Melatonin Daripada Mikroorganisma, Alga, Dan Tumbuhan Sebagai Alternatif Yang Mungkin Kepada Melatonin Sintetik Bahagian 1

Abstrak: Makanan tambahan melatonin digunakan secara meluas di seluruh dunia, dengan negara maju sebagai pengguna terbesar, dengan anggaran kadar pertumbuhan tahunan kira-kira 10 peratus sehingga 2027, terutamanya di negara membangun. Penggunaan meluas melatonin terhadap gangguan tidur dan masalah tertentu, seperti jet lag, telah ditambah kepada aplikasi lain, seperti anti-penuaan, anti-tekanan, pengaktifan sistem imun, antikanser, dan lain-lain, yang telah mencetuskan penggunaannya, secara amnya tanpa preskripsi. Industri kimia kini meliputi 100 peratus keperluan pasaran melatonin. Didorong oleh sektor yang mempunyai tabiat penggunaan yang lebih semula jadi, kemungkinan mendapatkan melatonin daripada tumbuhan, dipanggil phytomelatonin, timbul beberapa tahun yang lalu. Baru-baru ini, industri farmaseutikal telah membangunkan mikroorganisma yang diubah suai secara genetik yang keupayaannya untuk menghasilkan melatonin semula jadi dalam bioreaktor telah dipertingkatkan. Kertas kerja ini mengkaji aspek sintesis kimia dan biologi melatonin untuk kegunaan manusia, terutamanya sebagai makanan tambahan. Kebaikan dan keburukan mendapatkan melatonin daripada mikroorganisma dan fitomelatonin daripada tumbuhan dan alga dianalisis, serta kelebihan melatonin semula jadi, mengelakkan bahan kimia yang tidak diingini daripada sintesis kimia melatonin. Akhir sekali, aspek ekonomi dan kualiti produk baharu ini, yang sebahagiannya sudah dipasarkan, dianalisis.

Glikosida cistanche juga boleh meningkatkan aktiviti SOD dalam tisu jantung dan hati, dan dengan ketara mengurangkan kandungan lipofuscin dan MDA dalam setiap tisu, dengan berkesan menghilangkan pelbagai radikal oksigen reaktif (OH-, H₂O₂, dll.) dan melindungi daripada kerosakan DNA yang disebabkan oleh OH-radikal. Glikosida phenylethanoid cistanche mempunyai keupayaan penghapusan radikal bebas yang kuat, keupayaan pengurangan yang lebih tinggi daripada vitamin C, meningkatkan aktiviti SOD dalam penggantungan sperma, mengurangkan kandungan MDA, dan mempunyai kesan perlindungan tertentu pada fungsi membran sperma. Polisakarida cistanche boleh meningkatkan aktiviti SOD dan GSH-Px dalam eritrosit dan tisu paru-paru tikus senescent eksperimen yang disebabkan oleh D-galaktosa, serta mengurangkan kandungan MDA dan kolagen dalam paru-paru dan plasma, dan meningkatkan kandungan elastin, mempunyai kesan penghapusan yang baik pada DPPH, memanjangkan masa hipoksia pada tikus senescent, meningkatkan aktiviti SOD dalam serum, dan melambatkan degenerasi fisiologi paru-paru dalam tikus senescent secara eksperimen Dengan degenerasi morfologi selular, eksperimen telah menunjukkan bahawa Cistanche mempunyai keupayaan antioksidan yang baik. dan berpotensi menjadi ubat untuk mencegah dan merawat penyakit penuaan kulit. Pada masa yang sama, echinacoside dalam Cistanche mempunyai keupayaan yang ketara untuk menghilangkan radikal bebas DPPH dan boleh menghilangkan spesies oksigen reaktif, menghalang degradasi kolagen yang disebabkan oleh radikal bebas, dan juga mempunyai kesan pembaikan yang baik pada kerosakan anion radikal bebas timin.

