Sarmentosamide, Sebatian Anti-Penuaan Daripada Streptomyces Sp yang Diperolehi Marin. APmarine042

Kata kunci:Cistanche; Streptomycessp. APmarine042;anti penuaan; MMP-1; UVB; TNF-

Klik Di Sini Untuk Mendapatkan Maklumat Lanjut Mengenai Cistanche Untuk Penjagaan Kulit Penuaan

1. Pengenalan

Penuaan kulitdisebabkan oleh dua proses utama, yang terhasil daripada faktor intrinsik dan ekstrinsik.Penuaan ekstrinsikdisebabkan terutamanya oleh pendedahan kepada faktor persekitaran seperti pencemaran udara [1] dan sinaran ultraungu (UV) [2]. Cahaya UV terdiri daripada UVA (315–400 nm), UVB (280–315 nm),dan UVC (200–280 nm), yang mana sinaran UVB diketahui menembusi epidermis dan menyumbang kepada kulitfoto penuaan [3]. Penuaan kulit akibat UVB menyebabkan kerosakan DNA [4] dan spesies oksigen reaktif(ROS) generasi [5] dan mengganggu matriks ekstraselular [6]. Penuaan intrinsik disebabkan oleh semulajadiakibat perubahan fisiologi, seperti faktor genetik, hormon, dan proses metabolik [7]. Selain itu, sitokin radang, seperti tumor necrosis factor-alpha (TNF ), interleukin 1 alfa/beta(IL-1 / ), dan interleukin 6 (IL-6), meningkat secara kronik mengikut usia. Khususnya, nekrosis tumorfaktor- (TNF ) diketahui dapat mempercepatkan degradasi komponen matriks ekstraselular (ECM) melaluimeningkatkan ekspresi dan aktiviti metalloproteinase matriks (MMPs) dalam kulit tua [8]. MMP-1 ialahterutamanya dikeluarkan oleh fibroblas dalam dermis, dan MMP yang dirembeskan-1 bertanggungjawab untuk degradasikolagen kulit, yang menyokong struktur dan fungsi kulit. Oleh itu, modulasi MMP-1Ekspresi dalam fibroblas dermal boleh menjadi sasaran yang menjanjikan untuk pembangunan anti-penuaanbahan kosmetik.

Kajian terdahulu telah melaporkan bahawa sinaran UVB mendorong ROS (pengeluaran spesies oksigen reaktif dan membawa kepada pengaktifan laluan isyarat intraselular dan faktor transkripsi (cth, AP-1, NF-kB) [9. Faktor transkripsi ini dikawal oleh mitogen -kinase protein diaktifkan MAPKs), yang mendorong MMP-1 dan sitokin proinflamasi. Terdapat tiga MAPKamilies berbeza yang terlibat dalam rangsangan UVB/ROS: kinase dikawal isyarat ekstraselular (ERKs), c-Jun N-terminal

kinase (NK), dan p38. Kajian kami mengenal pasti Streptomyces sp. Ekstrak APmarine042 yang mempamerkan kesan perencatan yang kuat pada ekspresi MMP-1. Selepas itu, sebatian perencatan MMP-1 telah dikenal pasti dalam Streptomyces sp. Ekstrak APmarine042 dan struktur kimianya telah dikenal pasti melalui bantuan analisis NMR (1), sebatian dengan bahagian heksadienamida 101. Kami kemudiannya menyiasat sama ada ekspresi MMP-1 perencatan kompaun ini dalam kulit manusia yang disinari UVB dan yang disebabkan oleh TNFa. fibroblas serta peranannya dalam pengawalseliaan laluan isyarat yang mendasari. Selain itu, kami meneliti kee aktiviti antioksidan cistanche(1) melalui 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl(DPPHI)ujian penghapusan radikal.

2. Keputusan dan Perbincangan

2.1. cistanche (1) Pengasingan dan Pengenalpastian

cistanche (1) telah diasingkan melalui gabungan HPLC-UV dan pengasingan berpandukan bioaktiviti. Berdasarkan perbandingan antara data NMR (Bahan Tambahan) bagi kompaun yang dikenal pasti dalam kajian ini (selepas ini dirujuk sebagai kompaun 1") dengan kompaun yang dilaporkan sebelum ini, kompaun 1 dikenal pasti sebagai cistanche. Nilai putaran optik kompaun 1 ialah juga konsisten dengan laporan terdahulu, yang seterusnya menyokong bantuan kompaun 1 itu (Rajah 1).

