Industri Nanoteknologi Perlu Dibangunkan Dengan Pantas Di Seluruh Dunia

Sila hubungioscar.xiao@wecistanche.comuntuk maklumat lanjut

Abstrak

Nanozarah zink oksida (ZnO) (NPs) biasanya digunakan dalam barangan kosmetik, bangsal, biosensor, dan penghantaran ubat. Seperti sistem ideal in vitro, sel stem mesenchymal (MSC) digunakan untuk menguji ketoksikan akut. Dalam kajian ini, kesan sitotoksisiti bergantung kepada saiz ZnO NPs pada MSC telah dinilai. MSC sumsum tulang dan adiposa telah dirawat dengan ZnO NPs dengan saiz purata 10-30 dan 35-45 nm. Kepekatan 5 dan 10ug/ml ZnO NP didapati sebagai kepekatan selamat untuk saiz NP 10-30 dan 35-45 nm, masing-masing.faedah cistancheAnalisis kitaran sel menunjukkan bahawa saiz kecil ZnO NPs mempunyai lebih banyak kesan negatif terhadap proses kemasukan sel ke sintesis DNA jika dibandingkan dengan saiz yang lebih besar. Keputusan ujian -galactosidase menunjukkan promosi Forocess penuaan dalam sel yang dirawat dengan saiz ZnO NPs yang lebih kecil. Kedua-dua saiz NP didapati mengimbangi gen yang berkaitan dengan penuaan NF-kB dan p53 dan mengecilkan gen anti-penuaan Nanog. Kesimpulannya, saiz ZnO NP yang lebih kecil boleh meningkatkan proses penuaan dalam sel.

Sila klik di sini untuk mengetahui lebih lanjut

1. Pengenalan

Dalam dekad kebelakangan ini, industri nanoteknologi perlu dibangunkan dengan cepat di seluruh dunia. Zink oksida (ZnO) nanopartikel (NPs) biasanya digunakan dalam produk penjagaan kecantikan, bangsal, biosensor, penghantaran ubat, bioimaging dan sebagai agen antikulat dan antibakteria [1-5]. Struktur nano ZnO mempunyai beberapa sifat yang sangat baik serta kestabilan sebatian paun, julat permukaan spesifik yang hebat, sorotan korespondensi elektron yang tinggi, dan aktiviti sebatian elektro [6]. ZnO NPs sebahagian besarnya digunakan sebagai bahan tambahan yang menghilangkan cahaya UV dalam produk kosmetik seperti pelindung matahari, ubat gigi, dan produk keagungan [7, 8]. Dengan penggunaan meluas bahan berstruktur nano untuk barangan komersil, biokeselamatan bahan-bahan ini telah dipertimbangkan untuk meneroka kesan semula jadi dan toksikologi daripada manifestasi menyimpang dan segera bahan-bahan ini [9]. Disebabkan oleh spesies oksigen reaktif (ROS) dan ion logam yang tidak larut, bahan nano seperti ZnO mempunyai kesan toksik pada sel [10,11].kolesterol cistancheMemandangkan ketoksikan ZnO NPs adalah lebih tinggi dalam air ultratulen daripada garam penampan fosfat (PBS) dalam pelbagai media akueus, ketoksikan ZnO NPs kebanyakannya selaras dengan ion zink bebas [12]. Walaupun kompleks zink NP dengan media menyebabkan ketoksikan yang lebih rendah, kepekatan ion Zn2 ​​tambah sangat berkurangan. Zn2 ditambah ZnO NP yang tidak larut menyebabkan nekrosis dan keradangan [13]. ROS antara sel, yang disebabkan oleh ZnO NPs, mendorong kematian sel dan disfungsi fosforilasi oksidatif mitokondria [10].

