Potensi Antioksidan Dan Anti-Penuaan Kulit Tumbuhan Thai Terpilih: Penilaian In Vitro Dan Ramalan Sasaran Dalam Siliko Bahagian 2

3. Perbincangan

Penuaan kulit adalah proses yang berlaku secara semula jadi pada semua manusia. Walau bagaimanapun, banyak gaya hidup dan faktor persekitaran juga boleh mempercepatkan proses ini yang membawa kepada penuaan kulit pramatang [19]. ROS terkenal sebagai faktor patogenik yang penting dalam proses penuaan kulit. Pengumpulan ROS boleh mengimbangi ekspresi kedua-dua enzim elastase dan tyrosinase, yang seterusnya membawa kepada pembentukan kedutan, kekurangan keanjalan, dan hiperpigmentasi [20-22]. Semua ini adalah ciri umum penuaan kulit [4]. Di sini, kajian kami menyiasat sifat antioksidan, anti-elastase dan anti-tirosinase ekstrak tumbuhan daripada 16 spesies tumbuhan Thai dan mendedahkan sebatian semula jadi yang menjanjikan untuk potensi pembangunan rawatan baru terhadap penuaan kulit.

Glikosida cistanche juga boleh meningkatkan aktiviti SOD dalam tisu jantung dan hati, dan dengan ketara mengurangkan kandungan lipofuscin dan MDA dalam setiap tisu, dengan berkesan menghilangkan pelbagai radikal oksigen reaktif (OH-, H₂O₂, dll.) dan melindungi daripada kerosakan DNA yang disebabkan oleh OH-radikal. Glikosida phenylethanoid cistanche mempunyai keupayaan penghapusan radikal bebas yang teguh, keupayaan pengurangan yang lebih tinggi daripada vitamin C, meningkatkan aktiviti SOD dalam penggantungan sperma, mengurangkan kandungan MDA, dan mempunyai kesan perlindungan tertentu pada fungsi membran sperma. Polisakarida cistanche boleh meningkatkan aktiviti SOD dan GSH-Px dalam eritrosit dan tisu paru-paru tikus senescent eksperimen yang disebabkan oleh D-galaktosa, serta mengurangkan kandungan MDA dan kolagen dalam paru-paru dan plasma, dan meningkatkan kandungan elastin, mempunyai kesan penghapusan yang baik pada DPPH, memanjangkan masa hipoksia pada tikus senescent, meningkatkan aktiviti SOD dalam serum, dan melambatkan degenerasi fisiologi paru-paru dalam tikus senescent secara eksperimen Dengan degenerasi morfologi selular, eksperimen telah menunjukkan bahawa Cistanche mempunyai keupayaan antioksidan yang baik. dan berpotensi menjadi ubat untuk mencegah dan merawat penyakit penuaan kulit. Pada masa yang sama, echinacoside dalam Cistanche mempunyai keupayaan yang ketara untuk menghilangkan radikal bebas DPPH dan boleh menghilangkan spesies oksigen reaktif, menghalang degradasi kolagen yang disebabkan oleh radikal bebas, dan juga mempunyai kesan pembaikan yang baik pada kerosakan anion radikal bebas timin.

Klik pada suplemen cistanche tubulosa

【Untuk maklumat lanjut:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

Elastase ialah enzim protease yang bertanggungjawab terutamanya untuk degradasi elastin, protein penting yang terdapat dalam ECM. Elastin adalah penting untuk memberikan keanjalan pada kulit kerana sifat rekoil elastiknya [13]. Oleh itu, perencatan aktiviti elastase dapat membantu mencegah kehilangan keanjalan dan kedutan kulit [23]. Keputusan kami mendapati bahawa A. occidentale adalah perencat elastase paling mujarab, diikuti oleh G. zeylanicum dan S. alata, dalam susunan peringkat nilai IC50. Tambahan pula, keputusan dok menunjukkan bahawa lima sebatian yang diperoleh daripada ketiga-tiga tumbuhan ini mempunyai tenaga pengikatan yang lebih rendah daripada EGCG (kawalan positif) dan FRW (inhibitor asal), di mana sebatian yang memaparkan tenaga pengikatan yang lebih rendah dianggap mempunyai perencatan yang lebih baik (Jadual S4). 24]. Sebatian tersebut ialah flavonoid, yang termasuk tetramer proanthocyanidin [25], amentoflavon [25], rutin [26,27], agathisflavone [26] daripada A. occidentale, dan kaempferol 3-O-gentiobioside daripada S. alata [28] (Jadual S3). Hasilnya mencadangkan semua lima sebatian bertanggungjawab untuk aktiviti anti-elastase serta boleh dianggap sebagai calon yang menjanjikan untuk pembangunan anti-penuaan kulit. Walau bagaimanapun, kami mendapati bahawa tiada satu pun sebatian daripada G. zeylanicum menunjukkan pertalian pengikatan yang kuat berbanding ligan kawalan, walaupun ekstraknya menunjukkan aktiviti kedua paling banyak melalui ujian in vitro. Ini mungkin disebabkan oleh kesan sinergistik sebatian dalam campuran dan bukannya kesan individu setiap komponen fitokimia.

