Ekstrak Daun Ocimum Gratissimum yang kaya dengan polifenol Mencegah Kesan Toksik Cyclophosphamide Pada Fungsi Buah Pinggang Tikus Wistar

Untuk lebih lanjut sila hubungi:oscar.xiao@wecistanche.com

Abstrak

latar belakang:Cyclophosphamide (CP) adalah salah satu kemoterapi yang mujarab dan kos rendah yang digunakan dalam tetapan klinikal terhadap pelbagai tumor. Walau bagaimanapun, kaitannya dengan nefrotoksisiti mengehadkan penggunaan terapeutiknya. Ocimum gratis simum leaf ialah tumbuhan ubatan dengan pelbagai keberkesanan farmakologi dan terapeutik, seperti antioksidan, anti-keradangan dan sifat anti-apoptosis.

Kaedah: Kajian ini direka untuk menilai kesan perlindungan Ocimum gratissimum (OG) terhadap disfungsi buah pinggang yang disebabkan oleh CP pada tikus. Tikus telah dirawat terlebih dahulu dengan 400mg/kg bw ekstrak daun Ocimum gratissimum(Ocimum G.) selama 4 hari dan kemudian 50mg/kg bw CP ditadbir bersama dari hari ke-5 hingga hari ke-7 bersama-sama dengan Ocimum G.Petanda fungsi buah pinggang dan tekanan oksidatif, pengambilan makanan dan air, elektrolit, aldosteron, inflasi leukosit, keradangan, dan perubahan histopatologi dinilai.

Keputusan:Keradangan buah pinggang dan kecederaan buah pinggang yang jelas diperhatikan dalam kumpulan yang dirawat CP. Walau bagaimanapun, pemberian ekstrak daun Ocimum G. menghalang tekanan oksidatif, kecederaan buah pinggang, keradangan yang dilemahkan, peningkatan pengeluaran aldosteron, dan pengurangan ion natrium dan kehilangan air pada tikus. Kreatinin plasma, urea, dan kepekatan albumin air kencing telah dinormalisasi selepas pemberian ekstrak Ocimum G. pada tikus yang dirawat dengan CP. Ocimum G. juga menurunkan kepekatan plasma Interleukin-(IL)-6, protein C-reaktif, dan aktiviti myeloperoxidase dan malondialdehid dalam tikus yang dirawat CP.

Kesimpulan: Ocimum G. menghalang kecederaan buah pinggang dan meningkatkan fungsi buah pinggang melalui menghalang keradangan dan ketoksikan CP yang disebabkan oleh oksidan. Keberkesanan Ocimum G. adalah berkaitan dengan kehadiran pelbagai fitokimia dalam tumbuhan.

Kata kunci:Antioksidan, Kreatinin, Cyclophosphamide, Daun Ocimum gratissimum, Buah Pinggang, Natrium.