Cistanche boleh anti-penuaan

Beberapa eksperimen in vivo telah menunjukkan kesan berbahaya NP Zn pada pelbagai bentuk hidupan seperti drosophila [14], ikan [15], amphipod[16], tikus [17], tikus [18], dan bakteria [19]. Zn NP juga telah dilaporkan menunjukkan ketoksikan in vitro [20-22]. Walaupun terdapat banyak ketoksikan tersembunyi yang dikaitkan dengan ZnO NPs, ia digunakan secara meluas untuk pelbagai aplikasi bioperubatan dan tujuan farmaseutikal [23]. Oleh itu, kajian lanjut diperlukan untuk menilai kesan toksik sebatian ini pada sel. Dalam penyelidikan toksikologi, MSC digunakan sebagai pemodelan in vivo yang ideal [24]. Pengasingan dan pelanjutan MSC dalam budaya adalah mudah, dan pembezaan mereka dilakukan melalui rangsangan yang betul. Sel stem mesenchymal sumsum tulang (BMSCs) menunjukkan kepekaan terhadap ujian sitotoksisiti ubat kanser dan beberapa ubat sitotoksik lain [25]. Selain itu, sel stem mesenchymal (AMSC) yang berasal dari adiposa digunakan untuk menilai keselamatan dadah dan untuk menemui ubat-ubatan [26]. Oleh itu, dalam kajian ini, kami menganggap bahawa AMSC dan BMSC yang disasarkan oleh ZnO NP mungkin sesuai untuk mempertimbangkan potensi risiko dalam pembangunan penuaan. Untuk menilai ketoksikan sel, ujian ekspresi gen, faktor yang memainkan peranan dalam proses toksik awal, adalah sangat penting [26]. Oleh itu, sebagai penanda sel stem khusus, gen Nanog telah digunakan dalam penyelidikan semasa untuk menjangkakan ketoksikan. Nanog mempunyai dua fungsi dalam pembezaan sel stem dan pembaharuan diri [27]. Selain itu, gen Nanog merangsang penindasan senescence dengan merendahkan ekspresi gen p27KIPI [28].kesan sampingan cistanche deserticolaDalam tindak balas klasik terhadap genotoksisiti, untuk menyekat percambahan sel, p53 dalam genom yang rosak menyebabkan penangkapan kitaran sel dan kematian sel. Banyak penyiasatan telah menyerlahkan peranan rangka kerja NF-kB dalam mengaktifkan perubahan merangsang dalam tisu semasa penuaan [29]. Oleh itu, dalam kajian ini, ujian kitaran sel, ujian in situ galactosidase, dan tahap mRNA gen NF-kB, p53, dan Nanog telah dipertimbangkan.

2. Bahan-bahan dan cara-cara

2.1 Sifat dan pencirian zarah nano

Dua saiz berbeza NP ZnO (Sigma Aldrich, Amerika Syarikat) dengan maklumat berikut telah dibeli: satu dengan saiz purata 10-30nm, ditambah ketulenan 99 peratus, ketumpatan 5.606g/cm³ dan kira-kira 20-60m2/ g luas permukaan, dan satu lagi dengan saiz purata 35-45 nm,＋99 peratus ketulenan, 5.606g/cm³ ketumpatan, dan kira-kira 65m-/g luas permukaan (Rajah 1). Kemudian, stok 100ug/ml penggantungan ZnO NPs dalam 1 ml PBS telah disediakan melalui sonication selama 3 minit.

