Menentukan Acteoside Dan Echinacoside Of Cistanche Tubulosa

[Abstrak]Objektif: Untuk membina kaedah penentuan (komponen keberkesanan stateside dan echinacea－ side) dalam Cistanche Tubulosa oleh kromatografi cecair berprestasi tinggi. Untuk membandingkan kandungan komponen utama dalam dua habitat, empat perumah, dan empat kelompok dalam Cistanche tubulosa. Untuk memberikan bukti saintifik untuk anda－ penggunaan jenis Cistanche tubulosa. Kaedah: Menggunakan lajur kromatografi Kromasil C18 (4.6 mm×25{11}} mm, 5 μm); Fasa mudah alih: metanol, asetonitril-1 peratus asid asetik (14∶9∶77); Kadar aliran: 1.0 mL·min-1; Panjang gelombang pengesanan 334 nm; Suhu lajur ialah 30 darjah Keputusan: Dua komponen mempunyai julat linear lengkung standard yang baik dalam ujian (r=0.999,9). Kadar pemulihan purata ialah 96.89 peratus dan 100.7 peratus, dan peratus RSD ialah 0.91 peratus dan 1.96 peratus. Hasil analisis menunjukkan bahawa terdapat perbezaan yang signifikan antara kandungan komponen keberkesanan utama (stateside dan echinacoside) di kawasan, kelompok, dan hos yang berbeza dalam Cistanche tubulosa. Kesimpulan: Kaedah ini mudah, tepat, dan boleh dihasilkan semula. Ia menyediakan asas eksperimen untuk nilai perubatan Cistanche tubulosa.

[Kata kunci] Cistanche tubulosa; Acteoside; Echinacoside; penentuan kandungan

Percubaan Cistanche deserticola

Klik di sini untuk melihat produk Cistanche

【Minta lebih lanjut】 E-mel:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

Cistanche deserticola pertama kali direkodkan dalam "Shennong Materia Medica Classic" dan merupakan salah satu ubat yang paling kerap digunakan dalam preskripsi tonifying dan pengukuhan yang. Dalam beberapa tahun kebelakangan ini, penggalian besar-besaran Cistanche deserticola telah membawa kepada pengurangan pesat dalam sumber liar. Sebagai pengganti Cistanche deserticola, bunga tiub Cistanche deserticola yang dihasilkan di Xinjiang telah menyumbang 60 peratus daripada bekalan negara.

Serbuk cistanche

Phenylethanol glycosides seperti echinacoside dan ergosterol glycosides adalah salah satu komponen farmakologi utama Cistanche tubulosa. Echinoside mempunyai kesan neuroprotektif [3], kesan osteoprotektif [4], dan kesan anti-penuaan [5]. Ergosteroside mempunyai kesan memperbaiki gangguan ingatan, merawat penyakit Alzheimer, dan mempunyai kesan seperti androgen. Tiub Cistanche: juga dikenali sebagai Hongliu Dayun, dihoskan oleh pelbagai tumbuhan Tamarix L. [8-9]. Penulis menggunakan kaedah HPLC untuk menentukan kandungan dua komponen di atas dalam Cistanche deserticola. Kaedah dan keputusan penentuan menyediakan asas saintifik untuk kawalan kualiti dan nilai perubatan ubat ini.

Phenylethanol glycoside adalah komponen aktif utama Cistanche deserticola

1 Instrumen dan ubat ujian

Reagen dan ubat ujian: Echinacetin (nombor kelompok 111670-200401), ergosterol (nombor kelompok 111530-200505), bahan rujukan yang disediakan oleh Institut Kawalan Produk Farmaseutikal dan Biologi China. Acetonitrile dan metanol adalah kromatografi tulen, manakala air adalah air ultratulen; Semua reagen lain adalah tulen analitik. Semua bahan perubatan Cistanche deserticola telah dikumpul dan dikenal pasti oleh Profesor Ju Aihua dari Universiti Perubatan Mongolia Dalam. Instrumen: Kromatografi cecair berprestasi tinggi American Agilent 1100.

