Abstrak

Objektif

Untuk meneroka mekanisme intervensi bagiRebusan Anzhi Bushen (BSAZD)pada tikus dengan insomnia yang disebabkan oleh corak Perubatan Cina Tradisional (TCM) yang dikenali sebagai"buah pinggang gagal menyimpan semangat"(sering dibincangkan dalam TCM sebagai corak yang dikaitkan dengan kualiti tidur yang lemah, bangun awal dan kegelisahan-terutamanya dalam populasi yang lebih tua).

Kaedah

Sebanyak36 ekor tikus Sprague–Dawley (SD) jantantelah dibahagikan secara rawak kepadaenam kumpulan(6 tikus setiap kumpulan):

Kumpulan biasa(garam biasa)

Kumpulan model(garam biasa)

Kumpulan Eszopiclone(kawalan positif;0.27 mg/kg)

BSAZD dos rendah (5.85 g/kg)

BSAZD dos sederhana (11.70 g/kg)

BSAZD dos tinggi (23.40 g/kg)

Kecuali kumpulan normal, tikus diberi pentadbiran gabunganD-galaktosadanDL-4-chlorophenylalanine (PCPA)untuk mewujudkan model insomnia yang sepadan dengan corak TCM "buah pinggang gagal menyimpan semangat." Selepas pemodelan yang berjaya, ubat yang sepadan (atau garam) telah diberikanintragastrik sekali sehari selama 14 hari berturut-turut.

Selepas pentadbiran terakhir, para penyelidik menilai:

Penunjuk tingkah laku(tingkah laku seperti kebimbangan, parameter tidur)

Histopatologi hippocampal

Metabolomik serum yang tidak disasarkan, untuk mengenal pasti metabolit berbeza dan laluan diperkaya.

 

Keputusan

Berbanding dengan kumpulan model, yangBSAZD dos tinggikumpulan menunjukkan:

Peningkatan yang ketara dalampenyertaan tangan terbuka, masa lengan terbuka, danmasa tidur (P<0.05P<0.05P<0.05)

Penurunan yang ketara dalamkemasukan lengan tertutup, masa lengan tertutup, dankependaman tidur (P<0.05P<0.05P<0.05)

Histopatologi menunjukkan bahawa neuron hippocampal dalam kumpulan BSAZD dos tinggi adalahteratur teratur, dengansaiz, morfologi dan kedudukan nuklear hampir normal.

Metabolomik yang tidak disasarkan menemui metabolit berbeza termasukglutation teroksidadanglutamat. Perubahan ini terutamanya diperkaya dalam:

sinaps GABAergiklaluan

Sinaps glutamatergiklaluan

laluan isyarat kem

Metabolisme asid 2-oxocarboxyliclaluan

Kesimpulan

BSAZD bolehmeningkatkan kualiti tidurdanmelegakan tingkah laku seperti kebimbanganpada tikus dengan insomnia yang berkaitan dengan "buah pinggang gagal menyimpan semangat." Mekanisme yang berpotensi termasuk:

Mengawal seliaGABAergicdanglutamatergiklaluan sinaptik untuk memulihkan keseimbangan neurotransmitter

Mengurangkankecederaan tekanan oksidatif

Memodulasiisyarat kemuntuk menyokong pembaikan saraf

Masuk campurMetabolisme asid 2-oxocarboxylicuntuk mengoptimumkan bekalan tenaga

Kata kunci:Rebusan Anzhi Bushen; buah pinggang gagal menyimpan semangat; insomnia; metabolomik yang tidak disasarkan; metabolit berbeza

 

1. Latar belakang

Dalam TCM,"Bu Mei" (gangguan tidur jenis insomnia)merujuk kepada kelas keadaan yang dicirikan oleh ketidakupayaan yang kerap untuk mendapatkan tidur normal, sepadan dengan "insomnia" dalam perubatan moden. Data epidemiologi menunjukkan bahawa secara kasar30%orang di seluruh dunia mengalami simptom insomnia setiap tahun, dengan kejadian meningkat dengan usia; di China, kelaziman dewasa telah dilaporkan setinggi38.2%.

Insomnia jangka panjang secara serius mengurangkan kualiti hidup dan boleh meningkatkan risiko hipertensi dan penyakit jantung koronari. Ia juga boleh meningkatkan risiko gangguan mental dan fizikal dan boleh menyumbang kepada pergantungan atau penyalahgunaan ubat.

