Daun Neem (Azadirachta Indica A. Juss) Ekstrak Etanol Pada Fungsi Hati Dan Buah Pinggang Tikus
Mar 05, 2022
pengenalan
pembangunan ubat-ubatan daripada produk semula jadi mendapat perhatian dunia hari ini. produk semula jadi mempunyai struktur kimia yang unik, menghasilkan kepelbagaian aktiviti biologi, dan mempunyai sifat seperti dadah [1]. ditambah lagi amalan perubatan menggunakan produk semula jadi berlaku sejak zaman prasejarah dalam mencegah dan merawat pelbagai penyakit. Produk semulajadi menawarkan banyak kelebihan dari segi kecekapan dan selektiviti sasaran molekul supaya ia boleh digunakan berulang kali untuk membekalkan keperluan mendesak ubat-ubatan dengan berkesan [2]. Produk semulajadi mengandungi sebatian aktif dengan implantasi [8, 9], antihiperglisemik, antiulser, antikulat, antibakteria, anti-radang, imunomodulator, antimutagenik, antikanser, antimalaria, antivirus, antioksidan [10-12], anti kesuburan [13, 14], dan kontraseptif [9, 11]. Pelbagai bahagian tumbuhan neem telah berjaya diasingkan, mengandungi lebih daripada 140 sebatian kimia [10], dan telah digunakan sebagai ubat herba selama beribu-ribu tahun [14]. Neem mengandungi pelbagai sebatian primer termasuk derivatif lemak, karbohidrat, dan protein dan sebatian sekunder seperti flavonoid, steroid, saponin, terpenoid, alkaloid, glikosida, dan tanin [7-15]. Tumbuhan Neem adalah minat di seluruh dunia kerana keberkesanannya tanpa menunjukkan kesan sampingan. ditambah dengan penggunaan tumbuhan neem secara tradisional agak selamat, dan lebih daripada 75 peratus ubat tradisional menggunakan ekstrak daun neem. serta sejarah penggunaannya, daripada laporan sedia ada, tidak menunjukkan sebarang kesan sampingan daripada daun neem. Walau bagaimanapun, penilaian keselamatan yang menyeluruh terhadap penggunaan formulasi daun neem tidak pernah dilakukan [11].
CISTANCHE AKAN MENINGKATKAN FUNGSI BUAH PINGGANG/BUAH PINGGANG
Kajian terdahulu melaporkan bahawa ekstrak daun neem mempunyai kesan toksik pada hati danbuah pinggang [4, 11]; namun, laporan lain menunjukkan bahawa ekstrak daun neem boleh melindungi hati danbuah pinggangdaripada kerosakan [16–18]. Di Kabupaten Aceh Besar, Provinsi Aceh, Indonesia, penduduk setempat telah menggunakan daun neem sebagai sayuran dan digunakan untuk mencegah kehamilan tanpa mengetahui kesan sampingannya. serta keselamatan daun neem sehingga kini masih tidak jelas. Sehingga kini, untuk pengetahuan kita, masih terdapat kajian terhad yang menilai kesan ekstrak etanol daun neem terhadap hati danfungsi buah pinggang. Dalam kajian semasa, objektifnya adalah untuk menyiasat kesan pemberian ekstrak etanol daun neem pada hati danfungsi buah pinggangmelalui pemeriksaan kepekatan AST, ALT, urea, kreatinin dan hati histopatologi danbuah pinggangpada tikus jantan.
