Pembaca RNA M6 A YTHDF2 Mengawal Antitumor Sel NK Dan Kekebalan Antiviral Bahagian 6

Model melanoma metastatik dan cabaran MCMV

Sel B16F10 (105) telah disuntik iv ke dalam tikus. 14 hari selepas suntikan, tikus telah dimatikan untuk analisis postmortem. Nodul metastatik dalam paru-paru dianalisis secara makroskopik dan dikira. Talian sel B16F10 disediakan oleh Hua Yu (City of Hope, Los Angeles, CA). Tikus Ythdf2ΔNK dan Ythdf2WT telah dijangkiti dengan suntikan ip Smith strain MCMV (2.5 × 104 PFU), yang dibeli daripada American Type Culture Collection (VR-1399). Sampel darah periferi diperoleh melalui tusukan submandibular pada hari 0, 4, dan 7 selepas jangkitan.

Nodul metastasis pulmonari merujuk kepada nodul yang terbentuk oleh sel tumor malignan dari tapak lain yang berhijrah ke paru-paru melalui sistem darah atau limfa. Bagi kebanyakan pesakit, ini adalah manifestasi biasa kanser paru-paru.

Walau bagaimanapun, walaupun nodul metastasis paru-paru menimbulkan ancaman kepada kesihatan fizikal pesakit, tidak ada hubungan langsung antaranya dan ingatan. Oleh itu, kita harus aktif menghadapi cabaran kanser paru-paru dan nodul metastasis paru-paru, dan tidak membiarkan emosi dan kebimbangan negatif menjejaskan kesihatan fizikal dan mental kita.

Pada masa yang sama, kita boleh mengekalkan dan meningkatkan daya ingatan melalui beberapa kaedah yang positif. Sebagai contoh, lakukan beberapa latihan ingatan, seperti pengiraan matematik, membaca, mendengar muzik, bermain permainan, dan lain-lain. Selain itu, mematuhi tabiat hidup yang baik, seperti senaman yang kerap, tidur yang cukup, makan dengan sihat, dan lain-lain, juga boleh meningkatkan daya ingatan kita.

Perkara yang paling penting ialah mengekalkan sikap positif. Tidak kira apa pun kesukaran yang anda hadapi, anda mesti percaya pada kekuatan dan fleksibiliti sistem saraf anda, dan melalui pelarasan dan tindak balas yang positif, anda akhirnya akan berjaya mengatasi kesukaran itu.

Ringkasnya, walaupun nodul metastatik dalam paru-paru menimbulkan ancaman kepada kesihatan fizikal, ia tidak berkaitan secara langsung dengan ingatan. Kita harus menghadapinya secara positif dan mengekalkan serta meningkatkan daya ingatan kita dengan menyesuaikan gaya hidup dan mengekalkan sikap yang baik. Ia boleh dilihat bahawa kita perlu meningkatkan ingatan, dan Cistanche deserticola boleh meningkatkan ingatan dengan ketara, kerana Cistanche deserticola juga boleh mengawal keseimbangan neurotransmitter, seperti meningkatkan tahap asetilkolin dan faktor pertumbuhan. Bahan-bahan ini sangat penting untuk ingatan dan pembelajaran. Selain itu, Cistanche deserticola juga boleh meningkatkan aliran darah dan menggalakkan penghantaran oksigen, yang dapat memastikan otak menerima nutrien dan tenaga yang mencukupi, seterusnya meningkatkan daya hidup dan daya tahan otak. Ia boleh dilihat bahawa kita perlu meningkatkan ingatan, dan Cistanche deserticola boleh meningkatkan ingatan dengan ketara, kerana Cistanche deserticola juga boleh mengawal keseimbangan neurotransmitter, seperti meningkatkan tahap asetilkolin dan faktor pertumbuhan. Bahan-bahan ini sangat penting untuk ingatan dan pembelajaran. Selain itu, Cistanche deserticola juga boleh meningkatkan aliran darah dan menggalakkan penghantaran oksigen, yang dapat memastikan otak menerima nutrien dan tenaga yang mencukupi, seterusnya meningkatkan daya hidup dan daya tahan otak.

