Cap Jari Alam Semulajadi—Analisis Penembusan Kulit Formulasi Kristal Tumbuhan Jelatang Penyengat

Abstrak:

Latar Belakang: Kristal tumbuhan merupakan konsep baharu untuk menghasilkan formulasi berasaskan tumbuhan. Prinsip mereka adalah berdasarkan pengecilan bahagian atau keseluruhan tumbuhan. Dalam kajian ini, kesan surfaktan terhadap PlantCrystals daun jelatang yang menyengat telah disiasat. Kedua, kandungan bahan pukal dan rumusan PlantCrystals dibandingkan. Di samping itu, buat pertama kalinya, penembusan kulit PlantCrystals telah disiasat.

Kaedah: Daun jelatang yang menyengat dikisar dengan homogenisasi tekanan tinggi. Saiz dianalisis melalui mikroskop cahaya dan penyebaran cahaya statik. Untuk menyiasat kesan pengilangan, kandungan flavonoid dan jumlah karotenoid telah ditentukan, dan kapasiti antioksidan rumusan diukur melalui jumlah kandungan polifenol dan ujian DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) .

Akhirnya, kesan ke atas penembusan kulit telah disiasat. Keputusan: Analisis saiz menunjukkan kesan penstabilan surfaktan, dan analisis kimia mendedahkan kandungan flavonoid dan polifenol yang lebih tinggi untuk PlantCrystals. Penembusan rumusan ke dalam stratum korneum terbukti menjanjikan; PlantCrystals mempunyai pendarfluor dan homogeniti yang lebih tinggi yang dilihat secara visual berbanding dengan bahan pukal. Kesimpulan: Konsep PlantCrystals meningkatkan ketersediaan juzuk berharga dan keberkesanan penembusan. Penggunaan pendarfluor klorofil semula jadi untuk analisis penembusan kulit bagi formulasi berasaskan tumbuhan terbukti sangat berkesan.

Kulit adalah salah satu organ terbesar dalam tubuh manusia, dan tanda-tanda penuaannya secara beransur-ansur didedahkan dengan usia. Penuaan kulit dicirikan oleh kulit kering, peningkatan kedutan, dan penurunan keanjalan. Cistanche mengandungi sejumlah besar flavonoid dan polisakarida, bahan-bahan ini mempunyai anti-pengoksidaan, anti-radang, tekanan anti-oksidatif, dan kesan lain, dan boleh mencegah dan membalikkan penuaan kulit.

Flavonoid dalam Cistanche boleh menghalang penjanaan dan penghapusan radikal bebas, mengurangkan kerosakan tekanan oksidatif pada sel kulit, melindungi sel kulit, dan melambatkan proses penuaan kulit. Kajian telah menunjukkan bahawa polisakarida dalam Cistanche boleh merangsang pertumbuhan dan pembahagian sel kulit, dan meningkatkan keanjalan dan kilauan kulit.

Klik produk suplemen cistanche deserticola

Kata kunci:

antioksidan; anti penuaan; PlantCrystals; urtica dioica; penembusan kulit.

1. Pengenalan

Belia dan kecantikan abadi sentiasa diingini oleh manusia, dan percubaan untuk mencapainya telah berlaku sejak zaman purba. Hari ini, idea itu telah diterjemahkan ke dalam strategi anti-penuaan. Sasarannya bukan lagi pemuliharaan kesihatan keseluruhan untuk sepanjang masa, tetapi sokongan menyeluruh bagi tubuh yang sihat dan penangguhan mekanisme metabolik yang berkaitan dengan usia [1,2]. Dari sudut pandangan kosmetik, anti-penuaan kebanyakannya berkaitan dengan persepsi visual kulit manusia, kerana penuaan mudah dikenali, contohnya, kedutan atau kendur pada kulit [1,3].
Namun begitu, kulit tidak boleh dianggap dari sudut kosmetik sahaja; ia adalah organ terbesar dan penghalang antara badan dan dunia luar [4]. Oleh itu, kulit yang utuh dan sihat juga penting dari perspektif perubatan. Penuaan foto (pendedahan cahaya UV) paling biasa dikenali sebagai faktor eksogen yang bertanggungjawab untuk penuaan kulit bersama dengan faktor lain, contohnya, merokok atau pencemaran udara [5]. Faktor-faktor ini selalunya merupakan oksidan itu sendiri atau mendorong proses yang kerap disambungkan kepada pengeluaran spesies oksigen reaktif (ROS), masing-masing [1,6].

Selain itu, stratum korneum (SC) terjejas dengan fungsi penghalang yang hilang boleh menyebabkan penjanaan ROS, sekali gus merosakkan lapisan sel asas, yang mengakibatkan, contohnya, penuaan yang meluas, keradangan atau kanser kulit. Oleh itu, penghantaran antioksidan ke kulit boleh melambatkan atau menghalang kesan merosakkan ROS, menguatkan SC, dan meningkatkan fungsi perlindungannya [7,8]. Pada masa kini, kesan anti-penuaan antioksidan telah meningkatkan popularitinya, dan permintaan pengguna tidak hanya tertumpu pada keberkesanan dan harga sesuatu produk tetapi juga pada kemampanan [9]. Kajian terkini menunjukkan bahawa bahan tumbuhan boleh ditapis secara mampan dengan anodisasi, yang boleh merangsang potensi yang belum ditemui [10-12].

Berdasarkan keputusan ini, PlantCrystals ialah konsep baharu untuk pemprosesan tumbuhan dengan mengecilkan keseluruhan bahan ke dalam julat bersaiz mikro yang lebih rendah atau malah nano tanpa memerlukan pelarut organik atau pengeluaran sisa organik. Satu lagi kelebihan PlantCrystals berbanding ekstrak biasa ialah gangguan sel bahan organik. Ini membawa kepada pembebasan semua bahan aktif yang digunakan dan pengekalannya di dalam formulasi. Sebaliknya, ekstrak dihadkan kepada satu atau sebahagian kecil bahan dengan sifat kimia yang serupa (cth, air atau larut etanol). Sehubungan itu, dalam kajian ini, daun jelatang (SN) yang menyengat (Urtica dioica), juga dipanggil "Ratu Herba," digunakan untuk penghasilan PlantCrystals dan digunakan pada kulit [13].

Biasanya, SN dikenali sebagai diuretik, tetapi kesan farmaseutikal tidak terhad kepada itu. Banyak manfaat kesihatan boleh dikaitkan dengan SN dan ia masih disiasat untuk banyak kesan farmakologi, contohnya, antioksidan, antimikrob, antimitotik, ubat penahan sakit, anti-radang, dan anti-kanserogenik [14,15]. Mempertimbangkan kulit sebagai sasaran, SN mempunyai pelbagai juzuk dengan kesan yang bermanfaat, contohnya, klorofil, karotenoid, dan polifenol [15,16]. Kesusasteraan melaporkan beberapa sifat farmakologi yang menggalakkan selepas penggunaan kulit ekstrak SN, contohnya, anti-radang dan anti-oksidatif [17].

Sehingga kini, PlantCrystals tidak pernah digunakan dan dianalisis pada kulit. Memandangkan PlantCrystals boleh dihasilkan dengan bilangan tumbuhan yang tidak terkira banyaknya, analisis tanpa memerlukan kaedah individu untuk setiap sampel akan bermanfaat. Pendekatan untuk mengatasi masalah ini ialah penggunaan satu perkara yang kebanyakan tumbuhan mempunyai persamaan: Klorofil (a dan b) (Rajah 1). Pendarfluor klorofil terkenal dan telah disiasat [18]. Jika bahagian histologi mempamerkan klorofil tembus dalam jumlah yang mencukupi, yang boleh dikenali melalui mikroskop pendarfluor, penembusan kulit formula berasaskan tumbuhan boleh dianalisis dengan mudah.

