Bahagian Ⅱ Perbandingan Profil Kimia Dan Aktiviti Antioksidan Bahagian Berbeza Cistanche Deserticola Ditanam Menggunakan Kromatografi Cecair Berprestasi Ultra-Spektrometri Jisim Kuadrupol Masa Penerbangan Dan 1,1-Diphenyl-2-Ujian Berasaskan pikrilhidrazil

Untuk maklumat lanjut:emily.li@wecistanche.com

Klik di sini untuk mendapatkan maklumat lanjut tentang Cistanche

Data spektrum jisim terperinci dan corak pemecahan yang dicadangkan diberikan dalam Rajah 7. Struktur enam PhG yang dikenal pasti di atas dibahagikan kepada tiga bahagian: asid I-kafeik (CA), II-aglikon dan III-gula (Glc dan Rha) . Dalam spektrum MS/MS, kecacatan jisim yang sepadan dengan belahan neutral kumpulan caffeoyl dan sisa Glc dan Rha menguasai laluan pemecahan PhG dan menjana ion serpihan diagnostik (Rajah 8). Ion serpihan ciri MS/MS tambahan pada m/z 179, 161, dan 135 seterusnya mencadangkan bahawa substituen caffeoyl wujud dalam strukturnya. Dengan menggunakan ciri pemecahan ini, kami dengan yakin boleh mencadangkan laluan pemecahan seperti berikut.Acteoside(Rajah 7c) menghasilkan serpihan pada m/z 461 melalui kehilangan bahagian CA dan kemudian menghasilkan ion pada m/z 315 melalui kehilangan selanjutnya Rha. Bahagian CA ditemui pada m/z 179, dan ion serpihannya yang ditemui pada m/z 161 dan m/z 135 masing-masing dihasilkan oleh kehilangan H2O dan CO2. Isoacteoside (Rajah 7d) menghasilkan ion yang sama seperti acteoside pada m/z 461, 315, 179, 161, dan 135. 20 -Acetylacteoside (Rajah 7e) menghasilkan serpihan pada m/z 623 melalui kehilangan asetil dan kemudian menghasilkan ion pada m/z 461, 315, 179, 161, dan 135, yang sama dengan corak pemecahan acteoside. Sementara itu, 20 -asetilakteosida juga menghasilkan serpihan pada m/z 503 dengan kehilangan bahagian CA dan seterusnya kehilangan kumpulan Acnya untuk menghasilkan ion pada m/z 461. Tubuloside B (Rajah 6f) memaparkan corak pemecahan yang serupa kepada 20 -asetillakteosida. Echinacoside (Rajah 7a) menghasilkan ion serpihan pada m/z 623 melalui kehilangan bahagian CAnya, dan kemudian kehilangan jujukan bahagian Rha dan Glc menghasilkan ion serpihan pada m/z 477 dan 315. Ion serpihan pada m/z 461 dijana dengan kehilangan bahagian CA dan Glc daripada ion prekursor. Ciri-ciri ion CA pada m/z 179, 161, dan 135 juga ditemui. Cistanoside A (Rajah 7b) menghasilkan ion serpihan pada m/z 637 melalui kehilangan bahagian CA dan kemudian menghasilkan ion pada m/z 491 dan 475 dengan kehilangan seterusnya bahagian Rha dan Glc, masing-masing. Oleh itu, penggunaan gabungan UPLC-PDA-QTOF/MS boleh memberi sumbangan besar ke arah menjelaskan dengan tepat struktur kimia sebatian.

