Abstrak: Polifenol dikenali sebagai antioksidan pemakanan. Mereka baru-baru ini telah menarik minat yang besar dalam penggunaan untuk mencegah penuaan kulit dan hiperpigmentasi akibat penyinaran UV suria. Daun Prunus persica (L.) dianggap sebagai produk sampingan dan dilaporkan mempunyai aktiviti antioksidan yang luar biasa kerana kandungan polifenolnya yang tinggi. Kajian ini bertujuan untuk membangunkan penyediaan krim anti-penuaan dan pemutihan kulit kosmetik menggunakan ekstrak daun etanol Prunus persica (L.) (PPEE) yang dimuatkan dalam nanopartikel lipid pepejal (SLN) untuk meningkatkan penghantaran kulit. Penyiasatan kimia PPEE menunjukkan jumlah kandungan fenolik dan flavonoid yang tinggi dengan aktiviti antioksidan yang ketara (ujian DPPH, ABTS, dan -karotena). Glikosida kaempferol tesilat unik dengan struktur yang jarang ditemui, kaempferol 3-O- -4C1-(600 -O-3,4-dihydroxyphenylacetyl glucopyranoside) ( KDPAG) telah diasingkan buat kali pertama dan strukturnya dijelaskan sepenuhnya. Ia mewakili contoh pertama asilasi dengan 3,{{10}}asid phenylacetic dihidroksi dalam kimia flflavonoid. Kajian sitotoksisiti in-vitro terhadap garisan sel keratinosit manusia mendedahkan tidak ketoksikan PPEE dan PPEE-SLN. Selain itu, PPEE, PPEE-SLNs, dan KDPAG menunjukkan aktiviti anti-elastase yang baik, setanding dengan N (Methoxysuccinyl)-Ala-Ala-Pro-Val-chloromethyl ketone. Selain itu, PPEE-SLNs dan KDPAG menunjukkan secara signifikan (p <0.001) aktiviti anti-kolagenase dan anti-tirosinase yang lebih tinggi berbanding dengan EDTA dan asid kojik, masing-masing. Formula krim PPEE-SLN yang berbeza (2 peratus dan 5 peratus ) telah dinilai untuk kemungkinan aktiviti anti-kedutan terhadap penuaan foto akibat UV dalam model tetikus menggunakan kaedah pemarkahan kedutan dan ditunjukkan untuk menawarkan kesan perlindungan yang sangat ketara terhadap UV, seperti yang dibuktikan oleh tisu biomarker (SOD) dan kajian histopatologi. Oleh itu, kajian semasa menunjukkan bahawa produk sampingan daun Prunus persica menyediakan sumber yang menarik dan berharga untuk bahan kosmetik semula jadi. Ini menyediakan data berkaitan untuk mengkaji lebih lanjut potensi penggunaan selamat PPEE-SLN dalam formulasi kosmetik anti-penuaan topikal dengan sifat resapan kulit yang dipertingkatkan.

Menurut kajian yang berkaitan,cistancheadalah herba biasa yang dikenali sebagai "herba ajaib yang memanjangkan hayat". Komponen utamanya ialahcistanoside, yang mempunyai pelbagai kesan sepertiantioksidan, anti-radang, danpromosi fungsi imun. Mekanisme antara cistanche danpemutihan kulitterletak pada kesan antioksidan daripadaglikosida cistanche. Melanin dalam kulit manusia dihasilkan oleh pengoksidaan tirosin yang dimangkin olehtyrosinase, dan tindak balas pengoksidaan memerlukan penyertaan oksigen, jadi radikal bebas oksigen dalam badan menjadi faktor penting yang mempengaruhi pengeluaran melanin. Cistanche mengandungi cistanoside, yang merupakan antioksidan dan boleh mengurangkan penjanaan radikal bebas dalam badan, dengan itumenghalang pengeluaran melanin.

Klik pada Cistanche Supplement Untuk Pemutihan

Untuk maklumat lanjut:

david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501

1. Pengenalan

Penuaan kulit adalah proses progresif multifaktorial yang kompleks yang memangkinkan perubahan fizikal pada kulit dan tisu penghubung [1]. Ia dikelaskan kepada penuaan intrinsik dan ekstrinsik.

Penuaan kulit ekstrinsik disebabkan terutamanya oleh faktor persekitaran, seperti bahan pencemar, merokok, dan tekanan hidup, atau kebanyakannya daripada pendedahan berulang kepada sinaran UV (photoaging) [2].

