Kemajuan dalam Dermatologi Menggunakan Inovasi DNA Aptamer "Aptamin C": Pencegahan Tekanan Oksidatif Dan Kesan Memaksimumkan Vitamin C Melalui Antioksidasi

joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Sooho Choi PhD1|Jeongmin Han Ph.D. Calon2|Ji Hyun Kim MS Calon1|A‐Ru Kim Ph.D. Calon3|Sang‐Heon Kim Ph.D. Calon3|Weontae Lee Ph.D., profesor2|Moon‐Young Yoon Ph.D., profesor3|Gyuyoup Kim PhD1|Yoon‐Seong Kim Ph.D., profesor1

Abstrak

latar belakang:Vitamin C(juga dikenali sebagai asid L-askorbik) memainkan peranan penting dalam pengurangan spesies oksigen reaktif (ROS) dan penjanaan semula sel dengan melindungi sel daripada tekanan oksidatif. Walaupun vitamin C digunakan secara meluas dalam pasaran kosmetik dan terapeutik, terdapat banyak bukti bahawa vitamin C mudah dialamipengoksidaanoleh udara, pH, suhu, dan cahaya UV semasa penyimpanan. Kekurangan vitamin C ini mengurangkan potensinya sebagai antioksidan dan mengurangkan jangka hayat produk yang mengandungi vitamin C sebagai ramuannya. Untuk mengatasi kekurangan vitamin C, kami telah membangunkan Aptamin C, aptamer DNA inovatif yang memaksimumkan keberkesanan antioksidan vitamin C dengan mengikat kepada bentuk vitamin C yang dikurangkan dan menangguhkannya.pengoksidaan.

Kaedah:Pengikatan Aptamin C dengan vitamin C ditentukan menggunakan analisis ITC. Percubaan ITC telah dilakukan dengan 0.2 mmol/Lvitamin Cyang disuntik 25 kali dalam 2 µL aliquot ke dalam sel sampel 1.8 mL yang mengandungi Aptamin C pada kepekatan 0.02 mmol/L. Data telah dipasang pada isoterma pengikat satu tapak menggunakan program asal untuk ITC v.5.0.

Keputusan:Untuk menyiasat kesan Aptamin C danvitamin Ckompleks dalam kulit manusia, kedua-dua ujian in vitro dan klinikal telah dilakukan. Kami memerhatikan bahawa kompleks Aptamin C dan vitamin C berkesan dengan ketara dalam peningkatan kedutan, kesan pemutihan, dan peningkatan penghidratan. Dalam ujian klinikal, subjek yang dirawat dengan kompleks menunjukkan peningkatan dramatik dalam kerengsaan kulit dan gatal-gatal. Tiada tindak balas buruk ditunjukkan oleh kompleks Aptamin C dalam ujian.

Kesimpulan:Secara keseluruhan, keputusan ini menunjukkan bahawa Aptamin C, sebatian novel inovatif, berpotensi untuk dihidangkan sebagai bahan kosmetik utama untuk pelbagai keadaan kulit.

KATA KUNCIantioksida, Aptamin C (Aptamer pengikat vitamin C),pengoksidaan, tekanan oksidatif,vitamin C(asid L-askorbik)