Selain elastase, melanin dianggap satu lagi sasaran penting untuk rawatan penuaan kulit. Melanin adalah komponen utama kulit, rambut, dan warna mata yang disintesis oleh melanogenesis dalam melanosit. Walau bagaimanapun, pengeluaran melanin yang berlebihan boleh menyebabkan gangguan kulit, termasuk jeragat, melasma, bintik-bintik penuaan, dan hiperpigmentasi, yang membawa kepada penampilan penuaan pramatang [12]. Dalam melanogenesis, tyrosinase adalah enzim kritikal dalam langkah menghadkan kadar. Oleh itu, pengurangan aktiviti tyrosinase boleh menyebabkan pengeluaran melanin berkurangan [29]. Keputusan kami menunjukkan bahawa G. zeylanicum adalah perencat tyrosinase yang paling kuat, diikuti oleh A. catechu dan A. occidentale, mengikut nilai IC50. Yang menghairankan, kebanyakan sebatian (47 daripada 48 sebatian) dalam ketiga-tiga tumbuhan ini menunjukkan tenaga pengikat yang lebih rendah terhadap tyrosinase daripada KA (kawalan positif) dan tropolone (inhibitor asal) (Jadual S5). Antara 47 sebatian itu, 16 berasal daripada G. zeylanicum, 12 berasal daripada A. catechu, dan 29 berasal daripada A. occidentale, yang mana 10 daripadanya boleh didapati di lebih daripada satu tumbuhan (Jadual S3). Walau bagaimanapun, berbeza dengan pengikatan sebatian dengan elastase, sebatian berpotensi yang dikenal pasti terhadap tyrosinase adalah daripada pelbagai kelas fitokimia. Mengenai pangkat tenaga pengikat terhadap tyrosinase, sebatian yang dianggap sebagai lima perencat terbaik ialah asid o-Coumaric [30] (fenolik), tetramer proanthocyanidin [25] (flavonoid), asid kafeik [30] (fenolik), asid ferulik [30] (fenolik), dan tanin pinang A1 [31] (tanin), dalam susunan skor yang semakin meningkat (Jadual S5). Keputusan yang diperolehi daripada saringan in vitro dan analisis dok dalam kajian ini telah mengesahkan ciri-ciri anti-penuaan kulit empat tumbuhan ubatan Thai dan mencadangkan potensi sebatian terbitan mereka yang boleh bertanggungjawab untuk aktiviti yang diperhatikan. Kajian lanjut mengenai fraksinasi, serta pengenalpastian dan pengasingan sebatian bioaktif dalam ekstrak tumbuhan yang menjanjikan ini, sangat diperlukan untuk membuktikan kehadiran molekul yang dicadangkan kami yang kemudiannya boleh dibangunkan untuk rawatan kulit penuaan [14].

A. catechu, A. occidentale, G. zeylanicum, dan S. alata ialah tumbuhan yang digunakan dalam perubatan tradisional dan ditemui di zon tropika Asia Tenggara, termasuk Thailand [32–36]. Terutama, tumbuhan ini ditunjukkan untuk beberapa aktiviti berkaitan antioksidan. Buah A. catechu adalah bahan kunyah yang popular dengan daun sirih, yang memabukkan dan sedikit ketagihan [36]. Ia digunakan untuk rawatan luka bakar dan ulser kulit dan bertindak sebagai astringen [35,37]. Ia telah dilaporkan untuk kesan antioksidan dan anti-radang yang kuat terhadap kecederaan hati yang disebabkan oleh tekanan oksidatif pada tikus [38]. A. occidentale dan G. zeylanicum, milik Selatan Thailand, digunakan sebagai makanan dan tumbuhan ubatan tempatan [32,33]. Daun A. occidentale digunakan untuk merawat ruam kulit, gatal-gatal, ulser, dan demam, manakala daun G. zeylanicum digunakan untuk merawat arthritis rheumatoid, influenza, disentri, dan dispepsia [32,33,39]. Ekstrak daun A. occidentale dan G. zeylanicum mempamerkan kesan neuroprotektif terhadap glutamat dan H2O{15}}kerosakan oksidatif yang disebabkan [32,40]. Selain itu, ekstrak mentah dari daun kedua-dua tumbuhan memberikan tekanan antioksidatif dan sifat anti-penuaan dalam nematod Caenorhabditis elegans [33,41,42]. Daun S. alata digunakan untuk rawatan ruam kulit, mycosis, dan dermatitis [34]. Ekstrak daun tumbuhan ini dapat meningkatkan kedua-dua sistem antioksidan enzimatik dan nonenzimatik dan menghalang hati dan tisu buah pinggang daripada kerosakan yang disebabkan oleh tekanan oksidatif semasa diabetes dalam model tikus [43].

Dalam persetujuan dengan laporan terdahulu, penemuan kami mendedahkan bahawa A. catechu, A. occidentale, G. zeylanicum, dan S. alata mempamerkan potensi antioksidan, selain daripada aktiviti ke arah enzim berkaitan penuaan kulit. Kami mendapati tumbuhan ini kaya dengan jumlah fenolik dan flavonoid dengan kapasiti antioksidan yang tinggi terhadap radikal DPPH dan ABTS, kecuali S. alata, yang menunjukkan hanya tahap sederhana dalam kedua-dua jumlah dan aktiviti. Fenolik dan flavonoid adalah dua kelas metabolit sekunder tumbuhan yang terkenal yang bertanggungjawab untuk aktiviti antioksidan [44,45]. Ini konsisten dengan keputusan kami bahawa jumlah kandungan fenolik dan flavonoid menunjukkan korelasi positif yang signifikan dengan aktiviti penghapusan radikal bebas (Rajah S1). Menariknya, analisis korelasi juga mendedahkan bahawa kandungan jumlah sebatian fenolik dan flavonoid dalam ekstrak tumbuhan yang dikaji ini berkorelasi positif dengan perencatan elastase dan tyrosinase. Walau bagaimanapun, kekuatan korelasi didapati lebih tinggi dengan fenolik berbanding dengan flavonoid. Aktiviti penghapusan radikal bebas telah ditunjukkan mempunyai korelasi yang tinggi dengan aktiviti perencatan enzim ekstrak. Keputusan ini mencadangkan bahawa kandungan fenolik yang tinggi dan aktiviti antioksidan boleh menyebabkan perencatan kuat enzim elastase dan tyrosinase. Walau bagaimanapun, kemungkinan interaksi protein-polifenol juga harus menjadi kebimbangan. Sesetengah polifenol secara langsung boleh menyebabkan pemendakan enzim melalui keupayaan mereka untuk mengikat dengan protein yang kaya dengan prolin, mengakibatkan pembentukan ikatan hidrogen dengan enzim dan dengan itu membawa kepada perencatan tidak selektif [46].

