Rejim Pemvaksinan Chlamydia Trachomatis Prime-boost berbilang komponen mendorong Tindak Balas Antibodi Dan Sel T Serta Mempercepatkan Pembersihan Jangkitan dalam Model Primat Bukan Manusia

Adalah menjadi keutamaan antarabangsa untuk membangunkan vaksin terhadap jangkitan seksualJangkitan Chlamydia trachomatisuntuk memerangi penyebaran jangkitan global yang berterusan. Theimunisasi yang optimumstrategi masih perlu dijelaskan sepenuhnya. Matlamat kajian ini adalah untuk menilaistrategi imunisasidalam model primat bukan manusia (NHP). Kera Cynomolgus (Macaqua fascicularis) telah diimunisasi berikutan pelbagai komponen yang berbezaimunisasi prime-boostjadual dan seterusnya dicabar dengan C. trachomatis SvD dalam saluran genital bawah. Antigen imunisasi termasuk antigen protein rekombinan CTH522 yang digabungkan dengan CAF01 atau aluminium hidroksida, antigen DNA MOMP dan antigen vektor MOMP (HuAd5 MOMP dan MVA MOMP).

Klik Di Sini Untuk Mendapatkan Herba Cistanche Untuk MencegahJangkitan Chlamydia trachomatis

Semua binaan antigen adalah sangat imunogenik meningkatkan tindak balas IgG spesifik C. trachomatis sistemik yang ketara. Khususnya, kumpulan vaksin protein CTH522 meningkatkan pecificsIgG yang cepat dan kuat dalam serum. Pemetaan epitop sel B tertentu dalam MOMP menunjukkan bahawa semua kumpulan yang divaksin, epitop yang diiktiraf berhampiran atau dalam domain pembolehubah (VD) MOMP, dengan tindak balas VD4 yang konsisten dalam semua haiwan. Tambahan pula, serum daripada semua kumpulan yang divaksin boleh secara in vitro meneutralkan kedua-dua SvD, SvE, dan SvF. Tindak balas antibodi dicerminkan pada mukosa faraj dan okular, yang menunjukkan tahap IgG yang boleh dikesan. Vaksin juga mendorong tindak balas pengantara sel khusus C. trachomatis, seperti yang ditunjukkan oleh rangsangan in vitro dan pewarnaan sitokin intrasel bagi sel mononuklear darah periferal (PBMC). Secara amnya, kumpulan yang divaksinasi protein (CTH522) membentuk tindak balas sel CD4 T pelbagai fungsi, manakala kumpulan yang divaksinasi DNA dan Vektor juga membentuk tindak balas sel T CD8. Berikutan cabaran faraj dengan C. trachomatis SvD, beberapa kumpulan yang divaksin menunjukkanpembersihan dipercepatkan jangkitan, tetapi terutamanya kumpulan DNA, dirangsang dengan CAF01 adjuvan CTH522 untuk mencapai aCD4/CD8 seimbangTindak balas sel T digabungkan dengan anTindak balas IgG, menunjukkanpembersihan dipercepatkan jangkitan.

KATA KUNCI vaksin, jangkitan,imunologi, bakteria, limfosit CD4/CD8,Chlamydia trachomatis

pengenalan

Jangkitan Genital Chlamydia trachomatis setiap tahun menyebabkan dianggarkan 131 juta kes baru di seluruh dunia (1) dan merupakan isu kesihatan global utama dengan berpotensi mendorongkomplikasi terukseperti pelvispenyakit radang, kehamilan ektopik, danketidaksuburan(2, 3). Antibiotik masih menawarkan rawatan berkesan untuk jangkitan C. trachomatis. Walau bagaimanapun, oleh kerana jangkitan adalah asimtomatik sehingga 75 peratus daripada kes,majoriti jangkitan tidak dirawat, dan penghantaran tidak terganggu (3). Secara umumnya dipersetujui bahawa senjata paling berkesan terhadap penyebaran jangkitan Chlamydia yang berterusan ialah vaksin profilaksis (4).

Walaupun beberapa tahun penyelidikan, vaksin belum lagi berada di pasaran. Ini sebahagiannya disebabkan oleh gaya hidup dwifasa kompleks C. trachomatis. Kitaran hayat bifasa unik C. trachomatis, dengan kedua-dua peringkat intrasel dan ekstrasel, mencabar sistem imun. Adalah dipercayai bahawa imuniti pelindung harus terdiri daripada tindak balas imun pengantara sel (CMI), sebagai tambahan kepada antibodi spesifik serotype (5-13). Selain itu, menjana imuniti mukosa dalam saluran kemaluan menimbulkan cabaran tambahan untuk vaksin.

