Kesan Ekstrak Cistanche Tubulosa Pada Fungsi Pembiakan Lelaki dalam Streptozotocin–Nicotinamide-Induced Diabetes Tikus-Ⅱ

3.2. Dalam Analisis Vivo

3.2.1. Kesan CTE Terhadap Berat Badan Dan Pengambilan Kalori

Selepas 6 minggu percubaan, kumpulan diabetes (HFD-DM) menunjukkan berat badan yang lebih tinggi daripada kumpulan kawalan. Kumpulan HFD-DME4 menunjukkan berat badan yang lebih rendah daripada kumpulan HFD-DM dan HFD-DMER (Rajah 7a). Pengambilan kalori kumpulan kawalan adalah jauh lebih rendah daripada kumpulan lain. Tiada perbezaan yang ketara antara pengambilan kalori lima kumpulan yang lain (Rajah 7b).

3.2.2. Ujian Toleransi Glukosa Lisan (OGTT) Untuk Menentukan Induksi Kencing Manis yang Berjaya

Ujian toleransi glukosa oral (OGTT) digunakan sebagai alat yang menjanjikan untuk mengesan diabetes mellitus. Peningkatan tahap glukosa dalam darah menunjukkan keadaan diabetes. Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 8a, paras glukosa plasma adalah lebih rendah dalam kumpulan CTE berbanding kumpulan DM pada 0, 30, 90, dan 120 min. Selanjutnya, kawasan di bawah lengkung (AUC) kepekatan glukosa plasma menunjukkan bahawa dalam kumpulan CTE dan RSG, kadar pengambilan glukosa darah meningkat (Rajah 8b).

3.2.3. Jumlah Kandungan Glukosa, Kolesterol dan Trigliserida Plasma

Paras glukosa darah puasa plasma adalah lebih tinggi dalam kumpulan DM dan lebih rendah dalam kumpulan DME2 (kecuali kawalan) berbanding yang lain. Tiada perbezaan yang signifikan dalam jumlah kolesterol antara kumpulan kecuali kumpulan DME4. Dalam kumpulan DME4, paras kolesterol adalah lebih rendah daripada yang lain. Tahap trigliserida adalah lebih tinggi dalam kumpulan DM dan lebih rendah dalam kumpulan DME4 dan kandungan trigliserida telah menurun dengan peningkatan kepekatan CTE (Jadual 2). Keputusan menunjukkan bahawa tahap glukosa plasma, kolesterol, dan trigliserida adalah lebih tinggi dalam kumpulan DM dan tahap itu menurun dengan ketara pada rawatan dengan CTE.

3.2.4. Tahap Insulin Plasma, Tahap Leptin Plasma, Dan Penilaian Model Homeostasis–Nilai Rintangan Insulin (HOMA-IR)

Tahap insulin plasma, leptin, dan nilai HOMA-IR ditunjukkan dalam Jadual 3. Kumpulan DM mempunyai tahap insulin plasma dan leptin plasma yang lebih tinggi daripada kumpulan kawalan. Indeks HOMA-IR juga jauh lebih tinggi dalam kumpulan DM. Insulin plasma, leptin, dan nilai HOMA-IR telah menurun dengan peningkatan kepekatan CTE. Plasma leptin berkurangan dengan ketara dalam kumpulan CTE tetapi kumpulan ubat RSG (DMR) tidak menunjukkan sebarang perbezaan yang ketara daripada kumpulan DM.

3.2.5. Kesan CTE Pada Tahap LH Plasma Dan Testosteron Dalam Tikus Diabetik

Seperti yang ditunjukkan dalam Jadual 4, kepekatan testosteron dalam tikus diabetes (DM) telah menurun dengan ketara, manakalakepekatan testosteron meningkat dengan ketarapada pelbagai dos CTE. Selanjutnya, keputusan menunjukkan sedikit penurunan dalam tahap LH dalam kumpulan DM berbanding DMR, DME1, DME2, dan DME4. Pengeluaran LH adalah lebih tinggi dalam kumpulan DME4.

