Abstrak

Latar Belakang/Matlamat:Hyaluronan (HA) oligosakarida terlibat dalam beberapa proses biologi, terutamanya pembentukan semula kolagen dan penyembuhan luka. Pembentukan semula kolagen melambatkan penuaan kulit dan menyebabkan kedutan. Kajian ini bertujuan untuk menilai kesan 2-kDa HA oligosakarida (HA2k) ke atas kedutan melalui resapan melalui stratum korneum dan menggalakkan pembentukan semula kolagen.

Glikosida cistanche juga boleh meningkatkan aktiviti SOD dalam tisu jantung dan hati, dan dengan ketara mengurangkan kandungan lipofuscin dan MDA dalam setiap tisu, dengan berkesan menghilangkan pelbagai radikal oksigen reaktif (OH-, H₂O₂, dll.) dan melindungi daripada kerosakan DNA yang disebabkan oleh OH-radikal. Glikosida phenylethanoid cistanche mempunyai keupayaan penghapusan radikal bebas yang kuat, keupayaan pengurangan yang lebih tinggi daripada vitamin C, meningkatkan aktiviti SOD dalam penggantungan sperma, mengurangkan kandungan MDA, dan mempunyai kesan perlindungan tertentu pada fungsi membran sperma. Polisakarida cistanche boleh meningkatkan aktiviti SOD dan GSH-Px dalam eritrosit dan tisu paru-paru tikus senescent eksperimen yang disebabkan oleh D-galaktosa, serta mengurangkan kandungan MDA dan kolagen dalam paru-paru dan plasma, dan meningkatkan kandungan elastin, mempunyai kesan penghapusan yang baik pada DPPH, memanjangkan masa hipoksia pada tikus senescent, meningkatkan aktiviti SOD dalam serum, dan melambatkan degenerasi fisiologi paru-paru dalam tikus senescent secara eksperimen Dengan degenerasi morfologi selular, eksperimen telah menunjukkan bahawa Cistanche mempunyai keupayaan antioksidan yang baik. dan berpotensi menjadi ubat untuk mencegah dan merawat penyakit penuaan kulit. Pada masa yang sama, echinacoside dalam Cistanche mempunyai keupayaan yang ketara untuk menghilangkan radikal bebas DPPH dan mempunyai keupayaan untuk mengais spesies oksigen reaktif dan menghalang degradasi kolagen yang disebabkan oleh radikal bebas, dan juga mempunyai kesan pembaikan yang baik pada kerosakan anion radikal bebas timin.

Klik untuk Lihat Produk Antioksidan

【Untuk maklumat lanjut: david.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

Kaedah:Model kulit 3D dan kulit manusia yang dipotong digunakan untuk menilai resapan HA2k berlabel fluorescein. Kesan HA2k pada metabolisme kolagen telah dinilai dengan mengukur tahap protein jenis 1 pro-kolagen (COL1A1) dan matriks metalloproteinase-1 (MMP-1) dalam model kulit 3D. 0.1 peratus larutan HA2k dan kawalan kenderaan digunakan pada lengan bawah manusia selama 8 minggu untuk menilai ketumpatan kolagen kulit. Untuk menilai kesan HA2k pada kedalaman kedutan muka, percubaan terkawal rawak telah dijalankan dengan 0.1 peratus losyen HA2k dan losyen kenderaan selama 8 minggu.

Keputusan:HA2k telah disahkan meresap melalui stratum corneum oleh mikroskop pendarfluor. Kedua-dua COL1A1 dan MMP-1 telah dikawal selia oleh aplikasi HA2k dalam budaya model kulit 3D. Ketumpatan kolagen adalah lebih tinggi untuk lengan bawah yang dirawat HA2k berbanding lengan bawah yang dirawat kawalan kenderaan selepas 4 minggu. Kedalaman kedutan maksimum dalam lipatan nasolabial dan kawasan kaki gagak adalah lebih cetek dengan ketara dalam kumpulan losyen HA2k berbanding kumpulan kawalan.

Kesimpulan:HA2k meresap stratum korneum, mengaktifkan sintesis dan degradasi kolagen secara serentak, dan memulihkan kedutan.