Pendedahan berlebihan kepada sinaran UV merangsang pengeluaran berlebihan spesies oksigen reaktif (ROS) yang mengakibatkan tekanan oksidatif endogen dalam tisu kulit yang membawa kepada kemerosotan komponen matriks ekstraselular (ECM). Degradasi ECM dikaitkan secara langsung dengan penuaan kulit dan bertanggungjawab untuk peningkatan aktiviti enzim tertentu seperti kolagenase, elastase, dan tyrosinase yang terlibat dalam penuaan kulit. Pengaktifan enzim dermal ini menyebabkan penurunan tahap elastin, dan kolagen yang membawa kepada kehilangan keanjalan dan kekuatan kulit dan penampilan kedutan [3]. Juga, induksi pengeluaran melanin yang berlebihan dan penyamakan kulit mengakibatkan hiperpigmentasi kulit.

Oleh itu, penuaan kulit boleh dicegah oleh antioksidan dengan aktiviti penghapusan radikal bebas yang mungkin mempunyai kepentingan yang besar dalam pertahanan dan terapeutik penyakit berkaitan usia yang melibatkan ROS [4]. Cara lain untuk melambatkan penuaan ialah menggunakan perencat elastase, kolagenase, dan tyrosinase yang merupakan calon yang sangat kuat untuk aktiviti anti-kedut dan pemutihan kulit yang menyokong pemeliharaan keanjalan kulit dan boleh menjadi pendekatan biasa untuk menangani gangguan pigmentasi [5].

Telah dilaporkan bahawa antioksidan semulajadi yang diasingkan daripada tumbuh-tumbuhan mengurangkan risiko penuaan foto yang disebabkan oleh penyinaran UV kedua-dua in-vitro dan in-vivo [6] dan ia adalah lebih baik sebagai bahan kosmeseutikal daripada antioksidan sintetik dari segi kos dan kesan sampingan. Di samping itu, banyak kajian in-vitro dan in-vivo telah menunjukkan bahawa sebatian fenolik seperti asid fenolik, flavonoid, dan tanin boleh menghilangkan radikal bebas dan menghalang enzim elastase, kolagenase, dan tyrosinase [7].

Penggunaan antioksidan semulajadi dalam penyediaan topikal untuk melindungi kulit daripada tekanan oksidatif yang disebabkan oleh faktor ekstrinsik telah dilaporkan [8]. Walau bagaimanapun, majoriti molekul antioksidan secara semula jadi tidak stabil dan boleh teroksida dengan mudah untuk membentuk sebatian tidak aktif sebelum sampai ke tapak tindakan yang menjadikannya sukar untuk dirumuskan dalam produk kosmetik yang sesuai dan stabil. Penemuan ini membuktikan keperluan sistem penyampaian unik untuk meningkatkan formulasi antioksidan ini [9].

Beberapa faktor mempengaruhi kebolehtelapan polifenol yang digunakan secara topikal; subkelas fenolik, strukturnya, saiz molekulnya, dan bentuk glikosida atau aglikon, serta komponen perumusan yang lain. Walau bagaimanapun, interaksi dengan komponen kulit melalui campuran kaedah fizikal dan kimia boleh meningkatkan kebolehtelapan melalui gangguan boleh balik struktur penghalang lapisan stratum korneum. Pendekatan enkapsulasi adalah salah satu kaedah meningkatkan kebolehtelapan yang paling biasa digunakan untuk menstabilkan polifenol dengan mudah semasa penyimpanan, meningkatkan kesan antioksidannya, penyerapan kulit, dan penembusan dalam terapi kosmetik dan topikal. Teknologi enkapsulasi yang baru dibangunkan termasuk nanoemulsion, transferase, nanopartikel lipid pepejal, nanokristal, dan ribosom [10].

Nanopartikel lipid pepejal (SLN) ialah sistem penghantaran yang stabil untuk produk kulit. SLN dianggap sebagai pembawa ubat yang menjanjikan untuk formulasi topikal kerana kestabilan fotonya, sifat pelepasan terkawal, oklusiviti, kesan penyamaran bau, dan peningkatan penembusan konstituen aktif melalui kulit dengan meningkatkan penghidratannya tanpa tanda-tanda kerengsaan kulit, sebagai tambahan kepada kesederhanaan. pengeluaran, ketoksikan rendah, dan kestabilan fizikal [9,11].

