BAHAGIAN 1 Aktiviti Anti-Osteoporotik Perubatan Tradisional Cina Cistanche Deserticola Pada Metabolisme Tulang Tikus Ovariectomized Melalui RANKL/RANK/TRAF6- Laluan Pengantaraan Isyarat

Bo Zhang 1†, Ling-Ling Yang 1†, Shu-Qin Ding 1†, Jing-Jing Liu 1, Yan-Hong Dong 1,

Yan-Ting Li 1, Nan Li 1, Xiao-Jun Zhao 1, Chang-Ling Hu 2, Yiping Jiang 3* dan Xue-Qin Ma 1*

1 Makmal Utama Pemodenan Perubatan Etnik Hui, Jabatan Analisis Farmaseutikal, Kementerian Pendidikan, Pusat Pengajian Farmasi, Universiti Perubatan Ningxia, Yinchuan, China, 2 Makmal untuk Makanan Fungsian dan Kesihatan Manusia, Pusat Kecemerlangan dalam Teknologi Selepas Tuai, North Carolina Kampus Penyelidikan, North Caroline A&T State University, Greensboro, NC, Amerika Syarikat, 3 Jabatan Farmakognosi, Universiti Perubatan Tentera Kedua, Shanghai, China

cistancheboleh merawatosteoporosis

Memandangkan keterbatasan agen terapeutik sedia ada untuk rawatan osteoporosis selepas menopaus, masih terdapat keperluan untuk lebih banyak pilihan dengan kedua-dua keberkesanan dan kesan buruk yang lebih sedikit.Cistanche deserticolaYC Ma dikenali sebagai herba tonik popular yang digunakan secara tradisional untuk merawat kekurangan tenaga buah pinggang termasuk kelemahan otot di kawasan minoriti di daerah Asia. Berdasarkan teori "tulang mendominasi buah pinggang," model tikus ovariectomized (OVX) osteoporosis selepas menopaus digunakan untuk menilai kesan terapeutikC. deserticolaekstrak (CDE) pada kehilangan tulang. Empat puluh lapan ekor tikus Sprague-Dawley betina, berumur kira-kira 12 minggu, ditugaskan secara rawak kepada enam kumpulan termasuk kumpulan palsu yang ditadbir secara lisan dengan 0.5 peratus carboxymethyl cellulose sodium (CMC-Na) (sham), kumpulan positif dirawat dengan 1 mg/kg estradiol valerate (EV), kumpulan dos rendah, sederhana dan tinggi yang ditadbir secara lisan dengan 200, 400, dan 800 mg/ kg/hari CDE, masing-masing. Selepas 3 bulan campur tangan berterusan, CDE mempamerkan aktiviti anti-osteoporotik yang ketara yang dibuktikan oleh jumlah ketumpatan mineral tulang yang dipertingkatkan, seni bina mikro tulang yang diperbaiki; peningkatan aktiviti alkali fosfatase; menurunkan tahap deoxypyridinoline, cathepsin K, fosfatase asid tahan tartrat, dan malondialdehid; manakala berat badan, rahim dan vagina dalam tikus OVX tidak dipengaruhi oleh campur tangan CDE. Di samping itu, fenomena yang kelihatan bercanggah pada tahap kalsium dan fosforus antara OVX dan tikus palsu telah diperhatikan dan dijelaskan. Secara mekanis, CDE menurunkan secara ketara tahap TRAF6, RANKL, RANK, NF-κB, IKK , NFAT2 dan mengawal selia phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K), AKT, osteoprotegerin dan ekspresi c-Fos, yang tersirat CDE boleh menyekat pengaktifan RANKL/ RANK yang disebabkan oleh laluan NF-κB dan PI3K/AKT hiliran, dan akhirnya, menghalang aktiviti protein osteoklastogenik utama NFAT2 dan c-Fos. Semua data yang dicadangkan CDE mempunyai potensi aktiviti anti-osteoporotik dan kesan ini, sekurang-kurangnya sebahagiannya, terlibat dalam modulasi RANKL/RANK/TRAF6-pengantara isyarat NF-κB dan PI3K/AKT serta c- Tahap Fos dan NFAT2. Oleh itu, CDE mungkin mewakili calon ubat yang menjanjikan untuk rawatan osteoporosis selepas menopaus.

