Kesan Terapeutik Cistanche Deserticola Terhadap Buang Air Besar Dalam Model Tikus Sembelit Nyanyuk
Mar 27, 2022
Hubungi:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791
Xia Zhang, Fa-Juan Zheng, Zhen Zhang
Abstrak
LATAR BELAKANG
Sembelit adalah salah satu penyakit fungsi gastrousus kronik. Ia serius menjejaskan kualiti hidup. Cistanche deserticola (C. deserticola) boleh merawat sembelit dengan jelas, tetapi mekanismenya belum dijelaskan. Kami mengandaikan bahawa mekanismenya meningkatkan motilitas usus dengan merangsang sel Cajal celahan (ICC). Pengaktifan reseptor C-kit pada permukaan ICC berkait rapat dengan fungsi ICC, dan laluan isyarat faktor sel stem (SCF)/C-kit memainkan peranan penting di dalamnya. Untuk menyiasat mekanisme bagaimana C. deserticola merawat sembelit, kajian ini bertujuan untuk mewujudkan model sembelit pada tikus dan meneroka peranan laluan isyarat SCF/C-kit dalam rawatan.
AIM
Untuk meneroka laluan isyarat SCF/C-kit dalam peranan C. deserticola untuk merawat sembelit oleh model tikus sembelit.
KAEDAH
Empat puluh lapan 8-tikus Sprague–Dawley mo-old telah dibahagikan kepada 4 kumpulan mengikut kaedah rawak: Kumpulan normal (n=12), kumpulan model (n=12), kumpulan C. deserticola (n=12) dan kumpulan penyekat (n=12). Kumpulan normal menerima bygavage garam biasa; kumpulan model menerima loperamide secara gavage; kumpulan penyekat menerima loperamide dan C. deserticola secara gavage, dan STI571 disuntik secara intraperitoneal. Semasa rawatan, berat, butiran tahi, dan kualiti tahi direkodkan setiap 10 hari. Pada hari ke-20 selepas induksi model, tisu kolon setiap kumpulan telah dikeluarkan. Pewarnaan hematoksilin dan eosin digunakan untuk memerhatikan perubahan epatologi. Tahap ekspresi gen SCF, C-kit, dan Aquaporin telah dikesan oleh imunohistokimia, western blotting, dan tindak balas rantai polimerase kuantitatif masa nyata. Mitokondria epitelium kolon dan sel goblet diperhatikan oleh mikroskop elektron penghantaran.
KEPUTUSAN
Berbanding dengan kumpulan biasa, semasa rawatan berlangsung, berat tikus dalam model dan kumpulan penyekat menurun dengan ketara, berat najis menurun, dan kualiti najis adalah kering (P < {{0}}}.{{6}="" }5).="" c.="" deserticola="" membalikkan="" penurunan="" berat="" badan="" dan="" berat="" najis="" dan="" meningkatkan="" kualiti="" najis.="" analisis="" histopatologi="" menunjukkan="" bahawa="" epitelium="" mukosa="" kolon="" dalam="" kumpulan="" model="" tidak="" lengkap,="" dan="" susunan="" kelenjar="" adalah="" tidak="" teratur="" atau="" rosak.="" rawatan="" dengan="" c.="" deserticola="" meningkatkan="" integriti="" dan="" kesinambungan="" sel="" epitelium="" dan="" susunan="" kelenjar="" yang="" teratur.="" agen="" penyekat="" menghalang="" kesan="" c.="" deserticola="" immunohistochemistry="" dan="" tindak="" balas="" rantai="" polimerase="" kuantitatif="" masa="" nyata="" menunjukkan="" bahawa="" ekspresi="" scf="" dan="" c-kitprotein="" atau="" gen="" dalam="" tisu="" kolon="" kumpulan="" model="" telah="" menurun="" (p=""><0.05), manakala="" rawatan="" dengan="" c.="" deserticola="" meningkatkan="" ekspresi="" protein="" atau="" gen="" (p="">< 0.05).="" pembuangan="" barat="" menunjukkan="" bahawa="" ekspresi="" aquaporin="" apq3="" meningkat,="" manakala="" ekspresi="" cx43="" menurun="" dalam="" kumpulan="" model.="" rawatan="" dengan="" c.="" deserticolainhibited="" ekspresi="" apq3="" dan="" ekspresi="" digalakkan="" cx43.="" mikroskopi="" penghantaran="" elektron="" menunjukkan="" bahawa="" mitokondria="" epitelium="" kolon="" dalam="" kumpulan="" model="" membengkak="" dan="" tersusun="" secara="" tidak="" teratur,="" dan="" mikrovili="" adalah="" jarang.="" keadaan="" ini="" lebih="" baik="" dalam="" kumpulan="" c.="" deserticola.="" tikus="" yang="" dirawat="" dengan="" penyekat="" sti571="" mengesahkan="" bahawa="" menyekat="" laluan="" scf/c-kit="" menghalang="" peningkatan="" sembelit="" oleh="" c.="">
KESIMPULAN
C. deserticola meningkatkan pembuangan air besar pada tikus dengan sembelit, dan laluan isyarat SCF/C-kit, yang merupakan pautan utama fungsi ICC, memainkan peranan penting dalam rawatan.
