Tekanan Oksidatif Adalah Salah Satu Prekursor Penting Pelbagai Penyakit Metabolik Bahagian 1

Sila hubungioscar.xiao@wecistanche.comuntuk maklumat lanjut

Abstrak:Tekanan oksidatif adalah salah satu prekursor penting bagi pelbagai penyakit metabolik seperti diabetes, penyakit Parkinson, penyakit kardiovaskular, kanser, dll. Pelbagai laporan saintifik telah menunjukkan bahawa metabolit tumbuhan sekunder memainkan peranan penting dalam mencegah tekanan oksidatif dan kesan berbahayanya. Dalam hal ini, kajian ini telah dirancang untuk menyiasat profil fenolik dan potensi antioksidan dan antidiabetik bagi ekstrak akueus daripada spesies Cistus Turki dengan menggunakan kaedah in vitro. Prosedur simulasi pencernaan in vitro telah digunakan untuk semua ekstrak untuk menganggarkan bioavailabiliti kandungan fenoliknya. Jumlah kandungan fenolik, flavonoid, asid fenolik, dan proanthocyanidin ditentukan untuk semua fasa pencernaan. Di samping itu, perubahan dalam kuantiti flavonoid penanda yang ditetapkan (salidroside, hyperoside, dan quercitrin) dipantau oleh analisis Kromatografi Lapisan Nipis Berprestasi Tinggi (TLC). Potensi aktiviti antioksidan ekstrak telah dikaji dengan pelbagai kaedah untuk mendedahkan profil aktiviti terperinci mereka. Sebaliknya, enzim a-amilase dan a-glukosidase in vitro dan aktiviti penghambatan produk akhir glikasi lanjutan (AGE) ekstrak ditentukan untuk menilai potensi antidiabetik ekstrak. Keputusan menunjukkan bahawa ekstrak akueus yang diperolehi daripada bahagian udara spesies Cistus Turki mempunyai kandungan fenolik yang kaya dan aktiviti antioksidan dan antidiabetik yang kuat; walau bagaimanapun, profil bioaktiviti dan kepekatan flavonoid penanda mereka mungkin terjejas dengan ketara oleh pencernaan manusia. Keputusan menunjukkan bahawa jumlah kandungan fenolik, aktiviti antioksidan, dan perencatan enzim berkaitan diabetes bagi sampel bioavailable adalah lebih rendah daripada sampel tidak tercerna dalam semua ekstrak.

Kata kunci:Spesies Cistus Turki; cistanche tubulosa beneficios;aktiviti antioksidan; cistanche คือ;simulasi pencernaan manusia; HPTLC; kencing manis

1. Pengenalan

Keluarga Cistaceae terdiri daripada pokok renek, dan tumbuhan herba tahunan atau saka dan genus Cistus adalah salah satu ahli yang diedarkan secara meluas dalam keluarga ini. Lebih daripada 50 spesies Cistus diedarkan di seluruh dunia, dan mereka biasanya dipanggil "rockrose"[1]. Penyiasatan in vitro dan in vivo sebelum ini menunjukkan bahawa spesies Cistus mempunyai aktiviti antivirus, antidiabetik, antioksidan, antimikrob dan anti-radang [23]. Sebatian fenolik yang berbeza (asid fenolik, flavonoid, proanthocyanidins) dan terpenes telah diasingkan daripada spesies Cistus, dan faedah terapeutiknya secara amnya dikaitkan dengan komponen ini [4,5].

Di Turki, lima spesies Cistus tumbuh secara semula jadi, iaitu, C. salvifolius L., C. paroiflorus Lam, C.monspeliensis L., C.laurifolius L.dan C.creticus L.[6]. Dalam rekod etnobotani perubatan rakyat Turki, pelbagai organ spesies Cistus sering didokumenkan sebagai ubat. Infusi yang disediakan daripada cawangan C. laurifolius, C. salviifolius, dan C. creticus dimakan secara lisan terhadap diabetes di daerah Edremit (Balkesir) [7]. Air rebusan yang disediakan daripada bunga C.creticus dan C. salviifolius digunakan secara dalaman terhadap ulser peptik di Marmaris (Mugla) [8], manakala rebusan putik bunga C. laurifolius yang belum dibuka digunakan untuk tujuan yang sama. Di Anatolia Barat, rebusan daun C. laurifolius digunakan secara dalaman untuk melawan demam dan sakit perut dan secara luaran, melalui mandi, melawan sakit reumatik [9].