Kata kunci:Cistanche deserticola, antiosteoporotik, TRAF6, RANKL, PANGKAT

Untuk maklumat lanjut sila hubungi:Joanna.jia@wecistanche.com

Cistanche deserticola mempunyai banyak kesan, klik di sini untuk mengetahui lebih lanjut

PENGENALAN

Oleh kerana osteoporosis tidak dianggap sebagai sebahagian daripada penuaan biasa, kemajuan meluas dalam bidang osteoporosis telah diperolehi. Hari ini, osteoporosis telah menjadi bahaya kesihatan utama yang menimpa lebih daripada 200 juta penduduk di seluruh dunia dengan atendan 10 bilion dolar dibelanjakan setiap tahun untuk individu ini (Ma et al., 2015). Osteoporosis, termasuk osteoporosis selepas menopaus dan nyanyuk, dicirikan oleh kemerosotan seni bina mikro dan ketumpatan jisim tulang yang rendah (BMD) akibat daripada ketidakseimbangan antara pembentukan tulang pengantara osteoblas dan penyerapan tulang pengantara osteoklas, masing-masing (Kanis et al., 2015). ). Dengan mengambil kira batasan pilihan terapeutik semasa dan beberapa kesan buruk agen sintetik yang tidak diingini (Ye et al., 2015) untuk rawatan penyakit osteoporosis, adalah perlu untuk alternatif dengan kedua-dua keberkesanan dan kesan sampingan yang minimum (Tan et al., 2017). Sebagai cara terapi pelengkap dan alternatif yang luar biasa untuk rawatan pelbagai penyakit termasuk osteoporosis selepas menopaus, herba perubatan semulajadi terutamanya ubat-ubatan tradisional Cina (TCM) telah diiktiraf secara beransur-ansur dan sangat dijamin (Czerwinska dan Melzig, 2018; Ma et al., 2018). Dua ribu tahun yang lalu,Cistanche deserticolaYC Ma didapati bermanfaat untuk kesihatan manusia dan direkodkan dalam buku perubatan klasik Cina bernama Shen Nong Herbal (Anonymous, 1981). Kini, ia adalah TCM penting yang direkodkan secara rasmi dalam farmakope Cina (Chinese and Pharmacopoeia, 2015) dan juga sebagai herba tonik terkenal yang telah digunakan di daerah Asia termasuk China dan Jepun selama berabad-abad (Wong et al., 2006) .C. deserticoladidapati mempunyai profil keselamatan yang menggalakkan (Liao et al., 2018) dan fungsi perubatan yang luas: dalam masyarakat, ia digunakan secara meluas untuk memasak dengan pelbagai jenis masakan herba untuk rawatan kekurangan buah pinggang, kelemahan otot, dan kelemahan pinggang. ; pada masa kini, perhatian yang semakin meningkat telah dibayar untuk pelbagai fungsi farmakologinya termasuk anti-radang, anti-keletihan, antitumor, aktiviti antioksidan, meningkatkan imuniti, dan sebagainya (Gu et al., 2016; Fu et al., 2018). Ia juga terkenal sebagai "ginseng padang pasir" di China kerana kesan kuratif perubatan klinikal yang sangat baik. Kedua-dua aplikasi tradisional dan modenC. deserticolamenjadikan herba ini popular dalam kedua-dua perubatan dan industri makanan kesihatan, dengan itu telah dibangunkan menjadi cecair perubatan dan pemakanan yang diluluskan oleh Pentadbiran Makanan dan Ubat-ubatan Negeri. DiberiC. deserticolabiasanya digunakan untuk menangani kekurangan buah pinggang dalam perubatan rakyat Cina, yang membayangkan herba perubatan yang boleh dimakan ini boleh dianggap sebagai agen alternatif yang menjanjikan untuk campur tangan osteoporosis berdasarkan teori "tulang mendominasi buah pinggang" (Wang et