Kesan Rebusan Bushen Huoxue Xiezhuo Pada Apoptosis Dan Fibrosis Tisu Renal Dalam Tikus Dengan 5 / 6 Nefrectomy Berdasarkan HIF-1 / PKM2
Jan 27, 2026
3.4 Kesan Rebusan Bushen Huoxue Xiezhuo pada Ungkapan Protein -SMA, TGF- , FN dan Kolagen-1 dalam Tisu Renal Tikus CRF
Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 3~6, berbanding dengan kumpulan dikendalikan palsu, ekspresi protein -SMA, TGF-, FN, dan kolagen-1 dalam tisu buah pinggang kumpulan model telah meningkat dengan ketara (P<0.05). Compared with the model group, the protein expressions of α-SMA, TGF-β, FN, and collagen-1 in renal tissue of all drug-administered groups were significantly decreased (P<0.05). The effect of Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction was dose-dependent.
Jadual 2 Kesan Rebusan Bushen Huoxue Xiezhuo pada paras serum Urea, Scr dan ₂-MG dalam tikus CRF (x̄±s, n=10)
| Kumpulan | Urea/(mmol/L) | Scr/(μmol/L) | ₂-MG/(mg/L) |
|---|---|---|---|
| Kumpulan yang dikendalikan sham | 6.23±0.63 | 37.35±0.83 | 0.98±0.13 |
| Kumpulan model | 23.02±0.73* | 118.57±1.03* | 3.95±1.07* |
| Kumpulan dos rendah | 21.23±0.69# | 112.45±0.87# | 2.57±0.35# |
| Kumpulan dos sederhana | 18.02±0.54# | 93.18±1.17# | 1.98±0.09# |
| Kumpulan dos tinggi | 15.23±0.33# | 87.24±1.08# | 1.13±0.17# |
| Kumpulan Benazepril | 19.09±0.59# | 105.77±0.67# | 2.48±0.15# |
Nota: *P<0.05 vs. sham-operated group; #P<0.05 vs. model group
3.5 Kesan Rebusan Bushen Huoxue Xiezhuo pada Ungkapan mRNA HIF-1 , PKM2 dan HK2 dalam Tisu Renal Tikus CRF
Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 7, berbanding dengan kumpulan dikendalikan palsu, ekspresi mRNA HIF-1 , PKM2 dan HK2 dalam tisu buah pinggang kumpulan model telah meningkat dengan ketara (P<0.05). Compared with the model group, the mRNA expressions of HIF-1α, PKM2, and HK2 in renal tissue of all drug-administered groups were significantly decreased (P<0.05). The effect of Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction was dose-dependent.
Rajah 3. Kesan Formula Menonaktifkan Buah Pinggang, Mengaktifkan Darah dan Menghapuskan Kekeruhan pada Ekspresi Protein SMA dalam Tisu Renal Tikus CRF (ICH, ×400)
A. Kumpulan kendalian Sham
B. Kumpulan Model
C. Kumpulan Formula Pengetonkan Buah Pinggang, Pengaktifan Darah dan Penghapusan Kekeruhan Dos Rendah
D. Kumpulan Formula Mengenakan Buah Pinggang Dos Sederhana, Mengaktifkan Darah dan Menghapuskan Kekeruhan
E. Kumpulan Formula Pengetonkan Buah Pinggang, Pengaktifan Darah dan Penghapusan Kekeruhan Dos Tinggi
F. Kumpulan Benazepril
Rajah 4. Kesan Formula Menonaktifkan Buah Pinggang, Mengaktifkan Darah dan Menghapuskan Kekeruhan pada Ekspresi TGF- Protein dalam Tisu Buah Pinggang Tikus CRF (ICH, ×400)
A. Kumpulan kendalian Sham
B. Kumpulan Model
C. Kumpulan Formula Pengetonkan Buah Pinggang, Pengaktifan Darah dan Penghapusan Kekeruhan Dos Rendah
D. Kumpulan Formula Mengenakan Buah Pinggang Dos Sederhana, Mengaktifkan Darah dan Menghapuskan Kekeruhan
E. Kumpulan Formula Pengetonkan Buah Pinggang, Pengaktifan Darah dan Penghapusan Kekeruhan Dos Tinggi
F. Kumpulan Benazepril
Perkhidmatan Sokongan Wecistanche-Untuk butiran lanjut tentang kerjasama
E-mel:wallence.suen@wecistanche.com
3.6 Kesan Rebusan Bushen Huoxue Xiezhuo pada Ungkapan Protein HIF-1 , PKM2 dan HK2 dalam Tisu Renal Tikus CRF
Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 8, berbanding dengan kumpulan dikendalikan palsu, ungkapan protein HIF-1 , PKM2 dan HK2 dalam tisu buah pinggang kumpulan model telah meningkat dengan ketara (P<0.05). Compared with the model group, the protein expressions of HIF-1α, PKM2, and HK2 in renal tissue of all drug-administered groups were significantly decreased (P<0.05). The effect of Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction was dose-dependent.