Klik pada Kesan Sampingan Cistanche Reddit

【Untuk maklumat lanjut: david.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

Kata kunci: makanan tambahan; GMO; melatonin; mikroorganisma; fitomelatonin; bahan mentah tumbuhan

1. Pengenalan

Melatonin (N-acetyl-5-methoxytryptamine) is widely used around the world as a  dietary supplement. In general, melatonin is used as a sleep aid supplement, a mild tranquilizer, a generalist antioxidant, and an anticancer and anti-aging component, among others [1]. According to the American Psychiatric Association (APA), approximately one-third of adults suffer from insomnia during their lifetime [2]. It manifests itself in ongoing problems falling asleep and staying asleep. Therefore, it is very likely that the use of synthetic melatonin will spread. In 2019, the global production of synthetic melatonin,  which was around 4000 tons, accounted for around 1.3 billion USD. This vast market is fully assisted by the chemical melatonin, whose synthesis process is very cheap, effective, and,  therefore, lucrative. The melatonin market is expected to grow at a CAGR (compound annual growth rate) of >10 peratus dalam tempoh 5 tahun akan datang. Dengan peningkatan permintaan yang ketara ini, masalah insomnia yang dijana oleh pandemik-19 COVID adalah sangat relevan [3]. Amerika Utara mempunyai penggunaan tertinggi setakat ini, diikuti oleh Eropah. Pasaran melatonin global dikawal terutamanya oleh beberapa syarikat utama, seperti BASF, Aspen Pharmacare Australia, Nature's Bounty, Pfizer Inc., Natrol LLC, Aurobindo Pharma dan Biotics Research Co. Ambil perhatian bahawa penggunaan melatonin untuk tujuan perubatan melibatkan kira-kira 50 peratus daripada melatonin sintetik yang dihasilkan; selebihnya mempunyai aplikasi kimia dan industri [2,4].

Secara biologi, melatonin adalah molekul yang tersebar secara meluas dalam semua kerajaan organisma hidup [5]. Ditemui pada tahun 1958 dalam kelenjar pineal lembu [6] dan kemudian pada manusia [7], ia adalah salah satu biomolekul yang paling banyak dikaji, dan pelbagai fungsinya diketahui, terutamanya dalam mamalia [8,9], tetapi juga dalam ikan. [10–12], ayam itik [13,14], dan invertebrata [15]. Dalam sel haiwan dan manusia, melatonin bertindak sebagai antioksidan-peranan yang relevan dikaitkan dengannya pada tahun 1993 [16-18]. Melatonin bertindak sebagai pelindung sel yang menarik dalam situasi tertekan, dalam pelbagai aspek fisiologi pada manusia, dan, menurut pelbagai kajian, memberi manfaat kepada peningkatan dalam pelbagai penyakit dan disfungsi. Rajah 1 menunjukkan beberapa tindakan perlindungan dan pengawalseliaan melatonin pada manusia dan membentangkan melatonin sebagai molekul pleiotropik yang menarik, menonjol kerana kaitannya, peranan melatonin dalam pengawalan metabolisme lipid dan glukosa, mendorong rintangan insulin malam dan insulin harian sensitiviti. Kesan ini nampaknya dikaitkan dengan puasa malam dan pemakanan harian, menghalang penambahan berat badan yang berlebihan [19]. Kami juga menyerlahkan peranannya sebagai agen anti-onkogenik, menghalang pertumbuhan, percambahan, dan metastasis beberapa tumor. Rawatan tumor dengan melatonin meningkatkan sensitiviti kemoterapi dan radioterapi, bertindak sebagai molekul sinergi dalam mengawal sel-sel kanser. Selain itu, melatonin mengurangkan kerosakan akut pada sel normal, melindungi mereka daripada ketoksikan dadah, mungkin dengan meningkatkan tindak balas imun [20-22]. Antara disfungsi dan penyakit di mana kesan melatonin yang bermanfaat telah dikaji adalah neurologi, seperti Alzheimer, Parkinson, fibromyalgia, kemurungan, gangguan hiperaktif kekurangan perhatian, autisme, dan migrain; masalah kesihatan kardiovaskular, termasuk hiperkolesterolemia, hipertensi, sindrom metabolik, dan ketidakseimbangan glisemik; masalah kesihatan gastrousus, seperti refluks gastroesophageal, ulser, dan sindrom usus yang merengsa; masalah kesihatan imunologi, seperti multiple sclerosis, tindak balas autoimun (tekanan olahraga, tekanan toksik, psoriasis, dll.), sepsis, COVID-19, dsb. [3,23–26]; dan juga osteopenia [27], sarcopenia [28], pra-eklampsia, kesuburan, sindrom ovari polikistik, dan menopaus, antara lain [29–32]. Walau bagaimanapun, walaupun melatonin adalah molekul yang telah dikaji secara meluas sejak tahun 1950-an, kajian yang dijalankan memerlukan lebih banyak ujian dua buta klinikal dan meluas untuk menjelaskan tindakan pleiotropiknya yang kadang-kadang mengelirukan [33,34].