al., 2016). Data yang diterbitkan telah membuktikan kesan anti-osteoporotik ekstrak C. deserticola dalam vivo dan in vitro (Liang et al., 2011; Li et al., 2012; Liang et al., 2013; Xu et al., 2017; Song et al., 2018), dan beberapa sebatian terpencil termasuk echinacoside (Li et al., 2013), acteoside (Lee et al., 2013), dan cistanoside A (Xu et al., 2017) yang juga telah dilaporkan memproses anti -aktiviti osteoporosis; dan sebatian lain seperti 2'-acetylacteoside telah disahkan mempunyai antioksidan, anti-radang, neuroprotektif, hepatoprotektif, meningkatkan imun (Li et al., 2016), dan potensi anti-penuaan (Peng et al., 2016). Sehingga kini, berpuluh-puluh glikosida phenylethanoid bioaktif telah dikenal pasti daripadaHerba cistanche(Wang et al., 2012), echinacoside, dan acteoside ialah sebatian utama yang wujud dalam kebanyakan spesies Cistanche dengan kandungannya ialah 1.83–41.49 dan 0.27–8.28 mg/kg , masing-masing; manakala glikosida fenilethanoid yang lain termasuk 2'-asetilakteosida, 6'-asetilakteosida, cistanoside A, cistanosida C, dan isoacteoside ialah 1.56–3.16 mg/g, 0.49–1.66 mg/kg, 1.41–1{{ 29}}.11 mg/kg, 0.33–2.24 mg/kg, dan 0.08–5.00 mg/ kg, masing-masing (Dong et al., 2018). Berdasarkan data yang diterbitkan di atas, kami mendapati bahawa mekanisme molekul anti-osteoporotik yang mendasariC. deserticolaterutamanya isyarat hulu masih tidak jelas; dan sebatian itu sendiri tidak boleh mewakili kesan herba yang mengandungi sifat sinergi yang disumbangkan oleh pelbagai jenis komponen; tambahan pula, sasaran khusus laluan isyarat adalah sama sekali berbeza antara komponen yang berbeza. Kerja semasa bertujuan untuk menyiasat potensi kesan perlindunganC. deserticolaterhadap tikus ovariectomized (OVX) in vivo dengan penekanan pada pengawalseliaan faktor nekrosis tumor faktor berkaitan reseptor 6 (TRAF6), pengaktif reseptor ligan kappa B faktor nuklear (RANKL), ekspresi RANK dan RANKL/RANK/TRAF{{3} } faktor nuklear teraruh kappa B (NF-κB), dan isyarat phosphoinositide 3-kinase (PI3K)/protein kinase (AKT). Pengubahsuaian tulang, termasuk pembinaan semula dan pembaikan, adalah proses rumit yang dikawal oleh keseimbangan antara pembentukan tulang osteoblastik dan penyerapan tulang osteoklastik, dan peningkatan penyerapan tulang terutamanya disebabkan oleh osteoklastogenesis yang dipertingkatkan biasanya membawa kepada osteoporosis malah patah tulang. Kebanyakan isyarat sel, hormon, dan faktor pertumbuhan yang penting untuk pembezaan dan fungsi osteoklas dikawal oleh RANK dan dua ligannya, RANKL dan osteoprotegerin (OPG) (Lacey et al., 1998). Dan penemuan terbaru mendapati TRAF6 adalah faktor pengawalseliaan utama dalam lata isyarat yang dicetuskan RANKL/RANK (Tan et al., 2017). Dengan pengambilan TRAF6, RANKL terikat kepada RANK reseptornya, dan kemudian lata isyarat hiliran termasuk NF-κB dan PI3K/AKT telah dicetuskan, kemudian protein osteoklastogenik utama c-Fos dan faktor nuklear sel T diaktifkan c2 (NFAT2) ( Takayanagi, 2007) telah dikawal selia, dan akhirnya, pembezaan osteoklas telah dimulakan. Dalam kajian ini, mekanisme anti-osteoporotik CDE yang mendasari pada RANKL/RANK/TRAF{19}}pengantara penyerapan tulang disiasat dan dibincangkan.