Latar belakang

Cyclophosphamide (CP) ialah sebatian antineoplastik yang dikaitkan dengan mustard nitrogen. Ia digunakan dalam persekitaran klinikal untuk merawat pelbagai jenis penyakit kanser dan dalam terapi imunosupresif selepas pemindahan organ, rawatan untuk gangguan autoimun seperti arthritis rheumatoid, granulomatosis Wegener, dan sindrom nefritik pada kanak-kanak [1]. Tanpa mengira spektrum luas penggunaan klinikal ubat, CP diketahui menyebabkan banyak kecederaan organ yang bergantung kepada dos, yang, oleh itu, menghalang penggunaan terapeutiknya dalam persekitaran klinikal. Memandangkan ia diketahui bermanfaat dalam rawatan sindrom nefrotik pada kanak-kanak [1], sebaliknya dilaporkan dalam beberapa kajian terdahulu untuk menyebabkan kerosakan pundi kencing [2, 3] dan menyebabkan ketoksikan buah pinggang apabila digunakan secara tidak sesuai kerana penggunaan CP. terlebih dos [4–6]. Metabolit aktif Te CP, 4-Hydroxycyclophospha-mide, sebahagian tautomerized menjadi aldosphosphamide, yang seterusnya dipecahkan oleh fosfatase dalam peredaran dan sel hidup dan menghasilkan dua metabolit sitotoksik, mustard fosforamide dan akrolein [6]. Tindakan terapeutik mustard phosphoramide telah dilaporkan sebelum ini bertanggungjawab untuk kesan anti-tumor [6], manakala acrolein bertanggungjawab untuk kesan sitotoksik CP, seperti cystitis hemorrhagic semasa pentadbiran ubat [2, 7]. Metabolit toksik Te CP merosakkan tisu hidup dengan meredakan sistem antioksidan endogen tisu melalui penjanaan radikal bebas oksigen reaktif yang mutagen kepada sel hidup. Pentadbiran dos tinggi CP telah dilaporkan meningkatkan peroksidasi lipid dan menyebabkan pengurangan dalam antioksidan endogen dan bukan enzimatik [7, 8]. Kajian terdahulu telah menerangkan kegunaan bahan antioksidan yang bermanfaat bersama dengan kemoterapi dalam mencegah kesan sampingan ubat pada tisu badan [7, 9, 10]. Ejen antioksidan seperti kolaviron terbukti berkesan dalam pencegahan kardiotoksisiti CP pada tikus [11]. Oleh itu, gabungan daripadaagen antioksidanbersama-sama dengan ubat kemoterapi mungkin pendekatan terapeutik yang berpotensi untuk mencegah atau menghentikan perkembangan sitotoksik CP. Ocimum gratissimum (Ocimum G.) ialah keluarga Lamiaceae yang tergolong dalam spesies tumbuhan herba. Ia dikenali sebagai cengkih atau selasih Afrika di banyak negara kawasan tropika (Asia, India, Brazil dan Afrika Barat, dll). Ia banyak ditemui di Nigeria [12]. Banyak negeri di negara ini (Nigeria) menggunakan Ocimum G. sebagai sos dan sup sayur-sayuran. Daun dan fower Ocimum G. didapati mempunyai polifenol dan sebatian bioaktif lain [13, 14]. Tumbuhan Ocimum gratissimum digunakan untuk merawat pelbagai penyakit seperti cirit-birit, kolitis ulseratif, demam, dan catarrh [14-17]. Tumbuhan ini mempunyai banyak kelebihan farmakologi kerana keupayaan anti-radang, anti-oksidatif, antibakteria, antidiabetik, dan antimalaria [14, 18-20]. Aktiviti anti-mikrob dari ekstrak Ocimum G. telah diuji secara in vitro terhadap pelbagai patogen manusia seperti Klebsiella pneumonia, Staphylococcus aureus, Escherichia, Vibro spp, Enterobacter spp, Enterococcus faecalis, dll. Aktiviti antikulat minyak pati Ocimum G ekstrak telah dicatatkan secara in vitro [19, 21, 22], dan Ocimum G. telah digunakan sebagai perayu nyamuk [23]. Kajian haiwan baru-baru ini mencadangkan kepentingan kesan perlindungan ekstrak Ocimum G. dalam pencegahan ketidakteraturan tekanan darah terhadap ketoksikan kobalt-klorida [24] serta melemahkan keabnormalan jantung yang berkaitan dengan fibrosis hati dengan merendahkan interleukin-6 laluan isyarat [25] atau dengan mendorong kesan antioksidan [26]. Ekstrak daun akueus daun Ocimum G. menunjukkan kesan antioksidan terhadap kecederaan kardio-renal yang disebabkan oleh kobalt klorida [24] dan menghalang ulser gastrik dengan mengurangkan rembesan asid gastrik dan ulser [27]. Juga, asid ursolik daripada ekstrak Ocimum G. menunjukkan aktiviti anti-sabit [28] dan antikanser [29, 30]. Tambahan pula, minyak pati Ocimum G. telah ditunjukkan mempamerkan sifat vasorelaxant yang bergantung kepada endothelium pada tikus [31]. Kajian in vivo dan in vitro telah menilai eugenol, konstituen perubatan Ocimum G., untuk menurunkan tahap glukosa darah melalui perencatan alpha-glucosidase [32]. Lebih-lebih lagi, kajian klinikal membuktikan kecukupan farmakologi Ocimum G. untuk mempamerkan aktiviti yang sama seperti chlorhexidine terhadap plak dan gingivitis [33]. Dengan semua ciri Ocimum G. ini, kami membuat hipotesis bahawa Ocimum G. mungkin terapeutik yang mungkin apabila digunakan bersama-sama dengan CP untuk mencegah atau menghentikan kesan buruk CP. Oleh itu, kajian ini direka untuk mengkaji kesan berfaedah ekstrak kaya polifenol daun Ocimum gratissimum terhadap nefrotoksisiti akibat CP dalam tikus Wistar jantan.

