Cistanche Lacerata Mycelium Culture Medium Sebagai Bahan Mikrob Anti-Penuaan Novel Untuk Aplikasi Kosmeseutikal Ⅱ
Mar 27, 2023
3. Keputusan dan perbincangan
3.1. Pengukuran Aktiviti Antioksidan
Theaktiviti antioksidandaripada penyelesaian telah dinilai oleh ujian DPPH dan ABTS. Memandangkan fakta bahawa kebanyakan antioksidan semulajadi memegang hidrogen reaktif, yang berfungsi sebagai reduktor, kedua-dua ujian DPPH dan ABTS adalah ukuran berguna profil antioksidan standard. Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah2, larutan CLEPS (5 mg/mL) mempamerkan keupayaan untuk mengais ~81 peratus DPPH (a) dan ~85 peratus ABTS (b) radikal bebas (oksigen aktif) sebagai bersamaan dengan asid askorbik (AA, 1 mg/mL).
3.2. Ujian Daya Tahan Sel
Seperti yang dibentangkan dalam Rajah3, tiada ketoksikan pada daya maju NHDF (a) dan sel melanoma B16 (b) diperhatikan apabila CLEPS diuji pada julat kepekatan yang luas (0.05–7 mg/mL). Selain itu, telah ditentukan bahawa rawatan CLEPS boleh menyebabkanpercambahan sel fibroblastdalam cara yang bergantung kepada dos pada 1–7 mg/mL. Penemuan ini adalah dalam persetujuan yang baikdengan kajian lain, yang melaporkan tentang kesan percambahan sel apolisakarida bioaktifekstrak daripada Cistanche Tubulosa [21].
3.3. Tahap Ekspresi Filaggrin
Filaggrin adalah pelekat untuk mengikat keratin bersama-sama, secara beransur-ansur meratakan bentuk keratinosit, meningkatkan kekuatan penghalang kulit, dan mengukuhkan perpaduan antara sel-sel pada permukaan kulit.22]. Seperti yang dibentangkan dalam Rajah3c, apabila sel HaCaT dirawat dengan CLEPS (30–300 µg/ml), tahap ekspresi filaggrin pada 300 µg/ml telah meningkat dengan ketara sebanyak 36 peratus berbanding kumpulan yang tidak dirawat, mengesahkan CLEPS boleh meningkatkan atau mengekalkan keupayaan penghalang kulit dan melembapkan melalui upregulation filaggrin. Untuk menilai fungsi kulit anti-kering yang berkesan melalui penyelarasan filaggrin, ekstrak tumbuhan yang diperolehi daripadaArtemisia princeps[23], Rhodiola crenulate[24], atau campuranActinidia argutadanPerilla frutescens[25] telah dikaji, manakala metabolit kulat seperti GFF [26] telah disiasat. Dalam hal ini, CLEPS akan menjadi bahan penambah filaggrin baharu berdasarkan metabolit kulat jika dikembangkan lagi.
Klik Di Sini Untuk Mengetahui Cistanche Untuk Anti-Penuaan
3.4. Ujian Perencatan Melanogenesis Sel Melanoma B16
Apabila CLEPS (0.5, 1.5 mg/mL) ditambahkan pada melanosit yang disebabkan oleh -MSH, sintesis melanin telah dihalang dengan berkesan oleh 43 peratus, 54 peratus dan 57 peratus, masing-masing, dalam cara yang bergantung kepada kepekatan. (Rajah3d). Telah disahkan bahawa CLEPS boleh mengecilkan sintesis melanin dengan lebih cekap daripada 50 µg/ml arbutin (41 peratus ). Sebagai sebatian aktif yang diekstrak daripada tumbuhan bearberry dalamArctostaphylos, arbutin ialah penindas melanin yang terkenal dalam melanosit manusia berbudaya atau melanosit murine B16 [27]. Oleh itu, walaupun ia digunakan secara meluas sebagai agen pencerah kulit dalam pasaran kosmetik, masih banyak ketidakpastian, iaitu, arbutin ialah hidrokuinon glikosilasi yang boleh menyebabkan risiko kanser [28]. Memandangkan arbutin adalah sebatian tunggal pemutih yang diiktiraf, adalah sangat menggalakkan bahawa CLEPS bukan sahaja mempamerkan kesan pemutihan kulit dengan menghalang sintesis melanin tetapi juga menunjukkan fungsi pemutihan yang unggul berbanding arbutin, walaupun ia adalah sebatian kompleks yang tidak dikenal pasti.