Walau bagaimanapun, melatonin terkenal sebagai hormon yang mengawal tidur. Tahap berayun dalam aliran darah mengikut tempoh cahaya dan kegelapan (irama sirkadian) akibat pembebasan melatonin oleh kelenjar pineal adalah salah satu aspek yang paling dikaji dan diketahui bagi molekul ini. Peningkatan tahap melatonin darah semasa tempoh pertama tidur kepada sekitar 150-220 kutub/mL bertindak pada permulaan tidur, mengurangkan kependaman dan pemecahan tidur serta meningkatkan tempoh dan kualiti tidur [1,35,36]. Melatonin bertindak sebagai penyegerak dalaman kitaran tidur-bangun sirkadian dan irama bermusim. Dalam pengertian ini, banyak gangguan tidur telah dirawat dengan melatonin, termasuk sindrom fasa tidur tertunda, gangguan tidur kerja syif malam, gangguan afektif bermusim, gangguan tidur pada orang buta dan penuaan, dan gangguan patofisiologi kanak-kanak, dengan peningkatan ketara dalam kualiti tidur [ 37–41]. Gangguan yang paling meluas yang dirawat dengan melatonin ialah jet lag-penyahfasa dalam irama tidur-bangun berikutan penerbangan trans-lautan [42-45]. Mungkin, penekanan dalam kajian tentang peranannya sebagai pengawal selia tidur telah menyebabkan kekurangan kajian tentang kemungkinan peranannya dalam banyak aspek fisiologi dan klinikal yang lain.

Melatonin dalam tumbuhan, yang dipanggil phytomelatonin, ditemui serentak oleh tiga kumpulan penyelidikan dalam pelbagai bahan tumbuhan pada tahun 1995 [46-48]. Istilah phytomelatonin, yang merujuk kepada melatonin yang berasal dari sayuran (tumbuhan dan alga), digunakan untuk membezakannya daripada haiwan dan/atau melatonin sintetik. Istilah ini sangat meluas dan digunakan secara berterusan dalam kajian fitokimia, fisiologi tumbuhan, botani, kimia makanan, dsb., pada tumbuhan melatonin. Dalam tumbuhan, fitomelatonin juga merupakan molekul pleiotropik, membentangkan pelbagai peranan dalam tindak balas fisiologi yang pelbagai (Rajah 1). Peraturan oleh melatonin dari aspek seperti fotosintesis, termasuk pengambilan CO2 stomata dan penjimatan air, karbohidrat, lipid, nitrogen, dan metabolisme sulfur, dan metabolisme fenol, flavonoid dan terpenoid ringkas, telah menunjukkan minat yang penting dalam proses asas dan teknikal vegetatif. (percambahan, pertumbuhan tumbuhan, pengakaran, percabangan, dsb.) dan perkembangan pembiakan, termasuk kesuburan, parthenokarpi, pembangunan benih dan buah, pematangan, penuaan, dan pemuliharaan buah-buahan dan bunga potong [49–53]. Secara amnya, melatonin mengawal proses ini melalui tindakan rangkaian hormon tumbuhan, menaikkan/menurunkan beberapa faktor biosintesis, katabolik, dan transkripsi yang berkaitan dengan hormon tumbuhan [54-56]. Salah satu aspek kepentingan agronomik dan bioteknologi terbesar ialah peranan fitomelatonin sebagai penggalak toleransi terhadap tegasan biotik dan abiotik [57-68] (Rajah 1). Pada masa ini, phytomelatonin dipersembahkan sebagai alat mesra alam yang menarik untuk mengawal penyakit biologi dan untuk memudahkan rintangan/penyesuaian tumbuhan terhadap/menentang perubahan iklim.

