Jumlah Glikosida Dan Polisakarida Cistanche Deserticola Mencegah Osteoporosis

Hubungi:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Fujiang Wang 1, Pengfei Tu, Kewu Zeng *, Yong Jiang **

ABSTRAK

Kaitan etnofarmakologi:Perubatan tradisional Cina Cistanche deserticola YC Ma mempunyai kesan "menguatkan buah pinggang dan menguatkan tulang". Walau bagaimanapun, ekstrak aktif khusus C. deserticola dan mekanisme untuk rawatan osteoporotik tidak jelas.

Matlamat kajian:Kami ingin mengenal pasti ekstrak komponen berkesan C. deserticola untuk rawatan osteoporosis dan mekanisme yang berpotensi.

Bahan dan kaedah:Kumpulan kami menyelidik ekstrak C. deserticola dengan aktiviti anti-osteoporosis, termasuk jumlah glikosida (TGs), polisakarida (PSs) dan oligosakarida (OS) dalam tikus rawan tikus 6 (SAMP6) yang dipercepatkan penuaan. Pewarnaan Goldner's Trichrome, Van Gieson's (VG), Safranin O-Fast Green, dan pewarnaan von Kossa telah dilakukan untuk menyiasat pembentukan struktur tulang dan mendapan kalsium. Serum dikumpul untuk mengesan penanda biokimia. Seni bina mikro tulang dikesan oleh mikro-CT. Ungkapan protein morfogenetik tulang-2 (BMP-2), osteocalcin (OCN), osteoprotegerin (OPG), pengaktif reseptor ligan faktor-κ B nuklear (RANKL), p-glycogen synthetase kinase{{11 }} (p-GSK-3 ), dan p- -catenin dianalisis dengan western blotting dan imunohistokimia.

Keputusan:TGs dan PSs memperbaiki kerosakan histopatologi tulang, menggalakkan pembentukan tulang baru, serat kolagen, dan kondrosit, dan mempercepatkan deposit kalsium. Lebih-lebih lagi, mereka sangat mengubah biomarker perolehan tulang dan dengan berkesan memperbaiki seni bina mikro tulang. Kajian mekanisme selanjutnya menunjukkan bahawa TGs dan PSs telah menurunkan ekspresi RANKL, p- -catenin dengan ketara, serta menyelaraskan ekspresi BMP-2, OCN, OPG dan p-GSK{{ dengan ketara. 4}} (Ser9).

Kesimpulan:Penemuan kajian ini mencadangkan bahawa TGs dan PSs boleh menggalakkan pembentukan tulang osteoklastogenik dan memperbaiki kerosakan mikrostruktur tulang dalam tikus SAMP6, dan kesan terapeutiknya terhadap osteoporosis adalah melalui mengaktifkan laluan isyarat Wnt/ -catenin.

Cistanche bolehmenggalakkan tulang osteoklastogenikpembentukan dan penambahbaikankerosakan struktur mikro tulang.

1. Pengenalan

Osteoporosis adalah penyakit biasa pada individu warga emas yang membahayakan kesihatan manusia secara serius (Ye et al., 2020). Pesakit osteoporosis mungkin asimtomatik sepenuhnya sebelum patah tulang, justeru pencegahan dan rawatan osteoporosis yang berkesan adalah yang paling penting (Tella dan Gallagher, 2014).

