Apakah Cara Echinacoside, Ramuan Berkesan Cistanche Deserticola, Pertumbuhan Sel Adenokarsinoma pankreas?

Hubungi:joanna.jia@wecistanche.com

Echinacoside menyekat pertumbuhan sel adenokarsinoma pankreas dengan mendorong apoptosis melalui laluan kinase protein yang diaktifkan mitogen

WEI WANG, JINBIN LUO, YINGHUI LIANG dan XINFENG LI

Abstrak.

Aplikasi klinikal produk semulajadi yang diperolehi daripada perubatan tradisional Cina telah mendapat perhatian dalam kemoterapi kanser.Echinacoside(ECH), salah satu phenylethanoids, diasingkan daripada batangCistanchesalsa (ubat herba Cina) mempunyai kesan pelindung tisu dan anti-apoptosis pada sistem saraf pusat. Walau bagaimanapun, ia masih sukar difahami sama adaEchinacoside mempunyai aktiviti penindasan tumor. Dalam kajian ini, telah ditunjukkan bahawaEchinacosideboleh menghalang dengan ketara pembiakan sel adenokarsinoma pankreas dengan mendorong pengeluaran spesies oksigen reaktif dan gangguan potensi membran mitokondria dan dengan itu mencetuskanapoptosis. Tambahan pula, telah dijelaskan bahawaEchinacosidemenindas pertumbuhan sel tumor melalui modulasi aktiviti MAPK. Kesimpulannya, kajian ini mendedahkan fungsi baru ECH dalam mencegah perkembangan kanser dan membayangkan bahawa penggunaanEchinacoside boleh menjadi strategi kemoterapi yang berpotensi untuk kanser.

Echinacoside dalam cistanche berkuranganpertumbuhan sel adenokarsinoma pankreas

pengenalan

Kanser adalah penyakit yang mengancam nyawa dan salah satu punca utama kematian di seluruh dunia. Sel-sel kanser dicirikan oleh terhalangapoptosis, pertumbuhan dan percambahan yang tidak terkawal, dan metastasis (1). Perkembangan kanser, sering dimulakan oleh perubahan genetik, adalah proses kompleks yang melibatkan interaksi antara protein onkogenik dan penindas tumor membentuk rangkaian isyarat yang rumit. Sebagai contoh, onkogen Myc telah didapati dikuatkan atau diekspresikan secara berlebihan dalam pelbagai jenis kanser dan onkoprotein yang dikodkan Myc boleh menggalakkan tumorigenesis dengan memacu perkembangan kitaran sel, merangsang pertumbuhan sel, dan mendorong angiogenesis (2). Walau bagaimanapun, isyarat onkogenik yang dicetuskan Myc boleh mengaktifkan laluan penindas tumor p53 melalui induksi penekan tumor, ARF yang mengurangkan degradasi p53 yang dimediasi oleh E3-ligase tetikus dua minit (MDM)2-onkogenik ( 3). Ini adalah mekanisme perlindungan diri yang dikawal secara automatik yang menghalang sel daripada transformasi malignan. Terutamanya, p53 boleh menindas aktiviti Myc dengan mengaktifkan secara transkripsi, contohnya, miR-145 yang menyasarkan mRNA Myc untuk pembungkaman terjemahan (4,5), sekali gus membentuk gelung kawal selia maklum balas negatif.

