Jenis 1 Sel Dendritik (DC) dalam Penyakit Buah Pinggang

untuk maklumat lanjut:ali.ma@wecistanche.com

Sel Dendritik Jenis 1 Konvensional (cDC1) dalam Penyakit Ginjal Manusia: Korelasi Kliniko-Patologi

Titi Chen, Qi Cao & et al.

ABSTRAK

latar belakang: Jenis 1 sel dendritik(cDC1) ialah subset DC konvensional, yang fungsinya yang paling dikenali ialah pembentangan silang kepada sel T CD8 tambah. Kami menjalankan kajian ini untuk menyiasat bilangan dan lokasiJenis 1 sel dendritik(cDC1s) dalam pelbagai manusiapenyakit buah pinggangserta korelasinya dengan ciri klinikopatologi dan sel CD8 T.

Kaedah: Kami menganalisis 135buah pinggangsampel biopsi.Penyakit buah pinggangtermasuk: nekrosis tubular akut (ATN), nefritis interstitial akut (AIN), glomerulonefritis proliferatif (GN)(nefropati IgA, nefritis lupus, GN pauci-imun, penyakit anti-GBM), GN tidak proliferatif (penyakit perubahan minimum, nefropati membranous ), dan nefropati diabetik. Pewarnaan imunofluoresensi tidak langsung digunakan untuk mengukur cDC1s (Jenis 1 sel dendritik), CD1ct DC dan CD8 tambah sel T.

Keputusan:Jenis 1 sel dendritik(cDC1s) jarang hadir dalam keadaan normalbuah pinggang. Bilangan mereka meningkat dengan ketara dalam ATN dan GN proliferatif, secara berkadar lebih banyak daripada CD1ct DC. cDC1s (Jenis 1 sel dendritik)didapati terutamanya di interstitium, kecuali dalam lupus nefritis, GN pauci-imun, dan penyakit anti-GBM, di mana mereka menonjol di kawasan glomeruli dan peri-glomerular. Bilangan cDC1s (Jenis 1 sel dendritik)dikaitkan dengan keterukan penyakit dalam ATN, bilangan bulan sabit dalam GN pauci-imun, fibrosis interstisial dalam nefropati lgA, dan nefritis lupus, serta prognosis dalam nefropati IgA. Bilangan sel T CD8 ditambah juga meningkat dengan ketara dalam keadaan ini dan cDC1 (Jenis 1 sel dendritik)nombor berkorelasi dengan nombor CD8 ditambah Tcell dalam nefritis lupus dan GN pauci-imun, dengan kebanyakannya disetempatkan secara rapat. Kesimpulan: cDC1 (Jenis 1 sel dendritik)nombor dikaitkan dengan pelbagai ciri klinikopatologi dan prognosis yang mencerminkan peranan yang mungkin dalam keadaan ini. Perkaitan mereka dengan sel T CD8 ditambah mencadangkan mekanisme gabungan selaras dengan keputusan dalam model haiwan.

PENGENALAN

sel dendritik(DC) ialah pengatur pusat imuniti yang berkesan. Sel-sel ini adalah heterogen dan boleh dibahagikan kepada subset yang berbeza berdasarkan fenotip dan fungsinya. Sel dendritik boleh dikategorikan secara meluas kepada DC plasmacytoid (Sel Dendritik)(pDC) dan DC konvensional (Sel Dendritik)(cDC).cDC terdiri daripada dua subset utama: cDC1 (Jenis 1 sel dendritik)(CD141* DCs (Sel Dendritik) pada manusia dan CD103t atau CD8ot DC dalam tikus) dan cDC2(CD1c DC pada manusia dan CD1 lbt DC dalam tikus) (1).cDC1 (Jenis 1 sel dendritik)pertama kali ditemui pada tikus dan kemudian pada manusia dan dicirikan oleh keupayaan unggul mereka untuk memfagositosis sel nekrotik melalui reseptor corak molekul (DAMP) yang berkaitan dengan kerosakan Clec9A dan menghadirkan silang kepada sel T CD8 ditambah. Sebaliknya, cDC2 adalah pengaktif sel T CD4* yang berkesan tetapi lebih rendah pada pengaktifan sel T CD8t (2).

