Kajian Ekstrak Cistanche Deserticola Mengawal M2 Seperti Polarisasi Makrofaj Untuk Mengurangkan Migrasi Sel Dan Pembentukan Koloni dalam Kanser Payudara

Abstrak: Objektif Meneroka mekanisme pengawalseliaan ekstrak etanol Cistanche deserticola epimedium brevican pada polarisasi Makrofaj secara in vitro dan kesannya terhadap M{0}}seperti makrofaj yang menggalakkan penghijrahan sel 4T1 dan pembentukan koloni. Kaedah Kaedah CCK-8 digunakan untuk mengesan kesan kepekatan berbeza ekstrak etanol Cistanche deserticola deserticola terhadap aktiviti makrofaj terbitan sumsum tulang (BMDM), dan menentukan kepekatan selamat ekstrak etanol Cistanche deserticola deserticola deserticola; Western blotting dan qRT PCR digunakan untuk mengesan kesan ekstrak etanol Cistanche deserticola deserticola pada ekspresi arginase-1 (Arg-1) dan CD163, penanda M2 seperti makrofaj; QRT PCR digunakan untuk mengesan kesan ekstrak alkohol Cistanche deserticola deserticola pada zon radang 1 (Fizz1) dan reseptor diaktifkan proliferator peroksisom (PPAR) gen berkaitan makrofaj berkaitan Tumor (TAM) M2 (penerima diaktifkan peroksisom-proliferator, PPAR). ）, Kesan Chitinase 3-seperti 3 (Ym1), kemokin 24 (CCL24), makrofaj Galaktosa jenis C-jenis Lectin 2 (MGL2) dan ekspresi mRNA faktor pengawalseliaan interferon 4 (IRF4); Kesan ekstrak etanol Cistanche deserticola deserticola pada M2 TAM yang menggalakkan migrasi Sel 4T1 telah dikesan melalui ujian calar; Kesan ekstrak etanol Cistanche deserticola deserticola terhadap pertumbuhan sel 4T1 yang dirangsang oleh M2 TAMs telah dikesan melalui eksperimen koloni. Keputusan menunjukkan bahawa ekstrak etanol daripada Epimedium tidak mempunyai kesan toksik atau sampingan pada sel BMDM pada kepekatan 0.015 625 hingga 2.000 000 mg/mL; Ekstrak etanol Cistanche deserticola dengan ketara menghalang gen berkaitan M2 TAMs Arg{{ 36}}, CD163, Fizz1, PPAR , Ungkapan CCL24, Ym1, MGL2 dan IRF4 (P<0.05, 0.01, 0.001) inhibited the migration and colony formation ability of M2-TAMs in 4T1 cells (P<0.05, 0.001). Conclusion The ethanol extract of Cistanche deserticola can weaken the promotion of M2-like macrophages on 4T1 Cell migration and colony formation, and its mechanism may be related to the inhibition of M2-type polarization of macrophages.

Kata kunci: Cistanche deserticola; Makrofaj; polarisasi M2; Kanser payudara; Penghijrahan; Pembentukan koloni; Asid benzoin; Koniferil aldehid; Emodin; Asid vanillik

Kesan Cistanche-Antitumor

Kanser payudara ialah tumor malignan utama yang membahayakan kesihatan wanita, dan juga penyebab kedua utama kematian akibat kanser di dunia [1-2]. Pada peringkat akhir kanser payudara, terdapat metastasis paru-paru dan hati. Apabila metastasis organ berlaku, kadar survival dan kualiti hidup pesakit akan sangat berkurangan [3]. Rawatan barisan pertama kanser payudara terutamanya bergantung kepada kemoterapi antrasiklin, paclitaxel, dan ubat sitotoksik lain, tetapi rintangan dadah sering berlaku semasa rawatan. Oleh itu, adalah sangat penting untuk meneroka mekanisme patologi kanser payudara dan mencari kaedah rawatan yang berkesan. Makrofaj adalah penting untuk kejadian dan perkembangan pelbagai tumor [4-5], dan penanda bio makrofaj boleh berfungsi sebagai penunjuk prognostik. Kadar penyusupan makrofaj yang tinggi adalah berkaitan dengan prognosis buruk kanser payudara. Makrofaj berkaitan tumor (TAM) adalah jenis sel imun yang menyusup tumor yang paling tipikal. Mereka memainkan peranan penting dari kanser awal kanser payudara kepada perkembangan, terutamanya metastasis [6]. TAM terlibat dalam metastasis, angiogenesis, pembentukan semula matriks, pencerobohan, dan imunosupresi kanser payudara. Perubatan tradisional Cina memainkan peranan penting dalam keseluruhan rawatan kanser payudara. Perubatan tradisional Cina mempunyai ciri-ciri berbilang komponen, laluan, dan sasaran, yang boleh mengurangkan pengulangan dan kadar metastasis pesakit tumor, meningkatkan kualiti hidup mereka, dan memanjangkan masa hidup mereka. Cistanche deserticola deserticornu Maxim. Ia adalah tumbuhan Berberidaceae dari Ranunculales. Rasanya manis dan manis, sifatnya hangat, dan mengikuti dua saluran hati dan buah pinggang. Ia mempunyai kesan menguatkan otot dan tulang, menguatkan buah pinggang, melindungi sistem kardiovaskular [7], menggalakkan pembentukan tulang [8], mengawal kapasiti imun [9], dan menghalang kanser [10]. Penyelidikan menunjukkan bahawa ekstrak alkohol Cistanche deserticola boleh menghalang pembiakan sel kanser payudara [11], tetapi penyelidikan tentang bagaimana ekstrak alkohol Epimedium mempengaruhi persekitaran mikro imun tumor kanser payudara belum dilaporkan. Oleh itu, kajian ini berhasrat untuk meneroka kesan ekstrak alkohol Cistanche deserticola deserticola pada makrofaj seperti M{12}}dan peraturannya terhadap kanser payudara 4T1 Penghijrahan sel dan pembentukan koloni, untuk menyediakan asas eksperimen dan panduan teori untuk tindakan susulan aplikasi klinikal Epimedium.