Penyelidikan menunjukkan bahawa peningkatan penyerapan tulang dan penurunan pembentukan tulang menimbulkan ketidakseimbangan dalam pembentukan semula tulang, yang membawa kepada osteoporosis (Sims dan Gooi, 2008). Osteoblas dan osteoklas adalah dua jenis sel yang penting untuk pembentukan dan penyerapan tulang. Laluan wnt/ -catenin adalah penting untuk pertumbuhan, perkembangan, dan penyelenggaraan tisu tulang (Cadigan dan Nusse, 1997), dan juga memainkan peranan penting dalam mengawal selia pembezaan sel stromal sumsum tulang anjing beagle (BMSCs) (Jing et al. , 2018). GSK-3 menghalang degradasi -catenin. -Catenin kemudiannya masuk ke dalam nukleus, dan kemudian ia boleh mengaitkan dengan faktor pengikat faktor sel T/peningkatan limfoid dan mengawal ekspresi gen sasaran Wnt. Sementara itu, didapati bahawa isyarat Wnt/ -catenin mengurangkan pembezaan osteoklas dengan merangsang pengeluaran dan rembesan OPG (Glass et al., 2005), yang merupakan antagonis semula jadi RANKL (Lacey et al., 1998). OPG memainkan peranan pengawalseliaan yang penting dalam pembentukan tulang dan penyerapan tulang. Walau apa pun, pemadaman -catenin dalam osteoklas meningkatkan bilangan osteoklas dan penyerapan tulang serta mengurangkan jisim tulang (Wei et al., 2011). Inhibitor penyerapan tulang dan penggalak pembentukan tulang digunakan terutamanya dalam rawatan osteoporosis. Memandangkan tindak balas buruk ubat-ubatan yang digunakan sekarang dalam klinikal dengan keberkesanan yang tepat juga jelas, adalah penting untuk mencari ubat-ubatan dengan kesan sampingan yang lebih sedikit.

Cistanche deserticola YC Ma (C. deserticola) adalah salah satu tumbuhan sumber tonik herba perubatan tradisional Cina yang digunakan secara meluas Cistanches Herba, Roucongrong dalam bahasa Cina, untuk rawatan beberapa penyakit, seperti kekurangan buah pinggang, ketidaksuburan wanita, dan sembelit nyanyuk untuk lebih daripada 1000 tahun di China (Jawatankuasa Farmakope Kebangsaan, 2020). Menurut teori perubatan tradisional Cina (TCM), "tulang yang mendominasi buah pinggang" dan "tulang menguatkan buah pinggang", C. deserticola digunakan untuk merawat osteoporosis. Kajian menunjukkan bahawa C. deserticola boleh meningkatkan tahap serum alkali fosfatase (ALP), osteocalcin dan ion kalsium, menggalakkan ekspresi BMP-2 dalam osteoblas tikus (Gang et al., 2018). Di samping itu, kajian telah menunjukkan bahawa C. deserticola memberikan kesan perlindungan terhadap osteoklastogenesis yang disebabkan oleh RANKL (Zhang et al., 2019). Walaupun C. deserticola mempunyai kesan terapeutik terhadap osteoporosis, komponen aktif spesifiknya tidak begitu jelas. Adalah sangat penting untuk meneroka jenis komponen C. deserticola yang berkesan untuk rawatan osteoporosis dan mekanisme yang berkaitan.

Oleh itu, kami menjalankan kajian ini untuk menentukan sama ada terdapat beberapa kesan berfaedah daripada ekstrak yang mengandungi pelbagai jenis juzuk kimia daripada C. deserticola pada tikus SAMP6. Keputusan dapatan boleh memberikan panduan yang tepat untuk aplikasi klinikal C. deserticola serta mendedahkan asas bahan C. deserticola untuk rawatan osteoporosis.

2. Bahan-bahan dan cara-cara

2.1. Bahan kimia dan reagen

Cistanche deserticola YC Ma telah dibeli daripada Mandela Biotechnology Co., Ltd (Alashan, Inner Mongolia, China), dan kemudian seorang daripada pengarang mengenal pasti mereka (PF Tu). TG, PS, dan OS disediakan seperti kaedah yang dinyatakan sebelum ini (Gao et al., 2015). Analisis konstituen bagi setiap ekstrak telah dicapai melalui penggunaan HPLC mengikut laporan. (Li et al., 2019; Wang et al., 2020). H&E, pewarnaan trichrome Goldner, pewarnaan Van Gieson (VG) dan kit Safranin O-Fast Green dibeli daripada Boster (Hubei, China). BMP anti-tikus arnab-2 (ab14933), OCN (ab93876), OPG (ab183910) dan RANKL (ab216484) telah dibeli daripada Abcam (Cambridge, Britain). Teknologi Isyarat Sel ialah sumber p-GSK anti-tikus arnab-3 (Ser9) (#5558), GSK3 (#12456), -catenin (#13727) dan p- -catenin (# 4176). Antibodi sekunder telah dibeli dari Zhongshan Golden Bridge Biotechnology (Beijing, China).

