BAHAGIAN Ⅰ: Analog Asid Epoksieicosatrienoik Sasaran Buah Pinggang, EET-F01, Mengurangkan Keradangan, Tekanan Oksidatif, dan Nefrotoksisiti Akibat Cisplatin

Hubungi:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

John D. Imig, Md Abdul Hye Khan & et al.

1. Pengenalan

Penyakit buah pinggang dalam pesakit kanser dan mangsa yang terselamat telah muncul sebagai isu penjagaan kesihatan utama dan terus meningkat secara mendadak [1-3]. Terapi kanser yang lebih baru telah meningkatkan kadar penyembuhan dan masa kelangsungan hidup, tetapi keabnormalan cecair dan elektrolit yang berkaitan dengan terapi dan kecederaan buah pinggang akut yang berkembang kepada penyakit buah pinggang kronik adalah sekuela biasa [3-5]. Ubat anti-kanser, faktor pertumbuhan endothelial vaskular perencat tyrosine kinase (VEGFRI), dan derivatif platinum juga boleh menyebabkan kecederaan buah pinggang yang teruk yang menjejaskan penggunaannya secara berkesan dan selamat [3-5]. Terdapat keperluan klinikal yang ketara untuk terapi baru untuk merawat dan menghentikan penyakit buah pinggang secara berkesan dalam pesakit kanser. Isu penjagaan kesihatan ini telah membawa kepada perkembangan, evolusi, dan kemunculan subkepakaran, Onco Nephrology [5]. Rawatan semasa hanya melambatkan kehilangan fungsi buah pinggang atau tidak mempunyai manfaat sama sekali [2,5,6]. Pendekatan baharu amat diperlukan. Penyelidikan berterusan kami sedang menyerang arena kanser yang baru muncul ini dan kami menumpukan pada membangunkan analog asid epoksiekosatrienoik (EET) untuk melindungi buah pinggang daripada ketoksikan yang berkaitan dengan terapi kanser.

tablet bioflavonoiddancistancheuntukfungsi buah pinggang

Analog EET adalah berdasarkan bahagian farmakoforik EET dan direka bentuk dengan keterlarutan yang lebih baik dan rintangan kepada auto-pengoksidaan dan metabolisme oleh hidrolase epoksida larut (sEH)[7,8]. Kajian terdahulu telah menunjukkan bahawa analog EET sintetik adalah pelindung buah pinggang dalam beberapa keadaan patologi seperti hipertensi, akibat dadah.nefrotoksisiti, dan lupus nefritis [9-13]. Analog EET mengurangkan kerosakan buah pinggang dalam keadaan penyakit ini melalui aktiviti vasodilator, diuretik, anti-radang, anti-oksidatif dan anti-apoptosis[10-13]. Kajian ini jelas menunjukkan bahawa pendekatan berasaskan EET memerangi kerosakan buah pinggang dalam situasi patologi etiologi yang berbeza. Baru-baru ini, percubaan telah dibuat untuk membangunkan analog EET yang mempunyai sifat unik untuk menyasarkan buah pinggang. Satu bentuk baru analog EET sasaran buah pinggang telah direka dan disintesis dengan menggabungkan farmakofor EET dengan asid folik (EET-F01). Dalam kajian ini, kami menyiasat keupayaanEET-F01untuk menyasarkan buah pinggang jika dibandingkan dengan analog EET, EET-A. EET-FO1 dan EET-A dibandingkan untuk keupayaan mereka untuk mengurangkan kecederaan buah pinggang yang disebabkan oleh cisplatin. Akhir sekali, kajian ini menggariskan lagi tindakan anti-radang dan anti-oksidasi pelindung buah pinggangEET-F01.

faedah cistancheuntukbuah pinggang

2. Keputusan

2.1. EET-F01Mensasarkan Tisu Buah Pinggang

Struktur kimia untuk EET-A dan EET-FO1 disediakan dalam Rajah 1. Ketulenan untuk EET-A danEET-F01 was >95 peratus seperti yang ditentukan oleh NMR. Dalam kajian haiwan akut, dos yang sama mengikut berat EET-A danEET-F01telah diberikan secara intravena selama 6 jam diikuti dengan pengumpulan tisu plasma dan buah pinggang. Kami menunjukkan 5-paras plasma kali ganda lebih tinggi daripadaEET-F01berbanding EET-A selepas 6-h pentadbiran berterusan (Rajah 1). Menariknya, kami juga menunjukkan bahawa selepas 6-j pentadbiran berterusan kandungan buah pinggang EET-A hampir tidak dapat dikesan berbanding denganEET-F01kandungan dalam buah pinggang (Rajah 1). Data ini menunjukkan bahawaEET-F01menyasarkan buah pinggang.