Sila klik di sini untuk mengetahui lebih lanjut

Ia adalah fakta yang terbukti dengan baik bahawa pengagregatan tinggi spesies oksigen reaktif (ROS) mencetuskan tekanan oksidatif, yang merupakan salah satu prekursor penting kepada pelbagai gangguan metabolik seperti kanser, diabetes, masalah kardiovaskular, penyakit Alzheimer, dll. [10] Oleh itu, penggunaan antioksidan telah menjadi pendekatan holistik biasa untuk mencegah atau merawat keadaan sedemikian dalam amalan saintifik semasa. Aktiviti antioksidan ekstrak tumbuhan telah dilaporkan oleh sejumlah besar penyelidik[11-14]. Sebagai pendekatan biasa, potensi antioksidan ekstrak tumbuhan secara amnya ditumpukan kepada kandungan fenoliknya. Sebilangan besar bukti boleh didapati dalam literatur saintifik bahawa spesies Cistus juga kaya dengan profil fenolik dan akhirnya mempunyai tahap aktiviti antioksidan yang cukup besar. Walau bagaimanapun, konsep bioavailabiliti fitokimia ini dalam badan tidak dipertimbangkan dalam kebanyakan kajian ini.

Ia adalah fakta yang diketahui bahawa keadaan saluran gastrousus mempengaruhi sebatian fenolik disebabkan oleh keadaan pH yang berbeza,cistanche dan tongkat ali reddittindakan enzim, dan mikrobiota. Sebaliknya, struktur kimia sebatian fenolik dan matriks tumbuhan juga merupakan faktor penting yang mempengaruhi bioavailabilitinya [15]. Oleh itu, dalam penyiasatan ini, kaedah simulasi pencernaan in vitro telah digunakan untuk semua ekstrak untuk menganggarkan bioavailiti kandungan fenolik. Untuk memantau peralihan, jumlah kandungan fenolik, flavonoid, asid fenolik, dan proanthocyanidin ditentukan dalam semua fasa pencernaan. Selain itu, aktiviti antioksidan ekstrak telah dikaji dengan kaedah spektrofotometri yang berbeza secara mekanikal untuk mendedahkan profil aktiviti komprehensif mereka. Potensi antioksidan semua sampel yang diperolehi melalui proses pencernaan telah disiasat dengan ujian DPPH dan DMPD (pemusnahan radikal bebas), FRAP dan CUPRAC (potensi pengurangan logam), dan TOAC (jumlah kapasiti antioksidan) ujian. Sebelum ini, salidroside, hyperoside, dan quercitrin telah ditentukan sebagai flavonoid penanda spesies Cistus oleh Guzelmeric et al. [16]Oleh itu, penentuan kualitatif dan kuantitatif bagi flavonol glikosida ini telah dijalankan dengan sistem Kromatografi Lapisan Nipis Berprestasi Tinggi dan indeks bioavailabilitinya dianggarkan.

Cistanche boleh meningkatkan imuniti

Diabetes mellitus (DM) adalah gangguan metabolik biasa dan diterangkan oleh penurunan rembesan insulin oleh sel-sel pankreas atau kekurangan tindak balas badan terhadap insulin. Terdapat dua jenis DM: bergantung kepada insulin (Jenis I) dan tidak bergantung kepada insulin (Jenis II) [17]. （berapa banyak cistanche yang perlu diambil） Salah satu strategi rawatan untuk DM Jenis Ⅱ ialah mengawal hiperglikemia selepas makan, yang ditakrifkan sebagai "peningkatan ketara kepekatan gula dalam darah dalam aliran darah selepas makan". Perencatan enzim pencernaan utama, termasuk a-amilase dan o- glucosidase, adalah penting untuk mengawal hiperglikemia selepas makan. (cistanche tubulosa dalam bahasa Cina) Dalam sistem gastrousus, o-amilase mencerna kanji menjadi gula penurun seperti siklodekstrin, laktosa, dan maltosa, dan -glukosidase memecahkan gula ini menjadi glukosa. Oleh itu, perencatan enzim pencernaan dianggap sebagai cara tindakan yang mungkin untuk merawat hiperglikemia selepas makan [18] Sebaliknya, paras glukosa darah yang tinggi boleh mencetuskan pembentukan AGE yang ditakrifkan sebagai "sebatian yang terbentuk akibat tindak balas glikasi enzimatik. (Maillard)antara mengurangkan gula dan protein, asid nukleik dan lipid".Pengumpulan AGE yang tinggi dalam badan boleh menyebabkan banyak komplikasi diabetes, termasuk nefropati, neuropati, retinopati, dsb.[19]. Aminoguanidine, bayangkan dan metformin adalah contoh perencat sintetik untuk AGEs, dan acarbose, miglitol, dan voglibose adalah perencat sintetik untuk enzim pencernaan dan telah digunakan sejak beberapa dekad yang lalu [20,21]. Walau bagaimanapun, ujian klinikal dan eksperimen in vivo menunjukkan kesan sampingan perencat sintetik ini, seperti hepatotoksisiti, kembung perut, kembung perut, meteorisme, anemia, muntah, kegagalan jantung, dll. [21,22]. Disebabkan oleh kesan berbahaya tersebut, pelbagai kajian telah melibatkan potensi perencatan ekstrak tumbuhan pada AGE [23-25]. Telah dilaporkan bahawa fitokimia, terutamanya sebatian fenolik seperti asid fenolik, flavonoid dan proanthocyanidins, menghalang pembentukan AGE dan tindakan enzim yang berkaitan dengan ketara, iaitu x-amilase dan -glucosidase [26-28].