KATA KUNCI

anti-penuaan, kultur sel, pembentukan semula kolagen, kajian manusia, hyaluronan

1|PENGENALAN

Matriks ekstraselular (ECM) ialah komposit makromolekul, termasuk protein dan glikosaminoglikan, yang memberikan sokongan mekanikal kepada sel di sekelilingnya. Dalam tisu kulit, ECM menyumbang kepada sifat fizikal kulit. Sebagai contoh, kolagen, komponen utama ECM kulit, menyumbang kepada integriti, keanjalan dan kehalusan kulit.1 Secara fisiologi, kolagen kulit dikekalkan melalui degradasi kolagen lama dan sintesis semula kolagen baru dalam proses yang dipanggil kolagen. pembentukan semula.2 Walau bagaimanapun, kitaran pembentukan semula kolagen boleh melambatkan proses penuaan kulit, mengakibatkan kedutan, kendur dan keanjalan berkurangan.3 Masalah ini mempunyai kaitan yang ketara dengan persepsi umur seseorang yang lebih tinggi daripada umur sebenar. Oleh itu, pembentukan semula kolagen adalah sasaran yang menjanjikan untuk anti-penuaan. Pendekatan yang menyasarkan ECM berpotensi lebih baik untuk mengurus masalah ini kerana pendekatan cetek tidak menjejaskan ECM. Jarum mikro ialah cara yang menyasarkan ECM untuk menggalakkan pembentukan semula kolagen kulit; bagaimanapun, ia adalah kaedah yang agak invasif.

Hyaluronan (HA), polisakarida yang diperoleh secara biologi, juga merupakan komponen ECM. HA pertama kali ditemui dalam badan vitreous mata dan kemudian dalam cecair sinovial, tali pusat, dan kulit. Berat molekul HA berbeza mengikut jenis tisu dan keadaan biologinya, antara 1 kDa hingga 3000 kDa.4 HA dalam kulit umumnya wujud dalam keadaan berat molekul tinggi, dan disebabkan kelikatan dan air-nya yang tinggi. keupayaan memegang, HA berfungsi sebagai kusyen, pelincir, dan pelembap. Oleh itu, HA dengan berat molekul tinggi digunakan dalam bidang kosmetik untuk mengekalkan kandungan air stratum korneum. Memandangkan makromolekul mempunyai kebolehtelapan yang sangat terhad melalui kulit, terdapat beberapa percubaan untuk meningkatkan kebolehtelapan HA dengan merendahkan HA kepada serpihan kecil, yang telah disahkan meresap melalui stratum korneum.5

Selain fungsi fizikal, fungsi biologi HA telah menjadi topik penyelidikan terkini. Beberapa laporan penting telah diterbitkan mengenai fungsi biologi HA sebagai komponen niche sel stem6 dan jangka hayat luar biasa tikus tahi lalat telanjang. Berat molekul HA perlu dipertimbangkan apabila fungsi biologinya dibincangkan. HA dalam kulit umumnya wujud dalam keadaan berat molekul tinggi dan dilaporkan mengekalkan kestabilan tisu. Sebaliknya, HA dengan berat molekul rendah mengaktifkan beberapa proses biologi.7 Dalam laporan terdahulu, HA tetrasakarida mengawal sintesis HA dan kolagen jenis I dalam keratinosit dan fibroblas yang dikultur bersama, 8 penanda pembezaan teraruh dalam keratinosit,9 dan memperbaiki kerosakan dalam tetikus yang disinari ultraviolet-A.5 Khususnya, oligosakarida di bawah 10 kDa terutamanya menggalakkan proses penyembuhan luka, seperti sintesis ECM,9 angiogenesis, penghijrahan selular dan percambahan. Penyembuhan luka dan pembentukan semula kolagen berkait rapat, dan 12-mer (iaitu, kira-kira 2 kDa) HA mengimbangi kolagen jenis I dan matriks metalloproteinase 1 (MMP-1) secara serentak dalam fibroblas kultur, tetapi kesannya pada manusia masih perlu dijelaskan.

Terdapat beberapa laporan mengenai kosmetik HA yang menunjukkan kesan anti-kedut. Krim kulit 50-kDa HA memperbaiki kedalaman kedutan subjek wanita berumur 30–60 tahun dalam percubaan perbandingan separuh sisi rawak.10 Kajian berlabel terbuka menunjukkan bahawa krim mi micronized-HA digunakan secara topikal pada 35 –65-subjek berumur tahun, yang menghasilkan peningkatan markah soal selidik pada kedalaman kedutan.11 Dalam kajian ini, kebolehtelapan tinggi HA berat molekul rendah dicadangkan sebagai mekanisme tindakan, walaupun terdapat tiada data mengenai kulit manusia. Di samping itu, kesan serpihan HA pada ketumpatan kolagen pada manusia masih perlu dijelaskan.