DC (Sel Dendritik)telah dikaji pada manusiapenyakit buah pinggangdan bilangan mereka didapati meningkat dalam glomerulonephritis(GN)(3, 4). Selepas penemuan cDCl, kajian haiwan terkumpul telah menunjukkan bahawa mereka memainkan peranan penting dalampenyakit buah pinggang, seperti dalam adriamycin nephropathy dan GN crescentic, melalui interaksi dengan sel T (5-8). Walau bagaimanapun, kajian sedemikian kurang pada manusiapenyakit buah pinggang, dengan hanya satu kajian yang menunjukkan peningkatan bilangan cDC (konvensionalSel Dendritik)dalam GN (9). Kami menjalankan kajian ini untuk menyediakan analisis subset cDC utama, cDC1 (Jenis 1 sel dendritik), dan cDC2, dalam pelbagai jenis manusiapenyakit buah pinggangtermasuk penyakit bukan glomerular [nekrosis tubular akut (ATN), nefritis interstitial akut(AIN)], GN proliferatif (nefropati IgA, nefritis lupus, GN pauci-imun, penyakit anti-GBM), GN tidak proliferatif (penyakit perubahan minimum ( MCD), nefropati membran) dan nefropati diabetik. Kami mendapati cDC mempunyai korelasi yang ketara dengan ciri-ciri patologi termasuk keterukan ATN, pembentukan sabit dalam GN pauci-imun, dan fibrosis interstisial dalam GN pengantara imun. Di samping itu, selaras dengan keupayaan khusus mereka untuk mengaktifkan sel CD8 ditambah T dalam haiwan. model, kami juga menunjukkan korelasi mereka dengan sel T CD8t dalam sampel ini. Penemuan ini memberikan dorongan untuk meneroka sasaran terapeutik baharu yang memanipulasi sel-sel ini untuk rawatanbuah pinggangpenyakit.

Klik untuk batang Cistanche untuk penyakit buah pinggang

BAHAN DAN KAEDAH

Pesakit dan Sampel Tisu

Kajian itu dijalankan mengikut prinsip Deklarasi Helsinki dan telah diluluskan oleh Jawatankuasa Etika Penyelidikan Manusia Daerah Kesihatan Tempatan Sydney Barat. Persetujuan pesakit yang dimaklumkan telah diperolehi. Kami menganalisis 176 diagnostik bekubuah pinggangbiopsy samples taken from non-pregnant adult patients(>18 tahun) antara 18 Jun 2016 hingga 30* Jun 2017 di Hospital Westmead, Sydney, Australia.buah pinggangtisu-tisu dibekukan dalam OCTcompound (Tissue-Tek Sakura, Amerika Syarikat) dan disimpan pada -80 darjah . Empat puluh satu (41) sampel mempunyai kualiti tisu yang lemah dan dikecualikan daripada kajian. Data asas pesakit termasuk umur, jantina, anggaran kadar penapisan glomerular (eGFR), dan tahap proteinuria dikumpul pada masabuah pinggangbiopsi.eGFR dikira menggunakan formula CKD-EPI. Diagnosis dibuat oleh ahli patologi buah pinggang, berdasarkan cahaya, imunofluoresensi(IF), dan mikroskop elektron serta sejarah klinikal.

Pelbagai penyakit dianalisis termasuk penyakit bukan glomerular (ATN, AIN), GN proliferatif (nefropati IgA, nefritis lupus, GN pauci-imun, penyakit anti-GBM), GN tidak proliferatif (MCD, nefropati membran), dan diabetes. nefropati. Untuk ATN, kami hanya memasukkan kes bukan septik kerana ATN septik mempunyai patofisiologi yang berbeza. ATN selanjutnya dikategorikan kepada penyakit ringan-sederhana (ditakrifkan sebagai<50%cortical tubules="" showing="" injury)and="" severe="" disease="" (="">=50 peratus tubul kortikal menunjukkan kecederaan). Nefropati IgA dikelaskan mengikut skor Oxford MEST (M mesangial hypercellularity, E endocapillary hypercellularity, S segmental glomerulosclerosis, T tubular atrophy/interstitial fibrosis). Kami juga menganalisis korelasi antara cDC1 (Jenis 1 sel dendritik) number and prognosis (defined a priori as >20% reduction in eGFR on or before 31t December 2019)in IgA nephropathy by dividing patients into 2 groups according to cDC number with a cut-off point at the upper quartile(>=15). Lupus nefritis dikelaskan lagi kepada 2 kumpulan mengikut tahap fibrosis interstisial (<25%,>=25 peratus penglibatan interstisial kortikal). GN pauci-imun dikelaskan kepada 2 kumpulan mengikut peratusan glomeruli dengan bulan sabit(<40%,>=40 peratus ).

