Potensi Polifenol Parsley Dan Kapasiti Antioksidannya Untuk Membantu dalam Rawatan Kemurungan Dan Kebimbangan: Kajian Subakut In Vivo

Untuk maklumat lanjut. kenalantina.xiang@wecistanche.com

Abstrak: Kemurungan dan kebimbangan adalah masalah kesihatan mental utama di semua bahagian dunia. Penyakit ini dikaitkan dengan beberapa faktor risiko, termasuk tekanan oksidatif. Ubat psikotropik yang bersifat kimia telah menunjukkan beberapa kesan sampingan yang meningkatkan kesan penyakit tersebut. Menghadapi situasi ini, produk semula jadi kelihatan sebagai alternatif yang menjanjikan. Matlamat kajian ini adalah untuk menilai kesan anxiolytic dan antidepresan daripada Petroselinum sativum.polifenoldalam vivo, serta berkorelasinyaantioksidan sifat in vitro.Anxiolyticaktiviti ekstrak (50 dan 100 mg/kg) dinilai menggunakan medan terbuka dan ujian ruang gelap terang, manakala aktiviti antidepresan dinilai menggunakan ujian renang paksa. Aktiviti antioksidan ekstrak dinilai oleh ujian radikal bebas 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl(DPPH) dan ujian FRAP (iron-reducing capacity). Ekstrak fenolik menunjukkan kesan anxiolytic dan antidepresan yang sangat kuat, terutamanya pada dos 100 mg/kg, mengurangkan tingkah laku kemurungan pada tikus (masa imobilitas berkurangan) dan juga tingkah laku anxiolytic (kecenderungan untuk penemuan di tengah dan kawasan yang diterangi). ) lebih baik daripada paroxetine dan bromazepam (ubat klasik) seiring dengan keputusan tersebut ekstrak juga menunjukkan kapasiti antioksidan yang penting. Keputusan awal ini menunjukkan bahawa Petroselinum satioum mempamerkan potensi anxiolytic dan antidepresan untuk digunakan sebagai pelengkap atau phytomedicine bebas untuk merawat kemurungan dan kebimbangan.

Kata kunci: Petroselinum sativum; polifenol; anxiolytic; seperti antidepresan; antioksidan; farmakologi; ubat herba; produk semulajadi

1. Pengenalan

Gangguan kemurungan dan kebimbangan telah lama dianggap sebagai isu kesihatan mental, dan ia merupakan beban berat bagi mana-mana masyarakat di mana tekanan wujud di mana-mana. Pertubuhan Kesihatan Sedunia (WHO) meramalkan bahawa menjelang 2030, kemurungan, sebagai penyakit yang berpotensi membawa maut, akan menjadi punca kedua utama hilang upaya di seluruh dunia [1]. Menurut anggaran terkini WHO, lebih daripada 300 juta orang di seluruh dunia mengalami kemurungan, di mana lebih daripada 260 juta juga mengalami gangguan kecemasan [2].

Manual Diagnostik dan Statistik Gangguan Mental (DSM-V) mentakrifkan gangguan kemurungan utama sebagai bukan sahaja kesedihan atau serangan kemurungan sekali-sekala, tetapi sebaliknya perasaan tertekan atau kehilangan minat atau keseronokan selama sekurang-kurangnya dua minggu berturut-turut, episod yang sering berulang [3]. WHO juga mendefinisikan kemurungan sebagai "pelbagai simptom psikologi dan biologi, seperti perasaan sedih umum, kehilangan keseronokan dan minat, rasa bersalah, tidur terganggu (insomnia atau mengantuk) dan selera makan, perasaan keletihan (rencat psikomotor). ), dan kurang tumpuan".Dalam kes yang paling serius, kemurungan malah boleh membawa kepada bunuh diri [4].

Kebimbangan, seperti yang ditakrifkan oleh WHO, adalah "perasaan bahaya yang tidak dapat ditentukan yang disertai dengan keadaan lesu, gelisah, tidak berdaya, atau bahkan kemusnahan". Ia juga boleh digambarkan sebagai keadaan ketakutan yang menjangka yang disebabkan oleh bahaya yang berpotensi dan tidak pasti, walaupun puncanya tidak semestinya sedar, berbanding ketakutan yang timbul dalam menghadapi bahaya sebenar. Walau bagaimanapun, kedua-dua emosi ini dicirikan oleh tindak balas fisiologi yang sama (peningkatan tekanan darah, berpeluh, takikardia, dll.) dan tingkah laku (peningkatan kewaspadaan dan pengelakan) [5].

Kemurungan dan kebimbangan biasanya dirawat dengan ubat psikotropik, termasuk antidepresan dananxiolytics(penenang), selalunya bersifat kimia, seperti paroxetine dan benzodiazepin. Walau bagaimanapun, penggunaan ubat-ubatan ini menunjukkan had tertentu, dan ia boleh menyebabkan kesan sampingan yang tidak diingini. Bromazepam ditetapkan untuk rawatan kebimbangan. Walau bagaimanapun, penggunaannya datang dengan beberapa kesan sampingan negatif, termasuk mengantuk, sedasi, dan kehilangan ingatan [6]. Kesukaran tidur, kehilangan selera makan, mengantuk, dan disfungsi seksual juga merupakan kesan sampingan biasa paroxetine, antidepresan daripada keluarga serotonin reuptake inhibitor (SSRI) yang digunakan untuk menguruskan gangguan kemurungan utama [7]. Hasil daripada keberkesanan yang terhad ini, penerokaan kaedah terapeutik baru, lebih berkesan dan tidak toksik amat dihargai.