3.2.6. Kesan CTE Pada Parameter Sperma Tikus Diabetik

Keputusan eksperimen menunjukkan bahawa kumpulan DM mengalami penurunan ketara dalam bilangan dan pergerakan sperma berbanding kumpulan kawalan manakala kadar keabnormalan sperma meningkat dengan ketara dalam kumpulan DM. Menariknya, bilangan sperma, motilitas sperma, dan kadar keabnormalan sperma kumpulan DMR bertambah baik tetapi motilitas sperma tidak mencapai tahap yang ketara berbanding DME4. DME2 menunjukkan kiraan sperma yang lebih baik daripada kesemuanya dan kadar motilitas meningkat dengan ketara dalam kumpulan DME4. Tidak terdapat perbezaan yang signifikan antara bilangan sperma yang tidak normal antara kumpulan yang dirawat RSG dan CTE (Jadual 5).

3.2.7. Kesan CTE Terhadap Morfologi Tubul Seminiferus Dalam Tikus Diabetik

Rajah 9 menunjukkan pewarnaan H&E bahagian testis. Anak panah hitam menandakan sel Leydig dan anak panah putih menandakan sel Sertoli. Kedua-dua sel Leydig dan sel Sertoli dalam kumpulan DM menunjukkan atrofi yang ketara dan rongga dilihat dalam lumen. Struktur sel Leydig dan Sertoli telah dipulihkan dalam kumpulan yang dirawat CTE dan RSG. Ketebalan tubul seminiferus adalah lebih tinggi dalam kumpulan CTE dan RSG daripada kumpulan DM.

3.2.8. Kesan CTE Pada KiSS1, GPR54, SOCS-3 dan MRNA SIRT1 Dalam Hipotalamus Tikus Diabetik

Ekspresi KiSS1 (Rajah 10a), GPR54 (Rajah 10b), SOCS-3 (Rajah 10d), dan SIRT1 (Rajah 10c) ditunjukkan dalam Rajah 10. Ekspresi mRNA KiSS1 dan reseptor GPR54 dalam tikus diabetes ialah jauh lebih rendah daripada kumpulan kawalan. Tahap ekspresi mRNA KiSS1 dan GPR 54 dalam DMR, DME1, DME2, dan DME4 telah meningkat dengan ketara. Khususnya, ekspresi mRNA GPR54 meningkat dengan ketara dalam DME4 dan hampir serupa dengan kumpulan kawalan.

NATURAL CISTANCHE TUBULOSA UNTUK MELINDUNGI PENGELUARAN TESTOSTERON PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Percubaan ini menerokai lagi jumlah mRNA SOCS-3 dan SIRT1 dalam hipotalamus tikus. Ekspresi mRNA SOCS-3 dalam tikus diabetes telah meningkat dengan ketara menunjukkan bahawa impedans leptin adalah lebih serius. Kumpulan DMR, DME1, DME2, dan DME4 menunjukkan peningkatan yang ketara jika dibandingkan dengan kumpulan diabetes. Ekspresi mRNA SIRT1 dalam kumpulan DM telah menurun dengan ketara dan meningkat dengan ketara dalam kumpulan DME1 dan DME4.

3.2.9. Kesan CTE Pada Enzim Antioksidan Dalam Plasma Dan Testis Tikus Diabetik

Jadual 6 menunjukkan bahawa aktiviti SOD plasma, aktiviti GPx, dan aktiviti katalase tikus diabetes telah menurun dengan ketara dan aktiviti meningkat dalam kumpulan yang dirawat CTE dan RSG. Di samping itu, DME4 menunjukkan peningkatan ketara dalam aktiviti GPx berbanding yang lain. Keputusan menunjukkan bahawa aktiviti SOD dan katalase dalam tikus diabetes telah menurun dengan ketara selepas enam minggu. Aktiviti SOD dan katalase kumpulan DMR tidak mencapai tahap yang ketara. Kumpulan yang dirawat CTE menunjukkan peningkatan yang ketara dalam aktiviti SOD dan katalase. Peningkatan aktiviti katalase dan SOD dalam kumpulan CTE juga dilihat dalam testis (Jadual 7). Aktiviti tertinggi SOD dan katalase diperhatikan dalam kumpulan DME1 dan kumpulan DME2 masing-masing.