cistanchemempunyai keupayaan antioksida yang kuat

1|PENGENALAN

Spesies oksigen reaktif (ROS) ialah spesies bahan kimia reaktif yang mengandungi oksigen, yang memainkan peranan penting dalam isyarat sel dan homeostasis.1-3 Ini termasuk bukan sahaja kesan positif seperti induksi gen pertahanan perumah dan mobilisasi sistem pengangkutan ion tetapi juga berperanan dalam apoptosis (kematian sel terprogram).4,5Tahap ROS boleh ditingkatkan oleh tekanan persekitaran, yang membawa kepada kerosakan pada struktur sel.3 Fenomena ini dipanggil "tekanan oksidatif." Tekanan oksidatif ialah salah satu punca utama pelbagai penyakit termasuk penyakit neurodegeneratif, penyakit Lou Gehrig, autisme, multiple sclerosis dan penyakit kulit.6-15 Tambahan pula, tekanan oksidatif mempunyai pengaruh langsung pada proses penuaan kulit16; protein, lipid, dan DNA bertindak balas secara sensitif terhadap tekanan oksidatif yang disebabkan oleh ROS.17 Antioksidan sangat berkesan dalam perlindungan kulit kerana ia bertindak balas secara langsung kepada ROS menghalangnya daripada mencapai molekul sasaran biologi.18,19 Antioksidan sepertivitamin C, vitamin E, koenzim Q10, dan sebatian polifenol melindungi kulit daripada kerosakan yang disebabkan oleh ROS. Antioksidan dengan itu membantu mencegah dan merawat pelbagai penyakit kulit dan melambatkan proses penuaan kulit.20 Penggunaan vitamin C dalam industri adalah terutamanya kerana sifat antioksidanya, yang merupakan hasil daripadavitamin Ckeupayaan untuk meneutralkan radikal oksigen bebas, melalui proses yang dipanggil radikal scavenging.21,22 Walau bagaimanapun, kerana sifat antioksidan yang sama ini, molekul itu sendiri sememangnya mudah terdedah kepada degradasi melaluipengoksidaan. Untuk menyelesaikan masalah ini, kami membangunkan Aptamin C, aptamer DNA yang mengikat secara khusus kepada vitamin C dan menghalang pengoksidaan vitamin C. Aptamer ialah oligonukleotida berasaskan DNA atau RNA untai tunggal yang mampu mengikat secara selektif pelbagai molekul. Aptamer lazimnya dikenal pasti melalui kaedah pemilihan in vitro yang dirujuk sebagai Evolusi Sistematik Ligan melalui pengayaan EXponential atau "SELEX." Kami mengenal pasti bahawa Aptamin C menghalangpengoksidaanvitamin C daripada beberapa agen pengoksida dan mengekalkan aktiviti antioksidan semasa penyimpanan jangka panjang. Untuk mengesahkan penilaian keselamatan Aptamin C, eksperimen telah dijalankan di peringkat selular dan digunakan secara langsung kepada manusia dan tiada ketoksikan diperhatikan. Penyakit kulit seperti dermatitis atopik, psoriasis, dan jerawat adalah berkaitan dengan tindak balas imun dan ROS.23Vitamin Cmempunyai keupayaan untuk mengeluarkan ROS dan mempunyai kesan anti-radang.24 Aptamin C menghalangpengoksidaanvitamin c dan memaksimumkan keberkesanannya melalui pelepasan perlahan. Oleh itu, kami menjangkakan bahawa kompleks Aptamin C-vitamin C akan menunjukkan kesan sinergi.