Klik tahu suplemen untuk meningkatkan ingatan

Untuk mengukur beban virus dalam darah periferi, limpa dan hati, DNA telah diasingkan menggunakan Kit Darah dan Tisu QIAGEN DNeasy untuk analisis qPCR. Primer berikut telah digunakan: MCMV-IE1,59-AGCCACCAACATTGACCACGCAC-39 (ke hadapan) dan MCMVIE1, ​​59-GCCCCAACCAGGACACACAACTC-39 (terbalik).

Rawatan tetikus in vivo dengan IL-15

Untuk rawatan tetikus in vivo dengan IL-15, Ythdf2ΔNK dan Ythdf2WTmice disuntik dengan 2 µg ip rekombinan manusia IL-15 (cat.no. 745101; Institut Kanser Kebangsaan) selama 5 hari. Tikus yang dirawat dan terkawal kemudiannya dieutanasi untuk analisis sitometrik aliran.

Sitometri aliran

Suspensi sel tunggal disediakan daripada BM, darah, limpa, hati, dan paru-paru tikus Ythdf2ΔNK dan Ythdf2WT seperti yang diterangkan sebelum ini (Wang et al., 2018b). Analisis sitometri aliran dan pengisihan sel telah dilakukan pada LSRFortessa X-20 dan FACSAriaFusion Flow Cytometer (BD Biosciences), masing-masing.

Data dianalisis menggunakan perisian NovoExpress (Agilent Technologies).

Antibodi berlabel pewarna pendarfluor berikut daripada BD Biosciences, BioLegend, Invitrogen atau Teknologi Isyarat Sel telah digunakan: CD3ε (145-2C11), CD19 (1D3), Gr-1 (RB6-8C5 ),TER-119 (TER-119), CD11c (N418), CD4 (GK1.5), CD8 (53-6.7), CD122 (5H4), CD132 (TUGm2), NK1.1 (PK136), CD11b (M1/70),CD27 (LG.3A10), CD117 (2B8), CD127 (SB/199), CD135 (A2F10.1), KLRG1 (2F1), CD45 ({{46) }}F11), CD45.1 (A20), CD45.2 (104), IFN- (XMG1.2), 2B4 (m2B4), granzyme B (QA16A02), perforin(S16009A), Ly49H (3D10), Ly49D ( 4e5), CD69 (H1.2F3), CD226(TX42.1), NKG2D (CX5), NKG2A (16A11), NKp46 (29A1.4), TIGIT(1G9), PD-1 (J43), lampiran V, Ki67 (b56), Tbet (4b10), dan Eomes(WD1928), phospho-p44/42 Erk1/2 (Thr202/Tyr204, #9101),phospho-Akt (Ser473, #5315), fosfo-S6 protein ribosom , phospho-Stat3 (Tyr705, #9145), dan phospho-Stat5 (Tyr694, #9539).

Untuk penilaian percambahan sel NK, sel telah dilabelkan dengan 5 µM CTV (Invitrogen) mengikut protokol pengilang sebelum memindahkannya ke tikus penerima. Pewarnaan intraselular Ki67, Tbet, dan Eomes dilakukan dengan membetulkan dan meresap dengan Kit Pewarnaan Faktor Foxp3/Transkripsi (eBioscience).

Untuk pengesanan protein terfosforilasi, sel NK splenik yang telah disucikan telah dirawat terlebih dahulu dengan IL manusia rekombinan -15 (50 ng/ml) selama 1 jam dan kemudian difiksasi dengan Phosflow Fix Buffer I diikuti dengan permeabilisasi dengan Phosflow Perm Buffer III (BD Biosciences) dan pewarnaan dengan antibodi.