Sila klik di sini untuk mengetahui lebih lanjut

Bahan dan kaedah

Suntikan Cyclophosphamide (200mg/10mL) diperoleh daripada Makmal Celon (Hyderabad, India); suntikan ketamin hidroklorida (50mg/10mL) telah dibeli daripada Popular Pharmaceuticals Ltd., (Gazipur, Bangladesh); Kit ujian untuk parameter biokimia diperoleh daripada Randox Laboratories Limited, (Crumlin, UK), dsb. 1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH), metanol, natrium karbonat, Trolox, dan reagen Folin–Ciocâlteu telah dibeli daripada Merck & Co., Kenilworth, NJ, USA. Instrumen yang digunakan termasuk spektrometer jisim kromatografi gas (GCMS-QP2010 SE, Shimadzu Corporation, Kyoto, Jepun), dan spektrofotometer boleh dilihat ultraviolet (Beckman, DU 7400, Amerika Syarikat), radas Soxhlet, penyejat berputar, mikroskop (Olympus CH; Olympus , Tokyo, Jepun); kamera (Leica DM 750).

Penyediaan ekstrak polifenol daun Ocimum gratissimum

Daun Ocimum gratissimum dikumpulkan dari taman di Usi, negeri Ekiti, Nigeria. Kebenaran institusi yang berkaitan untuk mengumpul Ocimum gratissimum telah diperolehi. Kajian ini mematuhi garis panduan antarabangsa, kebangsaan dan/atau institusi untuk penggunaan bahagian tumbuhan yang berlainan. Spesimen tumbuhan itu telah disahkan oleh Encik Omole, kurator di herbarium Jabatan Botani, Universiti Obafemi Awolowo, Ile-Ife, di mana spesimen baucar (1945) telah disimpan di Herbarium Universiti. Ekstrak yang kaya dengan polifenol diperoleh daripada daun Ocimum G. (900}g) mengikut kaedah pengekstrakan tumbuhan kami yang terdahulu [14]. Metanol digunakan untuk mendapatkan produk pengekstrakan akhir, ekstrak kaya polifenol daun Ocimum gratissimum (PREOG) di bawah tekanan yang dikurangkan pada 40 darjah menggunakan penyejat berputar. Pekat ekstrak yang terhasil dikeringkan dengan bantuan lyophilizer. Sisa (8{{40}}}.85 g) disimpan dalam piring Petri dengan penutup yang ketat dan disimpan pada −20 darjah sehingga diperlukan untuk kajian. Ekstrak Te OG yang diperolehi dilarutkan dalam air (0.2mL/pengambilan) dan diberikan kepada tikus mengikut dos yang direka bentuk. Analisis spektrometri jisim kromatografi gas bagi (GC‑MS) ekstrak OG Komposisi kimia ekstrak yang diperolehi telah disemak menggunakan kromatografi gas-spektrometri jisim (GC–MS). Chavez et al. [34] kaedah telah diterima pakai dengan sedikit pengubahsuaian. Lajur kapilari silika bercantum (ketebalan filem 30×0.25 HP-5Ms, 0.25μm) mengandungi helium sebagai gas pembawa (kadar aliran 1/mL) digunakan untuk penentuan sebatian. Suhu ketuhar 40 darjah ditetapkan dan ditahan selama 5 minit, dan kemudian ditambah secara beransur-ansur sebanyak 3 darjah/min sehingga 270 darjah . 