Pengoptimuman Proses Pengekstrakan Polisakarida Cistanche Deserticola Dengan Meningkatkan Kadar Survival Drosophila Beracun Acetaldehyde

Abstrak:Objektif Untuk mengambil drosophila beracun asetaldehid sebagai model untuk menyaring dan mengoptimumkan proses pengekstrakan polisakarida daripada Cistanche deserticola, supaya polisakarida optimum dapat meningkatkan kadar survival drosophila beracun asetaldehid dengan ketara.

KaedahSerbuk mentah Cistanche deserticola diekstrak berturut-turut dengan etil asetat dan etanol. Papain, selulase dan pektinase telah ditambah ke dalam serbuk Cistanche deserticola yang telah dinyahlemak, dan polisakarida diekstrak melalui kaedah ortogon L9 (34) dan enzimolisis digabungkan dengan kaedah ultrasonik. Proses pengekstrakan polisakarida daripada Cistanche deserticola ma disaring dengan aktiviti farmakodinamik terbaik oleh mod beracun drosophila acetaldehyde.

Percubaan Cistanche deserticola

KeputusanKeadaan pengekstrakan optimum bagi polisakarida Cistanche deserticola ialah papain (2.00 peratus ), selulase (2.00 peratus ), pektinase (0.40 peratus ), nisbah pepejal-cecair 1∶25, suhu 54.1 darjah, pH 5.2, hidrolisis enzimatik 2 jam, masa pengekstrakan tunggal 45 minit, dan masa pengekstrakan 3.

KesimpulanTidak terdapat perbezaan yang ketara dalam proses pengekstrakan polisakarida dengan kaedah tradisional. Kadar kelangsungan hidup drosophila beracun asetaldehid digunakan sebagai indeks untuk menyediakan asas teori saintifik dan munasabah untuk pengekstrakan polisakarida.

Kata kunci: Cistanche deserticola polisakarida; drosophila; asetaldehid diracuni; proses pengekstrakan

Alkohol menjana asetaldehid di bawah tindakan etanol dehidrogenase, yang merupakan faktor risiko penting untuk ketagihan alkohol [1-2]. Jika ketoksikan asetaldehid dapat dikurangkan, ia boleh melambatkan satu siri tindak balas buruk yang disebabkan oleh alkoholisme.

Konstituen Kimia Utama Cistanche deserticola

Klik di sini untuk melihat produk Cistanche

【Minta lebih lanjut】 E-mel:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

MADrosophila ialah organisma model genetik yang dikaji secara meluas dan sangat dijinakkan, dengan genetik yang kuat, mekanisme molekul yang sangat konservatif, kitaran pembiakan yang pendek, kos pemakanan yang sangat rendah, dan ciri-ciri lain, yang boleh digunakan secara meluas untuk pemeriksaan dadah berkeupayaan tinggi. [4].

Pemilihan proses pengekstrakan polisakarida daripada Cistanche deserticola sering menggunakan kaedah ortogonal dan analisis permukaan tindak balas, dengan kandungan glukosa dan kadar pengekstrakan sebagai penunjuk [5-7] untuk pemeriksaan, tanpa perbezaan antara kumpulan yang ketara [8-9] . Kajian ini menyaring proses pengekstrakan polisakarida daripada Cistanche deserticola menggunakan farmakodinamik sebagai penunjuk untuk mendapatkan polisakarida tumbuhan dengan aktiviti biologi yang lebih baik; Menggunakan Drosophila beracun asetaldehid sebagai model [10-11], saring dan optimumkan proses pengekstrakan polisakarida daripada Cistanche deserticola yang boleh meningkatkan kadar kemandirian Drosophila yang diracuni asetaldehid dengan ketara.

Serbuk cistanche

1 Bahan dan Kaedah

1.1 Bahan

1.1.1 Haiwan eksperimen

Drosophila berasal dari Pusat Saham FlyBase di Indiana, Amerika Syarikat. Selepas pembelian, syarat penanaman ialah suhu 25 darjah C, kelembapan 60 peratus ~70 peratus , dan kitaran cahaya dan gelap 12-jam/12-jam.

