Acteoside, Komponen Stachys Sieboldii MIQ, Mungkin Menjadi Agen Antinephritic yang Menjanjikan: Kesan Acteoside Pada Nefritis Anti-GBM Jenis Crescentic dalam Tikus

Untuk maklumat lanjut:ali.ma@wecistanche.com

Kazumi Hayashi, Tadashi Nagamatsu, Mikio Ito, Tomohisa Hattori dan Yoshio Suzuki

Jabatan Farmakologi, Fakulti Farmasi, Universiti Meijo, 150 Yagotoyama, Tenpaku-Ku, Nagoya 468, Jepun

ABSTRAK

Kesan daripadaacteoside(ACT) pada anti-GBM jenis sabitnefritispada tikus telah disiasat. Apabila tikus dirawat denganActeosidedari hari pertama selepas suntikan iv serum anti-GBM,Acteosidemenghalang peningkatan perkumuhan protein ke dalam air kencing. Di dalamActeoside-tikus yang dirawat, kandungan kolesterol dan kreatinin dan pengeluaran antibodi terhadap r-globulin arnab dalam plasma adalah lebih rendah daripada tikus kawalan nefritik. Pemerhatian histologi menunjukkan bahawa agen ini menghalang hiperselulariti dan kejadian pembentukan bulan sabit, lekatan dinding kapilari ke kapsul Bowman, dan nekrosis fibrinoid dalam glomeruli. Tambahan pula, deposit tikus-IgG dan C3 pada GBM adalah kurang ketara dalamActeosidekumpulan yang dirawat daripada kumpulan nefritik kawalan. Apabila rawatan dimulakan dari hari ke-20 selepas suntikan iv serum anti-GBM, yang mana penyakit itu telah ditubuhkan,Acteosidemengakibatkan kesan yang sama padanefritiktikus seperti yang dinyatakan di atas. Keputusan ini menunjukkan bahawa Acteoside mungkin merupakan ubat yang berguna terhadap glomerulonephritis yang progresif dengan cepat, yang dicirikan oleh lesi glomerular yang teruk dengan bulan sabit meresap.

Kata kunci: Anti-GBM jenis Crescenticnefritis,Acteoside, Tikus-IgG, Tikus-C3

Klik untuk kegunaan Cistanche dengan Acteoside

Cyorogi Stachys sieboldii MIQ (Labiatae) ditetapkan untuk banyak penyakit, dan ubi ini digunakan sebagai makanan oleh orang Cina, Rusia dan Jepun. Penyiasatan terkini telah menunjukkan bahawa chyrogi mempunyai tindakan anti-anoksia(1), tindakan menghalang aktiviti hyaluronidase (2), dan tindakan imunosupresif (3).

Sebaliknya, telah disebutkan bahawa tindak balas imun mengambil bahagian dalam perkembangan nefritis. Untuk meletakkannya dengan lebih konkrit, kecederaan glomerular dimediasi oleh pemendapan kompleks imun dalam glomeruli, diikuti oleh tindak balas imun-inflamasi, termasuk pengaktifan pelengkap dan pembebasan mediator keradangan lain. Dalam kajian baru-baru ini, banyak perhatian telah diberikan kepada sumbangan tindak balas imun pengantara sel dalam perkembangan glomerulonephritis (4, 5). Selain itu, Neild et al. (6) melaporkan bahawa penindasan fungsi sel T oleh cyclosporin A (CyA) menyekat perkembangan berikutnya lesi glomerular dalam nefritis penyakit akut. Kami melaporkan bahawa mizoribine (7), azathioprine (7), CyA (8), methylprednisolone (9), dan beberapa komponen tumbuhan (10) mempunyai tindakan imunosupresif menunjukkan kesan yang baik pada nefritis anti-GBM. Walaupun agen imunosupresif ini mengenakan tindakan antinephritic, sukar untuk menggunakannya dalam ujian klinikal kerana kesan sampingannya (11). Oleh itu, agen imunosupresif baru untuk rawatan nefritis di peringkat klinikal dijangka dibangunkan.

Tujuan kajian ini adalah untuk menjelaskankesan anti-nephritic acteoside, komponen chyorogi, pada nefritis anti-GBM jenis sabit pada tikus.