Tumbuhan ubatan boleh menjadi sumber terapeutik baru, selamat dan berkesan yang mencukupi, terutamanya kerana kebanyakannya diketahui menunjukkan kesan sampingan yang lebih sedikit [8]. Pelbagai tumbuhan ubatan telah diuji dalam gangguan di atas, dan mereka menghasilkan keputusan yang sangat menyenangkan yang menggalakkan kajian lanjut untuk menemui sifat antidepresan dan anxiolytic tumbuhan tambahan [9].

Petroselinum satioum Hoffm., biasanya dikenali sebagai "pasli" ("maadnous" dalam bahasa Arab), ialah ahli keluarga Apiaceae. Apium crispum Mill, Apium Petroselinum L., Petroselinum Hortense Hoffm, dan Petroselinum crispum (Mill) Fuss. juga sinonim untuk Petroselinum sativum Hoffm.[10. Parsley, sebagai herba masakan yang berasal dari kawasan Mediterranean, telah menjadi herba biasa di seluruh dunia pada zaman moden [11]. P. sativum mempunyai pelbagai sifat berfaedah, termasukantioksidan, analgesik, spasmolitik, antidiabetik, imunomodulasi, dan kesan gastrousus [12]. Pelbagai manfaat ini mungkin dikaitkan dengan komponen teras tumbuhan, seperti polifenol (apigenin, kuersetin, luteolin, dan kaempferol), vitamin, karotenoid, kumarin, dan tanin [13]. Keluarga Apiaceae merangkumi pelbagai tumbuhan yang terkenal dengan aktiviti antidepresan dan anxiolytic mereka seperti Coriandrum satioum L.[14], Pimpinella anisum L.[15], Carum carvi L.[16] untuk kepekatan antara 50 dan 200 mg/kg.

Dalam kajian ini, potensi aktiviti seperti antidepresan dan anxiolytic paslipolifenoltelah dinilai buat kali pertama, bersama-sama dengannyaaktiviti antioksidan, untuk menentukan sama ada terdapat korelasi.

2. Keputusan

2.1. Penilaian Aktiviti Antioksidan

2.1.1.Ujian DPPH

Rajah 1 menunjukkan peratusan aktiviti antioksidan sebagai fungsi tahap PSPE dan BHT yang berbeza. Keputusan yang diperoleh mendedahkan bahawa ekstrak dan BHT kami memaparkan aktiviti antiradikal yang bergantung kepada kepekatan. Maksudnya, peratusan perencatan radikal DPPH meningkat dengan kepekatan ekstrak fenolik P. sativum dan BHT. BHIT menunjukkan aktiviti tertinggi berbanding ekstrak kami. Untuk 0.5 ug/mL, BHT mencapai peratusan perencatan maksimum sebanyak 90 peratus , yang kekal malar untuk kepekatan 1 ug/mL. Pada kepekatan yang sama, ekstrak fenolik menghasilkan perencatan maksimum sebanyak 58 peratus

Antioksidan sintetik BHT menunjukkan aktiviti antiradikal yang sangat kuat, dengan IC50 kira-kira 0.024 ug/mL, lebih tinggi daripada yang direkodkan untuk ekstrak fenolik P sativum （kira-kira 0.184 ug/mL） .

2.1.2.Ujian FRAP

Rajah 2 menunjukkan variasi dalam ketumpatan optik (OD) sebagai fungsi kepekatan berbeza PSPE dan BHT (kawalan positif). Ia boleh dilihat bahawa peratusan pengurangan adalah berkadar dengan kepekatan kedua-dua ekstrak dan BHT. Yang terakhir menunjukkan peratusan pengurangan yang lebih tinggi berbanding dengan ekstrak.

Untuk membandingkan kecekapan pecahan polifenolik P.sativoum(PSPE) dengan BHT, kami menentukan kepekatan yang mengurangkan 50 peratus FRAP (IC50).

BHT (BHT antioksidan sintetik) menunjukkan aktiviti antioksidan yang sangat kuat dengan IC50 kira-kira 0.09ug/mL, lebih tinggi daripada yang direkodkan untuk ekstrak fenolik P. sativum （kira-kira 0.38 ug/mL ）.

2.2. Penilaian Ujian Renang Paksa Aktiviti Antidepresan

Variasi masa henti dalam ujian renang paksa selama tiga minggu eksperimen ditunjukkan dalam Rajah 3. Masa imobilitas semasa ujian adalah jauh lebih pendek dalam tikus yang dirawat PSPE (PSPE 50 mg/kg(34 s±3.286), PSPE 100 mg/kg (33.8s± 2.653))berbanding dengan kawalan (Paroxetine(100.8s±6.837), Kenderaan(176s±6.550).

Keputusan ini menunjukkan bahawa kesan antidepresan ekstrak fenolik P. sativum adalah lebih besar daripada paroxetine.