3.2.10. Kesan CTE Pada Tekanan Oksidatif Dan Keradangan Dalam Plasma Dan Testis Tikus Diabetik

Pengeluaran nitrik oksida (NO) dalam plasma (Rajah 11a) dan testis (Rajah 11b) ditunjukkan dalam Rajah 11. Pengeluaran NO dalam kumpulan DM telah meningkat dengan ketara kedua-dua dalam testis dan plasma berbanding dengan kumpulan kawalan. Pengurangan secara beransur-ansur pengeluaran NO diperhatikan dalam kumpulan DME1, DME2, dan DME4 (dalam plasma). Kumpulan DMR juga menunjukkan pengurangan ketara dalam pengeluaran NO. Dalam kes testis, terdapat sedikit pengurangan pengeluaran NO diperhatikan dalam kumpulan CTE, manakala kumpulan DMR tidak mengurangkan pengeluaran NO dengan ketara.

Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 12 dan 13, tahap TNF- dan IL-6 telah meningkat dengan ketara dalam tikus diabetes (kedua-dua dalam plasma dan testis), menunjukkan bahawa keradangan adalah lebih serius. Dalam plasma, tahap TNF- adalah serupa dalam kumpulan yang dirawat CTE dan RSG (Rajah 12a). Kumpulan CTE dengan ketara (terutama DME2) mengurangkan tahap TNF- dalam testis (Rajah 12b). Tahap IL-6 telah dikurangkan dengan ketara dalam plasma kumpulan CTE dan RSG (Rajah 13a). Dalam testis, terdapat aliran kepada pengurangan tahap IL-6, tetapi ini tidak mencapai tahap yang ketara (Rajah 13b).

3.2.1.1. Kesan CTE Terhadap Tekanan Oksidatif Dan Keradangan Dalam Spermatozoa Tikus Diabetik Yang Disebabkan Oleh Diet Tinggi Lemak

Rajah 14 menunjukkan kandungan anion superoksida dalam sperma tikus. Keputusan menunjukkan bahawa pengeluaran anion superoksida dalam sperma tikus diabetes meningkat dengan ketara dan tiada peningkatan yang ketara diperhatikan dalam kumpulan DMR. Kumpulan DME1 dan DME4 menunjukkan pengeluaran anion superoksida berkurangan dengan ketara.

3.2.12. Kesan CTE Pada Pengoksidaan Lipid Dalam Spermatozoa Tikus Diabetik Yang Disebabkan Oleh Diet Tinggi Lemak

Kajian telah menunjukkan bahawa peroksidasi lipid meningkat dalam kedua-dua pesakit diabetes jenis 1 dan jenis 2 [19]. Tahap malondialdehid (MDA) dalam plasma, sperma dan testis ditunjukkan dalam Jadual 8. Tahap MDA dalam plasma, testis dan sperma kumpulan DM adalah lebih tinggi dengan ketara dan rawatan dengan CTE dan RSG mengurangkan pengeluaran MDA. Pengurangan yang ketara diperhatikan dalam kumpulan DME4 dan DMEI dalam plasma. Kajian ini mendapati bahawa tikus diabetes bukan sahaja meningkatkan tahap peroksidasi lipid dalam plasma tetapi juga meningkat dalam testis dan sperma. Peningkatan ketara diperhatikan pada pelbagai dos CTE.

4. Perbincangan

Diabetes adalah penyakit kronik yang dikaitkan dengan paras gula yang tinggi dalam darah. Ketidakseimbangan antara paras antioksidan dan ROS akan membawa kepada keadaan yang dipanggil tekanan oksidatif. Superoksida, radikal hidroksil, hidrogen peroksida, nitrik oksida, dan oksigen singlet adalah beberapa contoh ROS yang akan menyumbang kepada keadaan diabetes melalui tekanan oksidatif [20].Cistanche tubulosamerupakan tumbuhan padang pasir yang mengandungi komponen aktif sepertipolisakarida, oligosakarida, glikosida phenylethanoid (echinacoside, verbascoside), asid palmitik, asid linoleik, iridoid, alditol dan lignan. Tumbuhan ini mampu menghasilkan kesan anti-radang, neuroprotective, antibakteria, antivirus, antioksida, anti-tumor, dan imunomodulator [21]. Kajian kesusasteraan menunjukkan bahawa glikosida phenylethanoid daripada Cistanche tubulosa adalah sebab utama untuk aktiviti antioksidan [22]. Resveratrol (RES) dan rosiglitazone (RSG) telah diambil sebagai kawalan positif untuk kajian in vitro dan in vivo masing-masing. RSG ialah pemeka insulin yang berkuasa dan mempunyai pertalian terhadap isoform reseptor diaktifkan proliferator peroksisom (PPARc). Ia mengawal hiperglikemia pada pesakit diabetes [23]. RES mempunyai aktiviti antioksidan semulajadi dan bertindak sebagai vasodilator, mengawal metabolisme lipoprotein, menghalang pengagregatan platelet, dan mencegah kanser [24,25]. Siasatan kami menunjukkan bahawa ECH menunjukkan aktiviti pemusnahan radikal yang lebih baik daripada CTE dan RES (Rajah 1). Difahamkan juga bahawa ECH tidak menyebabkan sebarang ketoksikan yang ketara kepada sel LC-540 dan TM3 Leydig (Rajah 2).

