myBahasa
Rumah / Pengetahuan / Kandungan

Pengetahuan

Ekstrak Ginseng Merah Korea Memperbaiki Melanogenesis pada Manusia Dan Menghasilkan Kesan Antifotopenuaan dalam Tikus Tanpa Rambut Bersinar Ultraungu Bahagian 1

May 16, 2023

abstrak

Latar belakang: Panax ginseng adalah ubat herba yang luar biasa untuk semua penyakit badan. Mungkin itulah sebabnya ia dipanggil Panax, yang bermaksud "penawar untuk semua". Melanin ialah pigmen yang memberi warna kepada kulit kita; bagaimanapun, peningkatan pengeluaran melanin boleh menyebabkan pembentukan tumor. Pendedahan manusia kepada sinaran ultraungu B telah meningkat secara meluas disebabkan oleh peningkatan cahaya matahari akibat pemanasan global. Akibatnya, fenomena yang dipanggil photoaging telah diperhatikan untuk semua warna dan jenis kulit. Akibat fenomena ini, satu set enzim yang dipanggil metalloproteinases matriks, yang berfungsi sebagai enzim degradasi untuk protein matriks ekstraselular, terutamanya kolagen, meningkat, menyebabkan kekurangan kolagen dan mengakibatkan pembentukan kedutan awal.

Menurut kajian yang berkaitan, cistanche adalah herba biasa yang dikenali sebagai "herba ajaib yang memanjangkan hayat". Komponen utamanya ialah cistanoside, yang mempunyai pelbagai kesan seperti antioksidan, anti-radang, dan promosi fungsi imun. Mekanisme antara cistanche dan pemutihan kulit terletak pada kesan antioksidan glikosida cistanche. Melanin dalam kulit manusia dihasilkan oleh pengoksidaan tirosin yang dimangkin oleh tyrosinase, dan tindak balas pengoksidaan memerlukan penyertaan oksigen, jadi radikal bebas oksigen dalam badan menjadi faktor penting yang mempengaruhi pengeluaran melanin. Cistanche mengandungi cistanoside, yang merupakan antioksidan dan boleh mengurangkan penjanaan radikal bebas dalam badan, sekali gus menghalang pengeluaran melanin.

rou cong rong benefits

Klik Pada Gudang Kimia Cistanche untuk Pemutihan

Untuk maklumat lanjut:

david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501

Kaedah: Oleh itu, dalam kajian kami, kami menggunakan garisan sel melanoma murine B16/F10 untuk mengkaji perencatan melanogenesis oleh ekstrak Korean Red Ginseng (KRG) in vitro dan HRM-2 tikus tanpa rambut yang terdedah kepada ultraviolet B tiruan untuk memeriksa keberkesanan KRG dalam vivo. Kami menyediakan krim ekstrak ginseng merah 3 peratus dan menilai kesannya pada kulit manusia.

Keputusan: Keputusan kami menunjukkan bahawa KRG mendorong penindasan kuat aktiviti tyrosinase dan pengeluaran melanin dalam sel B16/F10; lebih-lebih lagi, ia mengurangkan transkripsi dan terjemahan komponen yang terlibat dalam laluan pengeluaran melanin. Dalam eksperimen in vivo, KRG dengan kuat menekan ekspresi metalloproteinase matriks, mengurangkan pembentukan kedutan, dan menghalang degradasi kolagen. Pada kulit manusia, krim ginseng meningkatkan daya tahan kulit dan kelembapan kulit serta meningkatkan warna kulit.

Kesimpulan: Oleh itu, kami membuat kesimpulan bahawa KRG adalah produk pemutihan kulit dan anti-penuaan yang sangat baik.

·2019 Persatuan Ginseng Korea. Perkhidmatan penerbitan oleh Elsevier BV Ini ialah artikel akses terbuka

