Kesan Ekstrak Cistanche Deserticola Pada Tindak Balas Erektil Zakar dalam Tikus yang Dibuang

Li Gu, Wen Ting Xiong, Yan Lei Zhuang, Jian Shuang Zhang, dan Xin Liu*

Pusat Penyelidikan Kejuruteraan Makanan dan Kesihatan Kementerian Pendidikan Negeri, Universiti Sun Yat-sen, Guangzhou, China

Abstrak

Cistanche deserticola (CD) telah dianggap sebagai agen tonik pada fungsi pembiakan selama beribu-ribu tahun. Kesan ekstrak CD pada tindak balas erektil zakar telah disiasat dalam kajian ini. Selepas pembedahan kastrasi, tikus dirawat secara intragastrik dengan ekstrak CD ({{0}}.45, 0.90 dan 1.8 g/kg) setiap hari selama empat minggu. Tindak balas erektil zakar diukur dan hormon serum diuji pada akhir eksperimen. Telah dinilai bahawa kependaman erektil menjadi lebih lama dan tempoh erektil lebih pendek dengan ketara pada tikus yang dikebiri berbanding dengan kawalan yang dikendalikan secara palsu. Walau bagaimanapun, ekstrak CD memendekkan kependaman erektil dan memanjangkan tempoh erektil untuk meminimumkan kesan negatif pengebirian. Pada dos 0.9g/kg, ekstrak CD mengawal selia pendekatan kepekatan hormon luteinizing serum ke tahap normal pada tikus yang dikebiri. Penemuan ini menunjukkan bahawa CD memudahkan tindak balas erektil zakar dan memodulasi tahap hormon serum sedikit sebanyak.

Klik produk tonik cistanche

PENGENALAN

Cistanche Hoffmg. Et Link, salah satu genera keluarga Orobanchaceae, diedarkan terutamanya di tanah gersang dan padang pasir di hemisfera utara, seperti Mongolia Dalam, Xinjiang, dan wilayah autonomi Ningxia di China, Iran, India, Mongolia, dll. The Cistanche spesies tergolong dalam herba parasit saka, yang biasanya melekat pada akar tumbuhan penetapan pasir seperti Haloxylox ammo dendron, H. persicum, Kalidium foliated, dan tumbuhan Tamarix, dll. (Jiang dan Tu 2009).

Herba Cistanche, batang spesies Cistanche, telah dianggap sebagai tonik yang unggul dan mendapat penghormatan "Ginseng of the deserts". Antara spesies Cistanche, Cistanche deserticola YC MA telah ditunjukkan sebagai bahan sumber utama Cistanche (Stefanova et al. 2011). Walau bagaimanapun, disebabkan penuaian yang berlebihan dalam beberapa tahun kebelakangan ini, sumber semula jadi C. deserticola (CD) liar adalah kekurangan yang telah dikumpulkan sebagai salah satu tumbuhan Kelas II yang memerlukan perlindungan di China, oleh itu spesies lain dari genus ini, seperti C. salsa dan C. sinensis, juga digunakan sebagai pengganti di beberapa kawasan. Dari pertama kali direkodkan dalam Chinese Material Medica Shen Nong (kompendium farmakologi kuno), CD telah dianggap dapat menguatkan buah pinggang dan mencergaskan "Yang" dalam amalan klinikal di bawah teori perubatan tradisional Cina, yang didakwa berkesan untuk pembiakan, pembangunan, dan fungsi kesuburan. Sementara itu, CD juga telah direbus dengan daging kambing, kentang, atau nasi untuk menghasilkan makanan tonik untuk merawat gangguan akibat overstrain selama beratus-ratus tahun, menunjukkan bahawa ia selamat untuk diambil secara lisan (Xiong et al. 2013). Walau bagaimanapun, penggunaan anekdot ini terutamanya wujud dalam incunabula Cina, dengan maklumat saintifik terhad dibincangkan dari segi konsep farmakologi moden.

