Abstrak

Latar belakang: Juzuk fitokimia dan aktiviti biologi Rosa rugosa Thunb. var. plena Regal flower cell sap (RFCS) telah disiasat.

Menurut kajian yang berkaitan,cistancheadalah herba biasa yang dikenali sebagai "herba ajaib yang memanjangkan hayat". Komponen utamanya ialahcistanoside, yang mempunyai pelbagai kesan sepertiantioksidan, anti-radang, danpromosi fungsi imun. Mekanisme antara cistanche dan pemutihan kulit terletak pada kesan antioksidan cistancheglikosida. Melanin dalam kulit manusia dihasilkan oleh pengoksidaan tirosin yang dimangkin olehtyrosinase, dan tindak balas pengoksidaan memerlukan penyertaan oksigen, jadi radikal bebas oksigen dalam badan menjadi faktor pentingmenjejaskan pengeluaran melanin. Cistanche mengandungi cistanoside, yang merupakan antioksidan dan boleh mengurangkan penjanaan radikal bebas dalam badan, dengan itumenghalang pengeluaran melanin.

Klik Pada Faedah Tablet Cistanche

Untuk maklumat lanjut:

david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501

Kaedah:Konstituen meruap, seperti linalool, phenylethyl alcohol, citronellol, dan -bisabolol, telah dikenal pasti oleh GCMS. Kandungan hyperoside, kaempferol-3-O-rutinosid, rutin dan luteolin serta jumlah kandungan flavonoid dalam RFCS ditentukan oleh HPLC dan HPLC-MS. Jumlah kandungan polifenol telah dinilai dengan kaedah kolorimetrik Folin-Ciocalteu. Aktiviti antioksidan RFCS dan piawaian telah dinilai oleh ujian pemusnahan radikal DPPH dan ABTS. Aktiviti perencatan tyrosinase bagi sampel mawar dan bahan piawai ditentukan dengan kaedah spektrofotometri. Kesan antimikrob RFC dinilai dari segi kepekatan perencatan minimum (MIC) dan kepekatan bakteria minimum (MBC) atau kepekatan Fungisida minimum (MFC).

Keputusan:Pecahan mawar mempamerkan kandungan bahan aktif biologi yang tinggi. Jumlah kandungan sebatian meruap dalam RFCS adalah lebih kurang 48.21 ± 2.76 ng/mL. Jumlah kandungan asid fenolik dan jumlah kandungan flavonoid ialah 0.31 ± 0.01 mg/mL dan 0.43 ± 0.01 mg/mL, masing-masing. Nilai IC50 dalam ujian DPPH ialah 1120 ± 42 ug/mL, dan nilai IC50 untuk aktiviti penghapusan radikal ABTS ialah 1430 ± 42 ug/mL.RFCS sangat menghalang pengoksidaan L-tirosin dengan nilai IC50 570 ± 21 ug/mL . Setiap sebatian yang dikenal pasti dalam RFCS mempamerkan aktiviti antimikrob spektrum luas. F. nucleatum paling mudah terdedah kepada RFCS dengan MIC 64 ug/mL dan MBC 250 ug/mL.

Kesimpulan:Disebabkan oleh aroma seperti mawar, phenylethyl alcohol boleh digabungkan dengan linalool untuk digunakan sebagai agen pemutih kulit semula jadi dan bahan tambahan penjagaan kulit dalam industri farmaseutikal.

Kata kunci:RFCS, Konstituen fitokimia, Antioksidan, Antimikrob, aktiviti perencatan Tyrosinase

Latar belakang

Bunga Rosa rugosa Thunb. var. plena Regal bukan sahaja digunakan dalam pengeluaran minyak wangi tetapi juga telah digunakan sebagai makanan kesihatan dan perubatan di negara-negara Asia sejak beribu-ribu tahun dahulu. Selain itu, mawar mengandungi bahan aktif, seperti minyak pati, polifenol, flavonoid, dan antosianin, yang terkenal dengan aktiviti antimikrob, anti-radang, hipoglikemik dan antioksidannya [1–4]. Mawar boleh dimakan dalam pelbagai bentuk, seperti teh mawar, kuih mawar, dan minyak mawar. Penghasilan teh mawar atau kelopak bunga kering melalui pengeringan suhu rendah bunga mawar (Rosa rugosa cv. Plena) menghasilkan kondensat yang dipanggil "nira sel bunga mawar" (RFCS). Pelupusan RFCS mewakili pembaziran sumber yang besar kerana kandungan polifenol dan minyak pati mawar yang tinggi, yang mempunyai aktiviti biologi yang sangat tinggi. Di samping itu, pencemaran alam sekitar mungkin disebabkan oleh pelupusan RFCS yang tidak betul kerana ia sukar untuk terurai. Selain itu, minyak pati dan polifenol adalah bahan aktif dalam industri farmaseutikal, kosmetik dan makanan. Pengeringan 1 kg kelopak mawar mentah atau bahan putik bunga boleh menghasilkan kira-kira 0.2 L kondensat. Kira-kira 40,000 kg putik bunga mawar dan 20,000 kg kelopak digunakan setiap kitaran pengeringan gelombang mikro industri dalam Pingyin sahaja. Sehingga kini, tiada kajian telah melaporkan kaedah yang sesuai untuk pelupusan RFCS dan sebatian bioaktif yang terkandung di dalamnya.

