Biomonitoring Mikotoksin dalam Plasma Pesakit Alzheimer Dan ParkinsonⅢ
Apr 12, 2023
3. Kesimpulan
Kami membentangkan keputusan yang diperolehi dalam kajian HBM pertama mengenai analisis 19 mikotoksin dan metabolit dalam sampel plasma daripada sukarelawan yang sihat dan pesakit (AD dan PD) di La Rioja (Sepanyol). Hasil kajian mencadangkan beberapa perbezaan antara kedua-dua kawalan dan pesakit dalam tahap OTA dan STER. Sebab di sebalik perbezaan ini tidak diketahui. Beberapa faktor mungkin mempengaruhi hasil yang diperhatikan seperti perbezaan dalam diet, metabolisme yang diubah akibat penyakit, atau fakta bahawa jantina dan umur mungkin mempunyai peranan penting dalam tahap mikotoksin yang dikesan dalam plasma.
Klik untuk cistanche tincture untuk penyakit Alzheimer dan penyakit Parkinson
Semua faktor yang mengelirukan ini harus dinilai dengan teliti dengan kajian termasuk bilangan individu yang lebih tinggi. Dalam kajian ini, perbezaan dalam OTA antara sahabat yang sihat dan pesakit telah diperhatikan tetapi perbezaan itu nampaknya lebih berkaitan dengan jantina daripada penyakit itu sendiri. Selain itu, OTA cenderung menurun dengan usia, terutamanya dalam kumpulan PD. Salah satu penemuan utama ialah STER muncul hanya selepas rawatan -glucuronidase/arylsulfatase, menyokong hipotesis bahawa STER-glucuronides terbentuk semasa metabolisme manusia. Selain itu, paras plasma STER didapati lebih tinggi pada pesakit, tanpa perbezaan antara patologi. Selain itu, tahap STER berkorelasi positif dengan umur pada wanita.
Apabila mentafsir data, adalah penting untuk menunjukkan bahawa kajian ini tidak direka untuk menerangkan patobiologi PD atau AD, tetapi untuk meneroka sama ada kehadiran faktor risiko persekitaran yang mungkin boleh bertindak sebagai agen perturbatif yang terlibat dalam gen- interaksi persekitaran. Sampel daripada kumpulan kawalan sepadan dengan data sebelumnya yang diperoleh dalam populasi yang serupa di rantau jiran Sepanyol dan menggunakan analisis LC/MS-MS yang sama [35].
Walau bagaimanapun, apabila membandingkan individu yang sihat antara kedua-dua kajian perlu diperhatikan bahawa: (i) julat umur adalah berbeza, kerana majoriti sampel dalam kajian ini diperoleh daripada orang yang berumur lebih daripada 60 tahun, terutamanya dalam kumpulan AD dan PD. , seperti yang dijangkakan untuk penyakit berkaitan usia; dan (ii) bilangan sampel kawalan yang rendah dalam kajian ini. Selain itu, batasan lain juga perlu diambil kira semasa mentafsir data daripada kajian ini; banyak data adalah sangat dekat dengan LOD dan bilangan sampel adalah terhad (terutama pada lelaki AD). Secara keseluruhan, keputusan kami menunjukkan beberapa perbezaan yang signifikan secara statistik antara kumpulan kawalan dan pesakit penyakit neurodegeneratif tetapi juga menunjukkan beberapa tindak balas berkaitan umur dan jantina yang boleh mempengaruhi metabolisme.
4. Bahan dan Kaedah
4.1. Reagen
LC-MS grade methanol (Honeywell Riedel-de-Haën, Seelze, Germany), LC grade acetonitrile (ACN) (Merck, Darmstadt, Germany), MS grade formic acid (purity > 98%), ammonium formate (both from Fluka Sigma-Aldrich, Mannheim, Germany), and deionized water (>Kerintangan 18 MΩ cm−1) yang disucikan dalam sistem Ultramatik Jenis I (Wasserlab, Navarra, Sepanyol) digunakan untuk penyediaan sampel dan analisis LC-MS/MS. Kartrij Captiva EMR-lipid (3 mL) diperoleh daripada Agilent Technologies (Santa Clara, CA, Amerika Syarikat).