2.3. Penilaian Aktiviti Anxiolytic

2.3.1. Tingkah Laku Cemas di Padang Terbuka

Rajah 4 menunjukkan variasi dalam masa yang dihabiskan di pusat ujian medan terbuka selama tiga minggu rawatan ekstrak. Dapat dilihat bahawa tikus yang dirawat dengan PSPE (50 dan 100 mg/kg) menghabiskan lebih banyak masa di kawasan tengah berbanding kumpulan kawalan. Peningkatan ketara ini adalah berkadar bukan sahaja dengan tempoh rawatan tetapi juga dengan kepekatan ekstrak. Nilai optimum diperolehi dengan kepekatan 100 mg/kg (37.4 s± 1.778, berbanding 33.4s±1.208 duduk dos 50 mg/kg). Ini menunjukkan ananxiolytickesan tumbuhan ini.

Variasi dalam bilangan jubin bersilang semasa eksperimen tiga minggu ditunjukkan dalam Rajah 5. Analisis menunjukkan peningkatan yang ketara dalam bilangan jubin yang dilalui oleh tikus yang dirawat PSPE (50 mg/kg (161.2±5.490),100 mg/ kg (173±10.104)) berbanding dengan kumpulan yang dirawat bromazepam 1 mg/kg(115.8± 1.393) dan kenderaan(147.4±1.568). Keputusan ini menunjukkan kesan anxiolytic FPPS yang lebih besar walaupun daripada bromazepam pada 1 mg/kg.

2.3.2. Tingkah Laku Cemas di Bilik Gelap-Terang

Rajah 6 membentangkan hasil variasi dalam masa yang dihabiskan di ruang berlampu semasa tempoh kajian. Keputusan menunjukkan peningkatan progresif dalam masa yang dihabiskan di dalam ruang berlampu dari masa ke masa untuk tikus yang dirawat dengan PSPE. Peningkatan ini amat ketara pada hari ke-21. Dalam ujian ini, tikus yang dirawat bromazepam dan dirawat PSPE menghabiskan lebih banyak masa dalam petak bercahaya (bromazepam 1 mg/kg(146.8 s ± 1.068), PSPE 50mg/kg (199.6s± 6.838), PSPE 100 mg/kg (213.6s±9.331)berbanding dengan tikus kawalan (kenderaan(75.8s±4.352)).Ini ditafsirkan sebagai bukti kesan anxiolytic ekstrak polifenolik P. sativum.

Rajah 7 menunjukkan variasi dalam bilangan peralihan antara ruang terang dan gelap semasa ujian ini. Perbezaan yang luar biasa ditemui dalam tempoh 21 hari antara tikus yang dirawat PSPE (50 mg/kg (16±{{10}}}.548), 100 mg/ kg (12.4±0.510)) dan tikus kawalan (kenderaan(10±0.837),bromazepam 1 mg/kg (12±0.949). Keputusan ini konsisten dengan keputusan masa yang dihabiskan di dalam ruang berlampu, kerana kedua-dua parameter ini adalah berkadar songsang dengan tahap kebimbangan yang ditunjukkan oleh tikus.

3. Perbincangan

Kami menunjukkan dalam kajian ini bahawa ekstrak fenolik P. satioum memaparkan aktiviti antioksidan in vitro dan aktiviti anxiolytic dan antidepresan dalam vivo.

Asid ferulik dan asid sinamat didapati mempunyai kesan antidepresan dalam beberapa kajian [17,18], manakala quercetin dan hydroxytyrosol menunjukkan kesan anxiolytic yang diluluskan [19,20]. Sebatian tersebut mungkin berada di sebalik kesan yang diperhatikan.

Keberkesanan antioksidan boleh digunakan dalam pelbagai bentuk, seperti penghapusan radikal bebas, penguraian radikal bebas, dan juga pengkelat ion logam [17]. Aktiviti ini boleh dinilai dengan ujian FRAP dan DPPH, yang terakhir, kerana kepantasannya, sering digunakan untuk menyaring molekul yang terdapat dalam ekstrak tumbuhan [18]. Keputusan kami menunjukkan aktiviti antioksidan dalam ekstrak fenolik pasli. Kerja sebelumnya oleh Hinneburg et al.[21]menunjukkan bahawa ekstrak akueus pasli memberikan aktiviti perencatan yang lemah bagi radikal DPPH, dengan IC50 pada tertib 12.0±{{8} }.10 mg/mL (berbanding dengan ekstrak polifenol dalam kajian kami, 0.184 ug/mL). Sebaliknya, kesan kelat ekstrak ini adalah lebih berkesan berbanding ekstrak lain yang digunakan dalam kajian yang sama.

Kajian baru-baru ini juga mendapati hubungan antara gangguan mood dan tekanan oksidatif [22,23] dan tekanan psikologi [24,25], sekali gus membuka jalan baru untuk mencegah dan/atau menguruskan kebimbangan dan kemurungan mengenai penggunaan potensi antioksidan. Desrumaux et al. [26] menyedari bahawa defisit vitamin E dalam otak tikus meningkatkan tahap tanda-tanda utama tekanan oksidatif dan tingkah laku yang menimbulkan kebimbangan. Begitu juga, tikus yang diberi vitamin C baru-baru ini mendedahkan bahawa sebatian ini mempunyai peranan antidepresan berdasarkan keputusan ujian penggantungan ekor [27]. Polifenol, termasuk flavonoid dan asid fenolik, terkenal dengan kesan antioksidan yang kuat [28,29]. Penggunaan metabolit fitokimia sekunder ini sebagai cara untuk mengelakkan dan menguruskan kebimbangan dan kemurungan mungkin merupakan strategi yang menjanjikan [9]. Kajian yang dijalankan oleh Akinci et al. [30] menunjukkan bahawa pasli berjaya meminimumkan kerosakan gastrik yang disebabkan oleh tekanan apabila diambil secara lisan dengan menyokong sistem pertahanan antioksidan sel, yang dicerminkan dalam peningkatan purata paras glutation tisu (53.31 ± 9.50) dan aktiviti superoksida dismutase( 15.18±1.05) dan katalase (16.68 ±2.29).