Ekstrak cistanche berkualiti tinggidaripadaChengdu Wecistanche Bio-Tech Co., Ltd

2.2. Haiwan

5-tikus/tahan 1 (SAMR1) dan tikus SAMP6 yang dipercepatkan penuaan betina berumur sebulan telah diperoleh daripada Teknologi Haiwan Makmal Sungai Vital (Beijing, China). Semua manipulasi haiwan dilakukan mengikut garis panduan yang dikeluarkan oleh Jawatankuasa Penjagaan dan Penggunaan Haiwan Institusi Pusat Sains Kesihatan Universiti Peking.

2.3. Pentadbiran dadah

Tikus telah diasingkan secara rawak kepada lima kumpulan berikut: kumpulan SAMR1 (garam biasa, n=10); Kumpulan SAMP6 (masin biasa, n =10); Kumpulan TGs (400 mg/kg, n=10); Kumpulan PSs (400 mg/kg, n=10) dan kumpulan OS (400 mg/kg, n=10) (Gao et al., 2015). Semua ubat diberi ig dan setiap hari selama 12 minggu.

2.4. Pewarnaan trichrome Goldner, pewarnaan H&E, pewarnaan SafraninO-Fast Green dan pewarnaan Van Gieson (VG)

Selepas 12 minggu, tulang paha telah dikeluarkan dengan cepat dan dibetulkan menggunakan 10 peratus asid etilena diamine tetraacetic (EDTA) selama 7 hari pada suhu 4 ◦C. Seterusnya, tulang paha dibelah menjadi kepingan (5 μm) dan diwarnakan dengan pewarnaan Goldner Trichrome, Van Gieson (VG), SafraninO-Fast Green dan H&E mengikut arahan pengilang. Imej-imej itu diperhatikan dengan mikroskop cahaya (Leica, Solms, Jerman).

2.5. Pengukuran tahap BGP, BALP, P1NP, PICP, ALP, S-CTX, TRACP, U-CTX, U-NTX, D-Pyr dan Pyr

Kepekatan protein gla tulang (BGP), fosfatase alkali khusus tulang (BALP), prokolagen jenis 1 N-terminal propeptida (P1NP), prokolagen jenis I C-terminal propeptide (PICP), alkali fosfatase (ALP), S-C -telopeptida jenis-I-kolagen (S-CTX), asid fosfatase tahan tatrat (TRACP), U-C-telopeptide jenis-I-kolagen (U-CTX), U-N-telopeptide jenis-I- kolagen (U-NTX), D-pyridinoline (D-Pyr), dan pyridinoline (Pyr) ditentukan oleh ujian imunosorben berkaitan enzim (Jiangsu Meimian Industrial Co., Ltd, Jiangsu, China).

2.6. Pewarnaan Von Kossa

Kepingan tulang paha telah direndam dalam 1 peratus perak nitrat selama 30 min di bawah pancaran matahari yang kuat dan kemudian dibasuh tiga kali dengan air ternyahion. Selepas itu, 5 peratus natrium tiosulfat ditambah selama 5 minit untuk menghilangkan perak yang tidak bertindak balas. Garam kalsium fosfat divisualisasikan sebagai pewarnaan hitam. Untuk menganalisis kandungan kalsium femur secara kuantitatif, perisian Image-Pro Plus versi 6.0 dan Adobe Photoshop telah digunakan.

2.7. Analisis tomografi yang dikira mikro

Semua sampel femur telah diimbas pada resolusi 9 μm oleh pengimbas mikro-CT (PerkinElmer, MA, Amerika Syarikat). Analisis lanjut dilakukan menggunakan perisian Analyze12.0 untuk mengira ketumpatan mineral tulang (BMD), isipadu tulang/jumlah isipadu (BV/TV), nombor trabekular (Tb. N), pemisahan trabekular (Tb. Sp), ketebalan trabekular (Tb. Th), dan ketumpatan mineral tisu (TMD). Imej tiga dimensi telah dibina semula menggunakan perisian CTVox (PerkinElmer, MA, USA).