Semua mikotoksin (bahan rujukan, ketulenan Lebih daripada atau sama dengan 98 peratus ) telah dibeli daripada Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, Amerika Syarikat) sebagai larutan ACN pada kepekatan AFM1, AFG2 dan AFB2 berikut: 0. 5 µg/mL; AFG1 dan AFB1: 2 µg/mL; OTA-d5 dan OTB: 10 µg/mL; STER dan DOM-1: 50 µg/mL; NIV, DON, 3-ADON, 15-ADON, NEO, DAS, FUS-X, ZEA dan T-2 dan HT-2 toksin: 100 µg/mL. Bahan rujukan disimpan pada suhu −20 ◦C. Penyelesaian stok piawai telah disediakan dalam ACN dan disimpan pada −20 ◦C. Penyelesaian yang berfungsi, yang merangkumi semua mikotoksin, telah disediakan dengan mencairkan penyelesaian stok individu yang sepadan dalam ACN. Kestabilan penyelesaian stok standard dan kerja dalam keadaan penyimpanan ini sebelum ini dinilai [36].
4.2. Subjects
Persetujuan bertulis yang dimaklumkan diperoleh daripada semua peserta sebelum kemasukan kajian. Sejumlah 94 subjek, termasuk 44 pesakit dengan PD ringan, 25 pesakit demensia yang tidak berkaitan dengan PD, dan 25 kawalan sihat, telah diambil dari perkhidmatan neurologi di Hospital San Pedro di La Rioja (Sepanyol) dengan kelulusan etika ("Kajian profil lipid dalam sampel serum/plasma daripada pesakit penyakit Parkinson untuk mendapatkan corak klinikal yang berbeza bagi tujuan diagnosis" Ruj: CEICLAR PI- 212, diluluskan pada 4 April 2016) daripada jawatankuasa etika tempatan mengenai eksperimen manusia (CEImLar , Comité Ética de Investigación con medicamentos de La Rioja). Pesakit didiagnosis oleh pakar neurologi yang berpengalaman. Pesakit PD dinilai oleh skala HY yang diubah suai (Jadual S3) manakala pesakit dengan demensia yang tidak berkaitan dengan PD dinilai oleh GDS (Jadual S4) untuk menentukan peringkat penyakit mereka. Kawalan sihat termasuk pasangan atau teman yang tidak berkaitan dengan pesakit yang tidak mempunyai penyakit neurologi atau komorbiditi yang jelas atau diketahui.
4.3. Plasmak
Pengumpulan Sampel darah diperolehi pada lawatan perubatan. Darah dikumpulkan ke dalam 4 mL tiub bersalut EDTA (Vacutainer, ref # 368171) dan plasma diasingkan dalam masa 2 jam dengan sentrifugasi pada 2200× g selama 15 minit pada suhu bilik. Plasma dikeluarkan serta-merta dan dipindahkan ke dalam botol berkod dalam aliquot 0.2 mL untuk mengelakkan kitaran pembekuan/pencairan berulang dan kemudian disimpan pada −80 ◦C. Penjagaan yang sewajarnya telah diambil untuk mengelakkan pencemaran sampel plasma dengan sel atau komponen pelet yang diperoleh daripada sentrifugasi.
4.4. Contoh Preparation
Rawatan plasma sebelum dan selepas hidrolisis enzimatik adalah seperti yang diterangkan dalam ArceLópez et al. (2020) [35,36]. Secara ringkas, sampel plasma (400 µL) telah ditambah pada kartrij Captiva EMR-lipid, yang mengandungi 1200 µL ACN berasid (1 peratus asid formik). Vakum telah digunakan, dan selepas 5 minit, dua 400 µL aliquot (satu untuk setiap kumpulan mikotoksin yang akan disiasat) daripada efluen diasingkan dan kemudian disejat hingga kering (60 ◦C).