1.1.2 Reagen dan instrumen

Cellulase 1 × 104 U/g (Shanghai McLean Biochemical Technology Co., Ltd., nombor kelompok: C11894650), papain (8.0 × 105 U/g) dan pectinase (4.0 × 105 U/mg) telah dibeli daripada Beijing Solaybao Biotechnology Co., Ltd., dengan kumpulan pengeluaran masing-masing 810079005 dan 329C0210. Cistanche deserticola berasal dari Gansu Huiqin Biotechnology Co., Ltd. (nombor kelompok: 20200101), dan telah dikenal pasti oleh Profesor Madya Yang Zhigang dari Sekolah Farmasi Universiti Lanzhou sebagai batang Cistanche deserticola YC Ma yang kering, bersisik dan berair, tumbuhan dalam keluarga Orobaceae. Pembersih ultrasonik kawalan berangka (Kunshan Ultrasonic Instrument Co., Ltd.), emparan CR22G (Hitachi, Jepun), pengering beku (LABCONCO, USA), spektrofotometer ultraungu UV-1700 (Shimadzu, Jepun), Neraca Analitik elektronik (Sartorius Scientific Instrument Co., Ltd.), GL-88B vortex mixer (Qilinbel Instrument Manufacturing Co., Ltd., Haimen City) Xk-3 stereomikroskop (Phoenix Optics Co., Ltd.), SHP{ {17}} inkubator biokimia (Shanghai Jinghong Experimental Equipment Co., Ltd.).

1.2 Prarawatan herba Cistanche deserticola [12]

Hancurkan herba ubatan Cistanche deserticola melalui ayak 10 mesh, nyahgriskannya tiga kali dengan 8 kali ganda jumlah etil asetat dan 95 peratus etanol, setiap kali selama 2 jam, dan keringkan untuk kegunaan kemudian.

Serbuk cistanche

1.3 Kaedah untuk menentukan pecahan jisim polisakarida Cistanche deserticola

Kaedah asid sulfurik fenol digunakan untuk menentukan pecahan jisim polisakarida daripada Cistanche deserticola [12]. Lukiskan lengkung piawai dengan kepekatan glukosa sebagai paksi-x dan penyerapan sebagai paksi-y. Persamaan regresi diperoleh: Y=6.4719X campur 0.006 4, R2=0.9991. Polisakarida daripada Cistanche deserticola menunjukkan hubungan linear yang baik dengan penyerapan pada kepekatan jisim 1.275-12.800 mg/L. Pecahan jisim polisakarida=(C1V1/1000M1) × 100 peratus , di mana C1 ialah kepekatan jisim larutan polisakarida yang diperoleh daripada persamaan regresi, V1 ialah isipadu sampel polisakarida kering beku pada isipadu malar, dan M1 ialah jumlah pensampelan polisakarida kering beku.

1.4 Penyediaan polisakarida deserticola Cistanche

Menggunakan hidrolisis enzimatik komposit digabungkan dengan kaedah ultrasound [12], 10 g serbuk Cistanche deserticola yang dinyahlemak ditambah dengan enzim yang sepadan, supaya m (bahan): m (air)=1:25. Jumlah m (bahan): m (air) diekstrak menggunakan 10, 8, dan 7 kali pelarut, dan jumlah m (bahan): m (air) mencapai 25 kali. Disebabkan oleh penyerapan air bahan perubatan, ketiga-tiga pelarut pengekstrakan adalah berbeza. Suhu 54.1 darjah C, pH 5.2, hidrolisis enzimatik selama 2 jam, pengekstrakan ultrasonik 3 kali, setiap pengekstrakan selama 31.5 minit, penapis dengan kain kasa, cantumkan turasan, sentrifuge pada 5000 r/min selama 10 minit untuk mendapatkan cecair jernih atas dan pekat kepada 1/10 daripada isipadu asal. Titiskan 95 peratus etanol ke dalam larutan pekat sambil dikacau sehingga kepekatan etanol mencapai 80 peratus . Biarkan berdiri pada suhu bilik selama lebih daripada 8 jam. Sentrifuge, mendakan, dan beku kering untuk mendapatkan polisakarida Cistanche deserticola.

Pengoptimuman proses penyediaan 1.5 Cistanche deserticola polysaccharides

Bagi mendapatkan hasil dan ketulenan polisakarida yang tinggi daripada Cistanche deserticola, kaedah eksperimen ortogon digunakan untuk mengoptimumkan proses pengekstrakan polisakarida daripada Cistanche deserticola. Papain (2.00 peratus ), selulase (2.00 peratus ), pektinase (0.40 peratus ), suhu 54.1 darjah C, pH 5.2, enzimolisis selama 2 jam. Mengikut prinsip reka bentuk eksperimen ortogon L (934) dalam Jadual 1, proses pengekstrakan polisakarida daripada Cistanche deserticola dipilih berdasarkan nisbah m (bahan) kepada m (air), masa pengekstrakan, dan kekerapan pengekstrakan. Kandungan gula dan kadar pengekstrakan digunakan sebagai penunjuk penilaian untuk menyaring proses pengekstrakan polisakarida daripada Cistanche deserticola.

Jadual 1 Faktor-faktor yang mempengaruhi pengekstrakan polisakarida daripada Cistanche deserticola menggunakan enzim komposit digabungkan dengan kaedah ultrasound

1.6 Eksperimen Farmakodinamik pada lalat buah

Penyelesaian polisakarida adalah ubat pencegahan, dan kajian ini perlu diulang sekurang-kurangnya 3 kali. Larutan sukrosa 5 peratus ialah larutan nutrien untuk lalat buah, dan larutan asetaldehid 4 peratus digunakan untuk mencipta model.

Eksperimen lalat buah jantan telah dijalankan dengan 20 ekor tikus dalam setiap kumpulan. Letakkan lalat buah dalam botol lalat buah dan tambah 150 μ Letakkan sekeping kertas turas larutan L polisakarida atau air suling ke dalam tiub lalat buah, sumbat dengan kapas, dan eramkannya dalam inkubator 24 darjah C selama 24 jam. Keluarkan lalat buah; Dipindahkan untuk membawa 150 μ Inkubasi selama 2 jam dalam tiub lalat buah yang mengandungi kertas turas larutan sukrosa 5 peratus; Keluarkan kertas turas daripada tiub lalat buah dan gantikan dengan 150 μ Teruskan kultur kertas turas baharu larutan L asetaldehid dan perhatikan hasilnya; Kira bilangan kematian Drosophila dalam setiap tiub sekali setiap 12 jam sehingga kadar kemandirian kumpulan larutan sukrosa 5 peratus dalam kumpulan pemodelan menghampiri 50 peratus , dan hitung kadar kemandirian Drosophila dalam setiap kumpulan.

Setiap sampel polisakarida dibahagikan kepada kumpulan dos dan dos. Dos dan kumpulan dos diberi {{0}}.001 peratus larutan polisakarida campur 5 peratus larutan sukrosa ditambah 4 peratus larutan asetaldehid, manakala kumpulan dos diberi 0.001 peratus larutan polisakarida ditambah 5 peratus larutan sukrosa. Ketoksikan sampel polisakarida dijelaskan oleh kadar kemandirian lalat buah dalam kumpulan dos. Sediakan kumpulan larutan sukrosa 5 peratus, yang dibahagikan kepada kumpulan pemodelan dan kumpulan kosong. Kumpulan pemodelan diberi larutan nutrien sukrosa 5 peratus dan larutan asetaldehid 4 peratus, manakala kumpulan kosong diberi larutan nutrien sukrosa 5 peratus. Dengan membandingkan kadar survival lalat buah yang dirawat dengan sampel polisakarida, didapati sampel polisakarida meningkatkan keupayaan hidup lalat buah yang diracuni oleh asetaldehid.

2 Keputusan

2.1 Keputusan Saringan untuk Jenis dan Dos Enzim Komposit

2.1.1 Pemilihan jenis enzim komposit

Pada masa lalu, selulase dan pektinase [3, 5] digunakan dalam penyaringan proses pengekstrakan polisakarida daripada Cistanche deserticola, manakala Yang Xiuyan et al. [12] percaya bahawa papain mempunyai kesan pecah dinding yang baik. Oleh itu, kajian ini tertumpu kepada penyaringan gabungan selulase, papain, dan pektinase, dan polisakarida yang diekstrak mengikut kaedah di atas, untuk menyaring gabungan enzim kompleks polisakarida yang diekstrak daripada Cistanche deserticola yang mempunyai kandungan gula dan kadar ekstrak yang lebih baik. Seperti yang ditunjukkan dalam Jadual 2, apabila enzim kompleks adalah gabungan selulase, papain, dan pektinase, kadar ekstrak dan kandungan gula polisakarida yang diekstrak daripada Cistanche deserticola adalah yang tertinggi, jadi enzim kompleks terdiri daripada selulase, papain, dan pectinase. dipilih.

2.1.2 Pemilihan Dos Enzim Kompaun

Proses pengekstrakan polisakarida berbeza-beza bergantung kepada bilangan enzim kompleks yang digunakan. Sediakan 5 set pemeriksaan dos enzim komposit, dan ekstrak polisakarida daripada Cistanche deserticola menggunakan kaedah yang dinyatakan di atas.

Seperti yang ditunjukkan dalam Jadual 3, hasil saringan dos enzim kompaun menunjukkan bahawa kadar pengekstrakan dan kandungan gula papain (2.00 peratus ), selulase (2.00 peratus ), dan pektinase ({ {5}}.40 peratus ) adalah yang tertinggi, jadi dos enzim sebatian kumpulan 2 telah digunakan.

Jadual 2 Keputusan Saringan Jenis Enzim Komposit

Jadual 3 Keputusan Saringan Dos Enzim Kompaun

2.1.3 Saringan Kaedah Pengekstrakan

Kaedah pengekstrakan polisakarida daripada Cistanche deserticola bukan sahaja menggunakan enzim komposit yang digabungkan dengan ultrasound, tetapi juga termasuk rendaman suam, air mendidih dan ultrasound tanpa enzim komposit [3,5-7]. Kajian ini membandingkan enzim komposit yang digabungkan dengan ultrasound, rendaman hangat, air mendidih, dan ultrasound tanpa enzim komposit.

Ambil 10 g serbuk Cistanche deserticola yang telah dinyahlemak menggunakan kaedah yang sama, dan tambahkan jumlah optimum enzim komposit melalui rendaman hangat dan air mendidih, masing-masing. Jangan tambah enzim komposit melalui ultrasound tanpa penambahan enzim komposit. Syarat lain adalah seperti berikut: selepas hidrolisis enzimatik, suhu ialah 54.1 darjah C untuk rendaman suam, dan kaedah pendidihan air dimasukkan ke dalam relau elektrik untuk pengekstrakan mendidih air. Pengekstrakan dijalankan di bawah keadaan ultrasonik tanpa penambahan enzim kompleks.

Keputusan eksperimen menunjukkan bahawa kadar pengekstrakan (12.91 peratus ) dan kandungan gula (70.81 peratus ) polisakarida daripada Cistanche deserticola tanpa kaedah ultrabunyi enzim komposit adalah jauh lebih tinggi daripada kaedah rendaman hangat (7.26 peratus ) dan kandungan gula (44.79 peratus). ), serta kadar perahan (10.74 peratus ) dan kandungan gula (66.33 peratus ) kaedah pendidihan air. Ini menunjukkan bahawa kecekapan pengekstrakan kaedah ultrasound tanpa enzim komposit adalah lebih tinggi daripada kaedah rendaman suam dan air mendidih. Kadar pengekstrakan dan kandungan gula (masing-masing 27.79 peratus dan 99.26 peratus) polisakarida daripada Cistanche deserticola menggunakan enzim komposit digabungkan dengan kaedah ultrasound adalah lebih tinggi daripada yang tidak mempunyai enzim komposit. Oleh itu, gabungan enzim komposit dan kaedah ultrasound adalah bermanfaat untuk mengekstrak polisakarida daripada Cistanche deserticola.