Strategi yang paling mudah dan berkesan untuk merawat kanser adalah dengan membunuh sel-sel kanser. Ubat antikanser yang biasa digunakan, seperti cisplatin (6), actinomycin D (7), dan adriamycin (8) ditunjukkan untuk menghalang pertumbuhan tumor dengan menggalakkan apoptosis. Baru-baru ini, bukti yang semakin meningkat telah menunjukkan bahawa beberapa produk semula jadi dan derivatif daripada tumbuhan, terutamanya daripada tumbuhan ubatan yang digunakan dalam perubatan tradisional Cina (TCM), mempamerkan fungsi penindasan tumor dengan mendorong apoptosis sel-sel kanser dan mempunyai potensi untuk aplikasi klinikal. dalam terapi kanser (9). Sebagai contoh, emodin antrakuinon semula jadi yang diasingkan daripada TCM, Radix rhizome Rhei, boleh menyekat pertumbuhan pelbagai jenis sel kanser(10,11). Camptothecin, yang berasal daripada 'pokok gembira' Cina, Camptotheca acuminate, adalah produk semula jadi yang berharga yang menghalang pengikatan DNA berikutan pemecahan helai pengantara topo I (12). Dalam satu lagi kajian kohort berasaskan populasi retrospektif terhadap sejumlah 729 pesakit dengan kanser payudara lanjutan, telah dicadangkan bahawa terapi TCM boleh menyumbang kepada rawatan kanser. Daripada kohort ini, 115 pesakit adalah pengguna TCM manakala 614 pesakit tidak menggunakan TCM. Analisis multivariate menunjukkan bahawa, berbanding dengan bukan pengguna, penggunaan TCM dikaitkan dengan penurunan risiko kematian semua sebab dengan ketara (13). Semua penemuan yang dinyatakan di atas menunjukkan bahawa TCM adalah ubat pelengkap dan alternatif yang penting yang boleh digunakan dalam rawatan kanser.

Echinacoside(ECH) ialah phenylethanoid yang diasingkan daripada batangCistanchessalsa, ubat herba Cina, yang merupakan ubat mentah penting yang digunakan sebagai agen antiserum dan antikeletihan (14). Telah didapati bahawa beberapa phenylethanoid mempunyai sifat penghapus radikal bebas dan melindungi daripada kecederaan toksik akibat tekanan oksidatif (15). Di samping itu, lebih banyak sifat biologiEchinacosidesejak itu telah dijelaskan. Sebagai contoh, ECH boleh menyelamatkan peningkatan tahap sitokin radang dan memperbaiki keabnormalan histopatologi paru-paru pada tikus dengan kecederaan paru-paru akut (16, 17). Juga,Echinacoside telah terbukti mempunyai kesan perlindungan pada tisu saraf dan memperbaiki gangguan tingkah laku dalam model murine penyakit Parkinson (18). Terutama, didapati bahawa ECH menggalakkan percambahan sel dan menghalangapoptosisdalam sel MODE-K epitelium usus tikus (19). Walau bagaimanapun, setakat ini, kurang perhatian telah diberikan kepada potensi peranan ECH dalam pencegahan kanser.

Dalam kajian ini, telah diterokai sama adaEchinacoside rawatan menjejaskan pertumbuhan dan percambahan sel tumor dan sama adaEchinacosidemendorong apoptosis, meningkatkan pengeluaran spesies oksigen reaktif (ROS), dan mengurangkan potensi membran mitokondria (MMP), dan seterusnya menyekat pertumbuhan sel tumor. Tambahan pula, kajian ini bertujuan untuk mengenal pasti mekanisme molekul yang bertanggungjawab untuk perencatan pertumbuhan sel pengantara ECH.

Bahan dan kaedah

Talian sel, reagen, dan antibodi.

SW1990 sel adenokarsinoma pankreas (ATCC, Manassas, VA, USA) telah dibiakkan dalam medium Eagle diubah suai Dulbecco ditambah dengan 10 peratus serum lembu janin, 50 U/ml penisilin, dan 0.1 mg/ml streptomycin pada 37˚C dalam atmosfera lembap CO2 5 peratus.Echinacosidetelah dibeli daripada Jrdun Biotechnology Corp. (Shanghai, China). Antibodi terhadap AKT, P-AKT, ERK, P-ERK, JNK, p-JNK, P38, p-P38, dan GAPDH telah dibeli daripada Teknologi Isyarat Sel (Danvers, MA, Amerika Syarikat); anti-Bax dan anti-Bcl-2 telah dibeli daripada Santa Cruz Biotechnology Inc. (Santa Cruz, CA, USA); dan anti-Caspase-3 telah dibeli daripada Abcam (Shanghai, China).