Metodologi ini digunakan untuk pengesanan 19 sebatian (mikotoksin dan metabolit), dikelaskan kepada dua kumpulan (mengikut program elusi berbeza yang diperlukan untuk pemisahan kromatografi): DOM-1, AFG2, AFM1, AFG1, AFB2, AFB1 , OTB, ZEA, STER, OTA, T-2, HT-2 (kumpulan I) dan NIV, DON, FUS-X, NEO, 3-ADON, 15-ADON dan DAS (kumpulan II). Sisa itu disusun semula dengan 200 µL fasa mudah alih dalam perkadaran yang sepadan dengan kumpulan mikotoksin yang dimaksudkan untuk dianalisis (40 peratus B untuk kumpulan I dan 5 peratus B untuk kumpulan II).
Sebelum analisis kromatografi, penyelesaian telah divorteks (5 min) dan ditapis (PVDF, 0.45 µm, Merck Millipore, Ireland). Prosedur untuk hidrolisis enzimatik ialah: 400 µL plasma telah dirawat dengan 50 µL campuran enzim glukuronidase/sulfatase (250 U/mL, 0.2 U/mL dalam PBS; daripada Helix Pomatia (Sigma Aldrich, Mannheim, Jerman). Selepas pengadukan, sampel diinkubasi semalaman (37 ◦C) dalam tab mandi air. Kemudian, pembersihan sampel plasma, menggunakan kartrij Captiva-EMR, dilakukan sama seperti yang diterangkan di atas.
4.5. Analisis LC/MS-MS
Analisis LC-MS/MS telah dilakukan dalam sistem LC 1200 siri digandingkan dengan 6410 Triple Quadrupole (QqQ) dalam mod ESI(tambah), kedua-duanya daripada Agilent Technologies (Mannheim, Jerman). Pengasingan dilakukan pada 45 ◦C pada Ascentis Express C18, 2.7 µm saiz zarah 150 × 2.1 mm lajur (Supelco Analytical, St. Louis, MO, USA) dengan fasa mudah alih terdiri daripada 5 mM ammonium formate dan 0.1 peratus asid formik dalam air (A) dan 5 mM ammonium format dan 0.1 peratus asid formik dalam 95:5 metanol/air (B) dalam keadaan kecerunan.
Isipadu suntikan ialah 20 µL dan elusi kecerunan telah dijalankan pada kadar alir 0.4 mL/min. Parameter pemerolehan data diterangkan dalam Arce-López et al. (2020) [36]. Sampel dianalisis dan dikumpulkan dalam urutan analisis. Setiap jujukan disertakan, bersama-sama dengan sampel, lapan penentukur padanan matriks.
Penentukuran ini digunakan dalam penyediaan lengkung penentukuran, yang berfungsi untuk kuantifikasi mikotoksin dalam sampel yang dianalisis dalam urutan yang sama. Kriteria penerimaan untuk lengkung penentukuran ialah: sekurang-kurangnya enam mata, pekali penentuan (R2 ) > 0.99, dan kepekatan dikira belakang untuk setiap penentukur yang tidak berbeza (dinyatakan sebagai RE) daripada nilai nominal dengan lebih daripada 15 peratus (20 peratus untuk tahap LOQ) [32]. Di samping itu, masa pengekalan tidak boleh berbeza lebih daripada 2.5 peratus antara sampel dan penentukur [33]. Bergantung kepada jumlah plasma yang ada, tidak semua sampel boleh dianalisis selepas rawatan enzimatik.
4.6. Pengesahan Kaedah Analisis
Pengesahan kedua-dua prosedur (sebelum dan selepas hidrolisis enzimatik) mengikut garis panduan FDA dan EU seperti yang diterangkan dalam Arce-Lopez et al. (202{{10}}) [35,36]. Nilai LOD ialah: 1.35 ng/mL untuk DOM-1; 0.35 ng/mL untuk AFG2, 0.18 ng/mL untuk AFM1; 0.07 ng/mL untuk AFG1 dan AFB2; 0.04 ng/mL untuk AFB1; 2.70 ng/mL untuk HT-2; 0.40 ng/mL untuk OTA dan OTB; 0.20 ng/mL untuk T-2 dan STER; 1.80 ng/mL untuk ZEA; 9.10 ng/mL untuk NIV; 1.94 ng/mL untuk DON; 1.95 ng/mL untuk FUS-X; 0.18 ng/mL untuk NEO; 0.70 ng/mL untuk 3-ADON; 1.20 ng/mL untuk 15-ADON dan 0.15 ng/mL untuk DAS.