2. Biosintesis Melatonin

Melatonin adalah sebatian asetilasi yang diperoleh daripada serotonin. Kedua-dua amina indolik disintesis daripada asid amino triptofan dalam laluan biosintetik yang telah dikaji secara meluas dalam kedua-dua haiwan dan tumbuhan [69,70]. Dalam tumbuhan, tryptophan ditukar kepada tryptamine oleh enzim tryptophan decarboxylase (TDC) (Rajah 2). Tryptamine kemudiannya ditukar kepada 5-hydroxytryptamine (serotonin) oleh tryptamine 5-hydroxylase (T5H), enzim yang telah dikaji secara meluas dalam beras, dan yang boleh bertindak dengan banyak substrat, walaupun ini belum dikaji. secara mendalam. Serotonin adalah N-asetilasi oleh serotonin N-acetyltransferase (SNAT). N-acetylserotonin kemudiannya dimetilasi oleh acetylserotonin methyl transferase (ASMT)—sebuah hydroxy indole-O-methyltransferase—yang menghasilkan melatonin. Dalam tumbuhan, metilasi N-asetilserotonin juga boleh dilakukan oleh asid caffeic O-methyltransferase (COMT), kelas enzim yang boleh bertindak pada pelbagai substrat, termasuk asid caffeic dan quercetin [71]. Serotonin juga boleh diubah menjadi 5-methoxy tryptamine oleh ASMT/COMT untuk menjana melatonin selepas tindakan SNAT. Laluan ini akan berlaku dalam keadaan penuaan dan/atau tekanan [70,72]. Tambahan pula, melatonin boleh dihasilkan melalui pembentukan N-acetyl tryptamine oleh SNAT, yang akan ditukar menjadi N-acetylserotonin oleh T5H [73], walaupun laluan ini tidak ditunjukkan, mungkin kerana T5H ialah enzim yang paling kurang dikaji bagi laluan tersebut. (Rajah 2). Menariknya, sehingga empat gen pengekodan histone deacetylases (DAC) telah dikenal pasti dalam pokok padi yang boleh membalikkan langkah daripada serotonin kepada N-acetylserotonin dan daripada 5-methoxy tryptamine kepada melatonin. DAC, yang dinyatakan dalam kloroplas, mempamerkan aktiviti enzim ke arah N-asetilserotonin, N-asetil tryptamine, dan melatonin, dengan aktiviti deasetilase tertinggi untuk N-asetil tyramine [74].

Dalam sel haiwan, serotonin terbentuk daripada 5-hydroxytryptophan selepas tindakan urutan tryptophan hydroxylase (TPH) dan TDC. Walaupun TPH tidak dikesan dalam tumbuhan, kehadiran 5-hydroxytryptophan mencadangkan bahawa beberapa aktiviti enzimatik, seperti TPH, bertindak pada tahap yang lebih rendah dalam sel tumbuhan. Selain itu, melatonin boleh dijana melalui pembentukan 5-methoxy tryptamine, terutamanya dalam keadaan tekanan seperti yang dicadangkan oleh beberapa pengarang, menunjukkan bahawa laluan biosintesis melatonin mungkin mengikuti pelbagai laluan alternatif berbanding dengan sel haiwan, dengan keupayaan yang lebih besar untuk menyesuaikan diri. kepada perubahan metabolik dalam tumbuhan [72,75]. Semua enzim yang dinamakan telah dikesan dan dicirikan dalam beras dan Arabidopsis, kecuali TPH, yang terkenal pada haiwan tetapi tidak pada tumbuhan. Namun begitu, sesetengah pengarang telah mencadangkan bahawa T5H boleh bertindak sebagai hidroksilase dengan kekhususan substrat yang rendah dan mampu bertindak dalam semua langkah hidroksilasi yang diterangkan [70,76-79]. Kekhususan substrat luas yang sama ini juga boleh dikaitkan dengan enzim SNAT, ASMT, dan COMT. Perantaraan melatonin dihasilkan dalam pelbagai petak subselular, seperti sitoplasma, retikulum endoplasma, mitokondria, dan kloroplas, yang menentukan langkah enzimatik berikutnya [80,81].

Dalam mikroorganisma, terdapat beberapa kajian mengenai laluan biosintesis melatonin [82]. Saccharomyces dan bakteria (Geobacillus, Bacillus, dan Pseudomonas) menghasilkan kedua-dua serotonin dan melatonin pada kepekatan yang berbeza [83-89]. Selain itu, pengeluaran melatonin telah dibuktikan oleh pengarang lain dalam budaya yis Pichia kluyveri, Saccharomyces cerevisiae, dan S. uvarum dan bakteria (Agrobacterium, Pseudomonas, Variovorax, Bacillus, dan Oenococcus) [85,90,91] dan sebelum ini dalam bakteria fotosintetik Rhodospirillum rubrum [92] dan Erythrobacter longus [93] dan Escherichia coli [94].