2.7. Korelasi antara Antioksidan dan Sifat A8antioksidan.

Analisis korelasi antara jumlah kandungan antioksidan dan jumlah aktiviti antioksidan telah diterangkan dalam banyak kajian [33-38]. Sepanjang pengetahuan kami, terdapat kekurangan kajian untuk membandingkan sifat antioksidan dan kandungan PhG yang ditanam.C. deserticolabahagian menggunakan kaedah pencirian yang begitu ringkas. Keputusan awal enam kandungan PhG yang diterangkan dalam bahagian "Analisis kuantitatif" diringkaskan dalam Jadual 4, dan aktiviti antioksidan (IC50) ditentukan menggunakan ujian DPPH seperti yang diterangkan dalam bahagian "Kapasiti Antioksidan" disenaraikan dalam Jadual 5. Pertama, jumlah kandungan antioksidan dan aktiviti setiap bahagian ditunjukkan dalam Rajah 9. Jelas sekali, terdapat perbezaan yang ketara antara bahagian yang berbeza. Malah, keputusan yang diperolehi menunjukkan bahawa aktiviti antioksidan yang ditanamC. deserticolabatang adalah setanding dengan batang yang terdapat di pasaran. Keputusan ini mencadangkan bahawa aktiviti antioksidan ekstrak batang mungkin dikaitkan dengan kandungan PhGnya. Oleh itu, fitokimia dalam ekstrak batang ditanamC. deserticoladicadangkan untuk memainkan peranan penting dalam aktiviti penghapusan radikal DPPH. Secara keseluruhan, keputusan kami menunjukkan korelasi yang kuat antara jumlah kandungan PhG dan aktiviti antioksidan: r {{0}}.92, ** p <>

Di samping itu, sampel tertentu dengan jumlah kandungan antioksidan yang lebih tinggi tidak menunjukkan aktiviti antioksidan yang tinggi, seperti paksi dan perbungaan. Sementara itu, corolla yang mempunyai aktiviti tertinggi daripada enam bahagian, mempunyai jumlah kandungan antioksidan yang lebih rendah daripada paksi dan perbungaan. Rajah 4, seperti yang diterangkan dalam bahagian "Analisis kuantitatif", menunjukkan jumlah relatif sebatian PhG untuk memberi pemahaman awal tentang sumbangan individu mereka. Dalam kajian ini, analisis regresi Partial Least Squares (PLS) [39-41] juga dijalankan untuk membandingkan korelasi antara kelimpahan setiap antioksidan dan aktiviti antioksidan secara in vitro. Model PLS telah dibina menggunakan kandungan setiap antioksidan (sebagai matriks deskriptor X) dalam kromatogram cap jari pada 330 nm dan aktiviti antioksidan (sebagai matriks tindak balas Y) semua bahagian. Plot pekali dan nilai kepentingan berubah dalam unjuran (VIP) yang diperoleh menggunakan perisian SIMCA-P plus (Versi 13.0, Umetrics, Umea, Sweden) ditunjukkan dalam Rajah 10. Terutamanya, songsangan bagi nilai IC50 (1/IC50) telah dipilih sebagai pembolehubah Y untuk mewujudkan model kerana nilai IC50 yang lebih rendah mewakili aktiviti antioksidan yang lebih kuat. Mengikut plot pekali regresi yang diperolehi dalam Rajah 10A, model regresi linear menunjukkan bahawa semua antioksidan kecuali acteoside berkorelasi positif dengan 1/IC50. Model penentukuran PLS yang diperolehi dinyatakan oleh persamaan regresi: Y=0.50X1 campur 0.57X2 − 0.11X3 tambah 0.32X4 tambah 0.58X5 tambah 0.24X6. Nilai VIP mencerminkan kepentingan pembolehubah dalam model. lebih besar VIP, lebih relevan untuk klasifikasi sampel. Seperti yang ditunjukkan oleh keputusan kami, 20 -asetilakteosida merupakan penyumbang penting kepada aktiviti antioksidan (Rajah 10B). Dapatan ini bersetuju dengan kajian oleh Yang et al [20].

3 Bahan dan Kaedah

3.1 Tumbuhan Bahan.DiusahakanC. deserticolatelah disediakan dengan murah hati oleh pangkalan penanaman Bencao Congrong di Daerah Yongning, Wilayah Ningxia, dan telah disahkan oleh Prof. Jun Chen dari Institut Pembangunan Tumbuhan Ubat, Akademi Sains Perubatan China, Beijing, China. Enam bahagian yang berbeza ditanamC. deserticola termasuk batang berair (R1), paksi bunga (R2), bunga (R3), bunga (tanpa biji) (R4), tangkai bunga (R5), dan corolla (R6). Maklumat sampel terperinci ditunjukkan dalam Rajah 11. Setiap bahagian telah dikeringkan secara berasingan dalam pengering, dihancurkan menjadi serbuk, melalui 40-ayak mesh, dan kemudian dimuatkan ke dalam bekas kedap udara dan disimpan dalam desikator. Spesimen baucar sampel ini telah disimpan di Institut Pembangunan Tumbuhan Ubat, Akademi Sains Perubatan China, Beijing, China.