Kami membuat hipotesis bahawa HA oligosakarida meresap melalui stratum korneum, menggalakkan pembentukan semula kolagen, dan memperbaiki kedutan sebagai kesan anti-penuaan. Kajian ini bertujuan untuk menilai kesan 2-kDa HA (HA2k) ke atas pembentukan semula kolagen dan keadaan kulit melalui kajian in vitro dan in vivo. Pertama, resapan HA2k dinilai dalam model kulit yang disusun semula dan kulit yang dipotong manusia. Selepas itu, kesan ke atas pembentukan semula kolagen dinilai secara in vitro dan subjek manusia. Akhirnya, perbandingan separuh sisi rawak bagi losyen kulit yang mengandungi HA2k dan losyen kawalan telah dilakukan di kalangan 21 subjek untuk menilai kesan pada kedutan kulit.

2|BAHAN DAN KAEDAH

Kajian ini telah dijalankan oleh Deklarasi Helsinki dan diluluskan oleh Jawatankuasa Etika Perubatan Kewpie Corp. dan Lembaga Semakan Institusi DERMAPRO Ltd., dengan nombor kelulusan 17–4 dan 1-220 777-AN-02-DICN18228, masing-masing . Kajian ini dijalankan dengan persetujuan sukarela subjek.

2.1|Reagen

HAbooster™, reagen HA2k gred kosmetik, diperoleh daripada Kewpie Corp. (Jepun).

2.2|Penyerapan kulit HA2k dalam epidermis manusia kultur tiga dimensi dan kulit manusia yang dipotong

Penyerapan HA2k telah dinilai dengan menggunakan sel resapan jenis Franz, menurut laporan sebelumnya.12 Sampel HA berlabel Fluorescein (Fl-) telah disediakan di<1.25 mg/ml HA in water and dimethyl sulfoxide mixed at a ratio of 2:1 (v:v). Next, 50 mg/ml each of 5-amino fluorescein, cyclohexyl isocyanide, and acetaldehyde was added to bind fluorescein to HA. After 5 h of reaction at room temperature in the dark, the sample was purified by gel filtration chromatography using a PD Midi Trap G-10 (GE Healthcare,) with an exclusion lower limit of 700 M r. The obtained FL-HA solution was lyophilized and used in the following experiments. For evaluation with reconstituted skin by cell culture, a 3D skin model EPI-606X (Mat Tek,), which was confirmed to retain barrier function, was fixed in a Franz-type diffusion cell. The three-dimensional (3D) skin model was precultured for 16–18 h at 37°C, 5% CO2 in the medium provided by the supplier. After the equilibration process, the medium was changed for testing. A 1% solution of Fl-HA samples of 2 or 8 kDa was applied to the upper compartment and then incubated for 5 h. After washing four times with phosphate-buffered saline, the specimen was embedded in OCT compound (Sakura Finetek,) and frozen by using dry ice/acetone for the preparation of the tissue section. For evaluation on human skin, dermatomed abdominal skin from a 34-year-old Caucasian woman (Biopredic International, France) was fixed in a Franz-type diffusion cell. A 0.1% Fl-HA solution (molecular weight, 2 or 1000 kDa) was applied to the human skin. After incubation at 32°C for 24 h, the tissue was subjected to cryosection preparation as described above. The tissue slides were observed under a fluorescent microscope.

2.3|Penilaian metabolisme kolagen dalam model kulit 3D dan kulit manusia yang dipotong

Model kulit 3D telah digunakan untuk menilai kesan HA2k pada metabolisme kolagen.13 Secara ringkasnya, model ketebalan penuh (EFT-412, Mat Tek) yang terdiri daripada keratinosit dan fibroblas telah dikultur dalam 8 ug/ml HA2k- mengandungi medium. Selepas 48 jam, medium terkondisi telah dikumpulkan dan ujian imunosorben berkaitan enzim (ELISA) tahap pro-kolagen jenis 1 (COL1A1) dan MMP-1 diukur. Tisu telah diproses untuk analisis imunohistologi. Kolagen dalam tisu dinilai dengan menggunakan pewarnaan imunohistokimia COL1A1 pada slaid tisu bahagian tertanam parafin tetap formalin. Bahagian tersebut dirawat dengan proteinase K selama 10 minit pada 37 darjah untuk mendapatkan antigen. Selepas menyekat, antibodi monoklonal anti-COL1A1 (Abcam,) diinkubasi pada 4 darjah semalaman. Slaid kemudiannya diinkubasi dengan Alexa Fluor® 488 Goat Anti-Arnab IgG (Abcam) pada suhu bilik selama 2 jam. Nukleus telah diwarnakan balas dengan propidium iodide. Bahagian-bahagian itu diperhatikan di bawah mikroskop pendarfluor.

