Triterpenoid Lanostane dalam Poria Cocos Memainkan Peranan Berfaedah dalam Aktiviti Imunoregulasi

Sila hubungioscar.xiao@wecistanche.comuntuk maklumat lanjut

Abstrak:Poria cocos (Schwein) FA Wolf(syn. Wolfiporia cocos)sklerotium kering, dipanggil lipatan, ialah kulat saprofit yang boleh dimakan yang biasa digunakan sebagai ubat tonik dan antipenuaan tradisional Cina. Ia digunakan secara tradisional dalam kombinasi dengan ubat-ubatan tradisional Cina yang lain untuk meningkatkan imuniti. Kajian ini menunjukkan bahawa ekstrak P. cocos (Lipucan⑨) yang mengandungi lanostane triterpenoids tidak mempunyai imunotoksisiti dan meningkatkan imuniti tidak spesifik(innate) melalui mengaktifkan sel pembunuh semula jadi dan menggalakkan rembesan interferon （IFN-y） oleh sel T-helper（Th1） Jenis 1. tindak balas imun. Selain itu, ekstrak P. cocos mengurangkan rembesan interleukin (IL-4 dan IL-5) dengan ketara oleh tindak balas imun sel-sel T-helper (Th2) Jenis 2, yang berkaitan dengan tindak balas alahan. Triterpenoid lanostane yang telah dimurnikan pertama kali dikenal pasti sebagai bahan aktif P. cocos dengan imuniti tidak spesifik yang dipertingkatkan dengan menggalakkan rembesan interferon （IFN-） dalam kajian awal. Penemuan kami menyokong bahawa ekstrak P. cocos memainkan peranan yang bermanfaat dalam aktiviti imunoregulasi.

Kata kunci:Poria cocos; triterpenoid lanostane; imunotoksisiti; Th1/Th2: immunoregulasi

1. Pengenalan

Jangkitan virus seperti virus pernafasan (termasuk virus influenza, rhinovirus, adenovirus, dan coronavirus), herpes dan virus kekurangan imun manusia (HIV) secara serius mengancam kesihatan manusia. Virus pernafasan yang sangat berjangkit ini menjangkiti penduduk dunia, menjadi pandemik dan menyebabkan banyak kematian. Ancaman ini telah berkembang menjadi isu kesihatan peribadi dan juga kepada isu ekonomi, keselamatan, dan sosial antarabangsa [1]. Vaksinasi kini merupakan cara utama untuk mengawal penyebaran jangkitan virus influenza. Walau bagaimanapun, disebabkan oleh keupayaan virus yang terkenal untuk bermutasi, vaksin baharu mesti dibangunkan setiap tahun. Terdapat keperluan mendesak untuk membangunkan ubat antivirus atau pendekatan terapeutik yang berkesan. Malangnya, bertahun-tahun dan ratusan juta dolar diperlukan untuk membangunkan ubat-ubatan baru, selalunya terlambat untuk melawan wabak virus secara tiba-tiba. Laporan terkini menunjukkan bahawa orang yang berumur lebih dari 50 tahun kebanyakannya dijangkiti virus pernafasan [2,3]. Penuaan adalah satu sebab yang berkait rapat dengan kecacatan dalam sistem imun, termasuk fungsi sel dan nombor [4-6]. Penjagaan diri adalah pendekatan penting yang digunakan di kebanyakan negara untuk mengurangkan perbelanjaan perubatan peribadi dan beban penjagaan kesihatan sosial |7,8]. Pembangunan penambah imuniti untuk meningkatkan daya tahan hos terhadap jangkitan virus dan meningkatkan kebolehsuaian tuan rumah adalah pendekatan penting yang telah mendapat banyak perhatian baru-baru ini [9,10].