Kata kunci:Fungsi Buah Pinggang; Tisu Buah Pinggang; kegagalan buah pinggang; Penyakit buah pinggang; buah pinggang
Bahan dan Kaedah
Koleksi Contoh Daun Neem.Daun neem dikumpulkan dari Desa Kajhu, Kabupaten Aceh Besar, Provinsi Aceh, Indonesia, pada September 2019. Pengenalpastian daun neem dilakukan di Bogoriense Herbarium, Pusat Penyelidikan Biologi, Institut Sains Indonesia (LIPI), Bogor, Indonesia (1454). /IPH.1.01/If.07/VII/2019), dan ia ditunjukkan sebagai Azadirachta indica A. Juss.Penyediaan Ekstrak Etanol Daun Neem.Daun neem segar dikumpulkan, dibasuh, dikeringkan dengan udara, dan dilenyek untuk menghasilkan serbuk mentah. Tambahan pula, serbuk mentah telah dimaserasi dengan etanol 70 peratus selama 7 hari. tambah en, turasan telah disejat dengan menggunakan penyejat berputar pada 50 darjah untuk menghasilkan ekstrak likat.Eksperimen Haiwan.Haiwan percubaan ialah 24 ekor tikus Wistar jantan dengan berat badan 150–250 g. Tikus telah disesuaikan selama 7 hari dan dibahagikan secara rawak kepada empat kumpulan (T0, T1, T2, dan T3) kerana setiap kumpulan mengandungi 6 ekor tikus. T0 adalah kumpulan kawalan tanpa rawatan dan T1, T2, dan T3 adalah kumpulan rawatan yang telah
memberikan ekstrak etanol daun neem dengan 100, 200, dan 300 mg/kg berat badan, masing-masing. ekstrak itu diberikan secara lisan menggunakan tiub gastrik selama 48 hari, dan sampel darah diambil pada hari ke-49 untuk menentukan kepekatan AST, ALT, urea, dan kreatinin, dan kemudian hati danbuah pinggangtisu dikumpulkan untuk menilai histopatologi. Semasa kajian, tikus diberi makanan standard dan air secara ad libitum.
Analisis Biokimia.Sampel darah (2–3 ml) diambil dari jantung menggunakan picagari steril. tambah en, darah telah dipindahkan ke tiub Eppendorf dan dibiarkan pada suhu bilik (30 darjah ) selama 10 minit. Darah disentrifugasi selama 10 minit pada 3000 rpm. plus e serum diasingkan dan disimpan dalam peti sejuk (0 20 darjah ). Tambahan pula, AST, ALT, urea dan kreatinin darah telah diperiksa menggunakan penganalisis kimia (Rayto RT-1904C). serta prosedur penentuan AST, ALT, urea dan kreatinin telah dilakukan mengikut protokol pengilang.
Pemeriksaan Histopatologi. The hati danbuah pinggangdaripada tikus telah ditetapkan dalam 10 peratus larutan formalin penimbal neutral selama 24 jam, dehidrasi dalam siri alkohol, dan dibersihkan dalam larutan xilol diikuti dengan benam pada blok parafin. Tisu yang tertanam dalam blok parafin dipotong menggunakan mikrotom berputar menjadi 4 µm tebal, dipasang pada slaid kaca, diwarnai dengan hematoxylin dan eosin, dan diperiksa di bawah mikroskop cahaya pada pembesaran 10 × 10.Analisis statistik.Data dianalisis menggunakan analisis varians (ANOVA sehala) diikuti dengan ujian posthoc Duncan menggunakan SPSS 24. Nilai-p<0.05 was="" considered="" statistically="">
CISTANCHE AKAN MEMPERBAIKI SAKIT BUAH PINGGANG/PINGGANG
Keputusan dan perbincangan
6e Kepekatan AST dan ALT. ditambah dengan kepekatan AST T0, T1, T2 dan T3 ialah 290.9 ± 202.5 U/L, 277.2 ± 167.2 U/L, 421.3 ± 2{ {28}}1.5 U/L dan 366.3 ± 276.9 U/L, masing-masing. ditambah kepekatan AST dalam kumpulan T2 dan T3 cenderung meningkat berbanding T{{30}} (kumpulan kawalan). Bagaimanapun, kepekatan AST dalam kumpulan T1, T2, dan T3 tidak menunjukkan perbezaan yang ketara daripada kumpulan T0 (p > 0.05). ditambah kepekatan ALT T0, T1, T2 dan T3 ialah 108.6 ± 23.1 U/L, 116.3 ± 51.9 U/L, 105.9 ± 15.2 U/L dan 95.9 ± 36.2 U/L, masing-masing. ditambah kepekatan ALT dalam kumpulan T2 dan T3 cenderung menurun berbanding dengan T0 (kumpulan kawalan).