Dalam yis Saccharomyces cerevisiae, tidak seperti tumbuhan dan haiwan, nampaknya biosintesis 5-hydroxytryptophan daripada triptofan tidak berlaku. Menariknya, beberapa peringkat yang diterangkan kelihatan boleh diterbalikkan dalam S. cerevisiae, seperti antara 5-hydroxytryptophan dan serotonin, N-acetylserotonin dan melatonin, dan 5-methoxy tryptamine dan melatonin [90,95], seperti yang diperincikan dalam Rajah 2. Dalam Bacillus amyloliquefaciens SB-9 dan Pseudomonas fluorescens RG11, 5- hydroxytryptophan, serotonin, dan N-acetylserotonin, tetapi tiada tryptamine dikesan [85,86]. Jadi, beberapa gen asal bakteria telah digunakan untuk membina strain Escherichia coli yang menghasilkan melatonin. Sebagai contoh, gen DDC, yang mengekodkan dekarboksilase asid L-amino aromatik daripada Candidatus Koribacter serba boleh Ellin 345 dan Draconibacterium orientale, dan gen AANAT, mengekodkan alkylamine N-acetyltransferase daripada Streptomyces griseofuscus, telah diuji [96,97]. Tidak dinafikan, kajian lanjut diperlukan untuk menjelaskan laluan biosintetik lengkap melatonin dalam mikrob prokariotik dan eukariotik yang berbeza [82].

3. Melatonin Biologi berbanding Melatonin Sintetik

Pada mulanya, melatonin diperoleh untuk kajian eksperimen dan klinikal daripada sumber haiwan (terutamanya daripada kelenjar pineal dan air kencing), dengan akibatnya risiko penularan virus [98,99]. Teknik-teknik ini telah ditarik balik apabila melatonin boleh diperolehi melalui sintesis kimia [100]. Pada masa ini, semua melatonin yang digunakan untuk tujuan industri dan perubatan diperoleh dengan menggunakan kaedah sintesis kimia. Kaedah-kaedah ini, yang menimbulkan masalah serius pada tahun 1980-an, termasuk kematian akibat kehadiran produk sampingan sintesis daripada tryptophan [101], adalah lebih selamat dan lebih cekap hari ini. Walau bagaimanapun, persediaan melatonin telah menggambarkan kehadiran keseluruhan set produk sampingan yang tidak diingini kerana sifat toksiknya. Rajah 3 menunjukkan tiga laluan sintesis kimia yang paling biasa digunakan untuk melatonin dan hasil sampingan yang dijana dalam sintesisnya [102]. Sintesis melatonin daripada derivatif tryptophan (Rajah 3, Skim A) menjana produk sampingan toksik yang kadangkala menyebabkan penyakit ketara, seperti sindrom eosinofilia-myalgia [101,103,104], manakala kaedah terkini (Rajah 3, Skim B) untuk sintesis melatonin daripada phthalimide [105] menimbulkan keraguan penting tentang ketoksikan beberapa produk sampingan yang dihasilkan [106]. Di samping itu, tindak balas indole Fischer daripada allylamine (Rajah 3, Skim C) membentangkan bahan tindak balas berbahaya dan toksik [107].

Sebaliknya, mendapatkan melatonin daripada sumber biologi bukan haiwan dipersembahkan sebagai komitmen yang kuat untuk masa depan, bukan untuk menggantikan melatonin sintetik tetapi untuk menjadi pelengkap yang lebih semula jadi, dan sumber alternatif [108].

4. Strategi Mendapatkan Melatonin Biologikal

Melatonin hadir dalam semua spesies biologi yang diketahui, daripada prokariot kepada eukariota, termasuk yis, alga, kulat, dan tumbuhan, serta haiwan [80,109–111]. Di bawah, metodologi yang dibangunkan dalam mikroorganisma dan tumbuhan sebagai sumber melatonin semula jadi yang mungkin dibentangkan.

4.1. Melatonin daripada Mikroorganisma

a. Saccharomyces

Pendekatan pertama untuk penghasilan melatonin biologi baru-baru ini telah dibuat oleh sekumpulan syarikat farmaseutikal Denmark Novo Nordisk menggunakan Saccharomyces cerevisiae yang diubah suai secara genetik (Jadual 1, produk #1). Orang Jerman dan rakan sekerja membina laluan melatonin rekombinan dalam strain yis yang mengandungi gen heterolog yang mengekod beberapa enzim biosintesis melatonin dan laluan sokongan faktor bersama [112]. Yis transgenik mengkodifikasikan gen berbeza daripada Rattus norvegicus, Lactobacillus ruminis, Pseudomonas aeruginosa, Homo sapiens, Schistosoma mansoni, Bos Taurus, dan Salmonella enterica. Memberi makan ragi hanya glukosa dan asetil Co-A, pengeluaran melatonin mencapai 14.5 mg·L −1 pada 76 jam. Namun begitu, menurut pengarang lain, beberapa masalah, seperti pengumpulan N-asetilserotonin yang tinggi dalam sel yis, ekspresi gen yang tidak seimbang, dan pengenalpastian beberapa perantara toksik yang berpotensi, mesti ditangani [113].