2.4|Penilaian ketumpatan kolagen kulit, kelembapan, dan tomografi dalam subjek manusia

HA2k digunakan secara topikal pada kulit manusia untuk menilai fungsinya sebagai bahan aktif. Lapan subjek (dua wanita dan enam lelaki; umur, 26-39 tahun) secara sukarela mendaftar dalam kajian ini. Lengan bawah mereka dibahagikan kepada dua kawasan berukuran 2 cm × 2 cm untuk sampel digunakan dua kali sehari. 0.1 peratus penyelesaian HA2k dan kawalan kenderaan telah digunakan secara berasingan pada dua kawasan. Pada 0, 4 dan 8 minggu, skor kolagen, kelembapan kulit dan kekasaran kulit telah dinilai. Subjek telah disesuaikan di bawah suasana terkawal pada 23 darjah ± 1 darjah dan kelembapan relatif 55 peratus ± 2 peratus selama 20 minit. Tempoh penyesuaian ini diikuti dengan pengukuran.

2.5|Penilaian skor kolagen

Ultrasound digunakan untuk mengukur ketumpatan kolagen kulit (DermaLab, Teknologi Korteks, Denmark).14 Probe digunakan pada losyen HA2k dan tapak kawalan kenderaan untuk mengukur skor kolagen. Sebanyak lima mata, yang terdiri daripada empat penjuru dan pusat setiap tapak, diukur, dan nilai purata dikira.

2.6|Penilaian kelembapan kulit

Kelembapan kulit diukur dengan menggunakan kaedah impedans (SKICON, Yayoi,).15 Probe digunakan pada tapak penilaian untuk mengukur kelembapan kulit. Sebanyak lima mata di empat penjuru dan pusat diukur. Nilai purata telah dikira.

2.7|Penilaian kekasaran kulit

Kekasaran kulit diukur dengan analisis visual (VisioScan, Courage plus Khazaka Electronic, Jerman).16 Imej telah diperoleh di empat penjuru dan dianalisis oleh perisian. Nilai purata telah dikira.

2.8|Penilaian kedutan, kendur, dan keanjalan kulit dalam subjek manusia

Memandangkan kolagen kulit dilaporkan dikaitkan dengan kedutan, kendur, dan keanjalan kulit, penggunaan HA2K dalam produk kosmetik telah dinilai. Dua puluh satu subjek telah didaftarkan mengikut kriteria berikut: wanita sihat dengan kedutan ringan hingga sederhana melalui penilaian visual dan foto antara gred kedutan 1–3 mengikut garis panduan penggredan kedut Persatuan Sains Kosmetik Jepun, mempunyai lipatan nasolabial, tidak mengandung. atau menyusu, dan tidak mempunyai kulit sensitiviti atau hipersensitiviti. Dalam tempoh ujian ini, subjek tidak menggunakan sebarang produk kosmetik, alat kecantikan atau prosedur penjagaan kulit selain artikel ujian. Sampel produk yang disediakan sebagai losyen disapu dua kali sehari (pagi dan petang). Formulasi losyen ditunjukkan dalam Jadual 1. Selepas mencuci muka, losyen disapu, diikuti dengan losyen susu dan krim yang ditetapkan, jika perlu. Losyen HA2k digunakan pada satu bahagian, dan produk kawalan digunakan pada bahagian lain. Subjek telah diperiksa oleh sistem penganalisis imej 3D untuk menilai kaki gagak, lipatan nasolabial, kulit kendur dan keanjalan pada garis dasar (0 minggu), 4 minggu dan 8 minggu selepas rawatan. Semua pengukuran dilakukan di bawah suhu relatif tertentu (20 darjah –24 darjah) dan kelembapan (45 peratus –55 peratus).

2.9|Pengukuran parameter kedutan

Parameter kedutan kaki gagak dan lipatan nasolabial dinilai dengan analisis visual (PRIMOS® Premium dan Lite, GFMesstechnik,).17 Imej dianalisis di kawasan yang sama pada garis dasar, 4, dan 8 minggu selepas rawatan dengan menggunakan perisian (Primos 5.8 E ver.).