Pemindahan sel angkat

Untuk menilai kesan kekurangan Ythdf2 pada pematangan sel NK, campuran 5 × 106 sel BM pada nisbah 1:1 daripada CD45.1 atau Ythdf2ΔNK CD45.2 tikus telah dipindahkan bersama ke dalam Rag2−/−Il2rg−/−tikus. Penyusunan semula penerima dinilai oleh sitometri aliran 8 minggu selepas pemindahan.

Untuk eksperimen proliferasi homeostatik yang disebabkan oleh limfopenia, bilangan sel splenikNK yang disucikan yang sama daripada CD45.1 atau Ythdf2ΔNK CD45.2 tikus telah dipindahkan bersama ke dalam tikus Rag2−/−Il2rg−/− diikuti dengan penilaian peratusan relatif sel WT dan NK splenik Ythdf2 yang dipindahkan daripada penerima Rag2−/−Il2rg−/− melalui sitometri aliran pada titik masa yang dinyatakan.

Untuk model melanoma metastatik, 106 IL-2–sel NK yang diperluas daripada Ythdf2ΔNK atau Ythdf2WTmice telah disuntik iv ke dalam tikus Rag2−/−Il2rg−/−. 1 hari kemudian, sel B16F10 (105) telah disuntik iv ke dalam tikus. 14 hari selepas suntikan, tikus dimatikan untuk analisis postmortem. Dalam sesetengah eksperimen, sel telah dilabelkan dengan CTV (5 µM, Invitrogen) untuk mengesan pembiakan sel sebelum pemindahan.

Ujian pemerdagangan in vivo

Untuk mengesan pemerdagangan sel NK daripada BM ke darah periferal, 1 µg iv antibodi anti-CD45 berlabel APC telah disuntik ke dalam tikus C57BL/6. Dua minit selepas suntikan antibodi, theice telah dieutanasi serta-merta, dan sel BM dikumpulkan untuk sitometri aliran selepas sel diwarnai dengan antibodi CD3 dan NK1.1. Sel NK parenkim dikenal pasti dengan kekurangan pewarnaan CD45, manakala sel NK sinusoidal dikenal pasti dengan kehadiran pelabelan CD45. Oleh itu, nisbah sel NK dalam sinusoid (CD45+) kepada kawasan parenkim (CD45−) menunjukkan pemerdagangan sel NK daripada darah tepi BM di bawah keadaan mantap.

RT-qPCR masa nyata dan immunoblotting

RNA telah diasingkan menggunakan Kit Mini RNeasy (QIAGEN) dan kemudian ditranskripsikan terbalik kepada cDNA dengan Kit Reagen PrimeScript RT dengan Pemadam gDNA (Takara Bio) mengikut arahan pengilang. Tahap ekspresi mRNA dianalisis menggunakan SYBRGreen PCR Master Mix dan QuantStudio 12K Flex Real-TimePCR System (kedua-duanya daripada Thermo Fisher Scientific). Urutan primer disenaraikan dalam Jadual S1.

Immunoblotting dilakukan mengikut prosedur standard, seperti yang diterangkan sebelum ini (Denget al., 2015; Yu et al., 2006). Antibodi berikut digunakan:METTL3 (cat. no. 15073-1-AP; Proteintech), METTL14 (cat. no.26158-1-AP; Proteintech), YTHDF1 (cat. no. 17479-1-AP ; Proteintech), YTHDF2 (cat. no. RN123PW; MBL), YTHDF3 (cat. no.25537-1-AP; Proteintech), ALKBH5 (cat. no. ab195377; Abcam),FTO (cat. no. ab124892; Abcam), MDM2 (cat. no. 33-7100; Invitrogen), TDP-43 (cat. no. PA5-29949; Invitrogen), dan -actin(cat. no. {{20 }}Ig; Proteintech).

ujian knockdown siRNA

IL-2–expanded NK cells were transfected with Accell mouse Tardbp siRNA (cat. no. E-040078-00-0005; Dharmacon) or Mdm2 siRNA (cat. no. E-041098-00-0005; Dharmacon) using Accell delivery media (Dharmacon) according to the manufacturer's instructions in the presence of IL-15 (50 ng/ml). The Accell eGFP control pool was used as siRNA control. The transfection efficiency was >90% seperti yang diukur oleh sitometri aliran. Kecekapan genockdown ditentukan oleh qPCR dan immunoblotting. 3 d selepas pemindahan, apoptosis sel, dan percambahan dianalisis oleh sitometri aliran seperti yang diterangkan di atas.