Dalam kajian ini, kami menguji strategi vaksin yang berbeza dalam model jangkitan klamidia NHP. Strategi yang bertujuan untuk mendorong antibodi, sel T CD4, dan/atau tindak balas sel CD8 T. Di samping itu, beberapa vaksin bertujuan untuk menghasilkan tindak balas mukosa. Antigen yang dipilih untuk kajian ini adalah berdasarkan Protein Membran Luar Utama. Pertama, konsensus MOMP Antigen (Con E) berdasarkan kira-kira 1500 serovar E ompA jujukan telah dihasilkan untuk menyediakan liputan epitope yang tinggi terhadap strain C. trachomatis yang paling lazim (14). Kedua, protein gabungan sintetik, CTH522, digunakan. CTH522 ialah versi rekombinan, kejuruteraan MOMP, yang terdiri daripada imunorepeat heterolog kawasan VD4 daripada empat serovar Ct alat kelamin (D, E, F, dan G) (11). Strategi di sebalik protein gabungan rekombinan adalah untuk mendorong tindak balas yang diperkuatkan kepada epitop pelindung dan mendorong perlindungan silang-serovar (11).

Satu lagi ciri utama eksperimen semasa ialah penilaian selari CTH522 dalam dua sistem adjuvant yang sangat berbeza (AlOH dan CAF01), digabungkan dengan penggalak intranasal. Gabungan ini telah diuji pada tikus dan babi mini di mana ia terbukti sangat imunogenik dengan mendorong titer antibodi peneutral yang tinggi, sel T penghasil CD4 tambah IFN-g, dan pembersihan dipercepatkan jangkitan C. trachomatis genital (11–13). , 15). Tambahan pula, perbandingan ini mencerminkan percubaan klinikal pertama dalam manusia baru-baru ini kerana kedua-dua formulasi terbukti sebagai imunogenik, dan di mana CAF01 lebih unggul dalam mendorong peneutralan antibodi serum dan tindak balas imun pengantara sel Th1 (16). Untuk mendorong tindak balas imun selular yang kuat, dan khususnya tindak balas sel CD8 T yang digabungkan dengan tindak balas sel T CD4, sebahagian daripada haiwan telah dirangsang dengan imunogen CT522/CAF01 selepas penyebuan dengan vektor Adeno pAL1112 (HuAd5-MOMP), sebuah Vektor cacar MVA, atau DNA plasmid pcDNA3.1 yang menyampaikan antigen MOMP Con E (14, 17). Ketiga-tiga vektor telah membuktikan imunogenik dalam NHP, dan baru-baru ini telah ditunjukkan bahawa strategi imunisasi yang menggabungkan ketiga-tiga vaksin ini dan vaksinasi penggalak akhir dengan tindak balas imun unggul yang disebabkan oleh antigen protein adjuvan dan secara konsisten meningkatkan pembersihan C. trachomatis intravaginal dalam C tetikus. model jangkitan trachomatis (14).

Dalam kajian ini, kami menunjukkan bahawa kombinasi berbeza strategi imunisasi berbilang komponen dengan kedua-dua vaksin protein, vaksin DNA dan vaksin vektor virus rekombinan dalam model primat bukan manusia (NHP), menghasilkan tindak balas imun yang berbeza. Tambahan pula, kami mendapati bahawa rejimen yang menggunakan penyebuan DNA dan protein (CTH522/ CAF01) meningkatkan pembersihan bakteria dipercepatkan berikutan cabaran kemaluan dengan Chlamydia trachomatis.

Keputusan

Semua rejim vaksinasi terbukti selamat dan mendorong tindak balas antibodi sistemik yang ketara

Sebanyak 30 kera cynomolgus telah divaksinasi berikutan rejim vaksinasi rangsangan perdana yang berbeza termasuk kedua-dua protein, DNA dan vaksin vektor dan laluan pentadbiran yang berbeza, seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 1 dan Rajah Tambahan 6-10). Semua haiwan kekal sihat semasa kajian dan tidak mengalami kesan buruk yang boleh diukur terhadap imunisasi. Di samping itu, kami tidak melihat turun naik yang ketara dalam berat atau suhu haiwan (Rajah Tambahan 1, 2).