2.10|Pengukuran keanjalan kulit

Keanjalan kulit diukur dengan kaedah sedutan (Cutometer® MPA580, Courage plus Khazaka electronic,) menurut laporan sebelumnya.18 Secara ringkasnya, kulit ditarik ke dalam apertur probe pada 450 bar selama 2 saat. Selepas itu, tekanan negatif dimatikan selama 2 s dan kulit dibenarkan kembali ke bentuk asalnya. Tiga ulangan dalam satu kitaran pengukuran telah dilakukan. Keanjalan kulit pada pipi dianalisis oleh parameter R2 pada garis dasar, 4, dan 8 minggu selepas rawatan.

2.11|Ukuran kulit kendur

Kulit kendur pada pipi dinilai dengan menggunakan kaedah topografi Moire (F-ray®, Beyoung,),19 yang merupakan kaedah morfometrik tiga dimensi di mana peta kontur dihasilkan daripada pinggiran gangguan bertindih yang dicipta apabila objek diterangi oleh cahaya koheren. Corak Moire pada pipi telah diambil, dan sudut yang dihasilkan dengan melukis dua garisan di hujung hidung dianalisis dengan menggunakan perisian (Image-Pro Plus®, MediaCybernetics,) pada garis dasar, 4, dan 8 minggu selepas rawatan.

2.12|Analisis statistik

Analisis statistik dilakukan dengan menggunakan program perisian SPSS® (IBM,). Ujian Mann-Whitney U dilakukan untuk menilai kesan HA2k pada pembentukan semula kolagen secara in vitro. Kesan HA2k pada kolagen dalam subjek manusia dianalisis dengan menggunakan ujian-t berpasangan. Dalam kajian manusia yang menilai kesan HA2k pada kedutan, kendur dan keanjalan kulit, ujian Shapiro-Wilks atau kurtosis dan kecondongan digunakan untuk ujian kenormalan. Analisis statistik pembolehubah parametrik dilakukan dengan menggunakan ukuran berulang ANOVA. Jika nilainya bukan parametrik, semuanya pada mulanya dibandingkan dengan menggunakan ujian peringkat bertanda Wilcoxon dengan pembetulan Bonferroni. Analisis statistik untuk perbandingan antara tapak dilakukan dengan langkah berulang ANOVA atau ANCOVA menggunakan nilai variasi dari garis dasar hingga 4 dan 8 minggu selepas rawatan. Nilai-p daripada<0.05 was considered to be indicative of statistical significance. Change from baseline (%)   was defined as follows: (Baseline − After treatment)/Baseline × 100.

3|KEPUTUSAN

3.1|Penyerapan kulit HA2k

Dalam model kulit 3D, HA2k berlabel fluorescein melalui stratum corneum (Rajah 1), manakala 8-kDa HA tidak. Dalam kulit manusia, HA2k berlabel fluorescein menembusi dermis. 1000- kDa HA tidak melalui stratum korneum. Keputusan ini menunjukkan bahawa berbanding dengan berat molekul yang lebih besar HA, HA2k mempunyai kebolehtelapan kulit yang tinggi.

3.2|Kesan HA2k pada metabolisme kolagen

Dalam model kulit 3D, kandungan protein kedua-dua COL1A1 dan MMP-1 dalam medium terkondisi telah dikawal oleh penambahan HA2k (Rajah 2). Oleh itu, HA2k diandaikan mempromosikan pengeluaran COL1A1 dan MMP secara serentak-1.

3.3|Kesan HA2k pada kandungan kolagen dan status kulit dalam subjek manusia

Dalam kajian manusia, skor kolagen kulit lebih tinggi selepas 4 minggu di tapak di mana 0.1 peratus larutan HA2k telah digunakan berbanding di tapak di mana penyelesaian kawalan telah digunakan (Rajah 3). Selain itu, status kandungan air kulit dan kekasaran kulit adalah lebih baik selepas 8 minggu di tapak yang dirawat dengan larutan HA2k berbanding di tapak yang dirawat dengan larutan kawalan. Oleh itu, HA2k dicadangkan menggalakkan penghasilan kolagen dalam kulit manusia dan memperbaiki keadaannya.