Disfungsi erektil (ED) adalah keadaan yang dicirikan oleh sama ada ereksi zakar yang tidak mencukupi atau ereksi yang tidak bertahan cukup lama pada lelaki dewasa (Cohan dan Korenman 2000). Sebagai tindak balas kepada agen kimia moden, canggih, terdapat minat baru untuk mencari ubat yang berkesan dan selamat daripada tumbuhan untuk rawatan ED (Adimoelja 2000). Kajian terdahulu (Liu et al. 2009) menunjukkan bahawa CD electuary mempercepatkan ereksi zakar pada tikus normal, walau bagaimanapun, tiada data yang terlibat mengenai kesan CD terhadap disfungsi erektil.

Pada haiwan, pengebirian pembedahan dengan orkiektomi dua hala telah dianggap sebagai standard pengebirian untuk menyiasat ED (Tombal 2005). Oleh itu, kajian ini dijalankan untuk menilai potensi kesan CD terhadap ED dengan menyiasat kependaman dan tempoh erektil dalam tikus yang dikebiri..

BAHAN DAN KAEDAH

Bahan kimia dan bahan

Echinacoside (purity >98%) and acteoside (purity >98 peratus ) dibeli daripada Institut Kawalan Makanan dan Dadah Kebangsaan (Beijing, China). Metanol gred HPLC dibeli daripada Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, Amerika Syarikat). Air yang telah disucikan dihasilkan menggunakan Sistem Millipore Milli-Q Integral 3 dan Sistem Q-POD Milli-Q (Bedford, MA, USA). Batang C. deserticola telah dibeli daripada Shenzhen GURU Biology Co., Ltd (Guangdong, China) dan dikisar menjadi serbuk halus dengan penghancur melalui penapis 60 mesh.

Analisis HPLC dan penyediaan bahan tumbuhan

Kandungan Echinacoside dan acteoside serbuk CD ditentukan mengikut kaedah kami sebelum ini (Zhao et al. 2011). Kemudian, setiap 100 g serbuk kering direbus dalam 1.5

L air selama 1.5 jam. Menyejukkan pada suhu bilik, minuman keras campuran telah disentrifugasi pada 2000 rpm selama 10 minit (Eppendorf 5810R, Jerman) dan mendakan telah diekstrak semula dua kali dalam keadaan yang sama. Supernatan gabungan telah dipekatkan oleh penyejat berputar vakum (Heidolph laborota 4001-efisien, Jerman) pada 60 darjah, dan kemudian diliofilkan dan menghasilkan kira-kira 42 peratus serbuk ekstrak kering. Semasa menjalankan eksperimen haiwan seterusnya, ekstrak kering telah dibubarkan dalam air yang disucikan pada suhu bilik.

Haiwan eksperimen

Tikus Sprague-Dawley jantan dewasa (200-220g) diperolehi daripada Pusat Haiwan Eksperimen Perubatan di Wilayah Guangdong (Guangzhou, PR China), yang dikekalkan dalam kawasan terkawal suhu dengan 12-jam kitaran terang/gelap pada suhu bilik (22-24 darjah ) dan kelembapan malar (40-70 peratus ) dalam makmal SPF (bebas patogen khusus) dan diberi makan secara ad libitum. Prosedur eksperimen mematuhi Panduan Institut Kesihatan Nasional untuk Penjagaan dan Penggunaan Haiwan Makmal.

Prosedur eksperimen

Seminggu sebelum pentadbiran, lima puluh ekor tikus SD jantan telah dibius dengan natrium pentobarbital intraperitoneal (40 mg/kg) (Jung et al. 1999) dan secara rawak diperuntukkan kepada lima kumpulan: kecuali tikus dalam kumpulan yang dikendalikan secara palsu (Sham ), selebihnya dikebiri secara dua hala melalui pendekatan skrotum (Anderes 2003, Schlatt et al. 2002). Sementara itu, kumpulan CDtreated diberikan secara intragastrik dengan 0.45g/kg (dos rendah ekstrak CD, LCD tambah Cas), 0.9g/kg (dos median ekstrak CD, MCD tambah Cas), dan 1.8g/kg (dos tinggi bagi Ekstrak CD, HCD tambah Cas) ekstrak CD, manakala kumpulan palsu dan dikebiri diberikan dengan jumlah air yang sepadan sahaja. Pengukuran berat badan diambil pada permulaan prosedur dan kemudian setiap minggu. Semua tikus menjalani laparotomi sejurus selepas kematian untuk penyingkiran dan penimbangan posterior organ berikut: kelenjar preputial, vesikel mani, kelenjar prostat, dan otot levator ani.