1. pengenalan

Melanin adalah sebatian yang bertanggungjawab untuk pigmentasi kulit, dan kepelbagaian warna kulit dalam umat manusia adalah disebabkan oleh jumlah sel penghasil melanin yang terdapat dalam kulit [1]. Proses yang bertanggungjawab untuk pembentukan melanin dipanggil melanogenesis. Dalam proses ini, hormon perangsang a-melanocyte (a-MSH) mengikat reseptornya (iaitu, reseptor melanocortin 1) menyebabkan tahap cAMP yang tinggi, yang seterusnya mengaktifkan faktor berkaitan mikroftalmia (MITF) melalui pelbagai laluan, seperti kitaran. Unsur tindak balas Adenosine Monophosphate (cAMP) mengikat protein, kinase terkawal ekstraselular, dan protein kinase B (AKT), menyebabkan degradasinya. Disebabkan kemerosotan ini, langkah pengehad kadar dalam proses melanogenesis (iaitu, tindakan enzim tyrosinase, TYR) terjejas dan menjadi diaktifkan. TYR bertanggungjawab untuk penukaran tirosin kepada L-3,4-dihydroxyphenylalanine (L-DOPA), yang membentuk melanin. Protein berkaitan tyrosinase 1 (TRP-1) dan protein berkaitan tyrosinase 2 (TRP-2) ialah faktor hiliran lanjut TYR dan MITF yang diaktifkan dan terlibat dalam pembentukan melanin. Akibatnya, sepanjang keseluruhan proses, TYR merupakan komponen terpenting dalam pengawalan pengeluaran melanin dalam sel kulit [2-4].

cistanche herb

Panax ginseng ialah herba ajaib yang telah digunakan secara meluas di Asia timur selama lebih 1,000 tahun kerana ia mempunyai banyak kesan kesihatan yang bermanfaat. Ia boleh didapati dalam pelbagai bentuk, termasuk minuman, kapsul, dan tablet [5,6]. Kajian lepas telah mendedahkan kesan penting ginseng apabila digunakan untuk mengurangkan kejadian pelbagai jenis tumor, banyak anomali mental, diabetes, hipertensi, hiperlipidemia dan keradangan [7-13]. Khususnya, di semenanjung Korea, suplemen ginseng membentuk sebahagian daripada diet biasa. Secara komersial, ginseng boleh didapati dalam bentuk ekstrak akar ginseng keseluruhan, ekstrak ginsenoside tunggal atau kapsul. Ginsenosides adalah sebatian aktif konstituen yang terdapat dalam keseluruhan akar ginseng yang bertanggungjawab untuk sifat-sifat meningkatkan kesihatan yang mujarab bagi ginseng [14].

Terdapat banyak kajian mengenai kesan ginsenoside tunggal pada pengeluaran melanin dan melasma [15]. Walau bagaimanapun, pada masa ini, tiada kajian telah melaporkan kesan anti-melanogenik ekstrak Ginseng Merah Korea (KRG) pada pengeluaran melanin dan mengkaji kesan pemutihan kulit dan antipenuaan, terutamanya pada manusia. Oleh itu, kami menyiasat perencatan TYR dan perencatan pengeluaran melanin oleh KRG in vitro dalam talian sel melanoma B16/F10 melalui kajian mekanistik mengenai laluan yang terlibat dalam proses ini. Keputusan kami menunjukkan bahawa KRG dengan ketara menghalang aktiviti TYR dan menurunkan kandungan melanin melalui laluan degradasi MITF. Selain itu, kajian in vivo kami menggunakan model tetikus tanpa rambut (HRM-2) sinaran ultraungu B (UVB) untuk penuaan foto dan hiperpigmentasi mendedahkan bahawa pengeluaran melanin dalam HRM-2 tikus telah dikurangkan dengan ketara dan ketara oleh penggunaan KRG (150 dan 300mg/kg). Tambahan pula, krim ekstrak ginseng merah 3 peratus menunjukkan kualiti anti-kedut dan pemutihan kulit yang sangat baik pada manusia. Oleh itu, kami membuat kesimpulan bahawa formulasi KRG dan KRG sebagai krim harus berguna dalam industri kosmetik sebagai agen pemutihan kulit dan anti-penuaan.

2. Bahan-bahan dan cara-cara

2.1. Bahan kimia dan reagen

Medium Eagle yang diubah suai Dulbecco (WelGene Co, Korea); serum lembu janin (WelGene Co., Korea); streptomycin dan penisilin (Lonza, MD, Amerika Syarikat); Reagen TRIzol (Invitrogen, Carlsbad, CA, Amerika Syarikat); primer oligodT, MITF, TYR, TRP-1, TRP-2 dan b-actin diperoleh daripada (Bioneer, Daejeon, Korea). 3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazoliumbromide telah dibeli daripada Sigma-Aldrich. Antibodi untuk MITF, TYR, TRP-1 dan TRP-2 telah diperolehi (Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, Inc., TX, USA). Cendawan TYR dan L-DOPA telah dibeli daripada Sigma (St. Louis, MO, Amerika Syarikat). Semua reagen lain adalah gred analitik tempatan.