3.4|Kesan HA2k pada kedutan, kendur, dan keanjalan kulit dalam subjek manusia

Dalam ujian manusia, kedalaman maksimum kaki gagak dan kedutan nasolabial adalah lebih rendah pada 4 minggu dan 8 minggu di sebelah yang dirawat dengan 0.1 peratus losyen HA2k berbanding di sebelah yang dirawat dengan losyen kawalan (Rajah 4) . Kulit kendur telah diperbaiki pada sisi yang dirawat dengan losyen HA2k selepas 4 minggu daripada pada peringkat awal. Keanjalan kulit bertambah baik selepas 4 dan 8 minggu pada bahagian samping dirawat dengan losyen HA2k, manakala ia bertambah baik hanya selepas 8 minggu di sebelah dirawat dengan losyen kawalan. Keputusan ini menunjukkan bahawa losyen HA2k meningkatkan kedutan, kendur, dan keanjalan kulit.

4|PERBINCANGAN

Telah dilaporkan bahawa lipatan nasolabial adalah salah satu faktor terkuat yang mempengaruhi jurang antara umur sebenar seseorang dan umur yang ditanggapi. Suntikan pengisi adalah cara biasa untuk memperbaiki lipatan nasolabial; namun, kesan dan keselamatan bergantung kepada teknik pakar perubatan. Beberapa kesan sampingan suntikan yang teruk yang disebabkan oleh oklusi vaskular yang membawa kepada nekrosis kulit dan buta telah dilaporkan.20 HA2k ialah pilihan yang lebih selamat dan kurang invasif untuk memperbaiki lipatan nasolabial. Tambahan pula, HA2k telah diuji sebagai losyen terrumus dalam kajian ini dan sepatutnya menjadi bahan kosmetik aktif (ACI) yang lebih praktikal.

Lipatan nasolabial disebabkan oleh penuaan pada dermis, dan sukar untuk diperbaiki dengan menghampiri hanya lapisan atas epidermis. Untuk menghantar ACI ke lapisan yang lebih dalam, seperti epidermis dan dermis, adalah perlu untuk meresap melalui stratum korneum. Sebelum ini,<300-kDa HAs have been shown to permeate through the stratum corneum of excised human skin.21 It is, therefore, reasonable that HA2k permeates through the stratum corneum. Interestingly,   a 1200-kDa HA has been reported to permeate through the stratum corneum of excised skin when polyion complex particles were constructed with a specific polycation.22 It is suggested that higher transdermal absorption of HA2k would be achieved by optimizing the formulation.

Beberapa laporan telah menyatakan bahawa ACI mengimbangi sintesis kolagen. Kami sebelum ini melaporkan tentang ACI tersebut, termasuk HA tetrasaccharides, 8 peptida kacang soya, dan peptida kolagen. HA2k adalah unik kerana ia mengimbangi sintesis dan degradasi kolagen secara serentak. Terdapat keperluan untuk menjelaskan mekanisme penyelarasan COL1A1 dan MMP-1 dalam kajian akan datang.

HA berat molekul rendah telah dilaporkan menyebabkan keradangan pada kulit23; bagaimanapun, mekanisme tindakan masih kontroversi. Satu lagi kajian menggunakan epidermis tersusun semula melaporkan bahawa HA berat molekul rendah adalah radang.24 Dalam kajian manusia kami, tiada kesan sampingan, termasuk gejala keradangan, diperhatikan. Berat molekul rendah mungkin menyebabkan isyarat keradangan hanya secara in vitro, tanpa dermis. Dalam keadaan yang lebih kompleks, seperti kulit manusia, crosstalk berlaku di antara pelbagai sel tisu, dan isyarat keradangan dibatalkan. Perlu diperhatikan bahawa kajian terbaru menunjukkan bahawa pemecahan HA endogen menyebabkan tindak balas keradangan, manakala HA berat molekul rendah eksogen (2800– 60 000} Da) tidak.25

Kepekatan HA2k yang digunakan dalam kajian manusia ini ialah 0.1 peratus , tetapi dos optimumnya masih perlu dijelaskan. HA2k boleh digunakan dengan lebih meluas jika dos yang lebih rendah berkesan. Di samping itu, digabungkan dengan HA dengan berat molekul yang lebih tinggi akan membolehkan pembangunan kosmetik yang lebih berkesan untuk anti-penuaan kerana HA yang lebih besar adalah pelembap yang lebih baik.4 HA2k masih merupakan bahan yang agak kos efektif untuk memperbaiki kedutan kerana ia tidak diberikan secara intravena oleh seorang doktor.