NATURAL CISTANCHE TUBULOSA UNTUK FUNGSI SEKSUAL LELAKI PHGS75% ECH 30% ACT 12%

AGE digunakan untuk mendorong keadaan tekanan dalam sel Leydig. Pengeluaran AGEs, keradangan, tekanan oksidatif, dan diabetes adalah saling berkaitan. Keadaan hiperglisemik diabetes menggalakkan kecederaan sel melalui penghasilan AGE dan tekanan oksidatif. AGEs mendorong ketoksikan sel, yang seterusnya menggalakkan pengambilan sel imun dan kematian sel. Tahap AGE yang tinggi menggalakkan ekspresi dua jenis reseptor yang dipanggil RAGE dan AGER1 [26]. Perpindahan elektron yang menitis dan seterusnya daripada rantai pernafasan mitokondria kepada oksigen molekul semasa tekanan oksidatif mengakibatkan pembentukan anion superoksida. Keputusan kami menunjukkan bahawa pengeluaran anion superoksida yang disebabkan oleh AGEs telah meningkat dalam kumpulan kawalan dan penambahbaikan selanjutnya diperhatikan dengan kedua-dua rawatan ECH dan RES. Menurut kajian kami, difahamkan bahawa pengeluaran superoksida (Rajah 3) dan H2O2 (Rajah 4) yang disebabkan oleh AGE telah berkurangan dengan kehadiran ECH dan RES.

NF-κB dikenali sebagai pengantara penting keradangan yang berkaitan dengan diabetes [27]. Ekspresi NF-κB membawa kepada disfungsi sel dan kematian sel. Pengaktifan NF-κB oleh tekanan oksidatif merangsang tindak balas pro-radang, regulasi endotelin, dan apoptosis [28]. Ekspresi RAGE dan NF-κB telah meningkat dalam kumpulan yang dirangsang AGE dan pengurangan seterusnya diperhatikan dalam sel yang dirawat ECH dan RES (Rajah 5).

Testosteronadalah steroid anabolik dan primerhormon seks lelakidisintesis daripada kolesterol. Proses ini bermula dengan pembelahan oksidatif rantai sisi kolesterol oleh gen pembelahan rantai sisi kolesterol (CYP11A). Gen ini disetempat dalam membran mitokondria dan menukarkan kolesterol menjadi pregnenolone. Seterusnya, gen CYP17A1 daripada retikulum endoplasma mengeluarkan dua atom karbon tambahan dan menghasilkan berbilang steroid C19. Di samping itu, pregnenolone dioksidakan untuk membentuk androstenedione/progesteron oleh hydroxysteroid dehydrogenase (3- -HSD). Akhir sekali, testosteron dihasilkan melalui pengurangan kumpulan keto dalam kedudukan karbon ke-17 androstenedione oleh 17-beta-hydroxysteroid dehydrogenase (17- -HSD). Sel Leydig terlibat dalam pengeluaran utama testosteron. Pemindahan kolesterol ke dalam membran mitokondria dalaman memerlukan tindakan protein pengawalseliaan akut steroidogenik (StAR). Kajian semasa menunjukkan bahawa ungkapan StAR, CYP11A1, CYP17A1 dan HSD{13}} telah menurun dalam sel (kawalan) yang dirawat AGE dan terdapat peningkatan yang besar ditunjukkan dalam sel yang dirawat ECH dan RES (Rajah 6) . Oleh itu, keputusan menunjukkan bahawa pengeluarantestosteron meningkat dalam kumpulan yang dirawat ECH dan RES. 