Kata kunci:Cistanche deserticola; Sembelit nyanyuk; Faktor sel punca; C-kit
bahan mentah cistanche segar
PENGENALAN
Sembelit nyanyuk (SC) adalah salah satu daripada penyakit gastrousus kronik yang biasa di kalangan pesakit geriatrik, yang mendorong atau memburukkan lagi kejadian serebrovaskular dan penyakit lain dan menjejaskan kualiti hidup penduduk tua secara serius[1,2]. Menurut perubatan tradisional Cina, yang utama. etiologi dan patogenesis haba gastrousus SCare, kekurangan Yin dan Jin, dan de-pembasahan usus[3,4], manakala Cistanche deserticola (C. deserticola) boleh memanaskan buah pinggang dan melegakan usus. Penyelidik telah melaporkan bahawa kesan usus peningkatan motilitas dan rawatan SC adalah jelas, tetapi mekanismenya belum dijelaskan [5,6]. Interstitial Cajalcells (ICCs) ialah sejenis sel mesenkim khas dalam saluran gastrousus.Pengaktifan reseptor C-kit pada permukaan ICCs berkait rapat dengan percambahan sel, pembezaan dan fungsi. ICC mengambil bahagian dalam patogenesis banyak disfungsi motor gastrousus [7,8]. Pengaktifan C-kit bergantung pada pengikatan faktor sel stem ligan (SCF)[9]. Untuk menyiasat kesan dan mekanisme tindakan C. deserticola pada SC, kajian ini bertujuan untuk mewujudkan model SC dalam tikus yang disebabkan oleh byloperidol untuk meneroka peranan laluan isyarat SCF/C-kit dalam rawatan sembelit oleh C. deserticola.
BAHAN DAN KAEDAH
Bahan eksperimen
Haiwan eksperimen:Haiwan eksperimen ialah 48 ekor tikus jantan 8-mo-old Sprague Dawley seberat 500-550 g; semuanya dibeli daripada Changsha Tianqin BiotechnologyCo. Ltd. Tikus dibesarkan di makmal haiwan Chongqing Weisiteng BiomedicalTechnology Co. Ltd., diberi cahaya siang dan malam biasa, makanan dan minuman. Semua prosedur mematuhi garis panduan pengurusan yang dikeluarkan oleh Jawatankuasa Etika Hospital Perubatan Tradisional Cina Chongqing.
Reagen primer:Reagen utama termasuk loperamide (Sigma, St. Louis, MO, Amerika Syarikat), C. deserticola dari Hubei Jurui Perubatan Tradisional Cina DecoctionCo. Ltd., STI571 daripada Chinese Selleck Co. Ltd. dan SCF, C-kit, connexin 43 (Cx43), aquaporin 3 (AQP3) dan antibodi -actin (Abcam, Cambridge, MA, Amerika Syarikat), PrimeScript II 1st Strand cDNA Kit Sintesis dan Premix Taq™ (Ex Taq™ Versi 2.0)(Takara Co. Ltd., Jepun).