Pada titik masa tetap selepas imunisasi, serum dikumpulkan dan tahap IgG spesifik CTH522 dalam serum dinilai oleh ELISA. Kesemua 5 kumpulan yang divaksin membentuk tindak balas IgG CTH522 serum yang ketara (Rajah 2). Walau bagaimanapun, kinetik adalah sedikit berbeza dalam 5 kumpulan yang divaksinasi. Semua haiwan dalam kumpulan CTH522/AlOH plus IN, CTH522/CAF01, dan CTH522/CAF01 plus IN menaikkan titer IgG yang ketara selepas hanya 1 imunisasi intramuskular (IM), dan titer IgG kekal signifikan ke titik pensampelan terakhir (Rajah 2A- C). Tahap IgG serum meningkat sedikit lebih perlahan dalam DNA ditambah CTH522 dan vektor ditambah kumpulan CTH522, di mana semua haiwan telah seroconverted pada minggu ke-8 dan minggu ke-4, masing-masing (Rajah 2D, E).

Kumpulan CTH522/AlOH plus IN, CTH522/CAF01 plus IN, dan CTH522/CAF01 telah meningkatkan IgG serum dengan ketara berikutan vaksin penggalak IM ke-3 pada minggu ke-16 (Rajah 2A C). Kumpulan DNA ditambah CTH522 dan vektor ditambah CTH522 meningkatkan tahap IgG serum dengan ketara berikutan penggalak IM protein/CTH522/ CAF01 pada minggu ke-20 (Rajah 2D, E). Tiada perbezaan yang ketara dilihat dalam tindak balas antibodi serum selepas tiga kali vaksin IM dengan CTH522 yang dirumus sama ada dengan adjuvant CAF01 atau AlOH (Rajah 2A, B), dan imunisasi penggalak bukan adjuvan intranasal (IN) dalam CTH522/AlOH ditambah IN dan Kumpulan CTH522/CAF01 plus IN tidak menyebabkan sebarang peningkatan ketara dalam titer antibodi IgG serum (Rajah 2A, B).

Kinetik tindak balas IgG serum mencerminkan kinetik/paras dalam cecair faraj, menunjukkan bahawa antibodi yang dikesan pada permukaan faraj berkemungkinan berasal daripada peredaran. Begitu juga, tahap IgG okular juga mengikuti tahap IgG serum dan, seperti yang diperhatikan dalam serum, menunjukkan bahawa penggalak IM dalam kumpulan DNA/vektor meningkatkan titer IgG okular (Tambahan Rajah 3).

Tindak balas antibodi serum diarahkan terhadap domain pembolehubah 1, 3, dan 4 dalam urutan MOMP

Penjelasan lanjut mengenai pengiktirafan epitope spesifik oleh antibodi serum, mengikut rejim vaksinasi yang berbeza, dinilai seterusnya. Serum dianalisis pada minggu ke-24, iaitu selepas vaksin penggalak intranasal dalam kumpulan 1 dan 2, dan selepas vaksin penggalak IM dalam kumpulan DNA dan vektor (kumpulan 4 dan 5). Analisis ini dilakukan dengan susunan peptida yang meliputi CTH522, yang terdiri daripada 15 mer peptida dengan 14 pertindihan asid amino

RAJAH 1 Reka bentuk kajian. Rajah menunjukkan kumpulan, vaksin dan laluan pentadbiran (intramuskular, IM, atau intranasal, IN) yang digunakan

RAJAH 2 (A–F) Serum CTH522 Tindak balas antibodi IgG. Kera Cynomolgus telah diimunisasi mengikut rejim rangsangan perdana yang berbeza (n=5 setiap kumpulan) dan serum dikumpulkan setiap minggu kedua. Antibodi IgG CTH522 spesifik dalam serum telah dinilai oleh ELISA dan dinyatakan di sini sebagai titer pada skala log10. Anak panah kelabu menunjukkan vaksinasi. Setiap baris mewakili satu haiwan. Kepentingan statistik ditunjukkan dengan asterisk *p < 0.05 dan **p < 0.01.