3.7 Kesan Rebusan Bushen Huoxue Xiezhuo pada Ungkapan Protein Bax, Bcl-2 dan Caspase-3 dalam Tisu Renal Tikus CRF
Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 9, berbanding dengan kumpulan yang dikendalikan secara palsu, ekspresi protein Bax dan Caspase-3 dalam tisu buah pinggang kumpulan model telah meningkat dengan ketara, manakala ekspresi protein Bcl-2 telah menurun dengan ketara (P<0.05). Compared with the model group, the protein expressions of Bax and Caspase-3 in renal tissue of all drug-administered groups were significantly decreased, and the protein expression of Bcl-2 was significantly increased (P<0.05). The effect of Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction was dose-dependent.
Rajah 7. Kesan Formula Pengtontonan Buah Pinggang, Pengaktifan Darah dan Penghapusan Kekeruhan terhadap Ekspresi mRNA HIF-1 , PKM2 dan HK2 dalam Tisu Buah Pinggang Tikus CRF
A. Kumpulan kendalian Sham
B. Kumpulan Model
C. Kumpulan Formula Pengetonkan Buah Pinggang, Pengaktifan Darah dan Penghapusan Kekeruhan Dos Rendah
D. Kumpulan Formula Mengenakan Buah Pinggang Dos Sederhana, Mengaktifkan Darah dan Menghapuskan Kekeruhan
E. Kumpulan Formula Pengetonkan Buah Pinggang, Pengaktifan Darah dan Penghapusan Kekeruhan Dos Tinggi
F. Kumpulan Benazepril
Nota: Berbanding dengan kumpulan yang dikendalikan secara palsu,
∗ P<0.05; Compared with the model group,
#P<0.05
Rajah 8. Kesan Formula Pengtonkan Buah Pinggang, Pengaktifan Darah dan Penghapusan Kekeruhan pada Protein HIF-1 , PKM2 dan HK2 dalam Tisu Buah Pinggang Tikus CRF
A. Kumpulan kendalian Sham
B. Kumpulan Model
C. Kumpulan Formula Pengetonkan Buah Pinggang, Pengaktifan Darah dan Penghapusan Kekeruhan Dos Rendah
D. Kumpulan Formula Mengenakan Buah Pinggang Dos Sederhana, Mengaktifkan Darah dan Menghapuskan Kekeruhan
E. Kumpulan Formula Pengetonkan Buah Pinggang, Pengaktifan Darah dan Penghapusan Kekeruhan Dos Tinggi
F. Kumpulan Benazepril
Figure 9. Effects of the Kidney-Tonifying, Blood-Activating, and Turbidity-Eliminating Formula on the Expression of Bax, Bcl-2, and Caspase-3 Proteins in the Kidney Tissue of CRF Rats
A. Kumpulan kendalian Sham
B. Kumpulan Model
C. Kumpulan Formula Pengetonkan Buah Pinggang, Pengaktifan Darah dan Penghapusan Kekeruhan Dos Rendah
D. Kumpulan Formula Mengenakan Buah Pinggang Dos Sederhana, Mengaktifkan Darah dan Menghapuskan Kekeruhan
E. Kumpulan Formula Pengetonkan Buah Pinggang, Pengaktifan Darah dan Penghapusan Kekeruhan Dos Tinggi
F. Kumpulan Benazepril
Nota: Berbanding dengan kumpulan yang dikendalikan secara palsu,
∗ P<0.05; Compared with the model group,
#P<0.05
4 Perbincangan