Pada masa ini, insomnia dirawat terutamanya dengan ubat kimia oral. Walaupun ubat tersebut bertindak dengan cepat, pesakit mungkin mengalami kesan sampingan seperti pening dan pening, serta risiko seperti pergantungan dadah dan insomnia pulih. Berbanding dengan ubat kimia, pendekatan TCM mungkin mempunyai kesan sampingan yang lebih sedikit dan hasil jangka panjang yang lebih stabil, dan bahan aktif serta mekanismenya patut diterokai dengan lebih mendalam.

 

2. Mengenai Bushen Anzhi Decoction (BSAZD) - Apa Itu dalam Syarat TCM

Rebusan Anzhi Bushen (BSAZD)ialah preskripsi berasaskan pengalaman yang dibangunkan oleh Profesor Zhang Xingping, berdasarkan teori"insomnia akibat buah pinggang gagal menyimpan semangat."Komposisi herbanya termasuk:

Akar Rehmannia yang disediakan

Cornus (diproses wain)

keladi cina

Beri goji

Benih dodder

Poria

Alpinia oxyphylla (Yi Zhi Ren)

Schisandra

Achyranthes bidentata

Polygala goreng madu (Zhi Yuan Zhi)

Dalam bahasa TCM, formula ini direka untuk"mengencangkan buah pinggang, menambah intipati, menyokong qi, dan menenangkan semangat."Secara klinikal ia telah digunakan selama bertahun-tahun dengan hasil yang positif, tetapimekanisme biologi modenbelum dikaji dengan cukup mendalam-maka kerja berasaskan metabolomik ini.

Metabolomik yang tidak disasarkanialah teknik tidak berat sebelah yang boleh memprofilkan metabolit molekul kecil secara sistematik, menyaring metabolit pembezaan melalui statistik multivariat, dan memetakannya kepada laluan yang membantu penyelidik memahami kedua-dua gangguan metabolik berkaitan penyakit dan sasaran dikawal ubat pada tahap "keseluruhan sistem".

 

Jadual 1. Perbandingan indeks berkaitan trajektori lokomotor dalam ujian Elevated Plus Maze antara kumpulan (xˉ±s\\bar{x}\\pm sxˉ±s, n=6n=6n=6)

Kumpulan	OE (kali)	CE (kali)	OT (s)	CT (s)
Kumpulan biasa	12.48 ± 0.63	5.15 ± 0.87	229.79 ± 3.38	64.74 ± 1.26
Kumpulan model	4.32 ± 0.49a	8.51 ± 0.74a	106.71 ± 2.98a	247.19 ± 2.98a
Kumpulan Eszopiclone	6.63 ± 0.58ab	7.63 ± 0.73b	150.05 ± 4.43b	210.62 ± 4.43b
Kumpulan BSAZD dos rendah	5.37 ± 0.55ab	6.52 ± 0.68a	143.26 ± 8.25a	198.21 ± 8.25b
Kumpulan dos sederhana BSAZD	8.55 ± 0.73ab	7.26 ± 0.78ab	186.46 ± 10.38a	151.14 ± 10.38a
Kumpulan BSAZD dos tinggi	9.58 ± 0.76ab	7.95 ± 0.75ab	193.05 ± 4.98ab	153.96 ± 4.98ab

Singkatan:OE, penyertaan terbuka; CE, penyertaan lengan tertutup; OT, masa lengan terbuka; CT, masa lengan tertutup.

Nota:
^alwn. kumpulan biasa, P<0.05P<0.05P<0.05
^blwn. Kumpulan model, P<0.05P<0.05P<0.05
^clwn. kumpulan Eszopiclone, P<0.05P<0.05P<0.05

 

Jadual 2. Perbandingan indeks dalam ujian refleks pembetulan natrium pentobarbital antara kumpulan (xˉ±s\\bar{x}\\pm sxˉ±s, n=6n=6n=6, s)