Eksperimen padang terbuka digunakan untuk menilai keadaan emosi haiwan. Haiwan yang telah dipisahkan dari sangkar rumah mereka dan diletakkan dalam persekitaran yang berbeza sering menunjukkan kesusahan dan kebimbangan dengan menunjukkan perubahan dalam semua atau beberapa parameter, seperti penurunan dalam aktiviti ambulatori, penerokaan dan imobilisasi, tetapi peningkatan dalam dandanan. tingkah laku [31]. Ekstrak P.sativum pada dos 100 mg/kg menghasilkan kesan anxiolytic yang sangat ketara, seperti yang ditunjukkan oleh peningkatan ketara dalam masa yang dihabiskan di pusat padang dan jumlah aktiviti ambulatori. Peningkatan ini lebih besar daripada yang dilihat pada tikus yang dirawat dengan bromazepam pada 1 mg / kg.

Percubaan bilik terang-gelap juga berguna dalam meramalkan kesan anxiolytic ubat-ubatan. Untuk mengukur tahap kebimbangan pada tikus semasa ujian ini, dua parameter diperhatikan:(1) Peratusan masa yang lebih rendah yang dihabiskan haiwan di dalam bilik gelap adalah berkaitan dengan tahap kebimbangannya. Dalam erti kata lain, apabila peratusan masa yang dihabiskan dalam petak bercahaya adalah minimum, kebimbangan dianggap tinggi, dan(2) bilangan peralihan, iaitu bilangan laluan antara dua petak, adalah berkait songsang dengan tahap kebimbangan (bilangan peralihan yang lebih rendah bermakna tahap kebimbangan yang tinggi)[32]. Penemuan kajian ini mendedahkan ekstrak polifenolik P. sativum pada 100 mg/kg menunjukkan kesan anxiolytic optimum berdasarkan peningkatan masa haiwan yang dihabiskan di dalam ruang berlampu dan bilangan peralihan berbanding dengan kawalan semasa tempoh kajian.

Eksperimen renang paksa telah dibangunkan pada tahun 1970-an. Ia juga dikenali dengan nama penciptanya sebagai ujian Porsolt [33]. Penemuan kami menunjukkan bahawa masa imobilitas tikus yang dirawat adalah lebih pendek daripada tikus kawalan, menunjukkan kesan antidepresan ekstrak fenolik P. sativum. Walau bagaimanapun, penurunan dalam masa imobilitas ini mungkin memihak kepada sama ada peningkatan masa berenang atau masa mendaki. Perbezaan ini adalah sangat penting dari sudut pandangan neurofarmakologi kerana secara teorinya, semasa berenang paksa, antidepresan yang menghasilkan peningkatan terutamanya noradrenergik atau dopaminergik mengurangkan imobilitas dengan meningkatkan masa peningkatan [34], manakala yang mengaktifkan 5HT sebaliknya mengurangkan imobilitas dengan meningkatkan masa berenang. [35]. Dari segi fungsi CNS, majoriti polifenol berinteraksi secara langsung dengan sistem neurotransmitter [36]. Kajian yang dijalankan ke atas pasli menunjukkan penguasaan flavonoid 37]. Pelbagai jenis flavonoid yang terdapat dalam ekstrak perubatan tradisional konvensional dilaporkan mempunyai kesan sedatif/anxiolytic dengan mengikat terus kepada reseptor GABA A [38].

Kajian yang dijalankan oleh Priprem et al. [39]menunjukkan bahawa polifenol quercetin menunjukkan aktiviti anxiolytic selepas seminggu pentadbiran berulang pada dos 300 mg/kg, yang tidak berkesan seperti diazepam, yang menunjukkan kesannya satu jam selepas pentadbiran pada dos yang lebih rendah. Pereira et al. [40] menunjukkan bahawa asid rosmarinic mempamerkan kesan anxiolytic pada dos yang sangat rendah (2 hingga 4 mg/kg). Contoh lain ialah apigenin, yang menunjukkan pertalian selektif dan rendah untuk reseptor benzodiazepin yang menghasilkan aktiviti anxiolytic dengan hampir tiada kesan sampingan[41. Flavonoid juga memainkan peranan dalam kemurungan melalui perencatan monoamine oxidase dan mengakibatkan peningkatan dalam 5-paras HT, DA, dan norepinephrine di kawasan tertentu di otak [42].

Asid amino pengujaan, seperti aspartat, glutamat, homocysteine, dan sistein, merangsang sel selepas sinaptik, manakala asid amino perencatan, seperti alanin, glisin, GABA, dan taurin, menyekat perkembangan sel selepas sinaptik 43]. Enzim yang dipanggil aromatik L-amino acid decarboxylase, juga dipanggil DOPA decarboxylase, tryptophan decarboxylase, 5-hydroxytryptophan decarboxylase, atau AAAD, yang memangkinkan dekarboksilasi L-dopa dan 5-hydroxytryptophan kepada dopamin dan {{ 7}}hydroxytryptamine juga mungkin memainkan peranan. Parsley boleh menyebabkan ekspresi berlebihan enzim ini, menyumbang kepada kesan antidepresannya. Kajian yang dijalankan ke atas Centella Asiatica, tumbuhan yang tergolong dalam keluarga Apiaceae yang sama, menunjukkan bahawa kesan antidepresan jumlah triterpene adalah disebabkan oleh peningkatan fungsi paksi hipotalamus-pituitari-adrenokortikal dan peningkatan kandungan neurotransmitter monoamine. [44]. Kajian-kajian ini mencadangkan kehadiran aktiviti anxiolytic dan antidepresan oleh ekstrak fenolik P. sativum.