2.2 Pengasingan sel stem mesenchymal

BMSC telah dipilih daripada {{0}}minggu (200-250} g) tikus jantan. Epifisis telah dikeluarkan, rongga sumsum telah diakses, dan jumlah palam sumsum tulang (BM) telah dikeluarkan daripada tulang tibial dan femoral dengan picagari 10ml yang mengandungi medium helang diubah suai Dulbecco (DMEM)(Laboratories Inc., MA, USA) ditambah 10 peratus serum lembu janin (FBS). Sampel BM telah dikumpul dan dihancurkan dengan tepat oleh jarum keinginan berturut-turut 18 dan 20 tolok yang dilampirkan pada picagari 10ml yang serupa. Kemudian, ampaian sel telah disentrifugasi selama 5 minit pada 1000 rpm. Selepas pelleting sel, mereka digantung semula dalam medium dengan 10 peratus FBS. Untuk memainkan kaunter pengiraan sel, 4 peratus asid asetik dicampur dengan jumlah penggantungan yang rendah untuk melisiskan sel darah merah. Pengiraan sel dilakukan dengan hemocytometer. Selepas itu, sel 5×10' disalut dalam hidangan kultur 100mm, disimpan dalam 5 peratus CO2 pada 37 darjah , dan ditukar dengan medium segar setiap 3-4 hari [30]. Menggunakan kolagenase jenis I (0.15 peratus berat kepada isipadu) selama 1j pada 37 darjah, tisu adiposa kemudiannya diasingkan secara enzimatik. Untuk mengalih keluar zarah yang tidak dipisahkan, penggantungan telah ditapis dengan penapis 70-um. Kemudian, DMEM dengan 10 peratus (v/v)FBS ditambah dan disentrifugasi pada 700×g selama 5min. Akhirnya, pelet sel telah digantung semula dalam DMEM dengan 1 peratus (v/v) penisilin/streptomisin dan 10 peratus (v/v) FBS [31].

2.3 Kultur sel

AMSC dan BMSC telah dibiakkan di DMEM (Laboratories Inc., MA, USA) dengan 1 peratus antibiotik dan 10 peratus FBS dalam keadaan kultur standard (pada 37 darjah, dalam 5 peratus CO2, dan 95 peratus kelembapan)[32].

2.4 Pencirian penanda permukaan BMSC dan AMSCS

BMSC dan AMSC dituai selama 5 minit pada 37 darjah, disalut dengan sentrifugasi 200 × g selama 5 minit, dan dibilas dengan PBS sejuk. Seterusnya, 5 ul antibodi terkonjugasi fluorescein isothiocyanate (FITC), termasuk CD34-PE, CD90-FITC, CD45-FITC dan CD73-FITC (Thermo Fisher Scientific, Jerman), telah ditambahkan pada BMSC dan AMSC dan kemudian disimpan pada suhu bilik (RT) dan tempat gelap selama 20 minit. Sampel telah dinilai dengan cytometer aliran (BD FACS Caliber; San Jose, CA, Amerika Syarikat) [33, 34].

2.5 Sitotoksisiti in vitro

Untuk ujian sitotoksisiti NPS, BMSC dan AMSC telah dikultur menjadi {{0}}plat perigi pada pertemuan 70-80 peratus, semua zarah digantung dalam DMEM lengkap (10 peratus NP dicairkan dengan 90 peratus DMEM yang mengandungi PBS)[35]. Sonikasi mandian dilakukan dua kali, setiap kali selama 5 minit, untuk mencampurkan kepekatan NP ZnO akhir dengan halus. Oleh itu, BMSC dan AMSC telah dirawat dengan kepekatan yang berbeza (0,3,5,10,25, dan 50ug/ml) NP ZnO selama 24, 48, dan 72 jam. Kemudian, ujian MTT digunakan untuk menguji daya maju sel yang dirawat.dos cistanche redditPenyediaan larutan stok MTT ((3-(4,5-diminish ethyl thiazole-2-yl)- 2,5-diphenyltetrazolium bromide) telah dilakukan dengan menambah 1ml PBS kepada 5mg MTT (Sigma, USA) di tempat yang gelap. Kemudian, 20ul larutan stok dicampur dengan semua telaga eksperimen (sel kawalan dan NP ZnO dirawat dengan kepekatan yang berbeza), digetar selama 10 minit, dan diinkubasi pada 37 darjah selama 3 jam Akhir sekali, sampel telah dikeluarkan dari inkubator dan dicampur dengan DMSO, dengan warna ungu yang ketara pada peringkat ini. Ia telah dibangunkan melalui pipet dan dibaca serta-merta dengan kehadiran UV pada 570nm.