Kumpulan	Kependaman tidur	Tempoh tidur
Kumpulan biasa	236.00 ± 4.36	3,538.55 ± 74.45
Kumpulan model	402.03 ± 4.93a	2,545.15 ± 70.38a
Kumpulan Eszopiclone	302.73 ± 12.25b	2,879.68 ± 99.63b
Kumpulan BSAZD dos rendah	336.40 ± 5.99bc	2,718.85 ± 76.94bc
Kumpulan dos sederhana BSAZD	299.17 ± 3.43b	2,891.83 ± 82.74b
Kumpulan BSAZD dos tinggi	285.51 ± 14.93bc	3,026.98 ± 106.13bc

Nota:
^alwn. kumpulan biasa, P<0.05P<0.05P<0.05
^blwn. Kumpulan model, P<0.05P<0.05P<0.05
^clwn. kumpulan Eszopiclone, P<0.05P<0.05P<0.05

 

3. Bahan

3.1 Instrumen Utama

Termasuk sistem pemantauan tidur EEG/EMG, spektrometer jisim resolusi tinggi, sistem UHPLC dan mikroskop optik.

Rajah 1.Peta trajektori lokomotor tikus dalam ujian Elevated Plus Maze (EPM) dalam setiap kumpulan.

 

3.2 Ubat dan Reagen

Kepingan herba diperolehi dari beberapa wilayah China; semua herba rebusan dibeli dari hospital TCM di Xinjiang. Tablet Eszopiclone, PCPA, natrium pentobarbital, dan pelarut/reagen LC-MS telah digunakan.

3.3 Haiwan

36 tikus SD lelaki gred SPF (170-220 g; 10-12 minggu) ditempatkan di bawah keadaan terkawal. Kajian itu telah diluluskan oleh jawatankuasa etika haiwan (nombor kelulusan: IACUC-20210301-45).

Rajah 2.Mikrograf histopatologi hippocampal perwakilan (pewarnaan H&E) tikus dalam setiap kumpulan.

Rajah 3.Plot skor PCA metabolit serum dalam tikus: kumpulan BSAZD dos tinggi vs kumpulan model.

Rajah 4.Plot skor OPLS-DA metabolit serum dalam tikus: kumpulan BSAZD dos tinggi lwn kumpulan model.

Rajah 5.Plot ujian pilih atur OPLS-DA metabolit serum dalam tikus: kumpulan BSAZD dos tinggi lwn kumpulan model.

Rajah 6.Plot gunung berapi bagi metabolit serum berbeza dalam tikus: kumpulan BSAZD dos tinggi lwn kumpulan model.

4. Kaedah

4.1 Penyediaan BSAZD

Herba-herba itu dicampur, direndam, direbus dua kali, digabungkan, dan dipekatkan ke dalam rebusan bersamaan dengan2.6 g herba mentah/mL, disterilkan, dan disejukkan pada 4 darjah .

4.2 Pengumpulan dan Permodelan

Selepas 7 hari penyesuaian, tikus telah diacakkan kepada enam kumpulan. Model insomnia disebabkan oleh:

Suntikan subkutaneus daripadaD-galaktosa120 mg/(kg·hari) selama 42 hari

Kemudian suntikan intraperitoneal daripadaPCPA300 mg/(kg·hari) selama 3 hari

Pemantauan EEG/EMG mengesahkan pemodelan yang berjaya (terjaga berpanjangan, mengurangkan tidur NREM dan REM).

Selepas pemodelan, tikus dirawat secara gavage sekali sehari selama 14 hari dengan garam atau campur tangan masing-masing.

4.3 Ujian Tingkah Laku

Elevated Plus Maze (EPM)

Diukur catatan dan masa lengan terbuka/tertutup.

Ujian Refleks Pembetulan Pentobarbital

Latensi tidur diukur dan tempoh tidur selepas suntikan pentobarbital.

4.4 Pengumpulan Sampel

Serum darah dan tisu otak dikumpul dan disimpan dengan sewajarnya untuk analisis.

4.5 Histopatologi Hippocampal

Pewarnaan HE dan mikroskopi digunakan untuk melihat perubahan hippocampal.

4.6 Metabolomik Serum Tidak Bersasar

Serum daripada kumpulan BSAZD biasa, model, dan dos tinggi dianalisis. Data diproses melalui PCA, OPLS-DA, ujian pilih atur, dan saringan metabolit pembezaan (VIP > 1, FC > 2 atau < 0.5, P<0.05P<0.05P<0.05), followed by KEGG enrichment.