cistanche for sale

2.2. Penyediaan sampel

KRG telah disediakan oleh Korea Ginseng Cooperation yang terdiri daripada 11 komposisi ginsenosides (mg/g): Rb1 6.67, Rb2 2.79, Rc 1.01 , Rd 1.01, Rg3s 2.22, Rg3r 0.79, Re 1.97, Rf 1.40, Rg1 1.67, Rg2s 1.23 dan Rh1 0.77 seperti yang dianalisis oleh analisis Kromatografi Cecair Berprestasi Tinggi (HPLC). Manakala 3 peratus krim ginseng merah (komposisi ginsenosides adalah sama seperti yang diterangkan sebelum ini) disediakan oleh Universiti Kyungnam, Changwon, Republik Korea. Secara ringkas, campuran 80 mL air tulen dan 30 mL sama ada minyak badam manis atau minyak biji bunga matahari dipanaskan pada suhu 80○C. Selepas itu, air tulen ditambah lagi dan diemulsikan dengan menggunakan pengisar. Selepas itu, tokoferol telah ditambah sebagai antioksidan, dan 3 peratus ekstrak ginseng merah ditambah sebagai bahan aktif; campuran itu dinamakan krim ginseng merah.

2.3. Penilaian kestabilan krim ginseng merah

Ujian berikut telah dilakukan untuk menilai kestabilan krim ginseng merah 3 peratus:

cistanche amazon

(1) ujian pH

pH krim ginseng merah diukur pada Hari 1, 7, 15 dan 30 percubaan 30-hari. pH krim ginseng merah adalah sedikit berasid dan hampir tidak menunjukkan perubahan sepanjang 30 hari (Jadual 2).

(2) Ujian perubahan warna

Tahap perubahan warna krim ginseng merah diukur pada Hari 1, 7, 15 dan 30. Tiada perubahan warna diperhatikan sepanjang 30-hari tempoh percubaan (Tambahan Rajah 1).

(3) Ujian tampalan

Untuk memeriksa tindak balas alahan terhadap krim ginseng, 1 mL krim ginseng merah disapu pada bahagian belakang tengah dorsal (1 cm × 1 cm) sukarelawan, dan tindak balas kulit dinilai selepas 24 jam. Pelbagai jenis tindak balas kulit telah dinilai, seperti yang ditunjukkan dalam Jadual Tambahan. 3A-B, dan tiada eritema, edema, atau tindak balas yang tidak diingini diperhatikan. Oleh itu, krim ini diuji lagi untuk parameter lain pada kulit. Tambahan pula, tahap kerengsaan kulit telah dinilai, seperti yang ditunjukkan dalam Jadual Tambahan. 4, untuk menghasilkan indeks kerengsaan kulit utama.

2.4. Regimen rawatan krim ginseng merah dan penilaian kesan pada minyak dan kandungan lembapan, keanjalan, dan pemutihan kulit

Untuk menilai kesan krim ginseng merah pada kandungan minyak, kandungan lembapan, keanjalan dan pemutihan kulit, 10 wanita (kira-kira 40 tahun, bukan perokok, tanpa sejarah penyakit kulit atau rawatan muka) dibahagikan kepada dua kumpulan yang masing-masing mengandungi lima individu: kumpulan kawalan, di mana krim tanpa ekstrak ginseng merah digunakan (bukan KRG), dan kumpulan eksperimen, di mana krim dengan ekstrak ginseng merah digunakan (kumpulan yang dirawat KRG). Bilangan individu dikira dengan menggunakan perisian statistik, G*Power 3.1 omicX; pekali keertian ialah 0.05, kuasa ialah 80, bilangan kumpulan ialah 2, dan bilangan pengukuran berulang ialah 6.

how to take cistanche

Sepuluh individu (lima dalam kumpulan eksperimen dan lima belas dalam kumpulan kawalan) telah dipilih untuk mengambil kira kadar keciciran sebanyak 20 peratus . Percubaan percubaan manusia telah dibenarkan oleh Lembaga Semakan Institusi Universiti Kyungnam (IRB # 1040460-A-2017-040).
Setiap hari selama 1 bulan, krim disapu pada kulit 1 jam selepas pembersihan. Selepas itu, parameter yang dinyatakan di atas diukur dalam kulit pada Minggu 0, 2 dan 4.