suplemen ekstrak herba cistanche
Kaedah
Penyediaan dan pengelompokan model SC:Untuk mengelakkan pengaruh faktor yang mengelirukan seperti berat badan ke atas keputusan eksperimen, tikus dikumpulkan secara rawak mengikut kaedah kumpulan rawak blok. Empat puluh lapan tikus diberi makan secara adaptif selama 1 minggu, dan tikus dinomborkan mengikut urutan berat dari ringan ke berat. Mengikut susunan berat badan, tikus dibahagikan kepada 12 zon (berat tikus di setiap zon adalah serupa), dengan 4 tikus di setiap zon. 12 zon dibahagikan kepada 4 kumpulan 12 (normal, model, C. deserticola, dan penyekat). Tikus dalam kumpulan model diberi loperamide (0.0625/100 g, 10 mL/kg) secara gavage. Dos gavage pertama digandakan, dan ubat itu diberikan pada pukul 10:00 setiap hari, sekali sehari selama 20 hari berturut-turut. Kumpulan normal diberi jumlah garam biasa yang sama secara gavage. Di samping itu, kumpulan model telah dirawat dengan C. deserticola (0.156 g/100 g, 10 ml/kg) secara gavage. Kumpulan penyekat diberi C. deserticola (0.156 g/100 g, 10 mL/kg) secara gavage dan STI571(25 mg/mL, 1 mL/kg) melalui suntikan intraperitoneal. Semasa eksperimen, berat badan, berat najis, dan keadaan najis direkodkan setiap 10 hari. Tiada kematian secara tidak sengaja berlaku pada mana-mana tikus. Dua puluh hari kemudian, tikus dibunuh, dan tisu kolon telah dikeluarkan untuk pemeriksaan dan pemeliharaan nitrogen cecair. Bahagian selebihnya telah diperbaiki dan dibenamkan.
Analisis histopatologi:Tikus yang berpuasa semalaman telah dibius dengan suntikan intraperitoneal dengan 7 peratus kloral hidrat (5 mL/kg) pada hari berikutnya. Perut dibuka untuk memisahkan tisu kolon dan 8-10 mm kolon telah dikeluarkan. Kandungan usus dikeluarkan dengan menggoncang perlahan-lahan dalam polybutylenesuccinate yang telah disejukkan dan difikatkan selama 24 jam dalam larutan fiksatif paraformaldehid 4 peratus. Pembenaman parafin konvensional telah dilakukan. Bahagian tisu (5 μm) telah dikeluarkan untuk pewarnaan forhematoxylin dan eosin, dan morfologi histopatologi diperhatikan di bawah mikroskop.
Pengesanan ekspresi SCF dan C-kit dengan pewarnaan imunohistokimia:Tisu parafin yang diperiksa oleh histopatologi di atas dibelah, dihidratkan semula dengan etanol kecerunan xilena dewaxed, antigen dipulihkan dengan haba, dan dimeterai selama 1 jam dengan serum kambing pada suhu bilik. Antibodi utama SCF dan C-kit ditambah setitik, dan tisu disimpan semalaman pada suhu 4 darjah . Selepas dibilas dengan polybutylenesuccinate, peroksidase lobak pedas digugurkan untuk melabel antibodi sekunder, dibilas dengan polybutylene succinate selama 5 minit, titiskan 2,4-diaminobutyric acid chromogensolution, pewarna semula dengan hematoxylin, dehidrasi alkohol kecerunan terbalik, telus oleh xilena dan neutral meterai resin. Secara mikroskopik, nukleus berwarna biru keunguan, dan hasil positif adalah zarah kuning keperangan atau kuning.
