2 Keputusan

2.1 Perbandingan Ralat Biasan dan Panjang Paksi Antara Kumpulan

Berbanding dengan kumpulan normal, ralat biasan tikus dalam kumpulan FDM, kumpulan formula Cistanche, dan kumpulan PIR telah berkurangan dengan ketara, manakala panjang paksi meningkat dengan ketara (semua P <0.05). Berbanding dengan kumpulan FDM, ralat biasan tikus dalam kumpulan formula Cistanche dan kumpulan PIR meningkat dengan ketara, dan panjang paksi menurun dengan ketara (semua P <0.05). Berbanding dengan kumpulan formula Cistanche, ralat biasan tikus dalam kumpulan PIR telah menurun, dan panjang paksi meningkat (semua P <0.05) (Jadual 2).

Jadual 2. Perbandingan Diopter dan Panjang Paksi Antara Kumpulan Tikus

Nota:Berbanding dengan kumpulan normal, *P <0.05; berbanding dengan kumpulan FDM,P <0.05; berbanding dengan kumpulan tambahan darah, aP <0.05.

EKSTRAK HERBA CISTANCHE UNTUK MENINGKATKAN KESIHATAN BUAH PINGGANG

Semak penyenaraian

Perkhidmatan Sokongan Wecistanche-Untuk butiran lanjut tentang kerjasama
E-mel:wallence.suen@wecistanche.com
 

2.2 Pewarnaan HE

Dalam kumpulan normal, struktur setiap lapisan retina adalah jelas, sel-sel disusun secara seragam dan padat, dan tidak ada perubahan morfologi yang tidak normal. Dalam kumpulan FDM, retina telah menipis, sel ganglion disusun longgar dan tidak teratur, dan perubahan vakuolar muncul. Ketebalan retina tikus dalam kumpulan formula Cistanche dan kumpulan PIR telah meningkat, susunan sel pada asasnya tetap, bilangan sel ganglion meningkat, dan sel-sel disusun padat, dengan prestasi paling ketara dalam kumpulan formula Cistanche (Rajah 1).

A: Kumpulan biasa; B: kumpulan FDM; C: Kumpulan formula yang menyuburkan darah dan menguatkan buah pinggang; D: kumpulan PIR. ① menunjukkan lapisan gentian saraf; ② menunjukkan lapisan plexiform dalam; ③ menunjukkan lapisan koroid; ④ menunjukkan lapisan sklera.
Rajah 1 Pewarnaan HE mata tikus dalam setiap kumpulan (×400)

2.3 Perbandingan Tahap Ungkapan TGF-β2 dalam Tisu Skleral Antara Kumpulan

Tahap ekspresi TGF-β2 dalam tisu skleral tikus dalam kumpulan normal, kumpulan FDM, kumpulan formula Cistanche, dan kumpulan PIR masing-masing adalah 133.59 ± 8.46, 96.28 ± 5.23, 124.56 ± 7.59, dan 115.79 ± 6.46. Berbanding dengan kumpulan normal, tahap ekspresi TGF-β2 dalam tisu skleral tikus dalam kumpulan FDM, kumpulan formula Cistanche, dan kumpulan PIR telah menurun dengan ketara (semua P <0.05). Berbanding dengan kumpulan FDM, tahap ekspresi TGF-β2 dalam tisu skleral tikus dalam kumpulan formula Cistanche dan kumpulan PIR meningkat dengan ketara (semua P <0.05). Berbanding dengan kumpulan formula Cistanche, tahap ekspresi TGF-β2 dalam tisu skleral tikus dalam kumpulan PIR telah menurun (P <0.05) (Rajah 2).