Objektif utama kajian ini adalah pembangunan formulasi SN PlantCrystals untuk aplikasi kulit dan anggaran penembusan SC. SN tidak diproses menjadi PlantCrystals pada masa lalu; akibatnya, matlamat pertama ialah penubuhan proses yang boleh mengecilkan bahan kasar ke dalam mikrometer yang lebih rendah atau julat saiz yang lebih kecil. Tambahan pula, kesan surfaktan tambahan telah dinilai pada saiz yang diperolehi dan aglomerasi rumusan. Kedua, penggantungan pukal dan SN PlantCrystals telah disiasat dengan ujian yang berbeza untuk membandingkan kandungan polifenol, flavonoid dan karotenoid, dan kapasiti antioksidan. Abraham et al. telah menunjukkan bahawa kesan pengurangan terhadap aktiviti bergantung kepada loji yang dipilih dan proses pengeluaran [11]. Oleh itu, perbandingan bahan yang diproses dan bahan pukal tidak dapat dielakkan untuk membuktikan bahawa proses yang digunakan adalah bermanfaat untuk loji yang dirumuskan. Selepas mencapai prasyarat ini, aplikasi kulit telah disemak dengan konsep baharu "cap jari alam semula jadi" dengan mengesan pendarfluor klorofil semula jadi untuk menganggarkan penembusan SC. Ini akan membawa kepada kaedah yang membolehkan kemungkinan cepat, mudah dan kos efektif untuk menganggarkan penembusan formulasi berasaskan tumbuhan ke dalam kulit.

2. Bahan-bahan dan cara-cara

2.1. Pengeluaran PlantCrystal

Daun SN kering berkualiti organik telah disediakan oleh Blank's GmbH and Co. KG (Uplengen, Jerman) (Rajah 2A). Bahan kasar telah dikecilkan dengan kilang kopi (CM) (CG9100, AICOK, Guangdong, China) untuk mendapatkan sampel serbuk untuk pemprosesan selanjutnya. Selepas itu, sampel serbuk (Rajah 2B) ditaburkan di dalam air pada kepekatan 3 peratus (b/b). Selain itu, sampel yang mengandungi 3 peratus (b/b) surfaktan TPGS yang diluluskan oleh FDA ( -Tocopherol Polyethylene Glycol Succinate, Gustav Parmentier GmbH, Frankfurt a. M., Jerman) telah dihasilkan. Kedua-dua sampel dikacau semalaman pada suhu bilik untuk membiarkan zarah membengkak untuk kebolehprosesan yang lebih baik dan untuk memastikan tiada perubahan dalam saiz akan berlaku kemudian (CM tambah S).

Dalam langkah seterusnya, sampel telah dinyahglomerasi dengan Ultra-Turrax (T 25 digital, IKA-Werke GmbH & Co. KG, Staufen, Jerman) selama satu minit dengan peningkatan kelajuan putaran daripada 3000 kepada 25,{ {11}}. Langkah pra-pengilangan seterusnya telah dijalankan dengan Miccra D27 (MICCRA GmbH, Heitersheim, Jerman) untuk mengurangkan lagi saiz zarah yang lebih besar. Sampel telah diproses empat kali dengan peningkatan kelajuan putaran selama 5 minit dengan 7000, 12,000, 18,000 dan 24,000 rpm.

Pengurangan zarah akhir dilakukan melalui homogenisasi tekanan tinggi (HPH) dengan LAB 40 (APV Gaulin, Lübeck, Jerman) pada 500, 750, 1000, dan 1500 bar lima kali setiap satu (Rajah 2C). Untuk analisis kandungan, sampel tanpa TPGS dianalisis untuk mengecualikan kesan TPGS semasa pengukuran atau kemungkinan pengekstrakan tambahan atau perlindungan bahan aktif akibat perumusan misel TPGS [19]. Untuk kajian penembusan kulit, sampel yang mengandungi TPGS digunakan untuk menjamin kebolehbasahan dan kebolehtebaran yang baik bagi formulasi PlantCrystals. Sebagai kawalan, untuk menunjukkan kesan penyusutan, penggantungan pukal daun SN bengkak semalaman (Rajah 2A) dengan kepekatan yang sama telah digunakan.

2.2. Analisis Saiz Zarah

Mikroskopi cahaya (Olympus BX53, Kerjasama Olympus, Tokyo, Jepun) digunakan untuk pemeriksaan visual sampel. Analisis saiz zarah selanjutnya telah dijalankan melalui penyerakan cahaya statik (SLS, Mastersizer 3000, Malvern Instruments, Kassel, Jerman), dengan indeks biasan 1.47 dan indeks penyerapan 0.01. Keputusan dikira sebagai taburan isipadu (D(v)) dan angka (D(n)). Taburan saiz berasaskan isipadu ialah D(v)0.x bermakna x peratus daripada jumlah isipadu (isipadu diringkaskan semua zarah) diwakili oleh zarah dengan saiz yang sama atau lebih rendah daripada nombor yang diberikan.

Oleh itu, nilai D(v)-menekankan zarah bersaiz lebih besar kepada kuasa tiga dan penting untuk memeriksa aglomerat dan zarah yang besar. Taburan saiz berasaskan berangka D(n)0,x bermakna x peratus zarah adalah sama atau lebih kecil daripada nilai yang diberikan. Nilai D(n)-adalah sangat penting berkenaan kajian kulit, kerana ia menekankan pecahan utama saiz zarah yang terdapat dalam sampel, yang terutamanya terlibat dalam proses penembusan. Gabungan hasil volumtrik dan angka harus memberikan gambaran lanjut tentang pemprosesan sampel dan kesan surfaktan pada pecahan zarah bersaiz besar (D(v)) dan pecahan saiz zarah utama (D(n)).

2.3. Jumlah Kandungan Polifenol

Ujian kolorimetrik Folin-Ciocalteu digunakan untuk menilai jumlah kandungan polifenol dan seterusnya kapasiti antioksidan sampel [20]. Pertama, 100 µL ampaian SN dicampur dengan 200 µL reagen Folin-Ciocalteu (Merck KGaA, Darmstadt, Jerman) dan 2 mL air tulen, dan selepas itu diinkubasi pada suhu bilik selama 5 minit. Selepas itu, 1 mL 20 peratus (w/v) Na2CO3 ditambah dan diinkubasi dalam gelap selama 1 jam. Akhirnya, campuran tindak balas yang diperolehi diukur secara spektroskopi pada 765 nm (Multiskan GO, Thermo Scientific, Dreieich, Jerman). Pengiraan kandungan dibuat mengenai asid gallic sebagai standard, dan keputusan dinyatakan sebagai setara asid gallic (mg GAE).

2.4. Kandungan Flavonoid

Untuk penentuan kandungan flavonoid, tindak balas pembentukan kompleks aluminium digunakan, yang merupakan kaedah spektrofotometri yang digunakan secara meluas untuk menentukan sebatian flavonoid yang berbeza dalam sampel makanan dan tumbuhan [21]. Selanjutnya, 100 µL setiap ampaian yang dicairkan ditambah kepada 100 µL larutan etanol AlCl3 2 peratus (w/v) dalam 96-plat perigi dan diinkubasi dalam gelap selama 1 jam. Selepas itu, penyerapan sampel diukur pada 420 nm. Pengiraan kandungan telah dilakukan mengenai quercetin (Biomol GmbH, Hamburg, Jerman) sebagai standard dan hasilnya dinyatakan sebagai setara kuersetin (µg QE).