Pengesanan ekspresi mRNA C-kit dalam tisu kolon dengan tindak balas rantai polimerase kuantitatif masa nyata (RT-qPCR):Tisu kolon tikus beku dikisar dengan homogenizer, dan 1 mL RNAiso Plus ditambah. Jumlah RNA tisu kolon telah diekstrak dengan kaedah kloroform/isopropanol, dan kualiti RNA dikesan oleh elektroforesis bygel. Selepas dikenal pasti oleh pengimej gel Bio-Rad, 1 ug RNA telah ditranskripsikan semula ke dalam cDNA oleh Kit Sintesis cDNA Tali Pertama Takara PrimeScript II. Menurut pangkalan data NCBI ID Gen: 64030, rantau CDS bagi gen C-kit ditemui dan digabungkan dengan Reka bentuk Primer-Blast NCBI Urutan Primer, yang telah disintesis oleh Sangon Biotech Co. Ltd, C-kit urutan primer helai deria 5'-AGGT GTACCGTTCCTGTCCC-3', helai antisense 5'-GGCTGGATTTGCTCTTTGCTGT-3', - helai deria actin 5'-CTTCCTTCCTGGGTATGGAATC-3', helai antisense 5'-CTGTGTTGGCATAGAGGTCTT-3'. Penguatan PCR dilakukan pada instrumen PCR Masa Nyata Bio-RadCFX90. Syarat-syarat untuk ujian PCR ialah denaturasi awal pada 95 darjah selama 5 minit, 30 kitaran 95 darjah selama 30 saat, 60 darjah selama 30 saat dan 72 darjah selama 1 minit diikuti dengan lanjutan akhir pada 72 darjah selama 10 minit. 2-ΔΔCt (ΔCt=Nilai Ct - -actin Ctvalue) telah diambil untuk menganalisis ekspresi gen relatif.
Pengesanan tahap ekspresi protein Cx43 dan AQP3 dalam tisu kolon oleh Western blotting:Kira-kira 1 cm tisu kolon beku dikumpul dan dilisiskan dengan cecair pirolisis kuat RIPA (100 μL). Tisu dihomogenkan dengan glasshomogenizer 20 kali dan dipindahkan ke tiub emparan 1.5 mL. Supernatan diekstrak selepas sentrifugasi pada 12000 rpm pada 4 darjah selama 5 minit, dan kepekatan jumlah protein dalam supernatan ditentukan oleh kaedah BCA. Kami mengeluarkan protein denatured 25ug untuk melakukan elektroforesis gel sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide dan kemudian memindahkan protein dalam gel ke polyvinylidene fluoridemembrane pada arus malar 200 mA kemudian dimeterai oleh 5 peratus cecair terkurung susu skim selama 2 jam pada suhu bilik. Antibodi primer yang sepadan telah dicairkan dengan cecair pengedap, diinkubasi pada 4 darjah semalaman, kemudian mencuci rintangan membran dan menambah antibodi kedua. Selepas menambah cecair ECL, mereka diletakkan di bawah meter pendedahan untuk ujian oleh analisis ketumpatan optik.
Mikroskopi elektron penghantaran:Kami mengambil kira-kira 1 cm tisu kolon proksimal, membetulkannya dalam 2.5 peratus glutaraldehid selama 24 jam, menyahhidratnya dengan aseton terperingkat, membenamkan dalam Epon812, dan memotong bahagian ultranipis 50 nm pada ultramikrotom. Bahagian tersebut diwarnakan dengan uranium dioksida asetat dan cecair pencelup sitrat plumbum pada suhu bilik selama 10 minit. Kami memerhatikan vili kolon, mitokondria sel epitelium dan sel goblet di bawah mikroskop elektron penghantaran Philips Tecnai-10.
Analisis statistik
Perisian SPSS 19.0 digunakan untuk analisis data dan perisian GraphPad Prism8.4 digunakan untuk memplot keputusan. Ujian Shapiro-Wilk digunakan untuk ujian normaliti. Data dengan taburan normal diwakili oleh min ± SD. Item ralat digunakan untuk mewakili min ± SD hemoglobin selepas rawatan. Ujian-t pelajar digunakan untuk perbandingan antara dua kumpulan. Analisis varians digunakan untuk perbandingan antara berbilang kumpulan. Kaedah Student-Newman-Keuls digunakan untuk perbandingan antara berbilang kumpulan secara berpasangan, dan ujian Dunnett digunakan untuk mengukur perbezaan antara setiap kumpulan eksperimen dan kumpulan kawalan dalam urutan. Data yang berkaitan diukur dengan berbilang titik masa, dan pengukuran berulang analisis data varian adalah dijalankan. Jika ujian sfera menunjukkan P > 0.{{10}}5,analisis data ukuran berulang bagi varians telah digunakan. Jika P <0.05, persamaan="" anggaran="" umum="" telah="" diambil.="" data="" yang="" tidak="" mematuhi="" taburan="" normal="" diwakili="" oleh="" m="" (p25,="" p75),="" dan="" ujian="" jumlah="" pangkat="" kruskal-wallis="" h="" digunakan="" untuk="" perbandingan="" antara="" kumpulan.="" ujian="" χ2="" digunakan="" untuk="" membandingkan="" antara="" kumpulan="" apabila="" data="" adalah="" data="" tidak="" tertib,="" dan="" ujian="" χ2="" pearson="" digunakan="" jika="" perkadaran="" sel="" dengan="" frekuensi="" teori="">< 5="" adalah="">< 20="" peratus.="" jika="" perkadaran="" sel="" dengan="" kekerapan="" teori="">< 5="" adalah="" lebih="" besar="" daripada="" atau="" sama="" dengan="" 20="" peratus="" ,="" ujian="" tepat="" fisher="" digunakan.="" p=""><0.05 digunakan="" untuk="" menentukan="" bahawa="" perbezaan="" adalah="" signifikan="" secara="">
Rajah 1 Perubahan histopatologi kolon.
