Bahagian2: Homoarginine Ameliorates Nefropati Diabetik Bebas Daripada Nitrik Oksida Synthase-3

Untuk maklumat lanjut. Hubungitina.xiang@wecistanche.com

3. KEPUTUSAN

3.1 Ciri-ciri tetikus

Jenis liar kencing manis dan tikus NOS3- mempunyai berat badan yang jauh lebih rendah berbanding dengan tikus bukan diabetes selepas 24 minggu, yang meningkat dengan ketara oleh homoarginine pada tikus NOS3-7 diabetes. Glukos darah lebih tinggi dalam semua jenis liar diabetes dan NOS3-7mice. Nisbah berat badan / badan jauh lebih tinggi pada tikus NOS3-7 diabetes, sementara rawatan homoarginin mengurangkan nisbah berat jantung / badan dengan ketara pada tikus NOS3 diabetes. Tekanan darah sistolik meningkat dengan ketara dalam NOS3-7mice berbanding dengan jenis liar dan menunjukkan trend pengurangan; walaupun tidak ketara oleh rawatan homoarginine dalam tikus NOS3-/ diabetes. (Jadual 1).

3.2 Homoarginine mengurangkan albuminuria dalam diabetes NOS3-/- rmice

Diabetes meningkat dengan ketara albuminuria dalam kedua-dua jenis liar dan noS3-/ tikus berbanding dengan normal, kesan yang berkurangan dengan ketara oleh rawatan homoarginine (Rajah 1). Oleh kerana keputusan yang diperhatikan pada tikus jenis liar adalah konsisten dengan kajian kami sebelum ini (Wetzel et al.,2019)mengenai kesan perlindungan homoarginine dalam DN, kami hanya menganalisis NOS3-/ tikus untuk baki kajian ini.

3.3 Homoarginine mengurangkan tahap BUN plasma dalam diabetes NOS3-7-mice

Kami seterusnya menilai kesan pentadbiran homoarginine pada tahap BUN plasma dalam NOS3-tikus. Tahap Plasma BUN meningkat pada tikus diabetes dan dikurangkan oleh rawatan homoarginine (Rajah 2).

Klik untuk mengetahui tentang kegunaan cistanche organik dan cistanche

Ungkapan 3.4 NOS1 dan NOS2 tidak diubah dalam diabetes NOS3-mice

Seterusnya, kami menentukan sama ada diabetes dan /atau homoarginine mengubah ungkapan isoform NOS lain dalam buah pinggang dari NOS3 -mice. Keputusan kami menunjukkan bahawa diabetes atau homoarginine tidak menjejaskan ekspresi gen NOS1 atau NOS2 dalam tikus NOS3-7 (Rajah 3).

3.5 Homoarginine mengurangkan patologi glomerular dan fibrosis dalam diabetes NOS3-tikus

Analisis bahagian glomerular bernoda PAS menunjukkan bahawa diabetes NOS3- tikus dikaitkan dengan peningkatan jumlah glomerular, selular glomerular, ketebalan membran bawah tanah glomerular (GBM), dan indeks kecederaan glomerular berbanding dengan NOS3一mice bukan diabetes; kesan berkurangan dengan ketara menggunakan rawatan homoarginine (Jadual 2 dan Rajah 4a). Tambahan pula, diabetes NOS3mice menunjukkan peningkatan peratus fibrosis (menggunakan ImageJ)dalam trikrom Masson (Rajah 4b,c) bahagian bernoda 24 minggu selepas diabetes, yang dikurangkan dengan rawatan dengan homoarginin.

3.6 Homoarginine mengurangkan penanda fibrotik buah pinggang pada tikus NOS3-/- diabetes

Analisis PCR masa nyata menunjukkan peningkatan yang ketara dalam fibronectin buah pinggang (Rajah 5a), TGFβ (Rajah 5b), aktin otot licin (Rajah 5c), dan E-cadherin (Rajah 5d) berikutan diabetes dalam NOS3-/tikus. Suplemen Homoarginine dengan ketara tumpul peningkatan penanda fibrosis ini.

3.7 Homoarginine mengurangkan penyusupan makrophage glomerular dalam diabetes NOS3-/mice

Kencing manis NOS3-/tikus menunjukkan peningkatan yang ketara dalam makrofaj buah pinggang dalam filtrating berikutan diabetes (Rajah 6)berbanding dengan tikus bukan diabetes. Rawatan Homoarginine mengurangkan penyusupan makrophage dengan ketara 24 minggu selepas diabetes.