60:1 telah ditetapkan sebagai nisbah pembahagian. Suhu 180 darjah ditetapkan untuk bahagian sambungan dan sumber ion, dan suhu antara muka 240 darjah ditetapkan untuk spektrometer jisim. Untuk kuantiti tenaga pengionan, 70 eV telah digunakan, manakala mod hentaman elektron (EI) dipilih untuk menghasilkan spektrum jisim yang stabil dan boleh dihasilkan semula, dan julat nilai 50-650m/z digunakan untuk menjalankan sampel. Masa kelewatan MS sebelum mengimbas ialah 5 minit. Sebatian yang diperolehi dipaparkan dalam Jadual 2. Penentuan jumlah kandungan fenolik Jumlah kandungan fenolik (TPC) ekstrak dinilai menggunakan teknik Folin-Ciocâlteu seperti yang diterangkan oleh Gulcin et al. [35], dengan sedikit pengubahsuaian. Secara ringkas, 100μL (0.5mg/mL) daripada ekstrak kaya polifenol Ocimum G. dimasukkan ke dalam tiub biasa yang berasingan. Kira-kira 500μL (1 peratus v/v) reagen fenol Folin–Ciocâlteu telah ditambah kepada setiap tiub yang mengandungi ekstrak Ocimum G. dan tiub tersebut dibiarkan selama 5 minit. dan kemudian dipusingkan. Selepas membenarkan berdiri selama 5 minit., kira-kira 400μL (20 peratus w/w) natrium karbonat telah ditambah kepada aliquot, yang kemudiannya diinkubasi dalam gelap pada suhu bilik selama 90 minit. Untuk pembangunan warna. Penyerapan setiap campuran dinilai dengan spektrofotometer yang boleh dilihat ultraviolet (Beckman, DU 7400, Amerika Syarikat) pada 765nm. Larutan natrium karbonat tanpa sebarang penambahan reagen fenol Folin–Ciocâlteu telah digunakan sebagai kosong. Untuk lengkung penentukuran, piawaian asid gallik digunakan. TPC sampel ditentukan daripada regresi linear piawaian asid gallic. Keputusan diwakili sebagai asid gallic equivalent (GAE) setiap gram berat kering ekstrak Ocimum gratissimum (mg GAE/g). Prosedur telah dijalankan dalam tiga kali ganda (n=3). Ujian penghapusan radikal bebas DPPH Aktiviti penghapusan radikal bebas ekstrak ditentukan mengikut kaedah yang diterangkan oleh RakMai et al. [36], dengan sedikit pengubahsuaian. Kira-kira 2mL larutan DPPH– metanol (180μmol/L) telah ditambah dan dicampur dengan ekstrak pada 0.1mg/mL. Alikuot telah diinkubasi dalam gelap pada 25 darjah. Penyerapan sampel ditentukan menggunakan spektrofotometer pada 517nm pada selang masa yang berbeza antara 0 dan 60min. Aliquot ekstrak tanpa penambahan larutan DPPH– metanol digunakan sebagai kosong. Trolox, analog sintetik daripadavitaminE, digunakan sebagai kawalan positif. Persamaan di bawah telah digunakan untuk menilai sifat penghapusan ekstrak. Prosedur telah dijalankan dalam tiga kali ganda (n=3). Di mana Sampel ialah ekstrak ditambah DPPH, Ablank ialah ekstrak sahaja, Kawalan ialah penyerapan larutan kawalan (hanya mengandungi DPPH). Penjagaan haiwan Dua puluh lapan (28) tikus Wistar jantan seberat 120-180 g digunakan untuk kajian ini. Mereka diperoleh daripada Pegangan Haiwan Kolej Sains Kesihatan, Universiti Obafemi Awolowo, Ile-Ife. Semua tikus disimpan di dalam sangkar konvensional selama 1 minggu untuk menyesuaikan diri dengan keadaan persekitaran pada darjah 28-32 dan mereka dibenarkan mendapat akses percuma kepada diet dan air minuman bersih. Eksperimen telah diluluskan oleh Jawatankuasa Etika Penyelidikan Kesihatan (HREC) Universiti Obafemi Awolowo dan kajian itu telah diterangkan mengikut garis panduan ARRIVE (haiwan dalam penyelidikan: pelaporan dalam eksperimen vivo) [37].