Krim disapu pada kawasan zon T (1) muka, yang terletak 1 cm di atas bahagian atas tengah T pada dahi antara kening dan di sebelah kanan dan sebelah kiri selama 3e5 saat. Zon-U (2) dilukis secara mendatar dari hidung dan menegak ke bawah dari ekor mata, seperti yang ditunjukkan dalam Rajah Tambahan. 2. Untuk menyeragamkan keadaan pengukuran, penyelidikan dilakukan pada 24 C ± 1 C dan 55 peratus ± 10 peratus kelembapan relatif.

Kandungan minyak, kandungan air, keanjalan dan kandungan melanin diukur dengan menggunakan sebumeter SM815 (CK elektronik, Jerman), kronometer CM825 (CK elektronik, Jerman), heksameter MX18 (CK elektronik, Jerman) dan cutometer (CK elektronik). , Jerman), masing-masing, dengan menyentuh instrumen ini pada kulit selama 3-5 saat.
Kelembapan dan kandungan minyak serta warna kulit kulit dianalisis dengan ujian-T. Analisis empirikal hasil kajian dianggap menunjukkan perubahan ketara secara statistik bagi nilai-p bagi<0.05. After the end of the application period, the satisfaction of the product assessed through a questionnaire was converted into a score for each response.

2.5. Kultur sel

Barisan sel melanoma B16/F10 murine diperoleh daripada Koleksi Budaya Jenis Amerika dan dikultur dalam Medium Helang Modified Dulbecco ditambah dengan 8 peratus serum lembu janin (WelGene Co, Daejeon), 100 IU/mL penisilin, dan 100 mg/mL streptomycin sulfate (Lonza, MD, Amerika Syarikat). Sel-sel telah dikekalkan dalam inkubator CO2 5 peratus yang dilembapkan pada 37 darjah C.

2.6. Ujian perencatan TYR tanpa sel

Ujian dilakukan menggunakan protokol yang sedikit diubah suai seperti yang diterangkan sebelum ini [3]. Secara ringkas, 10 mL KRG diletakkan dalam tiga kali ganda dalam 96-plat perigi dan dicampur dengan 60 mL 50 mmol/L penimbal fosfat pada ais (pH 6.8). Selepas itu, 20 mL 0.9mg/mL L-DOPA telah ditambah kepada setiap telaga. Akhir sekali, 10 mL cendawan TYR telah ditambah kepada setiap telaga, dan plat diinkubasi pada 27 darjah C selama 10 minit. Selepas pengeraman, pengeluaran dopachrome diukur secara spektrofotometri pada 450nm dengan menggunakan pembaca plat mikro (Versamax; Molecular Devices, LLC, CA, USA); dalam eksperimen ini, asid kojik digunakan sebagai kawalan positif [16].

cistanche side effects reddit

2.7. Ujian perencatan melanin

Sel B16/F10 telah disemai dalam 6-plat kultur telaga pada ketumpatan 2.5 × 103 sel/telaga dan diinkubasi selama 5 hari. Selepas sel mencapai kelancaran yang diingini, rawatan KRG digunakan dan sel telah dirangsang dengan a-MSH. Sel-sel tersebut kemudiannya diinkubasi selama 3 hari, dituai dengan menggunakan larutan asid trypsine ethylenediaminetetraacetic 0.25 peratus dan dipindahkan ke 1.5-mL tiub mikrosentrifuge. Tiub itu kemudiannya diempar pada 10,000rpm selama 10 minit, dan pelet dilarutkan dalam 2mol/L NaOH selama 15 minit pada 60 darjah C. Campuran itu kemudiannya dipindahkan ke 96-plat perigi, dan penyerapan setiap telaga pada 450nm diukur dengan menggunakan pembaca plat mikro (Versamax; Molecular Devices, LLC, CA, USA). Penyerapan dibandingkan dengan lengkung standard yang dihasilkan daripada melanin sintetik (Sigma).

2.8. Eksperimen haiwan dan kumpulan

Tikus tidak berbulu HRM jantan berusia enam minggu -2 melanin diperoleh daripada Central Lab Animal Inc. (Seoul, Korea Selatan) dan ditempatkan di dalam bilik terkawal (23 darjah ±1 darjah , 55 peratus ±5 peratus kelembapan relatif, kitaran cahaya/gelap 12j) dan diberi akses ad libitum kepada air dan makanan. Semua eksperimen haiwan dilakukan secara ketat oleh Jawatankuasa Penjagaan dan Penggunaan Haiwan Institusi Universiti Daejeon (Daejeon, Korea) (nombor kebenaran: DJUARB2017-033). Selepas tempoh penyesuaian selama 1 minggu, tikus dibahagikan secara rawak kepada lima kumpulan, masing-masing mengandungi lima belas haiwan: kumpulan normal, yang tidak menerima rawatan; kumpulan kawalan sinaran UVB; kumpulan kawalan positif, yang menerima 0.01 peratus pelindung matahari dan penyinaran UVB; kumpulan KRG dos rendah, yang menerima KRG 150 mg/kg po dengan penyinaran UVB; dan kumpulan KRG dos yang lebih tinggi, yang menerima KRG 300 mg/kg po dengan penyinaran UVB.