Nilai pemulihan (dalam keadaan ketepatan pertengahan) sebelum rawatan enzimatik adalah daripada 68.8 peratus untuk STER kepada 97.6 peratus untuk DAS (RDS Kurang daripada atau sama dengan 15 peratus untuk semua mikotoksin) dan tiada perbezaan ditemui selepas rawatan enzimatik. Kesan matriks juga dinilai sebelum dan selepas rawatan enzimatik, dan tiada perbezaan dalam kebanyakan mikotoksin, memperoleh nilai RDS Kurang daripada atau sama dengan 15 peratus untuk kesemuanya. Kestabilan selepas dua kitaran beku-cair dinilai pada dua tahap kepekatan (6 dan 30xLOQ) (tiga ulangan setiap tahap). Semua mikotoksin adalah stabil (RSD < 15 peratus ) (Jadual S7).
4.7. Analisis Statistik dan Pengendalian Data
Apabila merawat data analisis dengan statistik, adalah penting untuk menjelaskan jenis pengedaran yang mencirikan set data. Deskriptor dan ujian pakej yang akan digunakan adalah berbeza jika kita mempunyai data taburan normal atau bukan taburan normal. Ujian Shapiro- Wilk digunakan untuk mengesahkan taburan normal tahap kepekatan mikotoksin yang disiasat.
Oleh kerana hipotesis normaliti ditolak, set ujian bukan parametrik (yang tidak membayangkan sebarang andaian taburan) telah digunakan untuk rawatan statistik. Untuk menilai kemungkinan perbezaan antara tahap kepekatan OTA dan STER dalam kumpulan dan sub-kumpulan, ujian jumlah pangkat Wilcoxon (statistik dua sampel Mann-Whitney) telah digunakan [49]. Dalam statistik, ujian jumlah pangkat Wilcoxon ialah ujian bukan parametrik yang digunakan untuk menguji sama ada dua sampel berkemungkinan terbit daripada populasi yang sama mengesahkan bahawa untuk dua nilai X dan Y yang dipilih secara rawak daripada dua populasi, kebarangkalian X menjadi lebih besar. daripada Y adalah sama dengan kebarangkalian Y lebih besar daripada X.
Untuk tujuan yang sama, ujian Kruskal–Wallis telah digunakan di mana pengumpulan pembolehubah membayangkan lebih daripada satu taburan [50]. Untuk menilai korelasi antara tahap mikotoksin dan umur (pembolehubah kuantitatif) pekali korelasi pangkat Spearman (atau rho Spearman) digunakan. Semua ujian telah dijalankan dengan tahap keertian 5 peratus . Output dilaporkan bersama-sama dengan tahap kepentingan statistik dan nilai-p. Semua analisis telah dijalankan menggunakan perisian STATA14 (Stata/IC 14.0, Hak Cipta 1985–2015 StataCorp LP). Berkenaan dengan pengendalian data untuk penetapan set data, pembolehubah kuantitatif dan kualitatif telah dirawat seperti berikut: Tahap OTA dan STER. Pembolehubah kuantitatif, pembolehubah bukan negatif dinyatakan sebagai nilai dalam ng/mL.
Nilai telah ditetapkan seperti berikut: Nilai=0 ng/mL; apabila keputusan analisis yang diperolehi daripada analisis ditemui
Pembolehubah kuantitatif digunakan untuk menskalakan diagnosis pesakit PD (Jadual S3). Selain itu, pembolehubah binari (HY_d=0 dan HY_d=1) telah ditakrifkan: HY_d=0 untuk PD pesakit yang mendapat skala HY dalam julat 1-2 (tidak merosot refleks postur); HY_d=1 untuk pesakit PD yang mendapat skala HY dalam julat 2.5–3 (refleks postur terjejas). Skala GDS. Pembolehubah kuantitatif digunakan untuk menskalakan diagnosis pesakit dengan AD (Jadual S4).