Pengukuran tindak balas erektil zakar

Fungsi ereksi tikus dalam setiap kumpulan dinilai mengikut kaedah sebelumnya (Ji et al. 2009, Luo et al. 2006). Secara ringkas, elektrod bipolar keluli tahan karat (Sistem Pemerolehan & Analisis Data BL420F, Tme Technology Co., Ltd, Chengdu, PR China) diletakkan dengan teliti pada zakar sehingga ia didirikan dengan nadi rangsangan elektrik (5 V) 0.2 s. Masa dari rangsangan hingga ereksi direkodkan sebagai kependaman erektil zakar. Apabila tindak balas erektil zakar diperhatikan, elektrod boleh ditarik balik dari zakar, dan tempoh masa zakar mengekalkan ereksi direkodkan sebagai tempoh ereksi.

Pensampelan darah dan analisis hormon serum

Tikus telah dibius dengan natrium pentobarbital secara intraperitoneal (40}mg/kg) (Jung et al. 1999). Sampel darah diambil dan dibekukan pada 4 darjah selama 4j, dari mana serum dikumpulkan melalui sentrifugasi pada 4000 rpm selama 5 minit pada 4 darjah (Eppendorf 5810 R, Jerman) dan segera disimpan di dalam peti sejuk -20 darjah sehingga analisis selanjutnya . Jumlah tahap LH dan FSH diukur menggunakan kit radioimmunoassay (RIA) komersial (Institut Teknologi Biologi Beijing Utara, Beijing, China) merujuk kepada arahan pengeluar (Matsumoto et al. 1986). Berdasarkan teknik imun radioaktif kompetitif, saya{10}}melabelkan LH (atau FSH) telah digunakan dalam ujian. Secara ringkas, 100µl I125-ejen berlabel LH ​​(atau FSH) telah ditambahkan ke dalam sampel serum 100µl dan diinkubasi dengan 100µl antibodi arnab yang telah dimurnikan pada 4 darjah (atau 37 darjah ) semalaman. Kemudian, agen pemisah imun keldai-anti-arnab telah ditambah ke dalam kompleks antigen-antibodi dan disentrifugasi (3500 rpm, 15 min) untuk memisahkan bebas dan terikat antibodi 125I-LH (atau FSH). Selepas itu, keradioaktifan mendakan diukur di kaunter ujian imun radio (DMF-96, Zhongcheng electrical technology development Co., Ltd., Hefei, China). Had sensitiviti ujian LH dan FSH adalah kedua-duanya 1.0mIU/ml.

ANALISIS STATISTIK

Analisis data dilakukan menggunakan perisian SPSS versi 16.0. Nilai dinyatakan sebagai min ± sisihan piawai (SD). Data parametrik dianalisis menggunakan analisis analisis varians sehala (ANOVA) diikuti dengan ujian LSD post hoc. Data bukan parametrik dianalisis dengan ujian Kruskal-Wallis. Perbezaan dianggap signifikan secara statistik jika kebarangkalian sisihan adalah kurang daripada 0.05.

KEPUTUSAN

Penentuan kuantitatif kandungan echinacoside dan acteoside serbuk CD

Kandungan echinacoside dan acteoside dalam serbuk CD ialah 1.27±0.01 peratus dan 0.52±0.003 peratus , yang mematuhi keperluan Farmakope Cina. Kromatogram HPLC serbuk CD ditunjukkan dalam rajah. 1.