Walau bagaimanapun, kepekatan ALT dalam kumpulan T1, T2 dan T3 tidak menunjukkan perbezaan yang ketara daripada kumpulan T0 (p > 0.05) (Jadual 1). Enzim AST adalah salah satu penanda yang digunakan untuk menilai kehadiran kerosakan hati. plus ialah enzim memainkan peranan dalam proses glukoneogenesis untuk memangkinkan penukaran kumpulan amino asid aspartik kepada asid ketoglutarik untuk menghasilkan asid oksaloasettik. Enzim AST terdapat dalam isoenzim sitosolik dan mitokondria hati, otot rangka, otot jantung,buah pinggang,otak, pankreas, paru-paru, leukosit, dan sel darah merah. Walau bagaimanapun, enzim AST ini kurang sensitif dan khusus untuk menilai kerosakan hati [19]. Walaupun tiada perbezaan ketara dalam kepekatan AST dalam kumpulan rawatan (T1, T2, dan T3) berbanding kumpulan kawalan (T0), kepekatan AST cenderung meningkat dalam kumpulan T2 dan T3 berbanding dengan T 0 (kumpulan kawalan). peningkatan tambahan mungkin lewat disebabkan oleh sebatian aktif ekstrak daun neem seperti flavonoid, tanin, saponin, alkaloid, dan steroid, tetapi sebatian aktif ekstrak etanol daun neem tidak dikenal pasti untuk meningkatkan AST. Peningkatan enzim AST tidak semestinya diikuti dengan kerosakan hati kerana enzim ini bukan sahaja khusus dalam hati tetapi juga dalam tisu badan yang lain.
Kajian ini juga mendapati enzim ALT cenderung menurun dalam kumpulan rawatan (T1, T2, dan T3) berbanding kumpulan kawalan (T0), tetapi penurunan enzim ALT tidak ketara secara statistik. Enzim ALT adalah peramal kerosakan hati yang lebih baik daripada enzim AST kerana enzim sitosolik ini didapati dalam kepekatan tertinggi dalam hati dan lebih spesifik dalam menilai kerosakan fungsi hati [20]. plus ialah enzim memainkan peranan dalam glukoneogenesis dengan memangkinkan pemindahan kumpulan amino daripada alanin kepada asid ketoglutarik untuk menghasilkan asid piruvik [19]. ALT terdiri daripada 496 asid amino dan ditemui dalam hepatosit sitosol. Aktiviti enzim ALT dalam hati adalah kira-kira 3000 kali aktiviti serum, jadi dalam kes kerosakan hepatoselular atau kematian, ALT yang dikeluarkan daripada sel hati yang rosak akan meningkatkan aktiviti diukur enzim ALT dalam serum [21].
CISTANCHE AKAN MEMPERBAIKI DIALISIS BUAH PINGGANG/PINGGUL
Mohamed et al. [22] mendapati bahawa ekstrak etanol daun neem menyebabkan penurunan enzim AST dan ALT tikus. Ekstrak etanol daun neem tidak mempunyai kesan sampingan pada hati, malah ia berfungsi sebagai perlindungan hati. Kajian yang dijalankan oleh Haque et al. [23] juga mendapati bahawa ekstrak daun neem tidak menyebabkan perubahan dalam aktiviti serum normal enzim AST dan ALT pada tikus jantan. Bhangra et al. [24] melaporkan bahawa pemberian 500 mg/kg berat badan ekstrak daun neem dalam tikus yang disebabkan oleh parasetamol mengurangkan kerosakan hati, seperti yang ditunjukkan oleh kepekatan AST dan ALT biasa dan pemerhatian histopatologi. Hasil kajian yang dijalankan oleh Dkhil et al. [17] menunjukkan kesan perlindungan ekstrak metanol daun neem dengan dos 500 mg/kg berat badan kepada hati pada tikus yang disebabkan oleh cisplatin. Mallick et al. [25] melaporkan bahawa ekstrak metanol daun neem tidak mempunyai kesan toksik pada hati tikus walaupun pada dos yang tinggi. Kandungan antioksidan ekstrak daun neem memberikan kesan hepatoprotektif. Kajian yang dijalankan oleh Hartono dan Prabowo [26] mendapati bahawa ekstrak etanol daun neem yang diberikan pada tikus dengan mendorong dos tinggi parasetamol selama sepuluh hari juga boleh mengurangkan aktiviti enzim ALT dalam haiwan eksperimen. Penurunan enzim ALT adalah disebabkan oleh sebatian aktif ekstrak daun neem, yang berfungsi sebagai hepatoproteksi dengan menghalang kerosakan hati oksidatif. Antioksidan boleh mengurangkan radikal bebas untuk mation dengan penghapusan langsung yang mengurangkan pembentukan spesies oksigen reaktif (ROS) yang mempunyai kesan toksik pada fosfolipid membran dan menyebabkan spektrum luas kerosakan sel. Antioksidan boleh mengurangkan tekanan oksidatif kepada sel hati, dan aktiviti enzim ALT dalam darah akan berkurangan.