Mekanisme Cistanche merawat penyakit Alzheimer dan penyakit Parkinson
Cistanche adalah herba tradisional Cina yang telah digunakan selama bertahun-tahun untuk potensi manfaat kesihatannya. Dalam kajian baru-baru ini, didapati bahawa Cistanche mungkin mempunyai kesan neuroprotektif dan mungkin berkesan dalam merawat penyakit Alzheimer (AD) dan penyakit Parkinson (PD).
Mekanisme Cistanche dalam merawat AD dan PD secara berkesan dikaitkan dengan komponen aktifnya, seperti echinacoside, acteoside, dan cistanosides. Sebatian ini dipercayai mempunyai sifat antioksidan dan anti-radang yang boleh mengurangkan tekanan oksidatif dan keradangan di dalam otak, yang dikaitkan dengan perkembangan dan perkembangan penyakit neurodegeneratif.
Cistanche juga boleh menggalakkan pertumbuhan sel saraf dan meningkatkan fungsi kognitif dengan meningkatkan tahap faktor neurotropik yang berasal dari otak (BDNF), protein yang memainkan peranan penting dalam pertumbuhan dan penyelenggaraan neuron. Selain itu, Cistanche telah terbukti dapat mengurangkan plak -amyloid, yang merupakan ciri khas penyakit Alzheimer, dan mengurangkan pengumpulan -synuclein dalam otak, yang dikaitkan dengan penyakit Parkinson.
Secara keseluruhannya, potensi manfaat terapeutik Cistanche dalam merawat AD dan PD adalah menjanjikan, tetapi kajian lanjut diperlukan untuk menjelaskan mekanisme tindakan yang tepat dan mengesahkan keberkesanan dan keselamatannya dalam tetapan klinikal.
Rujukan
1Serrano-Pozo, A.; Frosch, MP; Masliah, E.; Hyman, BT Perubahan neuropatologi dalam penyakit Alzheimer. Pelabuhan Mata Air Sejuk. Perspek. Med. 2011, 1, a006189. [CrossRef]
2. Fearnley, JM; Lees, AJ Penuaan dan penyakit Parkinson: pemilihan serantau Substantia nigra. Otak 1991, 114, 2283–2301. [CrossRef]
3. Barber, RC Genetik penyakit Alzheimer. Scientifica (Kaherah) 2012, 2012, 1–14. [CrossRef]
4. Izco, M.; Carlos, E.; Alvarez-Erviti, L. Dua muka Exosom dalam penyakit Parkinson: Dari patologi kepada terapi. Pakar Neurosains 2021, 107385842199000. [CrossRef] [PubMed]
5. Hou, Y.; Dan, X.; Babbar, M.; Wei, Y.; Hasselbalch, SG; Croteau, DL; Bohr, VA Penuaan sebagai faktor risiko penyakit neurodegeneratif. Nat. Rev. Neurol. 2019, 15, 565–581. [CrossRef] [PubMed]
6. Johnson, SAYA; Stecher, B.; Labrie, V.; Brundin, L.; Brundin, P. Pencetus, Fasilitator, dan Pembesar: Mentakrifkan Semula Patogenesis Penyakit Parkinson. Trend Neurosci. 2019, 42, 4–13. [CrossRef]
7. Wainaina, MN; Chen, Z.; Zhong, C. Faktor persekitaran dalam perkembangan dan perkembangan penyakit Alzheimer yang lewat. Neurosci. lembu jantan. 2014, 30, 253–270. [CrossRef]
8. Rahman, MA; Rahman, MS; Uddin, MJ; Mamum-Atau-Rasyid, ANM; Pang, M.-G.; Rhim, H. Kemunculan risiko faktor persekitaran: Mekanisme wawasan penyakit Alzheimer. alam sekitar. Sci. mencemarkan. Res. 2020, 27, 44659–44672. [CrossRef] [PubMed]