BAHAN DAN KAEDAH

Haiwan

Tikus terikan Sprague-Dawley jantan, beratnya lebih kurang. 160 g (Nihon SLC, Hamamatsu), digunakan untuk semua eksperimen. Haiwan ini ditempatkan di dalam bilik berhawa dingin pada suhu 23 ± 1 C semasa tempoh percubaan.

Dadah

Struktur kimia acteoside (ACT) (Tsumura Co., Ltd., Tokyo) ditunjukkan dalam Rajah 1. Komponen ini diekstrak daripada bahagian udara chyorogi (Stachys sieboldii MIQ). Ketulenan ACT telah disahkan oleh HPLC (Lajur: TSK gel ODS-80TM (4.0 id x 250 mm); Fasa mudah alih: 20 peratus CH3CN/H2O, mengandungi 10 AcOH; Kadar alir: 0.7 ml/min; Suhu: suhu bilik; Kesan: UV 254 nm) di Tsumura Co., Ltd. ACT yang digunakan dalam eksperimen ini mempunyai ketulenan lebih daripada 9970. ACT telah dilarutkan dalam air suling. Dipyridamole (Dip) (Boehringer Ingelheim, Jerman) dan azathioprine (Aza) (Sigma, St. Louis, MO, Amerika Syarikat) juga digunakan; Ubat-ubatan ini digantung dalam 1070 gam arab.

Induksi nefritis anti-GBM jenis sabit

Nefritis anti-GBM jenis sabit telah diinduksi dengan mengimunkan tikus yang telah menerima dos nefritogenik serum anti-tikus GBM (anti-GBM) arnab dengan r-globulin (rG) arnab mengikut sedikit pengubahsuaian kaedah yang dilaporkan sebelum ini ( 12). Dalam eksperimen ini, berat tikus adalah lebih kurang. 160 g telah diberikan 0.6 ml/haiwan serum anti-GBM ke dalam urat ekor.

Kesan ubat ujian dianggarkan dengan mentadbirnya dari hari pertama selepas suntikan serum anti-GBM (fasa heterolog) atau hari ke-20 selepas suntikan serum antiGBM (fasa autologous). Dalam eksperimen, 24-jam sampel air kencing telah dikumpul, dan tikus kemudiannya dibahagikan kepada 5 atau 6 kumpulan 8 tikus supaya kandungan protein purata dalam 24-jam air kencing dalam setiap kumpulan adalah pada tahap yang serupa.

Penilaian kesan antinephritik ubat ujian

Dalam eksperimen rawatan dadah dari fasa heterolog, empat kumpulan diberikan secara lisan 3, 10, atau 30 mg/kg/hari ACT atau 100 mg/kg/hari Dip, masing-masing, dalam jumlah 1 ml setiap 100 g berat badan, setiap hari dari hari pertama atau hari selepas suntikan iv serum anti-GBM hingga hari ke-40. Dalam eksperimen rawatan dadah dari fasa autologous, tiga atau empat kumpulan diberikan secara lisan 3, 10, atau 30 mg/kg hari ACT (A) atau 30 mg/kg/hari ACT, 100 mg/kg/hari Celupkan atau 50 mg/kg/hari Aza (B), masing-masing, dalam jumlah 1ml setiap 100 g berat badan, setiap hari dari hari ke-20 selepas suntikan iv serum anti-GBM hingga ke-40 (A) atau ke-45 (B) hari. Kumpulan selebihnya diberi secara lisan kenderaan (air suling) dan bukannya ubat ujian dan berfungsi sebagai kawalan nefritik. Di samping itu, kumpulan yang tidak dirawat (normal) digunakan untuk perbandingan dengan kumpulan nefritik.