Rajah 1

Profil kromatografi HPLC serbuk Cistanche deserticola. Puncak 1, echinacoside; Puncak 2, acteoside. Paksi X, masa pengekalan; Paksi Y, unit penyerapan. Keadaan HPLC: Sistem HPLC Perairan (Binary HPLC Pump1525, Pengesan Indeks Biasan 2414, Pengesan Tatasusunan Fotodiod 2996); fasa pegun: Simetri C18(4.6mm×25{{10}}} mm, 5 µm, Waters, Milford, MA, USA); fasa mudah alih: 0.5 peratus (V/V) asid asetik larutan akueus (A) dan bahan metanol (B) (0min, A: B=25:75; 10- 30 min, A: B{{16 }}: 60; 30 min, A: B=0: 100); kadar aliran: 1ml/min; panjang gelombang detektif: 330 nm; suhu: 30.

Rajah.2

Latensi dan tempoh ereksi zakar dalam tikus yang dikebiri. Data dinyatakan sebagai min ± SD (n=10). ##hlm<0.01 relative to sham-operated group, **p<0.01 relative to castrated group. Abbreviation (below): Sham, sham-operated group; Cas, castration control group; LCD +Cas (0.45g/kg), MCD +Cas (0.9g/kg) and HCD +Cas (1.8g/kg), three groups of CD extract treated in castrated rats

Rajah.3

Kesan ekstrak CD pada kepekatan LH serum dalam tikus dikebiri. Data dinyatakan sebagai min ± SD (n=10). # hlm<0.05 relative to sham-operated group, * p<0.05 relative to castrated group.

Berat badan dan berat organ aksesori relatif

Seperti yang ditunjukkan dalam Jadual 1, semua tikus mempunyai berat badan awal yang sama dengan peningkatan dari hari 1 hingga hari 28. Walau bagaimanapun, nilai min dalam kumpulan dikebiri meningkat daripada 216.8±9.2 g kepada 251.4±12.7, 283.3±15.1, 306.8±15.4 dan 322.2±18.4 g, memperoleh berat yang lebih sedikit berbanding rakan sejawat yang dikendalikan secara palsu (p<0.05). There were no statistical differences between the sham group and CD treated group.

Rajah.4

Kesan ekstrak CD pada kepekatan FSH serum dalam tikus dikebiri. Data dinyatakan sebagai min ±SD (n=10).

Tahap hormon serum

Dianalisis oleh ujian RIA, purata kepekatan serum LH dalam tikus yang dikebiri ialah 2.50±0.34mIU/ml, menunjukkan peningkatan berbanding kawalan kendalian palsu (p<0.05). However, the value descended about 49.2% in the MCD +Cas group relative to that in castrated control (p<0.05) (fig. 3). Shown in fig. 4, no statistical differences were observed among all groups on FSH concentration.

PERBINCANGAN

Keputusan kami menunjukkan bahawa pengebirian memanjangkan kependaman erektil zakar dengan ketara dan memendekkan tempoh ereksi, dengan atrofi organ aksesori yang luar biasa. Walau bagaimanapun, ekstrak CD memudahkan tindak balas erektil zakar dan memodulasi tahap LH serum sedikit sebanyak pada tikus yang dikebiri.

Ereksi spontan terutamanya dirangsang dan dikekalkan oleh androgen melalui mekanisme selular, molekul dan fisiologi, yang melibatkan kelonggaran otot licin kavernosal (Traish et al. 2007, Talha et al. 2007) . Tahap testosteron yang tidak mencukupi membawa kepada penurunan kelonggarannya (McClure 1988), yang seterusnya mengakibatkan mati pucuk pada lelaki (Bivalacqua et al. 2000). Terutamanya pada tikus, ia dikekalkan oleh pelbagai kepekatan testosteron sistemik sebanyak 10-12 peratus, di bawahnya tindak balas erektil dilemahkan dalam cara yang bergantung kepada dos (Armagan et al. 2006). Dalam kajian ini, kepekatan testosteron dalam edaran adalah terlalu rendah untuk memenuhi had sensitiviti (0.02ng/ml) dalam semua tikus yang dikebiri (data tidak ditunjukkan dalam keputusan). Walau bagaimanapun, ekstrak CD memendekkan kependaman erektil zakar dengan ketara pada tiga dos dan memanjangkan tempoh ereksi pada 0.90 g/kg dan 1.8 g/kg. Ia mungkin akibat daripada kesan androgen seperti CD yang disebut dalam beberapa kajian terdahulu (He et al. 1996a, He et al. 1996b).