5|KESIMPULAN

Dalam kajian ini, kami menyiasat kesan HA2k pada memperbaiki kedutan kulit dengan penggunaan topikal pada kulit manusia. Lipatan nasolabial dan kaki gagak telah dipertingkatkan dengan ketara oleh 0.1 peratus losyen HA2k. Langkah pertama dalam mekanisme yang dicadangkan ialah resapan HA2k melalui stratum corneum, yang kami sahkan dengan melakukan eksperimen resapan dalam model kulit 3D dan kulit yang dipotong manusia. Langkah kedua mekanisme ialah pengaktifan pembentukan semula kolagen oleh HA2k, yang kami tunjukkan dengan melakukan ELISA pada COL1A1 dan MMP-1 dalam model kulit 3D dan melalui analisis ultrasound ketumpatan kolagen dalam kajian rintis pada manusia. mata pelajaran. Diambil bersama, HA2k adalah ramuan yang menjanjikan untuk kosmetik antipenuaan.

SUMBANGAN PENULIS

YA dan YT reka bentuk penyelidikan. YA, HK dan MK melakukan eksperimen. YA dan SS menganalisis data, dan SS menulis manuskrip yang diselia oleh TY Semua pengarang telah membaca dan meluluskan manuskrip akhir.

PENGAKUAN

Bantuan penulisan ilmiah telah disediakan oleh Crimson Interactive Pvt. Ltd.

KONFLIK KEPENTINGAN 

YT dan MK mengisytiharkan bahawa mereka tidak mempunyai kepentingan bersaing. YA, SS dan HK ialah pekerja Kewpie Corporation, pembekal HA.

PENYATA KESEDIAAN DATA

Data yang menyokong penemuan kajian ini boleh didapati daripada pengarang yang berkaitan atas permintaan yang munasabah.

KELULUSAN ETIKA

Kajian ini telah dijalankan oleh Deklarasi Helsinki dan diluluskan oleh Jawatankuasa Etika Perubatan Kewpie Corp. dan Lembaga Kajian Institusi DERMAPRO Ltd., dengan nombor kelulusan 17-4 dan 1-220777-AN-02-DICN18228 , masing-masing

RUJUKAN

1. Arseni L, Lombardi A, Orioli D. Daripada struktur kepada fenotip: kesan perubahan kolagen terhadap kesihatan manusia. Int J Mol Sci. 2018;19:1407.

2. Page-McCaw A, Ewald AJ, Werb Z. Matriks metalloproteinase dan peraturan pembentukan semula tisu. Nat Rev Mol Sel Biol. 2007;8:221-233.

3. Lee DH, Oh JH, Chung JH. Glycosaminoglycan dan proteoglycan dalam penuaan kulit. J Dermatol Sci. 2016;83:174-181.

4. Fraser JR, Laurent TC, Laurent UB. Hyaluronan: sifat, pengedaran, fungsi, dan perolehannya. J Intern Med. 1997;242:27-33.

5. Kage M, Tokudome Y, Hashimoto F. Penyerapan tetrasakarida hyaluronan melalui kulit tikus tanpa rambut: kajian in vitro dan in vivo. Arch Dermatol Res. 2013;305:69-77. doi:10.1007/ s00403-012-1252-2

6. Gesteira TF, Sun M, Coulson-Thomas YM, et al. Persekitaran mikro yang kaya dengan hyaluronan dalam niche sel stem limbal mengawal pembezaan sel stem limbal. Melabur Ophthalmol Vis Sci. 2017;58:4407-4421.

7. Kavasi RM, Berdiaki A, Spyridaki I, et al. Metabolisme HA dalam homeostasis kulit dan penyakit radang. Toksik Kimia Makanan. 2017;101:128-138.

8. Kage M, Tokudome Y, Matsunaga Y, Hariya T, Hashimoto F. Ekspresi hyaluronan synthase dan kolagen jenis I mRNA oleh tetrasakarida hyaluronan dalam fibroblas kulit manusia biasa. J Japanese Cosmet Sci Soc. 2013;37:1-5.

9. Kage M, Tokudome Y, Matsunaga Y, Hariya T, Hashimoto F. Kesan hyaluronan tetrasaccharides pada pembezaan epidermis dalam keratinosit epidermis manusia biasa. Int J Cosmet Sci. 2014;36:109- 115.

