Insight Mechanistic In To Diosmin-Induced Neuroprotection Dan Peningkatan Memori dalam Intracerebroventricular-Quinolinic Acid Model Tikus: Kebangkitan Fungsi Mitokondria Dan Antioksidan Bahagian 1

Neurodegenerasi adalah peristiwa terakhir selepas rangkaian mekanisme patogenik dalam beberapa gangguan otak yang membawa kepada kehilangan kognitif dan neurologi. Asid Quinolinic (QA) ialah excitotoxin yang diperoleh daripada laluan metabolisme tryptophan dan dikaitkan dengan beberapa penyakit, seperti Alzheimer, Parkinson, Huntington, dan penyakit psikosis.

Apabila orang semakin tua, neurodegeneration secara beransur-ansur menjadi fenomena biasa. Neurodegenerasi boleh memberi kesan buruk kepada kebolehan fizikal dan mental seseorang, terutamanya pada ingatan. Walau bagaimanapun, kita boleh melambatkan neurodegeneration dan meningkatkan ingatan melalui tindakan.

Pertama, mengekalkan sikap positif terhadap kehidupan boleh membantu mengurangkan neurodegenerasi. Kajian telah menunjukkan bahawa minda yang positif boleh menggalakkan pertumbuhan dan pembinaan semula neuron, dengan itu meningkatkan fungsi kognitif manusia. Lagipun, perasaan gembira mempunyai kesan positif terhadap kesihatan otak.

Kedua, kita boleh meningkatkan ingatan dan menggalakkan penjanaan semula saraf melalui senaman. Senaman yang betul boleh merangsang neuron di otak untuk membuat sambungan baru, dengan itu meningkatkan kebolehan kognitif dan ingatan orang. Selain itu, bagi warga emas, senaman juga boleh mengurangkan selera saraf yang menyebabkan neurodegeneration, yang membantu mengekalkan kesihatan otak.

Selain itu, mengekalkan kepelbagaian dan cabaran aktiviti harian juga merupakan cara penting untuk meningkatkan daya ingatan. Aktiviti harian yang kerap dan berulang akan menjadikan aktiviti otak sangat mekanikal dan monoton. Sebaliknya, pelbagai aktiviti meremajakan otak dan meningkatkan kebolehan kognitif dan ingatan manusia.

Ringkasnya, walaupun neurodegeneration boleh memberi kesan buruk pada ingatan orang, kita boleh mengambil tindakan yang sepadan untuk memperlahankan kesan ini. Pemikiran positif, senaman yang betul, dan pelbagai aktiviti boleh meningkatkan ingatan dan menggalakkan pertumbuhan semula saraf. Marilah kita menghargai dan melindungi otak kita untuk memastikan mereka sihat dan muda. Dapat dilihat bahawa kita perlu meningkatkan daya ingatan. Cistanche boleh meningkatkan ingatan dengan ketara kerana ia juga boleh mengawal keseimbangan neurotransmitter, seperti meningkatkan tahap asetilkolin dan faktor pertumbuhan, yang sangat penting untuk ingatan dan pembelajaran. Selain itu, Cistanche juga boleh meningkatkan aliran darah dan menggalakkan penghantaran oksigen, yang dapat memastikan otak memperoleh nutrisi dan tenaga yang mencukupi, seterusnya meningkatkan daya hidup dan daya tahan otak.

Klik tahu cara untuk meningkatkan ingatan anda

Diosmin (DSM) ialah flavonoid semulajadi yang mempunyai sifat sedemikian yang boleh menghentikan perjalanan perkembangan neurodegeneratif. Dalam kajian lepas, penghapusan radikal bebas, bersama-sama dengan sifat-sifat, seperti sifat antihiperglisemik, anti-radang dan vasoaktif, DSM adalah pragmatik. Oleh itu, dalam eksperimen semasa, aktiviti neuroprotektif DSM telah disiasat dalam prototaip tikus QA.

QA ditadbir melalui laluan intracerebroventricular (QA-ICV) pada tikus pada hari pertama, dan DSM (50 dan 100 mg/kg, laluan intraperitoneal) diberikan dari hari 1 hingga 21. Memori, gaya berjalan, fungsi sensorimotor, dan biomarker kemusnahan oksidatif dan fungsi mitokondria dinilai di seluruh otak. Keputusan menunjukkan kemerosotan ketara prestasi sensorimotor, gaya berjalan, dan ingatan bekerja dan jangka panjang dalam tikus oleh QA-ICV. Anomali tingkah laku ini telah dilemahkan dengan ketara oleh DSM (50 dan 100 mg/kg) dan donepezil (ubat standard).