Ujian daya maju sel.

Untuk menilai kadar pertumbuhan sel tumor, kit Pengiraan Sel{{0}} (CCK-8; Dojindo Molecular Technologies, Rockville, MD, USA) telah digunakan mengikut arahan pengilang. Suspensi sel telah disemai pada 5,000 sel setiap telaga dengan rawatan ECH selama 0, 12, 24, 48 atau 72 jam dalam 96-plat kultur telaga. Perencatan pertumbuhan sel ditentukan dengan menambahkan reagen WST{10}} daripada kit CCK‑8 pada kepekatan akhir 10 peratus pada setiap telaga, dan penyerapan sampel diukur pada 450 nm menggunakan pembaca plat mikro (Multiskan MK3; Thermo Fisher Scientific, Inc., Waltham, MA, Amerika Syarikat).

pewarnaan Hoechst 33342.

Sel (60 peratus pertemuan) dirawat dengan Hoechst 33342 (Institut Bioteknologi Beyotime, Haimen, China) pada kepekatan akhir 1 µg/ml, diinkubasi dalam inkubator 37˚C selama 15 minit, dibasuh dengan garam penimbal fosfat dua kali, tetap dalam 4 peratus paraformaldehid selama 30 minit pada suhu bilik, dan dipasang pada slaid. Perubahan morfologi nukleus sel diperhatikan di bawah mikroskop pendarfluor (Olympus BX51, Melville, NY, Amerika Syarikat). Nukleus normal adalah bulat dan berwarna biru muda, manakala nukleus apoptosis mengecut dan berwarna biru terang.

Analisis pengisihan sel teraktif pendarfluor (FACS).

Untuk penilaianapoptosis, fluorescein isothiocyanate (FITC)-Annexin VApoptosisKit pengesanan (BD Biosciences, Shanghai, China) telah digunakan mengikut arahan pengilang. Secara ringkas, 5x104 sel telah dibasuh dengan PBS sejuk ais, digantung semula dalam penimbal pengikat 0.1 ml (Institut Bioteknologi Beyotime) dan diwarnai dengan 10 ml Annexin V terkonjugasi FITC (10 mg/ml) dan 10 ml propidium iodida (PI) (50 mg/ml). Berikutan pengeraman selama 15 minit pada suhu bilik dalam gelap dan penambahan penampan pengikat 400 ml, sel-sel dianalisis oleh cytometer aliran (C6; BD Biosciences, Shanghai, China).

Pengukuran spesies oksigen reaktif (ROS).

Untuk menilai pengeluaran ROS, Kit Ujian Spesies Oksigen Reaktif (Vigorous Biotechnology, Beijing, China) telah digunakan mengikut arahan pengilang. Secara ringkas, sel (80 peratus pertemuan) dituai dan dibasuh dengan PBS sebelum pewarnaan dengan larutan dihydroethidium (DHE) (Institut Bioteknologi Beyotime). Sel kemudiannya dianalisis dengan analisis sitometrik aliran.

Pengukuran potensi membran mitokondria (MMP).

Kit Ujian tetramethylrhodamine metil ester (TMRM) (ImmunoChemistry Technologies, Bloomington, MN, Amerika Syarikat) telah digunakan untuk mengesan perubahan dalam MMP. Secara ringkas, sel (80 peratus pertemuan) dituai, dibasuh dengan PBS, dan diwarnai dengan TMRM selama 15‑20 minit dalam inkubator 37˚C. Sel-sel kemudian dibasuh sekali dengan PBS dan tertakluk kepada analisis sitometrik aliran.

Analisis imunoblotting.

Sel-sel (8{10}} peratus pertemuan) telah dituai dan dilisekan dalam penimbal RIPA (Jrdun Biotechnology) yang terdiri daripada 50 mM Tris-HCl, pH 7.4; 150 mM NaCl, 1 mM EDTA, 1 peratus NP‑40, 1 peratus asid natrium deoksikolik dan 0.1 peratus SDS, dan perencat proteasome yang baru ditambah. Kuantiti lisat sel jernih yang sama digunakan untuk analisis imunoblotting seperti yang diterangkan sebelum ini (20).