Barisan pertama pertahanan tubuh manusia terhadap patogen termasuk halangan fisiologi seperti kulit, tisu subkutaneus dan mukosa. Barisan pertahanan kedua ialah sistem imun, terdiri daripada organ imun, sel imun, dan molekul imun. Sistem imun dibahagikan kepada imuniti semula jadi dan imuniti adaptif [11]. Sistem imun semula jadi adalah sistem imun yang tidak spesifik. Ia boleh membezakan dirinya sendiri dan bukan diri sendiri tanpa pendedahan berulang kepada patogen seperti bakteria dan virus. Kerana ciri-cirinya yang tidak spesifik, ia mempunyai keupayaan yang luas untuk melawan pelbagai jangkitan [12]. Sel pembunuh semulajadi (NK) dan interferon (IFN adalah komponen antivirus utama sistem imun semula jadi dalam pertahanan perumah terhadap jangkitan virus pernafasan [13]. Sel NK mempunyai keupayaan untuk membunuh sel yang dijangkiti virus dengan pantas. Selain itu, sel NK juga mencetuskan sel imun yang lain, jenis T-helper （Th1） sel, dengan melepaskan IFN- 【14,15】. Interferon mempunyai keupayaan untuk mengganggu replikasi virus dan boleh dibahagikan kepada tiga jenis termasuk interferon I （IFN- , IFN- ） , II （IFN-y）, dan ⅢI （IFN-λ）【16,17】. Replikasi virus ialah peringkat asas yang penting dalam kehidupan virus. Sel-sel memainkan peranan penting dalam mempertahankan daripada jangkitan virus [18]. Sebaliknya tangan, sel T-helper (Th2) Jenis 2 terutamanya merembeskan interleukin (IL) termasuk IL-4, dan IL-5, dan menggalakkan sel B untuk merembeskan antibodi immunoglobulin E(IgE) untuk menggalakkan imuniti humoral dan mendorong tindak balas alahan [19].

Sila klik di sini untuk mengetahui lebih lanjut

Filing (sklerotium kering Poria cocos(Schwein.)FAWolf(syn. Wolfiporia cocos)), ubat tradisional Cina tonik dan anti-penuaan yang terkenal, telah digunakan secara meluas sebagai penenang dan diuretik selama lebih daripada dua ribu tahun [ 20]. P. cocos telah ditunjukkan mempunyai fungsi anti-radang, anti-tumor, anti-hiperglisemik, sedatif dan anti-penuaan dengan triterpenoid lanostane yang dikenal pasti sebagai komponen aktif [21-30]. Di samping itu, pecahan etil asetat dan pecahan polisakarida mentah P. cocos telah ditunjukkan untuk meningkatkan imuniti dalam model haiwan berdasarkan ujian kandungan hemolisis serum, kesan fagositik makrofaj mononuklear, dan tahap transformasi limfosit. Triterpenoid lanostane dianggap sebagai komponen utama dalam pecahan etil asetat mengikut analisis HPLC [31]. Walau bagaimanapun, masih tidak jelas sama ada imuniti semula jadi dan adaptif mempunyai kesan ke atas aktiviti sel NK, IFN, sel imun atau sitokin P.cocos, dan penjelasan sebatian aktif. Kajian ini menyiasat kesan sistem imun ekstrak P. cocos, produk konsisten kandungan triterpenoid lanostane yang dipatenkan, menggunakan model haiwan. Komponen aktif dikenal pasti terlebih dahulu.

Cistanche boleh anti-penuaan

2. Bahan-bahan dan cara-cara

2.1.Bahan Tumbuhan

Selerotium kering P. cocos(Schwein.)FAWolf telah diekstrak menggunakan 75 peratus etanol untuk mendapatkan ekstrak P. cocos (Lipucan). Ekstrak ini dihasilkan oleh Sinphar Tian-Li Pharmaceutical Co., Ltd., Hangzhou Sinphar Group, China, dan dibangunkan oleh Sinphar R&D Center, Taiwan. Ekstrak mengandungi empat triterpenoid lanostana utama (Rajah 1, sebatian 1-4) yang dianalisis menggunakan kromatografi cecair berprestasi ultra(UPLC) [32]. Empat kandungan triterpenoid lanostane utama ialah 6.2 peratus. Kapsul komersial(FL) yang mengandungi 27.0 mg ekstrak P. cocos telah digunakan untuk menyiasat kesan ke atas aktiviti imunoregulasi.