2|BAHAN DAN KAEDAH

2.1|Pemeriksaan Aptamer terhadap vitamin C dengan pengurangan graphene-oksida

Kaedah ini telah dijalankan dengan mengubahsuai kaedah penyelidikan terdahulu.25 Calon ssDNA yang boleh mengikat secara khusus kepadavitamin Cdibangunkan daripada perpustakaan ssDNA rawak yang terdiri daripada kira-kira 1X1018 jujukan yang berbeza. Untuk perpustakaan ssDNA, kami menggunakan jujukan tersuai yang bersaiz 60mer dan mengandungi 30 jujukan nukleotida yang dijana secara rawak dan tapak primer untuk penguatan (5′‐ATGCGGATCCCGCGC‐(N)30‐GCGCGAAGCTTGCGC‐3′). Kami melakukan sebanyak lima pusingan sambil menukar keadaan eksperimen untuk memilih urutan yang lebih spesifik. Jumlah isipadu untuk tindak balas ialah 200 μL. Kira-kira 20 μL penimbal pengikat 10× (10× PBS ditambah 10 mmol/L MgCl2), 80 μL rGO (5 mg/mL, dicairkan dalam air), dan 200 picomoles perpustakaan ssDNA (20 μL stok 100 μmol/L ) telah ditambah dan difailkan dH2O kepada 200 μL. Tindak balas berlangsung selama 30 minit untuk mengikat perpustakaan ssDNA pada rGO, dan kemudian, campuran itu disentrifugasi pada 20 000 g selama 20 minit untuk menghilangkan supernatan. Pelet rGO dibasuh 1 kali dengan 200 μL penimbal pengikat yang mempunyai kepekatan yang sama dengan keadaan pengikatan sasaran setiap pusingan. Untuk mengecilkan calon, 200 nanomol daripadavitamin Cdicairkan dalam 200 μL penimbal pengikat telah ditambahkan pada pelet rGO dan langkah elusi berlangsung selama 1 jam. ssDNA tercair dibahagikan dengan sentrifugasi ia dilakukan pada 20 000 g selama 20 minit dan dikuatkan. Kami melakukan pemendakan EtOH untuk menghapuskan kekotoran kecuali ssDNA sebelum amplifikasi. Kami melakukan PCR asimetri untuk mendapatkan ssDNA yang diperkuatkan. Nisbah primer pemajuan kepada primer terbalik PCR asimetri ialah 10:1. Kami melakukan elektroforesis pada 2.5 peratus gel agarose untuk mengesahkan produk PCR dengan beberapa mikroliternya. PCR asimetri tidak boleh menghasilkan ssDNA sahaja. Jadi, kami melakukan kaedah menghancurkan dan rendam untuk mengasingkan calon ssDNA. Untuk kaedah ini, kami melakukan elektroforesis pada gel asli polyacrylamide 12 peratus dan mengotorkan gel dengan etidium bromida (EtBr). Untuk memisahkan DNA untai dua (dsDNA) dan ssDNA, bahagian gel yang diwarnai oleh ssDNA dipotong, dilumatkan, dan diekstrak ssDNA dengan penimbal hancur dan rendam (500 mmol/L NH4OAc, 0.1 peratus SDS, 0.1 mmol/L EDTA) semalaman. Gel yang dihancurkan dipisahkan dengan sentrifugasi. Supernatan yang mengandungi ssDNA dipekat dan disucikan dengan melakukan pemendakan EtOH. ssDNA kering dikumpulkan dengan dH2O yang disterilkan dan ini digunakan untuk pusingan seterusnya sebagai perpustakaan.

bahan semulajadicistanche amazon

2.2|Eksperimen kalorimetri titrasi isoterma (ITC).

Eksperimen kalorimetri titrasi isoterma telah dilakukan menggunakan sistem VP‐ITC (MicroCal Inc Northampton) pada 25 darjah dalam salin penimbal fosfat yang terdiri daripada 1 mmol/L magnesium klorida (pH 7.4). Sebelum setiap eksperimen pentitratan, Aptamin C 2 mL danvitamin C600 µL sampel telah dinyahgas selama 30 minit di bawah vakum, tanpa dikacau, pada suhu beberapa darjah di bawah suhu percubaan. Kami menyediakan 0.2 mmol/L vitamin C yang disuntik 25 kali dalam 2 µL aliquots ke dalam sel sampel 1.8 mL yang mengandungi Aptamin C pada kepekatan 0.02 mmol/L. Data telah dipasang pada isoterma pengikat satu tapak menggunakan program asal untuk ITC v.5.0 (MicroCal Inc).