Di seluruh dunia, terdapat kira-kira 2000 kultivar pic [12]. Prunus (Rosaceae) ialah genus tumbuhan terkenal yang merangkumi spesies yang kaya dengan fenolik [13–15]. Beberapa spesies genus ini ditanam di Mesir untuk buah-buahan yang boleh dimakan atau sebagai hiasan [16].

Prunus persica (L.) Batch (PP) ialah pokok kecil dengan ranting bergerigi dan batang pendek, mahkota yang merebak, bulat [12] dan biasanya ditanam di Asia Barat, Eropah, India, dan Afrika Utara [17]. Secara tradisinya, daunnya telah digunakan sebagai diuretik, julap, vermifuge, insektisida, penenang, untuk batuk kokol, untuk rawatan leukoderma, dan sebagai febrifuges [17]. Tambahan pula, kajian farmakologi pada daun mencirikan in-vivo anti-diabetes, kesan spasmogenik, anti-radang, antikoagulan, hepatoprotektif, antimalaria, anti-asma, dan in-vitro perencatan sitotoksik, antimikrob dan nitrik oksida dengan aktiviti anti-oksidan yang ketara. [18–22].

Banyak kajian telah dilakukan untuk menyiasat profil fenolik pengikut PP, buah-buahan, dan biji, aktiviti antioksidan mereka, dan nilai farmakologi dan pemakanan [13,14,23,24]. Walau bagaimanapun, data yang sangat terhad tersedia pada daun. Sehingga kini, satu laporan tersedia yang menerangkan pengasingan lima glikosida flavonol daripada ekstrak daun etanol [25]. Di samping itu, sebatian fenolik telah dicirikan, termasuk asid fenolik dan flflavonoid menggunakan analisis HPLC-MS dengan flflavonol sebagai bahan dominan di antara semua sebatian yang ditentukan [20,26].

Selain itu, walaupun benih PP, buah-buahan, pengikut, dan spesies lain telah dilaporkan mempunyai aktiviti perlindungan in-vivo terhadap fotopenuaan akibat UV dan aktiviti anti-kedut dan pemutihan kulit in-vitro [15,23,27-32], ini tidak pernah dilaporkan untuk ekstrak daun PP.

Sebilangan besar daun PP adalah hasil sampingan yang diperoleh daripada penanaman pokok pic dan industri pengetinan buah [33]. Hasil sampingan biji PP, buah-buahan, dan varieti daun lain telah dinilai dalam kosmetik dan sebagai makanan diet untuk potensi valorisasi [32,34,35]. Walau bagaimanapun, sepanjang pengetahuan kami, produk sampingan daun PP var. Florida Prince tidak pernah disiasat dan boleh menjadi sumber fitokimia yang menarik. Berbanding dengan industri lain, pasaran kosmetik lebih mudah diakses dan berkembang dan boleh menjadi sumber untuk pengukuhan produk sampingan [15]. Penjagaan kulit dan produk penuaan kulit adalah beberapa potensi kosmetik yang paling penting.

Dalam kesinambungan penyelidikan kami tentang polifenol tumbuhan yang boleh dimakan Mesir [36] dan kerana daun PP dianggap sebagai produk sampingan dan dilaporkan mempunyai aktiviti antioksidan yang ketara terutamanya disebabkan kandungan flavonolnya yang tinggi, kajian ini bertujuan untuk menundukkan PPEE kepada fitokimia yang meluas. analisis profil fenoliknya dan untuk memasukkan PPEE ke dalam SLN yang dimuatkan sebagai sistem penghantaran kulit yang unik. Tambahan pula, potensi kosmetik anti-penuaan dan pemutihan kulit telah dinilai dengan menyiasat aktiviti antioksidan in-vitro PPEE, PPEE-SLNs, dan juzuk terpencil, bersama-sama dengan penilaian kesan perencatannya terhadap enzim berkaitan kulit. Sebagai tambahan kepada penggabungan PPEE-SLNs ke dalam krim anti-penuaan kosmetik topikal dan untuk menguji keselamatan produk serta penilaian kemungkinan aktiviti anti-kedut in-vivo formulasi krim PPEE-SLNs terhadap penuaan foto yang disebabkan oleh UV dalam model tetikus. Ini boleh menyediakan data untuk mengkaji lebih lanjut potensi penggunaan daun PPEE-SLN dalam formulasi topikal dengan penyerapan kulit yang dipertingkatkan.