Seperti biasabuah pinggangkawalan, kami menggunakan 5 korteks buah pinggang normal daripada sampel nefrektomi serta 2 pendermabuah pinggangtidak sesuai untuk pemindahan. Untuk nephrectomies tumor, sampel diambil dari kutub bertentangan dengan tumor dan sekurang-kurangnya 5 cm dari margin tumor. Tisu-tisu ini mempunyai rupa makroskopik biasa. Secara mikroskopik, tiada satu pun daripada inibuah pinggangsampel mempunyai bukti keradangan atau kecederaan glomerular atau tubulointerstitial yang ketara. Kami menggunakan tisu splenik penderma dewasa biasa sebagai kawalan positif untuk menguji antibodi.

Pewarnaan Imunofluoresensi

Bahagian cryostat bersiri dipotong pada 5μm dan diletakkan pada slaid kaca Superfrost Ultra Plus (Thermo Scientific, USA). Slaid telah disimpan pada -80 darjah . Bahagian tisu dibetulkan dengan 100 peratus metanol pada -20 darjah selama 10 minit dan kemudian dikeringkan dengan udara. Pewarnaan imunofluoresensi tidak langsung dilakukan menggunakan kaedah berikut: bahagian tisu dibasuh di DPBS (Lonza, Amerika Syarikat) dan disekat dengan 2 peratus Bovine Serum Albumin (Sigma-Aldrich, Amerika Syarikat) selama 15 minit; kemudian mereka diwarnai dengan antibodi primer pada 4 darjah semalaman diikuti oleh antibodi sekunder selama 40 minit pada suhu bilik. Jadual 1 ialah senarai antibodi primer dan sekunder yang digunakan serta pencairannya. Nukleus telah diwarnakan dengan DAPI(1:250,000, ThermoFisher, USA)sebelum sampel dipasang pada slip penutup dengan medium pelekap pendarfluor (Dako, USA). Pewarnaan tidak spesifik dan kereaktifan silang antara antibodi primer dan sekunder yang berbeza telah diperiksa dan dikecualikan.

JADUAL 1|Antibodi primer dan sekunder yang digunakan dalam kajian

cDCls dikenal pasti dengan pewarnaan untuk penanda Clec9A. Pada manusia, ungkapan Clec9A sangat terhad kepada cDCl dalam darah dan tisu (10, 11). Untuk mengesahkan perkara ini dalambuah pinggang, kami melakukan pewarnaan dua kali ganda Clec9A dan HLA-DRB1 serta Clec9A dan CD1lc dalam keadaan normal dan berpenyakit terpilih. Kebanyakan, jika tidak semua Clec9A bertindih dengan HLA-DRB1 (Tambahan Rajah 1) dan CD1lc (Tambahan Rajah 2).

RAJAH 1|Buah pinggang normal cDC1 (Jenis 1 sel dendritik), cDC2 dan sel T CD8 plus.

DC (Sel Dendritik)jarang hadir secara normalbuah pinggangdan nombor cDC2 adalah lebih kurang 7 kali ganda bilangan cDC1 (Jenis 1 sel dendritik). (Bar=100 mm).

KEPUTUSAN

Ciri-ciri Garis Dasar Pesakit.Ciri-ciri asas pesakit dalam kawalan dan kohort penyakit diringkaskan dalam Jadual 2. Sejumlah 135 pesakit telah dimasukkan ke dalam kajian. Pelbagai jenisbuah pinggangpenyakittelah dianalisis termasuk penyakit bukan glomerular[ATN (22), AIN (10)], proliferatif GN[gA nefropati (44), lupus nefritis (12), pauci-imun GN(12), anti-GBM penyakit(4)] , bukan proliferatif GN[MCD(5), nefropati membran(5)]dan nefropati diabetik (21). Terdapat lebih ramai wanita dalam kumpulan nefritis lupus dan umur mereka cenderung lebih muda berbanding dengan yang lainbuah pinggangpenyakit, yang konsisten dengan literatur(12). Pesakit dengan GN pauci-imun dan penyakit anti-GBM mempunyai eGFR terendah. Tahap proteinuria adalah yang tertinggi dalam MCD dan nefropati membran.

JADUAL 2|Ciri garis dasar.

Bilangan dan Lokasi DC (Sel Dendritik)dalam Kawalan dan Penyakit.cDCls jarang hadir dalam keadaan normalbuah pinggang(Rajah 1) dan nombor cDC2 adalah lebih kurang 7 kali ganda bilangan cDC1 (Jenis 1 sel dendritik).Bilangan cDC1 (Jenis 1 sel dendritik)meningkat dengan ketara dalam ATN dan GN proliferatif (Rajah 2A), manakala bilangan mereka kekal tidak berubah berbanding kawalan dalam AIN, nefropati membran, MCD, dan nefropati diabetik (Tambahan Rajah 3). Bilangan cDC2 juga meningkat dengan ketara dalam ATN dan GN proliferatif (Rajah 2B). Terdapat pengurangan dalam cDC2 (Jenis 2 sel dendritik)/cDC1 (Jenis 1 sel dendritik)nisbah yang menunjukkan cDCl (Jenis 1 sel dendritik)meningkat secara berkadar lebih daripada cDC2 (Rajah 2C).