3.8 Homoarginine mengurangkan fibrosis jantung dan meningkatkan fungsi jantung pada tikus diabetes NOS3-7-r

Tikus NOS3-/ diabetes menunjukkan peningkatan peratus fibrosis (menggunakan ImageJ)dalam trikrom Masson (Rajah 7a,b) bahagian bernoda 24 minggu selepas diabetes, yang dikurangkan dengan rawatan dengan homoarginin. Tambahan pula, diabetes NOS3-7mice mempunyai pengurangan ketara dalam pecahan ejection (EF)dan pengecutan pecahan (FS)(Rajah 7c-e)berbanding dengan kawalan bukan diabetes pada 22 minggu diabetes, kesan yang dipulihkan dengan ketara menggunakan rawatan homoarginine.

3.9 Homoarginine memulihkan kompleks MCU dan pengawal selianya dalam tikus Ins2Akita diabetes

Sampel buah pinggang yang diperolehi daripada penerbitan terdahulu kami (Wetzel et al.,2019)telah dianalisis untuk kompleks MCU dan pengawal selianya. Tikus kencing manis mempunyai peningkatan yang ketara dalam MCU buah pinggang dan pengawal selia positifnya, ungkapan MCUR1, bersama-sama dengan pengurangan dalam pengawal selia negatif MCU buah pinggang, ungkapan MICU1 (Rajah 8), berbanding dengan kawalan bukan diabetes pada usia 18 minggu dalam tikus Ins2Ak, manakala tikus diabetes yang dirawat dengan suplemen homoarginine memulihkan kompleks MCU dan pengawal selianya ke tahap normal.

3.10 Homoarginine memulihkan tikus kompleks MCU dan pengawal selianya dalam diabetes NOS3-7-

Diabetik NOS3-/tikus mempunyai peningkatan yang ketara dalam MCU buah pinggang (Rajah 9a) bersama-sama dengan pengurangan ketara dalam pengawal selia negatifnya, ekspresi MICUl (Rajah 9b,c), berbanding dengan kawalan bukan diabetes selepas 24 minggu diabetes diabetes, manakala diabetes NOS3-tikus yang dirawat dengan suplemen homoarginine memulihkan kompleks MCU dan pengawal selia negatifnya ke tahap normal.

4 PERBINCANGAN

Nefropati kencing manis kekal sebagai komplikasi diabetes yang penting dan tidak dapat diselesaikan. Penerbitan kami sebelum ini menunjukkan bahawa suplemen homoarginine memberikanBuah pinggangperlindungan dalam model tetikus diabetes (Wetzel et al., 2019). Walau bagaimanapun, mekanisme yang tepat di mana homoarginine menjadi pengantara kesan ini tidak jelas. Kajian semasa menunjukkan bahawa suplemen homoarginine menjadi pengantaraBuah pinggangperlindungan tisu dalam DN bebas daripada NOS3 yang akhirnya akan mengubah pemahaman kita tentang mekanisme yang mana homoarginine mendorong perlindungan buah pinggang dan jantung dalam DN. Kesan perlindungan homoarginine dalam DN boleh dimediasi melalui peningkatan fungsi mitokondria.