Kepekatan Urea dan Kreatinin.Kepekatan urea T{{0}}, T1, T2, dan T3 ialah 51.1 ± 7.0 mg/dl, 55.6 ± 8.5 mg/dl, 44.5 ± 5.4 mg/dl dan 48.4 ± 3.4 mg/dl, masing-masing. Kepekatan urea dalam kumpulan T1, T2 dan T3 menunjukkan perbezaan ketara daripada kumpulan T0 (p < 0.{{30}}5).="" kepekatan="" kreatinin="" t0,="" t1,="" t2="" dan="" t3="" ialah="" 0.22="" ±="" 0.{{40}}4="" mg/dl,="" {{44="" }}.24="" ±="" 0.03="" mg/dl,="" 0.21="" ±="" 0.03="" mg/dl="" dan="" 0.25="" ±="" 0.03="" mg/dl,="" masing-masing.="" kepekatan="" kreatinin="" dalam="" kumpulan="" t1,="" t2,="" dan="" t3="" tidak="" menunjukkan="" perbezaan="" yang="" ketara="" daripada="" kumpulan="" t0="" (p=""> 0.05) (Rajah 1). Thebuah pinggangmempunyai peranan penting dalam perkumuhan bahan buangan dan toksin seperti urea, kreatinin, dan asid urik; ia juga mempunyai fungsi dalam pengawalan isipadu cecair ekstraselular, osmolaliti, kepekatan elektrolit, dan pengeluaran hormon. ditambah e unit fungsianbuah pinggangialah nefron yang terdiri daripada glomerulus, tubul proksimal, tubul distal, dan saluran pengumpul [27]. hasil tambah e menunjukkan bahawa terdapat perbezaan yang ketara dalam kepekatan urea dalam kumpulan rawatan (T1, T2, dan T3) berbanding kumpulan kawalan (T0), dan kepekatan urea menurun dalam kumpulan T2 dan T3 berbanding kepada T0 (kumpulan kawalan). Urea ialah sebatian yang mengandungi nitrogen yang terbentuk di dalam hati sebagai produk akhir metabolisme protein dan kitaran urea. Kira-kira 85 peratus daripada kawasan itu dikumuhkan melaluibuah pinggang, dan selebihnya dikumuhkan melalui saluran penghadaman. Serum urea meningkat dalam keadaan pembersihan buah pinggang seperti dalam akut dan kronikkegagalan buah pinggang. Urea juga boleh meningkat dalam keadaan lain seperti pendarahan gastrousus atas, dehidrasi, proses katabolik, dan diet protein tinggi [27].Dalam kajian ini, terdapat penurunan kepekatan urea dalam kumpulan rawatan berbanding kumpulan kawalan. ditunjukkan bahawa ekstrak etanol daun neem tidak menjejaskanfungsi buah pinggangdaripada tikus jantan. Menurut Guyton dan Hall [28], jumlah urea dalam darah ditentukan oleh protein pemakanan dan keupayaanbuah pingganguntuk mengeluarkan urea. Jika buah pinggang rosak, urea akan terkumpul di dalam darah. Peningkatan urea dalam plasma ditunjukkankegagalan buah pinggangdalam menjalankan fungsi penapisannya. ditambah e syarat daripadakegagalan buah pinggang, yang dicirikan oleh paras urea plasma yang sangat tinggi, dikenali sebagai uremia.