2.2. Pengasingan dan Pemurnian Lanostane Triterpenoids daripada P. cocos

P.cocos kering(10} kg) telah diekstrak tiga kali dengan refluks dengan 75 peratus etanol selama 3 jam [24]. Ekstrak pekat dikromatografi pada gel silika (70-230 mesh) menggunakan campuran yang semakin polar CH2Cl, dan MeOH(CH2Cl:MeOH,97:3; CH2Cl2:MeOH, 96:4;CH2Cl:MeOH,90:10, dan 100 peratus MeOH). Menurut kromatografi lapisan nipis (TLC), empat pecahan(Fr.1-Fr.4) telah dikumpulkan untuk pengasingan selanjutnya. Fr.1-Fr.3 tertakluk kepada kromatografi cecair berprestasi tinggi persediaan (HPLC) (Waters Prep 150 LCsystem, Milford, MA, USA) pada lajur Waters XBridge RP-18(250 mm× 19 mm, 5 um, Milford, MA, USA)menggunakan 80 peratus metanol sebagai sistem fasa mudah alih. Kadar alir ialah 18 mL/min. Empat puncak minat utama telah dikumpulkan secara terpilih. Pecahan yang mengandungi sebatian yang disasarkan dipeluwapkan lagi kepada kekeringan dan menghasilkan asid tumulosik(1)(120.1 mg), asid polifonik C(2)(16.0mg),3-asid epi-dehydrotumulosic (3)(12.1 mg) , dan asid dehidrotumulosik(4)(6.8 mg), masing-masing. Struktur mereka telah dijelaskan oleh analisis spektroskopi NMR (resonans magnetik nuklear) dan spektrometer jisim pengionan elektrospray (ESI-MS) dan dengan perbandingan dengan data literatur [32].

2.3.Kajian Awal Haiwan oleh Lanostane Triterpenoid Compounds(1-3) untuk Kajian Analisis IFN-r

Untuk kajian ini, sebatian triterpenoid lanostane yang telah dimurnikan, termasuk asid tumulosik (1), asid polifonik C(2), dan 3-asid epidehidrotumulosik (3), telah disediakan untuk kajian awal menggunakan BALB/c(tekanan tikus). daripada tikus albino) tikus jantan. Selepas 4 hari pemberian oral sebatian 1-3 dan air suling steril(kumpulan kawalan)(1 mL/tikus), tikus dikorbankan pada hari kelima, dan sel limpa dikumpulkan. Limpa segar dipindahkan ke plat kultur yang mengandungi 10 mL Roswell Park Memorial Institute(RPMI)-1640 medium kultur. Limpa kemudiannya dikisar di atas jaringan halus untuk melepaskan sel-sel limpa. Sel-sel limpa yang terampai dalam medium kemudiannya dipindahkan ke tiub emparan kon 50 ml dan disentrifugasi pada 1300 rpm selama 10 minit. Supernatan dibuang dan pelet digantung semula dalam 1 ml penimbal pemlisis sel darah merah sejuk (RBC) yang mengandungi EDTA-NH4Cl. Sel-sel telah diinkubasi pada suhu bilik selama 10 minit dan kemudian dibasuh tiga kali dengan medium kultur dengan sentrifugasi. Suspensi sel limpa kemudiannya dikultur dalam 24-plat perigi pada ketumpatan 1 × 10 darjah sel/mL dalam medium yang mengandungi RPMl 1640 ditambah dengan 10 peratus serum lembu janin(FBS),2 mM L-glutamin, antibiotik, dan 1 ug/mL concanavalin A（ConA）pada 37 darjah selama 3 hari. Kultur supernatan sel limpa telah dikumpulkan. Kepekatan IFN- diukur menggunakan kit ujian imunosorben berkaitan Enzim (ELISA) (Sistem R&D, Minneapolis, MN, Amerika Syarikat).

2.4.Model Haiwan dan Jadual Eksperimen

Tikus BALB/c betina telah dibeli dari Pusat Haiwan Universiti Taiwan Nasional. Haiwan telah ditempatkan dalam sangkar pengudaraan individu untuk Spesifik-Bebas Patogen pada 22±2 darjah , dengan suhu dan kelembapan pada 40-60 peratus dengan 12 j/12 jam pada kitaran terang/gelap dan akses percuma kepada makanan dan air. Selepas satu minggu penyesuaian, tikus dikumpulkan secara rawak mengikut berat badan dan digunakan untuk eksperimen. Empat dos berbeza,26mg/kg (FL200),52mg/kg (FL400),104 mg/kg (FL800),156 mg/kg (FL1200), masing-masing dilarutkan dalam suling steril air (0.4 mL) dan diberikan secara lisan selama lima hari berturut-turut seminggu selama 9 minggu. Kumpulan kawalan diberi makan dengan air suling steril (0.4 mL). Tikus telah disuntik dengan antigen spesifik ovalbumin(OVA) secara intraperitoneal pada minggu ketiga, kelima, dan ketujuh. OVA ialah alergen putih telur ayam yang terdapat terutamanya dalam putih telur. Ia biasanya digunakan untuk menyebabkan alahan dalam model haiwan eksperimen. Sel-sel limpa telah dikumpulkan untuk kajian lanjut. Tikus telah dikorbankan menggunakan euthanasia karbon dioksida selepas 9 minggu percubaan. Nombor kelulusan untuk kajian ini oleh jawatankuasa penjagaan dan penggunaan haiwan institusi (IACUC) ialah A9647.