A: Kumpulan biasa; B: kumpulan FDM; C: Kumpulan formula yang menyuburkan darah dan menguatkan buah pinggang; D: kumpulan PIR. ① menunjukkan lapisan gentian saraf; ② menunjukkan lapisan plexiform dalaman; ③ menunjukkan lapisan koroid; ④ menunjukkan lapisan sklera.
Rajah 2 Pewarnaan imunohistokimia untuk mengesan tahap ekspresi TGF-β2 dalam tisu skleral tikus dalam setiap kumpulan (×400)

2.4 Perbandingan Tahap Ekspresi Protein AQP1 dan CAV1 dalam Tisu Skleral Antara Kumpulan

Berbanding dengan kumpulan normal, tahap ekspresi protein AQP1 dan CAV1 dalam tisu skleral tikus dalam kumpulan FDM, kumpulan formula Cistanche, dan kumpulan PIR telah menurun dengan ketara (semua P <0.05). Berbanding dengan kumpulan FDM, tahap ekspresi protein AQP1 dan CAV1 dalam tisu skleral tikus dalam kumpulan formula Cistanche dan kumpulan PIR meningkat dengan ketara (semua P <0.05). Berbanding dengan kumpulan formula Cistanche, tahap ekspresi protein AQP1 dan CAV1 dalam tisu skleral tikus dalam kumpulan PIR telah menurun dengan ketara (semua P <0.05) (Jadual 3, Rajah 3).

Jadual 3. Perbandingan Ekspresi Protein AQP1 dan CAV1 dalam Tisu Retina

Nota:Berbanding dengan kumpulan normal, *P <0.05; berbanding dengan kumpulan FDM,P <0.05; berbanding dengan kumpulan tambahan darah, aP <0.05.

A: Kumpulan biasa; B: kumpulan FDM; C: Kumpulan formula yang menyuburkan darah dan menguatkan buah pinggang; D: kumpulan PIR.
Rajah 3. Analisis Western blot bagi ekspresi protein AQP1 dan CAV1 dalam tisu skleral tikus dalam setiap kumpulan.

2.5 Perbandingan Tahap Ungkapan GLAST dan GLT-1 mRNA dalam Tisu Skleral Antara Kumpulan

Berbanding dengan kumpulan normal, tahap ekspresi relatif mRNA GLAST dan GLT-1 dalam tisu skleral tikus dalam kumpulan FDM, kumpulan formula Cistanche dan kumpulan PIR telah meningkat dengan ketara (semua P <0.05). Berbanding dengan kumpulan FDM, tahap ekspresi relatif GLAST dan GLT-1 mRNA dalam tisu skleral tikus dalam kumpulan formula Cistanche dan kumpulan PIR telah menurun dengan ketara (semua P <0.05). Berbanding dengan kumpulan formula Cistanche, tahap ekspresi relatif GLAST dan GLT-1 mRNA dalam tisu skleral tikus dalam kumpulan PIR telah meningkat dengan ketara (semua P <0.05) (Jadual 4).

Jadual 4. Ungkapan mRNA relatif GLAST dan GLT-1 dalam Tisu Retina

Nota:Berbanding dengan kumpulan normal, *P <0.05; berbanding dengan kumpulan FDM,P <0.05; berbanding dengan kumpulan tambahan darah, aP <0.05.

3 Perbincangan

FDM memberi kesan serius kepada fungsi visual dan kualiti hidup pesakit. Dalam teori perubatan Cina tradisional (TCM), kejadian miopia berkait rapat dengan kekurangan yin hati dan buah pinggang. Darah hati yang tidak mencukupi membawa kepada kekurangan zat makanan mata, dan kekurangan intipati buah pinggang mengakibatkan bekalan sumsum yang tidak mencukupi ke otak, akhirnya membawa kepada penurunan penglihatan [5]. Berdasarkan teori TCM bahawa "hati membuka ke dalam mata, dan buah pinggang menyimpan intipati untuk menghasilkan sumsum", kaedah tonifikasi buah pinggang dan menyuburkan darah telah memberikan idea penting untuk rawatan rabun.