2.5. Jumlah Kandungan Karotenoid

Kandungan karotenoid sampel ditentukan dengan mengukur penyerapan spektrum karotenoid pada panjang gelombang tertentu, menggunakan kaedah selepas Rodriguez-Amaya [22]. Penyerapan setiap sampel diukur pada 450 nm. Pengiraan telah dilakukan mengenai lengkung piawai -karotena (TCI Deutschland GmbH, Eschborn, Jerman), dan keputusan dinyatakan sebagai µg -karotena bersamaan (µg CE).

2.6. Kapasiti Antioksidan

Kapasiti antioksidan dinilai menggunakan ujian DPPH, yang menggunakan 1,1-difenil2-radikal bebas picrylhydrazyl (DPPH) sebagai penunjuk [23]. Secara ringkas, 0.2 mM larutan metanol DPPH (Sigma-Aldrich Corporation, St. Louis, MO, USA) telah disediakan dan 100 µL sampel yang dicairkan telah ditambah ke dalam 96-plat perigi dan dicampur dengan 100 µL larutan DPPH. Plat diinkubasi dalam gelap selama 30 minit, dan penyerapan diukur pada 517 nm [23]. Aktiviti penghapusan radikal bebas dikira mengikut persamaan berikut:

di mana peratus RSA ialah aktiviti penghapusan radikal dalam peratusan, ADPPH ialah penyerapan DPPH, dan sampel ialah penyerapan sampel. Kepekatan sampel dan peratusan RSA yang sepadan telah diplot pada graf untuk mengira nilai IC50.

2.7. Analisis statistik

Analisis statistik data telah dilakukan menggunakan perisian GraphPad Prism® (v. 8.3, GraphPad Software, Inc., La Jolla, CA, USA) dan ujian-t berpasangan digunakan untuk perbandingan, di mana nilai-p < {{4 }}.05 dianggap signifikan secara statistik.

2.8. Penentuan Penembusan Kulit

Kajian penembusan kulit telah dijalankan ke atas telinga babi segar, diperoleh dari rumah sembelih tempatan sebagai hasil sampingan pengeluaran daging. Telinga babi digunakan sebagai model kulit ex-vivo, kerana persamaan antara kulit babi dan manusia [24-26]. Selepas dibersihkan dengan air yang disucikan dan pengeringan berhati-hati dengan tuala kertas, 50 mg setiap sampel digunakan pada kawasan pemeriksaan 2 × 2 cm. Selepas itu, formulasi diurut ke dalam kulit selama 1 minit menggunakan sarung tangan tepu [27]. Semua sampel diinkubasi pada suhu 32 ◦C selama 6 jam dan permukaan kulit disapu dengan teliti dengan tuala kertas basah untuk mengeluarkan sebarang sisa sampel.

Selepas itu, biopsi tebuk diameter 15 mm telah diambil, dibenamkan dalam Tissue-Tek® (Sakura Finetek Europe BV, Alphen aan den Rijn, Belanda), dan serta-merta dibekukan pada −80 ◦C. Cryosectioning dalam potongan menegak setebal 20 µm telah dijalankan dengan cryo microtome (Mod. 2700, Reichert-Jung, Nußloch, Jerman). Pengimejan pendarfluor semua pemotongan dilakukan dengan Olympus CKX53 (Olympus, Jepun), dilengkapi dengan sumber cahaya Olympus U-HGLGPS dan 200-pembesaran lipatan. Keamatan sumber cahaya pendarfluor ditetapkan kepada 50 peratus. Masa pendedahan dikekalkan malar pada 50 ms untuk semua imej. Penapis yang dipilih untuk analisis ialah sistem blok penapis DAPI HC (penapis pengujaan: 540–560 nm, cermin dichroic: 570 nm, penapis pelepasan: Bermula pada 580 nm (LP)).

3. Keputusan dan perbincangan

3.1. Penghasilan PlantCrystals dan Analisis Saiz Zarah

Penghasilan PlantCrystals daripada bahan pukal daun SN kasar telah berjaya. HPH menghasilkan zarah yang sangat kecil, dan tiada sel utuh diperhatikan melalui mikroskop cahaya. Pembezaan berbeza bagi sampel yang diproses tanpa penstabilan tambahan (Rajah 3A) dan TPGS (Rajah 3B) sebagai surfaktan tidak dapat dilihat secara visual selepas pemeriksaan mikroskopik cahaya. Hanya kecenderungan aglomerasi yang sedikit lebih rendah boleh dilihat untuk sampel dengan TPGS sebagai surfaktan.

Analisis saiz zarah berasaskan isipadu melalui SLS mendedahkan bahawa proses pengilangan dapat mengurangkan saiz daripada beberapa 100 µm kepada julat saiz µm dua digit yang lebih rendah (D(v){{8 }}.50). Perbandingan sampel menunjukkan bahawa surfaktan mempunyai kesan yang boleh dikenali pada sampel yang digiling dan bengkak (CM tambah S). Dapat diketahui bahawa sampel tanpa surfaktan mempunyai nilai D(v)0 yang sama.10-} seperti sampel yang distabilkan dengan TPGS (Rajah 4), tetapi untuk nilai D(v) yang lebih tinggi, saiznya digandakan secara kasar. . Oleh kerana kedua-dua sampel telah digubah dan dirawat secara sama kecuali penambahan surfaktan, ini menunjukkan bahawa TPGS dapat menghalang penggumpalan sampel yang lebih besar semasa pembengkakan. Sampel yang diproses menunjukkan keputusan yang sama untuk semua nilai D(v) kecuali D(v)0.99, yang boleh ditafsirkan sebagai tanda aglomerasi yang jelas bagi sampel yang distabilkan dengan TPGS (Rajah 4). Walau bagaimanapun, perlu dipertimbangkan bahawa D(v)0.99 adalah sangat berubah-ubah dan tidak selalunya merupakan parameter yang paling boleh dipercayai, kerana satu atau sangat sedikit zarah bersaiz lebih besar boleh mempunyai pengaruh besar, contohnya, disebabkan oleh penyediaan sampel [28].

Saiz yang diperolehi adalah sangat menjanjikan berbanding keputusan untuk bahan berasaskan daun yang dicapai oleh Abraham et al. [11]. Pengukuran SLS menghasilkan saiz dan taburan saiz yang hampir sama untuk formulasi PlantCrystals akhir. Kemungkinan kelemahan kajian ini berbanding Abraham et al. ialah pra-penggilingan tidak begitu berkesan dalam kajian ini dan bahawa Miccra D27 telah digunakan, yang memperkenalkan banyak haba dan udara ke dalam sampel. Sebaliknya, pengecilan akhir zarah oleh HPH adalah lebih lembut dalam kajian ini, kerana bilangan kitaran HPH dikurangkan daripada 18 kepada 15 kitaran dengan tekanan Kurang daripada atau sama dengan 1000 bar dan daripada 10 hingga 5 kitaran dengan tekanan. sebanyak 1500 bar [11]. Saiz serupa yang diperolehi untuk PlantCrystals dalam kedua-dua kajian membawa akibatnya kepada teori yang menarik: Dua proses yang sangat berbeza telah digunakan, dan selain itu, dua surfaktan berbeza telah digunakan (atau tiada), tetapi pada akhirnya, saiz yang serupa diperolehi. Ini membawa kepada andaian bahawa pengurangan bahan tumbuhan melalui HPH adalah terhad pada tahap tertentu. Sekurang-kurangnya untuk daun SN (kajian ini) dan daun sage/laura (Abraham et al.), petunjuk kelihatan sangat kuat dan perlu disiasat dalam kajian masa depan [11].