Analisis statistik.

Data kuantitatif dinyatakan sebagai min ± sisihan piawai. Perbezaan statistik telah dinilai oleh ujian-t Pelajar yang tidak berpasangan menggunakan perisian SPSS 15.0 statistik. P<0.05 was="" considered="" to="" indicate="" a="" statistically="" significant="">

Keputusan

Echinacoside menyekat pertumbuhan sel tumor. Walaupun telah dilaporkan bahawaEchinacoside mempamerkan peranan pelindung dengan menghalangapoptosisdan isyarat keradangan dalam sel somatik, seperti sel epitelium neuron dan usus (16-19), ia masih sukar difahami sama ada ECH mengawal pertumbuhan dan percambahan sel kanser. Untuk menguji ini, ujian kelangsungan hidup sel telah dijalankan dengan merawat sel SW1990, yang diperolehi daripada adenokarsinoma pankreas gred II, dengan dos ECH yang dititrasi seperti ditunjukkan dalam Rajah 1. Terutamanya, ia telah menunjukkan bahawa ECH secara ketara melambatkan percambahan sel tumor dalam dos. cara bergantung semasa 5-tempoh budaya hari (Rajah 1).

Echinacoside mencetuskan apoptosis. Sebagai kehilanganapoptosisadalah salah satu mekanisme penyebab utama yang mendasari percambahan sel kanser pankreas yang tidak terkawal (21), kajian ini melakukan satu set eksperimen untuk menentukan sama ada ECH mencetuskan apoptosis. Pertama, dengan mengotorkan nukleus sel tumor dengan Hoechst 33342, telah ditunjukkan bahawa ECH menghasilkanapoptosisdalam cara yang bergantung kepada dos (Rajah 2A). Selain itu, analisis FACS telah dijalankan menggunakan pewarnaan Annexin V/PI untuk mengesahkan lagi kesan apoptosis tyEchinacoside (Gamb. 2B). Purata peratusan sel apoptosis ialah 1.1 peratus dalam keadaan kultur normal, manakala peratusan ini meningkat dengan ketara kepada 10.6, 21.4, dan 51.3 peratus sebagai tindak balas kepada rawatan ECH dalam cara yang bergantung kepada dos (Rajah 2C). Keputusan ini, bersama-sama dengan ujian daya maju sel yang ditunjukkan dalam Rajah 1, menunjukkan bahawaEchinacosiderawatan menyekat percambahan sel tumor dengan mencetuskanapoptosis.

Echinacoside mendorong penghasilan spesies oksigen reaktif (ROS). Beberapa ubat kemoterapi kanser, seperti doxorubicin dan cisplatin, telah ditunjukkan sebagai penjana kuat ROS yang merupakan peranan penting dalam induksi apoptosis di bawah keadaan fisiologi dan patologi (22). Oleh itu, ia telah disiasat sama ada rawatan ECH juga boleh mengawal pengeluaran ROS. Untuk menguji ini, DHE, yang boleh dioksidakan untuk menghasilkan etidium yang berinterkalasi dengan DNA, digunakan dalam kajian ini untuk menilai pengeluaran ROS. Didapati bahawa, seperti ubat antikanser yang lain,Echinacoside juga merangsang pengeluaran ROS dalam cara yang bergantung kepada dos seperti yang ditunjukkan oleh keamatan pendarfluor yang meningkat semasa rawatan ECH (Rajah 3).

Echinacosidemengurangkan MMP. Disfungsi mitokondria telah terbukti terlibat dalam induksi apoptosis. Pembukaan liang peralihan kebolehtelapan mitokondria telah ditunjukkan untuk mendorong depolarisasi potensi transmembran dan pembebasan faktor pro-apoptosis (23). Oleh itu, ia diuji sama adaEchinacoside boleh menyebabkan kehilangan MMP dalam sel tumor dengan melakukan ujian TMRM, yang merupakan pendekatan yang mantap, kerana keamatan pendarfluor TMRM adalah berkadar dengan potensi membran. Ia telah ditunjukkan bahawaEchinacoside rawatan mengurangkan MMP dengan ketara dalam cara yang bergantung kepada dos (Rajah 4).