KEPUTUSAN
Syarat am
Satu hari selepas gavage loperamide berbanding dengan kumpulan biasa, berat badan dan berat najis dalam kumpulan model telah berkurangan dengan ketara (P < {{0}}.05),="" tetapi="" tiada="" perbezaan="" yang="" ketara="" dalam="" kualiti="" najis.="" skor="" (p=""> 0.05). C. deserticolatreatment dalam kumpulan model memperlahankan penurunan berat badan dan berat najis (P< 0.05),="" but="" the="" bodyweight="" in="" the="" blocker="" group="" was="" not="" significantly="" reduced.="" after="" 10="" d="" of="" treatment,="" compared="" with="" the="" normal="" group,="" the="" body="" weight="" and="" stool="" volume="" of="" rats="" in="" the="" model="" group="" were="" further="" significantly="" reduced,="" and="" the="" stools="" were="" dry="" and="" almost="" contained="" no="" water="" (p="" <="" 0.05).="" the="" body="" weight="" loss="" of="" rats="" was="" also="" significantly="" reduced="" by="" treatment="" with="" c.="" deserticola="" (p="" <="" 0.05).="" the="" bodyweight="" of="" rats="" in="" the="" blocker="" group="" was="" not="" significantly="" different="" from="" that="" in="" the="" model="" group="" (p="" >="" 0.05).="" on="" day="" 20="" before="" sampling,="" the="" bodyweight="" of="" rats="" in="" the="" model="" group="" was="" significantly="" lower="" than="" that="" in="" the="" normal="" group,="" and="" the="" stool="" quality="" score="" was="" significantly="" increased="" (p="" <="" 0.05),="" while="" the="" weight="" loss="" caused="" by="" constipation="" was="" inhibited="" by="" c.="" deserticola="" treatment,="" and="" the="" stool="" quality="" score="" was="" decreased="" (p="" <="">
Histopatologi kolon
Pewarnaan hematoksilin dan eosin pada tisu kolon tikus ditunjukkan dalam Rajah 1. Dalam kumpulan normal, vili usus adalah utuh, mukosa usus adalah utuh dan berterusan, sel dan kelenjar disusun secara teratur. Mukosa dan submukosa tidak disusupi oleh sel-sel radang, dan struktur tisu adalah normal. Dalam kumpulan model, vili usus dan mukosa sebahagian besarnya dimusnahkan, vili tempatan dibuang dan tersusun longgar, dan sebahagian daripada struktur kelenjar hilang. Dalam kumpulan C. deserticola, pewarnaan histopatologi adalah kurang daripada kumpulan model, tetapi terdapat nekrosis dalam sel somegoblet. Selepas suntikan intraperitoneal dalam kumpulan penyekat, berbanding dengan kumpulan C.deserticola, masih terdapat kehilangan tempatan vili usus, dan terdapat patah tulang dan kehilangan mukosa usus.
Rajah 2 Ungkapan faktor sel stem dan nisbah ketumpatan optik relatif dalam tisu kolon melalui pengesanan imunohistokimia.