3.2. Bahan Kimia dan Reagen. Isoacteoside (Lot 130809), acteoside (Lot 130421), dan echinacoside (Lot 121027) telah dibeli daripada Chengdu Pure-Chem Standard Co. Ltd. (Beijing, China), Cistanoside A, 20 -Acetylacteoside dan tubuloside B dan disucikan daripada ditanamC. deserticoladi makmal kami, dengan lebih daripada 98 peratus ketulenan (HPLC) dan strukturnya juga disahkan berdasarkan HR-MS, 1H-NMR, dan 13C-NMR dan dibandingkan dengan kesusasteraan sebelumnya. Struktur mereka dipaparkan dalam Jadual 7. DPPH, asid L-askorbik, dan Trolox dibeli daripada Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, Amerika Syarikat). Pelarut, asetonitril, dan metanol adalah gred HPLC dari Merck (Darmstadt, Jerman), dan asid formik dengan ketulenan 96 peratus adalah gred HPLC (Tedia, Fairfield, OH, Amerika Syarikat). Air ternyahion (18 MΩ) telah disediakan oleh air suling melalui sistem Milli-Q (Millipore, Milford, MA, Amerika Syarikat). Reagen dan bahan kimia lain adalah gred analitik.

3.3. Penyediaan Penyelesaian

3.3.1. Penyelesaian Piawai.Penyelesaian stok standard campuran yang mengandungiechinacoside(501 µg/mL), cistanoside A (64 µg/mL), acteoside (239 µg/mL), isoacteoside (22.6 µg/mL), 20 -acetylacteoside (278 µg/mL) dan tubuloside B(46.2 µg /mL) disediakan dalam metanol. Larutan stok telah dicairkan dengan metanol untuk mendapatkan satu siri kepekatan yang sesuai yang digunakan sebagai penyelesaian yang berfungsi untuk membangunkan lengkung penentukuran dan disimpan pada suhu 4 ◦C sebelum digunakan.

3.3.2. Contoh Penyelesaian. Serbuk yang ditimbang dengan tepat (40 mesh, 1 g) daripada enam bahagian berbeza yang ditanamC. deserticolatelah ditambah dengan 50 mL metanol, masing-masing. Selepas direndam selama 30 minit pada suhu bilik, campuran ditimbang dan kemudian diekstrak dalam mandi air ultrasonik (40 kHz, 250 W, Kunshan, China) pada suhu bilik selama 40 minit. Selepas penyejukan, metanol tambahan ditambah untuk mengimbangi kehilangan berat badan. Semua larutan ditapis melalui penapis membran 0.22 µm sebelum suntikan. Aliquot (3 µL) larutan supernatan disuntik ke dalam UPLC untuk dianalisis. Setiap ekstrak disuntik dalam tiga kali ganda.

3.3.3. Penyelesaian DPPH. Penyelesaian stok radikal DPPH (5 × 10−3 mol/L) telah disediakan dengan melarutkan sampel DPPH yang ditimbang dengan tepat dalam metanol sejurus sebelum eksperimen dan dilindungi daripada cahaya. Kemudian, larutan stok baru dicairkan dengan metanol untuk mendapatkan larutan piawai (1 × 10−4 mol/L).