2.8. Pengumpulan tetrasiklin dan calcein

Setiap haiwan diberikan secara intraperitoneal 25 mg/kg tetracycline dan 5 mg/kg calcein pada hari ke-13 dan hari ke-3 sebelum euthanasia, masing-masing. Pengumpulan tetracycline dan calcein telah disiasat menggunakan Sistem Pengimejan Patologi Kuantitatif Automatik Vectra® Polaris™ (PerkinElmer, MA, USA). Jarak antara tetracycline dan calcein boleh diperhatikan oleh perisian Image-Pro Plus versi 6.0.

2.9. Analisis Western blotting

Tisu femur telah dihomogenkan dan dilisekan dalam penimbal lisis RIPA. Kepekatan protein ditentukan menggunakan kit reagen protein asid bicinchoninic (BCA) (Beijing TransGen Biotech, Beijing, China). Jumlah protein dimuatkan pada 10 peratus atau 12 peratus gel SDS-PAGE dan kemudian dipindahkan ke membran nitroselulosa. Membran telah disekat dan kemudian diinkubasi semalaman dengan antibodi primer dan GAPDH (Los Angeles, Amerika Syarikat) pada suhu 4 ◦C diikuti dengan pengeraman dengan antibodi sekunder. Analisis jalur protein dianalisis menggunakan Tanon 5200 Multi (Shanghai, China).

2.10. Analisis imunohistokimia

Bahagian tisu femur diinkubasi dengan antibodi utama pada suhu 4 ◦C. Antibodi poliklonal terhadap BMP-2, OCN, OPG dan RANKL masing-masing dicairkan kepada 1:200 dan 1:100. IgG anti-arnab tetikus antibodi sekunder (1:200) pada 37 ◦C selama 1 jam. Menggunakan Sistem Pengimejan Patologi Kuantitatif Automatik Vectra® Polaris™ (PerkinElmer, MA, USA). Untuk menganalisis secara kuantitatif ekspresi protein, perisian Image-Pro Plus versi 6.0 dan Adobe Photoshop telah digunakan.

2.11. Analisis statistik

Keputusan dinyatakan sebagai min ± sisihan piawai. ANOVA sehala dilakukan apabila membandingkan kumpulan yang berbeza. Perisian SPSS versi 22.0 telah digunakan untuk analisis statistik dan P < 0.05="" dianggap="" signifikan="" secara="">

cistanche reddit

3. Keputusan

3.1. TGs dan PSs memperbaiki kerosakan histopatologi tulang dan menggalakkan pembentukan serat kolagen dan kondrosit dalam tikus SAMP6

Kerosakan patologi tulang paha boleh diperhatikan dengan pewarnaan H&E. Struktur histomorfologi tulang dalam kumpulan SAMR1 disusun secara teratur. Walau bagaimanapun, struktur tulang yang disebutkan di atas telah rosak dalam kumpulan SAMP6. Perubahan morfologi dalam kumpulan TG dan PS adalah kurang daripada kumpulan SAMP6. Walau bagaimanapun, kumpulan rawatan OS tidak menunjukkan peningkatan yang ketara untuk perubahan morfologi (Rajah 1A). Pewarnaan Goldner's Trichrome, Van Gieson (VG), dan Safranin O Fast Green dilakukan untuk mendedahkan pembentukan struktur tulang. Hasilnya menggambarkan bahawa tulang baru, serat kolagen, dan kondrosit dalam kumpulan TGs dan PSs telah diperbaiki berbanding dengan kumpulan SAMP6. Walau bagaimanapun, kumpulan rawatan OS tidak menunjukkan peningkatan yang ketara untuk perubahan struktur tulang (Rajah 1B–D).

Rajah 1. TGs dan PSs memperbaiki kerosakan histopatologi dalam tikus SAMP6.

3.2. TGs dan PSs mengubah biomarker perolehan tulang dalam tikus SAMP6

Apabila osteoporosis berlaku, tahap biomarker pembentukan tulang akan berkurangan dengan ketara, seperti serum BGP dan PICP. Sebaliknya, tahap biomarker yang dikaitkan dengan penyerapan tulang telah meningkat dengan ketara, termasuk serum TRACP dan S-CTX (Rajah 2). Sangat menggalakkan, kumpulan TG dan PSs boleh membalikkan tahap BGP, BALP, P1NP, PICP, ALP, S-CTX, TRACP, U-CTX, U-NTX, D-Pyr dan Pyr, tetapi OS tidak dapat.