Secara keseluruhannya, kedua-dua kajian menunjukkan bahawa HPH sangat cekap dalam menghasilkan PlantCrystals, tetapi pra-pengilangan tidak dapat dielakkan untuk mengelakkan penyumbatan celah omboh. Masih terdapat potensi untuk mengoptimumkan proses pengeluaran, yang sepatutnya, dalam satu pihak, paling berkesan, tetapi juga memperkenalkan serendah mungkin haba dan udara ke dalam sampel untuk mengekalkan sebanyak mungkin bahan yang boleh dicapai, sebaliknya. .

Analisis taburan saiz berangka menunjukkan sekali lagi bahawa sampel yang bengkak termasuk saiz yang lebih besar sedikit untuk sampel tanpa surfaktan berbanding sampel yang mengandungi TPGS (Rajah 5). Sampel yang diproses mempunyai saiz yang sama untuk nilai D yang lebih rendah (D(n)0.10 dan D(n)0.50), dan perbezaan yang besar boleh dikenali untuk nilai D yang lebih tinggi ( D(n)0.99.

Untuk mendapatkan idea yang lebih baik tentang proses, kesan surfaktan, dan sampel yang diproses yang terhasil, semua analisis saiz (D(v), D(n), mikroskop cahaya) mesti dipertimbangkan dan digabungkan. Secara amnya, persediaan pengukuran untuk SLS tidak dapat membezakan antara satu zarah bersaiz besar dan aglomerasi zarah. Adalah mungkin untuk melakukan Rajah 5 tambahan. Taburan saiz berasaskan numerik bagi sampel SN yang tidak diproses dan diproses. Atas kiri: Tanpa surfaktan. Bawah, kiri: Dengan surfaktan. Kanan: Hasil skala semula untuk sampel PlantCrystals yang sepadan untuk visualisasi dan perbandingan yang lebih baik. Untuk mendapatkan idea yang lebih baik tentang proses, kesan surfaktan, dan sampel yang diproses yang terhasil, semua analisis saiz (D(v), D(n), mikroskop cahaya) mesti dipertimbangkan dan digabungkan. Secara amnya, persediaan pengukuran untuk SLS tidak dapat membezakan antara satu zarah bersaiz besar dan aglomerasi zarah. Adalah mungkin untuk melakukan pengukuran tambahan untuk memeriksa penggumpalan, jika penggumpalan tidak terlalu kuat dan boleh diuraikan, contohnya, dengan menukar kelajuan kacau atau sonication [29,30].

Walau bagaimanapun, prosedur ini tidak biasa digunakan dan ada kemungkinan ia tidak mempunyai kesan yang diingini. Penyelesaian yang cepat dan mudah ialah penggunaan mikroskop cahaya, yang membolehkan andaian cepat, walaupun untuk aglomerasi yang ketat. Mengenai analisis mikroskopik, boleh diketahui bahawa untuk sampel tanpa TPGS, aglomerasi adalah lebih gelap, dan secara keseluruhan, sampel kelihatan lebih keruh. Sebaliknya, zarah tunggal kedua-dua sampel kelihatan berada dalam julat saiz yang sama (Rajah 3). Ini bermakna perbezaan dalam saiz ukuran SLS berkemungkinan besar berkaitan dengan penggumpalan dan bukan saiz "sebenar" zarah.

Untuk tafsiran data SLS, adalah penting untuk mengetahui bahawa nilai D(v) - mewakili dan menekankan zarah bersaiz lebih besar secara eksponen kepada kuasa tiga, manakala nilai D (n) - mewakili kuantiti zarah [ 28]. Untuk membandingkan keputusan, nisbah nilai-D dilakukan dengan membahagikan nilai D(v)- atau D(n) sampel tanpa surfaktan dengan nilai D yang sepadan dengan surfaktan tambahan (Jadual 1). Nisbah yang lebih besar daripada 1.{{10}} bermakna surfaktan mempunyai kesan penstabilan, manakala nisbah yang lebih rendah daripada 1.0 akan menunjukkan kesan ketidakstabilan dan nisbah 1.0 dengan tepat menunjukkan tiada kesan.

Bagi sampel giling kering dan bengkak (CM tambah S), peningkatan kuat dalam nisbah nilai D(v)- menunjukkan bahawa aglomerat yang lebih besar boleh dihalang oleh TPGS, manakala nisbah malar D(n)- nilai mendedahkan bahawa penstabilan dengan TPGS hanya mempunyai kesan kecil pada aglomerat yang lebih kecil atau zarah tunggal. Bagi sampel yang diproses, sebaliknya boleh diperhatikan; nisbah nilai D(v)-adalah hampir malar, tetapi nisbah nilai D(n)-bertambah dengan nilai D(n)-yang lebih tinggi. Ini bermakna dalam kes sampel yang diproses, aglomerat yang lebih besar berlaku dengan dan tanpa TPGS (D(v)). Sebaliknya, surfaktan memang menghalang penggumpalan zarah tunggal, dan juga, pengagregatan besar sekurang-kurangnya boleh dikurangkan ke tahap tertentu (D(n)).

Secara keseluruhannya, boleh dirumuskan bahawa TPGS sebagai surfaktan tidak mempunyai kesan besar ke atas saiz atau taburan saiz, tetapi kesannya boleh diiktiraf. Kesan penstabilan diri daripada rumusan PlantCrystals tidak dapat diperhatikan. Sebaliknya, formulasi PlantCrystals mendapat manfaat daripada penambahan surfaktan. HPH membuktikan dirinya sekali lagi sebagai teknik yang sangat berkesan untuk menghasilkan formulasi PlantCrystals dan ia mampu mengurangkan saiz zarah utama kepada julat yang dikehendaki sekitar atau di bawah 1 µm. Walau bagaimanapun, ia memerlukan langkah pra-pengilangan yang meluas untuk mengelakkan penyumbatan mesin dan tidak boleh digunakan sebagai teknik kendiri [11].

3.2. Analisis Kandungan dan Kajian Kapasiti Antioksidan (AOC).

Dalam bahagian ini, analisis dilakukan ke atas sampel awal yang tidak diproses (penggantungan pukal) dan PlantCrystals untuk menyiasat kesan pengilangan ke atas bio-aktif SN, terutamanya antioksidan. SN terkenal dengan kandungan polifenol, flavonoid dan karotenoidnya, yang menunjukkan manfaat kesihatan yang hebat. Mereka mempunyai aktiviti antioksidan, anti-radang, dan antitumor, serta banyak aktiviti lain [23,31,32].

Di samping itu, ia mengandungi jumlah klorofil yang tinggi, yang mempunyai aktiviti antioksidan dan antimutagenik yang ketara; tambahan pula, ia boleh digunakan sebagai antijerawat dan agen perangsang tisu [33,34]. Semua bio-aktif tersebut boleh berfungsi sebagai sokongan semula jadi yang unggul untuk mengukuhkan fungsi penghalang SC. Beberapa kajian spektrofotometri telah dijalankan untuk menyiasat kesan teknik pengilangan terhadap kandungan SN dan antioksidan. Kandungan flavonoid dan karotenoid diukur sebelum dan selepas pengilangan. Di samping itu, jumlah kandungan polifenol dan ujian DPPH digunakan untuk menganggar kapasiti antioksidan. Semua keputusan analisis kandungan dan ujian dipaparkan dalam Jadual 2.

Pengecilan dijangka meningkatkan ketersediaan juzuk tumbuhan dengan pemusnahan sel tumbuhan, yang sepatutnya menghasilkan pelepasan selanjutnya sebatian aktif, sekali gus meningkatkan potensi farmakologi rumusan. Selaras dengan itu, peningkatan ketara telah diperhatikan untuk kandungan flavonoid (nilai-p=0.0165). Untuk bahan pukal, nilainya ialah 107 ± 2 µg QE dan boleh ditingkatkan kepada 288 ± 38 µg QE untuk penggantungan PlantCrystals.