Ujian wartawan Luciferase

Rantau promoter Ythdf2 antara –2,000 bp hingga +100 bpof TSS telah dikuatkan daripada sel NK murine dan diklonkan ke apGL4-Vektor Pelapor Luciferase Asas (Promega) untuk menjana apGL{ {5}}Plasmid wartawan Ythdf2. Sel HEK293T yang dibeli daripadaATCC telah ditransfeksi bersama dengan plasmid wartawan pGL4-Ythdf2 serta plasmid overexpression STAT5a atau STAT5b atau vektor kosong, bersama-sama dengan plasmid wartawan pRL-TK Renilla(Promega) untuk menormalkan kecekapan transfeksi. Sel-sel telah dituai untuk lisis 24 jam selepas pemindahan, dan luciferaseactivity dikira secara fluorimetrik dengan Dual-LuciferaseSystem (Promega). Urutan primer untuk pengklonan plasmid overexpression Ythdf2promoter dan STAT5a dan STAT5b disenaraikan dalam Jadual S1.

ujian ChIP

Ujian ChIP dilakukan menggunakan Kit ChIP Magnetik Pierce (cat. no. 26157; Thermo Fisher Scientific) mengikut arahan pengilang. Secara ringkas, jumlah yang sama ananti-anti-phospho-Stat5 (Tyr694, cat. No. 9351; Cell Signaling Technologies) atau kawalan sepadan IgG arnab biasa digunakan secara berasingan untuk mendakan kompleks DNA--protein berkait silang yang diperoleh daripada 5 × 106 sel NK primer tetikus tulen yang telah dirawat dengan IL-15 (50 ng/ml) selama 1 jam. Berikutan pembalikan silang silang, DNA yang diimunopresipitasi oleh antibodi yang ditunjukkan telah diuji oleh qPCR. Urutan semua primer disenaraikan dalam Jadual S1.

Ujian sitotoksisiti ex vivo

Sitotoksisiti ex vivo sel NK dinilai oleh ujian 51Crrelease standard. Sel sel limfoma tikus RMA-S (kelas MHC Kurang) dan sel RMA (cukup kelas MHC I), hadiah Andre'Veillette (Universiti McGill, Montreal, Kanada), digunakan sebagai sel sasaran. Tikus telah dirawat dengan suntikan ip polyinosinic:polycytidylic acid [poli (I: C); 200 µg/tikus] selama 18 jam. Sel NK yang diaktifkan Poli(I: C) telah diasingkan daripada limpa menggunakan Kit Pengasingan Sel NK EasySepMouse (STEMCELL Technologies). Sel PurifiedNK telah dikultur bersama dengan sel sasaran pada nisbah 5:1, 2.5:1 dan 1.25:1 dengan kehadiran IL-2 (50 U/ml).

m6A-seq

Sel NK splenik yang telah disucikan telah dikembangkan oleh IL-2 (1,000 U/ml,cat. no. Bulk Ro 23-6019; Institut Kanser Kebangsaan) secara in vitro selama7 d. Jumlah RNA telah diasingkan oleh reagen TRIzol (Thermo FisherScientific) daripada 50 juta IL-2–sel NK yang dikembangkan. RNA poliadenilasi diperkaya lagi daripada jumlah RNA dengan menggunakan Kit Pemurnian mRNA Dynabeads (Invitrogen). Sampel mRNA dipecahkan kepada 100-serpihan panjang nt dengan reagen pemecahan RNA (Invitrogen).