Butiran Lanjut Mengenai Cistanche Untuk Meningkatkan Fungsi Buah Pinggang

Cistanche, dikenali sebagai "ginseng padang pasir" dan salah satu daripada "sembilan ubat abadi" dalam TCM, mempunyai sejarah penggunaan perubatan lebih daripada 2,000 tahun. Ia direkodkan sebagai bahan perubatan berkhasiat gred tinggi dalam klasik TCM purba dan sangat dihormati kerana kesannya untuk menguatkan buah pinggang, menambah pati, menyuburkan darah dan melembapkan kekeringan. Tidak seperti kebanyakan herba TCM lain, Cistanche tumbuh secara eksklusif di padang pasir, terutamanya parasit pada akar Tamarix ramosissima di kawasan seperti Xinjiang, Mongolia Dalam dan Gansu di China. Persekitaran pertumbuhan yang unik ini memberikannya dengan bahan aktif yang kaya, termasuk echinacoside, verbascoside, dan flavonoid. Penyelidikan saintifik moden telah mengesahkan bahawa bahan-bahan aktif ini mempunyai ciri-ciri antioksidan yang kuat, boleh mengurangkan apoptosis sel, menggalakkan percambahan sel, membaiki sel-sel yang rosak, dan melebarkan saluran darah-aktiviti biologi yang sangat konsisten dengan kesan TCM iaitu "mengencangkan buah pinggang dan intipati berkhasiat" [16]. Di samping itu, Cistanche telah terbukti meningkatkan imuniti dengan menggalakkan percambahan limfosit, menahan keletihan dengan meningkatkan pengeluaran glikogen hati, dan memberikan kesan anti-penuaan dengan menghilangkan radikal bebas, menjadikannya bahan semula jadi yang menjanjikan untuk pembangunan produk kesihatan dan farmaseutikal [16].

Ralat biasan adalah penunjuk keupayaan fokus mata. Dalam FDM, pelarasan berterusan panjang fokus kanta dan perubahan dalam bentuk bola mata untuk melihat objek dengan jelas boleh membawa kepada pertumbuhan panjang paksi, yang memburukkan lagi rabun dan membentuk kitaran ganas [6-7]. Formula yang mengandungi Cistanche, dengan Cistanche tubulosa sebagai bahan teras, mewarisi prinsip terapeutik TCM untuk menguatkan buah pinggang dan menyuburkan darah. Bahan aktif Cistanche, seperti echinacoside dan verbascoside, boleh meningkatkan peredaran mikro okular, meningkatkan bekalan nutrien ke retina, dan melegakan ketegangan otot ciliary, dengan itu mengurangkan keletihan visual dan mengawal ralat bias [16]. Hasil kajian ini menunjukkan bahawa formula yang mengandungi Cistanche boleh mengawal panjang paksi dengan ketara, yang mungkin berkaitan dengan keupayaannya untuk meningkatkan peredaran darah periorbital, mengurangkan tekanan intraokular, dan menggalakkan pembaikan dan penjanaan semula sel retina dan otot silia. Selain itu, kesan Cistanche untuk menggalakkan percambahan sel dan membaiki sel yang rosak boleh membantu mengawal pembentukan semula gentian kolagen scleral, dengan itu menghalang pengembangan bola mata yang tidak normal [16].

Patogenesis FDM melibatkan interaksi pelbagai faktor pertumbuhan dan sitokin. Sebagai faktor utama, TGF-β2 mengaktifkan laluan isyarat hiliran dengan mengikat kepada reseptor permukaan sel, mengambil bahagian dalam pengawalan percambahan sel kornea dan skleral, menggalakkan lanjutan panjang paksi, dan dengan itu memburukkan lagi perkembangan miopia [11]. Formula yang mengandungi Cistanche memberikan kesan terapeutiknya dengan mengawal tahap ekspresi TGF-β2 dalam FDM. Mekanismenya mungkin termasuk menghalang pengaktifan abnormal laluan isyarat TGF-β2/Smad dan mengurangkan ekspresi protein berkaitan pembentukan semula matriks ekstraselular, dengan itu melambatkan penipisan skleral dan lanjutan panjang paksi. Kesan ini berkemungkinan berkaitan dengan bahan aktif antioksidan dan anti-fibrotik dalam Cistanche, seperti flavonoid dan echinacoside [16]. Kajian TCM sebelum ini telah menunjukkan bahawa tonifikasi buah pinggang dan darah berkhasiat boleh memperbaiki keadaan kekurangan darah dan kekurangan buah pinggang, dan promosi bersama darah yang mencukupi dan buah pinggang yang sihat membantu mengekalkan fungsi fisiologi normal tubuh manusia [12]. Selain itu, formula yang mengandungi Cistanche juga mempunyai kesan meningkatkan fungsi visual, mengawal fungsi imun dan melambatkan lanjutan panjang paksi, yang bersama-sama memberikan jaminan untuk rawatan FDM.