Oleh itu, boleh dinyatakan bahawa HPH membawa kepada ketersediaan flavonoid dua kali ganda bagi SN PlantCrystals berbanding pukal. Peningkatan ini amat penting untuk menggariskan keberkesanan teknik PlantCrystals kerana flavonoid SN seperti asid ursolik dan kuersetin dianggap sebagai bahan aktif paling penting yang bertanggungjawab untuk kesan anti-penuaan SN pada kulit. Kesan ini adalah berdasarkan keupayaan konstituen untuk menghalang elastase dan kolagenase [17]. Tambahan pula, peningkatan dalam kandungan flavonoid disokong oleh penggunaan media hidrofilik dalam rumusan PlantCrystals sebagai Bourgeois et al. menunjukkan keunggulan ekstrak hidrofilik mengenai aktiviti antioksidan dan anti-penuaan [17].

Keputusan yang diperolehi bagi jumlah kandungan karotenoid tidak menunjukkan sebarang peningkatan yang ketara selepas proses homogenisasi. Sebab yang mungkin untuk ini adalah pendedahan kepada haba, udara, dan cahaya semasa pengeluaran, sebagai tambahan kepada sifat hidrofilik formulasi, yang mungkin tidak menyokong ketersediaan bebas lipofilik aktif seperti karotenoid [22].

Polifenol terkenal dengan pelbagai manfaat kesihatannya yang diperluaskan sebagai antioksidan, antimikrob, anti-radang, antiulser, agen antitumor, dan banyak kesan lain [35-37]. SN dianggap sebagai sumber yang kaya dengan pelbagai jenis polifenol, seperti asid gallik, asid caffeic, asid ferulik, kuersetin, dan rutin [36,38]. Analisis kandungan polifenol dilakukan untuk memberikan pemahaman yang lebih baik tentang formulasi. Ujian ini juga dianggap sebagai ujian kapasiti antioksidan dan ia boleh mengukur polifenol hidrofilik dan lipofilik secara serentak [39]. Berbanding dengan keputusan kandungan flavonoid, jumlah kandungan polifenol boleh dipertingkatkan dengan ketara (nilai-p=0.0013). Sampel PlantCrystals menunjukkan kandungan 65 peratus lebih tinggi berbanding bahan pukal. Peningkatan yang kuat ini tidak dijangka, kerana kajian terdahulu oleh Abraham et al. menunjukkan peningkatan sebanyak 1.1 peratus selepas homogenisasi untuk biji argan sahaja [11]. Penjelasan untuk ini boleh jadi antioksidan tumbuhan yang berbeza: iaitu, SN kaya dengan antioksidan hidrofilik dan klorofil, manakala biji argan mengandungi terutamanya antioksidan lipofilik.

Keputusan ujian DPPH menunjukkan bahawa nilai IC50 formulasi tidak dapat diperbaiki oleh teknologi PlantCrystals. Ujian DPPH ialah ujian antioksidan yang cekap yang biasa digunakan dalam kesusasteraan, tetapi ia mempunyai kelemahan utama mengenai formulasi kaya karotenoid dan klorofil. Kehadiran juzuk ini bertindih secara fotometrik dengan ukuran DPPH, yang membawa kepada bacaan positif palsu. Pertindihan ini boleh menjelaskan nilai IC50 yang tidak dijangka tinggi untuk perumusan PlantCrystals. Ini tidak dijangka, kerana formulasi PlantCrystals sebelumnya sentiasa mencapai peningkatan dalam AOC yang dianalisis melalui ujian DPPH [10,11,40].

Untuk meringkaskan, HPH dapat meningkatkan kandungan flavonoid dan AOC melalui pengukuran polifenol tetapi bukan kandungan karotenoid dan pengukuran AOC melalui ujian DPPH. Di satu pihak, kemungkinan penambahbaikan boleh diberikan kepada pengurangan saiz zarah, yang akan membawa kepada kawasan permukaan yang lebih besar dan akibatnya penyebaran dan ketersediaan bahan aktif yang lebih baik. Pemusnahan sel tumbuhan dengan HPH juga membawa kepada pembebasan bahan aktif yang lebih baik.

Sebaliknya, teknik pengecilan memberi kesan kepada kestabilan fizikokimia juzuk. Proses yang digunakan dalam kajian ini memperkenalkan haba dan udara ke dalam rumusan pada tahap tertentu, yang boleh menyebabkan kehilangan juzuk sensitif, contohnya, disebabkan oleh pengoksidaan. Perlindungan daripada cahaya, penyejukan yang sesuai, dan pensterilan sampel boleh menjadi penambahbaikan selanjutnya untuk menghasilkan PlantCrystals dalam kajian akan datang dan menjamin perlindungan yang lebih baik bagi bahan-bahan berharga.

3.3. Penentuan Penembusan Kulit

Dalam bahagian terakhir kajian ini, perbandingan kelakuan penembusan pukal SN dan penggantungan PlantCrystals telah disiasat. Mikroskopi pendarfluor membolehkan visualisasi sampel daun SN pada kulit, dengan menjejaki penembusan klorofil jenis a dan b. SN terkenal dengan kuantiti besar pewarna semula jadi ini, yang bertanggungjawab untuk warna hijau tumbuhan. Kedua-dua bahan boleh menyerap cahaya biru (400-420 nm) dan merah (640-680 nm), menghasilkan pendarfluor klorofil pada kira-kira 690 dan 740 nm [41]. Lampu merah yang difluores oleh klorofil ini boleh dikesan menggunakan mikroskop pendarfluor.

Keputusan kajian penembusan kulit sampel daun SN dipaparkan dalam Rajah 6. Pada mulanya, autofluoresensi kulit dilaraskan kepada minimum (Rajah 6A). Perlu dinyatakan bahawa walaupun klorofil yang diperoleh daripada bahan pukal yang tidak diproses menunjukkan pendarfluor yang boleh dikesan secara visual dalam SC. Walau bagaimanapun, penembusan kulit adalah tidak konsisten dan tidak homogen (Rajah 6B). Formulasi PlantCrystals menunjukkan pendarfluor yang lebih konsisten dan dilihat secara visual dalam SC (Rajah 6C).

Perlu ditekankan bahawa kepekatan bahan tumbuhan adalah sama, dan perbezaan utama adalah saiz zarah dan bilangan sel tumbuhan yang musnah. Ini bermakna perbezaan dalam penembusan boleh dijelaskan oleh dua kesan. Pertama, gangguan sel akan membawa kepada kandungan kloroplas bebas yang lebih tinggi, menghasilkan kepekatan yang lebih tinggi dan seterusnya kecerunan kepekatan yang lebih tinggi dan penembusan yang lebih baik [42,43]. Kedua, bahan dan juzuk yang tidak boleh diselesaikan adalah jauh lebih kecil untuk rumusan PlantCrystals, dan ini akan setanding dengan kesan yang diketahui daripada nanohablur, contohnya, lekatan yang lebih baik dan keberkesanan penembusan. Di samping itu, kehomogenan akan dipertingkatkan kerana saiz zarah yang lebih kecil dan jumlah kawasan sentuhan zarah yang lebih tinggi.