MRNA pecahan (5 µgmRNA) telah digunakan untuk imunopresipitasi m6A menggunakan antibodi m6A (202003; Synaptic) mengikut protokol standard Kit m6A Magna MeRIP (Merck Millipore). RNA diperkaya melalui RNA Clean & Concentrator-5 (Zymo Research)untuk penjanaan perpustakaan dengan Kit HiperPrep RNA KAPA(Roche). Penjujukan telah dilakukan di kemudahan genomik City of Hope pada mesin Illumina HiSeq 2500 dengan mod baca 50-bp tunggal. Bacaan urutan dipetakan ke genom tetikus menggunakan perisian HISAT2 v101 (Kim et al., 2015).

Bacaan pemetaan imunopresipitasi dan perpustakaan input disediakan menggunakan pakej R exomePeak (Meng et al., 2014). m6Apeaks telah divisualisasikan menggunakan perisian Integrative Genomics Viewer (//www.igv.org). Motif pengikat m6A telah dianalisis oleh MEME (https://meme-suite.org) dan HOMER(http://homer.ucsd.edu/homer/motif). Puncak yang dipanggil telah dijelaskan oleh persimpangan dengan seni bina gen menggunakan Rpackage ChIPseeker (Yu et al., 2015).

StringTie was used to assess expression levels for mRNAs from input libraries by calculating the total exon fragments/mapped reads in millions × exon length in kb (Pertea et al., 2015). The differentially expressed mRNAs were selected with log2(fold change) >1 orlog2(perubahan kali ganda)<−1 and P < 0.05 using the R package edgeR (Robinson et al., 2010).

YTHDF2 RIP-seq

50 juta IL-2–sel NK yang diperkembangkan dituai dan dibasuh dua kali dengan PBS sejuk, dan pelet sel itu dilisiskan dengan penimbal oflisis 2 vol (10 mM Hepes, pH 7.6, 150 mM KCl, 2 mM EDTA, 0.5% NP-40, 0.5 mM dithiothreitol, 1:100 protease inhibitorcocktail [Thermo Fisher Scientific] dan 400 U/ml SUPERase-In RNase Inhibitor [Thermo Fisher Scientific]).

Lysate diinkubasi di atas ais selama 5 minit dan disentrifugasi selama 15 minit untuk membersihkan thelysate. Satu persepuluh isipadu lisat sel telah disimpan sebagai input. Bahagian atas lisat sel telah diinkubasi dengan 5 µg anti-YTHDF2 (cat.no. RN123PW; MBL) yang digandingkan dengan Protein A Magnetic Beads (cat. no. 10001D; Invitrogen) pada 4 darjah selama 2 jam dengan putaran lembut. Selepas itu, manik dicuci lima kali dengan 1 ml penimbal pencuci ais sejuk (50 mM HEPES, pH 7.6,200 mM NaCl, 2 mM EDTA, 0.05% NP-40, 0.5 mM dithiothreitol, dan 200 U/ml RNase perencat).

Sampel imunoprecipitated tertakluk kepada pencernaan Proteinase K dalam penimbal basuhan ditambah dengan 1% SDS dan 2 mg/ml Proteinase K (ThermoFisher Scientific) diinkubasi dengan goncangan pada 1,200 rpm pada 55 darjah selama 1 jam. Jumlah RNA telah diekstrak daripada kedua-dua input dan RNA immunoprecipitated dengan menambahkan 5 vol TRIzol reagen diikuti oleh Direct-zol RNA Miniprep (Zymo Research).