Echinacoside mengawal pertumbuhan sel tumor melalui mitogen-activated protein kinase (MAPK), tetapi bukan isyarat AKT. Untuk menyiasat lebih lanjut asas molekul bagiEchinacoside-kematian sel tumor yang dimediasi, aktiviti beberapa laluan isyarat penting, seperti MAPK dan AKT (24,25), yang mengawal kelangsungan hidup dan kematian sel telah diperiksa. MAPK dipelihara secara evolusi, kinase protein Ser/Thr yang diarahkan prolin, termasuk kinase dikawal isyarat ekstraselular (ERK), c-Jun NH2-kinase terminal (JNK) dan ahli keluarga p38 yang diaktifkan melalui tiga lata isyarat kinase peringkat (26,27). Dalam kajian ini, ekspresi MAPK dan AKT, serta bentuk fosforilasi diaktifkan, telah dinilai dan mendedahkan bahawaEchinacoside menyekat aktiviti JNK dan ERK1/2 dengan ketara, tetapi meningkatkan aktiviti p38 (Rajah 5). Terutama, telah ditunjukkan bahawa aktiviti AKT, yang juga sangat penting untuk percambahan sel, tidak terjejas oleh rawatan ECH (Rajah 5). Selain itu, ditunjukkan bahawa rawatan ECH meningkatkan ekspresi Bax dan Caspase-3 sambil mengurangkan ungkapan Bcl-2 (Rajah 5), yang konsisten dengan Rajah 2. Oleh itu, keputusan menunjukkan bahawaEchinacosidemencetuskan apoptosis sel tumor melalui laluan MAPK.

cistancheechinacosidekepada anti-apoptosis

Perbincangan

Untuk pengetahuan kami, ini adalah kajian pertama yang menunjukkan perkara ituEchinacoside mempunyai fungsi penindasan tumor dengan mencetuskanapoptosis(Rajah 2), menggalakkan pengeluaran ROS (Rajah 3), dan mendorong depolarisasi potensi membran mitokondria (Rajah 4), seterusnya membawa kepada perencatan pertumbuhan sel tumor (Rajah 1). Tambahan pula, asas molekul kematian sel tumor pengantara ECH ditunjukkan berlaku dengan mengawal selia laluan isyarat MAPK (Rajah 5). Penemuan ini menunjukkan fungsi baru ECH dalam mencegah tumorigenesis dan dengan itu mencadangkan bahawa ia mungkin menjadi ejen calon untuk terapi kanser.

Majoriti ubat antikanser boleh mendorong apoptosis sel tumor, penuaan, dan/atau penangkapan kitaran sel, yang membawa kepada perencatan pertumbuhan dan percambahan sel tumor. Penangkapan kitaran sel ialah tindak balas selular kepada isyarat tekanan ringan yang membolehkan sel membaiki DNA yang rosak sebelum memulakan sintesis atau mitosis DNA replikatif, manakala apoptosis dan penuaan (penahanan kitaran sel kekal) berlaku sebagai tindak balas kepada isyarat tekanan yang menghapuskan sel yang tidak boleh diperbaiki atau malignan( 28,29). Oleh itu, hanya kesan apoptosis daripadaEchinacoside pada sel tumor telah dinilai dalam kajian ini, kerana membunuh sel kanser adalah kriteria utama untuk menilai potensi agen antikanser. Terutamanya, telah ditunjukkan bahawa ECH mendorong ekspresi Bax (Rajah 5), gen pro-apoptosis, diaktifkan secara transkripsi oleh penindas tumor p53 (30). Oleh itu, adalah berbaloi untuk menguji sama adaEchinacoside boleh mengaktifkan laluan isyarat p53. Jika ya, ECH juga mungkin dapat menimbulkan penangkapan kitaran sel yang bergantung p{1}, penuaan, apoptosis atau autophagy. Dalam kajian ini, fungsi penindasan tumor ECH dalam barisan sel adenokarsinoma pankreas SW1990 telah dijelaskan. Walau bagaimanapun, kajian lanjut yang memerhatikan lebih banyak garisan sel kanser pankreas, diperlukan. Telah ditunjukkan bahawa mutasi dalam protein onkogenik RAS dan penindas tumor p53 dikaitkan dengan perkembangan kanser pankreas (31); walau bagaimanapun, garisan sel SW1990 tidak mempunyai sebarang mutasi p53, menurut pangkalan data IARC p53 Oleh itu, adalah penting untuk menyiasat sama adaEchinacoside boleh menjejaskan pertumbuhan dan percambahan saluran sel kanser pankreas lain dengan mutasi p53 yang berbeza. Di samping itu, adalah menarik untuk menentukan sama ada ECH dapat menggalakkan apoptosis dan menghalang pertumbuhan jenis tumor lain.