Disfungsi endothelial, dicirikan oleh pengurangan bioavailabiliti NO, dan peningkatan tekanan oksidatif adalah ciri khas diabetes (Creager et al.,2003)dan DN(Goligorsky et al.,2001). Peranan ungkapan dan tindakan NOS3 dalam DN adalah kontroversi; oleh itu walaupun rendah atau kekurangan NOS3 telah terbukti memburukkan lagi DN (Wang et al,2011; Zhao et al.,2006), penerbitan baru-baru ini (Natarajan et al.,2019) menunjukkan bahawa overexpression NOS3 dalam tikus Ins2Aki memburukkan lagi DN mungkin melalui peningkatan NOS3 uncoupling dan tekanan oksidatif dan bukannya oleh peningkatan buah pinggang TIADA pengeluaran / tindakan. Kerana homoarginine boleh menjadi substrat untuk NOS dengan meningkatkan L-arginine (Hecker et al.,1991; Moali et al.,1998), ia juga boleh menjadi pengantara kesannya melalui TIADA tindakan/ pengeluaran. Walau bagaimanapun, penerbitan kami sebelum ini menunjukkan bahawa suplemen arginin oral mengejutkan tidak menghalang atau mengurangkan sebarang penanda kecederaan buah pinggang dalam model tetikus diabetes, walaupun berjaya meningkatkan tahap arginin dalam plasma dan buah pinggang (You et al.,2014). Interaksi langsung antara tahap homoarginine dan TIADA pengeluaran adalah kontroversi. Homoarginine boleh mengurangkan TIADA sintesis daripada arginin oleh(a)persaingan arginin dan homoarginine untuk pengambilan selular oleh pengangkut asid amino kationik (CAT)(Chafai et al, 2017; Hagos et al.,2006);(b)oleh rangsangan trans CAT, yang seterusnya boleh meningkatkan efflux selular arginin; dan (c) oleh com-petition homoarginine dan arginin untuk NOS(Pilz et al., 2015), walaupun homoarginine adalah substrat yang kurang cekap untuk enzim ini (Moali et al.,1998; Zwan et al,2013). Walaupun homoarginine boleh meningkatkan ketersediaan arginin dan dengan itu TIADA sintesis dengan menghalang argise, ini tidak mungkin kerana pertalian homoarginine yang lemah untuk arginase (Marz et al,2010). Walau bagaimanapun, homoarginine boleh menyumbang kepada TIADA sintesis dengan berkhidmat sebagai substrat untuk NOSkerana homoarginine, walaupun dengan pertalian yang lebih lemah dengan NOS berbanding dengan arginin, boleh dimetabolisme kepada NO dan homocitrulline (Drechsler et al., 2011).

Untuk mengkaji mekanisme kesan perlindungan homoarginine dalam DN, kami menyiasat kesan suplemen homoarginine pada disfungsi buah pinggang, perubahan histopatologi glomerular, dan pengambilan makrophage dalam NOS3-/-dan model tetikus diabetes jenis liar mereka. Suplemen Homoarginine ketara ameliorated albuminuria diabetes dalam jenis liar diabetes dan NOS3-7mice, mengesahkan penemuan kami sebelum ini (Wetzel et al,2019), dan dikaitkan dengan pengurangan patologi glomerular dan ekspresi penanda fibrotik kanak-kanak-ney dalam diabetes NOS3-mice.

Diambil bersama, keputusan kami menunjukkan peranan langsung kesan perlindungan homoarginine dalam DN dan menyokong konsep bahawa homoarginine mediates perlindungan tisu buah pinggang bebas daripada NOS3. Kedua-dua morbiditi kardiovaskular dan kematian meningkat pada pesakit dengan DN. Di dalam jantung, tahap homoarginin yang lebih rendah berkaitan dengan peningkatan penebalan ventrikel kiri, EF yang lebih rendah, dan NTproBNP yang lebih tinggi (Bahls et al.,2018). Sebaliknya, suplemen homoarginine mengekalkan fungsi jantung dalam model murine kegagalan jantung infarksi selepas miokardium (Atzler et al.,2017). Dalam kajian semasa, kami juga menunjukkan bahawa kesan perlindungan homoarginine untuk meningkatkan fungsi jantung dan mengurangkan fibrosis jantung adalah bebas daripada ungkapan NOS3 dengan cara yang sama dengan kesannya pada buah pinggang. Walau bagaimanapun, kita tidak boleh mengecualikan kesan hemodinamik homoarginin dalam DN memandangkan trendnya untuk mengurangkan tekanan darah; walaupun tidak penting.