BAHAN DAN KAEDAH

Haiwan, Sel, Antibodi dan Reagen

Tikus Sprague-Dawley dewasa betina (Universiti Perubatan Ningxia, Yinchuan, China); RAW264.7 sel (Zhong Qiao Xin Zhou Biotechnology Co., Ltd., Shanghai, China); faktor perangsang koloni makrofaj (M-CSF) dan RANKL (PerroTech, Inc. USA); estradiol valerate [estradiol valerate (EV), Delpharm Lille SAS, Paris, Perancis]; cathepsin K (CK) kit ELISA (BioVision, Amerika); deoxypyridinoline (DPD) dan bone gla-protein (BGP) pautan silang kit ELISA (Xinyu Biological Engineering Co., Ltd, Shanghai, China); kit reagen malondialdehid (MDA), glutation (GSH), dan superoxide dismutase (SOD) (Jianchen Biological Engineering, Nanjing, China); penisilin dan streptomisin (Gibco, Amerika Syarikat); membran polivinilidena fluorida (PVDF) (Millipore Life Sciences, USA); antibodi primer termasuk GAPDH (18AF0401), -actin (17AV0411), IκB kinase (IKK ) (AD01134589), TRAF6 (2), RANKL (GR3193842-5), RANK (AA02113656), NFκBIA (AH04138226), AC09021266), OPG (AG06292776), c-Fos (AG12059411), AKT (AF05173234), NFAT2 (AO11015648), dan antibodi sekunder (horseradish peroxidase-conjugated goat anti-arnab immunoglobulin G5S813) telah ditawarkan oleh Z5S813BI46G, 13BII. , China); Medium helang yang diubah suai (DMEM), kit ujian kuantisasi protein asid bicinchoninic, serum lembu janin (FBS), dan garam penimbal fosfat Dulbecco (PBS) telah dibeli daripada Hylcone (Logan, UT, Amerika Syarikat); echinacoside [kromatografi cecair prestasi tinggi (HPLC) Lebih besar daripada atau sama dengan 98 peratus , 11167-200503, Institut Kawalan Makanan dan Dadah Negara, China]; acteoside (HPLC Lebih besar daripada atau sama dengan 98 peratus , AB0497, ALFA, China); isoacteoside (HPLC Lebih besar daripada atau sama dengan 98 peratus , AB17021202, ALFA, China); 2'-acetyl acteoside (HPLC Lebih besar daripada atau sama dengan 98 peratus , PRF7081243, Chengdu Pu Rui Fa Technology, Co., Ltd. China); cistanoside A, cistanoside C, dan 6'-acetyl acteoside (HPLC Lebih besar daripada atau sama dengan 95 peratus , diasingkan dan disucikan dalam makmal kami) (Xu et al., 2017).