4. Bahan dan Kaedah

4.1. Bahan Kimia dan Reagen

Reagen fenol Folin–Ciocalteu, aluminium klorida (AlCl3), dimetil sulfoksida (DMSO), natrium asetat (NaOAc), kuersetin, 2,2-difenil-1-pikrilhidrazil (DPPH), 2,{{5} } azinobis-(3-ethylbenzthiazoline-6-asid sulfonik) (ABTS), asid L-askorbik, kalium persulfat (K2S2O8), elastase daripada pankreas babi, epigallocatechin gallate (EGCG), Nsuccinyl-Ala-Ala- Ala-p-nitroanilide (SANA), tyrosinase daripada cendawan, asid kojic (KA), dan 3,4-dihydroxy-L-phenylalanine (L-DOPA) telah dibeli daripada Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA). Natrium karbonat (Na2CO3) dibeli dari Merck (Darmstadt, Jerman). Asid Gallic dibeli dari TCI America (Portland, OR, USA). Dipotassium fosfat (K2HPO4) dan kalium fosfat monobes (KH2PO4) telah dibeli dari HiMedia (Mumbai, India). Pangkalan Tris dibeli daripada Vivantis Technologies (Shah Alam, Malaysia). Etanol dan metanol dibeli daripada RCI Labscan (Bangkok, Thailand). Semua bahan kimia dan reagen adalah gred analitik.

4.2. Bahan Tumbuhan dan Pengekstrakan

Tumbuhan dalam kajian ini dikutip secara tempatan dari kebun atau dibeli dari pasaran tempatan mengikut kesesuaian. Jadual 1 menyediakan nama saintifik, bahagian yang digunakan, dan sumber setiap tumbuhan. Tumbuhan ini telah disahkan secara botani, dan spesimen baucarnya disimpan di herbarium Kasin Suvatabhandhu, Jabatan Botani, Fakulti Sains, Universiti Chulalongkorn, Bangkok, Thailand, atau dikenal pasti oleh ahli botani. Bahan tumbuhan telah dicuci, dikeringkan pada suhu 65 ◦C, dan dikisar halus dalam pengisar mekanikal. Pengekstrakan tumbuhan kering (40 g) dilakukan dengan kaedah pengekstrakan atau pemerahan Soxhlet menggunakan 400 mL etanol atau metanol. Ekstrak ditapis dan disejat hingga kering di bawah vakum. Kemudian, sisa-sisa kering telah dibubarkan dalam DMSO sebagai larutan stok 100 mg/mL dan disimpan pada suhu -20 ◦C untuk kajian lanjut.

4.3. Penentuan Jumlah Kandungan Fenolik

Jumlah kandungan fenolik dilakukan menggunakan kaedah Folin-Ciocalteu [47]. Secara ringkas, 50 µL ekstrak pada 1 mg/mL dalam air ternyahion dicampurkan dengan 50 µL 10 peratus (w/v) reagen fenol Folin–Ciocalteu dalam plat telaga 96-dan diinkubasi dalam gelap pada suhu bilik ( RT) selama 20 minit. Selepas pengeraman, 50 µL 7.5 peratus (b/v) Na2CO3 telah ditambah ke dalam campuran dan diinkubasi selama 20 minit lagi. Penyerapan diukur dengan pembaca plat mikro pada 760 nm. Jumlah kandungan fenolik dikira daripada lengkung penentukuran piawai menggunakan asid gallik daripada 1.56 hingga 100 µg/mL, dan keputusan ditunjukkan sebagai mg setara asid gallik (GAE) per g ekstrak berat kering.

4.4. Penentuan Jumlah Kandungan Flavonoid

Jumlah kandungan flavonoid dilakukan menggunakan aluminium klorida (AlCl3) [47]. Secara ringkas, 50 µL ekstrak pada 1 mg/mL dalam air ternyahion dibuat sehingga 200 µL dengan 95 peratus etanol, dan kemudian 10 µL 10 peratus AlCl3 dan 10 µL 1 M NaOAc telah ditambah ke dalam telaga 96- pinggan. Plat diinkubasi dalam gelap di RT selama 40 minit, dan penyerapan diukur dengan pembaca plat mikro pada 415 nm. Jumlah kandungan flavonoid dikira daripada lengkung penentukuran piawai menggunakan kuersetin daripada 1.56 hingga 100 µg/mL, dan keputusan menunjukkan sebagai mg setara kuersetin (QE) per g ekstrak berat kering.

4.5. Penentuan Aktiviti Pemusnahan Radikal DPPH

Ujian aktiviti penghapusan radikal DPPH dilakukan seperti yang diterangkan sebelum ini [47]. Reagen kerja DPPH• disediakan oleh DPPH yang dilarutkan dalam etanol mutlak. Secara ringkas, 180 µL DPPH• larutan berfungsi dicampur dengan 20 µL ekstrak dalam 96-plat perigi dan diinkubasi dalam gelap di RT selama 15 minit, dan penyerapan diukur dengan pembaca plat mikro pada 517 nm. Asid askorbik dari 1.56 hingga 100 µg/mL berkhidmat sebagai piawai. Aktiviti penghapusan radikal dikira sebagai peratus perencatan radikal bebas menggunakan persamaan berikut:

Peratusan aktiviti penghapusan DPPH bagi setiap ekstrak tumbuhan dibandingkan dengan asid askorbik. Hasilnya dinyatakan sebagai mg kapasiti antioksidan setara vitamin C (VCEAC) per g ekstrak berat kering. IC50 (kepekatan perencatan separuh maksimum) ditentukan daripada graf perencatan peratus terhadap kepekatan setiap ekstrak.