3.5. Ujian Anti-Radang NO, iNOS, COX2 dan TNF
Apabila CLEPS 500 µg/mL dirawat, tahap faktor berkaitan keradangan, NO (a), iNOS (b), COX2 (c), dan TNF (d) telah dikurangkan dengan ketara sebanyak ~75 peratus, ~85 peratus, 62 peratus , dan 55 peratus , masing-masing (Rajah4). Telah disahkan bahawa CLEPS memberikan kesan anti-radang dengan mengawal selia laluan isyarat radang melalui menekan pengeluaran NO dan ekspresi gen yang berkaitan dengan keradangan. Perencatan kuat aktiviti NO dan TNF- adalah setanding dengan cendawan yang boleh dimakan secara komersil, seperti Enoki, Shiitake, dan Oyster, sebagai spesies anti-radang yang paling kuat di kalangan cendawan (IC50 < 0.1 mg/mL ) [29].
3.6. Sintesis Kolagen dan Perencatan Kolagenase
Kolagen bukan sahaja komponen utama yang menyokong struktur kulit, tetapi ia juga boleh mengawal secara langsung persekitaran mikro luka, berfungsi sebagai perancah untuk lekatan dan fungsi sel, atau menghantar bahan aktif secara biologi untuk membantu penyembuhan luka [1]. Apabila rosak atau kekurangan, kulit boleh berkedut, berubah bentuk, atau menyebabkan penyakit kulit. Untuk mengesahkan anti-kedutkeberkesanan CLEPS, sintesis kolagen dan perencatan ujian kolagenase telah dilakukan seperti yang ditunjukkan dalam Rajah5. Berbanding dengan kumpulan kawalan, kumpulan yang dirawat dengan 10 ng/mL TGF- sebagai kawalan positif menunjukkan peningkatan yang ketara dalam sintesis kolagen sebanyak ~52 peratus . Sintesis kolagen telah meningkat kepada 27.4 peratus, 31.9 peratus, dan 65.4 peratus dalam kumpulan yang dirawat dengan CLEPS pada kepekatan 0.5, 1, dan 5 mg/mL, mengikut kepekatan yang bergantung kepada cara. PMA ialah bahan penjanaan ROS utama dan telah digunakan secara rutin sebagai inducer endogen penghasilan superoksida, yang boleh meningkatkan aktiviti MMP dalam fibroblas kulit, mengakibatkan degradasi protein matriks ekstraselular (ECM) dan penuaan kulit pramatang [30]. Dalam kerja ini, protein MMP-1 telah meningkat dengan ketara selepas dirawat dengan 50 nM PMA, manakala ia menurun dengan ketara kepada 93.4 peratus dengan kehadiran CLEPS (5 mg/mL) dalam cara yang bergantung kepada kepekatan, menunjukkan bahawa CLEPS menyekat aktiviti kolagenase dengan menghalang tekanan oksidatif yang disebabkan oleh PMA untuk membuat kematian sel NHDF. Oleh itu, telah disahkan bahawa CLEPS boleh berkesan dalam penambahbaikan kedutan melalui sintesis kolagen dan pengurangan kolagenase dalam ECM kulit.
Rajah 5. Kesan CLEPS pada sintesis kolagen (a) (p > 0.05 lwn. kawalan) dan perencatan kolagenase (b) (p > 0.05 lwn. tiada PMA).
3.7. Ujian Penyembuhan Luka In Vitro
Rajah 6. dilakukan dari 0 h hingga 48 jam untuk menganalisis kesan CLEPS (0-1 mg/mL) dalam sel HaCaT Bar Skala=100 um (a). Pemulihan luka oleh rawatan CLEPS dikira berbanding setiap kumpulan dos sifar (* p < 0.05) (b).
Oleh itu, CLEPS mungkin mengandungi bahan bioaktif yang berkaitan dengan sifat anti-penuaan, anti-pengoksidaan dan anti-radang. Dalam kajian awal sebelum ini, keadaan kultur terendam untuk biojisim miselium dan pengeluaran EPS olehC. lukatelah dipelajari [33]. Hasil daripada analisis EPS menggunakan HPLC, FT-IR dan NMR, ia didapati terdiri daripada polisakarida, termasuk mannose (83.36 peratus), galaktosa (12.54 peratus), dan glukosa (4.10 peratus). Beberapa flavonoid (cth, dimetil chalcone) dan tremulant sesquiterpenoids (cth, triphenyl) telah juga diasingkan sebagai komponen bioaktif yang kuat [34,35]. Walau bagaimanapun, kajian lanjut diperlukan untuk menjelaskan sebatian aktif ini.