Bahan dan Penyediaan Tumbuhan

Batang kering daripadaC. deserticolaYC Ma telah dibeli dari Daerah Yongning, wilayah Ningxia pada 2 September015, koordinat khusus pemilihan tumbuhan ialah (106.026597, 38.262816). Herba itu dikenal pasti oleh Prof. Ling Dong (jabatan farmakognosi, Universiti Perubatan Ningxia), dengan spesimen baucar (#20150901) boleh didapati dalam herbarium analisis farmaseutikal. Sebanyak 10.0 kg kering dan serbukC. deserticolatelah diekstrak dengan menggunakan kaedah refluks haba, prosedur terperinci adalah seperti berikut: pelarut adalah 75 peratus etanol, nisbahC. deserticolabahan kepada pelarut adalah 1:8, masa refluks telah berlangsung 2 jam, dan bahan-bahan refluks selama tiga kali; kemudian semua turasan dicampurkan bersama dan dipekatkan di bawah keadaan tekanan yang dikurangkan untuk menghasilkan 6.5 kgC. deserticolaekstrak etanol (CDE). Untuk percubaan haiwan, {{0}}.5 peratus natrium karboksimetil selulosa (CMC-Na) telah digunakan untuk menggantung CDE, dan dos yang diberikan secara lisan ditetapkan sebagai 200, 400, dan 800 mg/kg/hari, dengan isipadu 1 ml/100 g berat badan setiap haiwan; untuk analisis western blot, dimetil sulfoksida digunakan untuk melarutkan CDE dan kemudian dicairkan dengan DMEM untuk memperoleh kepekatan akhir 0.01, 0.1 1 mg/ml; untuk analisis HPLC, metanol digunakan untuk melarutkan CDE, diikuti dengan ditapis dan dicairkan dengan fasa mudah alih awal untuk mendapatkan kepekatan yang betul.

Analisis Kromatografi Cecair Berprestasi Tinggi bagiEkstrak Cistanche deserticola

Juzuk kimia utama CDE telah dikenal pasti dengan menggunakan HPLC dengan bahan rujukan yang sepadan. Keadaan kromatografi ditetapkan seperti berikut: Instrumen Agilent 1220 RP-HPLC dengan lajur C18 (4.6 id × 250 mm; 5 μm), fasa mudah alih elusi kecerunan yang kebanyakannya mengandungi air dan asetonitril digunakan untuk mendapatkan puncak yang dipisahkan dengan baik: pelarut A (air yang mengandungi 0.5 peratus asid asetik) dan B (asetonitril): 0–4 min, 85–83 peratus A; 4–10 min, 83–80 peratus A; 10–30 min, 80–75 peratus A; 30–40 min, 75–70 peratus A. Isipadu suntikan sampel ialah 5 ul, suhu dikawal pada 30 darjah, dan pengesanan UV dilakukan pada 333 nm (Dong et al., 2018). Bahan rujukan termasuk echinacoside, acteoside, isoacteoside, cistanoside A, cistanoside C, 2'-acetyl acteoside, dan 6'-acetyl acteoside telah digunakan untuk mengenal pasti puncak yang sepadan.

cistanchebolehanti-apoptosis

Eksperimen Haiwan

Untuk eksperimen haiwan, semua prosedur telah dilakukan mengikut ketat dengan protokol yang diluluskan oleh panduan jawatankuasa penjagaan dan penggunaan haiwan institusi Universiti Perubatan Ningxia (NXMU{{0}}). Empat puluh lapan ekor tikus Sprague-Dawley betina dewasa dengan berat kira-kira 237 ± 25 g telah diperolehi (Universiti Perubatan Ningxia, Yinchuan, China) dan dikekalkan selama 1 minggu dengan diet pelet standard dan air paip di bawah keadaan terkawal alam sekitar. Kemudian, setiap tikus menjalani sama ada anestesia (chloral hydrate, 100 mg/kg, ip) sahaja, sham ovariectomized (sham), atau dua ovari kedua-duanya dikeluarkan dan kemudian secara rawak dibahagikan kepada lima kumpulan: kumpulan model (OVX) ditadbir secara lisan dengan 0.5 peratus CMC-Na; kumpulan positif (EV) dengan 1 mg/kg/hari estradiol valerate; kumpulan dos rendah (CDEL), sederhana (CDEM) dan tinggi (CDEH) dengan 200, 400, dan 800 mg/kg/hari CDE, masing-masing. Eksperimen telah berlangsung selama 12 minggu; berat badan setiap tikus diukur setiap dua minggu dengan dos pentadbiran diselaraskan dengan sewajarnya. Selepas hari terakhir campur tangan, 24 jam air kencing, serum, femora, tibia, dan rahim dikumpulkan dan disimpan pada -80 darjah untuk analisis yang berbeza.