Pengumpulan air kencing dan darah

Sampel air kencing {{{0}}jam diperoleh dengan menyimpan setiap haiwan dalam sangkar metabolik individu selama 24 jam. Pada permulaan pengumpulan air kencing, setiap haiwan menerima 8 ml air suling secara lisan tanpa diberi makan. Air kencing kemudiannya disentrifugasi pada 3,000 rpm selama 15 minit pada 41C dan supernatan digunakan untuk penentuan protein. Pada hari terakhir percubaan, 2.0 ml darah telah diambil daripada urat renal setiap tikus yang dibius dengan picagari pakai buang dan dimasukkan ke dalam tiub yang mengandungi 0.125 ml heparin. Darah telah disentrifugasi pada 5,000 rpm untuk mendapatkan plasma bagi penentuan beberapa parameter.

Penentuan protein urin dan kolesterol plasma dan kandungan kreatinin

Perkumuhan protein dalam air kencing ditentukan oleh kaedah Kingsbury et al. (13) dan dinyatakan sebagai mg/24 jam air kencing. Kandungan kolesterol ditentukan dengan kit ujian komersial (Tentukan TC-5; Kyouwa Medix Co., Ltd, Tokyo) (14) dan dinyatakan sebagai mg/dl plasma. Kandungan kreatinin ditentukan dengan menggunakan kit penentuan kreatinin (CRE-EN; Kainos, Inc., Tokyo) dan dinyatakan sebagai mg/dl plasma/100 g berat badan.

Pengukuran titer antibodi plasma terhadap -G

Titer antibodi plasma terhadap rG ditentukan oleh hemagglutinasi tidak langsung menggunakan sel darah merah biri-biri yang sensitif (15).

Pengukuran tahap pelengkap plasma CH50

Tahap pelengkap plasma CH50 ditentukan oleh kaedah Mayer (16).

Penilaian parameter histopatologi

Untuk kajian mikroskopik ringan, buah pinggang telah diasingkan daripada tikus yang dibius dengan pentobarbital, kemudian didehidrasi dan diperbaiki dengan merendam tisu secara berperingkat ke dalam pelbagai tradisi kebimbangan etil alkohol dari rendah ke tinggi. Tisu-tisu itu kemudiannya dibenamkan dalam parafin dan dibelah menjadi 2 hingga 3 kepingan em-tebal. Dalam kajian nefritis anti-GBM jenis sabit, bahagian tersebut diwarnai dengan hematoxylin dan eosin dan trichrome Masson. Bilangan nukleus (hiperselular), pembentukan bulan sabit, lekatan kapsul Bowman pada dinding kapilari (pelekatan), dan nekrosis fibrinoid dalam glomeruli diperhatikan di bawah mikroskop cahaya. Untuk menilai parameter ini, keratan rentas khatulistiwa telah dipilih dengan kaedah persampelan rawak. Lima puluh glomeruli/keratan rentas diperhatikan, dan kadar penampilan pembentukan sabit, lekatan, dan nekrosis fibrinoid dinyatakan sebagai peratusan glomeruli (kejadian) yang mengalami perubahan morfologi seperti yang diterangkan sebelum ini (17). Penilaian dilakukan oleh orang yang berbeza yang tidak mengetahui identiti setiap sampel. Untuk menilai hiperselular, keratan rentas khatulistiwa telah dipilih dengan kaedah persampelan rawak. Bilangan nukleus (termasuk nukleus sel glomerular dan leukosit eksudatif) dikira dan dinyatakan sebagai nombor min bagi setiap keratan rentas glomerular dalam 10 glomeruli/bahagian.

Imunohistokimia

Dalam tisu untuk pewarnaan imunoenzimatik tikus-IgG, bahagian parafin dipotong seperti yang diterangkan di atas dan bahagian tersebut dirawat dengan 0.1 peratus protease dalam 0.05 M Tris- Penampan HCl selama 7 minit dan kemudian dibasuh dalam 0 yang sejuk.01 M garam penimbal fosfat (PBS), pH 7.4. Bahagian tersebut kemudian diinkubasi dengan antibodi monoklonal tikus IgG anti-tikus (mAb) (Cappel, West Clester, PA, Amerika Syarikat) pada pencairan 1:100 selama 90 minit. Bahagian itu dibasuh semula dengan PBS, dirawat dengan 0.3 peratus hidrogen peroksida dalam metanol selama 20 minit untuk menyekat peroksidase endogen, dan diinkubasi dengan IgG anti-tikus yang ditulenkan pertalian biotinilasi dan peroksidase lobak pedas dengan 3,3'-diaminobenzidine tetrahydrochloride (DAB) (Vecta stain ABC Kit; Institusi vektor, Burlingame, CA, Amerika Syarikat). Semua langkah dijalankan pada suhu bilik.