2 Kaedah dan Keputusan

2.1 Keadaan kromatografi dan ujian kebolehsuaian sistem

Lajur kromatografi: Lajur kromatografi Kromasil C18 (4.6 mm × 250 mm,5 μ m）; Fasa mudah alih: metanol asetonitril 1 peratus larutan asid asetik (9:14:77); Panjang gelombang pengesanan ialah 334 nm; Aliran kadar: 1.0 mL · min-1; Suhu lajur 30 darjah ; Isipadu suntikan 20 μ L. Bilangan teori plat tidak boleh kurang daripada 5000 berdasarkan pengiraan glikosida echinacea. Darjah pemisahan dua komponen farmakologi adalah baik, dengan darjah pemisahan lebih daripada 1.5 daripada puncak bersebelahan. (Lihat Rajah 1-3)

Rajah 1 Kromatogram Bahan Rujukan Echinacetin

Rajah 2 Kromatogram bahan rujukan ergosterol

Rajah 3 Kromatogram Cistanche deserticola

2.2 Penyediaan larutan sampel

Timbang dengan tepat kira-kira 0.5 g serbuk Cistanche deserticola (diayak melalui ayak 60 mesh) dan letakkannya dalam kelalang kon coklat 100 mL. Tambah tepat 50 mL fasa mudah alih, timbang jisim, sonikasi selama 40 minit, dan letakkan pada suhu bilik; Timbang jisim sekali lagi, gunakan fasa bergerak untuk mengimbangi penurunan berat badan, goncang dengan baik, tapis, ambil turasan sekali lagi, dan ketepikan.

2.3 Penyediaan penyelesaian rujukan

Timbang dengan tepat jumlah bahan rujukan Echinacetin dan ergosterol yang sesuai, dan tambah fasa mudah alih untuk menyediakan penyelesaian yang mengandungi kira-kira {{0}}.14 mg Echinacetin dan 0.10 mg ergosterol setiap 1 mL, masing-masing.

2.4 Pemeriksaan hubungan linear

Timbang dengan tepat 6.4 mg bahan rujukan echinacea dan 3.0 mg bahan rujukan ergosterol masing-masing, letakkannya dalam 10 kelalang volumetrik mL, cairkannya dengan fasa mudah alih dan goncangkannya secara sekata; Sedut 0 dengan tepat.1, 0.25, 0.5, 1.0, 2.0 dan 3.0 mL masing-masing ke dalam kelalang volumetrik 5 mL, cairkan mengikut skala dengan fasa bergerak, dan goncang; Masing-masing menyerap 20 μ Suntikan sampel L dan ukur mengikut keadaan kromatografi di atas. Paksi Y mewakili kawasan puncak, dan paksi X mewakili isipadu suntikan. Lukiskan lengkung piawai. Data yang diukur menunjukkan bahawa jumlah Echinacetin ialah 0.26 μ g-7.75 μ Terdapat hubungan linear yang baik antara kawasan puncak dan isipadu suntikan antara g, dan persamaan regresi ialah Y=831.41X21. 88, R2=0.9999; Jumlah glikosida ergosterol ialah 0.30 μ g-7.50 μ Terdapat hubungan linear yang baik antara kawasan puncak dan isipadu suntikan antara g, dan persamaan regresi ialah Y=671.53X campur 158.71, R{ {39}}.9999.

Echinoside, komponen kimia utama Cistanche deserticola

2.5 Ujian ketepatan

Timbang dengan tepat 0.5 g serbuk ubat di atas, sediakan penyelesaian ujian mengikut kaedah yang diterangkan dalam "2.2", suntikan 6 kali berturut-turut dan rekodkan kawasan puncak 2 komponen. Peratus RSD daripada kawasan puncak echinacosidenya ialah 1.46 peratus; Kandungan ergosterol glikosida ialah 1.62 peratus .

2.6 Ujian kestabilan

Ambil {{0}}.5 g serbuk sampel dan sediakan penyelesaian ujian mengikut kaedah yang diterangkan dalam "2.2". Suntikan sampel pada 0, 1, 2, 4, 8 dan 12 jam selepas penyediaan. Keputusan menunjukkan bahawa peratus RSD kawasan puncak Echinacetin ialah 1.5 peratus; Kandungan ergosterol glikosida ialah 2.0 peratus .

2.7 Ujian kebolehulangan

Timbang dengan tepat 6 sampel serbuk daripada kumpulan yang sama yang dihasilkan di Minfeng, Hotan, Xinjiang, setiap satu mempunyai berat kira-kira 0.5g. Sediakan dan ukur kawasan puncak mengikut kaedah di bawah "2.2". Kira peratus RSD bagi kawasan puncak echinacoside dalam 6 sampel sebagai 1.85 peratus dan ergosterol sebagai 1.93 peratus.

2.8 Contoh Penambahan dan ujian pemulihan

Timbang dengan tepat 6 sampel serbuk ubat daripada kumpulan yang sama yang dihasilkan di Minfeng, Hotan, Xinjiang, dengan setiap sampel mempunyai berat kira-kira 0.1 g. Tambah sejumlah Echinacetin dan ergosterol, dan sediakan penyelesaian ujian mengikut kaedah yang diterangkan dalam "2.2". Kadar pemulihan purata masing-masing ialah 96.89 peratus dan 100.7 peratus, dengan peratus RSD masing-masing ialah 0.91 peratus dan 1.96 peratus. (Lihat Jadual 1-2)

Jadual 1 Keputusan Ujian Pemulihan Glukosida Jus Nanas

Jadual 2 Keputusan ujian pemulihan glikosida ergosterol

2.9 Penentuan Sampel

Ambil serbuk ubat Cistanche deserticola dari setiap tiub dan beroperasi mengikut kaedah dalam "2.2". Keputusan yang diukur ditunjukkan dalam Jadual 3.