2. Bahan dan Kaedah

2.1. Umum

2.2. Bahan Tumbuhan

2.3. Penyediaan Ekstrak Tumbuhan 

2.4. Penentuan Jumlah Kandungan Polifenol (TPC) 

Reagen Folin-Ciocalteu seperti yang diterangkan oleh Li et al., [37] digunakan untuk menganggarkan jumlah kandungan fenolik dalam PPEE, yang dibentangkan sebagai asid gallik setara mg/g ekstrak kering.

2.5. Penentuan Jumlah Kandungan Flavonoid (TFC)

Kaedah kolorimetrik aluminium klorida yang diterangkan oleh Bahromun et al., [38] digunakan untuk menganggarkan jumlah kandungan flavonoid. Hasilnya dibentangkan sebagai ekstrak kering quercetin/g setara mg.

2.6. Pecahan PPEE dan Pengasingan Kompaun 1

2.7. Pengenalpastian kaempferol 3-O- -4C1-(6"-O-3,4-dihydroxyphenylacetyl glucopyranoside) (1)

2.8. Kajian In-Vitro

Barisan sel keratinosit manusia diperoleh daripada VACSERA CO. (Syarikat Mesir untuk Pengeluaran Vaksin, Sera, dan Ubat, Giza, Mesir). Ujian MTT telah dilakukan untuk PPEE dan PPEE-SLN mengikut kaedah Mostafa et al. [36].

Ujian DPPH dilakukan menggunakan kaedah Yardpiroon et al. [39], dan Vitamin C digunakan sebagai kawalan positif. Ujian ABTS mengikut kaedah Re et al., [40], Vitamin C digunakan sebagai standard. Ujian pelunturan -karotena menggunakan kaedah yang diterangkan oleh Soulef et al., [14] dengan kehadiran BHT kawalan positif. Nilai bagi setiap sampel ujian dibentangkan sebagai lengkung perencatan pada 50 peratus atau IC50.

Aktiviti anti-penuaan dan pemutihan kulit dinilai mengikut kaedah yang dilaporkan oleh Mostafa et al. [41]. Untuk ujian anti-elastase, 1 µg/mL elastase leukosit manusia diinkubasi dengan penimbal HEPES pH 7.5 dan setiap ekstrak yang diuji atau 1.4 mg/mL N-Methoxysuccinyl-Ala-Ala-Pro-chloromethyl ketone (inhibitor standard) dalam 96-plat perigi selama 20 minit pada suhu bilik sebelum penambahan 100 µL 1 mM N-Methoxysuccinyl-Ala-Ala-Pro-Val-p-nitroanilide sebagai substrat. Selepas 40 minit pengeraman, penyerapan diukur pada 405 nm dengan telaga tanpa ekstrak / perencat berfungsi sebagai kosong. Sampel yang diuji telah digunakan dalam julat kepekatan 25–300 µg/mL.

2.9. Rumusan dan Pencirian PPEE-SLN

Rumusan dilakukan mengikut kaedah Choubey et al. [11]. Mula-mula, gliseril monostearat telah dilarutkan dalam campuran kloroform–metanol (1:1) dan kemudian ekstrak etanol diserakkan dalam larutan tersebut. Kemudian pelarut organik dikeluarkan menggunakan rotovap dan larutan dipanaskan. Tween 80 kemudiannya ditambah dan campuran dikacau pada 3000 rpm selama 30 minit dan kemudian dihomogenkan selama 4 jam sebelum ditapis dan dikeringkan. Pencirian PPEE-SLN telah diperiksa dengan menganggar bentuk dan morfologi permukaan, saiz zarah, indeks polidispersiti (PDI), analisis potensi zeta, peratus kecekapan perangkap (PEE), dan kajian spektroskopi inframerah transformasi Fourier (FT-IR).

2.10. Penyediaan Formula Krim Topikal PPEE

Dua formulasi krim (2 peratus & 5 peratus PPEE-SLN) telah disediakan seperti ditunjukkan dalam Jadual 1 mengikut kaedah Mahawar et al. [42].

Sifat organoleptik, pH krim, kajian kebolehtebaran, ujian kelikatan, ujian homogeniti, ujian tampalan (ujian Burchard), pemeriksaan resapan kulit in-vitro, dan kajian kestabilan (garis panduan ICH) dinilai mengikut Matangi et al. [43]. Ujian had mikrob telah dijalankan mengikut Sekar et al. [44].