Dalam beberapa tahun kebelakangan ini, bilangan pesakit CKD telah meningkat, dan kelazimannya juga meningkat dengan ketara. Berdasarkan patogenesis asas CKD sebagai "kekurangan rumit dengan lebihan", Profesor Tan Jinchuan mencadangkan prinsip terapeutik untuk menguatkan buah pinggang dan limpa, mengaktifkan peredaran darah, dan mengeringkan kekeruhan. Kajian terdahulu telah menunjukkan bahawa Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction boleh mengawal laluan seperti autophagy, apoptosis, dan fibrosis untuk melindungi fungsi buah pinggang. Kajian yang berkaitan telah menunjukkan bahawa rhubarb, astragalus, angelica, salvia miltiorrhiza, dan bahan aktifnya semuanya boleh menghalang fibrosis buah pinggang dan melindungi fungsi buah pinggang [7]. Keputusan kajian ini menunjukkan bahawa berbanding dengan kumpulan model, semua kumpulan dos Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction meningkatkan tahap serum Urea, Scr, dan ₂-MG, serta pemendapan serat kolagen dalam tisu buah pinggang kepada tahap yang berbeza-beza, menunjukkan bahawa Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction memainkan peranan penting dalam melindungi fungsi buah pinggang dan melambatkan fibrosis.
Terutama, kesan perlindungan buah pinggang yang serupa telah dilaporkan untuk Cistanche tubulosa, herba TCM klasik yang dikenali sebagai "ginseng gurun" dan diiktiraf sebagai bahan perubatan berkhasiat buah pinggang bermutu tinggi [15]. Dalam teori TCM, Cistanche tubulosa sangat dihargai kerana keupayaannya untuk "mencergaskan buah pinggang yang dan menambah pati", dan penyelidikan moden telah mengesahkan bahawa ia kaya dengan bahan aktif seperti echinacoside, verbascoside, dan flavonoid [15]. Komponen ini boleh menghalang apoptosis sel buah pinggang, menggalakkan percambahan sel buah pinggang, membaiki tisu buah pinggang yang rosak, dan melebarkan saluran darah buah pinggang-kesan yang sejajar dengan mekanisme pelindung buah pinggang yang diperhatikan dalam Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction [15]. Penemuan sedemikian menyerlahkan potensi herba TCM dengan sifat berkhasiat buah pinggang dalam rawatan CKD.
Apoptosis adalah salah satu mekanisme penting yang mendasari patogenesis CRF. Di bawah keadaan fisiologi, keseimbangan dinamik yang halus dikekalkan antara ahli keluarga pro-apoptosis dan anti-apoptosis. Sebaik sahaja apoptosis diaktifkan secara berlebihan, ia akan membawa kepada perubahan patologi dalam glomeruli dan tubul renal, seterusnya merosakkan fungsi buah pinggang. Apabila protein pro-apoptosis Bax diaktifkan, ia mendorong peningkatan dalam kebolehtelapan membran luar mitokondria, mengakibatkan keruntuhan potensi membran dalam mitokondria dan pembebasan sitokrom C (CytC) ke dalam sitoplasma, yang mengaktifkan Caspase-9 dan seterusnya mencetuskan Caspase-3 yang bergantung kepada cas apoptosis [8]. Kajian yang berkaitan telah menunjukkan bahawa dalam sel epitelium tubular proksimal, mengetuk gen Bax atau meningkatkan ekspresi Bcl-2 secara berkesan boleh menghalang proses apoptosis [9]. Kajian ini mendapati bahawa semua dos Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction secara ketara menurunkan ekspresi faktor pro-apoptosis Bax dan Caspase-3, dan mengimbangi ekspresi faktor anti-apoptosis Bcl-2, menunjukkan bahawa Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction boleh meningkatkan fungsi buah pinggang dengan menyekat laluan apoptosis.