9. Bush, AI Teori Logam Penyakit Alzheimer. J. Alzheimer's Dis. 2012, 33, S277–S281. [CrossRef] 10. Moulton, PV; Yang, W. Pencemaran udara, tekanan oksidatif, dan penyakit Alzheimer. J. Alam Sekitar. Kesihatan Awam 2012, 2012, 472751. [CrossRef]
11. Li, Y.; Fang, R.; Liu, Z.; Jiang, L.; Zhang, J.; Li, H.; Liu, C.; Li, F. Perkaitan antara pendedahan persekitaran racun perosak toksik dan penyakit Alzheimer: Analisis saintifik dan visualisasi. Chemosphere 2021, 263, 128238. [CrossRef]
12. Fulop, T.; Witkowski, JM; Bourgade, K.; Khalil, A.; Zerif, E.; Larbi, A.; Hirokawa, K.; Pawelec, G.; Bocti, C.; Lacombe, G.; et al. Bolehkah hipotesis jangkitan menjelaskan hipotesis beta-amiloid penyakit Alzheimer? Depan. Neurosci penuaan. 2018, 10, 224. [CrossRef]
13. Vasefi, M.; Ghaboolian-Zare, E.; Abedelwahab, H.; Osu, A. Toksin persekitaran dan perkembangan penyakit Alzheimer. Neurokim. Int. 2020, 141, 104852. [CrossRef]
14. Goldman, SM Toksin persekitaran dan penyakit Parkinson. Annu. Rev. Pharmacol. Toksik. 2014, 54, 141–164. [CrossRef] [PubMed]
15. Marras, C.; Pengetinan, CG; Goldman, SM Environment, gaya hidup, dan penyakit Parkinson: Implikasi untuk pencegahan dalam dekad yang akan datang. Pergerakan Kekacauan. 2019, 34, 801–811. [CrossRef] [PubMed]
16. Van der Mark, M.; Brouwer, M.; Kromhout, H.; Nijssen, P.; Huss, A.; Vermeulen, R. Adakah penggunaan racun perosak berkaitan dengan penyakit Parkinson? Beberapa petunjuk kepada heterogeniti dalam hasil kajian. alam sekitar. Perspektif Kesihatan. 2012, 120, 340–347. [CrossRef] [PubMed]
17. Gorell, JM; Johnson, CC; Rybicki, BA; Peterson, EL; Richardson, RJ Risiko penyakit Parkinson dengan pendedahan kepada racun perosak, pertanian, air perigi, dan kehidupan luar bandar. Neurologi 1998, 50, 1346–1350. [CrossRef]
18. Priyadarshi, A.; Khuder, SA; Schaub, EA; Priyadarshi, SS Faktor risiko persekitaran dan penyakit Parkinson: Analisis meta. alam sekitar. Res. 2001, 86, 122–127. [CrossRef]
19. Mitchell, NJ; Bowers, E.; Hurburgh, C.; Wu, F. Potensi kerugian ekonomi kepada industri jagung AS daripada pencemaran aflatoksin. Tambah Makanan. Contam. Bahagian A 2016, 33, 540–550. [CrossRef] [PubMed]
20. Marin, S.; Ramos, AJ; Cano-Sancho, G.; Sanchis, V. Mycotoxins: Kejadian, toksikologi, dan penilaian pendedahan. Kimia Makanan. Toksik. 2013, 60, 218–237. [CrossRef]
21. Janik, E.; Niemcewicz, M.; Ceremuga, M.; Stela, M.; Saluk-Bijak, J.; Siadkowski, A.; Bijak, M. Aspek molekul mikotoksin—Masalah serius untuk kesihatan manusia. Int. J. Mol. Sci. 2020, 21, 8187. [CrossRef]
22. Logrieco, A.; Miller, J.; Sekolah, M.; Krska, R.; Ayalew, A.; Bandyopadhyay, R.; Battilani, P.; Bhatnagar, D.; Chulze, S.; De Saeger, S.; et al. Piagam mikotoksin: Meningkatkan kesedaran, dan tindakan bersepadu untuk, meminimumkan pendedahan mikotoksin di seluruh dunia. Toksin (Basel) 2018, 10, 149. [CrossRef] 23. Suruhanjaya Eropah. Peraturan Suruhanjaya (EC) No 1881/2006 pada 19 Disember 2006 menetapkan tahap maksimum untuk bahan cemar tertentu dalam bahan makanan. Mati. J. Eur. Union 2006, 364, 5–24.