4.7 Perangkaan

SPSS 27.0; ANOVA sehala, ujian post hoc yang sesuai; =0.05\\alfa=0.05 =0.05.

 

5. Keputusan

5.1 Labirin Ditambah Tinggi

Kumpulan model menunjukkan lebih banyak tingkah laku seperti kebimbangan (mengurangkan penerokaan lengan terbuka). BSAZD menambah baik langkah-langkah ini, danberdos tinggikumpulan menunjukkan peningkatan yang paling ketara, mengatasi kumpulan eszopiclone pada metrik EPM utama.

5.2 Ujian Tidur Pentobarbital

Kumpulan model mempunyai kependaman tidur yang lebih lama dan tempoh tidur yang lebih pendek. BSAZD memendekkan kependaman dengan ketara dan meningkatkan masa tidur; dos tinggi berprestasi terbaik.

5.3 Histologi Hippocampal

Tikus model menunjukkan kecederaan neuron yang jelas. BSAZD mengurangkan kerosakan hippocampal dalam cara yang bergantung kepada dos, dengan dos tinggi menunjukkan morfologi hampir normal.

5.4 Penemuan Metabolomik

Metabolit berbeza yang terlibatglutamat, glutation, danglutation teroksida, antara lain. Laluan diperkaya termasuk:

sinaps GABAergik

Sinaps glutamatergik

isyarat kem

Metabolisme asid 2-oxocarboxylic
 

6. Perbincangan

Dalam teks klasik, insomnia digambarkan sebagai "tidak dapat berbaring" atau "tidak dapat menutup mata." Pakar perubatan TCM secara sejarah mengaitkan insomnia dengan pelbagai mekanisme; merentas pandangan ini, tema yang sama ialah peraturan dalaman yang terganggu-sering digambarkan sebagai"yang tidak memasuki yin"dan roh tidak kembali ke "kediamannya."

Profesor Zhang mencadangkan pendekatan diagnostik yang menghubungkan subtipe insomnia kepada teori "lima roh". Subjenis"buah pinggang gagal menyimpan semangat"dicirikan olehbangun awaldan biasa berlaku pada orang tua, mencerminkan corak kekurangan dalam pati buah pinggang/qi/yin/yang.

Dalam kajian ini:

Data tingkah laku menunjukkan BSAZD meningkatkan kedua-duanyaparameter tidurdantingkah laku seperti kebimbangan.

Histologi mencadangkan BSAZD bolehmelindungi neuron hippocampal.

Metabolomik mencadangkan pelbagai mekanisme, terutamanya:

Mengimbangi semulaglutamat pengujaandan perencatansistem GABA

Mengurangkan tekanan oksidatif (melalui penanda glutation)

Menyokong laluan pembaikan saraf (isyarat berkaitan cAMP)

Meningkatkan metabolisme tenaga (asid 2-oxocarboxylic / metabolisme berkaitan TCA)

Penulis juga mencatatkan batasan: metabolomik mencadangkan laluan, tetapipengesahan sasaran molekuldalam tisu otak dan model sel masih diperlukan.

 

7. Tempat Cistanche Sesuai: Jambatan Praktikal Mesra Barat

Walaupun kertas ini memberi tumpuan kepadaBSAZD (formula TCM pelbagai herba), ia menyediakan akanta saintifik modenmengenai perkara yang dicari oleh ramai pengguna hari ini:

Kualiti tidur yang lebih baik

Tindak balas tekanan yang lebih tenang

Keseimbangan neurotransmitter yang sihat

Perlindungan tekanan oksidatif

Metabolisme tenaga otak yang lebih baik

Dalam TCM,herba yang menguatkan buah pinggangsering digunakan dalam corak yang berkaitan dengan penuaan, keletihan, dan daya tahan yang rendah. Salah satu bahan botani "penguat buah pinggang" yang paling terkenal ialahCistanche (Rou Cong Rong)-terutamaCistanche tubulosa, yang digunakan secara meluas sebagai bahan berfungsi dalam pembangunan nutraseutikal moden.

herba TCM untukSokongan buah pinggang+ pembangunan produk moden

Jika pelanggan anda bertanya:"Apakah faedah sebenar cistanche?"cara yang patuh dan sejajar dengan bukti untuk menerangkannya kepada khalayak EU/AS ialah:

Ekstrak cistanche tubulosabiasanya diletakkan sebagai botani yangmenyokong kecergasan, daya tahan, dan penuaan yang sihat, dan sering dikaitkan dalam TCM dengansokongan buah pinggang.