Air sisa penyulingan minyak mawar (RODW) adalah satu lagi hasil sampingan penyulingan wap bunga mawar kering untuk menghasilkan minyak mawar. Dalam kajian terdahulu, RODW telah tertumpu untuk menjana residu diperkaya polifenol yang mengandungi sebatian fenolik tidak meruap [5]. Selain itu, pecahan polifenol RODW boleh menghalang tyrosinase cendawan dengan kuat (nilai IC50 0.41 ug/mL) [6]. Oleh itu, polifenol dalam RODW boleh digunakan sebagai bahan bioaktif untuk melegakan hiperpigmentasi.

Bakteria patogen yang berkaitan dengan makanan menyebabkan penyakit bawaan makanan dalam berjuta-juta orang dan bahkan ratusan kematian setiap tahun di Amerika Syarikat sahaja, dan kos yang berkaitan berjumlah kira-kira $ 2.4 bilion [7]. Oleh itu, permintaan yang semakin meningkat untuk agen antimikrob yang sihat, tidak toksik dan berkesan telah memberi inspirasi kepada penyelidikan tentang bahan tambahan makanan pelbagai fungsi yang dihasilkan secara semula jadi. Walaupun minyak mawar terutamanya mengandungi minyak pati yang terkenal dengan aktiviti anti-mikrobnya [8], kesan antimikrob RFC belum disiasat.

Sebatian fenolik dan bahan meruap dalam bunga mempunyai aktiviti biologi yang kuat seperti antioksidan dan kesan perencatan tyrosinase [9]. Pembangunan kaedah tambahan untuk menghalang aktiviti tyrosinase adalah bidang penyelidikan yang aktif dalam industri kosmetik dan makanan berfungsi kerana kesan pemutihan tyrosinase dan keupayaan untuk mengawal keperangan [10, 11]. Antioksidan boleh mengurangkan risiko kebimbangan kesihatan seperti kanser, penuaan, dan aterosklerosis dengan mengurangkan tahap spesies oksigen reaktif (ROS) [12]. Beberapa antioksidan, seperti asid askorbik, juga telah dilaporkan mempunyai kesan pemutihan [11].

Dalam ujian awal kami, aktiviti perencatan antimikrob, antioksidan dan tyrosinase RODW daripada Rosa rugosa Thunb. var. plena Regal telah dinilai [13]. Walau bagaimanapun, tiada laporan dalam literatur yang menyiasat komposisi fitokimia dan aktiviti biologi RFC dari Rosa rugosa cv. Plena. Dalam kajian ini, (1) kandungan jumlah fenolik, flavonoid, kandungan sepenuhnya pepejal dan meruap telah disiasat; (2) aktiviti antibakteria (enam strain) dan anti-kulat (satu strain), aktiviti antioksida dan perencatan tyrosinase setiap sebatian aktif dan RFCS telah diperiksa. Keputusan kami akan membantu meningkatkan nilai mawar dalam bidang produk perubatan dan kosmetik [13–16].

Kaedah

Bahan kimia

Phenylethyl alcohol, -bisabolol, -terpineol, citronellol, miconazole nitrate, hydrochloride tetracycline, menthol, dan camphor telah dibeli daripada J&K Scientific Ltd. (Beijing). Asid kojic, hyperoside, quercetin, asid gallic, kaempferol-3-O-acetylglucosylrhamnoside, dan kaempferol-3-O-glucoside telah dibeli daripada Sigma (Shanghai, China). Medium asas agar darah anaerobik (CDC), medium sup actinomycete (sup GAM), sup infusi jantung otak (BHI), dan agar nutrien diperoleh daripada Suolaibao Biotech Co., Ltd. (Beijing, China). Bahan kimia yang tinggal adalah gred analitik atau kromatografi.

Penyediaan sampel 

RFCS daripada Rosa rugosa Thunb. var. plena Regal diperoleh daripada Fragrant Rose Biological Technology Co., LTD di Pingyin. Sampel telah ditapis melalui 0.42 μm membran mikroturasan sebelum dianalisis. Jumlah kandungan pepejal RFCS dinilai dengan pengeringan beku. Pengenalan Rosa rugosa Thunb. var. plena Regal telah dikenal pasti oleh ahli agronomi kanan Guo dan disahkan dalam sampel baucar (Ser. No. 0712) yang disimpan di Herbarium, Institut Sains Mawar Pingyin.