3.4. Keadaan Analisis UPLC-PDA. Analisis UPLC telah dijalankan pada sistem UPLC Waters Acquity (Waters, Milford, MA, USA) yang terdiri daripada pemanas lajur, pengurus sampel, pengurus pelarut binari dan pengesan tatasusunan fotodiod. Pemisahan kromatografi telah dilakukan pada lajur Acquity UPLC BEH C18 (1.7 µm,2.1 mm × 1{{10}}0 mm; Waters) dengan menetapkan pemanas lajur pada 30 ◦C. Fasa bergerak terdiri daripada asetonitril (A) dan air yang mengandungi 0.2 peratus asid formik (B) pada kadar alir 0.4 mL/min. Program elusi kecerunan digunakan seperti berikut: 5 peratus A pada 0–2 min, 5–15 peratus A pada 2–4 ​​min, 15 peratus A pada 4–6 min,15–20 peratus A pada 6–10 min, 20 –35 peratus A pada 10–15 min, 35 peratus A pada 15–18 min, dan 35–5 peratus A pada 18–18.1 min. Komposisi itu kemudiannya dipegang pada 5 peratus A selama 10 minit tambahan untuk penyamaan semula. Panjang gelombang pengesanan ditetapkan pada 330 nm.

3.5. Analisis UPLC-ESI-Q/TOF-MS. Keadaan Keadaan UPLC adalah sama seperti yang diterangkan dalam Bahagian 3.4. Analisis MS telah dilakukan pada spektrometer jisim Waters Xevo G2-XS QTOF (Waters MS Technologies, Manchester, UK) yang dilengkapi dengan antara muka penyembur elektro (ESI) dalam mod ion negatif dengan spektrum MS imbasan penuh sepanjang m/ julat z 50–1200. Dalam sumber, voltan kapilari ialah 2000 V, suhu sumber ialah 120 ◦C, suhu penyoraian ialah 450 ◦C, voltan kon ialah 40 V, gas kon ialah 30 L/j dan kadar aliran gas pelarutan ialah 600 L/j. Eksperimen MS/MS telah dijalankan menggunakan MSE, dan tenaga perlanggaran ialah 20–40 V. Semua data MS dikumpul menggunakan sistem Semburan Kunci untuk memastikan ketepatan jisim dan kebolehulangan. Ion [M − H]− leucine-enkephalin pada m/z 554.2615 digunakan sebagai jisim kunci dalam mod ESI negatif. Data diperoleh, dianalisis dan diproses menggunakan perisian Waters Mass Lynx 4.1 (Waters MS Technologies, Manchester, UK).

3.6. Ujian Pemusnahan Radikal DPPH luar talian. Jumlah aktiviti antioksidan ekstrak tumbuhan telah dinilai menggunakan ujian DPPH radikal-scavenging luar talian. Larutan sampel (2 mL) pada pelbagai kepekatan dicampur dengan 2 mL larutan DPPH 1 × 10−4 mol/L (dalam metanol). Semua sampel digoncang dan dibiarkan berdiri dalam gelap pada suhu bilik selama 60 minit. Pengurangan radikal bebas DPPH diukur dengan membaca penyerapan pada 517 nm terhadap kosong (metanol tanpa sampel) pada pembaca ELISA (TECAN, Growing, Austria). Metanol (2 mL) sahaja digunakan sebagai kawalan eksperimen ini. Trolox dan asid L-askorbik digunakan sebagai kawalan positif. Aktiviti penghapusan radikal (perencatan peratus) sampel yang diuji, yang dinyatakan sebagai peratusan penghapusan DPPH, dikira menggunakan formula berikut: perencatan peratus=[(Kawalan − Sampel)/Akawalan] × 100. Jumlah aktiviti antioksidan dikira dengan merancang peratus perencatan terhadap kepekatan sampel dan diwakili sebagai kepekatan sampel yang diperlukan untuk menghilangkan 50 peratus daripada radikal DPPH (IC50). Semua ujian telah dijalankan dalam tiga kali ganda, dan nilai IC50 dilaporkan sebagai min ± SD.

3.7. UPLC-PDA Digandingkan dengan Ujian DPPH Pra-Lajur. Dalam kajian ini, selepas 2 mL larutan DPPH (3 × 10−3 mol/L) dan 1 mL larutan sampel (12 mg/mL) bahagian berlainan C. deserticola yang ditanam dicampurkan, UPLC-PDA telah digunakan untuk melanjutkan menyaring profil antioksidan dan mengenal pasti komponen antioksidan dengan mengesan perubahan pada puncak ciri larutan sampel sebelum dan selepas tindak balas penghapusan radikal bebas DPPH. Bagi setiap bahagian tumbuhan yang berbeza, 10 µL aliquot larutan sampel sebelum dan selepas ujian DPPH disuntik secara berasingan ke dalam sistem UPLC di bawah keadaan yang sama seperti yang diterangkan dalam Bahagian 3.4. Selepas larutan sampel dicampur dengan larutan DPPH, perubahan dalam puncak ciri larutan sampel telah dikesan pada 330 nm.