2.3|Ujian mikroplat berasaskan pendarfluor untuk pengoksidaan vitamin C

Pengoksidaandaripadavitamin Cdiukur dengan mengesan produk teroksida dehidroascorbate (DHA) menggunakan versi diubah suai kaedah yang diterangkan oleh Vislisel et al.7 Dalam kaedah ini, DHA dikesan melalui tindak balas dengan o‐phenylenediamine (OPDA) untuk membentuk produk pemeluwapan pendarfluor 3‐( dihydroxyethyl)furo[3,4-b] quinoxaline-1-one. Ujian dilakukan seperti berikut dalam plat 384-telaga hitam (Greiner Bio-One). Aptamer mula-mula dilarutkan dalam garam penampan fosfat, pH 7.2, mengandungi 1mM MgCl2, pada kepekatan 200 µmol/L kemudian dilipat dengan memanaskan hingga 95 darjah dan dibiarkan sejuk perlahan-lahan ke suhu bilik selama 15 minit. Aptamer yang dilipat kemudiannya dicairkan 1:1 (v:v) ke dalam larutan yang baru disediakan sebanyak 5 mmol/Lvitamin Cdalam penimbal ujian [50 mmol/L natrium asetat, 1 peratus (b/v) BSA, 0.05 peratus (v/v) Antara 20, 1mM MgCl2 (Sigma, semua komponen) dilaraskan kepada pH 5.5] dan campuran itu diinkubasi selama 30 minit pada suhu bilik, untuk membolehkan aptamer mengikat sebelum penambahan pengoksida. Pengoksida kemudiannya ditambah kepada larutan vitamin C/aptamer pada kepekatan (EM) H2O2 (Sigma). Pengoksida telah dicairkan terlebih dahulu kepada kepekatan kerjanya dalam penimbal ujian. Sampel kemudian diinkubasi pada suhu bilik selama 10 minit sebelum penambahan OPDA (Sigma) pada kepekatan 5.5 mmol/L dalam penimbal ujian. Sejurus selepas penambahan OPDA, pendarfluor sampel pada 425 nm ditentukan menggunakan pembaca plat SpectraMax® i3X (Peranti Molekul) dengan pengujaan pada 345 nm, sepanjang kursus masa 45 minit dengan pengukuran dibuat setiap 60 saat. Semua sampel dan bekas yang mengandungi reagen telah dibalut dengan kerajang untuk melindunginya daripada cahaya semasa semua pengeraman dilakukan untuk ujian pendarfluor.

2.4|Pengukuran pengurangan vitamin C menggunakan DCPIP (2,6‐Dichlorophenolindophenol)

Untuk menentukan penguranganvitamin C, kami menjalankan eksperimen menggunakan tindak balas DCPIP. Vitamin C bertindak balas dengan DCPIP, menukar warna daripada biru kepada tidak berwarna. Vitamin C yang disediakan telah dirawat dengan 5 peratus Aptamin CTM, dan vitamin C yang tidak dirawat telah diinkubasi pada suhu bilik selama 8 minggu. Sampel diukur selepas 2, 4, dan 8 minggu. Kira-kira 2 mL DCPIP telah ditambah ke dalam kelalang kon menggunakan pipet, dan vitamin C pertama yang tidak dirawat ditambah sehingga larutan menjadi tidak berwarna. Jumlahvitamin Cditambah diukur dan diulang dengan sampel lain. Tahap pengurangan setiap sampel dikira mengikut data ini.

2.5|Kajian in vitro tentang kesan anti-kedut dalam fibroblas kulit manusia

Untuk menilai daya maju sel dalam fibroblas dermal manusia, sel telah dirawat dengan kepekatan akhir Aptamin C yang berbeza denganvitamin C(Aptamin C ug tambah vitamin C ug/mL) {{0}}.01 tambah 0.5 ug/mL, 0.1 tambah 5 ug/mL, 0.5 tambah 25 ug /mL, 1 tambah 50 ug/mL, dan 2 tambah 100 ug/mL. Dan kemudian, sel telah dirawat pada kepekatan Aptamin C dengan vitamin C untuk mengesan kolagen intraselular, kolagenase intraselular (MMP-1), dan aktiviti elastase.

Fibroblas kulit manusia (HDF) dipilih berdasarkan "Garis Panduan untuk penilaian keberkesanan kosmetik berfungsi (ΙI)" MFDS. HDF dibiakkan dalam DMEM/F12 3:1 campuran glukosa tinggi ditambah dengan 10 peratus FBS dan 1 peratus Antibiotik-Antimikotik dalam suasana CO2 5 peratus yang dilembapkan pada 37˚C.

HDF (5 × 104 sel/telaga) telah disemai ke dalam plat 24-telaga dan diinkubasi selama 24 jam dan dirawat dengan pelbagai kepekatan Aptamin C denganvitamin Cdan diinkubasi selama 24 jam. Selepas 24 jam, supernatan dikumpul, dan jumlah prokolagen yang dibebaskan ke dalam medium diukur pada 450 nm menggunakan Procollagen Type IC‐Peptide (PIP) ELISA Kit. Tahap pengeluaran kolagen telah ditentukur oleh jumlah kandungan protein dan dibandingkan dengan TGF- 1 sebagai kawalan positif. Media tanpa bahan ujian digunakan sebagai kawalan pelarut.