2.11. Kajian Anti-Kedutan In-Vivo Krim PPEE-SLNs

Lima puluh tikus jantan tidak berbulu (HR{{0}}) (4-berumur seminggu), 17–24 g diperoleh daripada VACSERA. Eksperimen telah dijalankan selepas kelulusan jawatankuasa etika di Universiti Oktober untuk Sains dan Seni Moden (MSA), nombor Protokol (PG1/EC1/2020PD) saiz sampel ditentukan mengikut perisian (G. Power). Seminggu sebelum kajian anti-kedut in-vivo, tikus bebas mengakses makanan, dan air dan menyesuaikan diri dengan bilik berhawa dingin (23 ± 2 ◦C). Tikus (50) dibahagikan kepada lima kumpulan, secara rawak (n=10) seperti ditunjukkan dalam Jadual 2. Rawatan telah dilakukan selama 40 hari, tiga kali seminggu, dengan 0.5 g krim PPEE-SLNs atau sebarang rawatan lain dan digunakan kepada kulit tikus dorsal dan seterusnya terdedah kepada UV (365 nm).

Sebelum dan selepas rawatan topikal, dua kali/minggu, gambar kulit tikus dorsal diambil. Penggredan kedutan kulit dinilai menggunakan skala kedutan visual Bissett [45]. Asas untuk skala penggredan ialah tekstur kedutan (halus atau kasar) dan keratosis, dibahagikan kepada lima gred: lebih teruk (−2), lebih teruk sedikit (−1), tiada perubahan (0), sedikit bertambah baik ( tambah 1), dan ditambah baik ( tambah 2).

Penilaian histologi dilakukan mengikut kaedah Elder et al. [46].

2.11.4. Aktiviti Superoxide Dismutase (SOD).

Aktiviti SOD dianggarkan mengikut kaedah Ukeda et al. [47].

2.12. Analisis statistik

3. Keputusan

3.1. Jumlah Kandungan Fenolik dan Flavonoid

TPC ditentukan secara spektrofotometri dalam PPEE sebagai 387.5 ± 4.28 mg ekstrak GAE/g. Juga, TFC dianggarkan sebagai 241.7 ± 3.25 mg ekstrak QE/g. PPEE menunjukkan kepekatan tinggi sebatian fenolik dan flflavonoid. Kedua-dua keputusan adalah mengikut nilai yang dilaporkan sebelum ini untuk ekstrak daun PP yang mengesahkan bahawa flavonoid adalah juzuk kimia utama dalam daun PP [20].