Penurunan jisim badan (g), diet dan pengambilan air akibat QA-ICV turut dilemahkan oleh rawatan DSM atau donepezil. QA-ICV menghalang aktiviti kompleks mitokondria I dan II dan menyebabkan peningkatan dalam tekanan oksidatif dan nitrosatif bersama-sama dengan pengurangan antioksidan endogen dalam otak. DSM yang bergantung kepada dos meningkatkan fungsi mitokondria dan mengurangkan tekanan oksidatif dalam tikus yang dirawat QA-ICV. DSM boleh menjadi alternatif yang mungkin dalam merawat gangguan neurodegeneratif dengan patologi disfungsi mitokondria yang mendasari.

1. Pengenalan

Kemerosotan saraf progresif dengan defisit kognitif dan neurologi yang serentak adalah manifestasi utama beberapa penyakit otak, seperti Alzheimer (AD), Parkinson (PD), dan penyakit Huntington (HD).

Kemerosotan sinaptik dan potensiasi berpanjangan terjejas kerana penurunan ekspresi neurotropin (cth, faktor neurotropik, kalsineurin, dan faktor perkembangan saraf), penyimpangan neurokimia (cth, asetilkolin, glutamat, monoamin, dan asid c-aminobutyric), neuropeptida (cth, oksitosin, bahan P, somatostatin, dan orexin), dan perubahan dalam persekitaran dalaman otak membawa kepada kemerosotan ingatan jangka pendek dan jangka panjang [1].

Laluan pengujaan yang dimediasi oleh reseptor glutamatergik sering dikaitkan dengan penyatuan ingatan jangka panjang dalam hippocampus dan korteks otak [2]. Reseptor seperti N-metil D-aspartat (NMDARs) ialah komponen penting bagi potensiasi dan kemurungan yang tahan lama, dan kemasukan kalsium melalui NMDAR dan saluran kalsium (Ca2+) berpagar voltan (VGCC) menguatkan sinaps.

Walau bagaimanapun, dorongan rangsangan yang berlebihan dalam otak memuncak dalam brainatrophy melalui radikal bebas, sitokin proinflamasi, dan pengaktifan laluan kematian sel [3, 4].

Asid quinolinic (QA) ialah produk daripada laluan kynurenine bagi metabolisme tryptophan dan merupakan ligan endogen NMDAR [5]. Walaupun tryptophan adalah wajib untuk biosintesis serotonin dan tryptamine, > 95% tryptophan dimetabolismekan melalui laluan kynurenine [6]. Metabolit laluan Kynurenine (cth, asid kinurenik) bersifat neuroaktif, termasuk QA, dan ia terlibat dalam inschizophrenia, AD dan HD [7]. ].

QA mengaktifkan sistem imun (mikroglia dan astrocytes), meningkatkan ekspresi faktor kemotaktik (cth, monocyte chemoattractantprotein-1, RANTES) dan menghasut radikal bebas. Peningkatan dalam kebolehtembusan penghalang darah-otak (BBB) ​​menghalang kesan perisai terhadap QA, yang menyebabkan otak terdedah kepada kemasukan QA yang berlebihan. QA adalah perencat metabolik yang menjadikannya neurotoksin yang kuat [8].

QA menghalang monoamineoxidase-B (MAO-B), glukoneogenesis (melalui phosphoenolpyruvate carboxykinase), creatine kinase, kompleks mitokondria, dan respirasi selular, dan mengurangkan tahap ATP [9].

QA boleh menambah tekanan oksidatif dan mengurangkan antioksidan dalam cara yang bergantung kepada NMDAR atau -bebas. Interaksi QA-Fe2+mencetuskan radikal bebas, membawa kepada peroksidasi lipid dan pencacatan DNA yang dibuktikan oleh peningkatan radikal inhidroksil, aktiviti polimerase (PARP) poli (ADP-ribose) dan aktiviti dehidrogenase laktat (LDH) [10].