Parameter Biokimia

Tahap serum SOD, GSH, MDA, cathepsin K, BGP, dan DPD urin ditentukan oleh kit reagen yang sepadan, manakala aktiviti asid fosfatase tahan tartrat (TRAP) dinilai mengikut rujukan (Jiao et al., 2009). Aktiviti alkali fosfatase (ALP) dan tahap Ca dan P dianggarkan dengan menggunakan mesin penganalisis automatik (Ciba-Corning 550, USA).

Ketumpatan Mineral Tulang dan Analisis Tomografi Mikrokomputer

Mesin absorptiometri sinar-X dwi-tenaga (Lunar, Amerika Syarikat) digunakan untuk menganggarkan ketumpatan mineral tulang (BMD, g/cm2) femur kanan setiap tikus dengan mod imbasan ditetapkan sebagai haiwan kecil. Kemudian, femur yang sama digunakan untuk menilai imej 3D mikroarkitektur tulang trabekular dengan menggunakan alat pengimbas mikro-CT (GE, Amerika), kawasan yang menarik (ROI) dipilih dengan menetapkan koordinat yang sama dalam plat pertumbuhan femur setiap sampel, parameter mikroarkitektur termasuk kandungan mineral tulang (BMC), kandungan mineral tisu (TMC), ketumpatan mineral tisu (TMD), pemisahan trabekular (Tb. Sp), nombor trabekular (Tb. N), dan ketebalan trabekular ( Tb. Th) diperoleh dengan menganalisis ROI.

Penentuan Western Blot

Osteoklas diinduksi dengan menggunakan sel RAW 264.7 ditambah dengan MCSF (25 ng/ml) dan RANKL (20 ng/ml) (Yang et al., 2019). Selepas 6 hari dirangsang, sel osteoklas matang yang dikenal pasti untuk aktiviti TRAP telah dirawat dengan atau tanpa CDE (0.01, 0.1, dan 1 mg/ml, masing-masing) selama 48 jam, kemudian sel-sel itu dilisiskan oleh penimbal lisis, dan supernatan telah disentrifugasi dan diasingkan dengan elektroforesis gel natrium dodesil sulfat-poliakrilamida 10 peratus dan dipindahkan ke membran PVDF. Membran telah disekat dengan 5 peratus susu tanpa lemak pada suhu ambien selama 1 jam dan kemudian diinkubasi dengan antibodi primer terhadap TRAF6 (1:400), RANKL (1:400), RANK (1:400), IKK (1:400). ), NFκBIA (1:400), OPG (1:400), PI3K (1:400), AKT (1:400), c-Fos (1:400), NFAT2 (1:400), -aktin dan GAPDH (1:1,000). Membran yang sama telah dilucutkan dan disiasat semula dengan antibodi yang sepadan, dikesan oleh Perisian Makmal Imej pada penghujungnya. Setiap eksperimen diulang tiga kali, dengan -actin atau GAPDH sebagai kawalan dalaman.

Analisis statistik

Data percubaan kami, yang diterangkan sebagai min ± SD, telah dianalisis dengan menggunakan analisis varians sehala diikuti oleh ujian Dennett (perisian SPSS 22.0, SPSS, USA), p < {{3} }.05 dianggap sebagai signifikan secara statistik.

cistanchejuga dikenali sebagaipadang pasirGinseng

KEPUTUSAN Kandungan Kimia Utama bagiCistanches deserticola

Ekstrak Dengan menggunakan bahan rujukan yang sepadan, tujuh sebatian glikosida phenylethanoid terutamanya termasuk echinacoside,cistanosideA, acteoside, isoacteoside,cistanosideC, 2'-asetilacteoside,dan 6'-asetilacteosidetelah dikenalpasti wujud dalam ekstrak ini, puncak dan struktur kromatografi yang sepadan ditunjukkan dalam Rajah 1.

