Kesan Renoprotective Formula Bushen Kaixuan Tongluo Berasaskan Cistanche dalam Db/db Tikus Melalui Pengaktifan Laluan Isyarat CAMP/PKA/CREB

3. Keputusan

3.1 Kesan Formula Bushen Kaixuan Tongluo Berasaskan Cistanche pada Keadaan Umum Tikus db/db

Tikus dalam kumpulan kosong aktif dan mempunyai bulu berkilat. Sebaliknya, tikus dalam kumpulan model kelihatan obes, lesu, dan kurang aktif. Tikus dalam kumpulan rawatan menunjukkan tahap peningkatan yang berbeza-beza dalam keadaan umum berbanding kumpulan model.

 

 

 

Formula Bushen Kaixuan Tongluo Berasaskan Cistanche untuk Kesihatan Buah Pinggang dan Hati

 

3.2 Kesan Formula terhadap Berat Badan Tikus db/db

Sepanjang tempoh percubaan, berat badan tikus dalam kumpulan model meningkat dengan ketara berbanding kumpulan kosong (P<0.01). Compared with the model group, mice in all treatment groups showed a downward trend in body weight, with differences appearing from week 8 onward. The high-dose Formula berasaskan cistanchekumpulan menunjukkan kesan yang paling ketara. (Lihat Jadual 2)

3.3 Kesan pada Fungsi Buah Pinggang

Berbanding dengan kumpulan kosong, kreatinin serum (Scr) dalam kumpulan model menunjukkan trend menaik, walaupun tidak signifikan secara statistik, manakala nitrogen urea darah (BUN), albumin kencing (uALB), dan nisbah albumin-ke-kreatinin (ACR) meningkat dengan ketara (P<0.05). Compared with the model group, mice in the formula-treated groups showed a decreasing trend in Scr (not significant), and significantly reduced levels of BUN, uALB, and ACR (P<0.05), with the medium-dose group showing the best results. In the irbesartan group, Scr and BUN showed a downward trend (not significant), while uALB and ACR were significantly reduced (P<0.01). (See Table 3)

3.4 Kesan pada Fungsi Hati dan Metabolisme Lipid

Berbanding dengan kumpulan kosong, ALT, AST, jumlah kolesterol (TC), dan trigliserida (TG) meningkat dengan ketara dalam kumpulan model (P<0.05). Compared with the model group, the treatment groups showed a decreasing trend in AST and ALT (not significant), and a significant decrease in TC (P<0.01). TG levels were significantly reduced in the medium-dose formula group (P<0.05), while other formula groups showed a downward trend (not significant). In the irbesartan group, TC showed a decreasing trend (not significant), and TG was significantly reduced (P<0.01). (See Table 4)

3.5 Kesan terhadap Metabolisme Glukosa

Berbanding dengan kumpulan kosong, paras glukosa darah puasa (FBG), leptin (LEP), protein serum glikosilasi (GSP), dan insulin (INS) meningkat dengan ketara dalam kumpulan model (P<0.05). Compared with the model group, FBG showed no significant downward trend in any group; LEP levels decreased (not significant) in the formula groups, whereas irbesartan significantly reduced LEP (P<0.05). All treatment groups showed significantly reduced GSP and INS levels (P<0.05), with the high-dose Formula berasaskan cistanchekumpulan menunjukkan kesan terbaik. (Lihat Jadual 5)

 

3.6 Kesan pada Histopatologi Buah Pinggang

pewarnaan HE: Kumpulan kosong menunjukkan seni bina buah pinggang normal dengan morfologi glomerular biasa dan sel epitelium tiub utuh. Kumpulan model menunjukkan glomeruli yang tidak teratur, percambahan sel mesangial sederhana, penyusupan keradangan, dan degenerasi vakuolar dalam sel epitelium tiub. Ciri-ciri patologi ini telah dikurangkan dalam formula dan kumpulan irbesartan yang rendah, sederhana dan tinggi. (Lihat Rajah 1)

mengotorkan PAS: Kumpulan kosong menunjukkan pemendapan matriks ekstraselular (ECM) minimum. Kumpulan model telah menandakan pengumpulan ECM dan membran bawah tanah yang menebal. Kumpulan rawatan menunjukkan tahap peningkatan yang berbeza-beza. (Lihat Rajah 2)

Pewarnaan Masson: Kumpulan kosong mendedahkan struktur glomerular normal dengan pemendapan kolagen yang minimum. Kumpulan model menunjukkan kolagen berwarna biru yang luas dalam glomeruli dan interstitium buah pinggang. Perubahan patologi telah dikurangkan dalam semua kumpulan rawatan. (Lihat Rajah 3)

 

3.7 Kesan pada Ekspresi p-PKA dan p-CREB dalam Tisu Renal

Berbanding dengan kumpulan kosong, pewarnaan p-PKA dan p-CREB dalam tisu buah pinggang kumpulan model telah dikurangkan dengan ketara (P<0.01). Compared with the model group, the medium-dose formula group had significantly increased p-PKA expression (P<0.01), and p-CREB showed an upward trend (not statistically significant). (See Figure 4, Table 6)

 

3.8 Kesan pada p-PKA, PKA, p-CREB, CREB dan Ungkapan Protein Bcl-2

Berbanding dengan kumpulan kosong, kumpulan model menunjukkan penurunan ketara p-PKA/PKA, p-CREB/CREB, dan Bcl-2 (P<0.05). These levels were significantly elevated in the medium-dose Formula berasaskan cistanchekumpulan (P<0.01). (See Figure 5, Table 7)

 

4. Perbincangan

Walaupun kesusasteraan perubatan Cina tradisional (TCM) tidak menerangkan secara eksplisit penyakit buah pinggang diabetes (DKD), gejala seperti air kencing berbuih sejajar dengan keadaan TCM seperti "kekeruhan air kencing" dan "guan ge." Berdasarkan pengalaman klinikal berdekad-dekad, Profesor Lü Cuiyan membangunkanFormula Bushen Kaixuan Tongluo, menggunakanCistanchemenggantikan Astragalus sebagai herba raja untuk tonifying Qi dan Yang, dipasangkan dengan Aconite untuk memanaskan buah pinggang dan mengubah kekeruhan.