Tisu untuk pewarnaan imunoenzimatik antigen nuklear sel yang membiak (PCNA), yang merupakan penanda untuk percambahan sel, telah ditetapkan dalam 10 peratus formalin dalam PBS, dan tisu tertanam parafin telah diwarnai dengan prosedur yang sama seperti untuk tikus-IgG kecuali untuk penggunaan mAb (19A2; Coulter Immunology, Hialeah, FL, USA) kepada PCNA.

Kuantifikasi tikus-IgG, C3, dan PCNA pada bahagian tisu

Jumlah kawasan imunoreaktif tikus-IgG dan C3 dalam glomerulus diukur dalam 30 glomeruli setiap bahagian menggunakan penganalisis imej (Penganalisis Imej Toyobo V1; Toyobo Co., Ltd., Tokyo) dan dibentangkan sebagai keratan rentas mm2/glomerular (GCS ). Sel PCNA-positif dalam glomerulus dikira dengan penganalisis imej, dan hasilnya dinyatakan sebagai bilangan sel / GCS

Analisis statistik

Data mewakili min ± SD, dan hasilnya dinilai secara statistik oleh ANOVA. Apabila keputusan ini adalah parametrik, ini telah dinilai secara statistik oleh ujian Duncan. Apabila keputusan bukan parametrik, mereka dinilai secara statistik oleh ujian Kruskal-Wallis. Peratusan perencatan dikira seperti berikut:

Peratusan perencatan ( peratus )=(Kawalan -Ujian ubat) x 100 / (Kawalan -Biasa)

KEPUTUSAN

Kesan Acteoside dalam nefritis anti-GBM jenis sabit

Perkumuhan protein urin (Rajah 2 dan 3): Apabila rawatan dengan ACT dimulakan dari hari selepas suntikan serum anti-GBM (fasa heterolog), penindasan ketara pertama pada protein kencing diperhatikan pada hari ke-5 pada 30 mg /kg, po; pada hari ke-20 pada 3 dan 10 mg/kg, po; dan pada hari ke-40 dengan Dip pada 100 mg/kg, po

Apabila ACT diberikan dari hari ke-20 selepas suntikan serum antiGBM (fasa autologous), ACT pada 10 dan 30 mg/hari menghalang peningkatan perkumuhan protein ke dalam air kencing pada hari ke-30. Sebaliknya, Aza pada 50 mg/kg adalah lebih lemah daripada ACT pada 30 mg/kg, walaupun tidak ketara, dan Dip tidak mempunyai kesan.

Kandungan kolesterol dan kreatinin plasma (Jadual 1): Kandungan kolesterol dan kreatinin plasma ditentukan pada hari ke-40 atau ke-45. Kandungan kolesterol plasma dalam tikus kawalan nefritik telah meningkat dengan ketara. Sebaliknya, peningkatan kandungan kolesterol dikurangkan dengan ACT (30 mg/kg) daripada fasa heterolog sebanyak 60 peratus daripada tahap kawalan dan dengan ACT (30 mg/kg) daripada fasa autologous sebanyak 62'o daripada kawalan. tahap. Kandungan kreatinin plasma dalam tikus nefritik juga meningkat. Sebaliknya, dalam ACT (30 mg/kg) daripada kedua-dua tikus yang dirawat fasa, kandungan kreatinin plasma adalah serupa dengan tikus biasa.

Titer antibodi plasma terhadap rG: Tikus nefritik telah menunjukkan pengeluaran antibodi yang dipercepatkan dengan ketara. Pengeluaran antibodi yang dipercepatkan telah ditindas kepada 72 peratus daripada tahap kawalan dengan rawatan dengan ACT (10 dan 30 mg/kg) daripada fasa heterologous (Jadual 2), ACT (30 mg/kg) daripada fasa autologous, dan Aza kepada 70 dan 51 peratus daripada tahap kawalan, masing-masing (data tidak ditunjukkan), dan ia tidak terjejas oleh Dip.