Urea ialah produk akhir nitrogen yang diperoleh daripada katabolisme protein dan asid amino, yang dihasilkan oleh hati, dan diedarkan kepada semua cecair intrasel dan ekstrasel. Di dalambuah pinggang, urea ditapis keluar daripada darah oleh glomeruli dan sebahagiannya diserap semula oleh air. Peningkatan urea adalah penunjuk bahawa kadar penapisan glomerular adalah lemah. Peningkatan kepekatan urea dikaitkan denganpenyakit buah pinggangatau kegagalan, halangan saluran kencing olehbuah pinggangbatu, kegagalan jantung kongestif, dehidrasi, demam, kejutan, dan pendarahan dalam saluran penghadaman.Kajian juga mendapati tiada perbezaan ketara dalam kepekatan kreatinin dalam kumpulan rawatan (T1, T2, dan T3) berbanding kumpulan kawalan (T0). menunjukkan bahawa ekstrak etanol daun neem tidak menyebabkan kerosakan pada tikusbuah pinggang.Kreatinin biasanya digunakan sebagai ukuranfungsi buah pinggang. Kepekatan kreatinin bukan sahaja dipengaruhi oleh produk jisim otot tetapi juga dipengaruhi oleh fungsi otot, komposisi otot, aktiviti, diet, dan status kesihatan. Peningkatan kepekatan kreatinin juga didapati dalam distrofi otot, anemia, leukemia, dan hipertiroidisme [29]. Kreatinin adalah penanda yang paling biasa digunakan untuk menilaifungsi buah pinggang.kepekatan kreatinin memberikan penunjuk tindakan glomerulus. Kreatinin adalah hasil sampingan kreatin fosfat dalam otot dan dihasilkan pada kelajuan tetap oleh badan. Untuk sebahagian besar, kreatinin dibersihkan sepenuhnya daripada darah olehbuah pinggang. Peningkatan kreatinin menunjukkan penurunan pembersihan olehbuah pinggang. Serum kreatinin adalah penilaian yang lebih tepatfungsi buah pinggangdaripada urea [27].
Moneim et al. [16] mendapati bahawa pemberian ekstrak daun neem pada dos 500 mg/kg berat badan selama lima hari pada tikus tidak menyebabkan perubahan dalam kepekatan urea dan kreatinin pada tikus. Kepala et al. [30] juga mendapati bahawa tikus yang diberi ekstrak daun neem pada dos 500 mg/kg berat badan selama 14 hari menyebabkan penurunan kepekatan urea dan kreatinin dalam tikus yang disebabkan oleh cisplatin untukkerosakan buah pinggang. Ekstrak etanol daun neem bertindak sebagai nefroprotection dalamkerosakan buah pinggang.Kajian yang dijalankan oleh Somsak et al. [18] mendapati bahawa ekstrak air daun neem pada dos 1000 dan 2000 mg/kg berat badan tidak mempunyai kesan toksik pada tikus. Ekstrak daun neem boleh digunakan sebagai calon untuk perlindungan nefroproteksi terhadap kerosakan padabuah pinggang.
Histopatologi Hati dan Buah Pinggang.Pemerhatian histopatologi hati dalam kumpulan kawalan (Rajah 2(a) dan kumpulan rawatan pada dos 100 mg/kg (Rajah 2(b)), 200 mg/kg (Rajah 2(c)), dan 300 mg/kg (Rajah 2(d)) menunjukkan bahawa hati, urat pusat, dan sel hepatosit kelihatan normal (Rajah 2).buah pinggangpemerhatian histopatologi dalam kumpulan kawalan (Rajah 3(a)) dan kumpulan rawatan pada dos 100 mg/kg (Rajah 3(b)), 200 mg/kg (Rajah 3(c)), dan 300 mg/kg ( Rajah 3(d)) menunjukkan rupa normal glomerulus dan tubul proksimal dan distal. ditambah sebelum tiada perubahan histologi dalambuah pinggang(Rajah 3).