Cistanche untuk anti-keletihan

Kajian histopatologi

Tisu-tisu telah dipotong menjadi bahagian tebal {{0}}μm oleh mikrotom, dipasang pada slaid dan diwarnai dengan PAS. Slaid telah diperhatikan di bawah mikroskop cahaya (Olym pus CH; Olympus, Tokyo, Jepun) dan fotomikrograf diambil dengan kamera Leica DM 750 pada pemberitahuan mag ×400. Bahagian tisu buah pinggang dinilai oleh ahli patologi bertauliah yang buta terhadap protokol eksperimen. Kerosakan glomerular dijaringkan antara gred 0 dan 4 dengan penilaian proliferasi mesangial, ketebalan membran basal, dan perubahan fibrinoid. Kerosakan tiub telah dijaringkan antara gred 0 dan 4 dengan penilaian degenerasi vakuolar, penyahkuamatan, degenerasi tiub, nekrosis tiub proksimal, dan pembentukan tuang. Infiltrat radang tubulointerstitial dijaringkan antara gred 0 dan 2 dengan penilaian kepelbagaian sel radang dalam medium dan kehadiran infiltrat dalam epitelium tubul (Jadual 1) [44]. Jumlah skor kerosakan buah pinggang 0-2 mewakili nefrotoksisiti tidak / ringan, 3-6 nefrotoksisiti sederhana, dan 7-10 nefrotoksisiti teruk [44].

Keputusan

Analisis spektrometri jisim kromatografi gas, kandungan fenolik, dan kapasiti penghapusan DPPH ekstrak daun Ocimum gratissimum analisis GC-MS mendedahkan beberapa sebatian bioaktif ekstrak daun Ocimum gratissimum (Jadual 2). Kandungan polifenol ekstrak telah diiktiraf dengan menggunakan kaedah Folin-Ciocâlteu (Jadual 2). Jumlah kandungan fenolik (TPC) (80.36±0.50mg GAE/100g) yang diperolehi dalam ekstrak Ocimum G. mendedahkan bahawa ekstrak Ocimum gratissimum kaya dengan kandungan fenolik. Kapasiti penghapusan DPPH ekstrak juga dinilai dengan mengira nilai IC50, yang berkaitan dengan jumlah ekstrak yang mampu menghilangkan 50 peratus daripada radikal bebas yang terkandung dalam campuran tindak balas. Nilai IC50 (22.12±0.43mg/ml) ekstrak adalah tinggi dan ini menandakan tinggiantioksidanaktiviti daun Ocimum gratissimum. Oleh itu, fungsi kandungan fenolik tumbuhan yang tinggi ditunjukkan dalam keupayaannya untuk menghilangkan aktiviti radikal bebas (Jadual 2).

Kesan PREOG dan cyclophosphamide pada pelepasan kreatinin

Penurunan ketara dalam pelepasan kreatinin buah pinggang diperhatikan dalam kumpulan CP sahaja jika dibandingkan dengan kawalan (p<0.05). however,="" the="" preog-treated="" groups="" revealed="" a="" significant="" increase="" in="" the="" creatinine="" clearance="" when="" compared="" with="" cp="" alone="" treated="" group=""><0.05)>