Pemerhatian histologi (Jadual 3, Rajah 4 dan 5): Pemeriksaan mikroskopik cahaya glomeruli nefritik mendedahkan lesi yang dicirikan oleh pembentukan bulan sabit yang teruk, lekatan, nekrosis fibrinoid, dan percambahan sel mesangial. Pemerhatian histologi menunjukkan bahawa ACT (dari kedua-dua fasa heterologous dan autologous) menghalang hiperselulariti dan kejadian pembentukan sabit, lekatan, dan nekrosis fibrinoid dalam glomeruli menjelang hari ke-40 atau ke-45. Lesi tikus nefritik yang dirawat Dip dan Aza juga kurang daripada tikus kawalan nefritik. Walau bagaimanapun, apabila tikus nefritik dirawat dengan Dip dari fasa autologous, perubahan histologi sedikit terjejas oleh Dip (data tidak ditunjukkan).

Proliferasi sel glomerular, iaitu peningkatan dalam sel PCNA-positif dalam glomeruli, diperhatikan dalamtikus nefritik. Sebaliknya, pada hari ke-30, pengurangan 52 peratustion dalam percambahan sel telah diperhatikan, dan ini dikaitkan wdengan pengurangan ketara dalam sel glomerularkilauan berbanding dengan kawalan (Jadual 3).

Pemendapan bahan tindak balas imun (Jadual 2 dan Rajah 6): Adalah mungkin untuk memerhatikan mendapan tikus-IgG dan C3 pada GBM dalam tikus kawalan nefritik; bagaimanapun, ia tidak ditemui dalam tikus biasa. ACT (30 mg/kg) daripada fasa heterolog mengurangkan pemendapan IgG tikus pada GBM sebanyak 72 peratus daripada tahap kawalan. Selain itu, ACT (3, 10, dan 30 mg/kg) daripada fasa heterolog mengurangkan pemendapan tikus-C3 pada GBM sebanyak 60 hingga 69 peratus menjelang hari ke-40. Walaupun ACT diberikan dari fasa autologous, perencatan pemendapan tikus-IgG dan C3 adalah serupa dengan keputusan di atas. Penurunan tidak menjejaskan pemendapan tikus-IgG dan C3. Aza, bagaimanapun, mengurangkan pemendapan tikus-IgG dan C3 pada GBM masing-masing sebanyak 67 dan 68 peratus (data tidak ditunjukkan).

Kesan ACT pada aktiviti pelengkap dan deposit C3 pada GBM dalam nefritis anti-GBM jenis asal (Rajah 7)

Nefritis anti-GBM jenis asal telah diinduksi pada tikus dengan suntikan 0.6 ml serum anti-GBM ke dalam urat ekor mereka, seperti yang diterangkan sebelum ini (18). Tikus nefritik telah dirawat dan selepas dirawat dengan ACT pada 30 mg/kg, po dan faktor racun ular tedung (CVF) (Sigma) pada 10 fig/tikus, ip, tiga kali, setiap 8 jam. Rawatan ACT dan CVF mengurangkan perkumuhan protein dalam air kencing dengan peratusan perencatan lebih kurang. 35 darjah dan 71 peratus, masing-masing. CH50 dalam tikus kawalan nefritik adalah lebih rendah daripada tikus biasa dalam 24 jam selepas induksi nefritis. ACT menghalang penurunan CH50 dan peningkatan pemendapan C3 pada GBM dalam tikus kawalan nefritik. CVF memansuhkan pemendapan CH50 dan C3. Tambahan pula, dalam eksperimen in vitro, ACT menghalang pengaktifan pelengkap sebanyak 37 peratus . Apabila ACT diberikan kepada tikus biasa, ACT mengurangkan pengaktifan pelengkap dalam eksperimen ex vivo (data tidak ditunjukkan).