Perpustakaan cDNA telah dijana dengan Kit HiperPrep RNA KAPA (Roche) dan disusun pada platform Illumina HiSeq 2500. Keputusan panggilan puncak dengan imunopresipitasi dan perpustakaan input dihasilkan oleh pakej R RIPSeeker (Li et al., 2013). HOMER digunakan untuk mencari motif taburan data di kawasan puncak. Puncak yang dipanggil dianotasi oleh persilangan dengan seni bina gen dan transkrip menggunakan ChIPpeakAnno (Zhu et al., 2010).

ujian kestabilan mRNA

Sel NK splenik yang telah disucikan daripada tikus Ythdf2ΔNK dan Ythdf2WT telah dikultur dengan IL-15 (50 ng/ml). 3 hari selepas kultur, sel dirawat dengan actinomycin D (5 µg/ml, kucing no. A9415; Sigma) untuk masa yang dinyatakan. Sel tanpa rawatan telah digunakan pada 0 h. Sel dikumpulkan pada masa yang dinyatakan, dan jumlah RNA telah diekstrak daripada sel untuk qPCR. Separuh hayat mRNA dikira menggunakan kaedah yang diterangkan sebelum ini oleh Weng et al.(2018). Urutan primer disenaraikan dalam Jadual S1.

Analisis pangkalan data dalam talian

Kami menggunakan sumber dalam talian BioGPS (//biogps.org) untuk menganalisis ungkapan khusus tisu Ythdf2. Set RNA-seqdata adalah daripada GEO di bawah no. GSE106138, GSE113214 dan GSE25672. Data normal daripada analisis RNA-seq telah dieksport, dan ekspresi gen z-skor telah divisualisasikan dengan fungsi Heatmap.2 dalam gplots Rlibrary

Perangkaan

Ujian-t Pelajar tidak berpasangan (dua ekor) dilakukan menggunakan perisian GraphPad Prism. ANOVA sehala atau dua hala telah dilakukan apabila tiga atau lebih kumpulan bebas dibandingkan. Nilai P telah diselaraskan untuk berbilang perbandingan menggunakan prosedur Holm-Sˇ´ıdak. P < 0.05 telah dianggap penting. *, P < {{10}}.05; **, P < 0.01; dan ***, P < 0.001.

Bahan tambahan dalam talian

Rajah S1 menunjukkan tahap protein YTHDF2 dalam sel imun, termasuk sel NK sebagai tindak balas kepada rangsangan IL-15, jangkitan MCMV dan perkembangan tumor; penjanaan tikus dengan pemadaman khusus NKcell bagi Ythdf2. Rajah S2 menunjukkan titer virus dalam limpa dan hati daripada tikus yang dijangkiti MCMV dan peratusan dan bilangan mutlak Ly49H+ dan/atau Ly49D+ NKsel dalam tikus yang dijangkiti MCMV. Rajah S3 menunjukkan percambahan, kemandirian, kematangan, dan ekspresi reseptor pengaktifan dan perencatan sel NK daripada tikus Ythdf2WT dan Ythdf2ΔNK. Rajah.S4 menunjukkan peraturan ungkapan YTHDF2 oleh IL-15-STAT5signaling dan ungkapan komponen reseptor IL-15, laluan PI3K–AKT dan laluan MEK–ERK dalam sel NK daripada Ythdf2WT dan Ythdf2ΔNK tikus. Rajah S5 menunjukkan ujian RNA-seq, m6A-seq, dan RIP-seq lebar transkriptom dalam sel dalamNK. Jadual S1 menyenaraikan primer yang digunakan dalam kajian.

Ketersediaan data

Data RNA-seq, m6A-seq, dan RIP-seq telah disimpan di Pusat Nasional untuk Maklumat Bioteknologi GEO di bawah kesertaan no. GSE174027. Data selebihnya yang menyokong penemuan kajian ini boleh didapati daripada pengarang yang berkaitan atas permintaan.

Ucapan terima kasih

Kerja ini disokong oleh Institut Kesihatan Kebangsaan (NS106170, AI129582, CA247550, CA163205, CA223400, CA068458, dan CA210087), Persatuan Leukemia dan Limfoma (1364-19), Institut Perubatan Regeneratif{COVID California (DISC2} 9}}), dan Anugerah Projek Luar Biasa Perikatan Kanser Payudara 2021. Kerja ini turut disokong sebahagiannya oleh USDAaward (USDA/NIFA 2020-67017-30843).