2.6 Ujian kitaran sel

BMSC dan AMSC telah disemai dalam 6-plat perigi yang berbeza. Walaupun pertemuan sel 70 peratus diperhatikan, kepekatan ZnO NPs yang selamat (5 dan 10ug/ml dalam saiz ZnO NP yang lebih kecil dan lebih besar telah diperolehi, masing-masing) dirawat pada sel untuk ujian MTT dan diinkubasi selama 72 jam pada 37 darjah (5 peratus CO2). Media dikeluarkan dari cakera confocal selepas 72 jam dan dibasuh dengan PBS dua kali dan disentrifugasi. Sel-sel telah ditetapkan menggunakan etanol (70 peratus ) pada 4 darjah selama 2 hari. Kemudian, sel yang diinkubasi sekali lagi dibilas dengan PBS dan digoncangkan sedikit, diikuti dengan media dikeluarkan sepenuhnya dari cakera confocal. Seterusnya, 10ul RNase ditambah dan diinkubasi selama 45 minit. Untuk pewarnaan, sel-sel telah digantung dengan larutan 10ul propidium iodide (Sigma, Amerika Syarikat). Sitometer aliran telah disaman untuk menilai DNA sel [36].

2.7 Galactosidase in situ assay untuk penuaan selular

Aktiviti senescence-associated-galactosidase (SA-gal), sebagai biomarker biasa untuk ujian penuaan dalam sel, telah dinilai oleh SA- -kit pewarnaan (Thermo Fisher Scientific, Jerman) sama seperti dalam kajian terdahulu [37]. Sel telah disemai dalam 24-plat perigi dan dirawat dengan dua saiz ZnO NP yang berbeza dengan kepekatan selamat. Seterusnya, ia dibasuh dalam PBS, dibetulkan dalam campuran fiksatif G/F (20 peratus glutaraldehid ＋ 37 peratus formaldi), dan diinkubasi di RT selama 3-5 min. Kemudian, sel-sel itu kemudiannya diwarnakan dalam larutan pewarna segar (10ml sitrat Na ditambah 250ul potassium ferricyanide ＋250ul potassium ferrocyanide＋100ul MgCl＋250ul NaCl＋200ul X-gal）selama 2j di tempat yang gelap 8} sel SA{8} positif SA{1} warna hijau divisualisasikan menggunakan mikroskop cahaya terbalik.

2.8 PCR masa nyata

BMSC dan AMSC dengan dua saiz ZnO NP yang berbeza telah dirawat dalam kepekatan optimum 5 dan 10 ug/ml, masing-masing. Mereka dituai selepas 48j, dan kit pengekstrakan RNA (Bio Basic INC) digunakan untuk mengekstrak jumlah RNA. Untaian pertama cDNA telah disintesis melalui transkripsi terbalik menggunakan kit SYBR Green qPCR MasterMix 2X, SYBR darjah Premix Ex TaqIM (TaKaRa, Jepun). Kemudian, kualiti dan kuantiti cDNA yang disintesis telah dinilai oleh spektrofotometer NanoDrop ND-1000 (Thermo Scientific, Jerman).faedah ekstrak cistancheKemudian, 2ul daripada cDNA digunakan untuk penguatan gen sasaran. Primer khusus telah direka oleh perisian Primer 3 dan digunakan untuk menguatkan ekspresi gen p53, NF-kB dan Nanog (General Biotech, Korea). Urutan primer dibentangkan dalam Jadual 1.

Tahap ekspresi telah dinormalisasi kepada tahap ekspresi gen GAPDH sebagai gen pengemasan. Untuk melaksanakan PCR masa nyata, kitaran pertama pada 95 darjah selama 3 minit dan 40 kitaran pada 95 darjah untuk 20s, pada 60 darjah selama 20s, dan pada 72 darjah selama 30s telah digunakan.

2.9 Analisis statistik

Semua ujian telah dilakukan dalam tiga kali ganda, dan hasilnya dipaparkan sebagai min ± sisihan piawai (SD). Data telah dimasukkan ke dalam perisian SPSS (IBM Corp. NY, USA) dan dianalisis dengan analisis varians dua hala (ANOVA).