PERBINCANGAN

Glomerulonephritis yang progresif dengan cepat dan penyakit buah pinggang dalam sindrom Goodpasture adalah penyakit malignan yang menjadi kegagalan buah pinggang dalam 2 atau 3 bulan selepas perkembangan penyakit (19). Ciri-ciri nefritis ini melibatkan hiperselular, penyusupan neutrofil dan monosit yang ketara, dan pembentukan bulan sabit dalam glomeruli. Terapi koktel dengan agen imunosupresif, ubat antiplatelet, dan steroid telah digunakan terutamanya untuk penyakit ini. Sebaliknya, walaupun CyA adalah imunosupresan yang melampaui kesan yang baik terhadap nefritis eksperimen (6, 8), telah dilaporkan bahawa CyA menyebabkan disfungsi buah pinggang dan menyebabkan perubahan histologi yang tidak dapat dipulihkan dalam glomeruli (11). Methylprednisolone mempunyai banyak kesan sampingan. Tambahan pula, fenomena rebound dan sindrom penarikan selepas rawatan yang lama dengan ubat ini adalah dua masalah. Oleh itu, agen imunosupresif baru untuk rawatan nefritis yang mempunyai kesan sampingan yang lebih sedikit mesti dibangunkan.

Nefritis anti-GBM jenis sabit ialah model eksperimen yang menunjukkan perubahan histologi dan patologi serupa dengan glomerulonefritis yang progresif dengan cepat dan penyakit buah pinggang sindrom Goodpasture (20). Perkembangan dan perkembangan nefritis ini terdiri daripada 2 fasa yang dimediasi oleh tindak balas imun. Tindak balas awal, yang dipanggil fasa heterolog, adalah disebabkan oleh pemendapan antibodi anti-GBM, diikuti oleh pengumpulan granulosit polimorfonuklear yang bergantung kepada pelengkap (21, 22). Fasa lewat (fasa autologous) berkembang dengan pengikatan antibodi autologus yang disimpan di sepanjang GBM dan kemasukan monosit/makrofaj ke glomeruli berikutan tindak balas ini (22, 23). Nefritis ini dicirikan oleh protein kencing bifasik dan hiperselular yang melibatkan pembentukan sabit dan nekrosis fibrinoid. Pembentukan bulan sabit dianggap sebagai pengantara oleh makrofaj yang berhijrah dan sel epitelium yang membiak (22, 24).

Kami sebelum ini melaporkan bahawa mizoribine dan Aza, agen imunosupresif (7), menghalang peningkatan antibodi plasma terhadap IgG arnab dan Pachyman, komponen utama Poria cocos (18), menurunkan tahap pemendapan C3 pada GBM, dan kedua-duanya adalah berkesan terhadap nefritis anti-GBM.

Rawatan ACT menghalang perkembangan glomerulonefritis anti-GBM seperti yang dinilai oleh pengurangan proteinuria dan kolesterol plasma, pencegahan gangguan fungsi buah pinggang, dan pencegahan perubahan histologi progresif termasuk perkembangan sabit glomerular dan hiperselular. Pada hari ke-40, ACT pada 30 mg/kg sahaja dengan ketara mengurangkan jumlah pemendapan tikus-IgG pada GBM yang dimediasi oleh penindasan pengeluaran anti-badan dalam model nefritik ini. Sebaliknya, jumlah deposit C3 pada GBM telah dikurangkan oleh ACT pada 3, 10, atau 30 mg/kg. Selain itu, ACT dengan ketara menghalang pengaktifan pelengkap dalam kedua-dua eksperimen in vitro dan ex vivo. Pengurangan CH50 dalam tikus kawalan nefritik telah dihalang oleh ACT. Data di atas mencadangkan bahawa ACT menghalang kecederaan buah pinggang dengan menekan pengaktifan pelengkap, kerana kompleks serangan membran pelengkap (MAC) terlibat dalam patogenesis kecederaan glomerular (25), dan MAC sublitik mempunyai mediator keradangan yang berpotensi yang boleh dikaitkan dengan kerosakan glomerular, percambahan sel mesangial dan resapan matriks ekstraselular, seperti spesies oksigen reaktif (26), protease (27), prostaglandin (28) dan interleukin-1 seperti sitokin (29), serta kolagen (30).