Salvia dan Hirudo bertindak sebagai herba menteri untuk mengaktifkan darah dan membuka sekatan cagaran, manakala Saposhnikovia, Bombyx batryticatus, dan cicada slough mengeluarkan angin dan patogen. Rehmannia dan Cornus menyuburkan intipati buah pinggang; Achyranthes membimbing herba ke bawah; Rosa laevigata, Euryale, Rubus, dan Cnidium menyatukan intipati; Dioscorea menguatkan limpa dan buah pinggang. Gabungan ini mencapai tonifikasi limpa-ginjal, penyingkiran kekeruhan, dan resolusi stasis, menunjukkan keberkesanan klinikal yang menjanjikan.

Kajian farmakologi moden menunjukkan komponen formula bertindak pada pelbagai sasaran untuk meningkatkan fungsi buah pinggang:

Tanshinone IIAdanhirudinmenghalang isyarat TGF- / Smad, mengurangkan fibrosis dan gangguan peredaran mikro

Polisakarida Saposhnikoviamengurangkan kawal selia keradangan pengantara NF-κB

Glikosida iridoid daripada Cornusaktifkan laluan Nrf2/ARE untuk meningkatkan enzim antioksidan

Achyranthes sterolmemodulasi laluan PI3K/Akt, menghalang apoptosis podosit

Dioscinmengaktifkan AMPK/mTOR untuk mengawal metabolisme sel autophagy dan epitelium

Thelaluan isyarat kem, pusat kepada metabolisme tenaga selular dan ekspresi gen, adalah penting untuk homeostasis buah pinggang. Adenylate cyclase (AC) menjana cAMP, yang secara alosteri mengaktifkan PKA; PKA diaktifkan memfosforilasi CREB untuk membentuk p-CREB, yang dipindahkan ke nukleus dan memulakan transkripsi gen sasaran sepertiBcl-2, menggalakkan kesan anti-apoptosis dan mengurangkan kecederaan buah pinggang.

Dalam DKD, hiperglikemia yang berterusan mengganggu keseimbangan cAMP dengan menghalang fungsi AC dan meningkatkan degradasi pengantara PDE, yang membawa kepada penurunan tahap cAMP. Ini menjejaskan isyarat PKA/CREB, menjejaskan fungsi mitokondria, pertahanan antioksidan, dan ekspresi gen anti-apoptosis, mempercepatkan sklerosis glomerular dan fibrosis interstisial.

Penyelidikan menunjukkan bahawamengaktifkan laluan cAMP/PKAmembantu mengekalkan integriti diafragma celah podosit dan mengurangkan proteinuria. Lebih-lebih lagi,CREBtranskripsi mendorong enzim antioksidan sepertiSOD2, mengurangkan tekanan oksidatif tiub.Bcl-2juga mengurangkan kebocoran ROS mitokondria, melindungi podosit dan sel tiub di bawah hiperglisemia.

Memulihkan tahap glukosa normal mengurangkan pengumpulan AGE, mengurangkan penebalan membran basal dan kecederaan podosit. Memperbaiki profil lipid mengurangkan pemendapan lipid buah pinggang dan penyusupan makrofaj, sekali gus melambatkan perkembangan fibrosis.

Walau bagaimanapun,penyelidikan tentang cara Formula Bushen Kaixuan Tongluo mempengaruhi DKD melalui laluan cAMP kekal terhad.

Dalam kajian ini, tikus db/db digunakan untuk mensimulasikan DKD manusia. TheFormula berasaskan cistanchefungsi buah pinggang yang bertambah baik dengan ketara, keadaan umum dan gangguan metabolik pada tikus, dengan profil keselamatan hati yang menggalakkan. Histopatologi menunjukkan pengurangan penebalan membran bawah tanah glomerular, pengembangan mesangial, dan pemendapan kolagen interstisial - lesi DKD yang menonjol.

Pada peringkat molekul, formulamRNA terkawal dan ekspresi protein PKA, CREB, dan Bcl-2, meningkatkan fosforilasi PKA dan CREB, dengan itumengaktifkan laluan cAMP, meningkatkan kapasiti antioksidan, dan memulihkan fungsi penghalang penapisan.

Kesimpulan

TheFormula Bushen Kaixuan Tongluo berasaskan cistanche:

Memperbaiki fungsi hati dan buah pinggang

Membetulkan gangguan metabolik glukosa dan lipid

MengaktifkanLaluan isyarat cAMP/PKA/CREB

Mengurangkan fibrosis buah pinggang dan tekanan oksidatif

Memberi perlindungan buah pinggang dalam DKD

Penemuan ini menyediakan asas farmakologi untuk aplikasi klinikal dan sokongan yang menyasarkan laluan cAMP sebagai strategi yang berpotensi untuk rawatan DKD. Penyelidikan masa depan harus meneroka molekul hiliran seperti BDNF untuk menjelaskan lagi mekanisme tersebut.