4.6. Penentuan Aktiviti Pemusnahan Radikal ABTS

Ujian aktiviti penghapusan radikal ABTS telah dilakukan seperti yang diterangkan sebelum ini [47]. Reagen kerja ABTS• ditambah telah disediakan dengan mencampurkan 7 mM ABTS• dan 2.45 mM K2S2O8 pada nisbah 1:1, dan campuran itu perlu kekal selama 16–18 jam dalam gelap di RT. Penyelesaian kerja ABTS• tambah telah dicairkan dengan etanol mutlak untuk penyerapan mencapai antara 0.7 dan 0.8 pada 734 nm. Secara ringkas, 180 µL ABTS• ditambah larutan berfungsi dicampur dengan 20 µL ekstrak dalam 96-plat perigi dan diinkubasi dalam gelap di RT selama 30 minit, dan penyerapan diukur dengan pembaca plat mikro pada 734 nm. Asid askorbik dari 1.56 hingga 100 µg/mL berkhidmat sebagai piawai. Aktiviti penghapusan radikal dikira sebagai peratus perencatan radikal bebas menggunakan Persamaan (1).

Peratusan aktiviti penghapusan ABTS bagi setiap ekstrak tumbuhan dibandingkan dengan asid askorbik. Keputusan dinyatakan sebagai mg kapasiti antioksidan setara vitamin C (VCEAC) per g ekstrak berat kering. IC50 ditentukan daripada graf peratus perencatan terhadap kepekatan setiap ekstrak.

4.7. Penentuan Aktiviti Anti-Elastase

Aktiviti anti-elastase dinilai oleh ujian perencatan elastase menggunakan protokol yang diubah suai [13,48,49]. Secara ringkas, 20 µL ekstrak, 10 µL 0.4 U/mL pancreatic porcine elastase (PPE) dan 140 µL 0.1 M Tris-HCL buffer pada pH 8.0 telah ditambah dalam 96-plat perigi dan pra-inkubasi di RT selama 20 minit. Selepas pengeraman, 30 µL 2 mM SANA telah ditambah kepada campuran tindak balas dan selanjutnya diinkubasi selama 30 minit di RT. Penyerapan diukur dengan pembaca plat mikro pada 734 nm. EGCG digunakan untuk berfungsi sebagai kawalan positif untuk perencatan. Kawalan negatif mengandungi 100 peratus DMSO dan bukannya ekstrak. Peratus perencatan aktiviti elastase dikira menggunakan persamaan (1). IC50 ditentukan daripada graf peratus perencatan elastase terhadap kepekatan setiap ekstrak.

4.8. Penentuan Aktiviti Anti-Tyrosinase

Aktiviti anti-tirosinase dilakukan menggunakan kaedah dopachrome dengan beberapa pengubahsuaian [8]. Secara ringkas, 20 µL ekstrak, 20 µL 200 U/mL cendawan tyrosinase, dan 140 µL 0.1 M fosfat penimbal pada pH 6.8 telah ditambah dalam 96-plat perigi dan pra-inkubasi dalam RT untuk 20 min. Selepas pengeraman, 40 µL 2.5 mM L-DOPA telah ditambah kepada campuran tindak balas dan selanjutnya diinkubasi selama 20 minit di RT. Penyerapan dibaca dengan pembaca plat mikro pada 492 nm. KA digunakan untuk berfungsi sebagai kawalan positif untuk perencatan. Kawalan negatif mengandungi 100 peratus DMSO dan bukannya ekstrak. Peratus perencatan aktiviti tyrosinase dikira menggunakan persamaan (1). IC50 ditentukan daripada graf peratus perencatan tyrosinase terhadap kepekatan setiap ekstrak.

4.9. Pelabuhan Molekul

4.9.1. Penyediaan Ligan

Senarai sebatian fitokimia daripada tiga tumbuhan paling berkesan dengan perencatan kuat terhadap elastase atau tyrosinase telah dipilih daripada literatur yang diterbitkan [25–28,30–32,42,50–61] (Jadual S3). Semua struktur kimia sebatian dijana daripada nama IUPAC menggunakan BIOVIA Draw 2019 (BIOVIA, San Diego, CA, USA). Kemudian, sebatian telah dibersihkan geometri dan menyimpan fail untuk memformat pdb menggunakan Discovery Studio Visualizer (BIOVIA, San Diego, CA, Amerika Syarikat). Fail ini telah ditukar kepada format pdbqt menggunakan perisian AutoDockTools-1.5.6 (The Scripps Research Institute, San Diego, CA, USA).

4.9.2. Penyediaan Protein

Struktur kristalografi sinar-X elastase (PDB ID: 3HGP) [62] dan tyrosinase (PDB ID: 2Y9X) [63] diperoleh daripada RCSB Protein Data Bank. Sebelum kajian dok, menggunakan Discovery Studio Visualizer, molekul air dan perencat asal telah dikeluarkan daripada struktur protein, tidak termasuk Cu2 plus dalam struktur tyrosinase. Struktur protein ini disediakan menggunakan persediaan protein yang disediakan dalam perisian AutoDockTools-1.5.6. Semua cas hidrogen dan Kollman yang hilang telah ditambahkan pada struktur protein dan disimpan dalam fail untuk memformat pdbqt untuk kajian dok.

4.9.3. Pelabuhan Molekul

Kajian dok molekul telah dilakukan menggunakan protokol lalai dalam perisian AutoDockTools{{0}}.5.6. Tapak grid ditetapkan dengan jarak 0.375 Å. Dimensi x–y–z ditetapkan kepada 40 × 40 × 40 mata untuk elastase dan 60 × 60 × 60 mata untuk tyrosinase. Kotak grid pusat x, y, dan z ialah 12.58, 9.36, dan 2.251 untuk elastase, dan -10.044, -28.706, dan -43.443 untuk tyrosinase. Kajian dok dilakukan menggunakan Algoritma Genetik Lamarckian (GA) dengan parameter lalai dan hasil dok dianalisis menggunakan perisian AutoDockTools-1.5.6 dan Visualizer Discovery Studio.

4.10. Analisis statistik

Semua eksperimen dilakukan dalam sekurang-kurangnya tiga kali ganda, dan hasilnya diwakili sebagai min ± sisihan piawai (SD). Nilai IC50 telah dianalisis menggunakan perisian SigmaPlot versi 12.0. Korelasi antara pembolehubah berbeza dinyatakan sebagai pekali korelasi Pearson (r). Korelasi ditentukan dengan menggunakan GraphPad Prism (GraphPad Software Inc., San Diego, CA, USA), dan keputusan dianggap signifikan secara statistik apabila p kurang daripada 0.05 (p < 0.05).