Secara amnya, peptida yang diiktiraf terletak berhampiran dan dalam domain pembolehubah (VDs 1,3,4) MOMP. Kumpulan CTH522/AlOH juga menunjukkan beberapa pengiktirafan rantau VD2. Semua haiwan mewujudkan tindak balas yang kuat terhadap rantau VD4 yang mengandungi epitope VD4 yang meneutralkan yang dipelihara (11). Kumpulan DNA menunjukkan pengecaman paling sempit dalam VD (Rajah 3), manakala kumpulan vektor menunjukkan corak pengecaman yang lebih luas sedikit. Kumpulan CTH522/CAF01 dan CTH522/AlOH menunjukkan pengiktirafan yang paling luas, terutamanya terhadap SvF dan SvG.

Antibodi serum dapat meneutralkan SvD, SvE, SvF secara in vitro

Untuk menilai keupayaan antibodi yang disebabkan oleh vaksin untuk menghalang jangkitan oleh C. trachomatis sel sasarannya, ujian peneutralan in vitro dilakukan. Menggunakan ujian ini, kami memeriksa peneutralan kedua-dua SvD, SvE, dan SvF. Serum dari minggu ke-24 digunakan untuk ujian, dan serum dari kumpulan naif digunakan sebagai kawalan. Kesemua lima kumpulan yang divaksin menunjukkan keupayaan untuk meneutralkan ketiga-tiga serovar (Rajah 4). Terhadap SvD kumpulan CTH522/AlOH tambah IN menunjukkan titer peneutralan tertinggi 50 peratus, manakala terhadap SvE kumpulan DNA/CTH522, diikuti rapat oleh kumpulan CTH522/AlOH tambah IN, menunjukkan titer peneutralan tertinggi. Walaupun semua kumpulan dapat meneutralkan SvF, titer peneutralan 50 peratus adalah lebih rendah sedikit untuk semua kumpulan terhadap serovar ini, berbanding SvD dan SvE. Kumpulan vektor ditambah CTH522 menunjukkan titer peneutralan 50 peratus terendah bagi semua kumpulan yang divaksinasi.

Rejim vaksinasi yang berbeza menyebabkan profil sel T yang berbeza

Untuk menilai tindak balas sel T yang disebabkan oleh vaksinasi, PBMC dikumpulkan semasa tempoh kajian dan disimpan secara krio. PBMC dari minggu 0/garis dasar dan minggu 22 telah dirangsang semula dengan kumpulan peptida (MOMP) dan dinilai untuk sitokin intraselular oleh pewarnaan sitokin intraselular (ICS) dan sesama sitometri. PBMC telah diwarnakan untuk penanda sel berikut: CD3, CD4, CD8, CD154, CD137 dan sitokin: IFN-g, IL-2, TNF-a, IL-22, IL{{14} }A. Strategi gating ditunjukkan dalam Rajah Tambahan 4, 5. Rangsangan PBMC dengan kumpulan peptida MOMP menyebabkan tindak balas yang ketara. Peratusan antigen spesifik CD154 ditambah CD4 ditambah sel T yang menyatakan kombinasi IL2, IFN-g, dan TNF-a meningkat 2 minggu selepas imunisasi terakhir (W22) dalam semua kumpulan yang divaksinasi (Rajah 5). Majoriti sel T ini adalah pelbagai fungsi dalam erti kata bahawa mereka menyatakan beberapa sitokin. Peratusan sel CD137 dan CD8 T spesifik antigen yang menghasilkan sitokin hanya meningkat dalam DNA dan Kumpulan Vektor (W22), (Rajah 6, menunjukkan kepelbagaian fungsi CD137 ditambah CD8 ditambah sel T). Dalam

RAJAH 3 Pemetaan epitope serum pada minggu ke 24. Kera Cynomolgus telah diimunisasi berikutan rejim rangsangan perdana yang berbeza (n=5 setiap kumpulan) dan serum dikumpul pada minggu ke 24. Tindak balas IgG tatasusunan peptida kepada CTH522 15mer bertindih peptida dibentangkan sebagai isyarat median untuk setiap kumpulan dengan peptida VD1 (oren), VD2 (hijau), VD3 (biru) dan VD4 daripada SvD, E, F dan G (merah) diserlahkan dalam warna.