Ketinggian ROS dan pengurangan MMP, yang disebabkan olehEchinacoside rawatan, telah terbukti penting dalamapoptosisinduksi (22). Di samping itu, didapati bahawa ROS boleh mendorong pengoksidaan liang mitokondria yang menyumbang kepada pembebasan cytochrome c, perantaraan dalam apoptosis, disebabkan oleh gangguan MMP (22). Oleh itu, masih perlu ditentukan sama ada ECH mengganggu MMP secara tidak langsung melalui induksi ROS. Selain itu, tekanan oksidatif yang ditimbulkan ROS juga telah ditunjukkan terlibat dalam memodulasi pelbagai isyarat pengawalan pertumbuhan sel, termasuk p53, NF-κB, HIF, dan PI3K (32). Ia masih perlu ditentukan sama ada dan, jika ya, bagaimana ECH mengawal laluan isyarat penting ini. Terutama, tekanan oksidatif menyebabkan pelbagai penyakit neurodegeneratif disebabkan oleh penggunaan oksigen yang tinggi, sistem antioksidan yang lemah, dan ciri-ciri pembezaan terminal sistem saraf pusat (33). Walau bagaimanapun, beberapa kajian telah menunjukkan bahawaEchinacosidemempunyai kesan perlindungan dan anti-apoptosis pada tisu saraf. Dalam hal ini, adalah munasabah untuk membuat hipotesis bahawa ECH boleh mengurangkan pengeluaran ROS dalam sel saraf yang dibezakan terminal. Oleh itu, ia juga masih perlu ditentukan sama ada peraturan pengeluaran ROS oleh ECH bergantung kepada status pembezaan sel. Oleh itu, keputusan semasa bersama-sama dengan kajian lain mendedahkan bahawa ECH, TCM yang digunakan secara meluas, boleh menjadi strategi kemoterapi yang penting bukan sahaja untuk rawatan penyakit neurodegeneratif tetapi juga karsinoma malignan.

Baru-baru ini, penggunaan TCM dalam terapi kanser semakin mendapat perhatian. Potensi produk semulajadi daripada tumbuhan ubatan yang digunakan dalam TCM telah diiktiraf oleh komuniti saintifik walaupun di dunia barat (9). Usaha diperlukan untuk menjelaskan mekanisme asas tindakan produk semulajadi ini, yang akhirnya boleh membawa kepada pembangunan ubat yang cekap dan selamat untuk terapi kanser.