Konstituen Kimia Utama Cistanche deserticola

2.2 Keputusan ujian ortogon

Keputusan eksperimen ortogon untuk mengekstrak polisakarida daripada Cistanche deserticola ditunjukkan dalam Jadual 4.

2.3 Analisis keputusan varians

According to the factors and levels in Table 1, the orthogonal experimental results and mathematical statistics were obtained by using the combined enzyme ultrasound method according to Table 4. From the variance analysis results of the sugar content and extract rate of the polysaccharides extracted from Cistanche deserticola in Table 5 and Table 6, it can be seen that the difference in m (material): m (water), extraction time, and extraction times were not statistically significant (P>0.05). Oleh itu, adalah perlu untuk menyaring lagi proses pengekstrakan polisakarida daripada Cistanche deserticola berdasarkan petunjuk farmakologi.

2.4 Keputusan eksperimen farmakodinamik

Menggunakan haiwan eksperimen seperti tikus atau tikus untuk eksperimen farmakodinamik mempunyai kelemahan kos pemakanan yang tinggi, manakala Drosophila mempunyai kelebihan kitaran pendek dan kos pemakanan yang sangat rendah, yang boleh digunakan dengan berkesan untuk pemeriksaan ubat yang tinggi dan penemuan sasaran. Oleh itu, kajian ini menggunakan asetaldehid, produk toksik utama metabolisme etanol, untuk mewujudkan model Drosophila yang mensimulasikan alkoholisme, Proses pengekstrakan optimum untuk meningkatkan kadar kemandirian lalat buah yang diracuni oleh asetaldehid telah dipilih daripada eksperimen ortogonal mengekstrak polisakarida daripada Cistanche deserticola. .

Jadual 4 Keputusan eksperimen ortogon pengekstrakan polisakarida daripada Cistanche deserticola

Z1~Z9 sepadan dengan sampel yang diperoleh daripada 9 proses ortogon. K1, K2, K3, dan R (1) ialah nilai yang dikira untuk hasil pes, manakala k1, K2, k3, dan R (2) ialah nilai yang dikira untuk kandungan gula.

Jadual 5 Analisis varians kandungan gula dalam eksperimen ortogonal untuk pengekstrakan polisakarida daripada Cistanche deserticola

Jadual 6 Analisis varians kadar pengekstrakan polisakarida daripada Cistanche deserticola dalam eksperimen ortogon

2.4.1 Saringan Kepekatan Acetaldehyde Berbeza

Selepas beberapa perbandingan eksperimen, berbanding dengan kumpulan lain (2 peratus, 3 peratus, dan 5 peratus), kumpulan asetaldehid 4 peratus menunjukkan trend paling perlahan dalam pertumbuhan kadar kematian dari masa ke masa, dan selepas 5 hari, kadar kematian mencapai 100 peratus. Oleh itu, dalam eksperimen penentuan kepekatan asetaldehid ini, 4 peratus ditentukan sebagai kepekatan optimum asetaldehid.

2.4.2 Saringan kepekatan dos yang berbeza

Dengan menetapkan kepekatan polisakarida yang berbeza ({{0}}.000 5 peratus , 0.001 peratus , {{10 }}.002 peratus ) untuk ekstrak polisakarida eksperimen, Drosophila melanogaster dalam kumpulan kawalan mengalami kematian pesat pada setiap kepekatan polisakarida sebanyak 0.002 peratus , mungkin disebabkan kepekatan polisakarida yang berlebihan. Oleh itu, kepekatan polisakarida dikurangkan kepada 0.001 0 peratus , dan Drosophila melanogaster dalam kumpulan kawalan tidak mati. Selepas itu, kepekatan polisakarida dikurangkan kepada 0.000 5 peratus , dan drosophila dalam kumpulan rawatan mengalami kematian yang cepat, menunjukkan bahawa kepekatan rawatan tidak mencukupi untuk mencegah ketoksikan asetaldehid secara berkesan. Kepekatan optimum polisakarida akhirnya ditentukan sebagai 0.001 peratus .