RAJAH 2|Bilangan cDC1 (Jenis 1 sel dendritik)dan cDC2, nisbah cDC2/cDC1, dan CD8 tambah sel T dalam kawalan dan penyakit terpilih.

Nilai-P dikira untuk setiap penyakit berbanding kawalan. Kedua-dua cDC1 (Jenis 1 sel dendritik)dan cDC2 meningkat dengan ketara dalam ATN, IgA, lupus nefritis, GN pauci-imun dan penyakit anti-GBM (A, B)

dengan cDC1 (Jenis 1 sel dendritik)meningkat secara berkadar lebih daripada cDC2 dalam ATN, lupus nefritis, GN pauci-imun, dan penyakit anti-GBM (C).

CD8 ditambah sel T meningkat dengan ketara dalam ATN, IgA, nefritis lupus, GN pauci-imun, dan penyakit anti-GBM (D).

Kebanyakan cDCl terletak di interstitium, kecuali dalam nefritis lupus, GN pauci-imun, dan penyakit anti-GBM di mana ia juga ditemui di kawasan peri-glomerular dan intra-glomerular (Rajah 3A). bilangan sel T CD8t dalam kawasan peri-glomerular dan intra-glomerular (Rajah 3A), dan kebanyakannya disetempatkan bersama dengan cDCls (Rajah 3B). Sebaliknya, cDC2 jarang ditemui di kawasan intra-glomerular dan terdapat penyetempatan bersama minimum dengan sel T CD8 plus.

RAJAH 3|(A) cDC1 (Jenis 1 sel dendritik)dan sel T CD8 ditambah di kawasan intra-glomerular. ( B ) penyetempatan bersama cDC1 dengan sel T CD8 plus. (Bar=100 mm). * P < 0.05,="" **="" p=""><>

Persatuan Antara cDC1 (Jenis 1 sel dendritik)Dengan Ciri-ciri Klinikal-Patologi dan Sel T CD8 tambah Kami menganalisis korelasi antara cDCl (Jenis 1 sel dendritik)dan ciri klinikopatologi serta sel T CD8 plus. Terdapat 22 kes ATN(penyakit mod ringan n=12, penyakit teruk n=10). Penyakit yang lebih teruk dikaitkan dengan bilangan cDC1 yang lebih tinggi (Jenis 1 sel dendritik)(p=0.032), tetapi bukan cDC2(Rajah 4A).cDC1 (Jenis 1 sel dendritik)meningkat secara berkadar lebih daripada cDC2(nisbah cDC2/cDC1 2.5, p=0.019).Bilangan sel T CD8 tambah juga meningkat dengan ketara dalam ATN(p=0.005) (Jadual3,Rajah2D). Bilangan cDC1 (Jenis 1 sel dendritik)tidak berkorelasi dengan nombor sel T CD8* dalam ATN.

JADUAL 3|CD8 tambah nombor sel T dan pekali korelasi antara cDC1 (Jenis 1 sel dendritik)dan nombor CD8 tambah sel T dalam kawalan dan buah pinggang berpenyakit.

Empat puluh empat kes nefropati IgA telah dianalisis. Menggunakan skor MEST klasifikasi Oxford (M mesangial hypercellularity, E endocapillary hypercellularity, S segmental glomerulosclerosis, T tubular atrophy/interstitial fibrosis), bilangan cDC1 yang lebih tinggi (Jenis 1 sel dendritik)dikaitkan dengan skor T yang lebih tinggi (p=0.008), tetapi bukan skor MES (Rajah 4B). Terdapat 7 kes dengan anak bulan dan bilangan cCD1 tidak dikaitkan dengan bilangan anak bulan. Jumlahbuah pinggangSel T CD8* adalah lebih tinggi dalam nefropati IgA berbanding dalam kawalan (m.s<0.001) (table="" 3,="" figure="" 2d).="" there="" was="" no="" correlation="" between=""> (Jenis 1 sel dendritik) and CD8+ T cell numbers. Thirty-five(35)patients had follow-up data on or before 31sf December 2019, of whom9experienced>20 peratus pengurangan dalam eGFR. Membahagikan pesakit kepada 2 kumpulan mengikut cDCl (Jenis 1 sel dendritik) number with a cut-off point at the upper quartile(>=15), semakin tinggi cDC1 (Jenis 1 sel dendritik)kumpulan nombor dikaitkan dengan hasil yang lebih teruk (Rajah 4E).