4. Bahan dan Kaedah

4.1. Bahan Tumbuhan

Petroselinum sativum Hoffm. bahagian udara dikumpulkan semasa fasa sebelum berbunga (musim bunga 2018) dari rantau Tanounate di Maghribi Utara (34 darjah 32'9"N 4 darjah 38'24"W). Pengelasan, pengenalan dan nama botani tumbuhan ini telah disahkan oleh ahli botani bertauliah Pr. Bari Amina. Sampel tumbuhan didepositkan di herbarium Fakulti Sains Dhar El Mahrez Fez (spesimen baucar: 18TA5001).

4.2. Pengekstrakan

Pengekstrakan telah dijalankan seperti yang diterangkan oleh Slighoua et al. [11]. Secara ringkasnya, 10g bahagian udara kering serbuk halus P. sativum dicampur dengan metanol (100 mL) dan dimaserasi selama 3 jam pada suhu 50 darjah . Selepas itu, turasan ditumpukan menggunakan penyejat berputar sehingga kering untuk memastikan penyejatan pelarut lengkap. Ekstrak yang terhasil dilarutkan semula dalam air suling (200 mL) dan dibasuh dengan tiga heksana dan kloroform (200 mL tiga kali) untuk menyingkirkan pigmen dan kekotoran lain. Fasa berair terakhir diekstrak dengan etil asetat (200 mL tiga kali). Fasa organik (etil asetat) ditumpukan untuk mendapatkan ekstrak polifenol. Hasil perahan ialah 10.52 peratus .

Kami sebelum ini menerbitkan kerja pada ekstrak yang sama yang ditunjukkan dengan menggunakan analisis HPLC-DAD bahawa ia terdiri daripada polifenol berikut: (1) Asid Ferulik, (2) Asid sinamik, (3) Asid Gallic, (4) Quercetin, (5) Myricetin,(6)Naringenin, (7)Hydrox-tyrosol [11].

4.3. Haiwan Kajian

Dalam kajian ini, tikus (Swiss albino) telah disediakan oleh Rumah Haiwan fakulti sains Dhar el Mahraz Fez. Sebelum dimasukkan ke dalam eksperimen, mereka dimasukkan ke dalam kumpulan enam dalam sangkar konvensional dan dibenarkan tempoh penyesuaian dua minggu dengan akses percuma kepada makanan dan air dan suhu terkawal 22±2 darjah dan di bawah kitaran cahaya/gelap. 12 j/12 j.

Percubaan telah dilakukan menurut piawaian antarabangsa untuk Rawatan dan Penggunaan Haiwan Eksperimen [16] dan Jawatankuasa Etika Haiwan Dalaman(#09-12/2019/LBEAS).

4.4. Penilaian Aktiviti Antioksidan

4.4.1.2, Ujian2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH)

DPPH ialah salah satu sebatian kimia yang paling biasa digunakan untuk menilai aktiviti antioksidan sebatian fenolik |45. DPPH mempunyai elektron tidak berpasangan pada atom penghubung nitrogen. Prinsip ujian ini diringkaskan dalam kapasiti ekstrak untuk mengurangkan radikal bebas DPPH ungu gelap menjadi pengurangan berwarna kekuningan yang boleh diukur oleh spektrofotometri [28]. Satu siri kepekatan ekstrak telah disediakan dalam metanol, 100 μL setiap satunya ditambah kepada 750 μL larutan metanol DPPH (0.004 peratus ). Selepas tempoh inkubasi selama 30 minit pada 25 darjah, penyerapan diukur pada 517 nm. Untuk kawalan negatif, sampel digantikan dengan metanol. Peratusan DPPH ditentukan oleh persamaan berikut:

(1)I=[(Sampel-Kosong)/Kosong]×100

Dalam peratusan aktiviti antiradikal, Sampel ialah penyerapan sampel, dan Kosong ialah penyerapan kawalan negatif.

4.4.2. Ujian Kuasa Pengurangan Ferrous (FRAP).

Kuasa penurunan besi (Fe3 plus ) dalam ekstrak yang dikaji ditentukan mengikut kaedah yang diterangkan oleh Mechchate et al. 【28】. Secara ringkas, 100 μL ekstrak pada kepekatan berbeza dicampur dengan 500μL larutan penimbal fosfat （PBS,0.2 M, pH6.6 ）dan 500 μL larutan 1 peratus kalium ferricyanide K, Fe（CN）. Ini diinkubasi dalam tab mandi air pada suhu 50 darjah selama 20 minit. Kemudian, 500 μL larutan 10 peratus akueus asid trikloroasettik （TCA）, 100 μL larutan 0.1 peratus ferik klorida FeCl3, dan 0.5 mL air suling ditambah kepada campuran tindak balas. Bacaan penyerapan campuran ini diambil pada 700 nm melawan kosong yang mengandungi semua reagen medium kecuali ekstrak tumbuhan. Keputusan dinyatakan sebagai kepekatan berkesan 50 peratus (EC50), yang mewakili kepekatan antioksidan yang diperlukan untuk mendapatkan penyerapan 0.5. Peningkatan dalam penyerapan sepadan dengan peningkatan dalam kuasa pengurangan ekstrak yang diuji.