2.5. Pengumpulan Sampel Limpa

Limpa, organ memanjang merah gelap di sebelah kiri atas perut tikus, telah dikumpulkan. Selepas tisu penghubung dikeluarkan dengan berhati-hati menggunakan gunting kecil dan forsep, limpa diletakkan dalam medium kultur sel (medium RPMI 1640 dengan 10 peratus serum lembu janin (HyClone)). Selepas ditimbang, sampel limpa dikisar menggunakan penolak picagari 5 mL yang bersih dan steril. Suspensi sel limpa telah disedut ke dalam tiub empar 15 mL baharu dengan penitis plastik pakej tunggal steril 3 mL. Sel terampai dikumpulkan selepas 5 minit pemendakan. Sel terampai telah disentrifugasi pada 1500 rpm selama 7 minit dan supernatan dibuang untuk mendapatkan palet sel. Kemudian, 1 mL penimbal lisis RBC ditambah untuk mengeluarkan sel darah merah selama 1 minit. Sembilan mL 10 peratus serum lembu janin ditambah dengan cepat ke dalam medium kultur, langkah sentrifugasi diulang, dan supernatan dibuang. Untuk mengelakkan kerosakan integriti sel limpa akibat penimbal RBClysis, sampel dicuci tiga kali dengan larutan penimbal Hank's Balanced Salt Solution (HBSS). Sel-sel limpa kemudiannya digantung dengan medium kultur serum lembu janin 10 peratus untuk analisis dan eksperimen.

2.6. Tindak balas Imun Tidak Tertentu

2.6.1.Analisis Penanda Permukaan Sel Limpa

Analisis sel imun dilakukan menggunakan antibodi monoklonal pendarfluor yang secara khusus mengikat pelbagai jenis sel imun menggunakan cytometer aliran pendarfluor. Sitometri aliran (Epics XL-MCL Beckman Coulter, Brea, CA, USA) digunakan untuk mengira bahagian sel imun tertentu seperti kompleks histokompatibiliti utama jenis I (MHC I), sel T CD4 tambah, sel T CD8 tambah, sel NK, dan makrofaj.

2.6.2. Analisis Aktiviti Sel Pembunuh Semulajadi

YAC-1 (garisan sel yang sensitif kepada tindakan aktiviti sel NK) talian sel limfoma tikus (ATCC) telah digunakan sebagai sasaran sel NK dalam eksperimen ini. Apabila sel limpa tikus betina BALB/c dikultur bersama dengan sel YAC-1 dalam hidangan yang sama, sel pembunuh semulajadi akan membunuh sel-1 YAC. Selepas 3 jam tindak balas sitotoksisiti, sel YAC-1 yang terbunuh telah diwarnakan dengan pewarna (Kit Sitotoksisiti Pengantaraan Sel HIDUP/MATI, Probe Molekul, L-7010). Oleh itu sitometri aliran digunakan untuk mengesan dan menganalisis keamatan pendarfluor menggunakan perisian WinMDI 2.8 (Purdue University Cytometry Laboratories, West Lafayette, IN, USA). Nisbah sel effector(E)kepada sel sasaran(T) ialah 100:1 dan 200:1 (Sel effector ialah sel limpa dan sel sasaran ialah sel YAC-1).