RAJAH 4 Peneutralan serum in Vitro C. trachomatis SvD, SvE, dan SvF. Kera Cynomolgus telah diimunisasi mengikut rejim rangsangan perdana yang berbeza (n=5 setiap kumpulan) dan serum dikumpul selepas tamat jadual imunisasi (minggu 24). C. trachomatis SvD, SvE, dan SvF diinkubasi dengan serum daripada setiap haiwan dan kapasiti antibodi serum untuk menghalang jangkitan dinilai dengan mengeram campuran antibodi-bakteria ke dalam sel HaK dan pewarnaan untuk kemasukan. Garis hitam menunjukkan SvD, garis kelabu menunjukkan SvE dan garis putus-putus kelabu gelap menunjukkan SvF. Garis merah bertitik menunjukkan titer peneutralan 50 peratus timbal balik setiap serovar.

RAJAH 5 Tindak balas sel CD4 T. Analisis pelbagai fungsi minggu 22. Pengeluaran sitokin oleh CD4 ditambah sel T yang diuji oleh ICS. Tindak balas pelbagai fungsi selepas rangsangan dengan kumpulan peptida bertindih daripada MOMP diwakili. Saiz setiap pai adalah berkadar dengan peratusan sel CD154 tambah CD4 tambah T yang menyatakan sekurang-kurangnya satu sitokin, termasuk IFN-g, TNF-a dan IL-2, dan perkadaran sel yang menyatakan IFN-g dan /atau TNF-a dan/atau IL{11}} sitokin dipaparkan dalam setiap pai.

Pembersihan dipercepatkan akibat vaksinasi daripada jangkitan C. trachomatis SvD faraj

Untuk menilai keberkesanan perlindungan tindak balas imun yang disebabkan oleh vaksin, haiwan itu dicabar dengan jangkitan faraj dengan 5x107 IFU C. trachomatis SvD. Berikutan inokulasi, beban klamidia faraj ditentukan oleh pengesanan PCR DNA klamidia dalam swab faraj (Rajah 7). Jangkitan telah dibersihkan pada semua haiwan pada minggu ke-5 dalam kumpulan DNA tambah CTH522/CAF01 dan kumpulan Vector tambah CTH522, pada minggu ke-6 dalam kumpulan CAF01/ CTH522 dan minggu ke-8 dalam kumpulan CTH522/Alum DALAM kumpulan (Rajah 7). Dalam kumpulan kawalan, pada minggu ke-8, 80 peratus haiwan telah membersihkan jangkitan dan 1 haiwan kekal positif PCR pada minggu ke-9. Penggalak IN dalam kumpulan CTH522/CAF01 ditambah IN tidak meningkatkan perlindungan (Rajah 7). Ujian Log-rank (Mantel-Cox), membandingkan semua kumpulan menunjukkan nilai P 0,0994, dan dengan membandingkan setiap kumpulan secara individu terhadap kumpulan kawalan, hanya kumpulan DNA-CTH522 menunjukkan nilai P di bawah 0.05 (P nilai=0.0257).

Perbincangan

Kajian ini direka untuk mendorong imuniti selular (CD4 dan CD8) digabungkan dengan imuniti humoral dan untuk menyesuaikan fenotip imuniti adaptif dengan vaksin Chlamydia berasaskan MOMP. Kami menilai imunogenisitas dan keberkesanan perlindungan gabungan strategi imunisasi berbilang komponen dengan kedua-dua vaksin protein (CTH522, Con E), vaksin DNA dan vektor virus rekombinan (MVA MOMP), dan vaksin berasaskan vektor adeno, dalam primata bukan manusia ( model NHP).

Data menunjukkan bahawa semua rejim imunisasi adalah imunogenik dan mendorong tindak balas selular dan humoral yang terdiri daripada antibodi peneutral (Rajah 2-4). Vaksin protein CTH522 yang dirumus dengan sama ada CAF01 atau AlOH menunjukkan induksi pantas IgG khusus antigen sistemik (Rajah 2). Kami tidak melihat sebarang perbezaan yang ketara antara tindak balas yang disebabkan oleh vaksin adjuvan AlOH dan CAF01, yang selaras dengan tindak balas yang diperhatikan pada manusia dengan adjuvan ini (16). Rejim vaksinasi DNA dan vektor juga menyebabkan titer yang ketara bagi antibodi sistemik khusus antigen, yang meningkat dengan ketara berikutan imunisasi penggalak protein (Rajah 2). Selaras dengan keputusan kami, kajian terdahulu pada tikus juga menunjukkan bahawa rejim vaksinasi protein mendorong tahap antibodi spesifik antigen yang lebih tinggi berbanding dengan antigen vaksin DNA dan vektor dan juga meningkatkan titer untuk kumpulan ini dengan cekap (15).