NATURAL CISTANCHE TUBULOSA UNTUK MENINGKATKAN KUASA SEKS PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Semasa keadaan diabetes, pengangkutan glukosa ke organ adalah terhad dan akibatnya, paras glukosa meningkat [29]. Oleh itu, keadaan hiperglisemik adalah salah satu penanda penting untuk pengesanan diabetes. Kajian kami menunjukkan bahawa paras glukosa plasma meningkat dalam kumpulan diabetes dan AUC kumpulan DM adalah lebih tinggi daripada kumpulan lain (Rajah 8). Bersama dengan glukosa plasma, jumlah kandungan kolesterol dan trigliserida telah meningkat dengan ketara dalam kumpulan DM (Jadual 2). Aterosklerosis difasilitasi oleh peningkatan tahap kolesterol dan trigliserida [30]. Walau bagaimanapun, tahap kolesterol dan trigliserida telah menurun dalam kumpulan yang dirawat CTE dan RSG. Kandungan trigliserida kumpulan DME4 mencapai nilai yang hampir serupa dengan kumpulan kawalan.

Insulin adalah hormon yang dihasilkan oleh sel-sel pankreas dan berfungsi untuk mengawal paras gula darah dalam badan manakala leptin adalah hormon yang dihasilkan oleh adiposit yang mampu mengawal pengambilan makanan dan penggunaan tenaga. Kajian menunjukkan bahawa leptin terlibat dalam patofisiologi obesiti dan terdapat interaksi positif antara leptin dan insulin [31]. Kajian kami menunjukkan bahawa tahap inulin plasma dan leptin lebih tinggi dalam kumpulan DM dan tahap insulin menurun dengan peningkatan kepekatan CTE. Kumpulan RSG tidak menunjukkan sebarang perbezaan yang ketara daripada kumpulan DM. Rintangan insulin dan fungsi sel dinilai dengan kaedah HOMA-IR. Nilai HOMA-IR meningkat dalam kumpulan DM dan berbeza dengan ketara daripada kumpulan lain (Jadual 3).

DM menjejaskan fungsi pembiakan melalui selang-seli hormon dalam paksi HPG dan kajian mendedahkan bahawa ekspresi insulin dalam testis juga dipengaruhi oleh diabetes. Ia dicirikan oleh vakuolisasi sel Sertoli, peningkatan pemecahan DNA, spermatogenesis terjejas, dan peningkatan pengurangan sel kuman. Tekanan oksidatif juga menyumbang kepada keabnormalan dalam fungsi pembiakan [32]. Proses pembentukan sperma dalam organ pembiakan lelaki (testis) dipanggil spermatogenesis. Testis terdiri daripada tubul bergelung rapat yang dipanggil tubul seminiferus. Sel sertoli dilihat di dinding tubulus seminiferus dan memberikan khasiat kepada sperma yang belum matang. Penyiasatan parameter sperma menunjukkan bahawa bilangan sperma dan motilitas berkurangan dan keabnormalan meningkat dalam kumpulan DM (Jadual 5). Kesan yang bertentangan diperhatikan dalam kumpulan yang dirawat CTE dan RSG. Kedua-dua sel Leydig dan sel Sertoli dalam kumpulan DM menunjukkan atrofi yang ketara dan rongga dilihat dalam lumen. Ketebalan tubul seminiferus juga berkurangan dalam kumpulan DM. Keputusan yang lebih baik diperhatikan dalam kumpulan yang dirawat CTE dan RSG (Rajah 9). Di samping itu, tahap LH dan testosteron menurun dalam kumpulan DM dan tahap meningkat dalam kumpulan yang dirawat CTE (Jadual 4). Pada lelaki, testosteron serum rendah dan kekerapan nadi LH yang lebih rendah sering dikaitkan dengan obesiti dan diabetes mellitus jenis 2 [33].