2.6.3. Rembesan Sitokin Menggunakan Analisis Sel Limpa

Selepas merangsang sel limpa dengan ConA（kepekatan 2.5 ug/mL） selama 48 jam, supernatan kultur sel dikumpul dan disimpan pada -20 darjah untuk analisis sitokin menggunakan kit IL-5 ELISA OptEIA tetikus( Pharmigen, 555236, Tasik Franklin, NJ, Amerika Syarikat)dan kit tetikus DouSet IFN- ELISA （Sistem R&D, DY485, Minneapolis, MN, Amerika Syarikat）. Penampan salutan (pH:9.6) telah disediakan untuk mengandungi jumlah antibodi sitokin antitikus yang sesuai (L-5 dan IFN-y) pada 96-plat perigi (plat Nunc-Immuno, MaxiSorp, Thermo Saintifik, Roskilde, Denmark). Selepas berdiri pada 4C semalaman, antibodi yang tidak terikat dibilas dengan Fosfat Buffered Saline dengan Tween20（PBST） buffer, dan 200 μL/well of blocking buffer (1 peratus BSA dalam PBS) kemudian ditambah. Selepas 2 jam pada suhu bilik, sampel dibilas dengan penimbal PBST, dan 100 μL/telaga supernatan kultur sel atau standard sitokin rekombinan ditambah kepada sampel. Selepas 4 darjah semalaman, sampel dibilas dengan penimbal PBST. Kepekatan yang sesuai bagi antibodi sekunder anti-sitokin biotin (biotin) terpaut (100 uL/telaga) kemudiannya ditambah. Selepas 2 jam pada suhu bilik, sampel dibilas dengan penimbal PBST. Avidin-peroxidase （100 μL/well）（Sigma, St. Louis, MO, USA) kemudiannya ditambah. Selepas 1 jam pada suhu bilik, substrat Tetramethylbenzidine (TMB)(R&D Systems, Minneapolis, MN, USA) telah ditambah selama 5 minit tindak balas warna, dan 50 μL 2.5 peratus H2SO4 kemudiannya ditambah untuk menghentikan tindak balas warna. Penyerapan diukur pada 450 nm.

2.7. Tindak Balas Imun Tertentu oleh Tikus Terinduksi Ovalbumin (OVA).

Tikus betina BALB/c telah disuntik secara intraperitoneal dengan OVA sebagai antigen dan CFA (Pelengkap Freund Lengkap) sebagai pembantu. Keadaan kultur sel limpa adalah sama seperti di atas. Sitokin (L-4) telah dianalisis oleh ELISA.

2.8.Analisis Statistik

Data dilaporkan sebagai min (SD) dan dianalisis menggunakan ANOVA sehala. Nilai dianggap signifikan secara statistik pada p<0.05. dunnett's="" test="" was="" used="" to="" identify="" the="" differences="" between="">

3. Keputusan

3.1. Pengasingan dan Pengenalpastian Empat Sebatian Triterpenoid Lanostane 1-4 P.cocos

P yang kering.Cistanche anti penuaancocos (10 kg) telah diekstrak tiga kali dengan refluks dengan 75 peratus etanol selama 3 jam. Ekstrak pekat dikromatografi pada gel silika dan lajur C18 untuk memberikan empat sebatian triterpenoid lanostane utama: asid tumulosik (1), asid polifonik C (2), 3-asid epi-dehydrotumulosic(3), dan asid dehidrotumulosik(4 ), masing-masing (Rajah 1). Struktur mereka telah dijelaskan oleh spektroskopi NMR (Jadual S1) dan analisis ESI-MS (Rajah S2, S4, S6, dan S8) dan perbandingan dengan data literatur [32,33]. Kromatogram UPLC 1-4 ditunjukkan dalam Rajah S1, S3, S5 dan S7.

3.2. Kajian Awal dalam BALB/c Tikus Jantan oleh Lanostane Triterpenoid Compounds 1-3

Sel limpa yang diasingkan daripada tikus yang dirawat dengan sebatian triterpenoid lanostane (1-3) telah dibiakkan selama lima hari dengan kehadiran satu. Jumlah IFN-y yang dirembeskan oleh limfosit T limpa diukur. Selepas tikus diberi makan dengan 2.5 mg/kg/hari atau dos yang lebih tinggi kompaun 1.5 dan 10 mg/kg/hari sebanyak 2, dan 20 mg/kg/hari sebanyak 3, masing-masing, IFN-y dirembeskan oleh ConA -sel T splenik yang dirangsang telah ditambah dengan ketara (Jadual 1 dan 2). Kajian awal menunjukkan bahawa lanostane 1-3 meningkatkan rembesan IFN-y oleh sel limpa yang dirangsang oleh ConA.