Secara keseluruhan, penemuan kami menunjukkan bahawa CLEPS sebagai penyelesaian penjagaan kulit baharumemberikan kesan kosmeseutikal yang berpotensi pada penuaan sel kulit manusiamelaluianti pengoksidaan, anti-keradangan,anti pecahan penghalang kulit, danpenyembuhan luka. Terutamanya, CLEPS bukan sahaja meningkatkan sintesis kolagen dan filaggrin dengan ketara tetapi juga dengan ketara menghalang aktiviti kolagenase, mungkin menunjukkan bahawa CLEPS boleh menghalang kerosakan penghalang kulit atau kedutan kulit. Walaupun sebatian tepat yang menghasilkan kesan ini tidak diketahui, CLEPS sebagai bahan anti-penuaan semula jadi yang baru boleh digunakan sebagai kosmetik berfungsi yang inovatif. Tambahan pula, proses pembuatan CLEPS bukanlah proses pengekstrakan yang kebanyakannya menggunakan pelarut organik kimia atau menjalankan ujian haiwan, tetapi proses kultur mikrob hijau bio, mesra alam, yang boleh sesuai dengan trend kecantikan terkini dalam "vegan. "pasaran kosmetik.
Sumbangan Pengarang:Pengkonsepan, J.-HK, dan YSK; penyusunan dan analisis data, CA dan J.-HK; pentadbiran projek, J.-HK, dan YSK; pemerolehan pembiayaan, YSK; penulisan—draf asal, J.-HK; menulis—menyemak dan menyunting, J.-HK, CA, dan SDH Semua pengarang telah membaca dan bersetuju dengan versi manuskrip yang diterbitkan.
Pembiayaan:Penyelidikan ini dibiayai sebahagiannya oleh Agensi Promosi Kluster Makanan Kebangsaan Korea (FOODPOLIS) di bawah Kementerian Pertanian, Makanan dan Hal Ehwal Luar Bandar Korea, nama Geran: "Makanan Kami-Untuk Dunia (Penilaian Keselamatan dan Keberkesanan)".
Penyata Lembaga Semakan Institusi:Tidak berkaitan.
Kenyataan Persetujuan Termaklum: Tidak berkaitan.
Konflik Kepentingan: Tiada percanggahan kepentingan diketahui yang dikaitkan dengan penerbitan ini dan tiada sokongan kewangan yang signifikan untuk kerja ini yang boleh mempengaruhi hasil penerbitan ini.
Singkatan
UV Ultraviolet
Rujukan
1. Parrado, C.; Mercado-Saenz, S.; Perez-Davo, A.; Gilaberte, Y.; Gonzalez, S.; Juarranz, A. Tekanan persekitaran terhadap penuaan kulit. Wawasan Mekanistik. Depan. Pharmacol. 2019, 10, 759. [CrossRef] [PubMed]
2. Rinnerthaler, M.; Bischof, J.; Streubel, MK; Trost, A.; Richter, K. Tekanan oksidatif dalam penuaan kulit manusia. Biomolekul 2015, 5, 545–589. [CrossRef]
3. Sies, H.; Jones, DP Spesies oksigen reaktif (ROS) sebagai agen isyarat fisiologi pleiotropik. Nat. Rev. Mol. Biol Sel. 2020, 21, 363–383. [CrossRef]
4. Gupta, PL; Rajput, M.; Oza, T.; Trivedi, U.; Sanghvi, G. Kecemerlangan produk mikrob dalam industri kosmetik. Nat. Prod. Bioprospek. 2019, 9, 267–278. [CrossRef] [PubMed]
5. Martel, J.; Ojcius, DM; Ko, YF; Chang, CJ; Muda, JD Kesan antipenuaan molekul bioaktif yang diasingkan daripada tumbuhan dan kulat. Med. Res. Wahyu 2019, 39, 1515–1552. [CrossRef]
6. Keller, NP Metabolisme sekunder kulat: Peraturan, fungsi dan penemuan ubat. Nat. Mikrobiol Rev. 2019, 17, 167–180. [CrossRef] [PubMed]
7. Meyer, V.; Basenko, EY; Philipp Benz, J.; Braus, GH; Caddick, MX; Csukai, M.; Vries, RP; Endy, D.; Frisvad, JC; Gunde-Cimerman, N.; et al. Mengembangkan ekonomi bulat dengan bioteknologi kulat: Kertas putih. Biol kulat. Bioteknol. 2020, 7, 1–23. [CrossRef]
8. Dufossé, L.; Fouillaud, M.; Caro, Y. Kulat dan metabolit kulat untuk peningkatan pemakanan dan kesihatan manusia dan haiwan. J. Fungi 2021, 7, 274. [CrossRef] [PubMed]
9. Takahashi, JA; Barbosa, B.; Martins, BAP; Guirlanda, CAF; Moura, M. Penggunaan fleksibiliti metabolisme kulat untuk memenuhi permintaan moden untuk penuaan yang sihat, makanan berfungsi dan kemampanan. J. Kulat 2020, 6, 223. [CrossRef] [PubMed]
10. Kumari, M.; Survase, SA; Singhal, RS Pengeluaran Schizophyllan menggunakan NRCM komune Schizophyllum. Bioresour. Technol. 2008, 99, 1036–1043. [CrossRef]
11. Miyamoto, K.; Dissanayake, B.; Omotezako, T.; Takemura, M.; Tsuji, G.; Furue, M. Fluktuasi harian kawasan liang muka, kekasaran, dan kemerahan di kalangan wanita muda Jepun; kesan berfaedah Galactomyces ferment fifiltrate yang mengandungi formula penjagaan kulit antioksida. J. Clin. Med. 2021, 10, 2502. [CrossRef]
12. Suhara, H.; Maekawa, N.; Kaneko, S.; Hattori, T.; Sakai, K.; Kondo, R. Spesies baharu, Ceriporia lacerata, diasingkan daripada kayu reput putih. Mycotaxon 2003, 86, 335–347.