AQP1 ialah aquaporin yang dinyatakan dalam mata dan terlibat dalam metabolisme dan pengangkutan cecair intraokular. Dalam FDM, ekspresi abnormal AQP1 boleh menyebabkan gangguan metabolisme cecair intraokular dan menjejaskan bentuk bola mata. Dengan mengawal selia keadaan penghidratan dan tekanan osmotik matriks ekstraselular, AQP1 secara tidak langsung boleh mengaktifkan isyarat TGF-β2, dengan itu mengawal selia sistem MMPs/TIMPs dan mengambil bahagian dalam degradasi kolagen skleral dan penipisan skleral. Di samping itu, sebagai protein yang terlibat dalam isyarat intraselular dan pengangkutan vesikular, ekspresi abnormal CAV1 mungkin berkaitan dengan kerosakan sel retina dan disfungsi dalam FDM [13]. Hasil kajian ini menunjukkan bahawa formula yang mengandungi Cistanche boleh mengawal tahap ekspresi AQP1 dan CAV1 di mata tikus FDM. Khususnya, formula boleh mengawal selia ekspresi AQP1, menggalakkan keseimbangan metabolisme cecair intraokular, dan meningkatkan keadaan penghidratan matriks ekstraselular; pada masa yang sama, ia mengawal ekspresi CAV1, meningkatkan transduksi isyarat intraselular dan pengangkutan vesikular, dan mengurangkan disfungsi sel retina. Kesan sinergistik AQP1 dan CAV1 boleh menghalang pengaktifan abnormal laluan isyarat TGF-β2, dengan itu melambatkan pembentukan semula matriks ekstraselular scleral dan sambungan panjang paksi. Kajian klinikal terdahulu juga menunjukkan bahawa pesakit miopia yang dirawat dengan formula pengetonan buah pinggang dan penyuburan darah telah memperbaiki keadaan penglihatan dan fundus, yang konsisten dengan keputusan kajian ini [14].

Pengangkutan air yang tidak normal adalah salah satu mekanisme patologi penting FDM, yang boleh mengubah kandungan air tisu skleral dan memburukkan lagi ubah bentuk skleral [15]. Bahan aktif dalam Cistanche, seperti echinacoside dan verbascoside, mempunyai aktiviti biologi yang kuat. Mereka boleh meningkatkan peredaran darah okular, menggalakkan metabolisme normal dan pemulihan fungsi sklera [16]. Keputusan kajian ini menunjukkan bahawa selepas campur tangan dengan formula yang mengandungi Cistanche, tahap ekspresi GLAST dan GLT-1 dalam tisu skleral berkurangan dengan ketara. Sebab yang mungkin adalah seperti berikut: pertama, ramuan dalam Cistanche meningkatkan bekalan oksigen dan nutrien persekitaran mikro okular dengan meningkatkan peredaran darah okular, dengan itu menyediakan persekitaran yang baik untuk kerja normal GLAST dan GLT-1. Kedua, formula yang mengandungi Cistanche boleh bertindak secara langsung pada GLAST dan GLT-1, menghalang pembebasan neurotransmiter yang tidak normal dengan mengawal aktivitinya, dan menggalakkan penggunaan semula neurotransmiter biasa. Dalam proses itu, ia juga boleh mengurangkan tindak balas keradangan okular dengan mengawal fungsi imun okular, dengan itu melindungi integriti struktur dan kestabilan fungsi pengangkut.