Oleh kerana pengekstrakan air (infusi atau rebusan) adalah teknik penyediaan biasa dalam perubatan tradisional,cistanche beneficioskajian ini dijalankan ke atas ekstrak akueus daripada spesies Cistus Turki sebelum dan selepas simulasi pencernaan gastrousus in vitro. Dalam hal ini, profil fenolik dan potensi antioksidan dan antidiabetik bagi ekstrak akueus dan metabolit penghadamannya telah disiasat secara perbandingan. Menurut tinjauan rujukan, aktiviti perencatan ekstrak Cistus pada AGEs telah dikaji buat kali pertama dalam kajian ini. Di samping itu, analisis kuantitatif flavonoid penanda juga dicapai oleh analisis HPTLC. Teknik simulasi pencernaan in vitro telah digunakan untuk semua ekstrak untuk memantau perubahan dalam kepekatan dan profil aktiviti biologi sebatian fenolik dalam keadaan gastrousus.

2. Keputusan

2.1. Anggaran Kandungan Fenolik Sampel

Menurut keputusan yang ditunjukkan dalam Jadual 1, ekstrak akueus C. saloifolius mempunyai jumlah kandungan flavonoid, fenolik dan asid fenolik yang lebih tinggi daripada spesies lain yang dikaji, manakala sampel ND (tidak dicerna) C.creticus dan C.laurifolius mempunyai proanthocyanidin yang paling tinggi. kandungan. Penurunan paling ketara dikesan dalam jumlah kandungan proanthocyanidins semua ekstrak. Jumlah sampel IN (bioavailable) proanthocyanidin tidak dapat dikesan dalam semua ekstrak akueus. Akibatnya, kandungan fenolik ekstrak akueus terjejas secara negatif oleh prosedur simulasi pencernaan manusia secara in vitro.

Singkatan untuk sampel ialah ND: Tidak tercerna; PG: Postgastri; DALAM: Bioavailable; BAvI: Indeks bioavailabiliti; Keputusan BR dinyatakan sebagai min bagi tiga kali ganda ± sisihan piawai (SD) dan sebagai mg bersamaan asid gallik(GAE) dalam 1 g sampel; Keputusan dinyatakan sebagai min bagi tiga kali ganda ± sisihan piawai (SD) dan sebagai setara mg quercetin (QE) dalam sampel 1 g; D Keputusan dinyatakan sebagai min bagi tiga kali ganda ± sisihan piawai (SD) dan sebagai setara asid kafeik mg (CAE) dalam sampel 1g; " Keputusan dinyatakan sebagai min bagi tiga kali ganda 士 sisihan piawai （SD） dan sebagai setara mg katekin （CE） dalam sampel lg; * Singkatan bagi ekstrak akueus∶CCA untuk C. creticus, CLA untuk C. laurifolius, CMA untuk C. monspeliensis, CPA untuk C.parviflorus, CSA untuk C.salviifolius. Huruf yang berbeza dalam baris yang sama menunjukkan kepentingan (p<>

Seperti yang dibentangkan dalam Jadual 2, kandungan salidroside dan hyperoside dalam ekstrak akueus C. salviifolius secara relatifnya lebih tinggi daripada spesies lain, manakala quercitrin tidak dijumpai. Sebaliknya, quercitrin didapati dalam kepekatan tertinggi dalam semua sampel simulasi ekstrak akueus daripada C. creticus, tetapi kepekatannya berkurangan dengan ketara dalam sampel bioavailable. Selain itu, kromatogram HPTLC dan spektrum UV tindanan rujukan dan bintik-bintik yang sepadan dalam jejak semua ekstrak dibentangkan dalam Rajah 1.