3.8. Analisis data. Data analisis dinyatakan sebagai min ± sisihan piawai (SD) bagi pengukuran bebas tiga kali ganda. Analisis korelasi bivariat dilakukan untuk mengkaji hubungan antara jumlah kandungan PhG dan aktiviti antioksidan dengan menentukan pekali korelasi Pearson (r) menggunakan IBM SPPS Statistics (Versi 19; International Business Machines Corp., New York, NY, USA). Nilai IC50 juga dikira dengan analisis probit menggunakan SPPS Statistics 19. Kadar penghapusan radikal bebas DPPH dan jumlah kandungan PhG telah diplot menggunakan OriginPro 8.5.1 (Origin Lab Corp., Northampton, MA, USA). Regresi kuasa dua terkecil separa (PLS) ditentukan menggunakan perisian SIMCA-P plus (Versi 13.0, Umetrics, Umea, Sweden).

4. Kesimpulan

Bahagian berlainan C. deserticola yang ditanam, ubat herba yang digunakan secara meluas, telah disiasat untuk kualitinya. Pertama, cap jari ciri enam bahagian yang berbeza ditanamCistanchedeserticolasampel dijana dan dinilai menggunakan SES dan analisis serentak kandungan enam sebatian penanda. Kedua, mengukur enam sebatian utama menggunakan UPLC menunjukkan ciri taburan sebatian ini dalam bahagian yang berbeza. Walau bagaimanapun, hasilnya tidak boleh dikaitkan secara langsung dengan aktiviti perubatan herba. Oleh itu, kaedah yang lebih baik untuk menentukan secara serentak kualiti dan aktiviti sampel C. deserticola yang ditanam adalah perlu. Pertama, kami menggunakan ujian penghapusan radikal DPPH luar talian untuk menilai aktiviti antioksidan yang ditanamCistanchedeserticolaekstrak dan mendapati aktiviti tertinggi dalam ekstrak batang. Tambahan pula, UPLC-PDA ditambah dengan ujian DPPH pra-lajur digunakan untuk menyaring dan menilai antioksidan dalam tanaman yang ditanam.Cistanchedeserticolaekstrak batang. Kaedah ini bukan sahaja memberikan lebih banyak maklumat kimia tetapi juga memberikan beberapa maklumat antioksidan yang boleh digunakan untuk mengenal pasti dan menilai ubat-ubatan herba. Kedua, komponen aktif dalam ekstrak batang telah diasingkan dan dikenal pasti menggunakan UPLC-PAD-QTOF/MSuntuk mengesahkan bilangan dan kedudukan kumpulan substituen dan untuk meningkatkan ketepatan analisis struktur. Akhirnya, hubungan antara komponen kimia dan aktiviti antioksidan in vitro telah diwujudkan dan disahkan menggunakan model PLS.