4 Kesimpulan

Formula yang mengandungi Cistanche boleh meningkatkan status biasan tikus FDM dengan berkesan dan menghalang pertumbuhan panjang paksi yang berlebihan. Mekanisme tindakannya mungkin berbilang sasaran dan berbilang laluan: di satu pihak, dengan menguatkan buah pinggang dan menyuburkan darah (selaras dengan teori TCM), ia meningkatkan peredaran mikro okular dan bekalan nutrien, dan melegakan ketegangan otot silia; sebaliknya, dengan mengawal selia ekspresi AQP1 dan CAV1, ia memulihkan keseimbangan metabolisme cecair intraokular dan fungsi retina, menghalang pengaktifan abnormal laluan isyarat TGF-β2/Smad, dan mengurangkan degradasi matriks ekstraselular, dengan itu melambatkan penipisan skleral. Selain itu, formula itu juga boleh mengekalkan homeostasis neurotransmitter retina dengan mengawal selia fungsi pengangkut glutamat seperti GLAST dan GLT-1, menunjukkan potensinya untuk campur tangan dalam FDM pada pelbagai peringkat daripada molekul ke seluruh badan.

Bagi penyelidik dan pembangun yang terlibat dalam pembangunan produk herba, hasil kajian ini menonjolkan potensi Cistanche sebagai bahan semula jadi untuk campur tangan rabun. Bahan aktif Cistanche yang jelas (echinacoside, verbascoside, dll.), kesan farmakologi yang pasti (menggalakkan percambahan sel, antioksidan, mengawal laluan isyarat), dan sejarah panjang penggunaan selamat dalam TCM menjadikannya calon yang ideal untuk pembangunan makanan berfungsi, suplemen kesihatan, atau juga persediaan farmaseutikal untuk pencegahan dan rawatan rabun jauh. Selain itu, Cistanche tubulosa, dengan kandungan bahan aktif tertinggi di kalangan spesies Cistanche, telah dihasilkan secara industri oleh perusahaan seperti Chengdu WeCistanche Bio-Tech. Co., Ltd., yang menyediakan bekalan bahan mentah yang stabil dan sokongan kawalan kualiti untuk pembangunan produk [16].

Walau bagaimanapun, kesan terapeutik formula yang mengandungi Cistanche dipengaruhi oleh pelbagai faktor, seperti perbezaan individu dan tempoh ubat. Kajian ini juga mempunyai batasan tertentu, dan mekanisme khusus peraturan formula perlu disahkan lebih lanjut. Penyelidikan masa depan boleh menumpukan pada mengoptimumkan bentuk dos dan dos Cistanche, meneroka penggunaan gabungannya dengan bahan semula jadi lain, dan menjalankan ujian klinikal untuk menilai keselamatan dan keberkesanannya pada manusia, untuk menggalakkan transformasi dan penggunaan produk berasaskan Cistanche dalam bidang pencegahan dan rawatan rabun.

Rujukan

[1] LIN MY, LIN IT, WU YC, WANG I J. Pemeriksaan dadah calon secara berperingkat untuk kawalan rabun dengan menggunakan model rabun ikan zebra, tetikus dan Golden Syrian Hamster [J]. EBioMedicine, 2021, 65: 103263.

[2] LEE SY, NAM YK, KIM Y K. Pencirian mRNA aquaporin1ab (Aqp1ab) dalam loach lumpur (Misgurnus mizolepis) terdedah kepada logam berat dan rangsangan imunostimulan [J]. Comp Biochem Physiol Bahagian A Mol Integr Physiol, 2022, 270: 111226.

[3] ZHU X, WU X, YANG H, XU Q, ZHANG M, LIU X, et al. Penyelarasan LINC01003 yang dimediasi m6A mengawal penghijrahan sel dengan menyasarkan laluan isyarat CAV1/FAK dalam glioma [J]. Biol Direct, 2023, 18(1): 27.