2.9. Penyinaran UVB dan induksi photoaging

Kulit dorsal tikus HRM {{0}} telah disinari oleh lampu UVB (15 W; panjang gelombang maksimum, 312 nm; keamatan UV, 100 mW cmˉ 2; IedaBoeki Co., Tokyo, Jepun). Untuk menilai kesan kawalan positif (0.01 peratus pelindung matahari) dan KRG pada pembentukan kedutan dan pigmentasi, tikus HRM-2 telah disinari dengan 100 mJ/cm2 UVB (1 dos eritematik minimum =100 mJ/cm 2 ) setiap hari untuk Minggu 1 dan kemudian 200 mJ/cm2 UVB daripada Minggu 2-5. Tikus dipantau tiga kali seminggu. Pengambilan diet dan berat badan diukur setiap minggu selama 12 minggu.

cistanche para que serve

2.10. Kesan pada pengeluaran melanin dalam HRM-2 tikus

Untuk menilai pengeluaran melanin yang terhasil daripada pendedahan tikus kepada UVB, kawasan dorsal tikus dibahagikan kepada bahagian kanan dan kiri. Dalam semua kumpulan kecuali kumpulan normal, bahagian kiri menerima penyinaran UVB (kawalan), pelindung matahari, atau KRG dan UVB selama 5 minggu. Sebelah kanan dibiarkan tidak dirawat. Penyinaran UVB digunakan tiga kali seminggu selama 5 minggu (seperti yang diterangkan di atas), dan status pigmentasi kulit dianalisis dalam Minggu 1, 3, dan 5 dengan menggunakan kamera digital (model D70; Nikon, Tokyo, Jepun) selepas tikus telah dibius dengan eter. Analisis imej kulit dorsal dilakukan dengan menggunakan perisian (Bio-Rad, USA) pada gambar kamera digital. Tahap pemendapan melanin dianalisis daripada perbezaan antara kawasan berpigmen, terdedah kepada UVB, dan sampel yang dirawat di sebelah kiri berbanding dengan kawasan yang tidak dirawat dan tidak berpigmen di sebelah kanan.

2.11. Pengukuran kedutan kulit 

Tahap penuaan kulit yang disebabkan oleh UVB diukur melalui pemerhatian pembentukan kedutan. Untuk menilai pembentukan kedutan, tikus HRM {{0}} telah dibius dengan suntikan intraperitoneal kloral hidrat (0.1 mL 7 peratus kloral hidrat/25 g tikus) pada Minggu 5 Pendedahan kepada UVB dan rawatan sampel telah diterangkan dalam bahagian sebelumnya. Kedutan kulit dinilai pada Minggu 3, 4 dan 5 dengan menggunakan Sistem DETAX II (MIXPAC) dan Cakera Double-Stick (3M Healthcare, Jerman) selepas penyinaran UVB. Cakera Double-Stick (disembur dengan Sistem DETAX II) dipasang pada kulit tetikus dan dikeluarkan selepas 2e3 minit. Kedutan cakera dinilai oleh sistem pemarkahan Bissett [17]: gred 0, ketiadaan kedutan; gred 1, beberapa kedutan cetek; gred 2, beberapa kedutan; dan darjah 3, beberapa kedutan dalam. Selepas cakera dikeluarkan dan kulit dibersihkan dengan 70 peratus etanol, kulit diambil gambar dengan menggunakan Mikroskop Digital USB (× 400; CE FOROHS, China), dan analisis visual kedutan kulit dilakukan.

2.12. Ujian imunosorben berkaitan enzim

Untuk menyiasat kesan gen berkaitan kedutan akibat UVB (iaitu, matriks metalloproteinase; MMP-2), kulit daripada semua kumpulan yang dirawat telah dituai dan protein dianalisis dengan menggunakan ujian imunosorben berkaitan enzim (ELISA) kit mengikut arahan pengilang (MMP-2 kit ELISA; R&D Systems, USA).

2.13. Pemerhatian histologi kulit

Tisu kulit yang diekstrak daripada setiap kumpulan eksperimen telah ditetapkan dalam larutan formalin 10 peratus selama 48 jam dan kemudian diwarnakan dengan hematoxylin dan eosin dengan kaedah Cardiff [18] untuk menentukan ketebalan epidermis. Untuk visualisasi kolagen, pewarnaan trikoma Masson dilakukan oleh protokol yang telah ditetapkan [19].

2.14. Pengekstrakan RNA dan tindak balas rantai polimerase masa nyata

Jumlah RNA telah diekstrak daripada sel B16/F10 dan kulit tetikus yang diluaskan UVB-ira selepas ia dirawat dengan KRG dan dirangsang dengan a-MSH dengan menggunakan TRIzol mengikut arahan pengeluar. RNA (2 mg) disepuh dengan oligodT (Bioneer Co, Daejeon) selama 10 minit pada 70 darjah C dan disejukkan selama 5 minit di atas ais, ditranskripsi terbalik menggunakan premix transkripase terbalik (Bioneer Co., Daejeon) dalam 20 mL campuran tindak balas , dan berjalan selama 90 minit pada 42.5 darjah dalam penggetar haba. Reaksi telah ditamatkan pada 95 darjah selama 5 minit untuk menyahaktifkan transkripase terbalik. Tindak balas rantai polimerase transkripsi terbalik (PCR) dilakukan pada aliquot cDNA yang diperoleh daripada tindak balas Reverse Transcriptase (RT) dalam premix PCR (Bioneer Co, Daejeon). Produk PCR kemudiannya dielektroforesis pada gel agarose 1 peratus, diwarnai dengan etidium bromida, dan divisualisasikan dengan menggunakan ImageQuant LAS 500 (GE Healthcare Life Sciences, Seoul, Korea Selatan). Keamatan ketumpatan jalur telah dinormalkan kepada Glyceraldehyde 3- phosphate dehydrogenase (GAPDH), dan jujukan primer disediakan dalam Jadual Tambahan. 1. Ungkapan MMP-2, MMP-9 dan interleukin (IL)-1b telah dianalisis dengan menggunakan PCR kuantitatif masa nyata menggunakan sistem PCR Masa Nyata Applied Biosystems 7500 ( Applied Biosystems, Amerika Syarikat).

cistanche tubulosa supplement

2.15. Analisis Western blot

Sel B16/F10 telah dirawat dengan KRG dengan kehadiran a-MSH (10mM). Jumlah protein daripada sel dan kulit tetikus yang disinari UVB telah diekstrak dengan arahan penimbal lisis PRO-PREP (iNtRON Biotechnology, Korea). Kepekatan protein kemudiannya diukur dengan menggunakan kit ujian PRO-MEASURE (PRO-PREP; iNtRON Biotechnology, Korea), dan jumlah protein yang sama dipisahkan oleh 10 peratus gel poliakrilamida dengan menggunakan elektroforesis gel sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide (SDS-PAGE) dan dipindahkan ke membran Polyvinylidene difluoride (PVDF) (Immobilon-P; Millipore, Billerica MA, USA). Pengikatan tidak spesifik pada membran PVDF telah diminimumkan dengan pengeraman membran dalam penimbal penyekat yang mengandungi 5 peratus susu kering tanpa lemak dan 0.1 peratus Tween-20 dalam Tris buffered-saline (TBS). Membran kemudian diinkubasi semalaman pada 4 darjah dengan antibodi primer tertentu, diikuti dengan pengeraman selama 1 jam dengan antibodi antiarnab terkonjugasi peroksidase lobak pedas (1: 3000 pencairan). Antibodi terikat telah divisualisasikan dengan aplikasi penyelesaian chemiluminescence yang dipertingkatkan (Supex, Daegu, Korea), dan imej dianalisis dengan menggunakan perisian ImageJ. b-Actin digunakan sebagai kawalan dalaman.

2.16. Analisis statistik

Data telah dibentangkan sebagai min ± Ralat Piawai Min (SEM). Analisis varians Sehala (ANOVA), ujian Dunnett dan ujian-t Pelajar tidak berpasangan digunakan untuk penilaian statistik data atau jika dinyatakan sebaliknya. Keputusan analisis statistik bagi***p < 0.001, **p < 0.05 dan *p < 0.01 dianggap penting.

Untuk maklumat lanjut: david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501

Anda mungkin juga berminat