Sumbangan pengarang: S. Ma, J. Yu, dan MA Caligiuriconceived and design the project. S. Ma, J. Yan, J. Zhang, danJ. Yu melakukan eksperimen dan/atau analisis data. Z. Chen, L.-S.Wang, JC Sun, dan J. Chen menyumbang reagen dan sokongan bahan. S. Ma, J. Yu, J. Chen, dan MA Caligiuri menulis, menyemak dan/atau menyemak kertas kerja. Semua penulis membincangkan keputusan dan mengulas manuskrip.

Pendedahan: J. Chen melaporkan "lain" daripada Genovel BiotechCorp. di luar kerja yang diserahkan dan merupakan pengasas saintifik Genovel Biotech Corp. dan penasihat saintifik onkologi kaum. Tiada pendedahan lain dilaporkan.

Rujukan

1. Arase, H., ES Mocarski, AE Campbell, AB Hill dan LL Lanier. 2002.Pengiktirafan langsung sitomegalovirus dengan mengaktifkan dan menghalang reseptor sel NK. Sains. 296:1323–1326.

2.Ayala, YM, T. Misteli, dan FE Baralle. 2008. TDP-43 mengawal fosforilasi protein retinoblastoma melalui penindasan ekspresi kinase 6 yang bergantung kepada siklik. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 105:3785–3789.

3.Barbieri, I., K. Tzelepis, L. Pandolfini, J. Shi, G. Millan-Zambrano, SC Robson, ´D. Aspris, V. Migliori, AJ Bannister, N. Han, et al. 2017. METTL3 terikat promoter mengekalkan leukemia myeloid oleh kawalan terjemahan yang bergantung kepada m6A. alam semula jadi. 552:126–131.

4. Becknell, B., dan MA Caligiuri. 2005. Interleukin-2, interleukin-15, dan peranan mereka dalam sel pembunuh semulajadi manusia. Adv. Immunol. 86:209–239.

5.Bertoli, C., JM Skotheim, dan RA de Bruin. 2013. Kawalan transkripsi kitaran sel semasa fasa G1 dan S. Nat. Rev. Mol. Biol Sel. 14:518–528.

6.Bezman, NA, CC Kim, JC Sun, G. Min-Oo, DW Hendricks, Y. Kamimura, JA Best, AW Goldrath dan LL Lanier. Konsortium Projek Genom Imunologi. 2012. Definisi molekul bagi identiti dan pengaktifan sel pembunuh semulajadi. Nat. Immunol. 13:1000–1009.

7.Carson, WE, JG Giri, MJ Lindemann, ML Linett, M. Ahdieh, R. Paxton, D.Anderson, J. Eisenmann, K. Grabstein, dan MA Caligiuri. 1994. Interleukin (IL) 15 ialah sitokin baru yang mengaktifkan sel pembunuh semulajadi manusia melalui komponen reseptor IL-2. J. Exp. Med. 180:1395–1403.

8.Carson, WE, TA Fehniger, S. Haldar, K. Eckhert, MJ Lindemann, CF Lai, CM Croce, H. Baumann, dan MA Caligiuri. 1997. Peranan yang berpotensi untuk interleukin-15 dalam pengawalseliaan kemandirian sel pembunuh semulajadi manusia.J. Clin. melabur. 99:937–943.

9.Chan, CJ, MJ Smyth dan L. Martinet. 2014. Mekanisme molekul pengaktifan sel pembunuh semulajadi sebagai tindak balas kepada tekanan selular. Kematian SelBerbeza. 21:5–14.

10.Chen, X., J. Han, J. Chu, L. Zhang, J. Zhang, C. Chen, L. Chen, Y. Wang, H.Wang, L. Yi, et al. 2016. Terapi gabungan sel EGFR-CAR NK dan virus herpes simplex oncolytic 1 untuk metastasis otak kanser payudara.Oncotarget. 7:27764–27777.

For more information:1950477648nn@gmail.com