2.4.3 Keputusan eksperimen farmakodinamik

Kadar kemandirian bagi 10 kumpulan pentadbiran polisakarida ialah 100 peratus , menunjukkan bahawa ketoksikan setiap sampel polisakarida Cistanche deserticola proses adalah sangat rendah pada kepekatan 0.001 peratus . Perbezaan kadar survival antara kumpulan Z5 dan kumpulan larutan sukrosa 5 peratus 1 dalam Jadual 7 adalah yang paling ketara, menunjukkan bahawa polisakarida yang diperolehi dalam kumpulan Z5 mempunyai keupayaan paling kuat untuk meningkatkan kadar kemandirian lalat buah yang disebabkan oleh keracunan asetaldehid. . Proses pengekstrakan yang sepadan untuk kumpulan Z5 ialah masa ultrasonik selama 45 minit, m (bahan): m (air)=1:25, dan pengekstrakan dilakukan 3 kali.

Kadar kemandirian lalat buah dalam kumpulan Z1 dan Z2 dalam Jadual 7 adalah lebih tinggi sedikit berbanding kumpulan larutan sukrosa 5 peratus 1, menunjukkan bahawa polisakarida yang diperoleh daripada kedua-dua proses pengekstrakan ini juga mempunyai keupayaan tertentu untuk meningkatkan kadar kemandirian lalat buah yang diracuni oleh asetaldehid; Tidak terdapat perbezaan yang ketara dalam kadar kemandirian lalat buah antara kumpulan Z3 dan Z8 dan 2 kumpulan yang dirawat dengan larutan sukrosa 5 peratus; Polisakarida yang diperoleh daripada proses pengekstrakan lain tidak mempunyai keupayaan untuk meningkatkan kadar kemandirian lalat buah yang diracuni oleh asetaldehid. Kumpulan larutan Z10 ialah polisakarida yang diekstrak daripada air tradisional dan tidak mempunyai keupayaan untuk meningkatkan kadar kemandirian lalat buah yang diracuni oleh asetaldehid.

Jadual 7 Kadar kemandirian Drosophila melanogaster yang dirawat dengan 10 polisakarida dan kumpulan pemodelan

Dengan menggabungkan kaedah eksperimen ortogon tradisional dengan eksperimen farmakodinamik Drosophila melanogaster, proses pengekstrakan optimum polisakarida Cistanche deserticola dipilih sebagai papain (2.00 peratus ), selulase (2.00 peratus ), pectinase (0.40 peratus ), m (bahan): m (air)=1 ∶ 25, suhu 54.1 darjah C, pH 5.2, enzimolisis selama 2j, masa pengekstrakan tunggal 45min, masa pengekstrakan 3 kali .

3 Perbincangan

Disebabkan Drosophila adalah organisma mudah alih, mengira sekali setiap 12 jam tidak dapat menentukan masa dengan tepat apabila kadar kemandirian kumpulan larutan sukrosa 5 peratus 1 mencapai 50 peratus . Ia hanya boleh hampir dengan nilai dan tidak boleh konsisten sepenuhnya. Dalam Jadual 7, kumpulan 1 daripada 5 peratus larutan sukrosa dan kumpulan 2 daripada 5 peratus larutan sukrosa telah disiapkan dalam dua eksperimen, dengan kadar survival hampir 50 peratus . Ini kerana bilangan lalat buah yang memenuhi syarat eksperimen adalah terhad, dan lalat buah yang mencukupi perlu ditinggalkan untuk laluan. Oleh itu, 10 sebatian polisakarida dibahagikan kepada dua eksperimen untuk diselesaikan. Dengan menganalisis tahap proses ortogon dan faktor polisakarida, didapati bahawa masa pengekstrakan ultrasonik selama 45 minit memainkan peranan yang menentukan. Jika masa pengekstrakan terlalu singkat, bahan berkesan tidak diekstrak sepenuhnya dan tidak akan berkesan; Jika masa pengekstrakan terlalu lama dan rantai polisakarida yang panjang terputus secara berlebihan, ia boleh menjadi monosakarida atau oligosakarida dengan mudah, tetapi bukan polisakarida rantai pendek, yang juga tidak berkesan.