5. Kesimpulan

Secara ringkasnya, penemuan kami mendedahkan empat tumbuhan ubatan Thai yang mengandungi sebatian calon yang menjanjikan untuk pembangunan sebagai agen anti-penuaan kulit. Ekstrak daun A. occidentale dan G. zeylanicum menunjukkan tindakan perencatan yang kuat terhadap kedua-dua enzim elastase dan tyrosinase, manakala ekstrak daun S. alata dan buah A. catechu menunjukkan aktivitinya lebih kuat hanya terhadap elastase atau tyrosinase, masing-masing. Beberapa sebatian yang diperoleh daripada tumbuhan ini juga telah disahkan untuk kebolehannya untuk mengikat kedua-dua enzim melalui kajian dok molekul. Selain itu, daun G. zeylanicum, daun A. occidentale, dan buah A. catechu mempunyai potensi antioksidan yang ketara terhadap radikal bebas dengan jumlah fenolik dan flavonoid yang tinggi. Diambil bersama, buah A. catechu, daun A. occidentale, daun G. zeylanicum, dan daun S. alata dikenal pasti sebagai sumber semula jadi antioksidan, anti-elastase dan anti-tyrosinase, yang dianggap berpotensi berguna untuk rawatan melawan penuaan. daripada kulit.

Sumbangan Pengarang:Pengkonsepan, AP; Penyiasatan dan analisis Formal, KC, SC (Sawarin Chumpolphant), PR dan CS; Pengesahan, PR dan AP; Visualisasi, KC dan SC (Sawarin Chumpolphant); Penulisan—Penyediaan Draf Asal, KC, SC (Sawarin Chumpolphant), PR, CS dan AP; Penulisan—Semakan dan Penyuntingan, KC, SC (Sawarin Chumpolphant), PR, CS, SC (Siriporn Chuchawankul), TT dan AP; Penyeliaan, TT, dan AP; Perisian, SC (Siriporn Chuchawankul) dan TT; Sumber, TT dan AP; Pemerolehan pembiayaan, AP Semua pengarang telah membaca dan bersetuju dengan versi manuskrip yang diterbitkan.

Pembiayaan: Penyelidikan ini disokong kewangan oleh Thailand Science Research and Innovation Fund Chulalongkorn University (CU_FRB65_hea (91)_198_53_01), dan Pejabat Setiausaha Tetap, Kementerian Pendidikan Tinggi, Sains, Penyelidikan dan Inovasi (No. Geran RGNS 63- 003). KC juga ingin mengucapkan terima kasih kepada Ulang Tahun ke-90 Tabung Universiti Chulalongkorn (Ratchadaphiseksomphot Endowment Fund).

Penyata Ketersediaan Data:Tidak berkaitan.

Ucapan terima kasih: Penulis berterima kasih kepada Maneewan Suwatronnakorn, Somchai Issaravanich, dan Chatrawee Duangjan atas bantuan baik mereka dalam penyediaan ekstrak tumbuhan. Kami juga berterima kasih kepada Nijsiri Ruangrungsi dan Chanida Palanuvej atas bantuan mereka dengan pengenalan tumbuhan dan Dicson Sheeja Malar atas bantuan mereka dalam penyuntingan manuskrip dalam bahasa Inggeris. AP berterima kasih kepada Geran Pembangunan Kakitangan Fakulti Baharu, Dana Endowmen Ratchadaphiseksomphot, Universiti Chulalongkorn.

Konflik Kepentingan:Penulis mengisytiharkan tiada konflik kepentingan.

Rujukan

1. Kligman, AM Apakah fungsi 'sebenar' kulit? Exp. Dermatol. 2002, 11, 159.

2. Zhang, S.; Duan, E. Melawan penuaan kulit: Jalan dari bangku ke tepi katil. Pemindahan Sel. 2018, 27, 729–738. [CrossRef] [PubMed]

3. Farage, MA; Miller, KW; Elsner, P.; Maibach, HI Ciri-ciri Kulit Penuaan. Adv. Penjagaan Luka 2013, 2, 5–10. [CrossRef] [PubMed]

4. Farage, MA; Miller, KW; Maibach, HI (Eds.) Perubahan Degeneratif dalam Penuaan Kulit. Dalam Buku Teks Penuaan Kulit; Springer: Berlin/Heidelberg, Jerman, 2017; ms 15–30.

5. Vierkötter, A.; Krutmann, J. Pengaruh persekitaran terhadap penuaan kulit dan manifestasi khusus etnik. Dermatoendocrinology 2012, 4, 227–231. [CrossRef] [PubMed]

6. Shin, J.-W.; Kwon, S.-H.; Choi, J.-Y.; Na, J.-I.; Huh, C.-H.; Choi, H.-R.; Park, K.-C. Mekanisme molekul penuaan kulit dan pendekatan antipenuaan. Int. J. Mol. Sci. 2019, 20, 2126. [CrossRef]

7. Rinnerhaler, M.; Bischof, J.; Streubel, M.; Trost, A.; Richter, K. Tekanan Oksidatif dalam Penuaan Kulit Manusia. Biomolekul 2015, 5, 545–589. [CrossRef]

8. Chatatikun, M.; Chiabchalard, A. Tumbuhan Thai dengan paras antioksidan yang tinggi, aktiviti penghapusan radikal bebas, aktiviti anti-tirosinase dan anti-kolagenase. Pelengkap BMC. Altern. Med. 2017, 17, 487. [CrossRef]

9. Lephart, ED Penuaan kulit, dan tekanan oksidatif: Kesan anti-penuaan Equol melalui mekanisme biokimia dan molekul. Penuaan Res. Wahyu 2016, 31, 36–54. [CrossRef]

10. Peng, H.-Y.; Lin, C.-C.; Wang, H.-Y.; Shih, Y.; Chou, S.-T. Kesan pengubahan melanogenesis minyak pati Achillea millefolium L. dan linalyl acetate: Penglibatan tekanan oksidatif dan laluan isyarat JNK dan ERK dalam sel melanoma. PLoS ONE 2014, 9, e95186. [CrossRef]