24. Parlimen Eropah. Parlimen Eropah dan Majlis Arahan EU Parlimen Eropah dan Majlis 7 Mei 2002 mengenai bahan yang tidak diingini dalam makanan haiwan 2002/32. Mati. J. Eur. Komuniti 2002, L140, 10–22.
25. Suruhanjaya Eropah. Syor Suruhanjaya pada 17 Ogos 2006 tentang kehadiran deoxynivalenol, zearalenone, ochratoxin A, T-2 dan HT-2 dan fumonisin dalam produk yang dimaksudkan untuk pemakanan haiwan. Mati. J. Eur. Union 2006, L299, 7–9.
26. Eskola, M.; Kos, G.; Elliott, CT; Hajšlová, J.; Mayar, S.; Krska, R. Pencemaran seluruh dunia terhadap tanaman makanan dengan mikotoksin: Kesahan 'anggaran FAO' yang dipetik secara meluas sebanyak 25 peratus . Crit. Rev. Sains Makanan. Nutr. 2020, 60, 2773–2789. [CrossRef] [PubMed]
27. Escrivá, L.; Fon, G.; Manyes, L.; Berrada, H. Kajian tentang kehadiran mikotoksin dalam sampel biologi: Gambaran keseluruhan. Toksin (Basel) 2017, 9, 251. [CrossRef]
28. Gurusankar, R.; Yenugadhati, N.; Krishnan, K.; Hays, S.; Haines, D.; Zidek, A.; Kuchta, S.; Kinniburgh, D.; Gabos, S.; Mattison, D.; et al. Peranan pemantauan biologi manusia dalam penilaian risiko kesihatan. Int. J. Penilaian Risiko. Manag. 2017, 20, 136–197. [CrossRef]
29. Bredesen, DE Penyakit Alzheimer Penyedutan: Wabak yang tidak diiktiraf—Dan boleh dirawat. Penuaan (Albany NY) 2016, 8, 304–313. [CrossRef]
30. Martins, I. Pemakanan berlebihan menentukan peraturan LPS terhadap neurotoksisiti yang disebabkan oleh mikotoksin dalam penyakit neurodegeneratif. Int. J. Mol. Sci. 2015, 16, 29554–29573. [CrossRef] [PubMed]
31. Izco, M.; Vettorazzi, A.; Forcen, R.; Blesa, J.; de Toro, M.; Alvarez-Herrera, N.; Cooper, JM; Gonzalez-Peñas, E.; Lopez de Cerain, A.; Alvarez-Erviti, L. Pendedahan subkronik oral kepada mycotoxin ochratoxin A mendorong ciri patologi utama penyakit Parkinson pada tikus enam bulan selepas tamat rawatan. Kimia Makanan. Toksik. 2021, 152, 112164. [CrossRef]
32. Pusat Penilaian dan Penyelidikan Dadah (FDA). Panduan Pengesahan Kaedah Bioanalitik untuk Industri. 2018. Tersedia dalam talian: https://www.fda.gov/files/drugs/published/Bioanalytical-Method-Validation-Guidance-for-Industry.pdf (diakses pada 20 November 2019).
33. Suruhanjaya Eropah. Keputusan Suruhanjaya 12 Ogos 2002 melaksanakan Arahan Majlis 96/23/EC mengenai prestasi kaedah analisis dan tafsiran keputusan (2002/657/EC). Mati. J. Eur. Komuniti 2002, 221, 8–36.