Faedah kesihatan serbuk cistanche-Antitumor

Klik di sini untuk melihat produk Cistanche

【Minta lebih lanjut】 E-mel:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

1. Bahan

1.1 Haiwan dan Sel

Tikus Perempuan C57BL/6 Gred SPF, berumur 8 minggu, dibeli daripada Sibeifu (Beijing) Biotechnology Co., Ltd., dengan nombor sijil haiwan 110324210105240115. Tikus-tikus itu dibesarkan di Pusat Eksperimen Haiwan Pusat Perubatan Kelima Hospital Besar Tentera Pembebasan Rakyat. Sepanjang tempoh percubaan, tikus diberi makanan dan air percuma dan diberi 12-jam cahaya/12-jam kitaran gelap. Eksperimen haiwan telah dijalankan mengikut garis panduan untuk penjagaan dan penggunaan haiwan eksperimen dan telah diluluskan oleh Pusat Perubatan Kelima Hospital Besar Tentera Pembebasan Rakyat. Nombor kelulusan etika untuk eksperimen haiwan ialah IACUC-2021-0007. Sel 4T1 telah dibeli daripada Shanghai Fuheng Biotechnology Co., Ltd.

Kajian Eksperimen mengenai Cistanche deserticola

1.2 Dadah

Cistanche deserticola telah dikenal pasti oleh penyelidik Xiao Xiaohe sebagai Epimedium E., tumbuhan Berberidaceae daun kering dari Brevicornum Maxim. Ambil daun Cistanche deserticola deserticola, hancurkan, dan lalukannya melalui ayak No. 4, timbangkannya dengan tepat, tambah etanol cair, lakukan rawatan ultrasonik (kuasa 400 W, frekuensi 50 kHz) selama 1j, sejukkan, timbang semula, gunakan etanol cair untuk menambah berat badan yang hilang, goncangkannya, tapis, ambil turasan yang berterusan, beku dan keringkan untuk mendapatkan ekstrak Cistanche deserticola deserticola. 1.3 Dadah dan reagen arginase-1 (Arg-1) antibodi (nombor kelompok: 93668) telah dibeli daripada Syarikat CST Amerika Syarikat; - Antibodi aktin (nombor kelompok 20536 1-AP) telah dibeli daripada Syarikat Protentech; Antibodi sekunder IgG anti-arnab kambing berlabel HRP (nombor kelompok J111-035-003) telah dibeli daripada Jackson Immuno Research; Reagen Trizol (nombor kelompok BSC51M1) telah dibeli daripada syarikat Biolux; Reagen CCK-8 (nombor kelompok KTA1020-1000T) telah dibeli daripada Syarikat Abbkine; Faktor Interleukin 4 (IL-4) (nombor kelompok 96-214-14-20) telah dibeli daripada Peprotech.

1.4 Instrumen

QB-9002 Instrumen Plat Seismik (Syarikat Loceng Haimen Qilin); Epoch ujian imunosorben berkaitan enzim dan penganalisis kepekatan asid nukleik P100 (Bio Tek Company, USA); Instrumen PCR kuantitatif pendarfluor Quantstudio 6 Flex (Thermo Fisher Scientific, Amerika Syarikat); MINI6K emparan sawit (Syarikat Hangzhou Aosheng); Vortex-Genie 2 vibrator (Industri Saintifik, Amerika Syarikat).