11. Park, JH; Ku, HJ; Lee, JH; Park, J.-W. Kekurangan IDH2 mempercepatkan pigmentasi kulit pada tikus melalui meningkatkan melanogenesis. Biol Redoks. 2018, 17, 16–24. [CrossRef]

12. Jiratchayamaethasakul, C.; Ding, Y.; Hwang, O.; Saya, S.-T.; Jang, Y.; Myung, S.-W.; Lee, JM; Kim, H.-S.; Ko, S.-C.; Lee, S.-H. Penyaringan in vitro elastase, kolagenase, hyaluronidase, dan tyrosinase aktiviti perencatan dan antioksidan 22 ekstrak tumbuhan halofit untuk kosmeseutikal baru. ikan. Aquat. Sci. 2020, 23, 6. [CrossRef]

13. Thring, TS; Hili, P.; Naughton, DP Anti-kolagenase, anti-elastase dan aktiviti anti-oksida ekstrak daripada 21 tumbuhan. Pelengkap BMC. Altern. Med. 2009, 9, 27. [CrossRef] [PubMed]

14. Bravo, K.; Alzate, F.; Osorio, E. Buah-buahan tumbuhan Andes liar dan ditanam terpilih sebagai sumber sebatian berpotensi dengan aktiviti antioksidan dan anti-penuaan. Prod Tanaman Ind. 2016, 85, 341–352. [CrossRef]

15. Kunwar, RM; Shrestha, KP; Bussmann, RW Perubatan herba tradisional di Far-west Nepal: Penilaian farmakologi. J. Etnobiol. Etnoperubatan 2010, 6, 35. [CrossRef] [PubMed]

16. Singh, G.; Passsari, AK; Leo, VV; Mishra, VK; Subbarayan, S.; Singh, BP; Kumar, B.; Kumar, S.; Gupta, VK; Lalhlenmawia, H. Penilaian kebolehubahan kandungan fenolik bersama dengan potensi antioksidan, antimikrob dan sitotoksik tumbuhan ubatan tradisional terpilih dari India. Depan. Sci tumbuhan. 2016, 7, 407. [CrossRef]

17. Byun, N.-y.; Heo, M.-R.; Yim, S.-H. Korelasi aktiviti anti-kedutan dan antioksidan radikal bebas pinang dengan kandungan fenolik dan flavonoid. Sains Makanan. Technol. 2021, 41, 1041–1049. [CrossRef]

18. Sellar, T.; Arulrajah, AA; Lanka, V. Peranan Sokongan Sosial terhadap Kehabisan Kerja di Firma Pakaian. Int. Bas. Res. 2019, 12, 110–118. [CrossRef]

19. Vierkötter, A.; Schikowski, T.; Ranft, U.; Sugiri, D.; Matsui, M.; Krämer, U.; Krutmann, J. Pendedahan zarah bawaan udara dan penuaan kulit ekstrinsik. J. Menyiasat. Dermatol. 2010, 130, 2719–2726. [CrossRef]

20. Lee, A.-Y. Keabnormalan Pigmentasi Kulit dan Kemungkinan Hubungannya dengan Penuaan Kulit. Int. J. Mol. Sci. 2021, 22, 3727. [CrossRef]

21. Popoola, OK; Marnewick, JL; Rautenbach, F.; Ameer, F.; Iwuoha, EI; Hussein, AA Perencatan tekanan oksidatif dan enzim berkaitan penuaan kulit oleh kalkon terprenilasi dan flavonoid lain daripada Helichrysum teretifolium. Molekul 2015, 20, 7143–7155. [CrossRef]

22. Tu, Y.; Quan, T. Tekanan oksidatif dan penuaan tisu penghubung kulit manusia. Kosmetik 2016, 3, 28. [CrossRef]

23. Azmi, N.; Hashim, P.; Hashim, DM; Halimoon, N.; Majid, NMN Anti-elastase, anti-tyrosinase dan matriks metalloproteinase-1 aktiviti perencatan ekstrak cacing tanah sebagai agen anti-penuaan baharu yang berpotensi. Pac Asia. J. Trop. Berbiomed. 2014, 4, S348–S352. [CrossRef] [PubMed]

24. Rangsinth, P.; Sillapachaiyaporn, C.; Nilkhet, S.; Tencomnao, T.; Ung, AT; Chuchawankul, S. Sebatian bioaktif terbitan cendawan berpotensi berfungsi sebagai perencat protease utama SARS-CoV-2: Pendekatan dalam siliko. J. Tradit. Pelengkap. Med. 2021, 11, 158–172. [CrossRef] [PubMed]

25. Konan, NA; Bacchi, EM Kesan antiulserogenik dan ketoksikan akut ekstrak hidroetanol daripada daun gajus (Anacardium occidentale L.). J. Ethnopharmacol. 2007, 112, 237–242. [CrossRef] [PubMed]

26. Ajileye, O.; Obuotor, E.; Akinkunmi, E.; Aderogba, M. Pengasingan dan pencirian sebatian antioksidan dan antimikrob daripada ekstrak daun Anacardium occidentale L.(Anacardiaceae). J. King Saud Univ. Sci. 2015, 27, 244–252. [CrossRef]

27. Chotphruethipong, L.; Benjakul, S.; Kijroongrojana, K. Pengoptimuman pengekstrakan sebatian fenolik antioksida daripada daun gajus (Anacardium occidentale L.) menggunakan metodologi permukaan tindak balas. J. Biokim Makanan. 2017, 41, e12379. [CrossRef]

28. Moriyama, H.; Iizuka, T.; Nagai, M.; Miyazaki, H.; Satoh, T. Aktiviti antiradang ekstrak daun Cassia alata yang dirawat haba dan glikosida flavonoidnya. Yakugaku Zasshi 2003, 123, 607–611. [CrossRef]