34. EFSA. Pengurusan data ditapis kiri dalam penilaian pendedahan diet bahan kimia. EFSA J. 2010, 8, 1–96.
35. Arce-López, B.; Lizarraga, E.; Irigoyen, Á.; González-Peñas, E. Kehadiran 19 mikotoksin dalam plasma manusia di wilayah Sepanyol Utara. Toksin (Basel) 2020, 12, 750. [CrossRef]
36. Arce-López, B.; Lizarraga, E.; Flores-Flores, M.; Irigoyen, Á.; González-Peñas, E. Pembangunan dan pengesahan metodologi berdasarkan pembersihan Captiva EMR-lipid dan analisis LC-MS/MS untuk penentuan serentak mikotoksin dalam plasma manusia. Talanta 2020, 206, 120193. [CrossRef]
37. Remiro, R.; González-Peñas, E.; Lizarraga, E.; López de Cerain, A. Kuantifikasi ochratoxin A dan lima analog dalam wain merah Navarra. Kawalan Makanan 2012, 27, 139–145. [CrossRef]
38. Yang, S.; Zhang, H.; De Saeger, S.; De Boevre, M.; Matahari, F.; Zhang, S.; Cao, X.; Wang, Z. Metabolisme in vitro dan in vivo ochratoxin A: Kajian perbandingan menggunakan spektrometri jisim hibrid kromatografi cecair berprestasi ultra-kuadrupole/masa penerbangan. dubur. Bioanal. Kimia. 2015, 407, 3579–3589. [CrossRef] [PubMed]
39. Muñoz, K.; Cramer, B.; Dopstadt, J.; Humpf, HU; Degen, GH Bukti ochratoxin A konjugasi dalam sampel air kencing daripada bayi dan orang dewasa. Mycotoxin Res. 2017, 33, 39–47. [CrossRef] [PubMed]
40. Vidal, A.; Mengelers, M.; Yang, S.; De Saeger, S.; De Boevre, M. Mycotoxin Biomarkers of Exposure: A Comprehensive Review. Compr. Rev. Sains Makanan. Makanan Saf. 2018, 17, 1127–1155. [CrossRef]
41. Panel EFSA CONTAM (EFSA Panel on Contaminants in the Food Chain); Schrenk, D.; Bodin, L.; Chipman, JK; del Mazo, J.; Grasl-Kraupp, B.; Hogstrand, C.; Hoogenboom, L.; Leblanc, J.; Nebbia, CS; et al. Penilaian risiko ochratoxin A dalam makanan. EFSA J. 2020, 18, 06113.
42. Arce-López, B.; Lizarraga, E.; Vettorazzi, A.; González-Peñas, E. Biomonitoring manusia terhadap mikotoksin dalam darah, plasma, dan serum dalam beberapa tahun kebelakangan ini: Kajian semula. Toksin (Basel) 2020, 12, 147. [CrossRef]
Beatriz Arce-López 1 , Lydia Alvarez-Erviti 2 , Barbara De Santis 3 , María Izco 2 , Silvia López-Calvo 4 , Maria Eugenia Marzo-Sola 4 , Francesca Debegnach 3 , Elena Lizarraga 1 ,6 Cerain López Elena González-Peñas 1,† dan Ariane Vettorazzi 5,6,* ,†
1 Jabatan Teknologi Farmaseutikal dan Kimia, Kumpulan Penyelidikan MITOX, Pusat Pengajian Farmasi dan Pemakanan, Universidad de Navarra, 31008 Pamplona, Sepanyol; barce@alumni.unav.es (BA-L.); elizarraga@unav.es (EL); mgpenas@unav.es (EG-P.)
2 Makmal Neurobiologi Molekul, Pusat Penyelidikan Bioperubatan La Rioja (CIBIR), Piqueras 98, Tingkat 3, 26006 Logroño, Sepanyol; laerviti@riojasalud.es (LA-E.); mizco@riojasalud.es (MI)
3 Makmal Rujukan Kebangsaan untuk Mikotoksin dan Toksin Tumbuhan, Istituto Superiore di Sanità, 00161 Roma, Itali; barbara.desantis@iss.it (BDS); francesca.debegnach@iss.it (FD)
4 Servicio de Neurología, Hospital San Pedro, Piqueras 98, 26006 Logroño, Sepanyol; slcalvo@riojasalud.es (SL-C.); memarzo@riojasalud.es (MEM-S.)
5 Department of Pharmacology and Toxicology, Research Group MITOX, School of Pharmacy and Nutrition, Universidad de Navarra, 31008 Pamplona, Spain; acerain@unav.es 6 IdiSNA, Navarra Institute for Health Research, 31008 Pamplona, Spain