Walau bagaimanapun, penembusan ke dalam SC adalah sasaran kajian ini, dan boleh diakui bahawa kesan yang berbeza pada kedalaman penembusan tidak dapat dilihat secara visual dalam PlantCrystals berbanding dengan bahan pukal. Fakta bahawa klorofil menunjukkan penembusan transdermal ke dalam bejana kulit hidup, walaupun selepas HPH, boleh dijelaskan dengan menggunakan peraturan Lipinski lima pada molekul. Peraturan ini pada asalnya digunakan untuk meramalkan kelakuan penyerapan atau kebolehtelapan ubat selepas pemberian oral. Penggunaan peraturan ini mengenai ramalan penembusan kulit sesuatu ubat kini sedang dibincangkan (46).

Ia menyatakan bahawa kebolehtelapan ubat yang lemah boleh diramalkan jika lebih daripada satu kriteria digunakan untuk molekul: Lebih daripada lima kumpulan penderma ikatan hidrogen, kumpulan penerima ikatan hidrogen, berat molekul lebih daripada 500 Da, atau air oktanol. pekali sekatan (nilai P log) lebih besar daripada 5 (47. Klorofil a dan b kedua-duanya sepadan dengan semua kriteria yang disebutkan selain kumpulan penderma ikatan hidrogen (Rajah 1). Ini menunjukkan sifat penembusan yang lemah bagi molekul. Oleh itu, PlantCrystals boleh hanya meningkatkan konsistensi dan kedalaman penembusan kulit klorofil pada tahap tertentu yang terhad. Namun begitu, pengeluaran PlantCrystals melalui HPH meningkatkan jumlah klorofil a dan b dalam SC. Ia boleh diandaikan bahawa jika klorofil menembusi lebih homogen dan disebut ke dalam SC, tumbuhan lain yang aktif dengan kebolehtelapan yang lebih tinggi akan dihantar ke dalam kulit pada tahap yang besar.

Memandangkan SC adalah sasaran yang dimaksudkan dalam kajian ini, teknologi PlantCrystals adalah pendekatan formulasi yang sangat menjanjikan dan serba boleh untuk mengeksploitasi manfaat banyak herba semulajadi pada sifat kulit. Oleh itu, sebagai contoh, banyak tumbuhan mempunyai kesan pelembab yang selaras dengan prinsip korneoterapi untuk menjana kulit yang lebih sihat [48,49]. Di samping itu, komponen seperti asid lemak perlu juga mempunyai kesan positif, contohnya, menguatkan dan membaiki halangan kulit, malah boleh digunakan sebagai penambah penembusan [50,51]. Kesemua kesan positif bahan aktif dan eksipien terbitan tumbuhan ini secara semula jadi digabungkan ke dalam rumusan PlantCrystals tanpa menghasilkan sebarang sisa.

Secara umum, dapat ditunjukkan bahawa mikroskop pendarfluor dapat mengesan penembusan kulit formulasi berasaskan tumbuhan. Ini bukan sahaja menarik dari sudut pandangan saintifik, tetapi juga untuk pemasaran dan kepuasan pelanggan, kerana kesan daripada formulasi berasaskan tumbuhan (contohnya, ubat rumah atau topeng kulit) boleh dibuktikan dengan mudah, contohnya, dengan lampu UV khas selepas rawatan di studio kosmetik. Dari sudut pandangan saintifik, kaedah ini merupakan kaedah yang sangat pantas dan menjimatkan kos untuk menganggar keberkesanan sesuatu formulasi tanpa penambahan sebarang penanda pendarfluor. Selain kelemahan bahawa hanya komponen pendarfluor aktif (sebahagian besar klorofil, tetapi yang lain tidak boleh dikecualikan) boleh dianalisis, andaian umum tentang kehomogenan dan jumlah boleh dilakukan. Selain itu, untuk kajian kulit dengan PlantCrystals atau bahan berasaskan tumbuhan, konsep "cap jari alam semula jadi" membolehkan analisis kesan rumusan (cth, asas terpakai (gel, krim, dll.) atau penambah penembusan) tanpa mengubah rumusan asal atau penambahan bahan kimia.

4. Kesimpulan

Konsep "cap jari alam" membuktikan nilainya dalam kajian ini. Pengesanan klorofil pendarfluor semulajadi dalam stratum korneum telah dicapai untuk PlantCrystals, serta untuk bahan pukal. Sasaran utama untuk membangunkan formulasi SN PlantCrystals dengan penembusan SC yang lebih baik telah dicapai dan penembusan SC bagi formulasi PlantCrystals adalah homogen berbanding dengan penembusan tidak homogen bagi bahan pukal. Konsep "cap jari alam semula jadi" sepatutnya bermanfaat untuk formulasi tumbuhan lain yang kaya dengan klorofil sebagai teknik yang mudah dan cepat untuk menganggarkan penembusannya.

Semasa penyediaan SN PlantCrystals, yang diterangkan di sini buat kali pertama, saiz zarah utama bahan kasar boleh dikurangkan kepada julat bersaiz mikro yang lebih rendah. TPGS sebagai surfaktan tambahan menghalang aglomerasi pada tahap tertentu. Kunci untuk mengaktifkan potensi penuh PlantCrystals ialah gangguan sel tumbuhan, yang dicapai mengikut analisis saiz. Teori ini ditekankan oleh peningkatan pembebasan aktif dan aktiviti antioksidan yang ketara. Nilai kandungan flavonoid yang lebih tinggi dan diukur AOC yang lebih baik menggunakan jumlah kandungan fenol menjadikan SN PlantCrystals sebagai formulasi yang menjanjikan untuk terapi kulit anti-oksidatif.

Kajian masa depan perlu membuktikan bahawa keputusan ini bukan sahaja boleh dicapai dengan "ratu herba." Kaedah tambahan untuk mengukur AOC juga harus diuji untuk kebolehgunaannya pada kristal tumbuhan yang kaya dengan klorofil. Ujian DDPH yang biasa digunakan, juga digunakan dalam kajian ini, malangnya, tidak dapat digunakan dalam kajian ini, disebabkan pertindihan spektrofotometri antara reagen yang digunakan dan karotenoid dan klorofil sampel.

Sumbangan Pengarang:

Pengkonsepan, DK, dan CMK; metodologi, DK, RMA, dan SW; analisis formal, DK, RMA, dan SW; penyiasatan, DK, RMA, dan SW; sumber, CMK; penyusunan data, DK, RMA dan SW; penulisan—penyediaan draf asal, DK, RMA, dan SW; menulis—menyemak dan menyunting, DK, RMA dan JB; visualisasi, DK, RMA dan SW; penyeliaan, JB; pentadbiran projek, CMK; pemerolehan pembiayaan, CMK Semua pengarang telah membaca dan bersetuju dengan versi manuskrip yang diterbitkan.

Pembiayaan:

Kerja ini sebahagiannya dibiayai oleh projek ZIM: KF ZF4114903AJ8.

Penyata Lembaga Semakan Institusi:

Tidak berkaitan.

Kenyataan Persetujuan Termaklum:

Tidak berkaitan.

Penyata Ketersediaan Data:

Semua data termasuk dalam manuskrip.

Penghargaan:

Penulis ingin mengucapkan terima kasih kepada Blank's GmbH & Co.KG atas sumbangan sampel jelatang yang menyengat, yang digunakan dalam kajian ini. Kami juga ingin mengucapkan terima kasih kepada Udo Bakowsky yang memberikan penggunaan percuma mikroskop pendarfluor. Penulis juga mengucapkan terima kasih kepada Soma Sengupta untuk bantuan dengan penyemakan draf. Reem M. Alnemari ingin mengucapkan terima kasih kepada Universiti Taif di Arab Saudi atas sokongan kewangannya.

Konflik Kepentingan:

Penulis mengisytiharkan tiada konflik kepentingan.