29. Chatatikun, M.; Yamauchi, T.; Yamasaki, K.; Aiba, S.; Chiabchalard, A. Kesan anti melanogenik daun substrat Croton roxburghii dan Croton dalam sel B16F10 yang dirangsang MSH. J. Tradit. Pelengkap. Med. 2019, 9, 66–72. [CrossRef]

30. Wang, R.; Pan, F.; Dia, R.; Kuang, F.; Wang, L.; Lin, X. Ekstrak biji Arecanut (Areca catechu L.) yang diekstrak oleh pelarut konvensional dan mesra alam: Hubungan antara komposisi fitokimia dan aktiviti biologi melalui analisis multivariate. J. Appl. Res. Med. Aromat. Tumbuhan 2021, 25, 100336. [CrossRef]

31. Nonaka, G.-i.; Hsu, F.-L.; Nishioka, I. Struktur procyanidin dimerik, trimerik dan tetramerik daripada Areca catechu LJ Chem. Soc. Kimia. Commun. 1981, 15, 781–783. [CrossRef]

32. Duangjan, C.; Rangsinth, P.; Zhang, S.; Wink, M.; Tencomnao, T. Anacardium Occidentale, L. Ekstrak Daun Melindungi Terhadap Glutamat/H2O2-Ketoksikan Oksidatif Teraruh dan Mendorong Pertumbuhan Neurit: Penglibatan Laluan Isyarat SIRT1/Nrf2 dan Protein Transmembran Teneurin 4. Depan. Pharmacol. 2021, 12, 627738. [CrossRef] [PubMed]

33. Duangjan, C.; Rangsinth, P.; Gu, X.; Zhang, S.; Wink, M.; Ekstrak daun Tencomnao, T. Glochidion zeylanicum mempamerkan sifat rintangan tekanan oksidatif yang memanjangkan jangka hayat dan dalam Caenorhabditis elegans melalui laluan isyarat DAF-16/FoxO dan SKN-1/Nrf-2. Phytomedicine 2019, 64, 153061. [CrossRef] [PubMed]

34. Oladeji, OS; Adelowo, FE; Oluyori, AP; Bankole, DT Penerangan etnobotani dan aktiviti biologi Senna alata. Evid. Pelengkap Berasaskan. Bergantian. Med. 2020, 2020, 2580259. [CrossRef] [PubMed]

35. Peng, W.; Liu, Y.-J.; Wu, N.; Matahari, T.; Dia, X.-Y.; Gao, Y.-X.; Wu, C.-J. Areca catechu L.(Arecaceae): Kajian semula kegunaan tradisionalnya, botani, fitokimia, farmakologi dan toksikologi. J. Ethnopharmacol. 2015, 164, 340–356. [CrossRef]

36. Salehi, B.; Konovalov, DA; Fru, P.; Kapewangolo, P.; Peron, G.; Ksenija, MS; Cardoso, SM; Pereira, ATAU; Nigam, M.; Nicola, S. Areca catechu—Dari ladang ke makanan dan aplikasi bioperubatan. Phytother. Res. 2020, 34, 2140–2158. [CrossRef]

37. Verma, DK; Bharat, M.; Nayak, D.; Shanbhag, T.; Shanbhag, V.; Rajput, RS Areca catechu: Kesan ekstrak etanol topikal pada penyembuhan luka bakar dalam tikus albino. Int. J. Pharmacol. Clin. Sci. 2012, 1, 74–78.

38. Pithayanukul, P.; Nithitanakool, S.; Bavovada, R. Potensi hepatoprotektif ekstrak daripada biji Areca catechu dan nutgalls Quercus infectoria. Molekul 2009, 14, 4987–5000. [CrossRef]

39. Salehi, B.; Gültekin-Özgüven, M.; Kirkin, C.; Özçelik, B.; Morais-Braga, MFB; Carneiro, JNP; Bezerra, CF; Silva, TGd; Coutinho, HDM; Amina, B. Kesan antioksida, antimikrob dan antikanser tumbuhan Anacardium: Perspektif etnofarmakologi. Depan. Endokrinol. 2020, 11, 295. [CrossRef]

40. Duangjan, C.; Rangsinth, P.; Zhang, S.; Gu, X.; Wink, M.; Tencomnao, T. Kesan Neuroprotective Ekstrak Daun Glochidion zeylanicum terhadap Ketoksikan H2O2/Glutamat-Induced dalam Sel Neuronal Kultur dan Ketoksikan A-Induced dalam Caenorhabditis elegans. Biologi 2021, 10, 800. [CrossRef]

41. Duangjan, C.; Rangsinth, P.; Gu, X.; Wink, M.; Tencomnao, T. Melanjutkan jangka hayat dan sifat rintangan tegasan oksidatif ekstrak daun daripada Anacardium occidentale L. dalam Caenorhabditis elegans. Oksida. Med. sel. Longev. 2019, 2019, 9012396. [CrossRef]

42. Duangjan, C.; Rangsinth, P.; Gu, X.; Zhang, S.; Wink, M.; Tencomnao, T. Data tentang kesan ekstrak daun Glochidion zeylanicum dalam Caenorhabditis elegans. Ringkas Data 2019, 26, 104461. [CrossRef] [PubMed]

43. Sugumar, M.; Dos, DVA; Maddisetty, PP Hepato-renal kesan perlindungan ekstrak hidroetanol Senna alata pada sistem antioksidan enzimatik dan nonenzimatik dalam tikus diabetes yang disebabkan oleh streptozotocin. Integr. Med. Res. 2016, 5, 276–283. [CrossRef] [PubMed]

44. Aryal, S.; Baniya, MK; Danekhu, K.; Kunwar, P.; Gurung, R.; Koirala, N. Jumlah kandungan fenolik, kandungan flavonoid dan potensi antioksidan sayur-sayuran liar dari Nepal Barat. Tumbuhan 2019, 8, 96. [CrossRef] [PubMed]

45. Panche, A.; Diwan, A.; Chandra, S. Flavonoid: Gambaran keseluruhan. J. Nutr. Sci. 2016, 5, e47. [CrossRef] [PubMed]

46. ​​Tazeddinova, D.; Rahman, M.; Hamdan, SB; Matin, MM; Bin Bakri, MK; Rahman, MM Persatuan Polifenol Berasaskan Tumbuhan dengan Protein: Kajian Prospektif. BioResources 2022, 17, 1–25. [CrossRef]

47. Prasansuklab, A.; Tencomnao, T. Acanthus ebracteate ekstrak daun menyediakan perlindungan sel neuron terhadap kecederaan tekanan oksidatif yang disebabkan oleh glutamat. Pelengkap BMC. Altern. Med. 2018, 18, 278. [CrossRef]

48. Abhijit, S.; Manjushree, D. Anti-hyaluronidase, aktiviti anti-elastase Garcinia indica. Int. J. Bot. 2010, 6, 299–303.