13. Lee, JW; Gwak, KS; Park, JY; Park, MJ; Choi, DH; Kwon, M.; Choi, IG Prarawatan biologi kayu lembut Pinus densiflflora oleh tiga kulat reput putih. J. Mikrobiol. 2007, 45, 485–491.
14. Kim, JE; Kim, HJ; Lee, SP Kesan hiperglisemik larutan kultur terendam Ceriporia lacerata dalam tikus diabetes yang disebabkan oleh streptozotocin. Sains Makanan. Bioteknol. 2012, 21, 1685–1693. [CrossRef]
15. Kim, JH; Park, YK; Kim, JE; Lee, SP; Kim, BC; Jang, BC Larutan mentah Ceriporia lacerata mempunyai kesan perlindungan terhadap sitotoksisiti akibat deksametason dalam sel INS-1 melalui modulasi aktiviti PI3K/PKB. Int. J. Mol. Med. 2013, 32, 179–186. [CrossRef] [PubMed]
16. Shin, EJ; Kim, JE; Kim, JH; Park, YM; Yoon, SK; Jang, BC; Lee, SP; Kim, BC Kesan budaya tenggelam Ceriporia lacerata mycelium pada protein GLUT4 dalam tetikus db/db. Korea J. Pengawet Makanan. 2015, 22, 893–900. [CrossRef]
17. Choi, JW; Shin, EJ; Lee, SJ; Kim, YH; Kim, SR; Ji, YM; Kim, NY; An, CH; Lee, IH; Kim, YS Kesan budaya tenggelam Ceriporia lacerata mycelium pada tikus diabetes yang disebabkan oleh diet lemak tinggi dengan rintangan insulin. J. Korean Soc. Sains Makanan. 2017, 46, 1419–1426. [CrossRef]
18. Kedare, SB; Singh, RP Genesis dan pembangunan kaedah DPPH ujian antioksidan. J. Sains Makanan. Technol. 2011, 48, 412–422. [CrossRef]
19. Kim, HJ; Suh, HJ; Kim, JH; Park, S.; Joo, YC; Kim, JS Aktiviti antioksidan gliseollin yang diperoleh daripada kacang soya yang ditimbulkan dengan Aspergillus sojae. J. Agric. Kimia Makanan. 2010, 58, 11633–11638. [CrossRef]
20. Goh, MJ; Lee, HK; Cheng, L.; Kong, DY; Yeon, JH; Dia, QQ; Cho, JC; Na, YJ Kesan depigmentasi kadsuralignan F pada melanosit murine melan-a dan setara dengan kulit manusia. Int. J. Mol. Sci. 2013, 15, 1655–1666. [CrossRef] [PubMed]
21. Mapoung, S.; Umsumarng, S.; Semmarath, W.; Arjsri, P.; Thippraphan, P.; Yodkeeree, S.; Limtrakul, P. Potensi Penyembuhan Luka Kulit Polisakarida daripada Cendawan Ubat Auricularia auricularia-judae (Bull.). J. Kulat 2021, 7, 247. [CrossRef]
22. Brown, SJ; Mclean, WH Satu molekul yang luar biasa: Filaggrin. J. Menyiasat. Dermatol. 2012, 132, 751–762. [CrossRef] [PubMed]
23. Hirano, A.; Goto, M.; Mitsui, T.; Hashimoto-Hachiya, A.; Tsuji, G.; Furue, M. Ekstrak Artemisia princeps Antioksidan Meningkatkan Ekspresi Filaggrin dan Loricrin melalui Laluan AHR/OVOL1. Int. J. Mol. Sci. 2017, 18, 1948. [CrossRef] [PubMed]
24. Hashimoto-Hachiya, A.; Tsuji, G.; Murai, M.; Yan, X.; Furue, M. Upregulation of FLG, LOR, and IVL Expression by Rho diola crenulata Root Extract via Aryl Hydrocarbon Receptor: Differential Involvement of OVOL1. Int. J. Mol. Sci. 2018, 19, 1654. [CrossRef] [PubMed]
Minta lebih lanjut:
E-mel:wallence.suen@wecistanche.com Whatsapp tambah 86 15292862950