Sesetengah organ aksesori, seperti prostat dan vesikel mani, adalah bergantung kepada androgen, oleh itu perubahan berat mungkin mencerminkan perubahan dalam status endokrin (Trisomboon et al. 2007, Jang et al. 2011). Ia wujud tahap ambang testosteron, di bawahnya metabolisme organ-organ ini telah dihalang (Trachtenberg 1985). Telah disahkan dalam kajian kami bahawa pengebirian menyebabkan berat organ pembiakan aksesori berkurangan akibat kekurangan testosteron.

Testosteron dirembeskan terutamanya oleh sel testis Leydig dan dikawal oleh hormon hipofisis, seperti hormon luteinizing (LH) dan hormon perangsang folikel (FSH), yang memainkan peranan penting dalam mengekalkan fungsi zakar haiwan yang dikebiri (Robert et al. 2{ {6}}04). Memandangkan paksi hipotalamus-pituitari-gonad (HPG) ialah mekanisme kawalan maklum balas gelung tertutup, paras hormon gonad yang rendah boleh mengawal rembesan LH dan FSH secara bergilir-gilir (Morales et al. 2004). Kajian kami telah menyiasat bahawa tahap LH serum meningkat dengan ketara pada tikus yang dikebiri dan kemudian turun ke paras normal oleh ekstrak CD pada 0.90 g/kg, yang bersetuju dengan kesimpulan sebelumnya bahawa peningkatan tahap LH dikaitkan dengan risiko disfungsi erektil yang lebih tinggi. (Kupelian et al. 2006). Dalam testis, LH merangsang sintesis dan pembebasan testosteron, kawalan maklum balas yang agak konsisten, manakala FSH bertindak secara langsung pada sel Sertoli untuk pemakanan dengan kompleks kawalan maklum balas (Hellqvist et al. 2008). Penemuan ini menawarkan lebih banyak sokongan untuk andaian bahawa CD menyatakan kesan seperti androgen, yang mungkin bertanggungjawab terutamanya untuk pengurangan LH serum lebih daripada FSH.

Dalam pemerhatian semasa, pengaruh pengebirian terhadap perkembangan berat badan pada tikus jantan adalah serupa dengan penemuan dalam kajian lepas (Christoffersen et al. 2006), bertentangan dengan keputusan dalam tikus betina (Pantaleão et al. 2010). Ekstrak CD tidak dapat meningkatkan berat badan dengan ketara, yang mungkin disebabkan oleh tempoh rawatan yang tidak mencukupi atau kesan kompleks terhadap status kesihatan keseluruhan.

Kesimpulannya, pengebirian memanjangkan kependaman erektil zakar dan memendekkan tempoh dengan ketara, dengan peningkatan LH serum dan atrofi organ seks aksesori.

Walau bagaimanapun, ekstrak CD memudahkan tindak balas erektil zakar dengan memendekkan kependaman erektil dan memanjangkan tempoh ereksi pada tikus yang dikebiri. Kesan ini mungkin disebabkan oleh kesan seperti androgen, yang disokong oleh pemerhatian bahawa ekstrak CD menormalkan kepekatan LH serum, terutamanya pada dos 0.90 g/kg. Walau bagaimanapun, bukti tambahan diperlukan untuk menunjukkan kesan ekstrak CD terhadap ED pada tahap hipotalamus dan limbik dan lebih banyak perhatian boleh diperolehi kepada ubat tradisional yang berharga ini di dunia moden.

PENGHARGAAN

Kerja ini disokong oleh geran daripada Projek Sokongan Sains dan Teknologi di Wilayah Autonomi Uygur Xinjiang (PR China) (200840102-15).