Rujukan

1. Kohl, E.; Steinbauer, J.; Landthaler, M.; Szeimies, R.-M. Penuaan kulit. J. Eur. Acad. Dermatol. Venereol. 2011, 25, 873–884. [CrossRef]

2. Mohiuddin, AK Penuaan Kulit & Strategi Anti-Penuaan Tepi Moden. Int. J. Dermatol. Penjagaan Kulit 2019, 1, 8–62. [CrossRef]

3. Trojahn, C.; Dobos, G.; Lichterfeld, A.; Blume-Peytavi, U.; Kottner, J. Mencirikan Penuaan Kulit Muka pada Manusia: Merungkai Ekstrinsik daripada Fenomena Biologi Intrinsik. BioMed Res. Int. 2015, 2015, 318586. [CrossRef]

4. Grice, EA; Segre, JA Mikrobiom kulit. Nat. Mikrobiol Rev. 2011, 9, 244–253. [CrossRef]

5. Cannarozzo, G.; Fazia, G.; Bennardo, L.; Tamburi, F.; Amoruso, GF; Del Duca, E.; Nisticò, SP Peranti Laser 675 nm Baharu dalam Rawatan Penuaan Muka: Kajian Pemerhatian Bakal. Fotobiomodul. Difoto. Laser Surg. 2021, 39, 118–122. [CrossRef] [PubMed]

6. Farage, MA; Miller, KW; Elsner, P.; Maibach, HI Faktor intrinsik dan ekstrinsik dalam penuaan kulit: Kajian semula. Int. J. Kosmet. Sci. 2008, 30, 87–95. [CrossRef] [PubMed]

7. Trouba, KJ; Hamadeh, HK; Amin, RP; Germolec, DR Tekanan Oksidatif dan Peranannya dalam Penyakit Kulit. Antioksida. Isyarat Redoks. 2002, 4, 665–673. [CrossRef] [PubMed]

8. Lademann, J.; Vergou, T.; Darvin, SAYA; Patzelt, A.; Meinke, MC; Voit, C.; Papakostas, D.; Zastrow, L.; Sterry, W.; Doucet, O. Pengaruh Aplikasi Topikal, Sistemik dan Gabungan Antioksidan pada Sifat Penghalang Kulit Manusia. Farmakol Kulit. Fisiol. 2016, 29, 41–46. [CrossRef]

9. Amberg, N.; Fogarassy, ​​C. Tingkah Laku Pengguna Hijau dalam Pasaran Kosmetik. Sumber 2019, 8, 137. [CrossRef]

10. Griffin, S.; Sarfraz, M.; Farida, V.; Nasim, MJ; Ebokaiwe, AP; Keck, CM; Jacob, C. Tiada masa untuk membuang sisa organik: Saiz nano menukarkan sisa pemprosesan makanan kepada bahan yang ditapis. J. Alam Sekitar. Manag. 2018, 210, 114–121. [CrossRef]

11. Abraham, AM; Alnemari, RM; Jacob, C.; Keck, CM PlantCrystals—Bahan Tumbuhan Bersaiz Nano untuk Peningkatan Bioefikasi Tumbuhan Perubatan. Bahan 2020, 13, 4368. [CrossRef]

12. Abraham, AM; Alnemari, RM; Brüßler, J.; Keck, CM Meningkatkan Kapasiti Antioksidan Sisa Teh Hitam Menggunakan Kristal Tumbuhan. Molecules 2021, 26, 592. [CrossRef] 13. Mehegan, MA Jelatang Penyengat—Ratu Herba. Penyembuhan Herba Alkimia, ed. 1; Bookbaby: Perbandaran Pennsauken, NJ, Amerika Syarikat, 2011.

14. Upton, R. Daun jelatang (Urtica dioica L.): Ubat sayuran yang luar biasa. J. Herba. Med. 2013, 3, 9–38. [CrossRef]

15. Semalty, M.; Adhikari, L.; Semwal, D.; Chauhan, A.; Mishra, A.; Kotiyal, R.; Semalty, A. Kajian Komprehensif mengenai Fitokimia dan Kesan Farmakologi Jelatang Penyengat (Urtica dioica). Curr. Tradit. Med. 2017, 3, 156–167. [CrossRef]

16. Kregiel, D.; Pawlikowska, E.; Antolak, H. Urtica spp.: Tumbuhan Biasa dengan Sifat Luar Biasa. Molekul 2018, 23, 1664. [CrossRef] [PubMed]

17. Bourgeois, C.; Leclerc, É.A.; Corbin, C.; Doussot, J.; Serrano, V.; Vanier, J.-R.; Seigneuret, J.-M.; Auguin, D.; Pichon, C.; Lainé, É.; et al. Jelatang (Urtica dioica L.) adalah sumber fitokimia antioksidan dan anti-penuaan untuk aplikasi kosmetik. Comptes Rendus Chim. 2016, 19, 1090–1100. [CrossRef]

18. Maxwell, K.; Johnson, GN Klorofil pendarfluor—Panduan praktikal. J. Exp. Bot. 2000, 51, 659–668. [CrossRef] [PubMed]

19. Hosseinzadeh, R.; Khorsandi, K.; Hemmaty, S. Kajian Kesan Surfaktan Terhadap Pengekstrakan dan Penentuan Sebatian Polifenol dan Kapasiti Antioksidan Ekstrak Buah-buahan. PLoS ONE 2013, 8, e57353. [CrossRef]

20. Gao, X.; Ohlander, M.; Jeppsson, N.; Björk, L.; Trajkovski, V. Perubahan Kesan Antioksidan dan Hubungannya dengan Fitonutrien dalam Buah Buckthorn Laut (Hippophae rhamnoides L.) semasa Pematangan. J. Agric. Kimia Makanan. 2000, 48, 1485–1490. [CrossRef]

21. Ordonez, A.; Gomez, J.; Vattuone, M.; Isla, MI aktiviti Antioksidan ekstrak Swartz Sechium edule (Jacq.). Kimia Makanan. 2006, 97, 452–458. [CrossRef]

22. Rodriguez-Amaya, DB Panduan Analisis Karotenoid dalam Makanan; Akhbar ILSI: Washington, DC, Amerika Syarikat, 2001.

23. Katsube, T.; Tabata, H.; Ohta, Y.; Yamasaki, Y.; Anuurad, E.; Shiwaku, K.; Yamane, Y. Penyaringan untuk Aktiviti Antioksidan dalam Produk Tumbuhan Boleh Dimakan: Perbandingan Ujian Pengoksidaan Lipoprotein Ketumpatan Rendah, Ujian Scavenging Radikal DPPH dan Ujian Folin−Ciocalteu. J. Agric. Kimia Makanan. 2004, 52, 2391–2396. [CrossRef]

24. Summerfield, A.; Meurens, F.; Ricklin, ME Imunologi kulit babi dan nilainya sebagai model untuk kulit manusia. Mol. Immunol. 2015, 66, 14–21. [CrossRef] [PubMed]

25. Ranamukhaarachchi, SA; Lehnert, S.; Ranamukhaarachchi, SL; Sprenger, L.; Schneider, T.; Mansoor, I.; Rai, K.; Häfeli, UO; Stoeber, B. Perbandingan mikromekanikal kulit manusia dan babi sebelum dan selepas pemeliharaan dengan pembekuan untuk pembangunan peranti perubatan. Sci. Rep. 2016, 6, 32074. [CrossRef]

26. Jacobi, U.; Kaiser, M.; Tol, R.; Mangelsdorf, S.; Audring, H.; Otberg, N.; Sterry, W.; Lademann, J. Kulit telinga babi: Model in vitro untuk kulit manusia. Kulit Res. Technol. 2007, 13, 19–24. [CrossRef] [PubMed]