Kesan daripadaCistanches deserticolaEkstrak pada Berat Badan, Rahim dan Faraj

Tiada perbezaan yang ketara dalam purata berat badan awal sebelum pembedahan. Walau bagaimanapun, 3 bulan selepas pembedahan ovariectomized, berat badan tikus dalam kumpulan model OVX telah meningkat dengan ketara sebanyak 35.7 peratus , manakala berat basah rahim dan faraj menurun secara mendadak masing-masing sebanyak 91.2 dan 61.8 peratus, berbanding palsu. tikus (p < 0.001).="" cde,="" dengan="" dos="" 200-800="" mg/kg/hari,="" tidak="" menunjukkan="" pengaruh="" ke="" atas="" peningkatan="" berat="" badan="" yang="" ketara="" ini="" dan="" penurunan="" berat="" basah="" rahim="" dan="" faraj,="" seperti="" yang="" ditunjukkan="" oleh="" rajah="" 2.="" walau="" bagaimanapun,="" sama="" sekali="" berbeza="" dengan="" cde,="" 1="" mg/kg/hari="" ev="" mempamerkan="" kesan="" estrogenik="" yang="" ketara,="" yang="" mana="" berat="" badan="" yang="" bertambah="" dan="" berat="" rahim="" dan="" vagina="" yang="" berkurangan="" dalam="" tikus="" ovx="" telah="" diterbalikkan="" dengan="" ketara="" oleh="" ev="">

Kesan daripadaCistanches deserticolaEkstrak pada Ketumpatan Mineral Tulang dan Arkitek Mikro Tulang

Kecenderungan menurun secara intuitif diperhatikan dalam kumpulan OVX dengan BMD ialah {{0}}.158 ± 0.016 g/cm2 berbanding tikus palsu dengan BMD ialah {{10}}.180 ± 0.010 g/cm2 (p < 0.001),="" yang="" membayangkan="" bmd="" tikus="" dalam="" kumpulan="" model="" ovx="" menurun="" kira-kira="" 12.2="" peratus="" selepas="" 12="" minggu="" pembedahan="" ovariectomized="" berbanding="" dengan="" tikus="" palsu.="" seperti="" yang="" ditunjukkan="" oleh="" rajah="" 3,="" kesemua="" tikus="" yang="" dirawat="" cde="" menunjukkan="" peningkatan="" bmd="" sebanyak="" 15.1="" peratus="" (p="">< 0.001),="" 8.1="" peratus="" (p="">< 0.05),="" dan="" 9.2="" peratus="" (p="">< 0.05),="" masing-masing,="" berbanding="" kumpulan="" model="" ovx.="" imej="" 3d="" dan="" keputusan="" kuantitatif="" yang="" sepadan="" bagi="" mikroarkitektur="" tulang="" trabekular="" tikus="" ditunjukkan="" dalam="" rajah="" 4.="" selaras="" dengan="" keputusan="" bmd,="" pengurangan="" ketara="" kawasan="" trabekular="" diperoleh="" dalam="" kumpulan="" model="" ovx="" berbanding="" dengan="" tikus="" palsu.="" walau="" bagaimanapun,="" kemerosotan="" tulang="" trabekular="" sebahagiannya="" diperbaiki="" oleh="" campur="" tangan="" cde,="" kecuali="" tmd="" dan="" tb.="" th,="" parameter="" tulang="" trabekular="" lain="" termasuk="" bmc,="" tmc,="" dan="" tb.="" n="" meningkat="" dengan="" ketara="" dan="" tb.="" sp="" telah="" berkurangan="" dengan="" ketara="" selepas="" rawatan="">

Kesan daripadaCistanches deserticolaEkstrak pada Parameter Biokimia Urin dan Serum