3.3.Penilaian Keselamatan daripada Kajian Haiwan Ekstrak P. cocos

Jadual 3 dan 4 menunjukkan bahawa ekstrak P. cocos tidak menjejaskan berat badan dan berat limpa.cistanche beefíciosJadual 5 juga menunjukkan bahawa sel-sel imun seperti jumlah sel T, jumlah sel B, MHC II (jenis kompleks histokompatibiliti utama II, sel T CD4 ditambah, sel T CD8 ditambah, sel NK dan makrofaj dalam kumpulan ekstrak P. cocos mempunyai tiada perbezaan yang ketara berbanding dengan kumpulan kawalan Berdasarkan keputusan di atas, ia harus dinilai bahawa tidak sepatutnya terdapat risiko imunotoksik semasa eksperimen pemakanan ekstrak P. cocos.

3.4. Penilaian Tindak Balas Imun Tidak Tertentu

Sel Pembunuh Alam Semula Jadi (sel NK) memainkan peranan penting dalam imuniti bukan spesifik. Jadual 6 menunjukkan bahawa kumpulan FL400 secara signifikan mendorong peningkatan aktiviti sel NK berbanding dengan kumpulan FL200. Ia adalah kecenderungan peningkatan kesan aktiviti sel NK ekstrak P.cocos. Sitokin ialah bahan kimia termasuk interleukin (IL) dan interferon (IFN) yang mengawal tindak balas imun atau pertumbuhan sel 【34】. Kami menganalisis kepekatan IFN- （Tindak balas imun Th1） bagi sel limpa yang disebabkan oleh ConA dan LPS dan kepekatan IL-5 (tindak balas imun Th2) sel limpa yang disebabkan oleh ConA yang diasingkan daripada tikus yang dirawat dengan FL200, FL400, FL800, dan FL1200(Jadual 7 dan 8). Kumpulan FL800 dan FL1200 secara signifikan merangsang pengeluaran IFN-y dalam sel limpa tikus dengan kehadiran ConA (Jadual 7). Jadual 7 juga menunjukkan bahawa kepekatan sel limpa IL-5 tikus yang diasingkan daripada tikus yang dirawat dengan FL200, FL400, FL800 dan FL1200 mempunyai kesan penurunan yang ketara dalam cara yang bergantung kepada dos. Di samping itu, kumpulan FL400, FL800, dan FL1200 juga secara signifikan merangsang pengeluaran IFN dalam sel limpa tikus dengan kehadiran LPS (Jadual 8).

4. Perbincangan

Sistem imun manusia bertanggungjawab untuk melawan patogen asing untuk melindungi kesihatan.puritans vitamin cImuniti yang tidak mencukupi biasanya menjadikan badan mudah terdedah kepada jangkitan dan oleh itu memerlukan imuniti yang mencukupi, tetapi ia juga memerlukan mekanisme pengawalseliaan yang ketat untuk mengelakkan kerosakan cagaran yang berlebihan. Mengekalkan keseimbangan imun adalah tugas sistem imun yang paling penting[35]. Banyak bukti menunjukkan bahawa keseimbangan imun sangat berkorelasi dengan tindak balas sel Th1/Th236,37]. Tekanan dan penuaan boleh menyebabkan Th1/Th2 kehilangan keseimbangan dan condong ke arah Th2, yang boleh menyebabkan jangkitan dan penyakit alahan [38-40]. Pencarian untuk imuniti keseimbangan yang berkesan ini sangat diperlukan. Di samping itu, adalah menggembirakan bahawa pengetahuan yang diperoleh daripada dekad penyelidikan saintifik terkumpul mengenai sistem imun manusia dan tindak balasnya terhadap penyakit berjangkit membantu memberikan maklumat mengenai penyelidikan dan pembangunan terapeutik, dan juga mempunyai strategi pencegahan untuk penyebaran wabak virus [41]. , A42]. Banyak kajian terdahulu mengenai kajian farmakologi P. cocos adalah berat sebelah terhadap protein P. cocos [43,44] atau polisakarida [45,46]. Terdapat beberapa kajian tentang keberkesanan triterpenoid lanostane daripada P. cocos seperti hipoglisemia [25], anti-kanser [24], dan fungsi sedatif [28].apa itu cistancheKajian terdahulu telah menunjukkan bahawa pecahan etil asetat P. cocos mengandungi komponen utama triterpenoid dan mempunyai aktiviti meningkatkan imun 31 Walau bagaimanapun, tiada kajian lanjutan yang mendalam telah diterbitkan. Kajian kami menilai fungsi imuniti P. cocos dalam model tikus yang mantap termasuk kajian saringan awal kompaun triterpenoid lanostane yang telah dimurnikan. Kami menunjukkan dalam kajian ini bahawa ekstrak P.cocos(Lipucan) yang mengandungi 6.2 peratus daripada empat triterpenoid lanostane memainkan peranan berbilang bermanfaat dalam aktiviti imunoregulasi.