2.2. Kesan sitotoksik cistanche (1) pada Fibroblas Dermal Manusia

Untuk menyiasat kesan sitotoksik cistanche, fibroblas kulit manusia normal (NHDUntuk sel fibroblas kulup manusia (Hs68) telah dirawat dengan cistanche pada kepekatan yang berbeza (6, 12, 25, 50, 100 ug/mL) selama 24 jam, selepas itu sel ujian kit pengiraan-8 (CCK-8) ​​telah dilakukan untuk mengukur daya maju sel. Garam tetrazolium larut air (WST-8) dalam larutan CCK-8 telah dikurangkan oleh aktiviti dehidrogenase dalam sel untuk memberikan pewarna formazan berwarna kuning, yang jumlahnya adalah berkadar dengan bilangan sel hidup. Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 2, cistanche tidak menyebabkan kesan sitotoksik yang boleh diperhatikan sama ada dalam sel NHDF atau Hs68 pada kepekatan antara {{15} } ug/ml

Rajah 2. Ujian daya tahan sel cistanche pada fibroblas. (ab) Daya maju sel bagidirawat dengan cistanchefibroblas dermal manusia normal (NHDF) (a) dan sel fibroblas kulup manusia (Hs68) (b) pada 24 jam diukur dengan ujian CCK (kit pengiraan sel). * p < 0.05, ** p < 0.01vs. kumpulan yang tidak dirawat).

2.3. cistanche (1) Menghalang MMP-1 Ekspresi dan Rembesan dalam Sel NHDF Bersinar UVB

Seterusnya, NHDF tanpa kehadiran dan kehadiran sinaran UVB (25 mJ/cm2) dirawat dengan cistanche (2.5 ug/mL) untuk tempoh yang singkat, dan tahap ekspresi mRNA MMP-1 relatif dikira melalui masa nyata kuantitatif analisis PCR. cistanche didapati mengecilkan tahap mRNA MMP-1 sehingga 16 peratus dan 17 peratus semasa ketiadaan (Rajah 3a) dan kehadiran (Rajah 3bof UVB, masing-masing. Sinaran UVB, faktor risiko penuaan kulit ekstrinsik utama, boleh menembusi epidermis dan mencapai dermis atas, menghasilkan penghasilan spesies oksigen reaktif (ROS)MMP, dan sintesis kolagen turun regulasi. Oleh itu, kajian kami berusaha untuk menyiasat sama ada rembesan MMP{12}} terhalang cistanche dalam sinaran UVB Sel NHDF. Tahap rembesan MMP-1 dalam media kultur sel diukur melalui ELISA dan jumlah relatif rembesan MMP-1dinormalkan kepada protein otal dalam lisat sel keseluruhan, yang diukur melalui bicinchoninic ujian kuantifikasi protein asid (BCA). Penyinaran UVB (25 mJ/cm2) dengan ketara meningkatkan rembesan MMP-1(8.3-kali ganda) berbanding kumpulan bukan sinaran UVB (Rajah 3c) dan cistanche -menyekat rembesan MMP-1 dalam sel NHDF yang disinari UVB dalam cara yang bergantung kepada dos.

Rajah 3. Kesan cistanche pada ungkapan metalloproteinase-1 (MMP-1) dalam NHDF yang disinari UVB. (a, b) Tahap mRNA relatif MMP-1 dalam sel NHDF menyinari UVB (25 mJ/cm2) atau dirawat dengan cistanche (2.5 ug/mL) selama 16 jam. Gen RPLPO digunakan sebagai kawalan dalaman. * p < {{10}}.05.*** p < 0.001 (C) Selepas penyinaran UVB (25 mJ/cm2) , cistanche dalam media bebas serum dirawat selama 48 jam, dan kemudian tahap rembesan relatif MMP-1 ke dalam media kultur sel dianalisis oleh ELISA### p < 0.001 (berbanding kumpulan kawalan bukan UVB); ** p < 0.01; *** p < 0.001 (kumpulan kawalan sinaran UVB).

Minta lebih lanjut:

E-mel:wallence.suen@wecistanche.com whatsapp: tambah 86 15292862950