Dua belas minggu selepas operasi ovariectomized, aliran menurun tetapi bukan statistik tahap perkumuhan air kencing Ca telah diperhatikan dalam kumpulan model OVX, seperti yang ditunjukkan oleh Rajah 5, manakala tahap air kencing P dalam tikus kumpulan model OVX telah menurun kira-kira tiga. kali kurang daripada tikus palsu (p < 0.001).="" selepas="" rawatan="" dengan="" cde="" (200-400="" mg/kg/hari)="" selama="" 12="" minggu,="" pengurangan="" serum="" ca="" dan="" p="" telah="" dihalang="" dengan="" ketara="" (p=""><0.05), dan="" penurunan="" tahap="" perkumuhan="" kencing="" p="" juga="" dihalang="" dalam="" semua="" cde="" yang="" dirawat.="" kumpulan="" (p=""><>

Kesan daripadaCistanches deserticolaEkstrak pada Penanda Pembentukan Tulang dan Penyerapan

Mengenai penanda pembentukan tulang ALP dan BGP (Rajah 6), aktiviti ALP, bukan BGP, telah meningkat dengan ketara dalam ketiga-tiga dos CDE (200-800 mg/kg/hari) kumpulan yang dirawat berbanding dengan tikus palsu. Mengenai penanda penyerapan tulang TRAP, DPD, dan cathepsin K (Rajah 7), aktiviti ketiga-tiga penyerapan tulang

penanda telah meningkat dengan ketara kira-kira 20.9~74.8 peratus dalam tikus kumpulan model OVX berbanding dengan tikus palsu; dan dijangka, CDE mempamerkan potensi besar dalam menindas semua indeks ini, yang mana aktiviti cathepsin K telah menurun sebanyak 49.9~66.7 peratus (p < 0.001),="" tahap="" dpd="" ialah="" menurun="" sebanyak="" 22.9~39.3="" peratus="" (p="">< 0.01),="" dan="" sifat="" trap="" telah="" dihalang="" sebanyak="" 20.1~27.6="" peratus="" (p="">< 0.01),="" masing-masing,="" berbanding="" dengan="" tikus="" kumpulan="" model="">

Kesan Ekstrak Cistanches deserticola pada Aktiviti Glutathione dan Superoxide Dismutase serta Kandungan Malondialdehyde

Tidak terdapat perbezaan yang ketara dalam aktiviti SOD dan GSH antara kumpulan OVX dan sham selepas 3 bulan operasi ovariectomized, seperti yang ditunjukkan oleh Rajah 8, manakala kandungan MDA jelas dipertingkatkan dalam tikus OVX.

kumpulan model sebanyak 68.2 peratus berbanding tikus palsu, dan paras MDA yang meningkat ini ditindas dengan ketara oleh dos rendah, sederhana dan tinggi kumpulan dirawat CDE dengan peratusan perencatan ialah 66.1, 44.0 dan 62.8 peratus , masing-masing, berbanding dengan tikus kumpulan model OVX.

Kesan daripadaCistanches deserticolaEkstrak pada Tahap Ekspresi Protein TRAF6, RANKL, RANK, NFκBIA, IKK , PI3K, AKT, OPG, c-Fos dan NFAT2

Seperti yang ditunjukkan oleh Rajah 9, ungkapan TRAF6, RANKL, RANK, IKK, NFκBIA, dan NFAT2 dikawal dengan ketara ke bawah manakala tahap PI3K, AKT, OPG dan c-Fos jelas dikawal selia selepas rawatan dengan CDE berbanding kepada kawalan. Mekanisme hipotesis (Rajah 10) di mana CDE boleh menurunkan tahap RANKL, RANK, dan TRAF6 dan mengawal selia ekspresi OPG, dengan itu kuantiti mengikat RANKL dengan RANK dikurangkan; akibatnya, laluan hiliran termasuk isyarat NF-κB telah ditindas dan PI3K/AKT telah dirangsang, dan lata isyarat ini bersama-sama membawa pengaktifan c-Fos digalakkan dan NFAT2 telah dihalang, dan akhirnya penyerapan tulang osteoklastik telah dihalang. PERBINCANGAN