Fibrosis buah pinggang ialah penyakit buah pinggang kronik yang dimediasi oleh pelbagai sitokin, dikawal oleh pelbagai laluan isyarat, dan didorong oleh pelbagai faktor. Ia adalah laluan biasa yang membawa kepada penyakit buah pinggang peringkat akhir, yang dicirikan oleh kerosakan tisu buah pinggang, keradangan, pemendapan ECM, dan peralihan epitelium-mesenchymal tiub. Fibrosis buah pinggang termasuk fibrosis glomerular dan fibrosis tubulointerstitial [8]. Kajian telah mengesahkan bahawa manifestasi patologi utama CRF awal adalah fibrosis buah pinggang, dan melambatkan perkembangan fibrosis buah pinggang adalah sangat penting untuk mengurangkan kerosakan buah pinggang dan mengurangkan perkembangan kegagalan buah pinggang [10]. TGF- ialah subjenis utama fibrosis pemacu, yang mengawal sintesis ECM melalui laluan isyarat Smad. FN terlibat dalam lekatan sel, penghijrahan dan pemasangan ECM. Sumber selular utama pemendapan ECM yang berlebihan adalah myofibroblas, dan transdifferentiation strukturnya adalah faktor utama dalam kejadian dan perkembangan fibrosis buah pinggang. Kolagen-1 terutamanya berasal daripada myofibroblas, dan -SMA, sebagai salah satu ciri morfologi utama dan penanda pengaktifan myofibroblast, tahap ekspresi kedua-duanya berkorelasi positif dengan tahap fibrosis buah pinggang [11]. Kajian yang berkaitan telah menunjukkan bahawa dalam pelbagai penyakit buah pinggang kronik, ekspresi mRNA dan protein -SMA dan Kolagen-1 meningkat dengan ketara, disertai dengan fibrosis buah pinggang yang teruk [12]. Dalam kajian ini, Rebusan Bushen Huoxue Xiezhuo mengurangkan ekspresi penanda fibrosis seperti -SMA, TGF-, FN, dan Collagen-1 dengan ketara, menunjukkan bahawa Rebusan Bushen Huoxue Xiezhuo mempunyai kesan penting dalam meningkatkan fungsi buah pinggang dan melambatkan perkembangan fibrosis buah pinggang.
Laluan isyarat HIF-1 /PKM2 berkait rapat dengan apoptosis. HIF-1 boleh menggalakkan apoptosis dengan mengaktifkan Bax secara transkripsi dan menghalang Bcl-2, dan PKM2 boleh memberi kesan dengan mengawal selia protein berkaitan apoptosis seperti p53 selepas translokasi nuklear [13]. Sebagai salah satu pengawal selia utama tindak balas hipoksik mamalia, HIF-1 boleh mengimbangi ekspresi TGF melalui HIF-1 dalam sel epitelium tiub renal hipoksik dalam model fibrosis interstisial buah pinggang, dengan itu mengaktifkan laluan berkaitan Smad dan mendorong ekspresi penanda fibrosis seperti -SMA dan Kolagen-1. Selain mengambil bahagian dalam peraturan apoptosis, PKM2 juga menyokong keperluan tenaga sel fibrotik dengan mengawal metabolisme glikolitik [14]. Keputusan kajian ini menunjukkan bahawa tahap HIF-1 , PKM2 dan HK2 dalam tisu buah pinggang kumpulan model CRF telah meningkat dengan ketara, manakala dalam kumpulan TCM menurun dengan ketara, menunjukkan bahawa Rebusan Bushen Huoxue Xiezhuo boleh menghalang apoptosis dan melambatkan fibrosis buah pinggang dengan menekan pengaktifan laluan tisu renal} / {{M2}.
Ringkasnya, Rebusan Bushen Huoxue Xiezhuo boleh menghalang apoptosis sel dan fibrosis dalam tikus CRF, memperbaiki kecederaan buah pinggang dalam tikus model CRF dan mekanismenya mungkin berkaitan dengan peraturan laluan isyarat HIF-1 /PKM2.