Pengesanan ekspresi faktor sel stem dan protein C-kit melalui pewarnaan imunohistokimia
Pewarnaan imunohistokimia menunjukkan bahawa SCF dan C-kit telah dinyatakan dalam kolon kumpulan kawalan. Berbanding dengan kumpulan kawalan, ekspresi SCF dan C-kit dalam kumpulan model telah menurun dengan ketara (P < 0.05).="" berbanding="" dengan="" kumpulan="" model,="" ekspresi="" scf="" dan="" c-kit="" dalam="" kumpulan="" c.="" deserticola="" telah="" meningkat="" dengan="" ketara="" (p="">< 0.05).="" tiada="" perbezaan="" dalam="" ekspresi="" scf="" dan="" c-kit="" antara="" kumpulan="" penyekat="" dan="" model="" (p=""><0.05, rajah="" 2="" dan="">
RT-qPCR
RT-qPCR showed that expression of C-kit mRNA in the model group was significantly lower than in the normal group (Figure 4, P < 0.05). Compared with the model group, C-kit in the C. deserticola group was significantly increased (P < 0.05). There was no significant difference in C-kit mRNA level between the model and blocker groups (P >0.05). Keputusan ini menunjukkan bahawa ungkapan C-kit yang diselaraskan oleh C. deserticola mengambil bahagian dalam penambahbaikan sembelit, dan penyekat menghalang keberkesanan C. deserticola.
faedah cistanche salsa
Western blotting
Western blotting menunjukkan bahawa protein AQP3 dinyatakan pada tahap rendah dalam kumpulan kawalan biasa, manakala ia meningkat dengan ketara dalam kumpulan model berbanding dengan kumpulan kawalan (Rajah 5) (P < 0.05)="" .="" ekspresi="" protein="" aqp3="" telah="" berkurangan="" selepas="" rawatan="" dengan="" c.="" deserticola,="" dan="" kesan="" perencatan="" c.deserticola="" pada="" ekspresi="" aqp3="" telah="" dihalang="" oleh="" rawatan="" penyekat="" (p=""><0.05). ekspresi="" cx43="" adalah="" bertentangan="" dengan="" aqp3.="" keputusan="" ini="" mencadangkan="" bahawa="" kesan="" farmakologi="" c.="" deserticola="" pada="" tikus="" dengan="" sc="" telah="" dicapai="" dengan="" mempromosikan="" ungkapan="" cx43="" dan="" menghalang="" ekspresi="" aqp3="" (rajah="">
Mikroskopi elektron penghantaran
Selepas induksi loperamide, pembengkakan mitokondria dan autophagy berlaku dalam beberapa sel epitelium mukosa kolon dalam kumpulan model. Bilangan dan panjang mikrovili usus berkurangan, dan piknosis sel goblet berlaku (Rajah 8). Selepas rawatan dengan C. deserticola, bilangan mikrovili usus meningkat. Themicrovilli disusun dengan kemas, dan strukturnya lengkap. Sel goblet panjangnya lebih pendek, morfologi mitokondria yang tidak teratur, dan pyknosis sel goblet yang teruk.
Rajah 3 Ungkapan C-kit dan nisbah ketumpatan optik relatif dalam tisu kolon melalui pengesanan imunohistokimia.
PERBINCANGAN
Sembelit adalah perkara biasa dalam populasi warga emas dan merupakan salah satu gejala biasa yang menjejaskan status kesihatan dan kualiti hidup orang tua [10,11]. Interm perubatan tradisional Cina, Bai et al[12] percaya bahawa patogenesis asas SC adalah disfungsi fungsi pengaliran usus besar, kegagalan badan nyanyuk, kehilangan fungsi hati dan buah pinggang secara beransur-ansur, kekurangan qi dan darah, dan kehilangan cecair badan. ,yang menyebabkan najis kering, mengakibatkan sembelit[13]. SC memberi tekanan kepada pesakit dan keluarga mereka dalam banyak aspek, dan adalah penting untuk meneroka patogenesisnya.
C. deserticola mempunyai fungsi menguatkan buah pinggang Yang, memberi manfaat kepada darah, dan mengawal imuniti badan[14]. C. deserticola dan rebusan herba Cina yang mengandungiC. deserticola telah digunakan secara meluas dalam rawatan sembelit, dan kesan klinikal adalah luar biasa. Du et al[15] mendapati dalam model tikus kekurangan Yang dan sembelit bahawa C. deserticola meningkatkan amplitud penguncupan kolon terpencil, menguatkan pengecutan saluran usus, dan mengembalikan tahap hormon gastrousus kepada normal. Di samping itu, serat makanan C. deserticola, hasil sampingan pemprosesan C. deserticola, meningkatkan kapasiti pegangan air najis dan mempunyai kelebihan dos yang rendah dan kesan yang baik dalam menyuburkan usus dan meningkatkan pembuangan air besar[16]. Kajian kami mendapati bahawa rawatan C. deserticola meningkatkan kelembapan tahi dan histopatologi kolon tikus dengan sembelit.