Kesimpulannya, buat pertama kalinya, kami telah membandingkan profil komposisi kimia dan aktiviti antioksidan bahagian berlainan sampel C. deserticola yang ditanam. Penemuan ini sangat menarik kerana pengagihan sebatian PhG, kandungan PhG dan sumbangannya kepada antioksidan bahagian berlainan sampel C. deserticola yang ditanam belum dilaporkan sehingga kajian ini. Tambahan pula, analisis PLS mula-mula ditubuhkan untuk memberi pemahaman awal tentang enam sumbangan individu PhG kepada aktiviti antioksidan. Pendekatan ini mungkin memberi kita beberapa pandangan baharu tentang penilaian kualiti menyeluruh C. deserticola yang ditanam. Akhir sekali, kerja ini mewakili laporan pertama korelasi yang kukuh antara aktiviti penghapusan radikal DPPH dan jumlah kandungan PhG bahagian berbeza daripada C. deserticola yang ditanam (r=0.92). Di antara bahagian yang berbeza ini, batang didapati kaya dengan PhG dan mempunyai aktiviti antioksidan yang kuat. Khususnya, bahagian buangan C. deserticola yang ditanam juga mengandungi beberapa sebatian bioaktif dan mungkin digunakan sebagai tambahan pemakanan alternatif. Kami berharap bahawa hasilnya akan memberikan maklumat yang berguna untuk kegunaan masa depan C. deserticola yang ditanam. Untuk pengetahuan terbaik kami, ini adalah laporan pertama tentang pengenalpastian pantas dan kuantifikasi antioksidan semula jadi di bahagian yang berlainan di tanam.Cistanchedeserticolamenggunakan UPLC-PAD-QTOF/MS, kaedah DPPH luar talian dan kaedah UPLC-PAD-pra-lajurDPPH. Mengikut keputusan kami, kaedah yang dibangunkan di sini boleh menyediakan alat yang berkuasa dan bermakna untuk kawalan kualiti komprehensif ubat-ubatan herba kompleks. Di negara kita, di bawah bimbingan inisiatif "One Belt, One Road", tanaman tradisional dengan manfaat kesihatan ini boleh digunakan untuk mereka bentuk produk baharu dengan aplikasi di seluruh dunia.

Ucapan terima kasih

Penulis mengucapkan terima kasih atas sokongan kewangan Chinese Academy of Medical Sciences (CAMS) Innovation Fund for Medical Sciences (CIFMS) (No. 2016-I2M-1-012) dan NationalNatural Science Foundation of China (No. 31570344).

Sumbangan Pengarang

Yue Shi dan Xiaoming Wang mengambil bahagian dalam reka bentuk penyelidikan. Xiaoming Wang, Jinfang Wang, Huanyu Guan, Rong Xu, Xiaomei Luo, Meifeng Su, Xiaoyan Chang, Wenting Tan dan Jun Chen bertanggungjawab untuk melaksanakan eksperimen. Yue Shi, Xiaoming Wang, dan Jinfang Wang melakukan analisis data. Yue Shi dan Xiaoming Wang menyumbang kepada penulisan dan penyuntingan manuskrip. Konflik Kepentingan: Pengarang mengisytiharkan tiada konflik kepentingan.

Rujukan

Wang, T.; Zhang, X.; Xie, W. Cistanche deserticola YC Ma, "Ginseng Gurun": Satu Tinjauan. Am. J. Chin. Med. 2012, 40, 1123–1141. [CrossRef] [PubMed]

2. Li, Z.; Lin, H.; Gu, L.; Gao, J.; Tzeng, C. Herba Cistanche (Rou Cong-Rong): Salah satu Hadiah Farmaseutikal Terbaik Perubatan Tradisional Cina. Depan. Pharmacol. 2016, 7, 41. [CrossRef] [PubMed]

3. Gu, C.; Yang, X.; Huang, L. Cistanches Herba: Kajian Neurofarmakologi. Depan. Pharmacol. 2016, 7, 289. [CrossRef] [PubMed]

4. Xu, X.; Zhang, Z.; Wang, W.; Yao, H.; Ma, X. Kesan Terapeutik Cistanoside A pada Metabolisme Tulang Tikus Ovariectomized. Molekul 2017, 22, 197. [CrossRef] [PubMed]

5. Wang, D.; Wang, H.; Gu, L. Aktiviti Penambahbaikan Antidepresan dan Kognitif dari Cistanche Herba Tradisional Cina. Pelengkap Berasaskan Evid. Altern. Med. 2017, 2017, 1–9. [CrossRef] [PubMed]

6. Xue, Z.; Yang, B. Phenylethanoid Glycosides: Penyelidikan Kemajuan dalam Fitokimia, Aktiviti Farmakologi dan Farmakokinetiknya. Molekul 2016, 21, 991. [CrossRef] [PubMed]

7. Jiang, Y.; Tu, P. Analisis juzuk kimia dalam spesies Cistanche. J. Chromatogr. A 2009, 1216, 1970–1979. [CrossRef] [PubMed]