Kesimpulannya, kajian ini menunjukkan fungsi perencatan tumorEchinacoside dan juga menghuraikan asas molekul bagiEchinacoside-pengantara penindasan tumor, dengan itu mencadangkan potensi aplikasi klinikalEchinacoside dalam terapi kanser.

echinacosidedalam cistanche

Ucapan terima kasih

Kajian ini dibiayai dan disokong oleh Program Utama Penyelidikan Saintifik FMU(geran no. 09ZD014). Penulis ingin mengucapkan terima kasih kepada Biomedworld (Shanghai, China) atas bantuan menyunting manuskrip.

daripadaEchinacosidemenyekat pertumbuhan sel adenokarsinoma pankreas dengan mendorongapoptosismelalui laluan kinase protein diaktifkan mitogen oleh WEI WANG, JINBIN LUO, YING HUI LIANG dan XINFENG LI

---LAPORAN PERUBATAN MOLEKUL 13: 2613-2618, 2016 DOI: 10.3892/mmr.2016.4867

Rujukan

1. Hanahan D dan Weinberg RA: Ciri-ciri kanser: Generasi seterusnya. Sel 144: 646-674, 2011.

2. Alderton GK: Transkripsi: Kesan transkripsi MYC. Nat Rev Cancer 14: 513, 2014.

3. Zindy F, Eischen CM, Randle DH, Kamijo T, Cleveland JL, Sherr CJ dan Roussel MF: Isyarat Myc melalui penindas tumor ARF mengawal p53-bergantungapoptosisdan keabadian. Genes Dev 12: 2424-2433, 1998.

4. Sachdeva M, Zhu S, Wu F, Wu H, Walia V, Kumar S, Elble R, Watabe K dan Mo YY: p53 menindas c-Myc melalui induksi penekan tumor miR-145. Proc Natl Acad Sci USA 106: 3207-3212, 2009.

5. Liao JM, Cao B, Zhou X dan Lu H: Cerapan baharu tentang fungsi p53 melalui mikroRNA sasarannya. J Mol Sel Biol 6: 206-213, 2014.

6. Zamble DB dan Lippard SJ: Cisplatin dan pembaikan DNA dalam kemoterapi kanser. Trend Biochem Sci 20: 435-439, 1995.

7. Kleeff J, Kornmann M, Sawhney H, dan Korc M: Actinomycin D mendorongapoptosisdan menghalang pertumbuhan sel kanser pankreas. Int J Cancer 86 399-407, 2000.

8. Tacar O, Sriamornsak P, dan Dass CR: Doxorubicin: Kemas kini mengenai tindakan molekul antikanser, ketoksikan dan sistem penghantaran ubat baru. J Pharm Pharmacol 65: 157-170, 2013.

9. Efferth T, Li PC, Konkimalla VS dan Kaina B: Daripada perubatan tradisional Cina kepada terapi kanser rasional. Trend Mol Med 13: 353-361, 2007.

10. Yim H, Lee YH, Lee CH, dan Lee SK: Emodin, terbitan antrakuinon yang diasingkan daripada rizom Rheum palmatum, secara selektif menghalang aktiviti kasein kinase II sebagai perencat kompetitif. Planta Med 65: 9-13, 1999.

11. Zhang L, Chang CJ, Bacus SS dan Hung MC: Menghalang transformasi dan mendorong pembezaan HER-2/neu-overexpressing sel kanser payudara oleh emodin. Kanser Res 55: 3890-3896, 1995.

12. Pommier Y: Perencat Topoisomerase I: Camptothecins dan seterusnya. Nat Rev Cancer 6: 789-802, 2006.

13. Lee YW, Chen TL, Shih YR, Tsai CL, Chang CC, Liang HH, Tseng SH, Chien SC, dan Wang CC: Terapi perubatan tradisional Cina tambahan meningkatkan kelangsungan hidup pada pesakit dengan kanser payudara lanjutan: Kajian berasaskan populasi. Kanser 120: 1338-1344, 2014.

14. Xiong Q, Hase K, Tezuka Y, Namba T, dan Kadota S: Acteoside menghalangapoptosisdalam kecederaan hati yang disebabkan oleh D-galactosamine dan lipopolysaccharide. Life Sci 65: 421-430, 1999.

15. Gao JJ, Igarashi K, dan Nukina M: Aktiviti pemusnahan radikal glikosida fenilpropanoid dalam Caryopteris incana. Biosci Biotechnol Biochem 63: 983-988, 1999.