Rajah 1. (A) Tindanan spektrum UV salidroside dan bintik-bintik yang sepadan dalam jejak semua ekstrak. (B) Tindih spektrum UV hyperoside dan bintik-bintik yang sepadan dalam jejak semua ekstrak. (C) Tindih spektrum UV kuersitrin dan bintik-bintik yang sepadan dalam jejak semua ekstrak. (D)Kromatogram HPTLC bagi:1. DAN,2. CCA PG,3. CAIN,4. CLA ND,5.CLA PG,6.CLAIN,7.Tiliroside（Rf ≈0.65）,8.Hyperoside（Bf ≈0.35）,9.Quercitrin（Rf ×{{ 14}}.45）,10.CMA ND,11.CMAPG,12.RANTAI,13.DAN,14. CPA PG,15.CPA IN,16.CSAND,17.CSAPG,18.CSA IN.Fasa mudah alih:EtOAc/CHCh/CHCOOH/HCOOH/H2O(100:25:10:10:10:10:11);Penerbitan : Reagen NPR. Visualisasi: 366 nm.

2.2. Anggaran Aktiviti Antioksidan Sampel

Seperti yang dibentangkan dalam Jadual 3, sampel bioavailable ekstrak Cistus mempamerkan aktiviti antioksidan penghapusan radikal yang lebih lemah daripada rakan sejawatannya yang tidak dicerna dan selepas gastrik. Sampel ND dan PG bagi semua ekstrak akueus menunjukkan aktiviti penghapusan radikal DPPH yang ketara dan mempunyai nilai ECso yang lebih rendah daripada BHT sebatian rujukan (nilai ECso:5.83±0.2 ug/mL）. Walau bagaimanapun, semua ekstrak menunjukkan penghapusan radikal DMPD yang lebih lemah aktiviti daripada sebatian rujukan Trolox (5.82±0.37 ug/mL).ND, PG dan IN sampel CPA mempunyai aktiviti DMPD yang lebih baik berbanding sampel ekstrak lain.

Sama seperti ujian aktiviti pembersihan radikal, sampel bioavailable ekstrak Cistus juga menunjukkan aktiviti pengurangan logam dan jumlah antioksidan yang lebih lemah daripada sampel tidak tercerna dan selepas gastrik. Semua sampel ND bagi ekstrak menunjukkan aktiviti antioksidan pengurangan ferik yang ketara, yang lebih kuat daripada sebatian rujukan BHT (4.06±0.42mM FeSO4 bersamaan). Antara sampel PG, hanya CSA(44±0.16mM FeSO4 setara) mempunyai aktiviti yang lebih baik daripada BHT. Dalam ujian CUPRAC, sampel ND dan PG CSA dikesan sebagai yang paling kuat di kalangan sampel spesies lain. Secara diskret, sampel IN CCA mempunyai aktiviti CUPRAC yang lebih baik daripada sampel bioavailable ekstrak akueus lain.

2.3.Aktiviti Perencatan Enzim Berkaitan Diabetes

Seperti yang ditunjukkan dalam Jadual 4, aktiviti perencatan enzim bergantung kepekatan dilihat dalam semua ekstrak akueus（herba superman cistanche）. Manakala sampel ND CPA dan CSA(75.89 peratus ±0.62,80.34 peratus ±0.19, masing-masing) menunjukkan aktiviti perencatan -amilase yang agak lebih tinggi daripada acarbose (75.80 peratus ±0.02)pada kepekatan 1 mg/mL; hanya sampel ND CSA yang mempamerkan aktiviti perencatan -glukosidase yang lebih tinggi daripada kuersetin sebatian rujukan dalam kedua-dua kepekatan.

Kesimpulannya, ekstrak akueus C. saloifolius mempamerkan aktiviti perencatan enzim pencernaan yang lebih baik daripada ekstrak spesies lain. Selain itu, sampel IN bagi semua ekstrak akueus menunjukkan aktiviti perencatan enzim yang lebih rendah berbanding sampel ND. 2.4.Aktiviti Perencatan AGEs

Seperti yang dibentangkan dalam Jadual 4, aktiviti perencatan AGE yang bergantung kepada kepekatan diperhatikan dalam semua ekstrak akueus. Sampel ND CCA, CPA dan CSA mempamerkan aktiviti perencatan yang lebih baik daripada kuersetin sebatian rujukan dalam kedua-dua kepekatan 0.5 dan 1 mg/mL. Walau bagaimanapun, hanya ekstrak C.salvifolius menunjukkan aktiviti perencatan yang lebih baik daripada kuersetin di kalangan sampel IN bagi ekstrak. Sampel bioavailable ekstrak akueus menunjukkan aktiviti perencatan AGE yang lebih rendah berbanding sampel yang tidak tercerna. Mengikut keputusan, sampel ND ekstrak akueus C. salvifolius mempunyai aktiviti perencatan AGE tertinggi. Walau bagaimanapun, sampel IN ekstrak akueus C. monspeliensis menunjukkan potensi perencatan AGE yang paling lemah dalam kepekatan yang diuji.

Artikel ini diekstrak daripada Molecules 2021, 26, 5322. https://doi.org/10.3390/molecules26175322 https://www.mdpi.com/journal/molecules