RUJUKAN

Adimoelja A (2000). Fitokimia dan penemuan herba tradisional dalam pengurusan disfungsi seksual. Int. J. Androl., 23: 82-84.

Anderes KL (2003). Pencirian biologi novel, antagonis hormon pelepas gonadotropin (GnRH) molekul kecil aktif secara lisan menggunakan tikus yang dikebiri dan utuh. J. Pharmacol. Exp. Ther., 305: 688-695.

Armagan A, Kim NN, Goldstein I dan Traish AM (2006). Hubungan tindak balas dos antara testosteron dan fungsi erektil: Bukti kewujudan ambang kritikal. J. Androl., 27: 517-526.

Bivalacqua TJ, Juara HC, Hellstrom WJ dan Kadowitz PJ (2000). Farmakoterapi untuk disfungsi erektil. Trend. Pharmacol. Sains, 7: 524-540.

Christoffersen B, Raun K, Svendsen O, Fledelius C dan Golozoubova V (2006). Penilaian tikus Sprague-Dawley jantan yang dikebiri sebagai model sindrom metabolik dan diabetes jenis 2. Int. J. Obes., 30: 1288- 1297.

Cohan P dan Korenman SG (2000). Kemajuan dalam disfungsi erektil dan fungsi hormon. J. Med. Anti-penuaan, 3: 169-175.

Feldman HA, Goldstein I, Hatzichristou DG, Krane RJ dan McKinlay JB (1994). Mati pucuk dan kaitan perubatan dan psikososialnya: Keputusan kajian penuaan lelaki Massachusetts. J. Urol., 151: 54-61.

He W, Shu XF, Zong GZ, Shi ML, Xiong YL dan Chen MH (1996b). Kajian tentang pengukuhan buah pinggang dan Yang menyokong tindakan Cistanche deserticola YC Ma sebelum dan selepas penyediaan. Dagu. J. Chin. Mater. Med., 9: 534-537.

He W, Zong GZ, Wu GL dan Chen MH (1996a). Penerokaan bahan aktif Cistanche pada kesan seperti androgen. Dagu. J. Chin. Mater. Med., 9: 564-565.

Hellqvist A, Schmitz M dan Borg B (2008). Kesan rawatan pengebirian dan androgen pada ekspresi FSH- dan LH- dalam stickleback tiga tulang belakang, Gasterosteus aculeatus Perbezaan maklum balas yang mengantara tindak balas pematangan fotoperiodik? Jen. Comp. Endokr., 158: 178-182.

Jang M, Min JW, Dalam JG dan Yang DC (2011). Kesan ekstrak ginseng merah pada motilitas sperma epididimis tikus yang terdedah kepada etanol. Int. J. Toxicol., 30: 435-442.

Ji DB, Ye J, Li CL, Wang YH, dan Zhao J (2009). Kesan antipenuaan ekstrak Cordyceps sinensis. Phytother. P., 23: 116-122.

Jiang Y dan Tu PF (2009). Analisis juzuk kimia dalam spesies Cistanche. J. Chromatogr. A., 1216: 1970-1979.

Jung GW, Kwak JY, Kim IH, Koo MY, Park JI, Yoon S, Jung DG, Jung SI, Kwon HY dan Yoon JH (1999). Peranan faktor pertumbuhan ke atas penjanaan semula nitric oxide synthase (NOS) - yang mengandungi saraf selepas neurotomi kavernosa pada tikus. Int. J. Impot. P., 11: 227-235.

Kupelian V, Shabsigh R, Travison TG, Page ST, Araujo AB dan McKinlay JB (2006). Adakah terdapat hubungan antara hormon seks dan disfungsi erektil? Keputusan daripada kajian penuaan lelaki Massachusetts. J. Urologi,176: 2584-2588.

Liu ZR, Zhang D, Wu HJ, Li YL, Chen SP dan Yang YM (2009). Kesan electuary Cistanche pada sintase nitrik oksida dan buah pinggang Yang berkhasiat. J. Med. & Pharm. Dagu. Min., 5: 33-34.