Siasatan sebelum ini melaporkan bahawa CD4 Manusia ditambah T-helper (Th) sel termasuk subset Th1 dan Th2 ditakrifkan oleh sitokin yang dirembeskannya [36]. Sel Th1 terutamanya merembeskan IFN- ; Sel Th2 menghasilkan IL-4, IL-5, mendorong pengeluaran antibodi, dan membawa kepada tindak balas alahan dengan meningkatkan pengeluaran IgE oleh sel B dan menggalakkan pertumbuhan sel mast, dan pembezaan eosinofil. Telah diketahui umum bahawa sel NK dan IFN- memainkan peranan penting dalam pertahanan imun terhadap jangkitan virus. Sistem imun semula jadi sangat penting untuk mempertahankan daripada virus yang pada mulanya menyerang badan dan mengaktifkan imuniti penyesuaian seterusnya. Sel NK dikelaskan sebagai imuniti tidak spesifik(bawaan) yang bertanggungjawab untuk membunuh sel yang dijangkiti virus【14】. IFN- menghalang kitaran hayat virus dan menghalang replikasi virus. IFN- juga mengawal tindak balas imun dengan mengaktifkan imuniti pengantara sel tidak spesifik dan merangsang imuniti khusus [17]. Berdasarkan kajian awal haiwan, sebatian triterpenoid lanostane utama ekstrak P. cocos, asid tumulosik (1), asid polifonik C （2）, dan 3-asid epi-dehydrotumulosic （3）, merangsang rembesan IFN dengan ketara. oleh sel limpa. Pengesahan komponen ekstrak Poria cocos aktif dalam kajian awal ini akan menjadi sangat penting kepada kawalan kualiti produk dan kajian bioavailabiliti dan mekanisme selanjutnya. Tambahan pula, kami menunjukkan dalam kajian ini bahawa ekstrak P. cocos secara signifikan merangsang aktiviti sel NK dan rembesan IFN- tanpa sifat imunotoksik. Keputusan ini menunjukkan kesan rangsangan ketara ekstrak P. cocos dan triterpenoid lanostane utama 1-3 pada Tindak balas imun.

Selain itu, penemuan kami menunjukkan bahawa ekstrak P. cocos menindas tindak balas imun Th2 dengan perencatan IL-5 yang ketara (Jadual 7) dalam model tindak balas imun bukan spesifik, dan perencatan IL-4(Jadual 9) yang ketara dalam model tindak balas imun spesifik yang disebabkan oleh OVA. IL-4 dan IL-5 akan membawa kepada tindak balas alahan.sistancheAlahan, juga dipanggil penyakit alahan, disebabkan oleh sistem imun yang hipersensitif kepada bahan di persekitaran, seperti asma alahan. Tindak balas imun pesakit cenderung kepada Th2. Sekiranya Th1/Th2 dalam badan dapat diseimbangkan, ia harus memperbaiki gejala alahan. Kajian ini membuktikan bahawa ekstrak P. cocos boleh mengawal tindak balas imun Th1/Th2, boleh mengurangkan kejadian penyakit alahan, dan boleh dikembangkan menjadi calon berpotensi untuk penyakit anti-alergi.

5. Kesimpulan

Kajian ini adalah yang pertama menunjukkan peraturan imuniti tidak spesifik dan spesifik tindakan ekstrak P. cocos yang mengandungi triterpenoid lanostane dalam tikus. Tindak balas imun ini termasuk pengaktifan sel NK, peningkatan rembesan IFN dan penurunan IL-4 dan IL-5. Penemuan kami menyokong bahawa ekstrak P. cocos tanpa imunotoksisiti ditambah kepada diet atau digunakan sahaja akan memainkan peranan immunoregulatory yang bermanfaat dalam peningkatan kekurangan imun dan peningkatan keupayaan untuk mencegah jangkitan dan tindak balas alahan. Ini adalah pengesahan pertama bahawa triterpenoid lanostane adalah bahan yang berkesan dan boleh digunakan sebagai bahan kawalan kualiti untuk mengekalkan konsistensi keberkesanan ekstrak P. cocos.

Artikel ini diekstrak daripada Life 2021, 11, 111. https://doi.org/10.3390/life11020111 https://www.mdpi.com/journal/life