Adalah dipercayai bahawa pengaktifan pelengkap berkait rapat dengan penyusupan leukosit. Dalam kajian baru-baru ini, dilaporkan bahawa C5a menimbulkan lekatan monosit dan neutrofil kepada sel mesangial dan sel endothelial, masing-masing (31, 32). Oleh itu, dalam kajian lanjut, kita akan menyiasat kesan ACT terhadap pengumpulan leukosit dalam glomeruli.

RUJUKAN

1 Yamahara J, Kitani T, Kobayashi H dan Kawahara Y: Kajian tentang Stachys sieboldii MIQ. II Tindakan anti-anoxia dan konstituen aktif. Yakugaku Zasshi 110, 932-935 (1990) (Abstrin English)

2 Takeda Y, Fujita T, Satoh T, dan Kakegawa H: Mengenai juzuk glikosidik Stachys sieboldii MIQ. dan kesannya terhadap aktiviti hyaluronidase. Yakugaku Zasshi 105, 955-959 (1985) (Abstr dalam Bahasa Inggeris)

3 Sasaki H, Nishimura H dan Morita T: Prinsip imunosupresif pelahap Rehmannia var. hueichingensis. Planta Med 55, 458-462 (1989)

4 Saito T dan Atkins RC: Sumbangan leukosit mononuklear kepada perkembangan sklerosis glomerular fokus eksperimen. Int Buah Pinggang 37, 1076-1083 (1990)

5 Tipping PG, Neale TJ, dan Holdsworth SR: Penyertaan limfosit T dalam glomerulonefritis eksperimen yang disebabkan oleh antibodi. Int Buah Pinggang 27, 530-537 (1985)

6 Neild GH, Ivory K, dan Williams DG: Cyclosporin A menghalang penyakit serum sactus pada arnab. Clin Exp Immunol 52, 586-594 (1983)

7 Okamoto K, Ito M dan Suzuki Y: Kajian tentang kesan antinephritic pada mizoribine (p-INN, Bredinin®), agen imunosupresif baharu dan azathioprine (2): Kesan ke atas nefritis anti-GBM jenis sabit pada tikus. Jpn J Pharmacol 34, 33-41 (1984)

8 Nagamatsu T, Kojima N, Kondo N, Hattori T, Kojima R, Ito M, dan Suzuki Y: Penindasan oleh siklosporin A nefritis anti-GBM dalam tikus. Jpn J Pharmacol 58, 27-36 (1992)

9 Taniguchi H, Nagamatsu T, Kojima R, Ito M, dan Suzuki Y: Ditandakan tindakan antinephritic dan kurang kesan buruk methylprednisolone sultanate oleh pentadbiran sekejap pada tikus. Jpn J Pharmacol 64, 79-88 (1994)

10 Hattori T, Furuta K, Hayashi K, Nagamatsu T, Ito N, dan Suzuki Y: Kajian tentang kesan antinephritik komponen tumbuhan (6): Kesan antinephritic dan mekanisme drine phellogen (OB-5) pada bulan sabit- jenis nefritis anti-GBM pada tikus (2). Jpn J Pharmacol 60, 187-195 (1992)

11 Mason J: Kesan Sandimmune pada buah pinggang. Clin Res Bull 6, 47-51 (1989)

12 Ito M, Yamada H, Okamoto Y, dan Suzuki Y: Nefritis jenis Crescentic yang disebabkan oleh serum membran bawah tanah anti-glomerular (GBM) pada tikus. Jpn J Pharmacol 33, 1145-1154 (1983)

13 Kingsbury FB, Clark CP, Williams G dan Post AL: Penentuan pesat albumin dalam air kencing. J Lab Clin Med 11, 981-989 (1926)

14 Zurkowski P: Kaedah pantas untuk penentuan kolesterol dengan reagen tunggal. Clin Chem 10, 451-453 (1964)

15 Mcleish KR, Clark CP, Williams G dan Post AL: Penindasan sintesis antibodi oleh prostaglandin E sebagai mekanisme untuk mencegah glomerulonefritis kompleks imun murine. Lab Invest 47, 147-152 (1982)

16 Mayer MM: Pelengkap dan pelengkap penetapan. Dalam Imunokimia Eksperimen, pp 133-240, Charles C. Thomas, Springfield (1961)