Analisis HPLC

Kepekatan konstituen polifenol dalam ekstrak ditentukan oleh analisis HPLC dan UV. Radas HPLC ialah sistem LC-20A HPLC (Shimadzu Corporation, Kyoto, Jepun), dan ia dilengkapi dengan lajur Ultrasphere 5 C18 (4.6 mm × 250 mm, Ultrasphere Co., Ltd., Berkshire, UK ). Fasa bergerak ialah elusi kecerunan air (A) dan asetonitril (B) dan telah diprogramkan seperti berikut: bermula dengan 10 peratus B selama 10 minit, 10–25 peratus B antara 15 dan 20 minit, 25–30 peratus B antara 20 dan 25 min, 30–60 peratus B antara 25 dan 50 min, 60–10 peratus B antara 50 dan 51 min, dan 10 peratus B antara 51 dan 55 min. Kadar aliran fasa mudah alih dikekalkan pada 1 mL/min, panjang gelombang pengesan ditetapkan pada 350 nm, ketuhar lajur ditetapkan pada 25 darjah, dan volum suntikan sampel ialah 10 μL.

Keadaan HPLC-ESI-MS

Data spektrometri jisim (MS) pengionan elektrospray (ESI) telah direkodkan pada instrumen Agilent-LC-1100 (Agilent, USA). Keadaan HPLC untuk analisis HPLC-ESI-MS adalah seperti yang diterangkan di atas. Parameter ESI adalah seperti berikut: kadar aliran gas perlanggaran (N2) dikekalkan pada 10 mL/min, ketuhar lajur ialah 25 darjah , data diperoleh dalam mod ion negatif [MH]−, imbasan dijalankan pada m/z 50 –2000, voltan semburan ialah 4.5 kV, voltan kapilari ialah 10 V, dan suhu kapilari ialah 250 darjah . Komponen dalam sampel telah dikenal pasti berdasarkan data spektrum jisim dan masa pengekalannya.

Analisis GC/MS

Juzuk meruap dalam RFCS ditentukan oleh sistem Shimadzu GC/MS model QP2010 Ultra yang dilengkapi dengan Rtx-5MS (30 m × 0.25 mm, ketebalan filem 0.25 μm) tiang kapilari. Program ketuhar adalah seperti berikut: bermula pada 60 darjah , pemanasan hingga 120 darjah pada kadar 1.7 darjah C/min, pemanasan hingga 200 darjah pada 2.5 darjah / min, pemanasan hingga 260 darjah pada kadar 8 darjah / min, dan akhirnya tahan pada 260 darjah selama 2 min. Helium digunakan sebagai gas pembawa, dan kadar alir ialah 1.0 mL/min. Suhu penyuntik dan pengesan dipegang pada 250 darjah dan 280 darjah, masing-masing. Suntikan split dijalankan dalam mod tanpa belah. Suhu sumber ion ialah 250 darjah dan tenaga pengionannya ialah 70 eV. Julat jisim ialah 35–500 Da. Komponen dalam sampel telah dikenal pasti berdasarkan data spektrum jisim dan masa pengekalannya.

Penyediaan lengkung standard

Penyelesaian phenylethyl alcohol (2.23 mg), -bisabolol (2.1 mg), -terpineol (5.23 mg), citronellol (1.52 mg), mentol (1.32 mg), dan camphor disediakan secara berasingan dalam 1 mL asetonitril. Seterusnya, penyelesaian stok telah dicairkan oleh faktor sepuluh ribu hingga satu bilion dengan etil asetat, dan 1 μL setiap sampel dianalisis oleh GS / MS. Larutan asid kojik (1.12 mg), hyperoside (1.07 mg), kuersetin (1.07 mg), asid gallik (1.29 mg), dan kaempferol-3-O-acetylglucosylrhamnoside (1.15 mg) disediakan secara berasingan dalam 1 mL metil alkohol. Penyelesaian stok telah dicairkan oleh faktor 2 dengan metil alkohol, dan 10 μL setiap larutan dianalisis oleh HPLC. Setiap kepekatan penyelesaian kerja dianalisis tiga kali. Lengkung penentukuran telah diplot sebagai kawasan puncak terhadap kepekatan setiap piawai. Kandungan bahan rujukan dalam setiap sampel dikira menggunakan lengkung penentukuran.