3 Keputusan

3.1 Analisis sitometri aliran sel stem mesenchymal

Sel stem mesenchymal tikus dipisahkan daripada dua asal, termasuk tisu adiposa dan BM. Penanda CD permukaan MSC telah diperiksa dan majoriti AMSC atau BMSC (98.18 dan 99.62 peratus ) ditemui untuk CD90 sebagai penanda permukaan positif dalam MSC (Rajah 2A, B). Tambahan pula, 94.80 dan 99.76 peratus daripada CD73 dalam AMSC atau BMSC pasti tercemar, masing-masing (Rajah 2A, B). Selain itu, peratusan BMSC atau AMSC yang tidak dihiraukan menunjukkan ekspresi CD45 (0.18 atau 0.56 peratus ) dan CD34 (0.71 atau 12.65 peratus ) dalam AMSC atau BMSC, yang merupakan penanda garis keturunan hematopoietik (Rajah). .2A, B). Profil molekul ini menunjukkan sifat luar biasa BMSC dan AMSC. Tambahan pula, mereka meluluskan penyingkiran kualiti sel hematopoietik dan pengasingan sel stem mesenchymal daripada tisu adiposa dan BM semasa pengasingan sel stromal.

3.2 Sitotoksisiti in vitro

Ujian sitotoksisiti kolorimetrik berasaskan MTT telah digunakan untuk menyiasat daya maju BMSC atau AMSC berikutan rawatannya dengan 10-30 dan 35-45 nm ZnO NPs selama 1,2, dan 3 hari (Rajah 3). Menurut data yang ditunjukkan dalam Rajah 2, kesan dua saiz ZnO NP yang berbeza pada BMSC atau AMSC adalah bergantung kepada dos dan masa. Pada dos 5 dan 10 ug/ml, 10-30 dan 35-45 nm ZnO NPs masing-masing menunjukkan daya maju yang baik untuk AMSC dan BMSC (Rajah 3). Tambahan pula, daya maju AMSC dan BMSC dengan 35-45 nm ZnO NPs telah menurun dalam cara yang bergantung kepada dos dan masa pada kepekatan yang sama (Rajah 3).

3.3 Ujian kitaran sel

Kesan ZnO NPs pada taburan kitaran sel BMSC dan AMSC telah dikaji menggunakan pewarnaan propidium iodide dan diukur dengan sitometri aliran. Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 4, AMSC dan BMSC dirawat dengan 10-30nm ZnO NPs

menunjukkan bahawa nisbah sel yang memasuki fasa GO/Gl meningkat (82.2 dan 82.01 peratus ) berbanding kumpulan kawalan (masing-masing 81.92 dan 78.76 peratus). Apabila isyarat yang mendorong percambahan mengalami apoptosis atau hilang, sel mempunyai kecenderungan untuk meningkat dalam G0/G1 [38].

Selain itu, dalam AMSC dan BMSC yang dirawat dengan NP ZnO 10-30nm, fasa G2/M menurun (7.38 dan 9.98 peratus secara reseptif) berbanding kumpulan kawalan (10.04 dan 13.47 peratus ), menunjukkan bahawa sel telah ditangkap pada Kitaran sel S dan fasa G2/M dan tidak membiak secara aktif (Gamb.4). Walau bagaimanapun, analisis kitaran sel bagi 35-45 nm ZnO NPs menunjukkan peningkatan pengumpulan sel fasa G2/M dalam AMSC dan BMSC (14.19 dan 16.18 peratus , secara reseptif) berbanding kumpulan kawalan G2/M (10.04 dan 13.47). peratus ), menunjukkan keterlambatan proses kitaran sel (Rajah 4). Apabila DNA dicederakan, pusat pemeriksaan G2 menghalang mitosis sel dan memastikan percambahan pendua genom tanpa ralat kepada setiap sel anak.