HDF (5 × 104 sel/telaga) telah disemai ke dalam plat 24-telaga dan diinkubasi selama 24 jam dan dirawat dengan pelbagai kepekatan Aptamin C denganvitamin Cdan diinkubasi selama 48 jam. Selepas 48 jam, aktiviti kolagenase diukur pada 450 nm menggunakan Kit ELISA Manusia MMP‐1. Aktiviti MMP-1 dinilai oleh jumlah kandungan protein dan dibandingkan dengan TGF- 1 sebagai kawalan positif. Media tanpa bahan ujian digunakan sebagai kawalan pelarut.

Semua data dinyatakan sebagai min ± sisihan piawai dan datang daripada 3 eksperimen bebas. Analisis statistik telah dijalankan oleh ujian-t sampel bebas menggunakan program perisian SPSS® (IBM) pada tahap keertian P <>

2.6|Pengukuran kedutan kulit dengan sistem analisis imej 3D

Dua puluh dua subjek perempuan (purata umur: 50.05 ± 2.94 tahun) mengambil bahagian dalam kajian ini. Kedutan kulit kaki gagak dinilai oleh sistem analisis imej 3D pada garis dasar, 4 dan 8 minggu. Penghidratan kulit dinilai dengan kaedah kapasitansi, dan TEWL dengan kaedah penyebaran air permukaan kulit dan keanjalan kulit melalui kaedah sedutan dinilai pada garis dasar, 2, 4, dan 8 minggu selepas rawatan. Juga, soal selidik diri mengenai keberkesanan telah diisi oleh subjek pada 2 dan 4 dan 8 minggu, dan kebolehgunaan telah diisi oleh subjek pada 8 minggu selepas rawatan. Semua data yang diperoleh telah dianalisis secara statistik oleh perisian SPSS®. Parameter kedutan pada kaki gagak dinilai menggunakan PRIMOS® Premium (GFMesstechnik GmbH). Sistem ini membenarkan analisis kuantitatif kekasaran, kedalaman, kawasan, dan isipadu yang menonjol pada kedutan kulit. Imej itu dianalisis di kawasan yang sama dari segi parameter kedutan kulit (1, Purata kedalaman kedutan; 2, Purata kedalaman kedutan terbesar; 3, Kedalaman maksimum kedutan terbesar; 4, Jumlah kawasan kedutan; 5, Jumlah kedutan keseluruhan; 6 , Jumlah kedutan faktor bentuk; 7, Jumlah panjang kedutan; 8, Ra; 9, Ry; dan 10, Rz) pada garis dasar, 4 dan 8 minggu selepas rawatan oleh Primos 5.8 E ver. Perisian.

3|KEPUTUSAN

3.1|Pendekatan yang rapi untuk penyediaan penimbal diperlukan untuk berjaya melaksanakan rGO‐SELEX dengan sasaran yang tidak stabil

Perpustakaan ssDNA, yang terikat kepada rGO melalui π‐π susun tindakan antara cincin aromatik permukaan graphene dan asas DNA 26,27 dan ssDNA tidak terikat pada rGO, telah dipisahkan dan dikeluarkan melalui sentrifugasi. ssDNA yang terserap pada permukaan rGO telah dielusi melalui rawatan dengan sebatian sasaran. Menurut laporan literatur, konformasi aptamer berubah selepas mengikat dengan sasaran dan dengan melemahkan interaksi susun π‐π dengan rGO.28-31 Proses ini diulang selama lima pusingan. Setiap pusingan berikutnya diteruskan dengan keadaan penimbal yang lebih keras dan masa elusi yang lebih pendek. Prestasi ini membolehkan kami mengekalkan ssDNA dengan kekhususan yang lebih baik kepada sebatian sasaran.