2 Kaedah

2.1 Analisis komponen ekstrak alkohol Cistanche deserticola

2.1.1 Sampelpenyediaan Tambah metanol kepada ekstrak alkohol Cistanche deserticola untuk menyediakan penggantungan 5 mg/mL, ekstrak melalui ultrasound selama 40 min, ambil 1 mL dan sentrifugasi pada 12 000 r/min selama 10 minit , ambil supernatan selepas sentrifugasi, lulus membran penapis 0.22 μ M, sampel ke dalam UPLC-MS/MS. Komponen Cistanche deserticola dikumpul melalui pangkalan data farmakologi sistem perubatan tradisional Cina dan platform analisis (TCMSP). Keputusan MS dianalisis menggunakan platform data Progression QI (berdasarkan pangkalan data NPATLAS dan GNPS), dan hasilnya dibandingkan dengan pengambilan komponen Cistanche deserticola untuk analisis komponen tidak disasarkan.

2.1.2 Keadaan kromatografi:

Pemerolehan lajur kromatografi UPLC BEH C18 (100 mm × 2.1 mm, 1.7 µm), fasa mudah alih ialah air suling berganda (A) - asetonitril (B), elusi kecerunan: 0-3 minit, 5 peratus B; 3 hingga 35 minit, 5 peratus hingga 95 peratus B; 35-42 minit, 95 peratus -5 peratus B. Kadar aliran isipadu ialah 0.3 mL/min; isipadu Suntikan ialah 5 μ L; Suhu kotak suhu lajur ialah 40 darjah . 2.1.3 Keadaan spektrometri jisim: sumber ion elektrospray (ESI) digunakan untuk pengesanan dalam mod ion positif, dan suhu kapilari ialah 275 darjah ; Kadar aliran isipadu gas sarung 20 Arb; Kadar aliran isipadu gas tambahan 5 Arb; Voltan punca ion ialah 5 kV. 2.2 Kultur sel Makrofaj terbitan sumsum tulang (BMDM) telah diasingkan daripada sumsum tulang femoral 8-tikus betina C57BL/6 minggu. Mereka dibiakkan dalam medium DMEM yang mengandungi 10 peratus serum lembu janin, 1 peratus penisilin/Streptomycin, dan faktor perangsang koloni makrofaj tikus M-CSF (50 ng/mL), dan diletakkan dalam inkubator pada 37 darjah dan 5 peratus CO2 selama 6 hari.

Hadam sel dengan 0.25 peratus trypsin EDTA (2:1) pada kadar 1.2 × Inokulasi 106/mL ketumpatan dalam plat perigi semalaman. Pada hari kedua, selepas menambah ekstrak alkohol Cistanche deserticola selama 1j, sel telah dirangsang dengan IL-4 (20 ng/mL) selama 24j.

2.3 Kaedah CCK{{0}} digunakan untuk mengesan sitotoksisiti ekstrak alkohol Cistanche deserticola deserticola kepada sel BMDM × Inoculate 106/mL ketumpatan dalam 96 plat perigi, letakkan di dalam inkubator semalaman, merawat sel dengan kepekatan jisim yang berbeza (0, 0.015 625, {{10}}.031 25, 0.{{ 9}}, 0.125, 0.25, 0.5, 1, 2, 4 mg/mL) ekstrak alkohol Cistanche deserticola selama 24 jam. Buang medium kultur, tambah larutan CCK-8-media kultur (1:10), eramkan dalam inkubator selama 1j, ukur penyerapan (A) pada 450 nm dengan pembaca plat mikro dan kesan ketoksikan ekstrak alkohol Cistanche deserticola deserticola kepada sel.

2.4Western blotting digunakan untuk mengesan ekspresi protein Arg{{0}} dalam sel BMDM. Kumpulan kawalan, kumpulan model dan kumpulan ekstrak alkohol Cistanche deserticola dengan kepekatan jisim berbeza (0.062 5, 0.125, 0.25 mg/mL) telah disediakan. Ubat itu diberikan mengikut kaedah di bawah "2.2". Sel telah dikumpulkan dan RIPA lysate telah ditambah untuk mengekstrak protein. Sampel protein tertakluk kepada 10 peratus elektroforesis gel Sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide, dipindahkan ke membran PVDF, dimeterai dalam TBST yang mengandungi 5 peratus susu skim selama 1j, ditambah dengan antibodi primer, dan diinkubasi semalaman pada 4 darjah; Selepas mencuci dengan TBST, inkubasi dengan antibodi sekunder dan kembangkan menggunakan reagen pengesan chemiluminescence yang dipertingkatkan.