Rajah 2. Kesan TGs dan PSs pada biomarker perolehan tulang dalam tikus SAMP6.

3.3. TG dan PS menggalakkan pembentukan tulang baru dan deposit kalsium dalam tikus SAMP6

Untuk menguji sama ada pembentukan tulang dan pemendapan mineral fosfat mungkin digalakkan oleh rawatan TG, PS, dan OS, pelabelan calcein tetracycline, dan pewarnaan Von Kossa telah dilakukan. Keputusan menunjukkan bahawa pembentukan tulang baru dalam tikus SAMP6 adalah jauh lebih rendah daripada tikus SAMR1, manakala TGs dan PSs menggalakkan pembentukan tulang baru dengan ketara (Rajah 3A). Pewarnaan Von Kossa mendedahkan bahawa banyak kalsium telah didepositkan dalam kumpulan rawatan TGs dan PSs (Rajah 3B).

Rajah 3. TGs dan PSs menggalakkan pembentukan tulang baru dan pemendapan mineral dalam tikus SAMP6.

3.4. TGs dan PSs memperbaiki microarchitecture tulang dalam tikus SAMP6

Seni bina mikro tulang telah dikesan oleh mikro-CT. Berbanding dengan tikus SAMR1, tikus SAMP6 mempunyai lebih banyak seni bina mikro yang merosot, manakala keadaan tulang pada tikus yang dirawat dengan TG dan PS selama 12 minggu telah bertambah baik (Rajah 4). Kami juga mendapati bahawa indeks BMD, BV/TV, Tb.N dan Tb. Th telah dikurangkan dan indeks Tb. Sp dan TMD telah meningkat dalam tikus SAMP6, berbanding dengan tikus SAMR1. TG dan PS meningkatkan BMD, BV/TV, Tb dengan ketara. N, Tb. Th dan Tb menurun. Sp dan TMD berbanding dengan tikus SAMP6. Walau bagaimanapun, tiada perubahan ketara diperhatikan dalam kumpulan OS.

3.5. TG dan PS mengubah ungkapan BMP-2, OCN, OPG dan RANKL dalam tetikus SAMP6

Kami memeriksa ungkapan protein BMP-2, OCN, OPG dan RANKL. TG dan PS mendorong peningkatan pengawalseliaan BMP-2, OCN dan OPG yang luar biasa, manakala ungkapan RANKL dikurangkan (Rajah 5). Walau bagaimanapun, tidak terdapat perbezaan yang signifikan dalam kumpulan terapi OS.

Rajah 4. Kesan TGs dan PSs pada ketumpatan mineral tulang dan microarchitecture tulang.

3.6. TG dan PS mengubah ungkapan p-GSK-3 (Ser9) dan p- -catenin dalam tikus SAMP6

Untuk memahami mekanisme TG dan PS yang menggalakkan osteoblastogenesis, ungkapan p-GSK-3 (Ser9) dan p- -catenin dalam tisu tulang tikus SAMP6 diukur menggunakan Western blotting (Rajah 6). Keputusan menunjukkan bahawa rawatan TGs dan PSs telah meningkatkan ekspresi p-GSK-3 (Ser9) dengan ketara dan mengurangkan ekspresi p- -catenin dalam femur berbanding dengan kumpulan SAMP6. Walau bagaimanapun, kumpulan rawatan OS tidak menunjukkan perubahan ketara.

4. Perbincangan

Dalam kerja semasa menggunakan tikus SAMP6 dan SAMR1 untuk mencari komponen berkesan daripada C. deserticola terhadap osteoporosis. Tiga ekstrak daripada C. deserticola digunakan untuk menilai kesan terapeutik, serta mekanisme yang mungkin. Selain itu, ungkapan RANKL, OPG, OCN dan BMP-2 serta pengawal selia penyerapan tulang lain turut dianalisis. Berbanding dengan kumpulan SAMP6, TGs dan PSs boleh memperbaiki kerosakan histopatologi tulang, serta menggalakkan pembentukan tulang baru, serat kolagen, kondrosit, dan pemendapan kalsium. Sementara itu, kedua-duanya boleh mengubah biomarker perolehan tulang, dan dengan berkesan meningkatkan struktur mikro tulang. Walau bagaimanapun, tiada kesan perlindungan diperhatikan untuk rawatan OS.