Kerana pengguna moden semakin mengaitkan tidur dan mood denganbiologi tekanan, tekanan oksidatif, dan keseimbangan neurotransmitter, Cistanche sering dibangunkan menjadimakanan berfungsi dan makanan tambahanbertujuan untuk daya tahan harian.

Variasi kata kunci yang dicadangkan untuk peletakan SEO (anda boleh menyetempatkan mengikut pasaran):

AS:"Herba TCM untuk faedah sokongan buah pinggang" / "Herba TCM untuk kecergasan"

EU/UK:"Herba TCM untuk daya tahan harian" / "Herba TCM untuk sokongan penuaan yang sihat"

Generik:"Herba TCM untuk sokongan buah pinggang - apakah faedah sebenar cistanche"

 

8. Kelebihan Kilang Anda

Apabila anda membangunkan produk berasaskan Cistanche untuk pasaran Barat, pembeli biasanya mengambil berat tentangnyakebolehkesanan + skala + pematuhan + aktif. Berdasarkan kandungan halaman yang anda sediakan:

Ditubuhkan pada2003

Disifatkan sebagai mempunyai rantaian industri Cistanche berskala besar diXinjiang (wilayah Hotan/Hetian)

Sistem bersepadu termasuk asas pembiakan benih, penanaman, kapasiti pengumpulan/penyimpanan bahan segar yang besar, danBengkel pengeluaran bertaraf GMP

Spesifikasi bengkel dan kapasiti makmal (seperti yang dinyatakan):Bengkel GMP 100,000 kelasdanMakmal inkubasi mikroorganisma kelas 10,000

Pensijilan tersenarai:SC, HACCP, sijil berkaitan organik (cth, NOP)dan berbilang paten yang berkaitan dengan teknologi pengekstrakan (termasuk teknologi pemisahan membran)

Kerjasama akademik dengan universiti dan pakar (seperti yang dinyatakan)

Serlahkan untuk ditambah (pembezaan utama anda)

Anda menyebut:"Kami adalah ekstrak Cistanche tubulosa; kandungan bahan aktif lebih tinggi."
Bagi pembeli EU/AS, cara paling jelas untuk menyampaikan perkara ini ialah:

Aktif standard sepertiechinacosidedanacteoside (verbascoside)

Jelasspesifikasi/COA, konsistensi kelompok ke kelompok dan ujian patuh

(Jika anda berkongsi julat spesifikasi tepat anda-cth, echinacoside %, acteoside %, kaedah pelarut, racun perosak/logam berat/had mikro-saya boleh mengubahnya menjadi bersihB2B helaian jualan satu halaman.)

 

9. Perenggan Pemasaran Cadangan

Sains tidur dan tekanan moden semakin menunjukkan keseimbangan neurotransmitter (GABA lwn. glutamat), tekanan oksidatif, dan metabolisme tenaga otak sebagai asas utama pemulihan.Dalam model tikus insomnia dan tingkah laku seperti kebimbangan yang dikaitkan dengan corak TCM "buah pinggang gagal menyimpan semangat," penyelidik mendapati bahawa Bushen Anzhi Decoction meningkatkan masa tidur, memendekkan kependaman tidur, menormalkan morfologi neuron hippocampal dan mengalihkan metabolit serum ke arah laluan yang berkaitan dengan sinaps isyarat GABAergic dan glutamatergik, dan metabolisme tenaga, cAMP.

Untuk penerokaan jenamaBahan-bahan berfungsi yang diilhamkan oleh TCM, Cistanche tubulosa (Rou Cong Rong)adalah salah satu herba "menyokong buah pinggang" yang paling diiktiraf digunakan dalam pembangunan nutraseutikal moden. Sebagai seorang yang khususPengeluar ekstrak cistanche tubulosa, kami menyediakan skala, penyumberan yang boleh dikesan dan pembangun produk yang membantu pemprosesan berasaskan GMP menterjemah penggunaan tradisional kepada penyelesaian ramuan yang moden dan piawai.