Data NGS perpustakaan diperkaya yang dihasilkan oleh proses rGO‐SELEX menghasilkan 404071 jujukan. Kami memilih 119 jujukan daripada data ini, menyusunnya kepada 11 kumpulan berdasarkan persamaan struktur, dan jujukan wakil terpilih untuk calon aptamer (Rajah 1A).

3.2|Pemilihan Aptamin C

Struktur sekunder calon Aptamin C telah diramalkan dengan menggunakan perisian bebas M‐Fold.32,33 Calon-calon tersebut dikumpulkan mengikut kedudukan, panjang, bentuk, dan bilangan batang dan gelung struktur berpotensi tertinggi (Rajah 1B). DHA, oksida daripadavitamin C, dikesan melalui tindak balasnya dengan o‐phenylenediamine (OPDA) yang memainkan peranan sebagai penunjuk.34 Jika aptamer mengikat dan menghalangnyapengoksidaan, kepada vitamin C dan menghalang pengoksidaannya, isyarat pendarfluor daripada 3‐(dihydroxyethyl)‐furo‐[3,4‐b] quinoxaline‐1‐one, hasil pemeluwapan vitamin C dan OPDA, akan lebih rendah daripada kawalan tanpa aptamer. Plot setiap calon aptamer dicampur dengan vitamin C dan pengoksida, dengan kawalan positif,vitamin Cditambah dengan urutan pengoksida dan scramble bercampur dengan vitamin C dan pengoksida (Rajah 1C). Lima aptamer, Aptamin Cb, Cc, Cf, Cg, dan Ck, telah ditunjukkan mempunyai kesan antioksida.

3.3|Perencatan pengoksidaan vitamin C oleh Aptamin C

Aptamin C mempunyai pertalian pengikatan yang tinggi untukvitamin C. Pengikatan Aptamin C dengan vitamin C ditentukan menggunakan analisis ITC. Daripada iso-terma pengikatan, entalpi (ΔH), entropi (ΔS), dan stoikiometri (n) tindak balas pengikatan boleh diperolehi. Pengikatan eksotermik Aptamin Cb dikesan daripada pengukuran ITC, dan entalpi (ΔH) dikira sebagai 302.5 ± 3.788, entropi (ΔS) dikira sebagai 18.9, stoikiometri(n) dikira sebagai 56.7 ± {{21 }}.426, dan pemalar disosiasi (Kd) dikira sebagai 2.13uM untuk vitamin C. Pengikatan eksotermik Aptamin Cf dikesan daripada pengukuran ITC, dan entalpi (ΔH) dikira sebagai 279.2 ± 2.992, entropi (ΔS) dikira sebagai 18.4, stoikiometri(n) dikira sebagai 167 ± 1.15, dan pemalar disosiasi (Kd) dikira sebagai 0.89uM untuk vitamin C. Pengikatan eksotermik Aptamin Ck dikesan daripada pengukuran ITC, dan entalpi (ΔH ) dikira sebagai 250.4 ± 3.742, entropi (ΔS) dikira sebagai 19.8, stoikiometri(n) dikira sebagai 82.2 ± 0.732, dan pemalar disosiasi (Kd) dikira sebagai 0.90 µmol/L untuk vitamin C (Rajah 2A). Pengukuran ITC mendedahkan bahawa perubahan dalam entropi apabila dikaitkan dengan Aptamin C adalah daya penggerak utama untukvitamin C. Untuk mengelakkanpengoksidaanvitamin C dalam keadaan cair, semua larutan disediakan dengan air ternyahiion dirawat dengan nitrogen. Pendarfluor dinyatakan dan dianalisis secara kuantitatif apabila OPDA (o‐phenylenediamine) terikat kepada DHA yang dihasilkan olehpengoksidaanvitamin C. Tahap pengoksidaan vitamin C mengikut kepekatan Aptamin C (125, 250, 500, dan 1000 nmol/L) telah dibandingkan dan disahkan oleh ujian OPDA. Keputusan menunjukkan bahawavitamin Cpenukaran kepada asid dehidroaskorbik adalah lebih perlahan apabila kepekatan Aptamin C lebih tinggi. (Rajah 2B). Data ini membuktikan bahawa Aptamin C adalah perencat bergantung kepada dos pengoksidaan vitamin C.