Luo Q, Li Z, Huang X, Yan J, Zhang S dan Cai YZ (2006). Lycium barbarum polysaccharides: Kesan perlindungan terhadap kerosakan akibat haba pada testis tikus dan kerosakan DNA akibat H2O2-dalam sel testis tikus dan kesan berfaedah terhadap tingkah laku seksual dan fungsi pembiakan tikus hemi dikebiri. Life Sci.,79: 613-621.

Matsumoto AM, Karpas AE dan Bremner WJ (1986). Pentadbiran gonadotropin chorionic manusia kronik pada lelaki normal: bukti bahawa hormon perangsang folikel diperlukan untuk mengekalkan spermatogenesis normal secara kuantitatif pada manusia. J. Clin. Endokrinol. Metab.,62: 1184-1192.

McClure RD (1988). Penilaian endokrin dan terapi disfungsi erektil. Urol. Clin. N. Am.,15: 53-64.

Morales A, Buvat J, Gooren LJ, Guay AT, Kaufman JM, Tan HM dan Torres LO (2004). Aspek endokrin disfungsi seksual pada lelaki. J. Sex Med., 1: 69-81.

Pantaleão TU, Mousovich F, Rosenthal D, Padrón ÁS, Carvalho DP dan Costa VMCd (2010). Kesan tahap serum estradiol dan leptin pada fungsi tiroid, pengambilan makanan dan penambahan berat badan pada tikus Wistar betina. Steroid,75: 638-642.Robert WH dan Robert EB (2004). Peraturan hormon spermatogenesis. Int. J. Androl., 27: 335-342.

Schlatt S, Kim SS dan Gosden R (2002). Spermatogenesis dan steroidogenesis dalam tisu testis tikus, hamster dan monyet selepas cryopreservation dan cantuman heterotopik kepada perumah yang dikebiri. Pembiakan, 124: 339-346.

Stefanova NA, Fursova AZ, Sarsenbaev KN dan Kolosova NG (2011). Kesan Cistanche deserticola pada tingkah laku dan tanda-tanda katarak dan retinopati dalam tikus OXYS yang dipercepatkan penuaan. J. Ethnopharmacol., 138: 624-632.

Talha M, Bilal G, Gökhan T, Arı Z dan Coşkun B (2007). Hubungan tahap hormon seks dan disfungsi erektil: Ujian manakah yang perlu dilakukan secara rutin? Yonsei. Med. J., 48: 1015

Tombal B (2005). Kastrasi yang sesuai dengan agonis hormon pelepas hormon (LHRH) luteinizing: Apakah tahap optimum testosteron? Eur. Urol. Suppl., 4: 14-19.

Trachtenberg J (1985). Kepekatan testosteron optimum untuk rawatan kanser prostat. J. Urologi, 133: 888-890

Traish AM, Goldstein I dan Kim NN (2007). Testosteron dan fungsi erektil: daripada penyelidikan asas kepada paradigma klinikal baharu untuk menguruskan lelaki dengan kekurangan androgen dan disfungsi erektil. Eur. Urol., 52: 54-70.

Trisomboon H, Watanabe G, Wetchasit P dan Taya K (2007). Kesan rawatan harian dengan herba Thai, Kaempferia parviflora, dalam ujian Hershberger menggunakan tikus tidak matang yang dikebiri. J. Reprod. Bangun, 53: 351- 356.

Xiong WT, Gu L, Wang C, Sun HX dan Liu X (2013). Kesan anti-hiperglisemik dan hipolipidemik Cistanche tubulosa dalam tikus db/db diabetes jenis 2. J. Ethnopharmacol., 150: 935-945.

Zhao SY, He XY, Jia BG, Peng QY dan Liu X (2011). Penghasilan acteoside daripada Cistanche tubulosa oleh beta-glucosidase. Pak. J. Pharm. Sains, 24: 135-141.

For more information:1950477648nn@gmail.com