8. Xiong, Q.; Kadota, S.; Tani, T. Kesan antioksidan feniletanoid daripada Cistanche deserticola. biol. Pharm. lembu jantan. 1996, 19, 1580–1585. [CrossRef] [PubMed]

9. Ma, Z.; Yang, Z.; Bibir.; Li, C. Penentuan Serentak Lapan Phenylethanoid Glycosides dalam Spesies Berbeza Genus Cistanche oleh Kromatografi Cecair Berprestasi Tinggi. J. Liq. Chromatogr. Relat. Technol. 2008, 31, 2838–2850. [CrossRef]

10. Jiang, Y.; Li, SP; Wang, YT; Chen, XJ; Tu, PF Pembezaan Herba Cistanches dengan cap jari dengan kromatografi cecair berprestasi tinggi-diod array pengesanan-spektrometri jisim. J. Chromatogr. 2009, 1216, 2156–2162. [CrossRef] [PubMed]

11. Lu, D.; Zhang, J.; Yang, Z.; Liu, H.; Li, S.; Wu, B.; Ma, Z. Analisis kuantitatif Cistanches Herba menggunakan kromatografi cecair berprestasi tinggi ditambah dengan pengesanan tatasusunan diod dan spektrometri jisim resolusi tinggi digabungkan dengan kaedah kemometrik. J. Sep. Sci. 2013, 36, 1945–1952. [CrossRef] [PubMed]

12. Lagu, Q.; Li, J.; Liu, X.; Zhang, Y.; Guo, L.; Jiang, Y.; Lagu, Y.; Tu, P. Sempang dalam talian buatan sendiri bagi pengekstrakan cecair bertekanan, kromatografi aliran gelora dan kromatografi cecair berprestasi tinggi, Cistanche deserticola sebagai kajian kes. J. Chromatogr. 2016, 1438, 189–197. [CrossRef] [PubMed]

13. Han, L.; Boakye-yiadom, M.; Liu, E.; Zhang, Y.; Li, W. Pencirian Struktur dan Pengenalpastian Glikosida Phenylethanoid daripada Cistanches deserticola YC Ma oleh UHPLC/ESI–QTOF–MS/MS. Phytochem. dubur. 2012, 23, 668–676. [CrossRef] [PubMed]

14. Zheng, S.; Jiang, X.; Wu, L.; Wang, Z.; Huang, L. Diskriminasi Kimia dan Genetik Herba Cistanches Berdasarkan UPLC-QTOF/MS dan DNA Barcoding. PLoS ONE 2014, 9, 1–11. [CrossRef] [PubMed]

15. Lagu, Y.; Lagu, Q.; Li, J.; Zhang, N.; Zhao, Y.; Liu, X.; Jiang, Y.; Tu, P. Strategi bersepadu untuk membezakan chamomile secara kuantitatif antara Cistanche deserticola dan C. tubulosa menggunakan kromatografi cecair berprestasi tinggi-hibrid triple quadrupole-linear ion trap spektrometri jisim. J. Chromatogr. 2016, 1429, 238–247. [CrossRef] [PubMed]

16. Niu, Y.; Yin, L.; Luo, S.; Dong, J.; Wang, H.; Hashi, Y.; Chen, S. Pengenalpastian Anti-oksidan dalam Flos Chrysanthemi oleh HPLC-DAD-ESI/MSN dan HPLC Digandingkan dengan Sistem Derivatisasi Pasca-lajur. Phytochem. dubur. 2013, 24, 59–68. [CrossRef] [PubMed]

17. Chen, LX; Hu, DJ; Lam, SC; Ge, L.; Wu, D.; Zhao, J.; Panjang, ZR; Yang, WJ; Kipas, B.; Li, SP Perbandingan aktiviti antioksidan bahagian yang berbeza daripada kekwa salji (Coreopsis tinctoria Nutt.) dan pengenalpastian antioksidan semulajadi mereka menggunakan kromatografi cecair berprestasi tinggi ditambah dengan pengesanan tatasusunan diod dan spektrometri jisim dan 2,20 -azinobis({ {4}}asid ethylbenzthiazoline-sulfonik) ujian berasaskan garam diamonium. J. Chromatogr. 2016, 1428, 134–142. [PubMed]