Rujukan
[1] American Journal of Health-System Pharmacy. Garis panduan amalan klinikal Kdigo 2024 untuk penilaian dan pengurusan penyakit buah pinggang kronik[J]. Buah Pinggang Antarabangsa, 2024, 105(4S): 117-314.[2] Zhang L, Liu L, Bai M, et al. HE4 yang disebabkan oleh hipoksia dalam sel epitelium tiub menggalakkan pengumpulan matriks ekstraselular dan fibrosis buah pinggang melalui NF-κB[J]. Jurnal FASEB, 2020, 34(2): 2554-2567.[3] Hu D, Wang L, Zhang Y, et al. Larutan oral Sanqi memperbaiki fibrosis buah pinggang dengan menyekat pengaktifan fibroblas melalui laluan HIF-1 /PKM2/glikolisis dalam penyakit buah pinggang kronik[J]. Jurnal Etnofarmakologi, 2024, 335: 118679.[4] Palsson-Mcdermott EM, Curtis AM, Goel G, et al. Piruvat kinase M2 mengawal aktiviti Hif-1 dan induksi IL-1 dan merupakan penentu kritikal kesan Warburg dalam makrofaj diaktifkan LPS[J]. Metabolisme Sel, 2015, 21(1): 65-80.[5] Lihat EJ, Cullen V. Ulasan tentang kemas kini 2021 garis panduan amalan klinikal KDIGO untuk pengurusan tekanan darah dalam penyakit buah pinggang kronik[J]. Nefrologi (Carlton, Vic), 2025, 30(1): e14414.[6] Wu ZH, Cao WX, Tan M, et al. Meneroka kesan Rhubarb Xiezhuo Decoction pada autophagy dan apoptosis pada tikus dengan kegagalan buah pinggang kronik berdasarkan laluan mTORC1/p70S6K[J]. Perubatan Lishizhen dan Penyelidikan Materia Medica, 2023, 34(2): 321-324.[7] Wang J, Li YT, Liu DW, et al. Kemajuan penyelidikan mengenai mekanisme komponen aktif utama antrakuinon rhubarb terhadap fibrosis buah pinggang[J]. Penyelidikan Perubatan Cina Tradisional, 2023, 36(10): 92-96.[8] Askari H, Seifi B, Kadkhodaee M, et al. Kesan perlindungan hidrogen sulfida pada penyakit buah pinggang kronik dengan mengurangkan tekanan oksidatif, keradangan dan apoptosis[J]. Jurnal EXCLI, 2018, 17: 14-23.[9] Solà-Riera C, García M, Ljunggren HG, et al. Hantavirus menghalang apoptosis dengan menghalang kehilangan potensi membran mitokondria melalui pengawalseliaan atas faktor pro-kemandirian BCL-2[J]. Patogen PLoS, 2020, 16(2): e1008297.[10] Yuan L, Wang L, Wang H, et al. Icariin menghalang hipermetilasi promoter Epo, mengawal peralihan pericyte-myofibroblast, dan memperbaiki anemia buah pinggang dalam 5/6 tikus nefrektomi [J/OL]. Farmakologi dan Klinik Materia Medica Cina: 1-17 [2025-12-17]. https://doi.org/10.13412/j.cnki.zyyl.20250408.004.[11] Sravani S, Saifi MA, Godugu C. Riociguat memulihkan kecederaan buah pinggang dan fibrosis dalam model haiwan [J]. Komunikasi Penyelidikan Biokimia dan Biofizik, 2020, 530(4): 706-712.[12] Li L, Zhou G, Fu R, et al. Polisakarida yang diekstrak daripada Balanophora polyandra Griff (BPP) memperbaiki fibrosis buah pinggang dan EMT melalui menghalang laluan Hedgehog [J]. Jurnal Perubatan Selular dan Molekul, 2021, 25(6): 2828-2840.[13] Rana NK, Singh P, Koch B. Hipoksia simulasi CoCl₂ mendorong percambahan sel dan mengubah corak ekspresi gen yang berkaitan dengan hipoksia yang terlibat dalam angiogenesis dan apoptosis[J]. Penyelidikan Biologi, 2019, 52(1): 12.[14] Wang Z, Yu J, Hao D, et al. Tandatangan transkrip yang bertindak balas kepada pengaktif PKM2 TEPP-46 dalam sel tiub epitelium proksimal renal manusia hiperglisemik[J]. Sempadan dalam Endokrinologi, 2022, 13: 965379.[15] Chengdu WeCistanche Bio-Tech., Co Ltd. Cistanche untuk buah pinggang yang berkhasiat[EB/OL]. https://www.xjcistanche.com/cistanche-extract-product/cistanche-for-nourishing-kidney.html, 2022-08-01.