16. Zhang Y, Xing J, Ai T, Wen T, Guan L, dan Zhao J: Perlindungan terhadapechinacosideterhadap kecederaan paru-paru akut yang disebabkan oleh asid oleik pada tikus. Free Radic Res 41: 798-805, 2007.

17. Li X, Gou C, Yang H, Qiu J, Gu T dan Wen T:Echinacosidemembaiki D-galactosamine serta kecederaan hati akut yang disebabkan oleh lipopolisakarida pada tikus melalui perencatanapoptosisdan keradangan. Scand J Gastroenterol 49: 993-1000, 2014.

18. Zhao Q, Gao J, Li W, dan Cai D: Kesan neurotropik dan penyelamat sarafEchinacosidedalam model tetikus MPTP subakut penyakit Parkinson. Brain Res 1346: 224-236, 2010.

19. Jia Y, Guan Q, Guo Y dan Du C:Echinacosidemerangsang percambahan sel dan menghalang apoptosis sel dalam sel MODE-K epitelium usus dengan pengawalseliaan peningkatan ekspresi faktor pertumbuhan‑ 1. J Pharmacol Sci 118: 99‑108, 2012.

20. Liao P, Wang W, Shen M, Pan W, Zhang K, Wang R, Chen T, Chen Y, Chen H, dan Wang P: Gelung maklum balas positif antara EBP2 dan c-Myc mengawal transkripsi rDNA, percambahan sel, dan tumorigenesis. Kematian Sel Dis 5: e1032, 2014.

21. Westphal S dan Kalthoff H: Apoptosis: Sasaran dalam kanser pankreas. Kanser Mol 2: 6, 2003.

22. Simon HU, Haj-Yehia A, dan Levi-Schaffer F: Peranan spesies oksigen reaktif (ROS) dalamapoptosisinduksi.Apoptosis5: 415-418, 2000.

23. Ly JD, Grubb DR, dan Lawen A: Potensi membran mitokondria (delta psi(m)) dalam apoptosis; satu kemaskini.Apoptosis8: 115-128, 2003.

24. Munshi A dan Ramesh R: kinase protein diaktifkan mitogen dan peranannya dalam tindak balas sinaran. Kanser Gen 4: 401-408, 2013.

25. Abraham AG dan O'Neill E: Peraturan PI3K/Akt-pengantara p53 dalam kanser. Biochem Soc Trans 42: 798-803, 2014.

26. Tournier C: 2 Wajah JNK Isyarat dalam Kanser. Kanser Gen 4: 397-400, 2013.

27. Koul HK, Pal M dan Koul S: Peranan transduksi isyarat kinase p38 MAP dalam tumor pepejal. Kanser Gen 4: 342-359, 2013.

28. Brady CA dan Attardi LD: p53 sekilas pandang. J Sel Sci 123: 2527-2532, 2010.

29. Carvajal LA dan Manfredi JJ: Satu lagi percabangan dalam keputusan hidup atau mati oleh penekan tumor p53. EMBO Rep 14: 414-421, 2013.

30. Miyashita T dan Reed JC: Penekan tumor p53 ialah pengaktif transkrip langsung gen Bax manusia. Sel 80: 293-299, 1995.

31. Morton JP, Timpson P, Karim SA, Ridgway RA, Athineos D, Doyle B, Jamieson NB, Oien KA, Lowy AM, Brunton VG, et al: Mutant p53 memacu metastasis dan mengatasi penangkapan pertumbuhan/penuaan dalam kanser pankreas. Proc Natl Acad Sci USA 107: 246-251, 2010.

32. Schieber M dan Chandel NS: Fungsi ROS dalam isyarat redoks dan tekanan oksidatif. Curr Biol 24: R453-R462, 2014.

33. Li J, OW, Li W, Jiang ZG dan Ghanbari HA: Tekanan oksidatif dan gangguan neurodegeneratif. Int J Mol Sci 14: 24438-24475, 2013.