RAJAH 4|Korelasi antara cDC1 (Jenis 1 sel dendritik), cDC2, dan CD8 ditambah nombor sel T dan keterukan penyakit (A–D).

Kurva Kaplan Meier bagi survival nefropati IgA (E). Skor T 0 merujuk kepada peratusan kawasan yang menunjukkan atrofi tiub/fibrosis interstisial <=25 peratus="">

Skor T 1 merujuk kepada peratusan kawasan yang menunjukkan atrofi tiub/fibrosis interstisial 26 - 50 peratus , skor T 2 merujuk kepada peratusan kawasan yang menunjukkan atrofi tiub/fibrosis celahan > 50 peratus .

Kemandirian ditakrifkan sebagai > 20 peratus pengurangan dalam eGFR pada atau sebelum 31 Disember 2019. NS, tidak ketara.

Terdapat 12 kes lupus nefritis. Seperti dalam nefropati IgA, nombor cDCl yang lebih tinggi dikaitkan dengan fibrosis yang lebih teruk (p=0.020)(Rajah 4C). Selain itu, nombor sel T CD8 tambah juga meningkat dengan ketara(P<0.001) (table="" 3,="" figure="" 2d)="" and="" this="" correlated="" with="" the="" number="" of="" cdcl="" cells="" (r="0.614," p="0.034)" (table="" 3).a="" significant="" number="" of=""> (Jenis 1 sel dendritik)dan sel T CD8t ditemui dalam peri-glomerular serta intra-glomerular yang menunjukkan mereka mungkin memainkan peranan dalam keadaan ini, Kedua, dalam fibrosis interstisial yang berkaitan dengan penyakit pengantara imun (nefropati IgA dan nefritis lupus), kami mendapati bahawa cDC1 (Jenis 1 sel dendritik)nombor berkorelasi dengan keterukan fibrosis, serta prognosis dalam nefropati IgA, manakala tiada korelasi sedemikian ditemui dalam penyakit fibrotik pengantara bukan imun (nefropati diabetik). Ketiga, terdapat korelasi yang kuat antara nombor cDCl dan pembentukan sabit dalam GN pauci-imun, dan cDCl hadir dalam jumlah besar di kawasan peri-glomerular dan intra-glomerular yang menunjukkan kemungkinan peranan mereka dalam pembentukan sabit. Keempat, bilangan cDC1 berkorelasi dengan nombor sel CD8 ditambah T dalam nefritis lupus dan GN pauci-imun, dengan banyak cDCls disetempatkan bersama dengan sel CD8 ditambah T yang mencadangkan kemungkinan interaksi mereka. Ini adalah selaras dengan penemuan kami dalam model haiwanbuah pinggangpenyakityang menunjukkan homolog murine cDC1 (Jenis 1 sel dendritik)sel lebih suka mengaktifkan sel T CD8t. Diambil bersama, penemuan ini mencadangkan bahawa cDCl memainkan peranan penting merentasi pelbagaibuah pinggangpenyakittermasuk ATN, fibrosis interstisial dalam penyakit pengantara imun, dan pembentukan bulan sabit dan ia berpotensi bertindak melalui pengaktifan sel T CD8t.

cDC1 (Jenis 1 sel dendritik)Bilangan Berkaitan Dengan Keparahan Penyakit dalam ATN. Dalam ATN bukan septik, buat kali pertama, kami menunjukkan bilangan DC yang meningkat dengan ketara (Sel Dendritik), terutamanya cDCl berbanding dengan cDC2s. Yang penting, cDC1 (Jenis 1 sel dendritik)bilangan yang dikaitkan dengan keterukan penyakit. Di samping itu, bilangan sel T CD8 ditambah juga telah ditambah. ATN biasanya disebabkan oleh kecederaan reperfusi iskemia (IRI), nefrotoksin, atau sepsis. Secara tradisinya, IRI dan toksin menyebabkan keradangan steril, dan imuniti semula jadi, di mana DC dan sel-T kurang penting, dianggap memainkan peranan yang dominan. Walau bagaimanapun, peningkatan bukti daripada kajian haiwan telah menunjukkan kedua-dua sel cDCl dan CD8 plus T adalah pemain penting. Kajian terdahulu dalam IRI haiwan dan nefrotoksisiti cisplatin mendapati jumlah bilangan sel DC dan T meningkat (13-17). Kajian terdahulu kami menunjukkan dalam nefropati Adriamycin, bilangan cDCl meningkat dengan ketara (5). Dalam IRI, subset sel dendritik yang diaktifkan menunjukkan peningkatan kapasiti kepada antigen hadir silang kepada sel T CD8t (18). Dalam nefropati Adriamycin, kami juga mendapati cDCls menimbulkan tindak balas sel T CD8 ditambah yang membawa kepada kecederaan (5). Kekurangan korelasi antara cDC1 (Jenis 1 sel dendritik)dan sel T CD8* dalam ATN manusia berbeza dengan penemuan dalam model haiwan mungkin mencerminkan laluan kecederaan bukan imunologi yang berbeza dalam ATN manusia berbanding IRI dalam model tetikus di mana cDCls memainkan peranan penting melalui sel T CD8*. Di samping itu, ia telah ditunjukkan dalam tikus bahawa cDCl direkrut ke dalam tisu oleh chemoattractant XCLl yang dihasilkan oleh sel pembunuh semulajadi (19). Oleh itu, mungkin berbaloi untuk mengkaji perkara ini dengan lebih lanjutbuah pinggangpenyakit.

cDC1 (Jenis 1 sel dendritik)Nombor Berkorelasi Dengan Fibrosis Interstisial Pengantaraan Imun. Penemuan penting kedua dalam kajian ini ialah nombor cDCl berkorelasi dengan keterukan fibrosis interstisial yang dikaitkan dengan penyakit pengantara imun (nefropati IgA dan nefritis lupus), tetapi tidak dalam penyakit fibrotik pengantara bukan imun (nefropati diabetik), kajian terdahulu menunjukkan peningkatan bilangan cDCls dan cDC2s dalam fibrosis celahan(9). Kami, buat kali pertama, menunjukkan bahawa ini hanya benar dalam penyakit pengantara imun dan cDC1 (Jenis 1 sel dendritik)bilangan meningkat secara berkadar lebih daripada cDC2s. Di samping itu, kami juga menunjukkan cDC1 (Jenis 1 sel dendritik)bilangan yang dikaitkan dengan prognosis dan bilangan sel T CD8* juga meningkat dengan ketara dalam nefropati IgA. Ini disokong oleh kajian haiwan yang menunjukkan DC (Sel Dendritik)secara langsung menyumbang kepada fibrosis. Sebagai contoh, amphiregulin yang berasal dari DC menggalakkan fibrosis (20). Ada kemungkinan juga cDCls menyumbang kepada fibrosis melalui sel T CD8 plus, yang diketahui menyumbang kepada fibrosis pada organ lain(21-23). Oleh kerana fibrosis interstisial dikaitkan dengan perkembangan kronikbuah pinggangpenyakit, tidak menghairankan bahawa kami menemui cDC1 (Jenis 1 sel dendritik)nombor untuk menjadi penanda prognostik yang baik dalam nefropati IgA. Kajian lain telah menunjukkan sel T CD8t berkorelasi dengan prognosis nefropati IgA (24), yang mungkin hasil daripada pembentangan silang daripada cDCls. Dalam nefritis lupus, kami menunjukkan korelasi antara cDC1 (Jenis 1 sel dendritik)nombor dan fibrosis interstisial serta bilangan sel T CD8t. Kajian terdahulu juga menunjukkan peningkatanbuah pinggangcDC1 (Jenis 1 sel dendritik)bilangan dalam lupus nefritis(25), terutamanya kelas III dan VI lupus nefritis, dengan pengurangan yang sepadan dalam nombor edaran mereka (26). Kami melanjutkan penemuan ini dengan menunjukkan bahawa mereka juga berkorelasi dengan perubahan kronik. Telah terbukti bahawa keradangan interstisial, yang terdiri daripada sel T, sel B, sel dendritik dan makrofaj, mempunyai peranan yang dominan dalam perkembangan nefritis lupus (27). cDCls boleh menyumbang kepada perkembangan nefritis lupus dalam pelbagai jenis. daripada cara. Pertama, pengaktifan interferon memainkan peranan penting dalam patogenesis lupus nefritis(28-30) dan cDCls ialah pengeluar utama IFN-入.（31）Kedua, cDC1 (Jenis 1 sel dendritik)boleh menyumbang kepada perkembangan lupus nefritis melalui sel T CD8t(32-37) dan penemuan kami tentang korelasi antara cDCls dan CD8 plus T menyokong lagi kemungkinan interaksi mereka. Peranan sel T CD8 plus dalam lupus nefritis telah ditunjukkan sebelum ini. CD8 plus sel T mengawal imuniti autoreaktif dengan pembebasan molekul sitotoksik. CD8 ditambah sel T dalam nefritis lupus didapati telah melembapkan fungsi sitotoksik, yang boleh mencetuskan autoimun (38). Di samping itu, sel-sel ini juga boleh menjana autoantigen lupus(39). Terdapat banyak bukti bahawa sel T CD8* dalam kedua-duanyabuah pinggang(32,33)dan air kencing(34-36)berkaitan dengan aktiviti penyakit dan kecederaan histologi dalam lupus nefritis. Di samping itu, keletihan sel T CD8* ditunjukkan untuk meramalkan prognosis yang menggalakkan(37).

cDC1 (Jenis 1 sel dendritik)Bilangan Berkorelasi Dengan Bilangan Bulan Sabit dalam Pauci-Imun GN. Dalam GN pauci-imun, kami mendapati cDCl diagregatkan di kawasan peri-glomerular dan intra-glomerular, dan bilangannya berkorelasi dengan bilangan bulan sabit dan CD8 ditambah sel T. Kajian terdahulu menunjukkan bahawa DC (Sel Dendritik)jarang terdapat di dalam glomerulus(3,4,9) atau hanya dalam jumlah yang sangat kecil(40). Sebaliknya, sel T menonjol dalam kawasan interstitium, peri-glomerular dan intra-glomerular({{6} }). Kami mendapati bahawa kedua-dua sel cDCls dan CD8* T menonjol di kawasan peri-glomerular dan intra-glomerular dengan kebanyakannya disetempatkan bersama. Di samping itu, cDC1 (Jenis 1 sel dendritik)nombor berkorelasi dengan nombor sel sabit dan CD8 ditambah T. Kesemua penemuan ini mencadangkan peranan untuk cDCl dalam pembentukan bulan sabit melalui interaksi dengan sel T CD8*. Peranan patogenik sel T CD8t dalam GN pauci-imun dan pembentukan bulan sabit telah ditunjukkan dalam model haiwan (45, 46). Selaras dengan penemuan kami pada manusia, dalam GN bulan sabit haiwan, cDC1 (Jenis 1 sel dendritik)dan sel T CD8* ditemui terutamanya di kawasan periglomerular(47,48). Telah ditunjukkan bahawa kapsul Bowman menyediakan niche imunologi yang dilindungi dengan menghalang akses DC dan sel T CD8 plus sitotoksik ke ruang Bowman dan dengan itu podosit(45,47). Walau bagaimanapun, apabila kapsul Bowman dilanggar, sel-sel radang ini mendapat akses dan memusnahkan podosit yang mengakibatkan GN (47) yang progresif dengan cepat.

Satu batasan kajian ini ialah teknik pewarnaan IF membenarkan penggunaan hanya bilangan penanda yang terhad. Adalah berfaedah untuk melanjutkan penemuan kami menggunakan teknologi seperti sitometri aliran, yang boleh menggabungkan berbilang penanda untuk menganalisis lebih lanjut fenotip DC ini. (Sel Dendritik)dan profil sitokin dan kemokin yang berkaitan. Walau bagaimanapun, maklumat lokasi akan hilang. Teknik lain seperti imunohistokimia multipleks dan Nanostring juga boleh dipertimbangkan dalam kajian akan datang untuk mengkaji lebih lanjut sel-sel ini dalambuah pinggangpenyakit. Di samping itu, apabila mengotorkan cDC2 menggunakan CD1c, HLA-DRB1 dan CD1lc, mungkin terdapat peratusan kecil sel B yang menyatakan penanda ini juga, yang tidak diketepikan.

KESIMPULAN

Walaupun cDC1 (Jenis 1 sel dendritik)terdiri daripada subset kecil DC (Sel Dendritik)di bawah keadaan homeostatik, kajian ini menunjukkan korelasi yang signifikan antara populasi sel ini dan ciri klinikopatologi dalam manusia.buah pinggangpenyakit. Ini mencerminkan kepentingan mereka dalam proses penyakit seperti ATN, pembentukan sabit dalam GN proliferatif, dan fibrosis interstitial dalam GN pengantara imun. Di samping itu, penyetempatan bersama dan korelasi mereka dengan sel T CD8t boleh memberikan penjelasan untuk mekanisme tindakan mereka, menyokong data daripada model haiwan. Penemuan ini memberikan dorongan untuk meneroka sasaran terapeutik baharu yang memanipulasi sel-sel ini untuk rawatanbuah pinggangpenyakit, seperti yang telah kita lakukan dalam kajian haiwan(6), dan untuk menyiasat penggunaannya sebagai penanda prognostik. Kajian lanjut dalam kedua-dua manusia dan haiwan diperlukan untuk menginterogasi peranan cDC1s (Jenis 1 sel dendritik), mekanisme tindakan mereka, dan cara terbaik untuk menyasarkannya secara terapeutik.

RUJUKAN

1. Pakalniskyte D, Schraml BU. Kepelbagaian Khusus Tisu dan Fungsi Sel Dendritik Konvensional. Adv Immunol(2017)134:89-135.doi:10.1016/bs.ai.2017.01.003

2. Merad M, Sathe P, Helft J, Miller J, Mortha A. Keturunan Sel Dendritik: Ontogeni dan Fungsi Sel Dendritik dan Subsetnya dalam Keadaan Steady dan Tetapan Meradang. Annu Rev Immunol (2013)31:563-604.doi:10.1146/imunol tahunan-020711-074950

3. Segerer S, Heller F, Lindenmeyer MT, Schmid H, Cohen CD, Draganovici D, et al. Ungkapan Khusus Petak Penanda Sel Dendritik dalam Glomerulonefritis Manusia.buah pinggangInt (2008)74(1):37-46.doi:10.1038/ki.2008.99

4. Woltman AM, de Fiter JW, Zuidwijk K, Vlug AG, Bajema IM, van der Kooij SW, et al. Kuantifikasi Subset Sel Dendritik dalam Tisu Renal Manusia Di Bawah Keadaan Normal dan Patologi.buah pinggangInt (2007)71(10):1001-8. doi: 10.1038/sj.ki.5002187

5. Cao Q, Lu J, LiQ, Wang C Wang XM, Lee VW, et al. Cd103 plus Sel Dendritik Mendapat Tindak Balas Sel Cd8 plus T untuk Mempercepatkanbuah pinggangkecederaandalam Adriamycin Nephropathy. J Am Soc Nephrol (2016) 27(5):1344-60.doi: 10.1681/ASN.2015030229

6. Wang R, Chen T, Wang C, Zhang Z, Wang XM, Li Q, et al. Perencatan Flt3 MengurangkanKronikbuah pinggangpenyakitdengan Menekan CD103 ditambah Pengaktifan Sel T Pengantaraan Sel Dendritik. Pemindahan Dail Nephrol(2019)34(11):1853-63. DOI: 10.1093/gfy385

7. Evers BD, Engel DR, Bohner AM, Tittel AP, Krause TA, Heuser C, et al Cd103 plusbuah pinggangSel Dendritik Melindungi Terhadap Crescentic GN dengan Mengekalkan Il-10-Menghasilkan Sel T Kawal Selia. J Am Soc Nephrol (2016)27(11):3368-82. DOI: 10.1681/ASN.2015080873

8. Kitching AR, Ooi JD. Sel Dendritik Renal: Jalan Panjang dan Berliku. J Am Soc Nephrol (2018)29(1):4-7.doi: 10.1681/ASN.2017101145

9. Kassianos AJ, Wang X, Sampangi S, Muczynski K, Healy H, Wilkinson R. Peningkatan Pengambilan Tubulointerstitial CD141(hi)CLEC9A(tambah)dan CD1c(tambah) Subset Sel Dendritik Myeloid dalam Fibrosis dan B Renal Manusiabuah pinggangB. Am J Physiol Renal Physiol (2013)305(10): F1391-401. doi:10.1152/adrenal.00318.2013

10. Guilliams M, Dutertre CA, Scott CL, McGovern N, Sichien D, Chakaro S, et al. Analisis Dimensi Tinggi Tanpa Pengawasan Menjajarkan Sel Dendritik Merentas Tisu dan Spesies. Kekebalan (2016)45(3):669-84.doi: 10.1016/j.immuni.2016.08.015

11. Villani AC, Satija R, Reynolds G, Sarkizova S, Shekhar K, Fletcher J, et al. RNA-seq Sel Tunggal Mendedahkan Jenis Baharu Sel Dendritik Darah Manusia, Monosit dan Leluhur. Sains(2017)356(6335):4-6. DOI: 10.1126/sains.aah4573

12. Almaani S, Meara A, Rovin BH. Kemas kini mengenai Lupus Nephritis. Clin I Am Soc Nephrol (2017)12(5):825-35.doi: 10.2215/CJIN.05780616

Catatan:di atas bukanlah senarai rujukan penuh