Mekanisme kesan perlindungan homoarginine nampaknya dikaitkan dengan modulasi fungsi mitokondria yang dikawal selia oleh kompleks MCU dan pengawal selianya. Disfungsi mitokondrial memainkan peranan penting dalam buah pinggang dalam juri (Brooks et al.,2009; Coughlan &Sharma,2016; Hallan & Sharma,2016; Long et al.. 2016; Sharma,2015; Sun et al.2008; Wang et al.,2012; Anda et al.,2016; Yu et al 2006; Zhan et al.,2013). Di buah pinggang, sel endothelial sangat terdedah kepada disfungsi mitokondria (Hong et al.,2012)dan menyumbang kepada tekanan oksidatif, kekurangan tenaga yang berterusan, kemerosotan mekanisme pembaikan yang bergantung kepada tenaga, dan kematian sel dalam kecederaan buah pinggang (Funk et al., 2010; Funk & Schnellmann, 2012). MCU adalah kompleks multimerik yang terlibat dalam pengambilan Ca' pantas dalam mitokondria dan telah terbukti tidak terkawal dalam patologi jantung (Liao et al.,2015; Luongo et al.,2015; Nemaniet al,2018; Tomar et al,2019; Woods et al,2019). Pengambilan Mitokondria Ca2+ yang dimediasi oleh kompleks MCU memainkan peranan penting dalam transduksi isyarat, bioenergetik, dan kematian sel, dan disregulasinya dikaitkan dengan beberapa penyakit manusia. Walaupun podocyte apoptosis telah dikaitkan dengan mcU dysregulation(Xu et al.,2018; Yuan et al.,2017), peranan kompleks MCU dan interaksinya dengan suplemen homoarginine dalam DN tidak diketahui. Data semasa kami dalam tikus diabetes menunjukkan bahawa pentadbiran homoarginine dengan ketara mengurangkan ekspresi MCU, meningkatkan pengawal selia MCU-negatif (MICU1), dan mengurangkan pengawal selia positif MCU (MCUR1)dalam DN, dan kesan ini bebas daripada ungkapan NOS3. Oleh itu, kami membuat spekulasi bahawa terdapat hubungan antara isyarat mitokondria Ca' dan hasil klinikal yang buruk dalam DN. Normalisasi fungsi mitokondria diperlukan untuk memulihkan metabolisme oksidatif semasa DN. Kajian tambahan diperlukan untuk mengesahkan kesan langsung homoarginin pada fungsi mitokondria.

Kesimpulannya, kajian kami menunjukkan buat kali pertama bahawa mekanisme perlindungan tisu buah pinggang dan jantung menggunakan suplemen homoarginine dalam DN adalah bebas daripada NOS3, dan ia mungkin dimediasi dengan meningkatkan disfungsi mitokondria. Keputusan kajian kami akhirnya boleh menghasilkan intervensi terapeutik baru yang direka untuk menambah homoarginine dalam rawatan DN.

FaedahCistanche

1. Cistanche adalah ubat tradisional Cina yang sangat baik untuk tonifying buah pinggang. Ia bukan sahaja boleh tonify yin buah pinggang, tetapi juga tonify yang buah pinggang, dan kesan farmakologinya agak ringan. Maka ia adalah berita baik untuk lelaki.

2. Cistanche kaya dengan alkaloid,echinacoside, dan bahan neutral kristal, serta beberapa unsur surih dan vitamin, yang boleh menyegarkan buah pinggang, yang, dan darah dengan berkesan. Ia mempunyai kesan yang baik terhadap gejala kekurangan yang, dan ia dapat mencegah fenomena penurunan berat badan dengan berkesan.

3. Cistanche bukan sahaja boleh merawat lelakimati pucuk, pelepasan malam, dan ejakulasi pramatang, ia juga boleh merawat haid tidak teratur wanita, amenorrhea, dan penyakit ginekologi lain.

Siapa lagi yang tidak boleh makan cistanche

1. Mereka yang mempunyai kekurangan yin buah pinggang. Kerana kesan Cistanche dalam pemanasan dan berkhasiat buah pinggang-yang, orang dengan kekurangan yin buah pinggang akan memburukkan lagi gejala kekurangan yin seperti lima panas yang kecewa, tidur gelisah dan berbaring, lebih banyak impian, lidah merah, dan kurang salutan, jadi orang yang kekurangan yin buah pinggang tidak boleh makan cistanche.

2. Orang yang mengalami cirit-birit akibat kekurangan limpa. Cistanche mempunyai kesan melembapkan kekeringan dan melicinkan usus. Orang yang mengalami kekurangan limpa dan cirit-birit boleh memburukkan lagi gejala cirit-birit dan najis longgar. Oleh itu, orang yang mengalami kekurangan limpa dan cirit-birit tidak boleh makan cistanche.

3. Kanak-kanak di bawah umur. Cistanche adalah tonik yang kuat. Kanak-kanak di bawah umur masih dalam peringkat perkembangan fizikal dan mental. Makan cistanche tidak kondusif untuk pertumbuhan dan perkembangan mereka sendiri. Oleh itu, jika tidak perlu, adalah disyorkan bahawa kanak-kanak di bawah umur tidak makan cistanche.

Oleh itu, jika anda perlu menyegarkan buah pinggang anda, Cistanche adalah suplemen yang baik, dan jika anda mempunyai keadaan lain, sila gunakannya di bawah nasihat doktor anda.