27. Nagelreiter, C.; Mahrhauser, D.; Wiatschka, K.; Skipiol, S.; Valenta, C. Kepentingan protokol kerja yang sesuai untuk eksperimen pelucutan pita pada kulit telinga babi: Pengaruh formulasi lipofilik dan kemerosotan lekatan jalur. Int. J. Pharm. 2015, 491, 162–169. [CrossRef] [PubMed]

28. Stetefeld, J.; McKenna, SA; Patel, TR Penyerakan cahaya dinamik: Panduan praktikal dan aplikasi dalam sains bioperubatan. Biophys. Wahyu 2016, 8, 409–427. [CrossRef] [PubMed]

29. Brar, SK; Verma, M. Pengukuran nanozarah dengan teknik penyebaran cahaya. Trend Dubur. Kimia. 2011, 30, 4–17. [CrossRef]

30. Kübart, SA; Keck, CM Laser difraktometri zarah nano: Perangkap yang kerap & peluang terlepas pandang. J. Pharm. Technol. Ubat Res. 2013, 2, 17. [CrossRef]

31. Kukric, Z.; Topalic-Trivunovic, L.; Kukavica, B.; Matos, S.; Pavicic, S.; Boroja, M.; Savic, A. Pencirian aktiviti antioksidan dan antimikrob daun jelatang (Urtica dioica L.). Tempoh Acta. Technol. 2012, 2012, 257–272. [CrossRef]

32. Pereira, L. Rumpai Laut sebagai Sumber Bahan Bioaktif dan Terapi Penjagaan Kulit—Kosmeseutikal, Algotheraphy, dan Thalassotherapy. Kosmetik 2018, 5, 68. [CrossRef]

33. Hayes, M.; Ferruzzi, MG Kemas kini mengenai bioavailabiliti dan mekanisme kemopencegahan derivatif klorofil pemakanan. Nutr. Res. 2020, 81, 19–37. [CrossRef] [PubMed]

34. Lagu, BH; Lee, DH; Kim, BC; Ku, SH; Park, EJ; Kwon, IH; Kim, KH; Kim, KJ Terapi fotodinamik menggunakan klorofil-a dalam rawatan jerawat vulgaris: Kajian rawak, buta tunggal, muka berpecah. J. Am. Acad. Dermatol. 2014, 71, 764–771. [CrossRef] [PubMed]

35. Gülçin, I.; Küfrevioglu, OI; Oktay, M.; Büyükokuroglu, ME Antioksidan, antimikrob, antiulser dan aktiviti analgesik jelatang (Urtica dioica L.). J. Ethnopharmacol. 2004, 90, 205–215. [CrossRef] [PubMed]

36. Ðurovi´c, S.; Pavli´c, B.; Šorgi´c, S.; Popov, S.; Savi'c, S.; Petronijevi´c, M.; Radojkovi´c, M.; Cvetanovi'c, A.; Zekovi'c, Z. Komposisi kimia daun jelatang yang menyengat yang diperolehi dengan pendekatan analisis yang berbeza. J. Fungsi. Makanan 2017, 32, 18–26. [CrossRef]

37. Ghaima, K.; Hashim, NM; Ali, SA Aktiviti Antibakteria dan Antioksidan Ekstrak Etil Asetat Jelatang (Urtica dioica) dan Dandelion (Taraxacum officinale). J. Appl. Pharm. Sci. 2013, 3, 96–99. [CrossRef]

38. Orˇci´c, D.; Franciškovi´c, M.; Bekvalac, K.; Svirˇcev, E.; Beara, I.; Lesjak, M.; Mimica-Duki´c, N. Penentuan kuantitatif fenolik tumbuhan dalam ekstrak Urtica dioica oleh kromatografi cecair berprestasi tinggi ditambah dengan pengesanan spektrometri jisim tandem. Kimia Makanan. 2014, 143, 48–53. [CrossRef]

39. Everette, JD; Bryant, QM; Hijau, AM; Abbey, YA; Wangila, GW; Walker, RB Kajian Teliti Kereaktifan Pelbagai Kelas Kompaun terhadap Reagen Folin−Ciocalteu. J. Agric. Kimia Makanan. 2010, 58, 8139–8144. [CrossRef]

40. Griffin, S.; Tittikpina, NK; Al-Marby, A.; Alkhayer, R.; Denezhkin, P.; Witek, K.; Gbogbo, KA; Batawila, K.; Duval, RE; Nasim, MJ; et al. Mengubah Sisa Kepada Nilai: Bahan Tumbuhan Semulajadi Bersaiz Nano Solanum incanum L. dan Pterocarpus erinaceus Poir dengan Aktiviti Antimikrob yang Menjanjikan. Farmaseutik 2016, 8, 11. [CrossRef]

41. Guidi, L.; Tattini, M.; Landi, M. Bagaimanakah Kloroplast Melindungi Klorofil Terhadap Cahaya Berlebihan? Dalam Klorofil; Jacob-Lopes, E., Zepka, LQ, Queiroz, MI, Eds.; InTech: London, UK, 2017.

42. Scheuplein, RJ; Kosong, IH Kebolehtelapan kulit. Fisiol. Wahyu 1971, 51, 702–747. [CrossRef] [PubMed]

43. Godin, B.; Touitou, E. Penghantaran kulit transdermal: Ramalan untuk manusia daripada model in vivo, ex vivo dan haiwan. Adv. Dadah Deliv. Wahyu 2007, 59, 1152–1161. [CrossRef] 44. Pyo, S.; Meinke, MC; Keck, CM; Müller, RH Rutin—Peningkatan Aktiviti Antioksidan dan Penembusan Kulit oleh Teknologi Nanokristal (smartCrystals). Kosmetik 2016, 3, 9. [CrossRef]

45. Vidláˇrová, L.; Romero, GB; Hanuš, J.; Štˇepánek, F.; Müller, RH Nanocrystals untuk peningkatan penembusan kulit—Kesan kepekatan dan mekanisme asas menggunakan curcumin sebagai model. Eur. J. Pharm. Biopharm. 2016, 104, 216–225. [CrossRef] [PubMed]

46. ​​Chaulagain, B.; Jain, A.; Tiwari, A.; Verma, A.; Jain, SK Penghantaran ubat protein secara pasif melalui laluan transdermal. Artif. Sel Bernama. Bioteknol. 2018, 46, 472–487. [CrossRef] [PubMed]

47. Lipinski, CA; Lombardo, F.; Dominy, BW; Feeney, PJ Eksperimen dan Pendekatan Pengiraan untuk Menganggar Keterlarutan dan Kebolehtelapan dalam Penemuan dan Pengembangan Ubat. Adv. Dadah Deliv. Wahyu 1997, 23, 3–25. [CrossRef]

48. Gediya, S.; Mistry, R.; Patel, U.; Blessy, M.; Jain, H. Tumbuhan Herba: Digunakan sebagai Kosmetik. J. Nat. Prod. Resour Tumbuhan. 2011, 1, 24–32.

49. Kapoor, S.; Saraf, S. Formulasi dan Penilaian Pelembap Yang Mengandungi Ekstrak Herba Untuk Pengurusan Kulit Kering. Farmakog. J. 2010, 2, 409–417. [CrossRef]

50. Dorni, AC; Amalraj, A.; Gopi, S.; Varma, K.; Anjana, S. Novel cosmeceuticals daripada tumbuhan—Semakan berpandukan industri. J. Appl. Res. Med. Aromat. Tumbuhan 2017, 7, 1–26. [CrossRef]

51. Herman, A.; Herman, AP Minyak pati dan konstituennya sebagai penambah penembusan kulit untuk penghantaran ubat transdermal: Kajian semula. J. Pharm. Pharmacol. 2014, 67, 473–485. [CrossRef]

For more information:1950477648nn@gmail.com