Penemuan klinikal juga mendedahkan bahawa QA dipertingkatkan dalam otak, darah, dan cecair serebrospinal (CSF) pesakit AD dan HD [5]. Penemuan pada masa lalu menunjukkan bahawa QA boleh mendorong defisit kognitif dan keabnormalan tingkah laku lain haiwan inexperimental [11].

Kajian terkini mendedahkan bahawa produk semula jadi boleh memperbaiki gejala disfungsi kognitif dan meningkatkan hasil terapeutik gangguan inneurodegenerative [12, 13]. Glikosida flavonoid, diosmin (3′,5,7-trihydroxy-4′-methoxy flavon-7-rhamnoglucoside), selalunya wujud dalam pericarp buah sitrus (Rutaceae) [14].

Diosmin(DSM) terdiri daripada kumpulan disakarida (6-O-( -L-rhamnopyranosyl)- -D-glucopyranosyl) yang dilekatkan dengan bahagian aglikon (diosmetin) melalui kaitan glikosidik dan boleh dibiosintesis daripada hesperidin.

Flora usus mengubah glikosida DSM kepada bahagian aglikon, yang kemudiannya diserap dengan pantas melalui saluran gastrousus. Pada manusia, separuh hayat DSM ialah 26 hingga 43 jam apabila diberikan melalui laluan oral [15].

Ia adalah ubat vasoaktif yang meningkatkan peredaran mikro, dan saliran limfa, dan meningkatkan fleksibiliti urat dengan melemahkan metabolisme norepinephrine oleh catechol-O-methyl transferase. DSM membatalkan kebolehtelapan mikrovaskular, ekstravasasi leukosit, dan kemunculan molekul lekatan, seperti ICAM-1dan VCAM-1 [14, 15].

Beberapa kajian menunjukkan perumming radikal bebas dan sifat penyelarasan imun DSM di dalam otak [16, 17]. Bukti klinikal mengesyorkan bahawa DSM ialah ubat yang boleh diterima dengan baik, selamat dan tidak toksik [15]. Dalam nutraseutikal, DSM (Daflon) sering dicadangkan untuk merawat gangguan vena, termasuk buasir dan keadaan hiperglisemik.

Penemuan sebelumnya menunjukkan bahawa DSM boleh merangsang pembebasan insulin daripada sel-sel, karbohidratmetabolisme, dan ekspresi pengangkut glukosa (GLUT). Juga, ia mengurangkan komplikasi diabetes [15].

Melemahkan dislipidemia dan glukoneogenesis hepatik [16]. Kajian sebelum ini, DSM meningkatkan fungsi kognitif, melemahkan gejala skizofrenia, dan menunjukkan kesan neuroprotektif dalam haiwan eksperimen [16-19].

Sawmiller et al. [20], dalam satu kajian, mencatatkan pengurangan pengantaraan DSM dalam hiperfosforilasi amiloid dan tau dengan melemahkan glikogen sintase kinase 3 dalam model 3 × Tg-ADmouse. Penemuan ini dengan tepat menandakan bahawa DSM mempunyai potensi untuk memperbaiki disfungsi otak terhadap QA. Dalam kajian ini, QA digunakan untuk mendorong demensia dan defisit neurologi yang lain pada tikus.

QA boleh bertindak sebagai neurotoksin kuat yang menghalang beberapa laluan dan mekanisme molekul dalam otak untuk mendorong kemerosotan neuroprogresif dan atrofi otak. Penyiasatan kontemporari telah direka untuk meneroka hasil DSM dalam prototaip tikus QA-ICV.

2. Bahan dan Kaedah

2.1. Haiwan Eksperimen.

.adakah penyelidikan dibenarkan oleh IAEC di bawah protokol no. ASCB/IAEC/14/20/145. Tikus AlbinoWistar (sama ada jantina, 200 g hingga 250 g, umur 8 hingga 9 bulan) dikekalkan dalam kepungan kuboid polipropilena bersaiz biasa di bawah tetapan suhu tiruan (23 ± 2 darjah ), jujukan gelap/cahaya 12:12 jam, dan kelembapan (40 ± 10%) di dalam rumah haiwan institusi. .e tikus telah diberi makanan berkhasiat standard (Pengilang Ashirwad,Punjab) dan air yang disucikan sesuka hati.