ICC ditemui di seluruh saluran usus dan memainkan peranan penting dalam kawalan saraf pergerakan usus sebagai perentak jantung dan penghantaran saraf usus [17]. Reseptor pengekodan proto-onkogen kinase tyrosine kinase, C-kit, dinyatakan oleh ICC, dan SCFis ligan daripada C-kit[18]. Sistem SCF/C-kit adalah penting dalam pembangunan ICC. Laluan isyarat SCF/C-kit telah dianalisis semasa rawatan sembelit pemindahan perlahan pada tikus melalui akupunktur[19]. Electroacupuncture di Tianshu point meningkatkan bilangan ICC kolon dalam ACK2-tikus yang dirawat, ekspresi terkawal protein SCF dan C-kit, dan membalikkan fenotip ICC. Preskripsi untuk qi dan limpa yang mencergaskan boleh meningkatkan ekspresi ICC dalam tisu kolon dan mengimbangi ekspresi C-kit dan mRNA SCF, sekali gus memperbaiki gejala sembelit[20]. Dalam kajian kami, imunohistokimia menunjukkan bahawa C. deserticola secara signifikan mengimbangi ekspresi SCF dan C-kit protein dalam model tikus SC, danRT-qPCR menunjukkan bahawa C. deserticola secara signifikan mengimbangi ekspresi C-kitmRNA. Penyekat C-kit menghalang regulasi ekspresi SCF dan C-kit yang disebabkan oleh C. deserticola.
Kandungan air tahi dan pengangkutan air kolon berkait rapat dengan AQP, yang memainkan peranan penting dalam metabolisme air usus[21]. Dalam kajian tikus dengan sembelit pengangkutan perlahan, Merebus Buang Air Besar telah meningkatkan gejala sembelit dengan ketara dengan mengawal selia penyerapan air usus melalui menurunkan kawal selia AQP3 dan AQP4[22]. Dalam model tikus sembelit berfungsi, mekanisme rawatan Cecair Xiaofu Tongjie Lisan untuk sembelit berfungsi boleh direalisasikan dengan mengawal selia ekspresi polipeptida usus vasoaktif dan AQP3 dalam kolon[23]. Gapjunctions memainkan peranan penting dalam pengantaraan pengecutan segerak sel otot licin. Cx43 ialah protein terpenting semasa proses tersebut[24]. Kehilangan ekspresi Cx43 mungkin sebahagiannya bertanggungjawab untuk disfungsi motor otot licin[25]. Pembaikan struktur rangkaian sistem saraf usus pada tikus dengan transitsembelit yang perlahan boleh meningkatkan ekspresi Cx43 dsb. dan simptom sembelit[26]. Keputusan ini menunjukkan peningkatan peningkatan. Ekspresi AQP3 mengurangkan kandungan air tahi, membawa kepada sembelit, yang mungkin merupakan mekanisme penting sembelit. Ekspresi Cx43 mungkin berkaitan dengan pengecutan otot licin usus dan mengurangkan kejadian sembelit. Dalam kajian kami, western blotting menunjukkan bahawa ekspresi Cx43 telah meningkat dan ekspresi AQP3 telah dihalang oleh rawatan C.deserticola, yang mengakibatkan peningkatan penguncupan otot licin dan penyerapan air yang berkurangan, dan rawatan penyekat membalikkan kesan ini.
Untuk maklumat lanjut, sila klik di sini.
KESIMPULAN
Kesimpulannya, C. deserticola boleh menghalang ekspresi AQP3 dan menggalakkan ekspresi Cx43 melalui laluan SCF/C-kit, dengan itu meningkatkan sembelit yang disebabkan oleh loperamine dan mengurangkan kerosakan tisu kolon pada tikus tua. Kajian ini menyediakan asas teori yang baik untuk kegunaan klinikal C. deserticola.