ginseng padang pasir

Menggunakan Drosophila beracun asetaldehid sebagai model dan meningkatkan kadar kemandirian Drosophila beracun asetaldehid sebagai penunjuk farmakodinamik boleh meningkatkan kesesuaian dan kebolehlaksanaan proses pengekstrakan polisakarida perubatan tradisional Cina dengan ketara.Menyaring dan mengoptimumkan proses pengekstrakan polisakarida Cistanche deserticola yang boleh meningkatkan kadar kemandirian Drosophila beracun asetaldehid dengan ketara memberikan kepentingan rujukan tertentu untuk penyaringan proses pengekstrakan polisakarida tumbuhan, dan meletakkan asas untuk pembangunan dan penggunaan polisakarida Cistanche deserticola.

rujukan

[1] Shield K, Manthey J, Rylett M, et al. Beban penyakit nasional, serantau dan global dari 2000 hingga 2016 yang dikaitkan dengan penggunaan alkohol: Kajian penilaian risiko perbandingan [J]. Jurnal Kesihatan Awam Lancet, 2020, 5(1): e51-e61.

[2] Birková A, Hubková B, Čižmárová B, et al. Pandangan semasa mengenai mekanisme ketoksikan pengantara alkohol[J]. Jurnal Antarabangsa Sains Molekul, 2021, 22(18): 9686.

[3]Lian Le, Gao Mingbo, Yin Xinxin, et al Pengoptimuman keadaan proses pengekstrakan ultrasonik untuk polisakarida daripada Cistanche deserticola [J] Guangzhou Chemical Industry, 2018, 46 (19): 61-62, 77

[4] Duan Dandan, Gao Li, Qin Xuemei, dll Aplikasi Drosophila dalam Penyelidikan Farmakologi [J]. Jurnal Farmasi Cina, 2016, 51 (19): 1638-1642

[5] Gao Jiande, Liu Xiong, Zhu Xiaoyu, et al Pengoptimuman proses pengekstrakan dan analisis kinetik polisakarida daripada Cistanche deserticola menggunakan enzim komposit [J] Journal of Gansu University of Traditional Chinese Medicine, 2017, 34 (5): { {4}}

[6] Wang Jia, Yang Wen, Wang Dong, dsb. Kemajuan penyelidikan tentang kaedah pengekstrakan dan penentuan kandungan polisakarida daripada genus Cistanche [J] Zhongnan Pharmacy, 2019, 17 (7): 1055-1059

[7] Xiao Xinghui, Gao Haixia, Li Honghui, et al Pengoptimuman Proses Pengekstrakan dan Pemurnian untuk Polisakarida daripada Desert Cistanche deserticola [J]. Jurnal Perubatan Cina Tradisional Cina, 2019, 44 (3): 475-481

[8] Liang Yongfeng, Li Jiahui, Cao Jiangping Kajian tentang Proses Pengekstrakan dan Aktiviti Antioksidan Polisakarida daripada Bunga Aprikot [J] Sains Pertanian Jiangsu, 2018, 46 (7): 208-210

[9] Zhang Tao, Chen Qihang, Wei Haiqiu, et al Pengoptimuman Proses Pengekstrakan dan Aktiviti Antioksidan Polisakarida daripada Solidago Canadiana [J] Journal of Zhejiang Ocean University: Natural Science Edition, 2022, 41 (3): {{4} }

10] Tatum NS, Rebecca AM, Trudy FC, et al. Kaedah pemprosesan tinggi untuk mengukur masa sedasi alkohol bagi individu drosophila melanogaster[J]. Eksperimen Visualisasi Jurnal, 2020, 158(e61108): 1-8.

[11] Peter D, van Kerckvoorde V, Tim B, et al. Pengenalpastian blackberry (rubus fruticosus) meruap sebagai drosophila su zukii Attractants[J]. Serangga, 2021, 12(5): 417.

[12] Yang Xiuyan, Xue Zhiyuan, Yang Yafei, et al Kajian tentang proses pengekstrakan, sifat fizikokimia, dan aktiviti antioksidan polisakarida daripada membranaceus Astragalus menggunakan enzim komposit digabungkan dengan ultrasound [J] Jurnal Perubatan Cina Tradisional Cina, 2018, 43 (11): 2261-2268