MOMP mengandungi empat VD yang terdedah pada permukaan bentuk berjangkit Ct Kawasan ini adalah sasaran utama imuniti bergantung kepada antibodi, kedua-duanya melalui antibodi peneutralan dan imuniti pengantara reseptor Fc (18). Kajian terdahulu telah menunjukkan bahawa pemindahan pakai serum peneutral yang disebabkan oleh vaksin mengurangkan dengan ketara penumpahan bakteria awal berikutan jangkitan C. trachomatis (6, 11, 19–21). Oleh itu, antibodi nampaknya memainkan peranan dalam meneutralkan/mengawal inokulum awal, mungkin dengan kerjasama imuniti selular. Dengan pemetaan epitope sel B terperinci, kami mendapati pengiktirafan kawasan VD 1, 3, 4 dalam semua kumpulan vaksin. Kumpulan DNA dan vektor juga mengiktiraf kawasan VD1, 3 dan 4. Walau bagaimanapun, kumpulan ini menunjukkan pengiktirafan yang lebih sempit dalam VD ini berbanding dengan kumpulan CAF01 dan AlOH, mungkin mencerminkan bahawa antigen Con E dalam kumpulan vektor tidak mengandungi rantau VD4 SvF dan G (Rajah 3). Pengiktirafan rantau VD4 dikaitkan dengan keupayaan semua strategi vaksin untuk mendorong antibodi peneutralan terhadap SvD, SvE dan SvF.

Imunisasi parenteral dengan CTH522 dalam CAF01 dan AlOH menyebabkan tahap antibodi mukosa (IgG) yang ketara dalam saluran kemaluan dan mata dan tahap yang berkorelasi dengan titer serum (Tambahan Rajah 3, minggu 18). Vaksin DNA dan vektor sahaja tidak menyebabkan IgG mukosa, yang mencerminkan titer serum yang lebih rendah berbanding protein sahaja. Walau bagaimanapun, berikutan penggalak IM CTH522/CAF01, kumpulan ini meningkatkan ketara dalam serum Ab. tahap dan kedua-dua IgG faraj dan okular, setanding dengan protein sahaja (Tambahan Rajah 3, minggu 18). Penilaian selari CTH522 dalam sistem adjuvant penyebuan yang berbeza (AlOH dan CAF01) diikuti dengan dua kali rangsangan intranasal dengan antigen tidak mempunyai kesan rangsangan pada tahap antibodi mukosa (Tambahan Rajah 3, minggu 22). Oleh itu tahap IgG serum keseluruhan dicerminkan pada mukosa untuk semua kumpulan. Percubaan fasa-I manusia baru-baru ini juga menilai penilaian selari CTH522 dalam AlOH dan CAF01, diikuti dengan peningkatan intranasal dua kali. Di sini titer IgG mukosa juga berkorelasi baik dengan kepekatan IgG serum (16). Walau bagaimanapun, berbeza dengan penemuan dalam model NHP, percubaan manusia menunjukkan kesan peningkatan IN dalam kumpulan CAF01, menyebabkan paras IgG dan IgA meningkat. Malangnya, penilaian IgA tidak dapat dilakukan dalam kajian semasa, kerana bahan terhad dan isyarat positif palsu yang terhasil daripada antibodi sekunder tindak balas silang yang digunakan dalam ujian. Kedua-dua kajian menggunakan peranti VaxINator, yang direka untuk mengatomkan ubat hidung untuk penjerapan mukosa. Walau bagaimanapun, rongga hidung manusia adalah lebih luas daripada NHP dan boleh dibuat spekulasi bahawa ini boleh mempengaruhi pengedaran dan pengambilan antigen yang sekata.