2.5 qRT PCR digunakan untuk mengesan faktor kemotaktik sel BMDM 24 (CCL24), zon keradangan 1 (Fizz1), Chitinase 3-seperti 3 (Ym1), makrofaj galaktosa jenis C-jenis Lectin 2 (MGL2), dan proliferator Peroksisom- reseptor diaktifkan (penerima diaktifkan peroxisome-proliferator , PPAR ）, Faktor pengawalseliaan Interferon 4 (IRF4), Arg-1 dan ekspresi mRNA CD163 telah ditetapkan dalam kumpulan kawalan, kumpulan model dan kepekatan jisim yang berbeza ({{17} }.062 5, 0.125, 0.25 mg/mL) ekstrak alkohol Cistanche deserticola mengikut "2.2"

2.6Penyediaan medium terkondisi Kaedah rujukan [12]: BMDM telah dikultur mengikut kaedah di bawah "2.2". Selepas plat benih sel dilekatkan, medium bebas serum yang mengandungi ekstrak alkohol Cistanche deserticola (0.25 mg/mL) ditambah dan IL-4 (20 ng/mL ) ditambah 1 jam kemudian. Selepas 24 jam, kumpulkan supernatan sebagai medium terkondisi. Medium terkondisi telah disentrifugasi pada 2000 r/min untuk memendakan serpihan, disedut, dan disimpan pada -80 darjah untuk eksperimen migrasi Sel. BMDM dibiakkan mengikut kaedah di bawah "2.2", dan medium DMEM yang mengandungi ekstrak alkohol Cistanche deserticola (0.25 mg/mL) ditambah selepas plat benih sel dilekatkan pada dinding dan IL-4 (20 ng /mL) ditambah sejam kemudian. Selepas 24 jam, kumpulkan supernatan sebagai medium terkondisi. Empar medium terkondisi 2000 untuk memendakan serpihan, menyedut supernatan dan menyimpannya pada -80 darjah untuk eksperimen koloni sel.2.7 Percubaan migrasi sel Letakkan pemalam lubang {{0}}untuk penyembuhan luka ke dalam 12-plat lubang dan sel 4T1 dirawat dengan vaksinasi 3.6 × 105/mL . Selepas sel melekat pada dinding semalaman, keluarkan pemalam dan bersihkan sel mati terapung dengan PBS. Tambah medium bebas serum yang mengandungi 5{16}} peratus medium berhawa dingin. Inkubasi dalam inkubator selama 24 jam. Pada 0 dan 24j, ambil foto dengan mikroskop terbalik, analisis gambar dengan Imej J dan hitung kadar migrasi Sel. Kadar penghijrahan sel=(0 j kawasan luka -24 j kawasan luka)/0 j kawasan luka

2.8Percubaan koloni sel 1000 4Sel T1 telah diinokulasi ke dalam setiap telaga 6 plat telaga, dan diinkubasi dengan medium yang mengandungi medium terkondisi 50 peratus selama 8 hari. Betulkan dengan 2 peratus Paraformaldehyde, pewarna dengan 1 peratus Crystal violet, ambil foto dan analisis gambar dengan Imej J.

2.9Analisis statistik telah dijalankan menggunakan perisian GraphPad Prism 8, dengan data pengukuran dinyatakan sebagai xs ±, dan perbandingan antara kumpulan menggunakan ANOVA sehala.

3 Keputusan

3.1 Analisis komposisi ekstrak alkohol Cistanche deserticola deserticola ditunjukkan dalam Rajah 1 dan Jadual 2. Ekstrak alkohol Cistanche deserticola deserticola mengandungi asid benzoik, koniferil aldehid, Emodin, asid vanillik, hialin, dan lepirudin A.

Jadual 1 Urutan primer

Rajah 1 Analisis ekstrak alkohol daripada Cistanche deserticola deserticola

Jadual 2 Analisis komponen ekstrak alkohol Cistanche deserticola deserticola

3.2Sitotoksisiti ekstrak alkohol Cistanche deserticola pada BMDM Keputusan menunjukkan bahawa 0.015 625 - 2 mg/mL ekstrak alkohol Cistanche deserticola tidak mempunyai kesan toksik pada sel BMDM selepas merawat sel BMDM dengan kepekatan berbeza ekstrak alkohol Cistanche deserticola selama 24 jam (Rajah 2).

Rajah 2 Sitotoksisiti ekstrak alkohol Cistanche deserticola deserticola kepada BMDM (xs ±, n=3)

3.3 Ekstrak etanol Cistanche deserticola menghalang polarisasi M2 makrofaj secara in vitro. Dalam makrofaj BMDM M0, penanda Arg-1 dan CD163 bagi makrofaj seperti M2-dinyatakan rendah dan ungkapan meningkat dengan ketara selepas aruhan oleh IL-4, menunjukkan bahawa BMDM berjaya terpolarisasi menjadi M2-makrofaj seperti. Teknik Western blotting dan qRT PCR telah digunakan untuk mengesahkan bahawa ekstrak alkohol Cistanche deserticola boleh memodulasi ekspresi Arg-1 dan CD163 yang disebabkan oleh IL-4 dalam cara yang bergantung kepada dos (Rajah 3), menunjukkan bahawa ekstrak alkohol Cistanche deserticola boleh secara langsung menghalang polarisasi makrofaj seperti M2. Untuk meneroka lebih lanjut kesan ekstrak alkohol Cistanche deserticola deserticola pada polarisasi M2 makrofaj, qRT PCR digunakan untuk mengkaji M2 seperti gen berkaitan makrofaj Fizz1 dan PPAR , Tahap transkripsi Ym1, CCL24, MGL2, dan IRF4 ditunjukkan dalam Rajah 4. Berbanding dengan kumpulan model, tahap ekspresi mRNA Fizz1, Ym1, CCL24 dan IRF4 dalam ekstrak alkohol Cistanche deserticola (0.062 5, 0.125, { {29}}.25 mg/mL) kumpulan menurun dengan ketara (P<0.05, 0.01, 0.001), and the PPAR in the alcohol extract of Cistanche deserticola (0.125, 0.25 mg/mL) group γ The mRNA expression level decreased significantly (P<0.01, 0.001), and the MGL2 mRNA expression level in the alcohol extract of Cistanche deserticola deserticola (0.25 mg/mL) group decreased significantly (P<0.001).

3.4 Ekstrak etanol Cistanche deserticola melemahkan promosi makrofaj seperti M{0}}pada penghijrahan sel 4T1. Ujian calar digunakan untuk melihat kesan supernatan ekstrak etanol Cistanche deserticola terhadap keupayaan penghijrahan sel kanser payudara. BMDM diinkubasi dalam medium bebas serum yang mengandungi IL-4 dan ekstrak alkohol Cistanche deserticola deserticola selama 24 jam, dan supernatan itu dikumpulkan sebagai medium terkondisi. 4T1 dibiakkan dalam medium bebas serum yang mengandungi 50 peratus medium terkondisi, seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 5, medium terkondisi yang dikumpul oleh BMDM yang dirawat dengan IL-4 sahaja telah menggalakkan penghijrahan sel 4T1 dengan ketara (P<0.05), while the conditioned medium of BMDM treated with alcohol extract of Cistanche deserticola significantly inhibited the migration of 4T1 cells (P<0.05). 3.5 Cistanche deserticola alcohol extract weakens the promotion of M2-like macrophages on 4T1 cell colony formation Use colony formation experiment to evaluate the effect of Cistanche deserticola alcohol extract on M2-like macrophages promoting 4T1 cell colony formation. As shown in Figure 6, the conditioned medium treated with IL-4 significantly promoted the colony formation of 4T1 cells (P<0.05), while the conditioned medium treated with alcohol extract of Cistanche deserticola significantly inhibited the colony formation of cells (P<0.001)

4. Perbincangan

Kebaikan cistanche tubulosa-Antitumor

Pada masa ini, kanser payudara masih menjadi masalah kesihatan awam global. Kadar insiden kanser payudara meningkat dari tahun ke tahun dan muda, yang secara serius mengancam kesihatan wanita [13]. Perubatan tradisional Cina percaya bahawa pada peringkat awal tumor, disebabkan oleh ketidakupayaan badan untuk menghilangkan qi akibat kekurangan yang, yin qi tidak mencukupi dan tidak dapat membentuk pengumpulan sperma yang normal. Walau bagaimanapun, pengumpulan yang tidak normal membawa kepada produk patologi seperti kekeruhan kahak dan stasis darah, yang membawa kepada transformasi toksin menjadi tumor [14]. Cistanche deserticola deserticola, sebagai ubat penting untuk tonifying yang, mempunyai kesan tonifying tenaga penting dan buah pinggang yang dan boleh mengawal imuniti. Ia adalah ubat Cina tonifying buah pinggang yang biasa digunakan dalam amalan klinikal. Kini ia sering digunakan untuk merawat kanser payudara dan sering digunakan sebagai ubat kompaun frekuensi tinggi. Salah satu ciri kanser ialah disfungsi imun. Sel-sel imun yang harus melawan tumor secara khusus dihambat secara seksual oleh tisu sekeliling dan persekitaran mikro Tumor, yang membawa kepada pertumbuhan dan penyebaran tumor yang tidak terkawal [15]. Semakin banyak bukti menunjukkan bahawa apabila ia wujud dalam persekitaran mikro Tumor, sel imun semula jadi (makrofaj, neutrofil, sel dendritik, sel limfoid semula jadi, sel perencatan seksual yang berasal dari sumsum tulang dan sel NK) dan sel imun adaptif (sel T dan sel B. ) menyumbang kepada perkembangan tumor [16]. Makrofaj adalah mediator yang sangat diperlukan untuk homeostasis tisu, dan polarisasi mereka terhadap makrofaj diaktifkan alternatif (jenis M2) boleh menggalakkan percambahan sel kanser, angiogenesis, dan metastasis. Oleh itu, mengawal selia TAM dan mengekalkan homeostasis mereka telah menjadi tumpuan rawatan tumor [17]. TAM terlibat dalam metastasis, angiogenesis, pembentukan semula matriks, pencerobohan, dan imunosupresi kanser payudara. TAM terbahagi terutamanya kepada dua fenotip berbeza, iaitu makrofaj seperti M1-teraktif klasik dan makrofaj seperti M2-alternatif diaktifkan [18]. Dalam tumor jinak atau tidak berfungsi, kebanyakan TAM adalah M{11}}seperti makrofaj yang diaktifkan secara klasik, iaitu pengaktifan Interferon- , IFN- ） Atau Lipopolysaccharide (LPS), sekali gus menggalakkan TAM menghasilkan faktor proinflamasi dan fagositosis sel tumor. Makrofaj seperti M2-boleh diaktifkan oleh sitokin Th2 seperti IL-4 untuk menghasilkan sejumlah besar faktor anti-radang, yang secara langsung menggalakkan perkembangan kanser payudara [19]. Oleh itu, membalikkan atau menghalang polarisasi makrofaj seperti M{19}} ialah strategi imunoterapi untuk kanser payudara. Arg-1 ialah penanda makrofaj seperti M2-dan ekspresi berlebihannya dikaitkan dengan prognosis yang buruk dalam pesakit kanser [20].

Herba Cina cistanche-Antitumor

CD163 ialah penanda khusus bagi M2-makrofaj [21], yang dikaitkan dengan metastasis tumor. CD163 plus TAM mendorong peralihan epitelium-mesenchymal (EMT) dan menggalakkan penghijrahan sel kanser [22]. Hasil kajian ini menunjukkan bahawa ekstrak Cistanche deserticola deserticola memainkan peranan dalam mengawal imuniti pada tahap tertentu, menghalang ekspresi Arg-1 dan CD163, penanda permukaan M2-seperti makrofaj, dan menghalang polarisasi jenis M2-makrofaj. PPAR Ia adalah sensor metabolik yang mengawal homeostasis lipid melalui pengaktifan pelbagai asid lemak dan derivatif asid lemak (seperti asid Palmitik) [23]. PPAR Berkaitan dengan polarisasi M2 makrofaj, PPAR Telah menjadi pengawal selia utama polarisasi M2 dalam makrofaj [24], Ligan PPAR telah ditunjukkan mempunyai kesan perencatan yang kuat terhadap pertumbuhan tumor dalam vivo [25]. Fizz1 dan Ym1 kedua-duanya adalah M{17}}gen penanda makrofaj dan Fizz1 dan Ym1 terlibat dalam fibrosis semasa pembaikan tisu [26]. Makrofaj seperti M{21}}menghasilkan sejumlah besar CCL24 in vitro [27] dan peningkatan ekspresi CCL24 boleh menggalakkan percambahan tumor, penghijrahan dan pencerobohan [28]. IRF4 ialah ahli keluarga IRF. Ia mengambil bahagian dalam proses polarisasi M2 makrofaj dan bertindak sebagai pengawal selia negatif isyarat reseptor seperti Tol dengan menggabungkan dengan molekul penyesuai MyD88 [29]. MGL2 adalah ahli keluarga Lektin jenis C Galaktosa makrofaj, dan ia juga dinyatakan dalam makrofaj yang dirangsang di bawah keadaan pengaktifan alternatif [30]. Hasil kajian ini menunjukkan bahawa ekstrak Cistanche deserticola deserticola menghalang gen berkaitan makrofaj M2 seperti PPAR , Ekspresi Fizz1, Ym1, CCL24, IRF4, dan MGL2 menghalang polarisasi makrofaj jenis M2, menunjukkan bahawa Epimedium boleh berfungsi sebagai berkesan. perencat M2 seperti makrofaj. Semakin banyak bukti menunjukkan bahawa makrofaj seperti M2-boleh menggalakkan metastasis dan pertumbuhan kanser [31]. Media terkondisi daripada makrofaj seperti M2-boleh mensimulasikan persekitaran mikro Tumor dan mendorong penghijrahan dan pertumbuhan tumor, yang serupa dengan makrofaj yang diasingkan daripada tumor malignan [12]. IL-4 boleh menggalakkan polarisasi makrofaj ke arah jenis M2, dan menggalakkan percambahan tumor dan angiogenesis [18]. Kajian ini menunjukkan korelasi antara polarisasi makrofaj dan kesan anti-tumor Cistanche deserticola deserticola. Media terkondisi daripada IL-4-makrofaj diaktifkan menggalakkan penghijrahan dan pertumbuhan sel 4T1, dan selepas campur tangan bersama dengan Cistanche deserticola, membalikkan M2-kesan menggalakkan tumor yang diaktifkan ini, menunjukkan bahawa IL{{55} } polarisasi M2 yang diaktifkan telah dihapuskan oleh Cistanche deserticola.