[4] ABED ZI, ARIANEJAD M, AZIZI Z. Eksosom terbitan sel stem mesenchymal mengurangkan Hiperplasia dalam Psoriasis dengan mendorong mengubah faktor pertumbuhan β2 (TGF-β2) [J]. Mol Biol Rep, 2024, 51(1): 635.[5] YU Z F. Meneroka peranan dan mekanisme akupunktur untuk "mengawal hati dan menguatkan buah pinggang" dalam mencegah dan mengawal rabun berdasarkan peredaran mikro fundus dan teknologi oksigen darah [D]. Chengdu: Universiti Perubatan Tradisional Cina Chengdu, 2022.[6] ZHU Y, BIAN JF, LU DQ, TO CH, LAM CS, LI KK, et al. Pengubahan isyarat EIF2, glikolisis, dan rembesan dopamin dalam miopia kekurangan bentuk sebagai tindak balas kepada rawatan atropin 1%: bukti daripada proteomik iTRAQ-MS dan SWATH-MS interaktif menggunakan model guinea pig [J]. Front Pharmacol, 2022, 13: 814814.[7] SHU Z, CHEN K, WANG Q, WU H, ZHU Y, TIAN R, et al. Peranan reseptor dopamin D1 retina dalam pertumbuhan okular dan perkembangan miopia pada tikus [J]. J Neurosci, 2023, 43(48): 8231-8242.[8] HOU J M. Kesan perlindungan resipi Yangxue Bushen pada apoptosis sel skleral dalam rabun tinggi percubaan [D]. Xining: Universiti Qinghai, 2015.[9] DIAO CX, GUO JG, WU QX, ZHANG H, WEN Y. Campur tangan perubatan Cina dalam pembentukan semula skleral: kemajuan penyelidikan laluan TGF-β/BMP dalam peningkatan miopia [J]. New Chin Med, 2024, 56(17): 190-195.[10] LUO Y, GUO XQ, CHEN YX, CAO WX, KANG ZF, ZHUANG Z Y. Kajian tentang kesan formula yangxue bushen pada pembentukan semula scleral dan TGF-β2 dalam guinea pig dengan myopia kekurangan bentuk [J]. Chin J Ophthalmol, 2023, 33(10): 905-909.[11] HAN X, LI M, ZHAO J, ZHANG X, SUN B, XU H. Kepekatan hidroksiprolin dan faktor-faktor berkaitan bagi lentikul stromal kornea yang terpelihara insisi kecil pengekstrakan terbitan lentikul kornea [J]. Kornea, 2024, 43(10): 1285-1290.[12] YAO L. Penyelidikan tentang kesan angelica sinensis pada ketebalan koroid dalam babi guinea dengan kekurangan bentuk dan miopia jenis kekurangan qi dan darah [D]. Shenyang: Universiti Perubatan Tradisional Cina Liaoning, 2023.[13] REN YL, ZHANG XF, KONG L, TANG ZS, ZHANG L W. Ekspresi Caveolin-1 dalam retina tikus dengan hipertensi okular akut [J]. Rec Adv Ophthalmol, 2020, 40(5): 407-410.[14] LIN T, GAO J, WANG Y, KANG ZF, WU NL, ZHUANG ZY, et al. Kesan rebusan yang menyuburkan darah dan menguatkan buah pinggang pada fungsi visual pesakit rabun tinggi [J]. China J Chin Ophthalmol, 2021, 31(4): 250-253, 259.[15] BURGOYNE C, WANG YX, JEOUNG J, HONG SU, GARDINER S, REYNAUD J, et al. Morfologi kepala saraf optik OCT dalam miopia II: tunduk skleral saluran peri-neural dan ketebalan koroid dalam miopia tinggi-tesis masyarakat oftalmologi Amerika [J]. Am J Ophthalmol, 2023, 252(1): 225-252.[16] Chengdu WeCistanche Bio-Tech. Co., Ltd. Cistanche untuk penyakit Buah Pinggang [EB/OL]. https://www.xjcistanche.com/cistanche-extract-product/cistanche-for-nourishing-kidney.html, 2022-08-01.