Semua prosedur haiwan dilakukan secara eksklusif mengikut garis panduan CPCSEA, GOI, New Delhi. .e penjaga dan pengendali haiwan telah dibutakan mengenai rejimen terapeutik berbeza yang difasilitasi kepada kohort haiwan.

Percubaan haiwan penyiasatan telah dilaksanakan, berjaya sekurang-kurangnya dua minggu tempoh suai kenal. Semua penyiasatan menggunakan haiwan telah dilakukan antara 0900- dan 1600-jam jam sehari.

2.2. Dadah dan Bahan Kimia.

Diosmin (DSM: 520-27-4), asid quinolinik (QA: 89-00-9), dan analit standard diperoleh daripada Merck (India). Natrium dihidrogen fosfat (NaH2PO4), natrium hidroksida (NaOH), kalium fosfat dibasic (K2HPO4), nitrobluetetrazolium (NBT), phenazine methosulphate (5-methylphenazinium methylsulfate), asid ethylenediaminetetraacetic (EDTA), bovineserum albumin (BSA), {{ 7}}[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfononic acid (HEPES), 1,2-bis[2-[bis(carboxymethyl) amino]ethoxy]ethane (EGTA), riboflavin, natrium sianida(NaCN), natriumazid (NaN3), tetrasodium pirofosfat, hidrogen peroksida (H2O2), NADH disodium (DPNH), NADPH tetrasodium (Coenzyme II reduced tetrasodium salt), asid fosforik, Reagen Folin dan Ciocalteu's phenol (FCR), dan asid sulfosalicylic (5-SSA) (HiMedia Laboratories, Maharashtra, India); diglisin, asid asetik glasier(CH3COOH), reagen Ellman (3-Karboksi-4-nitrophenyldisulfide, DTNB), azabenzene (C5H5N) dan natrium laurilsulfat (SLS) (LobaChemie, Mumbai, India); 4,6-Dihydroxy-2-mercaptopyrimidine (2-TBA), disodium carbonate(Na2CO3), dan (2-mercaptoethyl)trimethylammonium iodide acetate (bahan kimia TCI, India); zink sulfat (ZnSO4), garam Rochelle (kalium natrium L(+)-tartrat), 2-(1-Naphthylamino)ethylamine dihydrochloride, nitrous acidsodium (NaNO2), dan p-aminobenzenesulfonamide (Makmal Penyelidikan Sisco, India ); butil alkohol (Fisher Scientific, India) telah digunakan.

2.3. Suntikan Intracerebroventricular Asid Quinolinic.

Haiwan telah dikenakan anestesia dengan mentadbir intraperitoneal (ip) ketamin (90 mg/kg) dan xylazine (10 mg/kg) koktel menggunakan air steril untuk suntikan. .ebody dibaringkan dalam keadaan meniarap di atas kusyen pemanas yang hangat, dan pada lekapan instrumen pembedahan stereotaxic, kepala diletakkan. Kulit kepala dihiris pada titik tengah sagital, dan tengkorak itu ditemui dengan mengasingkan kulit.

Mana-mana satu daripada dua ventrikel sisi dipilih secara sewenang-wenangnya, dan dalam tengkorak, tulang parietal terkelupas (koordinat stereotaksik -0.8 mm anteroposteriordari bregma, ±1.5 mm mediolateral dari jahitan midsagital dan ±3.6 mm dorsoventral dari permukaan tulang parietal ) untuk membuat lubang burr [21].

Pada hari pertama, larutan quinolinicacid (QA) telah dibentuk baru (240 nmol) dalam PBS (Na+-K+ [PO4]2- salin penimbal, pH 7.4) dan disuntik secara beransur-ansur menggunakan picagari mikro Hamilton pada kadar alir 1 µl/minit dalam ventrikel serebrum kiri atau kanan tikus dalam tempoh 5 hingga 6 minit dengan jumlah suntikan 5 µl ICV-kenderaan [22].

Selepas inokulasi keseluruhan ubat, jarum mikro tidak dicabut selama 4 hingga 5 minit untuk membolehkan penyebaran dadah dalam cecair serebrospinal dan menghalang regurgitasinya. Isipadu setara (10 µl) kenderaan PBS telah diberikan ICV dalam shamrat yang dikendalikan secara serupa, walau bagaimanapun, QA tidak disuntik.