Kajian ini menunjukkan korelasi antara polarisasi makrofaj dan kesan anti-tumor Cistanche deserticola deserticola. Media terkondisi daripada IL-4-makrofaj diaktifkan menggalakkan penghijrahan dan pertumbuhan sel 4T1, dan selepas campur tangan bersama dengan Cistanche deserticola, membalikkan M2-kesan menggalakkan tumor yang diaktifkan ini, menunjukkan bahawa IL{{7} } polarisasi M2 yang diaktifkan telah dihapuskan oleh Epimedium. Kajian ini mendapati bahawa ekstrak Cistanche deserticola menghalang penghijrahan Sel dan pembentukan koloni kanser payudara dengan mengawal polarisasi makrofaj secara in vitro, menunjukkan bahawa rawatan Cistanche deserticola terhadap kanser payudara mungkin berkaitan dengan peraturan persekitaran mikro Tumor, dan Epimedium boleh bertindak sebagai pengawal selia persekitaran mikro Tumor di tapak metastasis dengan mempengaruhi makrofaj, yang memberikan gambaran mekanisme baharu untuk fungsi anti-tumor Cistanche deserticola, Ia mendedahkan mekanisme potensi baharu Cistanche deserticola untuk rawatan kanser, yang boleh membantu mengurangkan kadar kejadian kanser dan kematian berkaitan kanser. Pada masa hadapan, pasukan penyelidik akan meneroka lebih lanjut kesan Cistanche deserticola pada pertumbuhan dan metastasis kanser payudara selepas menghalang polarisasi M2 makrofaj dalam vivo, untuk menerangkan lebih lanjut mekanisme anti-tumor Cistanche deserticola dan menyediakan asas untuk aplikasi klinikal daripada Cistanche deserticola dalam rawatan penyakit tumor.

Rujukan

Rujukan

[1] Kolaborator Faktor Risiko Kanser GBD 2019. Beban global kanser yang dikaitkan dengan faktor risiko, 2010-19: Analisis sistematik untuk Kajian Beban Global Penyakit 2019 [J]. Lancet, 2022, 400(10352): 563-591.

[2] Yin L, Duan JJ, Bian XW, et al. Subtaip molekul kanser payudara tiga kali ganda negatif dan kemajuan rawatan [J]. Res Kanser Payudara, 2020, 22(1): 61.

[3] Medeiros B, Allan AL. Mekanisme molekul metastasis kanser payudara ke paru-paru: Perspektif klinikal dan eksperimen [J]. Int J Mol Sci, 2019, 20(9): 2272.

[4] Pathria P, Louis TL, Varner J A. Menyasarkan makrofaj yang berkaitan dengan tumor dalam kanser [J]. Trend Immunol, 2019, 40(4): 310-327.

[5] Shen MJ, Chen YB, Xu LJ, et al. Peningkatan penyusupan makrofaj kepada sel-sel kanser paru-paru radioresistant menyumbang kepada pembangunan rintangan tambahan sel tumor terhadap kesan sitotoksik sel NK [J]. Int J Oncol, 2018, 53(1): 317-328.

[6] Tariq M, Zhang JQ, Liang GK, et al. Polarisasi makrofaj: Strategi anti-kanser untuk menyasarkan makrofaj yang berkaitan dengan tumor dalam kanser payudara [J]. J Cell Biochem, 2017, 118(9): 2484-2501.

[7] Ma Li Kesan Cistanche deserticola glycoside pada faktor terhasil sel stroma-1 (SDF-1) dan reseptornya CXCR-4 pada tikus dengan infarksi arteri serebrum tengah akut [D] Nanjing : Universiti Perubatan Cina Nanjing, 2014

[8] Hao Fuliang Kesan dan mekanisme Cistanche deserticola glycoside pada pembaikan dan penyembuhan kecacatan tengkorak arnab [D] Shijiazhuang: Universiti Perubatan Hebei, 2013

[9] He J, Zang SL, Liu N, et al. Polisakarida epimedium melemahkan hematotoksisiti dengan mengurangkan tekanan oksidatif dan meningkatkan fungsi imun dalam model tikus kegagalan sumsum tulang akibat benzena [J]. Biomed Pharmacother, 2020, 125: 109908.

[10] Hua Ciyi, Shi Youyang, Xie Ying, et al Kemajuan penyelidikan mengenai mekanisme Cistanche deserticola Bahan aktif dalam merawat kanser payudara [J] Perubatan herba Cina, 2022, 53 (20): 6593-6600

[11]Chen Xiaolei, Tang Lijian, Li Qinglin Kajian tentang anti-percambahan sel kanser payudara oleh Cistanche deserticola dan ekstrak frazil in vitro [J] China Pharmacy, 2007, 18 (15): 1124-1127

[12] Xu F, Cui WQ, Wei Y, et al. Astragaloside IV menghalang perkembangan kanser paru-paru dan metastasis dengan memodulasi polarisasi makrofaj melalui isyarat AMPK [J]. J Exp Clin Cancer Res, 2018, 37(1): 207.