Kisspeptin yang dikodkan oleh gen KiSS1 dikenali sebagai perangsang kuat paksi HPG dan sebarang mutasi dalam gen kisspeptin akan membawa kepada tahap rendah steroid seks dan gonadotropin. Kajian menunjukkan bahawa dalam tikus diabetes yang disebabkan oleh STZ, tahap mRNA Kiss1 telah menurun [33]. Permulaan dan penyelenggaraan kemandulan mamalia disambungkan dengan reseptor G-protein 54 (GPR54). Mutasi dalam GPR 54 dicirikan oleh ketiadaan kematangan seksual dan tahap rendah hormon gonadotropik (LH dan FSH). Sitokin pro-radang seperti IL-6 dan TNF- mengawal selia ekspresi penindas isyarat sitokin 3 (SOCS3) yang terlibat dalam rintangan insulin pengantara keradangan dalam hati dan adiposit [34]. SIRT 1 adalah gen yang dikaitkan dengan peraturan beberapa penyakit penuaan. Gen ini dinyatakan dengan jelas dalam sel-sel pankreas dan mengawal rembesan insulin dan menghalang apoptosis. Kajian semasa menunjukkan bahawa ungkapan KiSS1, GPR54, dan SIRT1 menurun dalam kumpulan DM, tetapi ungkapan itu meningkat dalam kumpulan yang dirawat CTE (Rajah 10). Peningkatan dalam ungkapan SOCS-3 dalam kumpulan DM menunjukkan keadaan keradangan. Pautan molekul pertama yang dikenal pasti antara obesiti dan keradangan ialah TNF-. Oleh itu, peningkatan tahap TNF- adalah penunjuk keradangan. Tahap penurunan sitokin pro-radang seperti TNF- dan IL-6 dilihat dalam kumpulan yang dirawat CTE (Rajah 12 dan 13).

Ketidakseimbangan antara ROS dan antioksidan membawa kepada keadaan diabetes. Superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT), dan glutathione peroxidase (GPX) dikenali sebagai antioksidan utama yang bertanggungjawab untuk mengekalkan tahap ROS optimum [35]. Daripada keputusan, didapati bahawa aktiviti antioksidan adalah jauh lebih rendah dalam kumpulan DM. Kumpulan yang dirawat CT menunjukkan peningkatan dalam pengeluaran antioksidan. Kumpulan yang dirawat RSG tidak menunjukkan sebarang peningkatan yang ketara dalam aktiviti antioksidan (Jadual 6 dan 7).

Nitrik oksida (NO) dikenali sebagai ROS penting yang menyumbang kepada keradangan. Kajian kami menunjukkan bahawa tahap NO telah menurun dalam kumpulan yang dirawat CTE (Rajah 11). Keputusan menunjukkan bahawa kandungan anion superoksida dalam sperma tikus diabetes meningkat dengan ketara dan tiada peningkatan ketara selepas pemberian RSG. Pengeluaran superoksida telah dikurangkan dalam kumpulan CTE.

Penentuan MDA sangat berguna untuk menilai peroksidasi lipid. Peroksidasi lipid ialah proses pengoksidaan dalam lipid dan akhirnya mengakibatkan kerosakan sel. MDA dihasilkan hasil daripada peroksidasi lipid asid lemak tak tepu. Kajian menunjukkan bahawa tahap MDA dikaitkan dengan umur dan tahap glukosa darah puasa [36]. Kajian semasa menunjukkan bahawa CTE meningkatkan peroksidasi lipid dalam plasma, testis, dan sperma (Jadual 8).

NATURAL CISTANCHE TUBULOSA UNTUK MENINGKATKAN FUNGSI SEKSUAL PHGS75% ECH 30% ACT 12%

5. Kesimpulan

Tekanan oksidatif semasa keadaan diabetes mengganggu sistem pembiakan lelaki melalui kerosakan sperma dan disfungsi gonad. Cistanche tubulosa adalah tumbuhan padang pasir yang diterima secara meluas dalam perubatan Cina kerana kesan farmakologinya.Echinacoside (ECH)adalah konstituen utama CTE yang bertanggungjawab untuk aktiviti antioksidan dan anti-radangnya. Keputusan in vitro kami menunjukkan bahawa ECH memulihkan laluan sintesis testosteron dan menurunkan tahap ekspresi protein NF-κB dan RAGE. ECH berkesan menghalang pengeluaran anion superoksida dan H2O2 dalam sel Leydig. Kajian in vivo mendedahkan bahawa ECH mengurangkan tahap kolesterol, trigliserida, TNF- dan IL-6. Di samping itu, ekspresi mRNA dalam hipotalamus tikus diabetes telah bertambah baik dengan ketara. Perlu diperhatikan juga bahawa ECH mengurangkan peroksidasi lipid dan meningkatkan rintangan insulin dalam tikus jantan diabetes. Aktiviti antioksidan meningkat dalam plasma dan testis. Oleh itu, kajian kami mencadangkan bahawa ECH memberikan perlindungan yang berkesan terhadap disfungsi pembiakan dalam tikus lelaki diabetes yang disebabkan oleh STZ.