4.5. Ujian Renang Paksa Aktiviti Antidepresan (FST)

Model Porsolt, atau ujian renang paksa, ialah ujian ramalan aktiviti jenis antidepresan. Tikus secara individu dipaksa berenang di dalam bekas silinder yang diisi dengan air setinggi 12 cm. Ujian berlangsung selama 6 minit, tetapi hanya 4 minit terakhir ujian dianalisis. Haiwan itu dianggap tidak bergerak apabila ia terapung dalam kedudukan tegak dan hanya membuat beberapa pergerakan untuk mengekalkan keseimbangannya di dalam air (masa imobilitas).

Sebanyak empat kelompok lima tikus setiap satu digunakan untuk ujian ini. Semua ekstrak tumbuhan ditadbir secara gavage selama 21 hari, dan ujian dilakukan 1 jam selepas pemberian ekstrak pada 21 hari. Kumpulan A, kawalan negatif, menerima penyelesaian fisiologi sebagai kenderaan. Kumpulan B, kumpulan kawalan positif, menerima paroxetine pada 11 mg/kg. Kumpulan C dan D menerima PSPE masing-masing pada 50 dan 100 mg/kg.

Satu jam selepas pentadbiran ekstrak tumbuhan, masa imobilitas dikira selama 6 minit. Dua minit pertama membolehkan tetikus menyesuaikan diri dengan tekanan, dan kemudian, tetikus menjadi letih dan tidak bergerak dengan masa. Masa imobilitas dikira dalam beberapa saat, dan kemudian, ia dibandingkan dengan masa imobilitas tikus dalam kumpulan kawalan positif (paroxetine) untuk rujukan [33].

4.6. Aktiviti An.xiolytic

4.6.1.Lapangan Terbuka

Ujian medan terbuka(OF) digunakan untuk meramalkan aktiviti anxiolytic, kerana haiwan menunjukkan tahap pengelakan yang tinggi terhadap kawasan pusat berbanding dengan pinggir. Ia juga digunakan sebagai ujian penerokaan dan pergerakan. Kawasan tersebut terdiri daripada empat dinding kayu setinggi 40 cm yang disusun dalam keluasan 50×50 cm, dibahagikan kepada 25 jubin yang sama saiz yang ditandakan dengan garisan hitam.

Sebanyak empat kelompok lima tikus setiap satu digunakan untuk ujian ini. Semua ekstrak tumbuhan ditadbir secara gavage selama 21 hari. Seterusnya, ujian dilakukan 1 jam selepas pentadbiran ekstrak tumbuhan pada hari 1,7,14, dan Kumpulan A, kawalan negatif, menerima penyelesaian fisiologi sebagai kenderaan Kumpulan B, kawalan positif, menerima bromazepam pada 1 mg/kg. . Kumpulan C dan D menerima PSPE masing-masing pada 50 dan 100 mg/kg.

Selepas 60 minit, ujian telah dilakukan dengan meletakkan setiap tetikus di dataran tengah untuk meneroka arena untuk mengukur jumlah aktiviti ambulatori tikus (bilangan jumlah jubin yang dipalang oleh tikus, iaitu, bilangan jubin persisian dan bilangan jubin tengah yang dilintasi oleh tikus dengan keempat-empat kaki) dan masa yang dihabiskan di tengah-tengah padang terbuka [3146].

4.6.2. Ujian Bilik Terang-Gelap

Ujian bilik terang-gelap juga digunakan untuk meramalkan aktiviti anxiolytic, kerana ia membolehkan penilaian mudah tingkah laku haiwan yang berkaitan dengan kebimbangan dengan menganalisis pergerakan haiwan antara dua petak warna dan pencahayaan yang berbeza. Haiwan yang lebih cemas cenderung menghabiskan lebih sedikit masa di dalam bilik yang terang. Kotak kayu terang-gelap dengan dimensi 44 × 21 × 21 cm terdiri daripada dua petak hitam dan putih, disambungkan dengan laluan (lubang 7 × 7 cm di tengah, memisahkan dua petak dan membenarkan akses kepada satu atau yang lain daripada petak). Petak yang diterangi diterangi oleh lampu.

Sebanyak empat kelompok lima tikus setiap satu digunakan untuk ujian ini. Semua ekstrak tumbuhan ditadbir secara gavage selama 21 hari. Ujian dilakukan 1 jam selepas pentadbiran ekstrak tumbuhan pada hari 1,7,14, dan 21. Kumpulan A, kawalan negatif, menerima penyelesaian fisiologi sebagai kenderaan. Kumpulan B, kawalan positif, menerima bromazepam pada 1 mg/kg. Kumpulan C dan D menerima PSPE masing-masing pada 50 dan 100 mg/kg.

Selepas 60 minit, ujian lima minit dilakukan dengan meletakkan setiap tetikus menghadap bukaan yang menyertai petak gelap [47]. Selepas setiap ujian, kotak itu dibersihkan dengan alkohol. Parameter yang diukur ialah masa yang dihabiskan di dalam ruang berlampu dan bilangan peralihan ruang [48].

5. Kesimpulan

Parsley, herba masakan yang digunakan setiap hari di seluruh dunia, memberikan manfaat kesihatan yang sangat besar dan melalui kajian ini, ia telah terbukti mempunyai aktiviti seperti antidepresan dan anxiolytic yang luar biasa, malah lebih baik daripada ubat klasik, terutamanya dengan dos 100 mg/kg. Dalam mencari ubat yang berkesan dengan kurang atau hampir tiada kesan sampingan, tumbuhan ini boleh menjadi alternatif yang baik. Kerja ini menggalakkan penggunaan hariannya serta perkembangannya kepada phytomedicine yang mantap.

Kajian lanjut diperlukan untuk menyiapkan kerja ini, termasuk prestasi ujian tingkah laku lain dengan ekstrak yang sama untuk mengesahkan keberkesanannya. Oleh itu, pecahan berpandukan bio bagi ekstrak fenolik P. satioum dirancang untuk mengenal pasti komponen utama yang bertanggungjawab untuk aktiviti seperti anxiolytic dan antidepresan yang diperhatikan dan untuk menentukan mekanisme tindakannya yang tepat.

Rujukan
1. Friedrich, MJ Kemurungan Merupakan Punca Utama Kecacatan Di Seluruh Dunia. JAMA 2017, 317, 1517. [CrossRef] [PubMed]
2. Lim, GY; Tam, WW; Lu, Y.; Ho, CS; Zhang, MW; Ho, RC Prevalens Kemurungan dalam Komuniti daripada 30 Negara antara 1994 dan 2014. Sci. Rep. 2018, 8, 2861. [CrossRef]
3. Persatuan Psikiatri Amerika. Manual Diagnostik dan Statistik Gangguan Mental (DSM-5®); Persatuan Psikiatri Amerika: Washington, DC, Amerika Syarikat, 2013; ISBN 0-89042-557-4.

4. Dinga, R.; Marquand, AF; Veltman, DJ; Beekman, AT; Schoevers, RA; van Hemert, AM; Penninx, BW; Schmaal, L. Meramalkan Kursus Naturalistik Kemurungan daripada Pelbagai Data Klinikal, Psikologi dan Biologi: Pendekatan Pembelajaran Mesin. Terjemahan Psikiatri 2018, 8, 1–11. [CrossRef]
5. Daviu, N.; Bruchas, MR; Moghaddam, B.; Sandi, C.; Beyeler, A. Pautan Neurobiologi antara Tekanan dan Kebimbangan. Neurobiol. Tekanan 2019, 11, 100191. [CrossRef]
6. Sanabria, E.; Cuenca, RE; Esteso, M.Á.; Maldonado, M. Benzodiazepines: Penggunaannya Sama ada sebagai Ubat Penting atau sebagai Bahan Toksik. Toksik 2021, 9, 25. [CrossRef] [PubMed]
7. Kanekar, S.; Sheth, CS; Ombach, HJ; Olson, PR; Bogdanova, OV; Petersen, M.; Renshaw, CE; Sung, Y.-H.; D'Anci, KE; Renshaw, PF Pendedahan Hipoksia Hipoksia dalam Tikus Secara Berbeza Mengubah Keberkesanan Antidepresan Perencatan Semula Serotonin Terpilih Fluoxetine, Paroxetine, Escitalopram dan Sertraline. Pharmacol. Biokim. perangai. 2018, 170, 25–35. [CrossRef]
8. Es-Safifi, I.; Mechchate, H.; Amaghnouje, A.; Jawhari, FZ; Bari, A.; Cerruti, P.; Avella, M.; Andriy, A.; Andriy, D. Tumbuhan Ubat Digunakan untuk Merawat Masalah Sistem Penghadaman Akut di Wilayah Fez-Meknes di Maghribi: Tinjauan Etnofarmakologi. Etnobotani. Res. Appl. 20, 2020. [CrossRef]
9. Amaghnouje, A.; Mechchate, H.; Es-Safifi, I.; Boukhira, S.; Aliqahtani, AS; Noman, OM; Nasr, FA; Conte, R.; Calarco, A.; Bousta, D. Penilaian Subakut Ketoksikan dan Kesan Seperti Antidepresan Origanum Majorana L. Polifenol dalam Tikus Albino Switzerland. Molekul 2020, 25, 5653. [CrossRef]
10. Agyare, C.; Appiah, T.; Boakye, YD; Apenteng, JA Petroselinum crispum: Satu Tinjauan. Med. Rempah Sayuran. Afr. 2017, 527–547. [CrossRef]
11. Slighoua, M.; Mahdi, I.; Di Cristo, F.; Amaghnouje, A.; Grafov, A.; Boucetta, N.; Bari, A.; Bousta, D. Penilaian Aktiviti Estrogenik dan Anti-Radang In Vivo Ekstrak Hidro-Etanolik dan Pecahan Polifenolik Parsley (Petroselinum sativum Hoffm.). J. Ethnopharmacol. 2020, 265, 113290. [CrossRef] [PubMed] 12. Farzaei, MH; Abbasabadi, Z.; Ardekani, PUAN; Rahimi, R.; Farzaei, F. Parsley: Kajian Etnofarmakologi, Fitokimia, dan Aktiviti Biologi. J. Tradit. Dagu. Med. 2013, 33, 815–826. [CrossRef]
13. Chaves, DS; Frattini, FS; Assafifim, M.; de Almeida, AP; Zigali, RB; Costa, SS Komposisi Kimia Fenolik Ekstrak Petroselinum Crispum dan Kesannya terhadap Haemostasis. Nat. Prod. Commun. 2011, 6, 1934578X1100600709. [CrossRef]
14. Mahendra, P.; Bisht, S. Aktiviti Anti-Kebimbangan Coriandru m Sativum Dinilai Menggunakan Model Kebimbangan Eksperimen Berbeza. Indian J. Pharmacol. 2011, 43, 574. [CrossRef]
15. Shahamat, Z.; Abbasi-Maleki, S.; Mohammadi Motamed, S. Penilaian Kesan Seperti Antidepresan Ekstrak Berair dan Etanol Buah Pimpinella Anisum dalam Tikus. Avicenna J. Phytomed. 2016, 6, 322–328. [PubMed]
16. Es-Safi, I.; Mechchate, H.; Amaghnouje, A.; Jawhari, FZ; Al Kamaly, OM; Imtara, H.; Grafov, A.; Bari, A.; Bousta, D. Satu Wawasan tentang Sifat Anxiolytic dan Antidepresan Seperti Carum carvi L. dan Persatuannya dengan Aktiviti Antioksidannya. Kehidupan 2021, 11, 207. [CrossRef]
17. Zheng, X.; Cheng, Y.; Chen, Y.; Yue, Y.; Li, Y.; Xia, S.; Li, Y.; Deng, H.; Zhang, J.; Cao, Y. Ferulic Acid Memperbaiki Tingkah Laku Seperti Kemurungan dalam Tikus Keturunan Prenatal yang Tertekan melalui Aktiviti Anti-Radang dan Paksi HPA. Int. J. Mol. Sci. 2019, 20, 493. [CrossRef]
18. Diniz, LRL; de Souza, MTS; Barboza, JN; de Almeida, RN; de Sousa, DP Antidepresan Potensi Asid Sinamik: Mekanisme Tindakan dan Perspektif dalam Pembangunan Dadah. Molekul 2019, 24, 4469. [CrossRef]
19. Lee, B.; Yeom, M.; Shim, I.; Lee, H.; Hahm, D.-H. Kesan Perlindungan Quercetin pada Gejala Seperti Kebimbangan dan Keradangan Neuro yang Disebabkan oleh Lipopolysaccharide dalam Tikus. Evid. Pelengkap Berasaskan. Altern. Med. 2020, 2020, 4892415. [CrossRef]
20. Karkovi´c Markovic, A.; Tori's, J.; Barbaric, M.; Jakobuši´c Brala, C. Hydroxytyrosol, Tyrosol dan Derivatif serta Kesan Potensinya terhadap Kesihatan Manusia. Molekul 2019, 24, 2001. [CrossRef]
21. Hinneburg, I.; Dorman, HD; Hiltunen, R. Aktiviti Antioksidan Ekstrak daripada Herba dan Rempah Masakan Terpilih. Kimia Makanan. 2006, 97, 122–129. [CrossRef]
22. Nunes, CS; Maes, M.; Roomruangwong, C.; Moraes, JB; Bonifacio, KL; Vargas, HO; Barbosa, DS; Anderson, G.; de Melo, LGP; Drozdstoj, S. Kualiti Hidup yang Direndahkan dalam Gangguan Mood Dikaitkan dengan Peningkatan Tekanan Neuro-Oksidatif dan Tahap Hormon Merangsang Tiroid Basal dan Penggunaan Penstabil Mood Antikonvulsan. J. Eval. Clin. Berlatih. 2018, 24, 869–878. [CrossRef] [PubMed]
23. Bonifácio, KL; Barbosa, DS; Moreira, EG; Coneglian, CF; Vargas, HO; Nunes, SOV; Moraes, JB; Maes, M. Peningkatan Ketoksikan Tekanan Nitro-Oksidatif sebagai Penentu Utama Peningkatan Tekanan Darah dalam Gangguan Mood. J. Mempengaruhi. Kecelaruan. 2021, 278, 226–238. [CrossRef] [PubMed]
24. Eick, SM; Barrett, ES; van 't Erve, TJ; Nguyen, RH; Bush, NR; Milne, G.; Swan, SH; Ferguson, KK Persatuan antara Tekanan Psikologi Pranatal dan Tekanan Oksidatif semasa Kehamilan. Pediatr. Perinat. Epidemiol. 2018, 32, 318–326. [CrossRef]
25. McAllister, MJ; Basham, SA; Waldman, HS; Smith, JW; Mettler, JA; Butawan, MB; Bloomer, RJ Kesan Tekanan Psikologi semasa Bersenam pada Penanda Tekanan Oksidatif dalam Lelaki Sihat dan Terlatih Muda. Fisiol. perangai. 2019, 198, 90–95. [CrossRef] [PubMed]
26. Desrumaux, C.; Risold, P.-Y.; Schroeder, H.; Deckert, V.; Masson, D.; Athias, A.; Laplanche, H.; Le Guern, N.; Blache, D.; Jiang, X.-C. Kekurangan Phospholipid Transfer Protein (PLTP) Mengurangkan Vitamin E-Kandungan Otak dan Meningkatkan Keresahan pada Tikus. FASEB J. 2005, 19, 1–16. [CrossRef]