Beberapa kajian dalam kedua-dua manusia dan tikus telah menunjukkan kepentingan imuniti sel Th1 T dan sitokin efektor IFN-g (8, 22-27). Sebaliknya, kurang diketahui tentang peranan perlindungan untuk sel T CD8 (28–33). Semua kumpulan vaksin menginduksi sel T CD4, tetapi hanya kumpulan DNA dan Vektor yang menunjukkan tindak balas sel T CD8 (Rajah 6 dan 7). Berdasarkan sitokin yang diukur, sel CD8 T terdiri daripada bilangan subset yang terhad berbanding sel T CD4, yang boleh dibahagikan kepada 6 atau lebih subset, yang kebanyakannya menghasilkan beberapa sitokin (Rajah 7). Sel T CD4 menunjukkan lebih banyak subset IL-2-yang menyatakan daripada sel T CD8, yang terutamanya termasuk hanya satu subset IL-2-yang menyatakan, subset yang menyatakan IL-2 bersama-sama dengan IFN-g dan TNF- a (Rajah 6). Sel CD8 T dikuasai oleh populasi besar yang hanya menghasilkan IFN-g, manakala subset sel CD8 T dominan yang lain menghasilkan kedua-dua IFN-g dan TNF-a. Corak sitokin di antara sel T CD4 dan sel T CD8 tidak seperti yang telah diperhatikan pada tikus, apabila menguji strategi vaksin yang dapat mendorong kedua-dua sel T CD4 dan CD8 (34).

Strategi serupa yang melibatkan vaksinasi DNA diikuti dengan meningkatkan dengan kompleks perangsang imun (ISCOM) protein MOMP (35) mendorong perlindungan kuat terhadap jangkitan paru-paru Chlamydia muridarum. Dalam kajian itu, DNA MOMP (atau MOMP/ISCOMS) menyebabkan perlindungan yang kurang ketara (35). Satu lagi kajian menunjukkan bahawa vaksinasi tikus dengan plasmid DNA MOMP, tanpa vaksin subunit, gagal melindungi daripada cabaran C. trachomatis genital (36), menunjukkan bahawa strategi DNA mendapat manfaat daripada ditambah dengan vaksin subunit yang mendorong sel T CD4 dan antibodi. . Perlu diingatkan bahawa vaksin DNA telah menunjukkan profil imunogenisiti yang agak rendah dalam ujian klinikal manusia, yang mungkin perlu ditangani dalam kajian masa depan (37).

Walaupun dos jangkitan Ct yang digunakan dalam kajian ini adalah lebih tinggi daripada dos yang dialami oleh jangkitan semula jadi pada manusia, ia dipilih untuk memastikan semua haiwan dijangkiti, yang penting memandangkan bilangan haiwan yang kecil dalam setiap kumpulan. Dos adalah selaras dengan dos yang digunakan dalam kajian terdahulu, yang berkisar antara 106 hingga 108 (38, 39). Menurunkan dos dalam model kami membawa kepada peningkatan variasi mengenai pengambilan jangkitan (data tidak ditunjukkan). Dos yang lebih rendah yang diberikan berulang kali juga telah digunakan (40, 41). Walau bagaimanapun, ini bukan protokol yang optimum apabila objektifnya adalah untuk menguji kecekapan perlindungan vaksin, terutamanya jika imuniti semula jadi adalah pengantara perlindungan sebelum protokol jangkitan telah selesai. Ia boleh membuat spekulasi bahawa menggunakan dos yang tinggi mungkin memerlukan tindak balas imun yang mengandungi semua lengan sistem imun, seperti sel CD4 T spesifik antigen, sel T CD8 serta antibodi peneutralan, supaya dapat mengurangkan bakteria. peringkat. Itu juga akan menjelaskan mengapa antibodi peneutral yang diinduksi dalam semua kumpulan tidak membawa kepada perlindungan yang ketara dalam semua kumpulan [walaupun kami melihat trend perlindungan awal dalam kebanyakan kumpulan, di mana antibodi dianggap memainkan peranan (Rajah 7)] . Kami sedang cuba membangunkan model yang lebih berkaitan secara fizikal.

Diambil bersama, data kami menunjukkan bahawa antigen CTH522 yang dirumuskan dalam adjuvant CAF01 atau AlOH boleh mendorong kedua-dua sel T pelbagai fungsi dan meneutralkan antibodi dalam NHP. Selain itu, keputusan kami mencadangkan bahawa strategi vaksin heterolog yang terdiri daripada vaksin DNA dan vaksin subunit CTH522/CAF01 mewakili strategi vaksin yang menjanjikan untuk induksi tindak balas imun pelbagai rupa dengan tahap peneutralan Abs yang tinggi digabungkan dengan tindak balas sel CD4 dan CD8 yang kuat yang boleh mempercepatkan pembersihan jangkitan C. trachomatis dengan ketara.

Minta lebih lanjut:

E-mel:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/Tel: tambah 86 15292862950

Kedai Wecistanche

https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop