HydroZitLa Menghalang Pembentukan Batu Kalsium Oksalat dalam Tikus Nefrolithic Dan Menggalakkan Awet Muda dalam Nematod Caenorhabditis Elegans Bahagian 2

Glikosida cistanche juga boleh meningkatkan aktiviti SOD dalam tisu jantung dan hati, dan dengan ketara mengurangkan kandungan lipofuscin dan MDA dalam setiap tisu, dengan berkesan menghilangkan pelbagai radikal oksigen reaktif (OH-, H₂O₂, dll.) dan melindungi daripada kerosakan DNA yang disebabkan oleh OH-radikal. Glikosida phenylethanoid cistanche mempunyai keupayaan penghapusan radikal bebas yang kuat, keupayaan pengurangan yang lebih tinggi daripada vitamin C, meningkatkan aktiviti SOD dalam penggantungan sperma, mengurangkan kandungan MDA, dan mempunyai kesan perlindungan tertentu pada fungsi membran sperma. Polisakarida cistanche boleh meningkatkan aktiviti SOD dan GSH-Px dalam eritrosit dan tisu paru-paru tikus senescent eksperimen yang disebabkan oleh D-galaktosa, serta mengurangkan kandungan MDA dan kolagen dalam paru-paru dan plasma, dan meningkatkan kandungan elastin, mempunyai kesan penghapusan yang baik pada DPPH, memanjangkan masa hipoksia pada tikus senescent, meningkatkan aktiviti SOD dalam serum, dan melambatkan degenerasi fisiologi paru-paru dalam tikus senescent secara eksperimen Dengan degenerasi morfologi selular, eksperimen telah menunjukkan bahawa Cistanche mempunyai keupayaan antioksidan yang baik. dan berpotensi menjadi ubat untuk mencegah dan merawat penyakit penuaan kulit. Pada masa yang sama, echinacoside dalam Cistanche mempunyai keupayaan yang ketara untuk menghilangkan radikal bebas DPPH dan mempunyai keupayaan untuk mengais spesies oksigen reaktif dan menghalang degradasi kolagen yang disebabkan oleh radikal bebas, dan juga mempunyai kesan pembaikan yang baik pada kerosakan anion radikal bebas timin.

cistanche supplement

Klik pada Cistanche Norge

【Untuk maklumat lanjut:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:8613632399501】

Berdasarkan penemuan semasa kami, HydroZitLa menggunakan fungsi antipatogen melalui sekurang-kurangnya dua laluan. Pertama, ia mengurangkan perkumuhan oksalat kencing, mengurangkan kapasiti penghabluran CaOx kencing, dan membekalkan sitrat. Kedua, ia mengandungi polifenol herba yang mampu melemahkan tekanan oksidatif dan keradangan, seterusnya menghalang lithogenesis CaOx. Pada asasnya, oksalat disintesis secara endogen dalam hati menggunakan glioksilat sebagai prekursor yang menonjol41. Glyoxylate disintesis daripada glikolat oleh enzim glikolat oksidase (GO), dan ia seterusnya ditukar kepada oksalat oleh laktat dehidrogenase (LDH). Kami mendapati bahawa HydroZitLa mengurangkan perkumuhan oksalat kencing dengan ketara dalam tikus yang dirawat EG. Kami membuat spekulasi bahawa HydroZitLa menghalang laluan sintetik oksalat dalam hati melalui penurunan regulasi enzim hepatik yang terlibat dalam metabolisme glioksilat, terutamanya LDH dan GO. Kajian terdahulu oleh Kailash dan Varalakshmi menunjukkan bahawa ekstrak batang pisang mengurangkan tahap GO dan LDH hepatik dalam tikus hyperoxaluric yang disebabkan oleh natrium glikolat27. Poonguzhali dan Chegu juga melaporkan bahawa ekstrak mentah daripada batang pisang mengurangkan oksalat urin, asid glikolik, dan asid glioksilik dalam tikus hiperoksalurik yang disebabkan oleh glikolat30. Baru-baru ini, Patankar et al. menunjukkan bahawa formulasi herba mereka, dipanggil Herbmed Plus (mengandungi batang pisang), mengurangkan tahap aktiviti LDH dalam hati dan tisu buah pinggang42. Untuk mengesahkan spekulasi kami, ekspresi enzim hepatik dan buah pinggang yang terlibat dalam sintesis oksalat dalam tikus EG yang dirawat dengan HydroZitLa perlu diterokai dengan lebih lanjut.

cistanche nedir

Beberapa baris bukti menyokong kuat bahawa tekanan oksidatif, keradangan, dan kecederaan tiub buah pinggang terlibat secara kritikal dalam lithogenesis CaOx3,4,15,43–45. Tekanan oksidatif yang disebabkan oleh kristal oksalat dan/atau CaOx menyebabkan kecederaan tiub buah pinggang yang mewujudkan tapak untuk nukleasi kristal, lekatan, pengekalan, pengagregatan, dan akhirnya pembentukan nidus43,46,47. Tambahan pula, tekanan oksidatif mengaktifkan tindak balas keradangan yang seterusnya mempercepatkan proses litogenik4,47,48. Oleh itu, phytomedicine yang mempunyai sifat antioksidan dan anti-radang adalah langkah yang menjanjikan untuk pencegahan pembentukan batu karang24. Aggarwal et al. ditunjukkan dalam model tikus nefrolithic yang disebabkan oleh EG bahawa bergenin (sebatian fenolik bioaktif yang diasingkan daripada Bergenia ligulata) mempunyai kesan antipatogen yang kuat untuk mengurangkan tekanan oksidatif, memperbaiki disfungsi mitokondria dan mengurangkan kecederaan tiub dan keradangan49. Rutin dan curcumin (fitokimia asli yang terkenal dengan sifat antioksidan dan anti-radang) telah ditunjukkan untuk menghalang kerosakan tubulointerstitial dan mendapan kristal dalam tikus nefrolithic yang disebabkan oleh EG50. Polifenol daripada biji anggur juga telah ditunjukkan untuk menghalang mendapan kristal CaOx intrarenal dalam tikus lithiasis yang disebabkan oleh EG, dengan munasabah melalui aktiviti antioksidan mereka51. Formulasi herba Ayurveda Herbmed telah ditunjukkan untuk mengurangkan kecederaan radang dan mendapan kristal dalam buah pinggang tikus nefrolithic yang disebabkan oleh EG42. Dalam kajian ini, kami menunjukkan bahawa HydroZitLa mengurangkan tekanan oksidatif intrarenal, keradangan, dan mendapan kristal CaOx, menunjukkan bahawa HydroZitLa mengenakan tindakan antioksida dan anti-radang untuk menghalang pembentukan batu renal CaOx.

Beberapa polifenol tumbuhan telah terbukti secara eksperimen bermanfaat untuk memanjangkan jangka hayat dan melambatkan penuaan52. Resveratrol ialah sebatian polifenolik memanjangkan jangka hayat dengan ciri yang paling baik. Ia terutamanya bertindak melalui pengaktifan sirtuin dan pengecilan tekanan oksidatif53. Kesan jangka hayat resveratrol yang diuji dalam model C. elegans berbeza antara kajian dengan peningkatan jangka hayat median antara 10 hingga 65 peratus 54,55. HydroZitLa memanjangkan jangka hayat jenis liar C. elegans dengan ketara sehingga 34 peratus tanpa tanda ketoksikan, menunjukkan bahawa kesan lanjutan jangka hayat HydroZitLa adalah setanding dengan resveratrol. Sekatan diet adalah mekanisme utama yang diketahui dalam umur panjang56. Kadar pengepaman pharyngeal berbanding antara cacing HydroZitLa dan cacing kawalan adalah setanding, menunjukkan bahawa lanjutan jangka hayat oleh HydroZitLa bukanlah hasil daripada sekatan pemakanan.

HydroZitLa telah mengurangkan pengumpulan lipofuscin pigmen umur autofluoresen dalam C. elegans dengan ketara, mencadangkan kesan anti-penuaan. ROS dan tekanan oksidatif adalah induktor SIPS yang terkenal, dan tekanan oksidatif mempercepatkan pemendekan telomeres57. Kami baru-baru ini menunjukkan bahawa oksalat, COM dan air kencing daripada pesakit dengan batu CaOx menyebabkan penuaan pramatang, regulasi p16, dan pergeseran telomere dalam sel tiub renal melalui tekanan oksidatif 58. Dalam kajian ini, kami menunjukkan bahawa HydroZitLa menghalang pergeseran telomere, regulasi p16, dan penuaan pramatang dalam sel HK-2 terdedah kepada H2O2, oksalat dan COM. Walaupun mekanisme molekul untuk kesan anti-penuaan ini tidak dihuraikan, HydroZitLa dicadangkan untuk mencegah penuaan pramatang secara mekanis melalui perencatan pemendekan telomere dan penurunan regulasi ekspresi p16.

Walaupun ubat herba dan fitoperubatan semakin popular dan diterima secara global, bukti saintifik tentang keberkesanan dan keselamatan mesti disediakan dan tidak boleh dikompromi. Interaksi herba-ubat sukar diramalkan kerana ia sangat berbeza di kalangan individu, bergantung kepada beberapa faktor seperti polimorfisme enzim cytochrome P450 dan pengangkut ubat, dan keadaan perubatan sedia ada59. Kesan buruk penggunaan herba dan ubat-ubatan mesti dipantau dengan teliti untuk mengenal pasti potensi interaksi herba-ubat. Herba paling terkenal yang secara serius berinteraksi dengan ubat-ubatan termasuk bawang putih, Baizhi, Danggui, ginseng, ginkgo, licorice, St John's wort, Kava, lada hitam dan panjang, Danshen, Huangqin dan milk thistle59. Untuk pengetahuan kami, tiada kesan sampingan yang serius atau interaksi ubat yang dilaporkan untuk batang pisang, bunga kacang biru rama-rama dan kayu nilam. Di Thailand, batang pisang digunakan sebagai bahan makanan. Minum terlalu banyak jus batang pisang (pengambilan berlebihan) boleh menyebabkan alahan, sakit perut dan muntah, oleh itu pengambilan sederhana disyorkan. Bunga kacang biru biasanya digunakan dalam makanan sebagai pewarna semula jadi, dan ia juga digunakan untuk membuat teh. Kesan buruk pengambilan berlebihan teh bunga kacang biru rama-rama, contohnya, sakit perut, loya, dan tindak balas alahan, jarang dilaporkan. Kayu sappan juga kerap digunakan sebagai pewarna makanan semula jadi, dan dalam komuniti (termasuk komuniti di Thailand) ia biasanya dimakan sebagai minuman yang menyihatkan. Walau bagaimanapun, fungsi kontraseptif (anti-kesuburan pada lelaki) ekstrak kayu nilam ditunjukkan dalam model tikus, kerana ia mengganggu spermatogenesis60. Sebaliknya, kayu jantung Caesalpinia sappan L. digunakan sebagai rawatan perubatan untuk gejala ginekologi, termasuk oligomenorea dan amenorea61. Oleh itu, keselamatan penggunaan jangka panjang HydroZitLa pada manusia masih perlu dipastikan dalam percubaan klinikal.

rou cong rong benefits (2)

Kajian ini mempunyai beberapa batasan. Sebatian aktif yang tepat yang bertanggungjawab untuk fungsi perencatan batu CaOx tidak dikenal pasti dan dicirikan. Mekanisme tepat HydroZitLa untuk menghalang pembentukan batu CaOx dalam tikus tidak disiasat secara meluas. Kesan antipatogenik bergantung kepada dos HydroZitLa tidak disiasat. Dos HydroZitLa yang boleh meningkatkan tahap sitrat kencing dengan ketara dalam tikus nefrolithic tidak diterokai. Profil fenolik HydroZitLa perlu disiasat lebih lanjut. Mekanisme promosi umur panjang oleh HydroZitLa dalam C. elegans tidak diterokai secara intensif. Akhirnya, sebatian khusus dalam HydroZitLa yang bertanggungjawab untuk umur panjang dan anti-penuaan tidak dikenal pasti dan dicirikan.

Kesimpulannya, HydroZitLa telah dibangunkan untuk secara serentak menormalkan faktor risiko pembentukan batu CaOx dengan membekalkan cecair, sitrat, dan antioksidan semula jadi. Secara eksperimen, HydroZitLa menghalang deposit CaOx intrarenal dalam tikus nefrolithic. Keberkesanan perencatan batu CaOx HydroZitLa adalah bersamaan dengan kalium sitrat (Uralyt-U) yang sedang digunakan. HydroZitLa dengan cekap melemahkan tekanan oksidatif kedua-dua in vitro dan in vivo. Hebatnya, HydroZitLa memanjangkan jangka hayat dan melambatkan permulaan penuaan dalam C. elegans. Tambahan pula, HydroZitLa menghalang pemendekan telomere, ekspresi p16, dan penuaan pramatang dalam sel buah pinggang manusia dengan ketara. Penemuan praklinikal ini mencadangkan bahawa HydroZitLa adalah alternatif yang menjanjikan secara klinikal untuk rawatan nefrolitiasis CaOx disertai dengan promosi umur panjang dan faedah anti-penuaan. Ujian klinikal adalah perlu untuk menjamin keberkesanan terapeutik HydroZitLa pada manusia.

Bahan dan kaedah

Pengeluaran HydroZitLa, kandungan antioksidan, dan fakta pemakanan. HydroZitLa ialah pekat minuman berasaskan tumbuhan ubatan yang boleh didapati secara tempatan di Tailand32. Minuman ini disediakan dengan mencairkan pekat HydroZitLa (55 mL dalam kantung tertutup) dengan air minuman (hingga jumlah akhir 500 mL). Ia mempunyai warna merah jambu-ungu dengan rasa masam-manis yang lazat. Bahan utama HydroZitLa ialah ekstrak air batang pisang (Musa sapientum L.), dan asid sitrik (16 mEq/uncang). Tumbuhan ubatan tradisional Tai termasuk Clitoria ternatea L. (serbuk bunga kacang biru rama-rama) dan Caesalpinia sappan L. (serbuk kayu sappan) digunakan sebagai pewarna semula jadi. Stevia dan sucralose adalah pemanis. Produk ini telah diluluskan oleh Tai FDA pada 10 April 2019, dalam kategori minuman dalam bekas bertutup (No siri makanan 10–1-02,244–5-0005).

Jumlah kapasiti antioksidan (TAC) HydroZitLa ialah 21.87±7.96 mg kapasiti antioksidan bersamaan vitamin C setiap kantung (Tambahan Rajah 8). Jumlah kandungan fenolik (TPC) ialah 19.99 ±0.83 mg bersamaan asid gallik/100 g. Jumlah kandungan favonoid (TFC) ialah 4.59± 0.31 mg bersamaan catechin/100 g. Untuk kawalan kualiti, TAC, TPC, dan TFC digunakan sebagai parameter kawalan kualiti. Tahap TAC, TPC, dan TFC dalam batang pisang, bunga kacang biru rama-rama, dan ekstrak kayu nilam antara lot dan titik masa penyimpanan tidak jauh berbeza. Dalam pengeluaran HydroZitLa, nilai TAC, TPC, TFC, dan brix (17±2) digunakan sebagai parameter kawalan kualiti untuk mengekalkan konsistensi antara kelompok.

Jumlah tenaga HydroZitLa setiap kantung (hidangan) ialah 25 kcal. Tiada kandungan protein, lemak dan kolesterol dikesan. Jumlah karbohidrat ialah 6 g, gula adalah<1 g, and sodium was 10 mg. The potassium content was 240 mg/100 g. Soluble and insoluble dietary fibers were 0.74 and 0.43 g/100 g, respectively. Te pH of HydroZitLa was 3.4.

Penilaian ketoksikan.Kehadiran Escherichia coli, Clostridium spp., Salmonella spp., dan Staphylococcus aureus dalam HydroZitLa telah dianalisis oleh Biro Kualiti dan Keselamatan Makanan, Kementerian Kesihatan Awam, Thailand. Profil logam HydroZitLa dianalisis oleh ICP-OES.

Ketoksikan akut in vivo HydroZitLa pada tikus telah diuji oleh Institut Penyelidikan Tumbuhan Ubat, Kementerian Kesihatan Awam, Thailand. HydroZitLa atau air (kawalan) diberikan secara lisan kepada tikus pada dos 20 mL/ kg (n=10 setiap kumpulan). Tikus diperhatikan selama 14 hari sebelum nekropsi. Lesi kasar dalam organ visceral telah diperiksa dan dibandingkan antara HydroZitLa dan kumpulan kawalan.

Ujian pengagregatan CaOx.Hablur COM benih telah disediakan62 dan dicairkan kepada 50 mg/mL dalam 0.05 M Tris/0.15 NaCl, pH 6.5. HydroZitLa, atau BSA, atau air suling (kosong) (200 µL) telah ditambah pada penggantungan COM benih kerja yang baru disediakan (2 mL). Selepas pencampuran, penyerapan pada 620 nm diukur sebagai garis dasar (AT0). Selepas pengeraman pada 37 darjah selama 10 minit, penyerapan pada 620 nm diukur semula (AT10). Pekali pengagregatan (AC) dikira seperti berikut: AC=((AT0− AT10)/10)×1000. Nilai AC yang lebih tinggi menunjukkan pengagregatan COM yang lebih tinggi.

Garis sel, sitotoksisiti, dan penentuan ROS intraselular.Sel HK{{0}} (ATCC, VA, USA) dikekalkan dalam DMEM ditambah dengan 10 peratus serum lembu janin dan 1 peratus Pen-Strep di bawah 37 darjah , 5 peratus CO2 dan 95 peratus kelembapan. Sitotoksisiti HydroZitLa dalam sel HK-2 dinilai oleh ujian MTT63. Sel HK-2 telah disemai (200 sel/telaga), ditanam semalaman dalam 96-plat perigi dan dirawat dengan pelbagai kepekatan HydroZitLa (0 sebagai kawalan, 1.25 peratus , 2.5 peratus , 5 peratus , 10 peratus , 20 peratus , 40 peratus , 50 peratus , 80 peratus dan 100 peratus v/v) selama 24 jam. Selepas mencuci, larutan MTT ditambah, diinkubasi selama 1 jam, dan kemudian dibuang. Dimetil sulfoksida telah ditambah untuk melarutkan hablur formazan. Penyerapan pada 570 nm diukur. Daya maju sel ( peratus ) dikira menggunakan sel yang tidak dirawat sebagai kawalan (daya maju 100 peratus).

Perencatan pengeluaran ROS intraselular oleh HydroZitLa ditentukan oleh ujian dichloro-dihydro-fluorescein diacetate (DCFH-DA) dalam 96-plat telaga 64,65. Sel HK-2 telah digabungkan dengan 0.1 M larutan DCFH-DA dan diinkubasi pada 37 darjah selama 30 min. Selepas mencuci, sel telah dicabar dengan H2O2 atau COM (dengan dan tanpa 10 peratus v/v HydroZitLa). Keamatan pendarfluor (teruja pada 485 nm dan dipancarkan pada 535 nm) diukur pada permulaan (T0) dan 60 min (T60). Unit pendarfluor arbitrari (AFU), yang menunjukkan tahap penjanaan ROS, dikira seperti berikut: AFU= T60/T0.

Pengukuran karbonilasi protein.Kandungan karbonil protein, sebagai penunjuk pengoksidaan protein, diukur mengikut laporan awal kami64-66. Sel HK-2 yang dirawat (dalam hidangan 100-mm) telah dilisekan oleh penimbal ujian radioimunopresipitasi yang mengandungi koktel perencat protease. Jumlah kepekatan protein diukur oleh ujian Bradford. Lisat sel diinkubasi dengan larutan 10 mM dinitrophenylhydrazine (DNPH) atau 2 N HCl selama 1 jam dalam gelap. Asid trichloroacetic 20 peratus sejuk telah ditambah dan diinkubasi selama 10 minit di atas ais. Pelet dikumpul dengan sentrifugasi, dibasuh dengan etil asetat: etanol (1:1), dan dilarutkan semula dengan 6 M guanidine HCl. Penyerapan (A) pada 375 nm diukur. Kandungan karbonil protein yang dinormalkan oleh jumlah kepekatan protein dikira seperti berikut: ((ADNPH – AHCl)×45.45)/kepekatan protein.

cistanche side effects reddit

Model tikus untuk nefrolitiasis CaOx.EG (1 peratus v/v) ditambah dalam air minuman (akses percuma ad libitum, selama 35 hari) digunakan untuk induksi nefrolitiasis CaOx dalam tikus. Tikus Wistar jantan (6–8 minggu, 180–300 g) dibahagikan kepada empat kumpulan, iaitu, EG (n=6), EG plus HydroZitLa (n=6), EG plus Uralyt-U (n=6), dan kumpulan kawalan biasa (n=2). Semua tikus ditempatkan dalam sangkar keluli tahan karat pada 25 darjah di bawah kitaran terang-gelap 12:12 jam. Dua tikus kawalan sengaja digunakan hanya untuk perbandingan deposit CaOx dalam buah pinggang tikus dan imunohistokimia, bukan untuk kimia air kencing. HydroZitLa dan Uralyt-U diberi makan secara paksa dua kali sehari (pagi dan petang) pada jumlah dos sitrat 2 mEq sehari. Dos sitrat yang ditadbir ini adalah bersamaan dengan 60.8 mEq sitrat pada manusia yang dikira berdasarkan penukaran dos yang dicadangkan oleh Reagan-Shaw et al.67. 24-h spesimen air kencing dikumpul pada penghujung intervensi (hari ke-35) menggunakan timol sebagai pengawet. Tikus telah dibius dengan isoflurane dan dikorbankan. Kedua-dua buah pinggang telah dikeluarkan, dipotong, dan diperbaiki dalam penampan formalin neutral 10 peratus untuk kajian histologi.

Semua tikus dibeli dari Pusat Haiwan Makmal Kebangsaan, Kampus Salaya Mahidol University, Nakhonpathom, Thailand. Prosedur eksperimen dijalankan mengikut garis panduan untuk haiwan eksperimen oleh Majlis Penyelidikan Kebangsaan Thailand dan diluluskan oleh Jawatankuasa Penjagaan & Penggunaan Haiwan Institusi, Fakulti Perubatan, Universiti Chulalongkorn (No. 022/2560). Kajian kami telah dilakukan dengan mematuhi garis panduan ARRIVE.

Pemendapan CaOx dalam bahagian buah pinggang dengan mikroskop terpolarisasi.Bahagian buah pinggang tikus yang dibenamkan parafin tetap formalin telah disediakan oleh pemproses tisu automatik. Pewarnaan H&E dilakukan mengikut prosedur standard. Endapan kristal CaOx dwirefringen dalam bahagian bernoda H&E telah divisualisasikan menggunakan mikroskop cahaya terpolarisasi (OLYMPUS BX50, Jepun).

Pewarnaan Yasue untuk histokimia CaOx.Bahagian tisu buah pinggang telah dinyahparafin, dihidratkan semula, direndam dalam 5 peratus asid asetik selama 30 minit untuk mengeluarkan kalsium fosfat dan kalsium karbonat, dan dibasuh dengan air suling 68. Bahagian diinkubasi dengan 5 peratus AgNO3 selama 12 minit, dibasuh, dan diinkubasi dengan rubenaik tepu asid dalam 10 peratus ammonium selama 1 min. Bahagian yang bernoda dibilas dengan 50 peratus etanol, dibasuh dengan air suling, dehidrasi, dibersihkan dan dipasang. Mendakan CaOx hitam telah divisualisasikan di bawah mikroskop cahaya69.

Pewarnaan imunohistokimia.Selepas penyahparafinan dan penghidratan semula, pengambilan antigen dilakukan dengan merebus dalam penimbal natrium sitrat menggunakan gelombang mikro. H2O2 endogen telah dinyahaktifkan dengan mengeram dengan 0.3 peratus H2O2 selama 30 minit. Pengikatan tidak spesifik telah disekat dengan mengeram dengan serum kuda biasa selama 20 minit. Bahagian kemudiannya diinkubasi dengan antibodi utama 1:1,000 4-HNE (ab46545, Abcam, Cambridge, UK) atau caspase terbelah-3 (5A1E, Cell Signaling Technology, MA, USA) pada 4 darjah semalaman, diikuti dengan pengeraman dengan antibodi sekunder pada 37 darjah selama 30 minit. Selepas mencuci, bahagian diinkubasi dengan reagen ABC (kit VECTASTAIN® ABC) selama 30 minit, direndam dalam reagen pewarna diaminobenzidine 1 peratus selama 5 minit, dan diwarnakan balas dengan hematoxylin selama 5 minit. Akhirnya, bahagian telah dehidrasi, dibersihkan, dipasang, dan divisualisasikan di bawah mikroskop cahaya.

Pengukuran sitrat kencing, oksalat, asid urik, dan iCOCI. Paras air kencing sitrat ditentukan oleh kromatografi cecair berprestasi tinggi (Sistem Perubatan Varian, CA, Amerika Syarikat) menggunakan lajur ROAorganic Acid H tambah (300×7.8 mm) (Phenomenex, CA, USA) dan dicairkan oleh 5 mM H2SO4 pada kadar aliran 0.5 mL/min. Tahap oksalat dan asid urik kencing diukur dengan elektroforesis kapilari (Beckman Coulter, CA, USA) dipisahkan pada 25 darjah dengan voltan -20 kV. Ujian iCOCI kencing telah dilakukan mengikut laporan kami sebelumnya 38.

C. elegans ketegangan dan penyelenggaraan.Strain jenis liar C. elegans Bristol N2 dan sumber makanan makmalnya E. coli OP50 diperolehi daripada Pusat Genetik Caenorhabditis, Universiti Minnesota, Amerika Syarikat. Mereka ditanam dan dikekalkan dalam plat agar medium pertumbuhan nematod dengan rumput E. coli OP50 pada 20 darjah 70. Semua eksperimen dijalankan dalam cacing dewasa muda yang disegerakkan umur.

Ujian jangka hayat.Analisis jangka hayat dilakukan dalam media cecair71. Secara ringkas, 10 nematod dewasa muda yang disegerakkan umur telah dipindahkan ke dalam 24-plat perigi dengan penimbal M9 bersama-sama dengan E. coli OP50 dan 5-fuoro-2′- deoxyuridine untuk mencegah pengeluaran keturunan. Pelbagai kepekatan HydroZitLa telah ditambah menggunakan air suling sebagai kawalan kenderaan. Nematod hidup dikira setiap 24 jam. Nematod dianggap mati apabila mereka tidak bertindak balas terhadap dorongan lembut menggunakan gelung platinum.

Ujian pengepaman pharyngeal.Pengepaman pharyngeal (penunjuk keupayaan pengambilan makanan) diukur dalam nematod dewasa muda (~10) berbanding antara kawalan dan suplemen HydroZitLa, dengan memantau pengecutan pharyngeal selama 30 saat dalam setiap 24 jam di bawah stereomikroskop (SMZ{ {3}}, Motic, China) pada hari 0 (sebelum suplemen), 5, 10 dan 1572.

Ujian lipofuscin.Pengumpulan lipofuscin dalam nematod jenis liar selepas suplemen dengan pelbagai kepekatan HydroZitLa (20 peratus, 30 peratus, 40 peratus v/v) selama 5 hari telah dipantau. E. coli OP50-cacing yang diberi makan telah digunakan sebagai kawalan. Selepas intervensi, cacing dicuci menggunakan penimbal M9 beberapa kali dan diletakkan di atas slaid kaca ke dalam titisan natrium azida. Pengimejan pendarfluor dilakukan menggunakan mikroskop confocal ZEISS LSM 700. Imej dianalisis selanjutnya menggunakan perisian Image J, dan keamatan pendarfluor dibentangkan sebagai unit arbitrari (AU)72.

Pengukuran panjang telomer relatif. Panjang telomer relatif (RTL) diukur dalam sel HK-2 yang dirawat dengan H2O2 (25 µM), natrium oksalat (NaOx, 900 µM) dan COM (25 µg/cm2 ) dengan atau tanpa HydroZitLa (10 peratus v /v). RTL ditentukan oleh tindak balas rantai polimerase kuantitatif masa nyata (qPCR)73. Ia dikira berdasarkan nisbah bilangan salinan ulangan telomerik kepada nombor salinan gen salinan tunggal (gen 36B4) yang berkadar dengan purata panjang telomer. Primer yang digunakan adalah seperti berikut: Telomere (ke hadapan) 5′-CGGTTTGTTTGGGTTTGGGTTTGGGTTTGGGTTTGGGTT-3′, Telomere (terbalik) 5′-GGC TTGCCTTACCCTTACCCTTACCCTTACCCTTACCCT{{18}GG}′, 34B4{18}TGG′ATCAG, 34B4{18}TGG′ATCAAG }}′ dan 36B4 (terbalik) 5′-CCCATTCTATCATCAACGGGTACAA-3′. PCR dikuatkan pada 95 darjah selama 10 minit, diikuti oleh 40 kitaran 95 darjah selama 15 s dan 54 darjah selama 1 minit.

Pewarnaan dua kali SA‑‑gal dan p16.Sel-sel HK{{{0}} yang tumbuh pada coverlips telah dirawat dengan H2O2, NaOx dan COM dengan dan tanpa 10 peratus v/v HydroZitLa selama 72 jam untuk aruhan SIPS. Selepas rawatan, sel dibetulkan dan diwarnakan dengan larutan X-gal yang baru disediakan (Vivantis, Malaysia) selama 12–16 jam, dicuci, telap dengan 0.1 peratus Triton X-100 (Amresco, TX, Amerika Syarikat) selama 3 minit , dan disekat untuk pengikatan tidak spesifik dengan 1 peratus serum kuda biasa (Gibco, MA, Amerika Syarikat) pada 37 darjah selama 1 jam. Sel kemudiannya diinkubasi dengan antibodi primer 1:10,000 p16 (ab108349, Abcam) pada 4 darjah semalaman, diikuti dengan 1:10,000 Alexa Fluor® 488-antibodi sekunder terkonjugasi ( Teknologi Isyarat Sel) pada 37 darjah selama 30 min. Slip penutup berwarna telah dipasang dengan medium pelekap Fluoroshield dengan 4′,6-diamidino-2-phenylindole (Abcam). Sel senescent SA- -positif gal (biru) dan sel pengekspresi p16-(hijau) telah divisualisasikan dan diimej menggunakan sistem pengimejan EVOS FL Auto 2 (Thermo Fisher Scientific, MA, USA).

Analisis statistik.Semua data dibentangkan sebagai min ± sisihan piawai atau median (julat antara kuartil), mengikut kesesuaian. Ujian-t dua sampel atau ujian Mann-Whitney dilakukan untuk menguji perbezaan antara kedua-dua kumpulan. Analisis varians sehala atau ujian Kruskal-Wallis, diikuti dengan ujian perbandingan berbilang, digunakan untuk menguji perbezaan antara tiga atau lebih kumpulan. Perisian GraphPad Prism versi 9 (GraphPad Sofware Inc., CA, USA) telah digunakan untuk pengiraan dan graf. P<0.05 was considered significant.

Rujukan

1. Michell, AR Urolithiasis–aspek sejarah, perbandingan dan patofisiologi: Kajian semula. JR Soc. Med. 82, 669–672 (1989).

2. Shah, J. & Whitfield, HN Urolithiasis sepanjang zaman. BJU Int. 89, 801–810 (2002).

3. Boonla, C. et al. Ekspresi RNA Pengutus bagi protein chemoattractant monocyte-1 dan interleukin-6 dalam buah pinggang yang mengandungi batu. BJU Int. 101, 1170–1177 (2008).

4. Boonla, C. et al. Fibrosis dan bukti untuk peralihan epitelium-mesenchymal dalam buah pinggang pesakit dengan staghorn calculi. BJU Int. 108, 1336–1345 (2011).

5. Chuang, TF et al. Risiko penyakit buah pinggang kronik pada pesakit dengan batu karang-kajian kohort di seluruh negara. BMC Nephrol. 21, 292 (2020).

6. Dhondup, T. et al. Risiko ESRD dan kematian dalam pembentuk batu ginjal dan pundi kencing. Am. J. Buah Pinggang Dis. 72, 790–797 (2018).

7. Kum, F. et al. Adakah batu masih membunuh? Analisis kematian akibat penyakit batu 1999–2013 di England dan Wales. BJU Int. 118, 140–144 (2016).

8. Geraghty, RM, Cook, P., Walker, V. & Somani, BK Penilaian beban ekonomi penyakit batu karang di UK: Kajian kohort retrospektif dengan min susulan selama 19 tahun. BJU Int. 125, 586–594 (2020).

9. C. Türk (Pengerusi), AN, A. Petrik, C. Seitz, A. Skolarikos (Naib pengerusi), K. Tomas & Guidelines Associates: NF Davis, JFD, R. Lombardo, N. Grivas, Y. Ruhayel. Garis Panduan Persatuan Urologi Eropah (EAU) mengenai Urolithiasis.

10. Jendle-Bengten, C. & Tiselius, HG Susulan jangka panjang pembentuk batu yang dirawat dengan dos rendah natrium kalium sitrat. Scand. J. Urol. Nephrol. 34, 36–41 (2000).

11. Schwille, PO, Herrmann, U., Wolf, C., Berger, I. & Meister, R. Sitrat dan urolithiasis kalsium idiopatik berulang. Kajian rintis membujur mengenai kesan metabolik kalium sitrat oral yang diberikan ke atas ubat jangka pendek, sederhana dan panjang pesakit batu lelaki. Urol. Res. 20, 145–155 (1992).

12. Tracy, CR & Pearle, MS Kemas kini mengenai pengurusan perubatan penyakit batu. Curr. Pendapat. Urol. 19, 200–204 (2009).

13. Mechlin, C., Kalorin, C., Asplin, J. & White, M. Splenda(R) meningkatkan toleransi suplemen kalium sitrat oral untuk pencegahan pembentukan batu: Keputusan percubaan double-blind rawak. J. Endourol. 25, 1541–1545 (2011).

14. Boonla, C. Tekanan Oksidatif dalam Urolithiasis, Spesies Oksigen Reaktif (ROS) dalam Sel Hidup, Cristiana Filip dan Elena Albu, IntechOpen.

15. Boonla, C., Wunsuwan, R., Tungsanga, K. & Tosukhowong, P. Urinari 8-hydroxydeoxyguanosine dinaikkan pada pesakit dengan nephrolithiasis. Urol. Res. 35, 185–191 (2007).

16. Khan, SR Hyperoxaluria yang disebabkan tekanan oksidatif dan antioksidan untuk perlindungan buah pinggang. Urol. Res. 33, 349–357 (2005).

17. Khan, SR Spesies oksigen reaktif sebagai modulator molekul pembentukan batu ginjal kalsium oksalat: Bukti daripada penyiasatan klinikal dan eksperimen. J. Urol. 189, 803–811 (2013).

18. Kittikowit, W. et al. Peningkatan kerosakan DNA oksidatif dilihat dalam biopsi buah pinggang batu bersebelahan pada pesakit dengan nephrolithiasis. Urolithiasis 42, 387-394 (2014).

19. Yasui, T. et al. Rawatan urolithiasis berasaskan patofisiologi. Int. J. Urol. 24, 32–38 (2017).

20. Huang, HS, Ma, MC & Chen, J. Diet rendah vitamin E memburukkan lagi pembentukan kristal kalsium oksalat melalui tekanan oksidatif yang dipertingkatkan dalam buah pinggang hiperoksalurik tikus. Am. J. Physiol. buah pinggang. Fisiol. 296, F34-45 (2009).

21. Huang, HS, Chen, J., Chen, CF & Ma, MC Vitamin E melemahkan pembentukan kristal dalam buah pinggang tikus: Peranan kematian sel tubular renal dan perencat penghabluran. Buah Pinggang Int. 70, 699–710 (2006).

22. Tamilselvan, S. & Menon, M. Terapi Vitamin E menghalang pemendapan kristal kalsium oksalat yang disebabkan oleh hyperoxaluria dalam buah pinggang dengan meningkatkan status antioksidan tisu buah pinggang. BJU Int. 96, 117–126 (2005).

23. Tamilselvan, S. & Selvam, R. Kesan vitamin E dan manitol pada pengekalan kalsium oksalat buah pinggang dalam nefrolitiasis eksperimen. Indian J. Biochem. Biophys. 34, 319–323 (1997).

24. Butterweck, V. & Khan, SR Ubat herba dalam pengurusan urolithiasis: Alternatif atau pelengkap? Planta Med. 75, 1095–1103 (2009).

25. Kasote, DM, Jagtap, SD, Tapa, D., Khyade, MS & Russell, WR Ubat herba untuk batu kencing yang digunakan di India dan China: Kajian semula. J. Ethnopharmacol. 203, 55–68 (2017).

26. Abu Zarin, M., Tan, JS, Murugan, P. & Ahmad, R. Penyiasatan potensi aktiviti anti-urolithiasis daripada pelbagai jenis ekstrak pseudo-batang Musa dalam perencatan penghabluran kalsium oksalat. BMC Complement Med. Ter. 20, 317 (2020).

27. Kailash, P. & Varalakshmi, P. Kesan jus batang pisang pada perubahan biokimia dalam hati tikus normal dan hiperoksalurik. India J. Exp. biol. 30, 440–442 (1992).

28. Prasad, KV, Bharathi, K. & Srinivasan, KK Penilaian Musa (kultivar Linn paradisiacal)–jus batang "Puttubale" untuk aktiviti antilithiatik dalam tikus albino. India J. Physiol. Pharmacol. 37, 337–341 (1993).

29. Panigrahi, PN, Dey, S., Sahoo, M. & Dan, A. Keberkesanan antiurolithiatik dan antioksidan pseudostem Musa paradisiaca pada nephrolithiasis akibat etilena glikol dalam tikus. Indian J. Pharmacol. 49, 77–83 (2017).

30. Poonguzhali, PK & Chegu, H. Pengaruh ekstrak batang pisang terhadap faktor risiko kencing untuk batu pada tikus normal dan hiperoksalurik. Br. J. Urol. 74, 23–25 (1994).

31. Pillai, RG Teras pseudostem Musa dalam rawatan batu kencing. Anc Sci Life. 15, 2–6 (1995).

32. Lordumrongkiat, N., Chotechuang, N., Madared, N., Jindatip, D. & Boonla, C. Jumlah fenolik, jumlah flavonoid dan jumlah kapasiti antioksidan bagi minuman terbitan tumbuhan ubatan: HydroZitLa. Chula Med. J. 64, 381–388 (2020).

33. Sakhaee, K. Farmakologi penyakit batu. Adv. Dis. Buah Pinggang Kronik 16, 30–38 (2009).

34. Baumann, JM & Afolter, B. Peranan paradoks makromolekul kencing dalam pengagregatan kalsium oksalat: Rayuan selanjutnya untuk meningkatkan diuresis dalam metafilaksis batu. Urolithiasis 44, 311–317 (2016).

35. Reddy, AJ et al. Kesan antikonvulsan dan antioksidan ekstrak batang Musa sapientum pada model eksperimen akut dan kronik epilepsi. Farmakog. Res. 10, 49–54 (2018).

36. Jaafar, NF, Ramli, ME & Mohd Salleh, R. Keadaan pengekstrakan optimum Clitorea ternatea fower pada aktiviti antioksidan, jumlah fenolik, jumlah flavonoid dan jumlah kandungan antosianin. Trop. Life Sci. Res. 31, 1–17 (2020).

37. Nirmal, NP, Rajput, MS, Prasad, RG & Ahmad, M. Brazilin dari Caesalpinia sappan heartwood dan aktiviti farmakologinya: Kajian semula. Pac Asia. J. Trop. Med. 8, 421–430 (2015).

38. More-Krong, P. et al. Pengesahan klinikal ujian indeks penghabluran kalsium oksalat (iCOCI) tindak balas indole kencing untuk mendiagnosis urolithiasis kalsium oksalat. Sci. Rep. 10, 8334 (2020).

39. Yasui, T. et al. Kesan sitrat pada pembentukan batu renal dan ekspresi osteopontin dalam model urolithiasis tikus. Urol. Res. 29, 50–56 (2001).

40. Ghaeni, FA, Amin, B., Hariri, AT, Meybodi, NT & Hosseinzadeh, H. Kesan antilithiatic crocin pada lithiasis akibat etilena glikol dalam tikus. Urolithiasis 42, 549-558 (2014).

41. Holmes, RP & Assimos, DG Glyoxylate sintesis, dan modulasi dan pengaruhnya terhadap sintesis oksalat. J. Urol. 160, 1617–1624 (1998).

42. Patankar, S., Fanthome, B. & Bhalerao, SS Keberkesanan herba tambah dalam tikus urolitik: Kajian eksperimen. J. Ayurveda Integr. Med. 11, 250–255 (2020).

43. Chaiyarit, S. & Tongboonkerd, V. Disfungsi mitokondria, dan penyakit batu karang. Fisiol Depan. 11, 566506 (2020).

cistanche portugal

44. Holoch, PA & Tracy, CR Antioksidan dan sejarah batu karang yang dilaporkan sendiri: Tinjauan Pemeriksaan Kesihatan dan Pemakanan Kebangsaan. J. Endourol. 25, 1903–1908 (2011).

45. Khan, SR Adakah tekanan oksidatif, hubungan antara nefrolitiasis dan obesiti, hipertensi, diabetes, penyakit buah pinggang kronik, sindrom metabolik? Urol. Res. 40, 95–112 (2012).

46. Hirose, M. et al. Kecederaan sel epitelium tiub renal dan tekanan oksidatif mendorong pembentukan kristal kalsium oksalat dalam buah pinggang tikus. Int. J. Urol. 17, 83–92 (2010).

47. Khan, SR Spesies oksigen reaktif, keradangan, dan nephrolithiasis kalsium oksalat. Terjemahan Androl. Urol. 3, 256–276 (2014).

48. Boonla, C. et al. Protein radang dan fibrotik sekutu proteomik yang dikenal pasti sebagai juzuk protein utama dalam air kencing dan matriks batu pesakit dengan batu ginjal. Clin. Chim. Akta 429, 81–89 (2014).

49. Aggarwal, D., Gautam, D., Sharma, M. & Singla, SK Bergenin melemahkan kecederaan buah pinggang dengan membalikkan disfungsi mitokondria dalam model tikus hiperoksalurik yang disebabkan oleh etilena glikol. Eur. J. Pharmacol. 791, 611–621 (2016).

50. Ghodasana, J., Pawar, A., Deshmukh, C. & Kuchekar, B. Kesan perencatan rutin dan curcumin pada urolithiasis kalsium oksalat yang disebabkan oleh eksperimen pada tikus. Farmakog. Res. 2, 388–392 (2010).

51. Rumput, F. et al. Kesan polifenol daripada biji anggur pada litiasis buah pinggang. Oksida. Med. sel. Longev. 2015, 813737 (2015).

52. Cherniack, EP Potensi pengaruh polifenol tumbuhan terhadap proses penuaan. Forsch Komplemented. 17, 181–187 (2010).

53. Wood, JG et al. Pengaktif Sirtuin meniru sekatan kalori dan melambatkan penuaan dalam metazoan. Alam 430, 686–689 (2004).

54. Bonkowski, MS & Sinclair, DA Melambatkan penuaan mengikut reka bentuk: Peningkatan NAD( tambah ) dan sebatian pengaktifan sirtuin. Nat. Rev. Mol. sel. biol. 17, 679–690 (2016).

55. Bhullar, KS & Hubbard, BP Jangka hayat dan lanjutan jangka hayat oleh resveratrol. Biochim. Biophys. Acta. 1852, 1209–1218 (2015).

56. von Frieling, J. & Roeder, T. Faktor-faktor yang mempengaruhi terjemahan sekatan diet ke dalam kehidupan yang lebih lama. IUBMB Life 72, 814–824 (2020).

57. von Zglinicki, T. Tekanan oksidatif memendekkan telomer. Trends Biochem Sci. 27, 339–344 (2002).

58. Chuenwisad, K. et al. Penuaan pramatang dan pemendekan telomer yang disebabkan oleh tekanan oksidatif daripada oksalat, kalsium oksalat monohidrat, dan air kencing daripada pesakit dengan nephrolithiasis kalsium oksalat. Depan. Immunol. 12, 696486 (2021).

59. Hu, Z. et al. Interaksi herba-ubat: Kajian literatur. Dadah 65, 1239–1282 (2005).

60. Susanti, S. & Imannura, P. Kesan ekstrak Kayu Secang (Ceasalpinia Sappan L.) terhadap morfologi spermatozoa dan proses boleh balik pada tikus jantan. Dalam Prosiding dalam Persidangan Antarabangsa Bersama Ke-2. ISBN: 978-602-5842-03-0 (2018).

61. Kim, BS et al. Caesalpinia sappan mendorong kematian sel apoptosis dalam sel 12Z endometrium ektopik dengan menekan ekspresi piruvat dehidrogenase kinase 1. Exp. Ter. Med. 21, 357 (2021).

62. Boonla, C., Youngjermchan, P., Pumpaisanchai, S., Tungsanga, K. & Tosukhowong, P. Aktiviti litogenik dan kaitan klinikal lipid yang diekstrak daripada air kencing dan batu pesakit nefrolitiasis. Urol. Res. 39, 9–19 (2011).

63. Kloypan, C., Srisa-art, M., Mutirangura, A. & Boonla, C. LINE-1 hipometilasi yang disebabkan oleh spesies oksigen reaktif dimediasi melalui pengurangan S-adenosylmethionine. Biokim Sel. Fungsi. 33, 375–385 (2015).

64. Whongsiri, P., Phoyen, S. & Boonla, C. Tekanan oksidatif dalam karsinogenesis urothelial: Pengukuran karbonilasi protein dan pengeluaran intraselular spesies oksigen reaktif. Kaedah Mol. biol. 1655, 109–117 (2018).

65. Whongsiri, P. et al. Tekanan oksidatif dan pengaktifan semula LINE-1 dalam kanser pundi kencing dikaitkan secara epigenetik melalui pembentukan kromatin aktif. Radic Percuma. biol. Med. 134, 419–428 (2019).

66. Whongsiri, P. et al. LINE-1 Protein ORF1 dikawal selia oleh spesies oksigen reaktif dan dikaitkan dengan perkembangan karsinoma urothelial pundi kencing. Genom Kanser. Proteom. 15, 143–151 (2018).

67. Reagan-Shaw, S., Nihal, M. & Ahmad, N. Penterjemahan dos daripada kajian haiwan kepada manusia dikaji semula. FASEB J. 22, 659–661 (2008).

68. Yasue, T. Pengecaman histokimia kalsium oksalat. Acta Histochem. Cytochem. 2, 83–95 (1969).

69. Evan, AP et al. Plak Randall pesakit dengan nefrolitiasis bermula di membran bawah tanah gelung nipis Henle. J. Clin. melabur. 111, 607–616 (2003).

70. Prasanth, MI, Santoshram, GS, Bhaskar, JP & Balamurugan, K. Ultraviolet-A mencetuskan penuaan foto dalam model nematod Caenorhabditis elegans dalam laluan bergantung -16 DAF. Umur (Dordr) 38, 27 (2016).

71. Brimson, JM, Prasanth, MI, Plaingam, W. & Tencomnao, T. Bacopa monnieri (L.) wettst. Ekstrak melindungi daripada ketoksikan glutamat dan meningkatkan umur panjang Caenorhabditis elegans. J. Tradit. Kompleks. Med. 10, 460–470 (2020).

72. Prasanth, MI, Brimson, JM, Chuchawankul, S., Sukprasansap, M. & Tencomnao, T. Antipenuaan, rintangan tekanan, dan keberkesanan neuroprotektif Cleistocalyx nervosum var. ekstrak buah panacea menggunakan model Caenorhabditis elegans. Oksida. Med. sel. Longev. 2019, 7024785 (2019).

73. Cawthon, RM Pengukuran telomere dengan PCR kuantitatif. Asid Nukleik Res. 30, e47 (2002).

Ucapan terima kasih

Kajian itu disokong kewangan oleh Dana Jurang Penyelidikan daripada Kementerian Sains dan Teknologi, Agensi Pembangunan Sains dan Teknologi Kebangsaan (NSTDA) dan Universiti Chulalongkorn (GB-rgf_60_2905_0003 kepada CB), dan oleh Penyelidikan Sains Thailand dan Inovasi, Bahagian Industri (RDG6150088 kepada CB), dan Fakulti Perubatan, Universiti Chulalongkorn (Matching Fund). NL menerima Ulang Tahun ke-90 Chulalongkorn University Fund (Ratchadaphiseksomphot Endowment Fund). Penulis amat menghargai sokongan penyelidikan dan inovasi yang disediakan oleh Pusat Teknologi Universiti Chulalongkorn dan Dana Penyelidikan dan Inovasi Sains Thailand (TSRI) (CU_FRB640001_01_2). Terima kasih kepada Cik Natcha Madared atas bantuan yang sangat baik. Berterima kasih kepada kakitangan di kemudahan haiwan Fakulti Perubatan, Universiti Chulalongkorn. Terima kasih kepada Penolong Prof. Dr. Sitthichai Ukritchon dan Prof. Dr. Manathip Osiri atas sokongan mereka terhadap penggunaan mikroskop terpolarisasi.

Sumbangan pengarang

NL: Menjalankan eksperimen sel dan tikus serta mengumpul data. NC: Mengumpul data, dan membantu memahami idea penyelidikan dan analisis data. MP: Mengandung dan melaksanakan eksperimen C. elegans, dan melakukan analisis data C. elegans. DJ: Membantu dalam eksperimen imunohistokimia dan pengimejan. CM: Membantu dalam pembahagian tisu. KC: Melakukan eksperimen pemendekan telomer dan penuaan. AL: Berjaya mengakses kemudahan haiwan untuk eksperimen tikus. TT: Membantu hamil dan mereka bentuk eksperimen C. elegans. CB: Mengandung dan mereka bentuk kajian, melakukan analisis statistik, dan menulis manuskrip. Semua pengarang menyemak manuskrip.

Kepentingan yang bersaing

CB, NC dan NL ialah pencipta HydroZitLa. Universiti Chulalongkorn dan pencipta memiliki harta intelek untuk HydroZitLa. Tiada pengarang lain mempunyai sebarang konflik kepentingan untuk diisytiharkan tentang karya ini.