3.4 Ujian in situ galaktosidase

Aktiviti enzim beta-galactosidase telah digunakan dalam kerja ini untuk menyemak kesan 10-30 dan 35-45 nm ZnO NPs pada penuaan BMSC dan AMSC. Keputusan kami menunjukkan bahawa kawasan sel dengan pewarnaan hijau positif diperhatikan lebih kerap dalam kumpulan yang dirawat ZnO NP dalam kedua-dua jenis sel stem tikus berbanding dengan kumpulan kawalan (Rajah 5A, B).

Dalam sel normal, asid lisosom -galaktosidase dihasilkan dan dikumpulkan dalam lisosom, seperti yang diperhatikan dalam kumpulan kawalan. Tetapi dalam sel senescent, lisosom meningkat dan menghasilkan tahap atas -galactosidase, dinamakan senescence-associated -galactosidase (SA- -gal), seperti yang dikesan dalam sel yang dirawat dengan ZnO NPs (Rajah 5). Sel-sel positif SA-gal telah diwarnakan biru-hijau di bawah mikroskop medan terang. Kedua-dua sel yang dirawat adalah positif berbanding dengan kumpulan kawalan. Warna biru-hijau tertinggi diperoleh dalam AMSC dengan 10-30nm ZnO NPs (Rajah 5A).

3.5 PCR masa nyata

Ekspresi relatif gen NF-kB, P53 dan Nanog dinilai relatif kepada GAPDH sebagai gen pengemasan pada kedua-dua BMSC dan AMSC, yang terdedah kepada NP ZnO 5 dan 10ug/ml dalam 10-30 dan 35-45 saiz nm, masing-masing, selepas 48j. Keputusan ekspresi gen Nanog dalam sel yang dirawat dengan 10-30 dan 35-45 nm ZnO NPs menunjukkan dengan ketara (P<0.01)lower regulation="" in="" the="" amscs="" (fig.6a)="" and="" bmscs="" in="" comparison="" with="" the="" control="" group="" (fig.="">

Sel yang dirawat dengan 10-30nm ZnO NPs menunjukkan ekspresi gen Nanog yang lebih rendah berbanding dengan sel yang dirawat dengan

4. Perbincangan

Kajian ini menilai kesan toksik dua saiz NP ZnO pada BMSC dan AMSC;10-30nm sebagai saiz yang lebih kecil dan 35-45nm sebagai saiz yang lebih besar. Keputusan menunjukkan bahawa saiz ZnO NP yang lebih kecil mempunyai kesan yang lebih toksik daripada saiz yang lebih besar. Zon permukaan dan saiz zarah NP adalah kualiti bahan yang ketara dari sudut toksikologi. Apabila saiz zarah berkurangan, kawasan permukaannya meningkat dan membenarkan tahap zarah atau atomnya yang lebih tinggi ditunjukkan secara cetek berbanding bahagian dalam bahan [39].

Bahan nano yang lebih kecil daripada 50 nm memaparkan sifat Fiziko-kimia yang unik kerana saiznya yang kecil, kawasan permukaan yang tinggi, kos yang rendah, kereaktifan yang lebih baik dan kemasukan yang mudah ke dalam pembahagi sel [40-42]. Mengikut keputusan ujian MTT kami, kepekatan optimum dan selamat bagi saiz ZnO NP yang lebih kecil dan lebih besar yang dikaji adalah 5 dan 10 ug/ml, masing-masing, berbanding dengan kumpulan kawalan. Analisis kitaran sel kami menunjukkan bahawa kepekatan selamat ZnO NPs bersaiz 10-30 nm mempunyai kesan toksik pada AMSC dengan mengurangkan bilangan sel dalam fasa S dan GO/G1, yang menunjukkan penahanan proses dan kehilangan kitaran sel daripada isyarat percambahan pemacu. ZnO NP dalam saiz 35-45 nm mengurangkan sel dalam fasa G2/M dan S, mengakibatkan keterlambatan proses kitaran sel.