Perbincangan

Dalam kajian semasa, terdapat tanda-tanda peningkatan tahap dalam parameter tekanan oksidatif seperti peroksidasi lipid, hidrogen peroksida (H2O2), dan oksida nitrik (NO), menunjukkan bahawa lipid membran dan protein buah pinggang tikus dirawat dengan CP sahaja yang rosak. Selain itu, aktiviti enzim antioksidan seperti superoksida dismutase dan katalase dan tahap antioksidan bukan enzimatik, glutation terkurang telah menurun dalam kumpulan yang dirawat dengan CP sahaja. Penurunan antioksidan dalam sel buah pinggang tikus yang dirawat dengan CP sahaja adalah petunjuk ketidakseimbangan redoks-homeostasis. CP sebelum ini telah ditunjukkan untuk mendorong kerosakan oksidatif, keradangan, dan nekrosis sel atau apoptosis selepas pengaktifan dan promosi spesies oksigen reaktif (ROS) melalui metabolitnya, akrolein [7, 11, 14], yang kemudiannya mencetuskan penyahaktifan dan penguranganpertahanan antioksidankapasiti organisma yang terjejas [10, 11, 45]. Dalam kajian ini, lebihan pengeluaran ROS melebihi endogenkapasiti antioksidan, mencetuskan tekanan oksidatif, dan seterusnya merosakkan sel-sel buah pinggang tikus yang dirawat CP seperti yang ditunjukkan oleh peningkatan tahap penanda tekanan oksidatif dan penurunan tahapparameter antioksidan. Juga, pandangan histologi tikus ini menunjukkan kerosakan glomerular dan nekrosis tiub sel-sel buah pinggang. Tambahan pula, ketidakseimbangan redoks menimbulkan pengeluaran berlebihan sitokin proinflamasi [3, 14]. Telah memerhatikan pengeluaran berlebihan ROS mencetuskan peroksidasi lipid dan mobilisasi sitokin proinflamasi dan secara serentak menyebabkan kerosakan sel buah pinggang radang. Penilaian IL-6 dalam kajian ini telah meningkat dengan ketara dalam tikus yang dirawat CP, yang menunjukkan serangan tekanan oksidatif dan keradangan sel buah pinggang. Ketinggian IL-6 didapati mencetus dan/atau merangsang hati untuk memulakan tindak balas fasa akut yang mengakibatkan peningkatan dalam pengeluaran protein C-reaktif (CRP) yang beredar dan mediator bioaktif yang lain [46]. CRP meningkat dengan ketara dalam tikus yang dirawat CP dan tahap tinggi biomarker ini merupakan petunjuk sistem pertahanan awal terhadap jangkitan, maklumat, dan kerosakan tisu [47, 48]. Ketinggian tahap CRP dalam kajian ini mengesahkan lagi mengalami keradangan pada tikus yang dirawat dengan CP sahaja. CP telah diperhatikan untuk mencetuskan pengurangan antioksidan endogen buah pinggang seperti penggunaan berlebihan GSH oleh buah pinggang akibat pengumpulan produk metabolit cyclophosphamide dalam sel tubular renal [9]. Hasil daripada proses ini, buah pinggang tikus yang dirawat dengan CP sahaja boleh meningkatkan tindak balas imun terhadap selnya, yang kemudiannya mengakibatkan keradangan seperti yang ditunjukkan oleh peningkatan CRP plasma. Dalam persetujuan, CP mempunyai potensi untuk mendorong keradangan dan kemungkinan kerosakan imunologi pada buah pinggang tikus yang dirawat CP.

Kesimpulan

Kesimpulannya, keputusan daripada penemuan ini menunjukkan bahawa ekstrak Ocimum gratissimum yang kaya dengan polifenol menghalang kesan sampingan CP pada fungsi buah pinggang melalui penurunan tekanan oksidatif, menghalang pengeluaran berlebihan sitokin pro-radang, dan infltasi leukosit, dan peningkatan enzim antioksidan. aktiviti tisu buah pinggang. Selain itu, telah disahkan bahawa CP menyebabkan pengurangan rembesan aldosteron, dan memudahkan kehilangan natrium dan air yang berlebihan melalui air kencing dalam tikus. Walau bagaimanapun, ekstrak Ocimum G. meningkatkan fungsi buah pinggang meningkatkan pengeluaran aldosteron, dan menghalang kehilangan natrium dan air yang berlebihan dalam tikus yang dirawat CP. Kehadiran polifenol dan antioksidan dalam daun Ocimum gratissimum menjadikannya calon yang sempurna untuk rawatan dan/atau pencegahan kesan nefrotoksik cyclophosphamide.

Rujukan

1. Chabner BA, Ryand DP, Pax-Ares L, Garcis-Carbonero, Calaresi P. Ejen anti-neoplastik. Dalam: Harnam JG, Libmirde LE, editor. Goodman dan Gilman adalah asas farmakologi terapeutik. ed ke-10. New York: McGraw Hill; 2001. hlm. 1389–459.