b. Escherichia coli

Dalam pendekatan kedua, kali ini menggunakan budaya Escherichia coli yang diubah suai transgenik (Jadual 1, produk #2), Novo Nordisk melaporkan pengeluaran melatonin biologi daripada strain heterologus yang dibina daripada rekombinan E. coli, termasuk beberapa gen seperti gen TDC daripada Candidatus Koribacter serba boleh, gen SNAT daripada Streptomyces griseofuscus, dan gen ASMT manusia. Selain itu, beberapa gen berkaitan triptofan telah disekat atau dipadamkan untuk mengelakkan penindasan, degradasi, dan pengangkutan eksport yang tidak diingini [96,97]. Selepas beberapa penambahbaikan terikan dan memberi makan dengan garam mineral, vitamin dan antibiotik, sel yang dikultur menghasilkan melatonin pada ~1 g·L −1 menggunakan glukosa sebagai sumber karbon tunggal dan sehingga 2 g·L −1 dalam sel yang diberi makan tryptophan, dengan tahap produk sampingan yang boleh diabaikan. Oleh itu, menurut pengarang, strain GMO E. coli ini mungkin menjadi asas untuk pengeluaran melatonin komersil biologi masa depan menggunakan kilang sel mikrob. Namun begitu, penggunaan organisma transgenik untuk menghasilkan bahan untuk kegunaan manusia boleh menjadi masalah apabila matlamatnya adalah untuk membawa produk semula jadi kepada pengguna yang peka atau pengguna anti-GMO.

c. Bakteria asid laktik

Melatonin juga dihasilkan secara industri melalui penapaian mikrob, seperti yang dilaporkan dalam [114]. Biosintesis melatonin diarahkan oleh bakteria asid laktik berbilang strain, seperti Lactobacillus sp. (L. brevis, acidophilus, bulgaricus, casei subspesies. sake, fermentum, helveticus subspec. jogorti, plantarum); Bifidobacterium sp. (B. breve spp. breve, longum spp. infantis); Enterococcus sp. (E. faecalis TH10); dan Streptococcus thermophilus. Produk yang dihasilkan di bawah teknologi ini dipasarkan oleh Quantum Nutrition Labs (Texas, USA) sebagai Melatonin Drops, Qultured™, yang mengandungi 8 mg melatonin yis (Jadual 1, produk #3).

d. Chlorella

Produk yang diperbuat daripada alga ialah Herbatonin® (Jadual 1, produk #4), dirumus dalam pil yang mengandungi 0.3 atau 3 mg fitomelatonin, walaupun di Eropah ia dipasarkan dalam dos 0.3 dan 1.9 mg, mengikut undang-undang EU. Formulasi ini mengandungi beberapa spesies tumbuhan seperti beras (Oryza sativa L.) dan alfalfa (Medicago sativa L.), bersama-sama dengan alga hijau Chlorella pyrenoidosa dan C. vulgaris. Data kami menunjukkan bahawa mikroalga ini mengandungi tidak lebih daripada 2–15 ng·g DW−1 [115], dan spesies tumbuhan pendamping mengandungi tahap fitomelatonin yang sangat rendah, 1–5 ng·g−1 dalam beras dan 16 ng·g −1 dalam alfalfa [116]. Kehadiran Chlorella menunjukkan bahawa phytomelatonin terutamanya diperolehi dengan mengkultur alga hijau dalam bioreaktor, mungkin diberi makan dengan prekursor seperti triptofan, dengan cara yang sama seperti dalam Achillea millefolium [117], walaupun tiada data yang diterbitkan mengenai kaedah mendapatkan ekstrak yang kaya dengan fitomelatonin ini, hanya pencirian biokimia mereka [118]. Juga tiada data tentang kawalan kehadiran cyanotoxin dalam ekstrak ini disebabkan oleh kemungkinan pencemaran oleh cyanobacteria (alga biru-hijau). Sianotoksin ini mempunyai beberapa kesan tidak diingini yang berkaitan dengan kekarsinogenan, hepatotoksisiti, dan neurotoksisiti, antara lain. Oleh itu, pengesanan sianotoksin dalam beberapa makanan tambahan alga menguatkan keperluan untuk kawalan kualiti yang lebih baik [119,120].

【Untuk maklumat lanjut: david.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】