Keputusan kajian kami adalah selaras dengan kajian lain yang menunjukkan bahawa NP boleh menyebabkan kematian sel dengan cara merosakkan DNA atau organel [43, 44]. Walaupun terdapat laporan toksikologi terhad kesan ZnO NPs, terdapat beberapa laporan mengenai kesan sitotoksik ZnO NP secara in vitro [45-47]. Satu kajian menunjukkan bahawa tegasan oksidatif telah diaktifkan dalam sel TR146 dengan kepekatan 10ug/ml ZnO NPs [48] dan dalam sel SH-SY5Y dengan kepekatan 15 ug/ml [49]. Sitokin pro-radang dikeluarkan dalam sel THP-1 dengan 17.69 ug/ml ZnO NPs 【20】. Kerosakan DNA juga dibuat pada kepekatan 6.4 ug/ml NP ZnO dalam sel karsinoma kolon manusia [50] dan pada kepekatan 12.5 ug/ml dalam sel epitelium buah pinggang tikus [51]. Sentuhan dengan bahan nano tidak dapat dielakkan kerana ia menjadi sebahagian daripada kehidupan seharian kita; sewajarnya, ketoksikan penyelidikan bahan nano diambil kira [52]. Rajah 9 menggambarkan interaksi ZnO NPs dalam sel mamalia. Penentuan sel senescent menunjukkan peningkatan tahap aktiviti lisosom -galactosidase [53]. Keputusan ujian SA- -gal kami menunjukkan bahawa ZnO NP dalam kedua-dua saiz yang lebih kecil dan lebih besar (10-30 dan 35-45 nm) merangsang sel untuk menghasilkan lisosom. Walau bagaimanapun, warna biru-hijau yang tinggi disebabkan oleh tahap lisosom yang tinggi dalam sel yang terdedah kepada 10-30 nm ZnO NPs berbanding dengan kumpulan kawalan.

P53 berfungsi sebagai kualiti jangka hayat kecemerlangan aktiviti penyenyap tumor yang kuat dan pengawal penuaan [54]. p53 boleh mengurangkan dan meningkatkan tekanan oksidatif mungkin disebabkan oleh kesan berganda pada penuaan. Keputusan PCR masa nyata kami menunjukkan ekspresi gen p53 dan NF-kB yang dikawal dengan ketara dalam sel yang terdedah kepada kedua-dua saiz NP ZnO. Walau bagaimanapun, ekspresi berlebihan tertinggi bagi gen ini telah dikesan dalam sel yang dirawat dengan saiz (10-30nm) NP yang lebih kecil. Selain itu, tahap mRNA gen Nanog dianggap sebagai gen anti-penuaan. Untuk gen Nanog, hasil kajian kami menunjukkan penurunan yang ketara bagi kedua-dua saiz ZnO NP yang dikaji dalam kedua-dua sel yang dirawat. Walau bagaimanapun, penurunan peraturan terendah dalam saiz 10-30nm menunjukkan bahawa NP ZnO boleh menjadi lebih toksik dalam saiz yang lebih kecil daripada saiz yang lebih besar (35-45 nm).

5. Kesimpulan

ZnO NPs (10-30 dan 35-45 nm) menggesa sel kepada proses penuaan. Saiz ZnO NP yang lebih kecil mempunyai lebih banyak kesan toksik pada sintesis DNA daripada saiz yang lebih besar. Pewarnaan -galactosidase tertinggi diperhatikan dalam saiz yang lebih kecil daripada saiz ZnO NP yang lebih besar. Di samping itu, ekspresi berlebihan gen yang berkaitan dengan penuaan (NF-kB dan p53) telah diperolehi dalam sel ZnO NP yang dirawat dengan kedua-dua saiz. Tambahan pula, pengurangan ketara gen berkaitan anti-penuaan (Nanog) diperoleh dalam sel yang dirawat dengan ZnO NPs.

Artikel ini diekstrak daripada Journal of Materials Science: Materials in Medicine (2021) 32:128https://doi.org/10.1007/s10856-021-06602-x