Hati danbuah pinggangadalah organ yang mempunyai peranan penting dalam metabolisme dan perkumuhan dadah atau bahan lain. Dalam kajian itu, menunjukkan bahawa pemberian ekstrak etanol daun neem pada dos 100, 200, dan 300 mg/kg tidak menyebabkan keabnormalan dan kerosakan pada hati tikus. ditambah hati dalam tikus yang dirawat menunjukkan struktur umum normal hati dan penampilan normal urat pusat dan sel hepatosit. plus histopatologi hati adalah mengikut keputusan analisis enzim AST dan ALT yang menunjukkan bahawa tidak terdapat perbezaan yang signifikan antara kumpulan kawalan dan rawatan. Walaupun terdapat peningkatan dalam enzim AST dalam kumpulan 200 dan 300 mg/kg berbanding kumpulan kawalan, histopatologi hati kelihatan normal. Enzim AST tidak khusus untuk kerosakan hati. AST ditemui terutamanya dalam sel darah merah, otot jantung dan rangka, danbuah pinggang. AST kurang sensitif kepada hati daripada ALT [19].
Thebuah pinggangpemerhatian histopatologi selepas pemberian ekstrak etanol daun neem dengan dos 100, 200, dan 300 mg/kg tidak menunjukkan perbezaan berbanding kawalan. Thebuah pinggangpada tikus yang dirawat menunjukkan umum biasastrukturbuah pinggangdan penampilan normal glomerulus dan tubulus. Dapatan ini disokong oleh analisis urea dan kreatinin dalam darah tikus yang tidak menunjukkan perbezaan yang signifikan antara kumpulan kawalan dan rawatan. Urea dan kreatinin adalah parameter biokimia yang merupakan penunjuk utamafungsi buah pinggang. Walau bagaimanapun, kreatinin adalah penilaian yang lebih tepatfungsi buah pinggangdaripada urea [27]. Ini adalah selaras dengan beberapa laporan sebelum ini bahawa ekstrak daun neem mempunyai potensi kesan hepatoprotektif dan nefroprotektif [31]. Kusuma et al. [32] mendapati bahawa ekstrak etanol daun neem tidak menjejaskan diameter hepatosit, diameter lobulus hati, dan berat hati pada tikus. Sebaliknya, kajian Katsayal et al. [33] mendapati bahawa pemberian ekstrak metanol daun neem pada dos 500, 1000, dan 2000 mg/kg menyebabkan keabnormalan pada hati dan buah pinggang tikus yang dirawat berbanding dengan kawalan. Perbezaan dalam keputusan ini mungkin disebabkan oleh dos ekstrak daun neem yang berbeza. Thehasil kajian ini menunjukkan bahawa ekstrak etanol daun neem daripada Kajhu tidak menyebabkan kerosakan pada hati danbuah pinggangdaripada tikus jantan. plus adalah disebabkan oleh sebatian aktif ekstrak etanol daun neem yang merupakan antioksidan. Kajian terdahulu menunjukkan bahawa ekstrak etanol daun neem daripada Kajhu mengandungi flavonoid, alkaloid, tanin, saponin, dan steroid [34]. ditambah sebatian aktif yang bertindak sebagai antioksidan ialah flavonoid. ditambah ekstrak etanol daun neem mempunyai aktiviti antioksidan yang kuat [35]. selain kami, ekstrak etanol daun neem dari Kajhu selamat untuk hati dan buah pinggang tikus jantan.
CISTANCHE AKAN MEMPERBAIKI KEGAGALAN BUAH PINGGANG/BUAH PINGGANG
Kesimpulan
Ekstrak etanol daun neem tidak menyebabkan kerosakan pada hati danbuah pinggangtikus jantan seperti yang ditunjukkan oleh analisis AST, enzim ALT, urea, dan kepekatan kreatinin dan hati histopatologi danbuah pinggang. Walau bagaimanapun, siasatan lanjut diperlukan untuk penilaian keselamatan komprehensif ekstrak daun neem pada pelbagai dos untuk mendapatkan gambaran yang jelas tentang keselamatan daun neem untuk perubatan.