Jadual 3 Penentuan Echinacetin dan Ergosteroside dalam Cistanche deserticola

3 Perbincangan

3.1 Pemilihan fasa mudah alih

Dua set fasa mudah alih telah dibandingkan: 1) metanol asetonitril 1 peratus larutan asid asetik (14:9:77); (2) Metanol: 1 peratus asid formik (21.5:78.5). Keputusan menunjukkan bahawa elusi dengan fasa mudah alih (1) menghasilkan masa pengekalan relatif yang sederhana, puncak kekotoran yang lebih sedikit, dan pemisahan yang baik bagi kedua-dua komponen.

3.2 Pemilihan syarat pengekstrakan

Kesan kaedah pengekstrakan yang berbeza (refluks pemanasan, ultrasound) dan masa pengekstrakan (40 min, 50 min) ke atas kandungan bahan aktif dibandingkan menggunakan fasa mudah alih sebagai pelarut pengekstrakan. Akhirnya, didapati bahawa walaupun kandungan tertinggi diukur selepas pemanasan dan refluks selama 50 minit, tiada pilihan kerana bentuk puncak yang lemah. Kandungan yang diukur oleh ultrasound selama 40 minit dan ultrasound selama 50 minit adalah serupa, jadi ultrasound selama 40 minit dipilih sebagai keadaan pengekstrakan.

3.3 Penyelidikan telah menunjukkan

cistanche herba cina

Bahawa perumah dan habitat yang berbeza mempunyai perbezaan yang ketara dalam kandungan echinacoside dan ergosterol dalam Cistanche deserticola, menunjukkan bahawa kualiti bahan ubatan dipengaruhi dengan ketara oleh lokasi dan perumah. Oleh itu, kajian sistematik korelasi antara asal, perumah, dan kualiti bahan ubatan Cistanche tubulosa adalah sangat penting untuk memilih tumbuhan perumah yang optimum dan menilai kualiti Cistanche tubulosa.

rujukan

[1] Chen Fei, Chen Zhuo, Xing Xuefei, et al. Kemajuan penyelidikan mengenai Cistanche deserticola [J]. Penyelidikan Penilaian Dadah, 2013, 36 (6): 469-475

[2] Song Hailong, Jia Xiaoguang, Xie Haihui. Kemajuan penyelidikan mengenai komponen kimia Cistanche tubulosa [J]. Perubatan Tradisional Cina Xinjiang, 2010, 28 (01): 76-78

[3] ZHU M,LUC,LIW. Pendedahan sementara kepada echinacoside adalah mencukupi untuk mengaktifkan isyarat Trk dan melindungi sel ronal neu－ daripada rotenone [J].J Neurochem,2013,124(4): 571-580. [4] LIF YANG X,YANG Y,etal.Aktiviti antiosteoporotik echinacoside dalam tikus ovariectomized [J].Phytomedicine, 2013,20(6):549-557.

[5] XIE H,ZHU H,CHENG C,et al. Echinacoside melambatkan penuaan selular sel fibroblastik manusia MRC-5[J]. Pharmazie,2009,64(11):752-754.

[6] Park Jinghua, Pu Xiaoping, Ma Jian, et al. Peningkatan gangguan pemerolehan ingatan yang disebabkan oleh scopolamine oleh coeliaoside [J]. Buletin Farmakologi Cina, 2001, 17 (6): 625-626

[7] Lai Qinghai, Wang Linlin, Ding Hui, et al. Kemajuan penyelidikan mengenai rawatan osteoporosis dengan Cistanche deserticola [J]. Jurnal Universiti Perubatan Tradisional Cina Liaoning, 2016, 18 (3): 102-104

[8] Wang Changlin, Guo Yuhai, Tu Pengfei, et al. Analisis RAPD parasit Cistanche deserticola pada spesies Tamarix [J] yang berbeza. Jurnal Perubatan Cina Tradisional Cina, 2009, 34 (3): 264-268

[9] Huang Xiaofang, Xu Rong, Chen Jun, et al. Status penyelidikan dan prospek mengenai ciri habitat, mekanisme parasit dan pengangkutan nutrien Cistanche deserticola [J] Jurnal Perubatan Tradisional Cina Cina, 2012, 37 (19): 2831-2835