Rajah 1. Perbandingan plasma dan buah pinggang EET-F01 dan EET-A selepas pentadbiran iv selama 6j.Panel atas: Struktur kimia untuk EET-A danEET-F01. Panel kiri: Kepekatan plasma EET-FO1 dan EET-A. Panel kanan: Tahap buah pinggangEET-F01dan EET-A. Data dinyatakan sebagai min±SEM, n=3/kumpulan.

2.2. EET-F01Melindungi daripada CisplatinNefrotoksisiti

Dalam set eksperimen yang berasingan, kumpulan tikus telah dirawat terlebih dahuluEET-F01dan EET-A selama dua hari sebelum induksi nefropati cisplatin dan kemudian dirawat dengan sebatian ujian selama 5 hari lagi. Tindakan perlindungan buah pinggangEET-F01dan EET-A ditentukan daripada tahap BUN, kandungan NAG kencing dan tahap KIM{1}} kencing.EET-F01berkesan seperti EET-A dalam mengurangkan BUN, NAG, KIM-1 dan kecederaan histologi buah pinggang lima hari selepas induksi cisplatinnefrotoksisiti(Rajah 2). Seterusnya, pemeriksaan histologi dijalankan untuk menilai lebih lanjut nefrotoksisiti cisplatin. Pentadbiran Cisplatin mengakibatkan kecederaan tiub yang ditunjukkan oleh vakuolasi dan penyahkuamatan sel epitelium buah pinggang bersama-sama dengan pembentukan tuangan protein intra-tubular yang teruk di kedua-dua kawasan kortikal dan medulla buah pinggang. EET-A danEET-F01rawatan melindungi buah pinggang daripada cisplatinnefrotoksisitidalam tikus (Rajah 2).EET-F01berkesan pada 20 mg/kg/d dan pada dos 10-kali ganda lebih rendah sebanyak 2 mg/kg/d walaupun berat molekulnya hampir 2× lebih besar disebabkan oleh folat berbanding dengan EET-A. Data ini jelas menunjukkannyaEET-F01menyasarkan buah pinggang dan memudahkan dos yang lebih rendah, namun masih berkesan. Oleh itu, kami telah membangunkan analog EET yang disasarkan buah pinggang,EET-F01, yang menunjukkan potensi yang sangat baik sebagai terapeutik untuk penyakit buah pinggang.

faedah cistanche deserticola

Rajah 2. Kecederaan buah pinggang yang disebabkan oleh cisplatin dikurangkan dengan rawatan EET-F01 dan EET-A.Panel kiri: nitrogen urea darah (BUN), Panel tengah: N-acetyl- -(D)-glucosaminidase (NAG), panel kanan: molekul kecederaan buah pinggang-1 (KIM-1) dalam tikus yang diberi cisplatin yang dirawat dengan kenderaan, EET-FO1, atau EET-A. Panel bawah: Fotomikrograf perwakilan pewarnaan asid Berkala-Schiff (PAS) yang menggambarkan vakuolasi dan penyahkuamatan sel epitelium buah pinggang bersama-sama dengan pembentukan tuangan tiub tuangan protein intra-tubular yang teruk dalam bahagian buah pinggang kumpulan eksperimen yang berbeza.*p<0.05 vs.="" control-vehicle="" group;t=""><0.05 vs.="" cisplatin-vehicle="" group.data="" expressed="" as="" mean="" ±sem,="" n="">