Kami menjalankan eksperimen untuk menentukan sama ada Aptamin C boleh menghalangpengoksidaanvitamin C dalam jangka masa yang panjang. Aptamin C dirawat bersamavitamin C, dan vitamin C yang tidak dirawat terdedah kepada cahaya dan dibiarkan berdiri pada suhu bilik selama 8 minggu. Akibatnya, apabila vitamin C yang tidak dirawat dibiarkan begitu sahaja, tahap pengurangan berkurangan kepada kurang daripada separuh dalam 2 minggu, dan hampir kesemuanya teroksida selepas 4 minggu. Dengan kehadiran Aptamin C, vitamin C dikurangkan kepada kira-kira separuh sebanyak 8 minggu (Rajah 2C). Ini menunjukkan bahawa Aptamin C menghalang pengoksidaan vitamin C dalam jangka masa yang panjang.

bina badan cistanche

3.4|Analisis aktiviti kolagenase intraselular (MMP-1) dan kolagen

Mengenai analisis aktiviti kolagenase, pengeluaran matriks metalloproteinase‐1 (MMP‐1) dikurangkan dengan ketara dalam cara yang bergantung kepada dos, dengan 7.06 peratus , 9.29 peratus dan 31.81 peratus pada kepekatan {{1{ {12}}}}.01 tambah 0.5 ug/mL, 0.1 tambah 5 ug/mL dan 0.5 tambah 25 ug/ mL, masing-masing (Rajah 3A). Mengenai analisis sintesis kolagen, jenis prokolagen Ι carboxy-terminal peptide (PIP) telah meningkat dengan ketara dalam cara yang bergantung kepada dos, dengan peningkatan 25.{{20}} peratus peningkatan pada 0.01 ditambah 0.5 ug/mL , 41.99 peratus pada 0.1 tambah 5 ug/mL, dan 71.18 peratus pada 0.5 tambah 25 ug/mL (Rajah 3B).

3.5|Kajian klinikal kesan peningkatan kedutan kulit pada kulit manusia

Analisis statistik parameter kedutan dilakukan oleh sistem analisis imej 3D, untuk menilai kesan peningkatan kedutan kulit produk ujian pada kulit manusia. Berbanding dengan kumpulan kawalan, parameter "Purata kedalaman kedutan" menurun 4.77 peratus pada 4 minggu dan 4.25 peratus pada 8 minggu, parameter "Kedutan kedalaman paling besar purata" menurun 3.37 peratus pada 4 minggu dan 4.53 peratus pada 8 minggu, " Parameter kedutan terbesar kedalaman maksimum" telah menurun 4.36 peratus pada 4 minggu dan 7.19 peratus pada 8 minggu, parameter "Jumlah panjang kedutan" menurun 1.61 peratus pada 4 minggu dan 2.67 peratus pada 8 minggu, parameter "Ra" menurun 4.22 peratus pada 4 minggu dan 3.90 peratus pada 8 minggu, parameter "Ry" menurun 2.66 peratus pada 4 minggu dan 7.11 peratus pada 8 minggu, parameter "Rz" menurun 3.69 peratus pada 4 minggu dan 6.22 peratus pada 8 minggu, penurunan adalah 3.69 peratus ‐7.11 peratus (Rajah 4).

4|KESIMPULAN

Vitamin Cialah molekul yang penting secara komersial tetapi tidak stabil, jadi meningkatkan kestabilannya menarik minat pelbagai sektor pasaran. Kerja kami menunjukkan bahawa Aptamin C, aptamer DNA, berpotensi memanjangkan jangka hayat dan meningkatkan potensi produk tersebut dengan melambatkanvitamin C pengoksidaandalam penyelesaian. Kami mempamerkan keberkesanan klinikal kompleks Aptamin C dalam peningkatan kedutan dan penghidratan kulit. Aptamin C complex juga boleh membantu melegakan kulit dalam keadaan kasar.

memperbaiki pemutihan kulit