49. Widowati, W.; Rani, AP; Hamzah, RA; Arumwardana, S.; Afifah, E.; Kusuma, HSW; Rihibiha, DD; Nufus, H.; Amalia, A. Ujian antioksida dan antipenuaan ekstrak Hibiscus sabdariffa dan sebatiannya. Nat. Prod. Sci. 2017, 23, 192–200. [CrossRef]

50. Fernand, VE; Dinh, DT; Washington, SJ; Fakayode, SO; Losso, JN; van Ravenswaay, RO; Warner, IM Penentuan sebatian aktif secara farmakologi dalam ekstrak akar Cassia alata L. dengan menggunakan kromatografi cecair berprestasi tinggi. Talanta 2008, 74, 896–902. [CrossRef]

51. Jain, V.; Garg, A.; Parascandola, M.; Chaturvedi, P.; Khariwala, SS; Stepanov, I. Analisis alkaloid dalam produk yang mengandungi kacang pinang dengan kromatografi cecair–spektrometri jisim tandem. J. Agric. Kimia Makanan. 2017, 65, 1977–1983. [CrossRef]

52. Liu, A.; Xu, L.; Zou, Z.; Yang, S. Kajian tentang juzuk kimia daripada daun Cassia alata. Zhongguo Zhong Yao Za Zhi 2009, 34, 861–863. [PubMed]

53. Ming-Yue, W.; Jin-Hui, L.; Jian-Guo, L. Penentuan Polifenol dalam Areca catechu oleh HPLC. Nat. Prod. Res. Dev. 2011, 23, 101.

54. Mohammed, AR; Ali, A.; Aboul-Enein, S.; Mohamed, F.; Abou, E.; Magdy, M.; Mohammed, A. Fitokimia, sitotoksisiti dan penyiasatan antioksidan daun Cassia alata yang tumbuh di Mesir. J. Innov. Pharm. biol. Sci 2017, 4, 97–105.

55. Okpuzor, J.; Ogbunugafor, H.; Kareem, G.; Igwo-Ezikpe, M. Penyiasatan in vitro terhadap sebatian fenolik antioksidan dalam ekstrak Senna alata. Res. J. Phytochem. 2009, 3, 68–76. [CrossRef]

56. Pongnimitprasert, N.; Wadkhien, K.; Chinpaisal, C.; Satiraphan, M.; Wetwitayaklung, P. Kesan anti-radang rhein dan ekstrak mentah daripada Cassia alata L. dalam sel HaCaT. Sci. En. Stud Kesihatan. 2018, 12, 19–32.

57. Promgool, T.; Pancharoen, O.; Deachathai, S. Sebatian antibakteria dan antioksida daripada Cassia alata Linn. Songklanarin J. Sci. Technol. 2014, 36, 459–463.

58. Singh, B.; Nadkarni, JR; Vishwakarma, RA; Bharate, SB; Nivsarkar, M.; Anandjiwala, S. Ekstrak hidroalkohol daun Cassia alata (Linn.) dan kompaun rhein utamanya mempamerkan aktiviti antialergi melalui penstabilan sel mast dan perencatan lipoxygenase. J. Ethnopharmacol. 2012, 141, 469–473. [CrossRef]

59. Wu, Q.; Yang, Y.; Simon, JE Penentuan HPLC/MS kualitatif dan kuantitatif proanthocyanidins dalam pinang (Areca catechu). Kimia. Penyelam biologi. 2007, 4, 2817–2826. [CrossRef]

60. Zhang, W.-M.; Huang, W.-Y.; Chen, W.-X.; Han, L.; Zhang, H.-D. Pengoptimuman keadaan pengekstrakan polifenol biji pinang dan penilaian aktiviti antioksidannya. Molekul 2014, 19, 16416–16427. [CrossRef]

61. Zhang, X.; Mei, W.; Zeng, Y.; Liu, J. Konstituen fenolik daripada buah Areca catechu dan aktiviti anti-bakterianya. J. Trop. Subtrop. Bot. 2009, 17, 74–76.

62. Tamada, T.; Kinoshita, T.; Kurihara, K.; Adachi, M.; Ohhara, T.; Imai, K.; Kuroki, R.; Tada, T. Gabungan neutron resolusi tinggi dan analisis sinar-X elastase terhalang mengesahkan lubang oksianion tapak aktif tetapi mengawal ikatan hidrogen halangan rendah. J. Am. Kimia. Soc. 2009, 131, 11033–11040. [CrossRef] [PubMed]

63. Ismaya, WT; Rozeboom, HJ; Weijn, A.; Mes, JJ; Fusetti, F.; Wichers, HJ; Dijkstra, BW Struktur kristal Agaricus bisporus cendawan tyrosinase: Identiti subunit tetramer dan interaksi dengan tropolone. Biokimia 2011, 50, 5477–5486. [CrossRef] [PubMed]

Penafian/Nota Penerbit:Kenyataan, pendapat dan data yang terkandung dalam semua penerbitan adalah semata-mata dari pengarang dan penyumbang individu dan bukan MDPI dan/atau editor. MDPI dan/atau editor(s) menafikan tanggungjawab untuk sebarang kecederaan kepada orang atau harta benda akibat daripada sebarang idea, kaedah, arahan atau produk yang dirujuk dalam kandungan.

【Untuk maklumat lanjut:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】