18. Fu, M.; Xu, Y.; Chen, Y.; Wu, J.; Yu, Y.; Zou, B.; An, K.; Xiao, G. Penilaian flavonoid bioaktif dan aktiviti antioksidan dalam Pericarpium Citri Reticulate (Citrus reticulata "Chachi") semasa penyimpanan. Kimia Makanan. 2017, 230, 649–656. [CrossRef] [PubMed]

19. Zhang, X.; Xu, M.; Zhang, J.; Wu, L.; Liu, J.; Si, J. Pengenalpastian dan penilaian komponen antioksidan dalam bunga lima spesies Chimonanthus. Tanaman Ind. Prod. 2017, 102, 164–172. [CrossRef]

20. Yang, J.; Hu, J.; Rena, K.; Ka, S.; Du, N. Hubungan struktur-aktiviti glikosida phenylethanoid dalam tumbuhan Cistanche salsa pada aktiviti antioksida. J. Chin. Med. Mater. 2009, 32, 1067–1069.

21. Beliau, W.; Fang, T.; Tu, P. Kemajuan penyelidikan mengenai aktiviti farmakologi echinacoside. China J. Chin. Mater. Med. 2009, 34, 476–479.

22. Li, Y.; Chen, J.; Li, Y.; Li, P. Pengenalpastian dan kuantifikasi pemusnah radikal bebas dalam tunas bunga spesies Lonicera oleh ujian HPLC-DPPH dalam talian ditambah dengan spektrometri jisim tandem pengionan elektrospray empat kali ganda masa penerbangan. Berbiomed. Chromatogr. 2012, 26, 449–457. [CrossRef] [PubMed]

23. Yao, H.; Chen, Y.; Shi, P.; Hu, J.; Li, S.; Huang, L.; Lin, J.; Lin, X. Saringan dan analisis kuantitatif antioksidan dalam buah Livistona Chinensis R. Br menggunakan HPLC-DAD-ESI MS ditambah dengan ujian DPPH pra-lajur. Kimia Makanan. 2012, 135, 2802–2807. [CrossRef] [PubMed]

24. Wang, Y.; Hao, H.; Wang, G.; Tu, P.; Jiang, Y.; Liang, Y.; Dai, L.; Yang, H.; Lai, L.; Zheng, C.; et al. Pendekatan untuk mengenal pasti metabolit berjujukan glikosida phenylethanoid biasa, echinacoside, berdasarkan masa perangkap-ion kromatografi cecair analisis spektrometri jisim penerbangan. Talanta 2009, 80, 572–580. [CrossRef] [PubMed]

25. Qi, M.; Xiong, A.; Bibir.; Yang, Q.; Yang, L.; Wang, Z. Pengenalpastian acteoside dan metabolit utamanya dalam air kencing tikus oleh kromatografi cecair berprestasi ultra digabungkan dengan spektrometri jisim tandem pengionan elektrospray empat kali ganda masa penerbangan. J. Chromatogr. B 2013, 940, 77–85. [CrossRef] [PubMed]

26. Li, W.; Matahari, X.; Lagu, H.; Ding, J.; Bai, J.; Chen, Q. Pengenalpastian Berasaskan HPLC/Q-TOF-MS Konstituen yang Diserap dan Metabolitnya dalam Serum Tikus dan Urin selepas Pentadbiran Lisan Ekstrak Cistanche deserticola. J. Sains Makanan. 2015, 80, H2079–H2087. [CrossRef] [PubMed]

27. Li, Y.; Zhou, G.; Xing, S.; Xing, S.; Tu, P.; Li, X. Pengenalpastian Metabolit Echinacoside yang Dihasilkan oleh Bakteria Usus Manusia Menggunakan Kromatografi Cecair Berprestasi Ultra-Spektrometri Jisim Masa Penerbangan Kuadrupol. J. Agric. Makanan. Kimia. 2015, 63, 6764–6771. [CrossRef] [PubMed]