3.2. Pengasingan dan Penjelasan Struktur kaempferol

3-O- - 4C1-(600 -O-3,4-dihydroxyphenylacetyl glucopyranoside), Sebatian 1

Selepas menyusun semua struktur yang diketahui dalam ekstrak itu, pencarian sebatian unik yang berpotensi aktif secara biologi menjadi lebih cekap. Menurut 2-data analisis DPC yang diterima, fenolik PPEE didapati difraksinasi terbaik pada lajur gel MCI yang dicairkan oleh campuran MeOH/H2O bagi kekutuban menurun, satu proses yang menghasilkan empat pecahan lajur utama. Bahan amorf telah diasingkan daripada kepekatan panas pecahan III (diserap daripada lajur sebanyak 70 peratus MeOH akueus) apabila berdiri semalaman pada suhu bilik. Penghabluran bahan ini dua kali daripada mendidih EtOH menghasilkan serbuk amorf berwarna kuning kecoklatan kromatografi tulen 1. Ia menunjukkan sifat kromatografi (bintik ungu gelap pada PC di bawah cahaya UV, bertukar menjadi kuning lemon apabila diasap dengan wap ammonia dengan penghijrahan sederhana dalam pelarut akueus dan organik ) dan tindak balas warna (warna kuning limau dengan reagen Naturstoff), yang mencadangkan terbitan kaempferol yang mengandungi kumpulan hidroksil 40 bebas dan kedudukan 3-O yang digantikan O. Spektrum UV 1 dalam MeOH (268 nm, 316 nm, 360 nm) dan selepas penambahan reagen anjakan diagnostik [48] adalah tipikal bagi 3-kaempferol terglikosilasi O (anjakan positif dengan NaOAc, anjakan stabil dengan NaOMe). Hidrolisis asid normal 1 (2 N HCl akueus, 3 jam, 100 ◦C) menghasilkan glukosa (kromatografi kertas perbandingan, Co-PC), kaempferol dan 3,4-asid fenilasettik dihidroksi (UV) penyerapan dan spektrum 1H-NMR, untuk sampel individu, diasingkan oleh kromatogram kertas persediaan bagi ekstrak etil asetat hidrolisat). Akibatnya, 1 ialah kaempferol 3-O-(3,4-dihydroxy phenyl acetyl glucoside). Kompaun diperoleh semula tidak berubah selepas diinkubasi dengan enzim -glukosidase selama 24 jam, sekali gus membuktikan bahawa bahagian glukosil diasilasi. Formula molekul 1 disimpulkan sebagai C29H26O14 daripada spektrum jisim HRESI negatifnya yang menunjukkan ion [MH]− pada m/z=597.5302 (kira untuk C29H25O14, 597.5015). Eksperimen ESI-MS (mod ion negatif) memberikan puncak ion kuasi molekul [MH]− pada m/z: 597 menunjukkan berat molekul 598 untuk 1. Puncak ion serpihan selanjutnya dalam spektrum ESI-MS-MS ialah diperhatikan pada m/z: [MH]−: 447, 167, dan 285 sepadan dengan kehilangan dihidroksi fenil asetat daripada sebatian induk 1 manakala ion serpihan pada m/z 285 dan m/z 167 dikaitkan dengan kaempferol dan bahagian asid dihydroxyphenylacetic, masing-masing. Untuk menentukan tapak perlekatan semua gugusan dalam molekul 1 dan untuk membenarkan penugasan penuh semua resonans karbon dan proton, analisis spektroskopi NMR bagi 1, termasuk 1D- 1H dan 13C, dan 2D- HSQC dan HMBC , kemudiannya dijalankan. Daripada lima isyarat di kawasan gula antara δ ppm 62.25 dan 76.9 dan daripada isyarat karbon anomerik yang terletak pada 99.13 ppm, telah terbukti bahawa bahagian gula mesti dilekatkan pada kedudukan 3 kaempferol kerana isyarat karbon C-3 ini. telah dianjak ke atas dan isyarat orto dan para-karbon yang sepadan telah dianjak ke bawah (lihat eksperimen). Peralihan yang sama terkenal dari karya Nawwar et al. [48]. Ini disahkan lagi oleh korelasi jarak jauh 3 J yang diiktiraf dalam spektrum HMBC, di mana, satu isyarat silang didapati mengaitkan isyarat proton H{82}} glukosa anomerik pada δ 5.42 kepada karbon flavonol C-3 isyarat pada δ 133.5. Konfigurasi bahagian glukosa diperolehi daripada anjakan kimia C-l00 pada 99.13 ppm. Nilai anjakan kimia karbon gula mengesahkan bentuk piranosa bagi bahagian ini [48]. Spektrum 1H-NMR 1 juga oleh struktur yang dicadangkan. Peralihan kimia isyarat proton anomerik pada δ 5.42 ppm (d, J=8 Hz) menunjukkan bahawa karbon anomerik dilekatkan pada bahagian kaempferol pada C-3 (δppm 133.5) dan pemalar gandingan yang ditentukan 8 Hz, buktikan -konfigurasi bahagian glukosa. Konformasi bagi bahagian gula ialah 4C1 seperti diikuti oleh -konfigurasi yang dibincangkan di atas.

Selain itu, perlekatan bahagian 3,4-dihydroxy phenylacetic acid pada bahagian C-600 metilena glukpiranosa diikuti daripada peralihan medan bawah isyarat karbon ini kepada δ ppm 62.25 dalam spektrum 13C-NMR. Ini disahkan lagi oleh puncak silang dalam spektrum HMBC, mengaitkan isyarat proton glukosa metilenik pada δ 4.04 (H-600 a) dan δ 4.2 ppm (H-600 b) kepada karbon karbonil bagi 3,4-bahagian asid dihroxyphenylacetic pada δ 176.26 ppm. Data ini dan data yang diberikan di atas akhirnya mengesahkan struktur sebatian 1 sebagai kaempferol 3-O- - 4C1-(600 -O-3 baharu,{ {24}}dihydroxyphenylacetyl glucopyranoside) (KDPAG), dilaporkan buat kali pertama dalam alam semula jadi, kerana ia mewakili asilasi pertama dengan 3,4-asid hidroksifenil asetik yang dikaitkan dengan kimia flflavonoid (Rajah 1).

Untuk maklumat lanjut: david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501