10. Pavicic T, Gauglitz GG, Lersch P, et al. Keberkesanan formulasi novel berasaskan krim asid hyaluronik dengan berat molekul berbeza dalam rawatan anti-kedut. J Dadah Dermatol. 2011;10:990-1000.

11. Lubart R, Yariv I, Fixler D, Lipovsky A. Krim muka asid hyaluronik topikal dengan teknologi molekul mikronisasi baharu berkesan menembusi dan meningkatkan kualiti kulit muka: hasil daripada in-vitro, ex-vivo dan in-vivo (label terbuka ) kajian. J Clin Aeshet Dermatol. 2019;12:39-44.

12. Kano S, Todo H, Sugie K, et al. Penggunaan model kulit manusia yang dikultur semula sebagai kulit alternatif untuk kajian resapan sebatian kimia. Ujian Altern Anim Exp. 2010;15:61-70.

13. McDaniel DH, Hamzavi IH, Zeichner JA, et al. Pertahanan total ditambah pembaikan: konsep baru dalam perlindungan suria dan peremajaan kulit. J Dadah Dermatol. 2015;14:s3-s11.

14. Vitral GLN, Aguiar RAPL, de Souza IMF, Rego MAS, Guimarães RN, Reis ZSN. Ketebalan kulit sebagai penanda potensi usia kehamilan semasa lahir walaupun profil pertumbuhan janin berbeza: kajian kebolehlaksanaan. PLoS One. 2018;13:e0196542.

15. Clarys P, Clijsen R, Taeymans J, Barel AO. Pengukuran penghidratan stratum korneum: perbandingan antara kaedah kemuatan (versi digital Corneometer CM 825) dan kaedah impedans (Skicon-200EX). Teknologi Res Kulit. 2012;18:316- 323.

16. Li X, Yuan C, Xing L, Humbert P. Kepelbagaian topografi mikroflora kulit biasa dan perkaitannya dengan jenis persekitaran kulit: kajian pemerhatian pada wanita Cina. Sci Rep. 2017;7:18046.

17. Roques C, Téot L, Frasson N, Meaume S. PRIMOS: sistem optik yang menghasilkan ukuran tiga dimensi permukaan kulit. J Penjagaan Luka. 2003;12:362-364.

18. Matsunaga Y, Fujiwara S, Mori Y, et al. Pembangunan jarum mikro larut sendiri yang terdiri daripada asid hyaluronik sebagai rawatan antikedut. Majalah IFSCC. 2012;15:73-78.

19. Borkow G, Elias AC. Mengencangkan dan mencerahkan kulit muka selepas tidur di atas sarung bantal yang mengandungi kuprum oksida. Kosmetik. 2016;3:24.

20. Sito G, Manzoni V, Sommariva R. Komplikasi vaskular selepas suntikan pengisi muka: kajian literatur dan meta-analisis. J Clin Aeshet Dermatol. 2019;12:E65-E72.

21. Essendoubi M, Gobinet C, Reynaud R, Angiboust JF, Manfait M, Piot O. Penembusan kulit manusia asid hyaluronik dengan berat molekul berbeza seperti yang disiasat oleh spektroskopi Raman. Teknologi Res Kulit. 2016;22:55-62.

22. Tokudome Y, Komi T, Omata A, Sekita M. Strategi baharu untuk penghantaran kulit pasif nanopartikel, asid hyaluronik berat molekul tinggi yang disediakan melalui kaedah kompleks poliion. Sci Rep. 2018;8:2336.

23. Jiang D, Liang J, Noble PW. Hyaluronan adalah pengawal selia imun dalam penyakit manusia. Physiol Rev. 2011;91:221-264.

24. Farwick M, Gauglitz G, Pavicic T, et al. Asid hyaluronik lima puluh kDa mengimbangi beberapa gen epidermis tanpa mengubah ekspresi TNF dalam epidermis yang dibentuk semula. Fisiol Pharmacol Kulit. 2011;24:210-217.

25. Takabe P, Kärnä R, Rauhala L, Tammi M, Tammi R, PasonenSeppänen S. Pemecahan kot hyaluronan Melanocyte meningkatkan isyarat reseptor TLR-4 yang disebabkan oleh UVB dan ekspresi pengantara proinflamasi IL6, IL8, CXCL1 dan CXCL10 melalui pengaktifan NF-kappaB. J Invest Dermatol. 2019;139:1993-2003.

【Untuk maklumat lanjut: david.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】