2.3. EET-F01 dan EET-A Mengurangkan Keradangan Buah Pinggang dan Tekanan Pengoksidaan dalam CisplatinNefrotoksisiti

Tahap ekspresi mRNA IL-6 Renal dan TNFo menunjukkan peningkatan 4 hingga 5-kali ganda dalam akibat cisplatinnefrotoksisiti. EET-F01dan rawatan EET-A mengurangkan gen radang buah pinggang IL-6 dan TNF sebanyak 30-50 peratus dalam cisplatinnefrotoksisiti(Rajah 3). Peningkatan ekspresi buah pinggang gen penanda oksidatif NADPH oxidase subunit p47phox, p67phox, gp91phox, dan NOX4 diperhatikan dalam tikus yang diberikan cisplatin. Tahap TBARS tisu buah pinggang meningkat semasa disebabkan oleh cisplatinnefrotoksisiti. Peningkatan tekanan oksidatif akibat cisplatin ini telah dilemahkan60-100 peratus sebanyakEET-F01dan rawatan EET-A (Rajah 4 dan 5). Data ini menunjukkan bahawa sasaran buah pinggangEET-F01adalah berkesan seperti EET-A dalam mengurangkan keradangan dan tekanan oksidatif dalam cisplatinnefrotoksisiti.

Rajah 3. Keradangan buah pinggang dalam nefrotoksisiti cisplatin dikurangkan dengan rawatan EET-F01 dan EET-A.Analisis RT-PCR untuk ekspresi mRNA IL-6(panel kiri) dan TNF (panel kanan).*p<0.05 vs.="" control-vehicle="" group;=""><0.05 vs.="" cisplatin-vehicle="" group.="" data="" expressed="" as="" mean±sem,="" n="">

2.4. EET-A Tidak Meningkatkan Pertumbuhan Tumor

Penggunaan analog EET mungkin menggalakkan metastasis kanser apabila diberikan untuk jangka masa yang panjang [14,15]. Walaupun pendekatan terapeutik semasa akan mentadbir analog EET untuk jangka masa yang singkat untuk mengelakkan cisplatin yang disebabkannefrotoksisiti, kami menilai kesan jangka panjang EET-A pada pertumbuhan tumor barisan sel kanser payudara manusia, MBA-MB-231, dalam tikus athymic. Jumlah dan berat tumor meningkat pada kadar yang sama dalam kenderaan atau tikus yang dirawat EET-A dalam tempoh tiga minggu (Rajah 6). Penilaian histologi tumor gagal menunjukkan sebarang perubahan dalam hiperplasia selular atau percambahan dalam tikus yang dirawat EET-A. Data ini menunjukkan bahawa EET-A tidak meningkatkan pertumbuhan tumor.

Rajah 4. Tekanan oksidatif buah pinggang dalam nefrotoksisiti cisplatin dikurangkan dengan rawatan EET-F01 dan EET-A.Analisis RT-PCR untuk ekspresi mRNA bagi (a)p47phox, (b)p67phox, (c)gp91phox, (d) NOX4.*p<0.05 vs.control-vehicle=""><0.05 vs.="" cisplatin-vehicle="" group.="" data="" expressed="" as="" mean="" ±="" sem,="" n="">	Rajah 5. Bahan reaktif asid tiobarbiturik buah pinggang (TBARS) dalam nefrotoksisiti cisplatin dikurangkan dengan rawatan EET-F01 dan EET-A.*p<0.05 vs.control-vehicle=""><0.05 vs.="" cisplatin-vehicle="" group.="" data="" expressed="" as="" mean="" ±="" sem,="" n="">

Rajah 6. Pertumbuhan tumor barisan sel kanser payudara manusia, MBA-MB-231, dalam tikus athymic tidak diubah oleh rawatan EET-A.Panel kiri: isipadu tumor, Panel kanan: berat tumor dalam MBA-MB-231 tikus pembawa tumor yang dirawat dengan kenderaan (kawalan) atau EET-A. Panel bawah: Fotomikrograf perwakilan Pewarnaan asid-Schiff (PAS) berkala yang menggambarkan hiperplasia tumor yang serupa dan percambahan dalam tumor payudara manusia. Data dinyatakan sebagai min± SEM,n=5 tikus dan n=10 tumor/kumpulan.

KLIK DI SINI UNTUK BAHAGIAN Ⅱ

cistanche dalam hindi