Selepas suntikan ubat, lubang telah dipulihkan menggunakan agen luting (zink fosfat, PYRAX®), dan jahitan kulit telah dicapai. Untuk mengelakkan pencemaran (pertumbuhan bakteria), Neosporin® digunakan secara pro re nata.

Toeevade sepsis selepas pembedahan, Orizolin (Zydus Cadila), dos 30 mg/kg (ip), telah diberikan. Setiap tikus disediakan persekitaran yang hangat (37 ± 0.5 darjah ) untuk mengelakkan hipotermia selepas pembedahan. Setiap tikus dibenarkan makanan separuh pepejal (di dalam sangkar) dan air percuma selepas pembedahan selama tujuh hari dan ditempatkan secara diskret dalam sangkar yang berbeza (30 × 23 × 14 cm3).

2.4. Protokol Eksperimen. DSM disuntik pada dos 50dan 100 mg/kg setiap berat badan (bw) pada tikus melalui laluan intraperitoneal (ip) menggunakan kenderaan dimetilsulfoksida 0.5% dalam salin normal (dos-isipadu 5 ml/kg) [17].

Haiwan diperuntukkan secara rawak dalam 5 kelompok dalam mod buta tunggal (n � 5): (i) sham (S), (ii) QA, (iii) QA + DSM50, (iv)QA + DSM100, dan (v) QA + DNP. Tikus telah tertakluk kepada pentadbiran intracerebroventricular QA (QA-ICV) atau pembedahan palsu pada hari pertama. DSM ditadbir selama 21 hari berturut-turut setiap hari 120 minit selepas QA-ICV dari kemudiane dan seterusnya.

Donepezil (DNP) digunakan sebagai ubat standard dalam kajian ini dan disuntik (dos 3 mg/kg, ip) dalam tikus yang disuntik QAICV selama 21 hari berturut-turut. Haiwan dalam kumpulan kawalan thesham dan QA telah diberikan kenderaan (steril 0.5% dimetilsulfoksida dalam garam biasa dalam dos-isipadu 5 ml/kg) dari hari 1 hingga 21. .seluruh kajian telah dilakukan mengikut skema yang digambarkan dalam Rajah 1.2.5. Aktiviti Lokomotor.

Dalam semua kelompok tikus, min aktiviti lokomotor telah didokumenkan menggunakan alat actophotometer selama 5 minit. Haiwan yang berasingan diletakkan di dalam actophotometer selama 3 minit penyesuaian. .e tikus kemudian diberi 5 minit, dan keputusannya dinyatakan sebagai kiraan setiap 5 minit [11].

2.6. Rotarod Test. In rodents, the rotarod test typically evaluates the equilibrium and muscle synchronization facets of sensorimotor functions. .e rats were presented to acquisition trials until their ability to run reached >60 saat seperti rod berputar pada sembilan putaran seminit (rpm).

Selepas ujian pemerolehan, seekor tikus yang berasingan diletakkan pada aci silinder, dan halaju revolusi dirangsang pada selang malar 10 saat daripada 6 rpm (kelajuan awal) kepada 30 rpm (kelajuan penutup), menjangkau lebih 50 saat. .e min kependaman kejatuhan (dalam saat) daripada aci silinder pusingan dinyatakan dalam keputusan.

2.7. Analisis Jejak. Prinsip di sebalik melakukan analisis jejak pada tikus adalah menilai keabnormalan gaya berjalan.

Untuk kesan tapak kaki, kaki tikus direndam dalam empat pewarna makanan tidak toksik berwarna pelbagai dan dibenarkan berjalan di atas laluan condong (70 cm × 10 cm × 8 cm). Pangkalan landasan ditutup dengan kepingan selulosa berwarna putih. .e tikus didorong ke bahagian bukit yang malap di hujung landasan untuk mendapatkan jejak kaki yang jelas. .e pewarna dikeluarkan perlahan-lahan daripada setiap haiwan menggunakan air suam selepas percubaan. .e tapak kaki telah diimbas dan "panjang langkah" diukur menggunakan pembaris piawai. Panjang langkah dikira dengan mengira jarak antara penempatan berurutan kaki tikus yang sama [11].

For more information:1950477648nn@gmail.com