Rajah 5. TG dan PS mempromosikan ungkapan BMP-2, OCN dan OPG dan mengurangkan ungkapan RANKL.

TCM telah digunakan secara meluas untuk melegakan gejala banyak penyakit seperti osteoporosis. mengurangkan pelbagai gejala penyakit termasuk osteoporosis. Banyak sebatian bioaktif anti-osteoporotik telah dikenal pasti daripada berpuluh-puluh herba perubatan Cina semulajadi yang biasanya digunakan untuk menguatkan buah pinggang serta memelihara pati buah pinggang (Xu et al., 2017; Liu et al., 2018). C. deserticola mempunyai keselamatan yang agak tinggi dan pelbagai fungsi terapeutik untuk rawatan kekurangan buah pinggang. Banyak kajian penyelidikan telah menemui kesan terapeutik ekstrak C. deserticola terhadap osteoporosis (Li et al., 2012; Liang et al., 2013; Song et al., 2018).

Osteoblas pembentuk tulang dan osteoklas penyerap tulang, yang berasal dari pembezaan sel stem mesenchymal multipotensial (MSC), adalah sel yang dibezakan secara terminal dengan jangka hayat yang pendek (Teitelbaum dan Ross, 2003). Kedua-duanya perlu diganti secara berterusan dengan yang baru yang berasal daripada sel stem (Long, 2011). Laluan isyarat Wnt/ -catenin, yang memainkan peranan penting dalam pembezaan tisu tulang, merangsang pengeluaran osteoblas dengan menggalakkan orientasi dan pembezaan MSC berbilang potensi menjadi osteoblas (Rodda dan McMahon, 2006). Di samping itu, Wnts menghalang apoptosis osteoblas matang dan dengan itu memanjangkan jangka hayat mereka dengan kedua-dua laluan yang bergantung kepada katenin dan bebas (Almeida et al., 2005). Oleh itu, laluan isyarat Wnt/ -catenin memainkan peranan penting dalam menjelaskan patogenesis osteoporosis. Dalam eksperimen ini, tikus SAMP6 telah digunakan untuk mengkaji keberkesanan anti-osteoporotik daripada ekstrak C. deserticola yang berbeza. TG dan PS telah menurunkan secara ketara tahap RANKL dan p- -catenin dan mengawal selia BMP-2, OCN, OPG dan p-GSK-3 dengan ketara. Ringkasnya, kesan terapeutik TGs dan PSs pada tikus SAMP6 adalah terutamanya melalui mengaktifkan laluan isyarat Wnt/ -catenin.

Oleh kerana penyerapan osteoklas yang berlebihan merupakan punca penting osteoporosis, faktor-faktor yang dikaitkan dengan pengaktifan dan pembezaan osteoklas boleh dianggap sebagai tujuan penting untuk mencegah kehilangan tulang (Takatsuna et al., 2005). Dalam kajian kami, ungkapan RANKL telah dikawal dengan ketara, pada masa yang sama tahap OPG boleh dikawal selia oleh TG dan PS. Telah didokumentasikan dengan baik bahawa proses pembentukan tulang dan pembentukan semula pembezaan sel osteoblas dicirikan terutamanya oleh peningkatan ekspresi BMP-2 dan OPN (Canalis, 2009). Dalam kajian ini, kami mendapati bahawa TG dan PS C. deserticola meningkatkan BMP-2 dan ekspresi OPG serta mempertingkatkan mineralisasi tulang. Oleh itu, TG dan PS mengantara pembentukan tulang dengan menaikkan BMP-2 dan OPN serta menurunkan RANKL.

Penanda pembentukan tulang mencerminkan aktiviti sel membina tulang, penanda penyerapan tulang yang sama mencerminkan aktiviti osteoklas. Seni bina mikro merosot akibat daripada penanda pusing ganti tulang yang diubah. Dalam kajian kami, penanda penyerapan tulang (S-CTX, TRACP, U-CTX, D-Pyr, U-NTX, Pyr) telah dikurangkan dengan ketara dalam kumpulan TG dan PSs, sebaliknya, penanda pembentukan tulang (BGP, BALP , P1NP, PICP, ALP) meningkat dengan ketara. Oleh itu seseorang boleh melihat bahawa TG dan PS C. deserticola menggalakkan pembinaan semula tulang osteoporosis.

Laluan Wnt/ -catenin merangsang ekspresi penanda pembezaan osteoblas dan mineralisasi, pada masa yang sama ia mengaktifkan ekspresi faktor osteogenik induk BMP-2 dalam osteoblas (Zhang et al., 2013). Di samping itu, -catenin meningkatkan ekspresi OPG dalam osteoblas, yang secara tidak langsung menindas pembezaan osteoklas dengan menghalang penyerapan tulang (Baron dan Kneissel, 2013). Kajian semasa kami menunjukkan bahawa TG dan PS dengan ketara meningkatkan pengawalseliaan p-GSK-3 dan menurunkan tahap p- -katenin. Keputusan ini menyokong kesimpulan bahawa fungsi TG dan PS pada anti-osteoporotik dikawal melalui pengaktifan laluan isyarat Wnt/ -catenin.

Analisis HPLC kami sebelum ini menunjukkan bahawa lima glikosida phenylethanoid termasuk echinacoside, cistanoside A, acteoside, isoacteoside, dan 2'-acetylacteoside adalah komponen utama dalam TGs (Li et al., 2019; Shi et al., 2019). Struktur lima glikosida fenilethanoid di atas semuanya kaya dengan kumpulan hidroksil fenolik, yang bertanggungjawab terhadap sifat antioksidan C. deserticola (Chen et al., 2016). Telah dilaporkan bahawa meningkatkan sistem antioksidan boleh menghalang kehilangan tulang, oleh itu glikosida phenylethanoid ini boleh menjadi komponen aktif yang berpotensi C. deserticola yang bertanggungjawab untuk aktiviti anti-osteoporotik. Terdapat laporan bahawa echinacoside dan acteoside boleh memperbaiki ciri patologi tipikal osteoporosis, seperti, meningkatkan kualiti tulang dan jumlah BMD femur, menggalakkan pembentukan tulang, dan menghalang penyerapan tulang (Chen et al., 2020). Di samping itu, echinacoside mempunyai kesan anti-osteoporotik yang menarik (Li et al., 2013). Kajian terdahulu menunjukkan bahawa cistanoside A boleh menggalakkan pembentukan tulang dan mencegah penyerapan tulang melalui menghalang NF-κB dan mengaktifkan laluan PI3K/Akt (Xu et al., 2017). Kesan anti-osteoporotik C. deserticola polysaccharides belum dilaporkan. Walau bagaimanapun, kajian lain telah menunjukkan bahawa polisakarida astragalus boleh menekan ekspresi RANKL, meningkatkan tahap OPG serum dan akhirnya menyekat pembezaan osteoklas (Huo dan Sun, 2016; Hwang et al., 2018). OS C. deserticola terutamanya terdiri daripada manitol, betaine, fruktosa, glukosa dan sukrosa (Shi et al., 2019), yang tidak mempunyai laporan untuk aktiviti anti-osteoporotik, oleh itu, OS tidak mempunyai kesan terapeutik terhadap osteoporosis. Secara ringkasnya, TG dan PS adalah komponen aktif dalam C. deserticola untuk kesan anti-osteoporosis.

Serbuk suplemen herba cistanchemempunyaikesan anti-osteoporosis.

Untuk maklumat lanjut, sila klik di sini.

5. Kesimpulan

Kesimpulannya, TG dan PS daripada C. deserticola boleh meningkatkan pembentukan tulang dalam tikus SAMP6 melalui mengawal selia laluan isyarat Wnt/ -catenin tetapi bukan OS. Pada masa hadapan, TG dan PS mungkin menjadi agen terapeutik pelindung tulang yang menjanjikan untuk osteoporosis.