[13] Britt KL, Cuzick J, Phillips K A. Langkah utama untuk pencegahan kanser payudara yang berkesan [J]. Kanser Nat Rev, 2020, 20(8): 417-436.

[14] Hao Feifei, Tian Sisheng Penerokaan "Yang Menguasai Yin Mengikuti" dalam Metastasis Tumor Malignan Berdasarkan Teori Pengegasan [J] Shi Zhen Guoyi Guoyao, 2021, 32 (1): 164-166

[15] Denk D, Petrocelli V, Conche C, et al. Pengembangan sel stem memori T dengan imuniti anti-tumor yang unggul oleh urolithin A-induced mitophagy [J]. Kekebalan, 2022, 55(11): 2059-2073.

[16] Hinshaw DC, Shevde L A. Persekitaran mikro tumor secara semula jadi memodulasi perkembangan kanser [J]. Kanser Res, 2019, 79(18): 4557-4566.

[17] DeNardo DG, Ruffell B. Macrophages sebagai pengawal selia imuniti tumor dan imunoterapi [J]. Nat Rev Immunol, 2019, 19(6): 369-382.

[18] Dong R, Gong YL, Meng W, et al. Penglibatan perencatan polarisasi makrofaj M2 dalam kesan chemopreventive pengantara fenretinide pada kanser kolon [J]. Cancer Lett, 2017, 388: 43-53. [19] Jiménez-Garcia L, Herránz S, Luque A, et al. Peranan kritikal p38 MAPK dalam IL-4-mengakibatkan pengaktifan alternatif makrofaj peritoneal [J]. Eur J Immunol, 2015, 45(1): 273-286.

[20] Ma ZG, Lian J, Yang M, et al. Ekspresi berlebihan Arginase-1 ialah penunjuk prognosis yang buruk pada pesakit dengan kanser kolorektal [J]. Pathol Res Pract, 2019, 215(6): 152383.

[21] Tao SF, Chen Q, Lin C, et al. Linc00514 menggalakkan metastasis kanser payudara dan polarisasi M2 makrofaj yang berkaitan dengan tumor melalui laluan isyarat Notch pengantaraan Jagged1-[J]. J Exp Clin Cancer Res, 2020, 39(1): 191.

[22] Wei C, Yang CG, Wang SY, et al. Crosstalk antara sel-sel kanser dan makrofaj yang berkaitan dengan tumor diperlukan untuk metastasis kanser kolorektal yang dimediasi oleh sel tumor mesenchymal [J]. Kanser Mol, 2019, 18(1): 64.

[23] Francque S, Szabo G, Abdelmalek MF, et al. Steatohepatitis bukan alkohol: Peranan reseptor diaktifkan proliferator peroksisom [J]. Nat Rev Gastroenterol Hepatol, 2021, 18(1): 24-39.

[24] Tian Y, Yang CM, Yao QY, et al. Procyanidin B2 mengaktifkan PPAR untuk mendorong polarisasi M2 dalam makrofaj tikus [J]. Immunol Depan, 2019, 10: 1895.

[25] Takada I, Makishima M. Peroxisome proliferator-activated receptor agonists and antagonis: Kajian semula paten (2014- ada) [J]. Pakar Opin Ther Pat, 2020, 30(1): 1-13.

[26] Okuzumi S, Miyata J, Kabata H, et al. Agonis TLR7 menyekat keradangan pengantara sel limfoid semula jadi kumpulan 2 melalui IL-27-menghasilkan makrofaj interstisial [J]. Am J Respir Cell Mol Biol, 2021, 65(3): 309-318.

[27] Makita N, Hizukuri Y, Yamashiro K, et al. IL-10 mempertingkatkan fenotip makrofaj M2 yang disebabkan oleh IL-4 dan memberikan keupayaan untuk meningkatkan penghijrahan eosinofil [J]. Int Immunol, 2015, 27(3): 131-141.

[28] Jin L, Liu WR, Tian MX, et al. CCL24 menyumbang kepada keganasan HCC melalui laluan angiogenesis RhoB-VEGFA-VEGFR2 dan menunjukkan prognosis yang buruk [J]. Oncotarget, 2017, 8(3): 5135-5148.

[29] Satoh T, Takeuchi O, Vandenbon A, et al. Paksi Jmjd3-Irf4 mengawal polarisasi makrofaj M2 dan tindak balas perumah terhadap jangkitan helminth [J]. Nat Immunol, 2010, 11(10): 936-944.

[30] Raes G, Brys L, Dahal BK, et al. Lektin jenis C jenis galaktosa makrofaj sebagai penanda baru untuk makrofaj diaktifkan secara alternatif yang ditimbulkan oleh jangkitan parasit dan keradangan saluran pernafasan alahan [J]. J Leukoc Biol, 2005, 77(3): 321-327.

[31] Mantovani A, Allavena P, Sica A, et al. Keradangan berkaitan kanser [J]. Alam Semula Jadi, 2008, 454(7203): 436-444.