17 Hattori T, Ito M, Nagamatsu T dan Suzuki Y: Kajian tentang kesan anti nefritik TJ-8014, ubat herba Jepun baharu (3): Kesan pada nefritis anti-GBM jenis sabit pada tikus. Jpn J Pharmacol 52, 131-140 (1990)

18 Hattori T, Hayashi K, Nagao T, Furuta K, Ito M, dan Suzuki Y: Kajian tentang kesan antinephritik komponen tumbuhan (3): Kesan pachyman, komponen utama Poria cocos Wolf pada asal nal-jenis anti-GBM nefritis pada tikus dan mekanismenya. JpnJ Pharmacol 59, 89-96 (1992)

19 Shibata S, Miyakawa Y, Naruse T, Nagasawa T, dan Takuma T: Glikoprotein yang mendorong antibodi nefrotoksik: Pengasingan dan penulenannya daripada membran bawah tanah glomerular tikus. J Immunol 102, 593 601 (1969)

20 Falk RJ: Penyakit buah pinggang yang berkaitan dengan ANCA. Kidney Int 38, 998-1010 (1990) 21 Mulligan MS, Johnson KJ, Todd RF III, Issekutz TB, Miyasaka M, Tamatani T, Smith CW, Anderson DC dan Ward PA: Keperluan untuk molekul lekatan leukosit dalam nefritis nefrotoksik. J Clin Invest 91, 577-587 (1993)

22 Nahas AME: Faktor pertumbuhan dan sklerosis glomerular. Buah Pinggang Int 41, Supp 36, S15-S20 (1992)

23 Boyce NW, Holdsworth SR, Dijkstra CD, dan Atkins RC: Kuantiti fagosit mononuklear intraglomerular dalam glomerulonephritis eksperimen dalam tikus menggunakan antibodi monoklonal tertentu. Patologi 19, 290-293 (1987)

24 Becker GJ, Hancock WW, Stow JL, Glasgow EF, Atkins RC dan Thomson NM: Penglibatan makrofaj dalam glomerulonefritis kompleks imun kronik eksperimen. Nephron 32, 227-233 (1982) 25 Perkinson DT, Baker PT, Couser WG, Johnson BJ dan Adler S: Pemendapan kompleks serangan membran dalam kecederaan glomerular eksperimen. Am J Pathol 120, 121-128 (1985)

26 Alder S, Baker PJ, Johnson RJ, Ochi RF, Pritzl P, dan Couser WG: Kompleks serangan membran pelengkap merangsang pengeluaran metabolit oksigen reaktif oleh sel mesangial tikus yang dikultur. J Clin Invest 77, 762-767 (1986)

27 Johnson RJ, Couser WG, dan Alpers CE: Protease neutro philistine manusia, esterase, dan cathepsin G boleh menengahi kecederaan glomerular dalam vivo. J Exp Med 168, 1169-1174 (1988)

28 Cybusky AV, Lieberthal W, Quigg RJ, Rennke HG, dan Salant DJ: Peranan untuk tromboksan dalam kecederaan glomerular pengantara pelengkap. Am J Pathol 128, 45-51 (1987)

29 Lovett D, Hansch G, Resch K, dan Gemsa D: Pengaktifan sel mesangial glomerular oleh komponen pelengkap terminal. Rangsangan pembebasan faktor prostanoid dan seperti interleukin. Imunobiologi 168, 34-35 (1986)

30 Torbohm I, Schonermark M, Wingen AM, Berger B, Rother K dan Hansch GM: C5b_8 dan C5b_9 memodulasi pembebasan kolagen sel epitelium glomerular manusia. Int Buah Pinggang 37, 1098-1104 (1990)

31 Lo SK, Detmers PA, Levin SM, dan Wrigh SD: Lekatan sementara neutrofil pada endothelium. J Exp Med 169, 1779 -1793 (1989) 32 Brady HR, Denton MD, Jimenez W, Takata S, Palliser D dan Brenner BM: Chemoattractants mencetuskan lekatan monosit pada sel mesangial manusia dan kecederaan sel mesangial. Buah Pinggang Int 42, 480-487 (1992)