2. Chabner BA, et al. Ejen antineoplastik. Dalam: Brunton LL, Lazo JS, Parker KL, editor. Goodman dan Gilman adalah asas farmakologi terapeutik. ed ke-11. New York: McGraw Hill; 2006. hlm. 1322–8. 1694.
3. Ge B, Yang D, Wu X, Zhu J, Wei W, Yang B. Kesan sitoprotektif liposom asid glycyrrhetinic terhadap cystitis yang disebabkan oleh cyclophosphamide melalui menghalang tekanan keradangan. Int Immunopharmacol. 2018;54:139–44.
4. Sinanoglu O, Yener AN, Ekici S, Midi A, Aksungar FB. Kesan perlindungan spirulina dalam nefrotoksisiti yang disebabkan oleh siklofosfamid dan urotoksisiti pada tikus. Asas Transl Sci. 2012.
5. Caglayan C, Temel Y, Kandemir FM, Yildirim S, Kucukler S. Naringin melindungi daripada hepatotoksisiti dan nefrotoksisiti akibat siklofosfamid melalui modulasi tekanan oksidatif, keradangan, apoptosis, autophagy dan kerosakan DNA. Environ Sci Pollut Res Int. 2018;25(21):20968–84.
6. Zhang J, Tian Q, Yung S, Chuen S, Zhou S, Duan W, et al. Metabolisme dan pengangkutan oxazaphosphorine dan implikasi klinikal. Dadah Metab Rev. 2005;37:611–703.
7. Famurewa AC, Edeogu CO, Ofor FI, Besong EE, Akunna GG, Maduagwana EK. Penurunan peraturan ketidakseimbangan redoks dan isyarat iNOS/NF-ĸB/caspase-3 dengan suplemen zink menghalang urotoksisiti cystitis hemoragik akibat siklofosfamid pada tikus. Life Sci. 2021;266:118913.
8. Oyagbemi AA, Omobowale TO, Saba AB, Olowu ER, Dada RO, Akinrinde AS. Asid Gallic memperbaiki neurotoksisiti yang disebabkan oleh siklofosfamid dalam tikus Wistar melalui aktiviti penghapusan radikal bebas dan peningkatan dalam sistem pertahanan antioksidan. J Diet Suppl. 2016;13:402–19.
9. Abraham P, Isaac B. Kesan glutamin oral pada nefrotoksisiti yang disebabkan oleh siklofosfamid pada tikus. Hum Exp Toxicol. 2010;30(7):616–23.
10. Sherif IO. Mekanisme neuroprotektif bagiquercetinterhadap urotoksisiti yang disebabkan oleh cyclophospha-tikus: kesan pada tekanan oksidatif dan penanda keradangan. J Sel Biokim. 2018;119(9):7441–8. 11. Omole JG, et al. Kesan perlindungan kolaviron pada ketoksikan jantung yang disebabkan oleh cyclophosphamide pada tikus. J Evid Based Integr Med. 2018;23:1
11. Efraim KD, Jacks TW, Sodipo OA. Kajian histopatologi tentang ketoksikan ekstrak daun Ocimum gratissimum pada beberapa organ arnab. Afr J Biomed Res. 2003;6:21–5.
12. Akinmoladun AC, Ibukun EO, Emmanuel A, Obuotor EM, Farombi EO. Kandungan fitokimia dan aktiviti antioksidan ekstrak daripada daun Ocimum gratissimum. Sci Res Esei. 2007;2:163–6.
13. Alabi QK, Akomolafe RO, Omole JG, Adefsayo MA, Ogundipe OL, Aturamu A, et al. Ekstrak kaya polifenol daun Ocimum gratissimum memulihkan kolitis melalui melemahkan kecederaan mukosa kolon dan mengawal pengeluaran sitokin pro-radang dan tekanan oksidatif pada tikus. Biomed Pharmacother. 2018;103:812–22.
14. Ofah VN, Chikwendu UA. Kesan antidiarrhoeal ekstrak daun Ocimum gratissimum dalam haiwan eksperimen. J Ethnopharmacol. 1999;68:327–30.