Penentuan jumlah fenolik, flavonoid, dan jumlah kandungan pepejal

Jumlah kandungan fenolik RFCS telah dinilai oleh kaedah kolorimetrik Folin-Ciocalteu [17]. Jumlah kandungan bahan fenolik ditentukan dengan perbandingan dengan lengkung piawai asid gallik. Jumlah kandungan flavonoid sampel RFCS telah dinilai oleh HPLC, yang menyediakan jumlah keseluruhan semua sebatian flavonoid yang diuji. 10-mL sampel RFCS telah dikeringkan secara beku untuk menentukan jumlah kandungan pepejal. Setiap penentuan dilakukan dalam tiga kali ganda.

Sifat antioksidan

Aktiviti penghapusan radikal DPPH

Aktiviti antioksidan RFCS dan piawaian telah dinilai oleh aktiviti scavenging radikal DPPH menggunakan versi yang sedikit diubah suai daripada kaedah yang dilaporkan sebelum ini [18]. Secara ringkas, 10 μL aliquot sampel mawar (1000 ug/mL hingga 62.5 ug/mL) dicampur dengan 190 μL 50 peratus etanol yang mengandungi 0.4 mM DPPH dan diinkubasi dalam gelap selama 30 min. Aliquot (100 μL) supernatan dipindahkan ke dalam 96-plat mikro telaga, dan penyerapan setiap satu direkodkan pada 517 nm menggunakan spektrofotometer Spectramax Plus384 UV-Vis (Peranti Molekul, Sunnyvale, California, Amerika Syarikat). Asid askorbik (1000 ug/mL hingga 0.05 ug/mL) digunakan sebagai kawalan positif, dan larutan DPPH tanpa sampel digunakan sebagai kawalan negatif. Nilai IC50, yang mewakili kepekatan sampel mawar dan bahan standard di mana 50 peratus daripada radikal DPPH telah dihalang, telah ditentukan. Ujian telah dilakukan dalam tiga kali ganda, dan peratusan DPPH scavenging dikira menggunakan persamaan berikut.

Penentuan penghapusan radikal ABTS

Ujian ABTS RFCS dilakukan mengikut versi diubah suai kaedah yang dilaporkan sebelum ini [19]. Secara ringkas, larutan stok dijana dengan mencampurkan kuantiti yang sama 7.4 mM ABTS● tambah larutan dan 2.6 mM larutan kalium persulfat, dan campuran itu diinkubasi pada suhu bilik selama 12 jam dalam gelap. Kemudian, larutan itu diseimbangkan dengan 1 mL larutan ABTS● ditambah dengan 50 peratus etanol berfungsi sebagai kawalan positif. Penyerapan larutan pada 734 nm ialah 1.17 ± 0.02 unit. Aliquot (10 μL) sampel mawar (1000 ug/mL hingga 62.5 ug/mL) dicampur dengan 1.0 mL larutan ABTS• tambah yang dicairkan. Campuran dicampur dengan kuat dan diinkubasi pada 30 darjah selama 30 minit. Penyerapan kemudiannya diukur pada 520 nm dengan panjang gelombang pengujaan 734 nm menggunakan spektrofotometer. Piawaian positif ialah Trolox (2000 ug/mL hingga 0.05 ug/mL).

Perencatan( peratus )={(Serapan kosong - Serapan sampel)/Serapan kosong} × 100

Penentuan aktiviti perencatan Tyrosinase

Aktiviti perencatan tyrosinase sampel mawar dan bahan standard ditentukan dengan kaedah spektrofotometri [17]. Pertama, 300 μL aliquot kepekatan berbeza (1000 ug/mL hingga 62.5 ug/mL) setiap sampel telah dicairkan dengan 700 μL 0.175 Penampan natrium fosfat M (pH 6.8), kemudian 1.0 mL larutan 10 mM DOPA dan 1.0 mL cendawan tyrosinase (220 unit/mL) telah ditambah. Etanol (300 μL, 50 peratus ) dan asid kojik (2000 ug/mL hingga 0.1 ug/mL) masing-masing digunakan sebagai rujukan kosong dan piawaian positif. Campuran tindak balas telah dipusingkan dan dikekalkan pada 37 darjah selama 15 minit, dan kemudian maksimum penyerapan dopachrome (ditetapkan pada 479 nm) diukur menggunakan pembaca plat mikro (Peranti Molekul, Sunnyvale, California, Amerika Syarikat). Ujian telah dilakukan dalam tiga kali ganda, dan nilai aktiviti perencatan tyrosinase dikira seperti yang diterangkan di atas.

Sifat antimikrob

Ujian antibakteria dan antikulat

Aktiviti antimikrob diukur dengan kaedah yang diterangkan oleh Xue [20]. Semua strain standard diperoleh daripada Pusat Budaya Mikrobiologi Guangdong (Guangzhou, China). Listeria ivanovii (ATCC 19119) telah dibiakkan dalam BHI, Salmonella enteritidis (ATCC 14028) Staphylococcus aureus (ATCC 25923), dan Escherichia coli (ATCC 25922) telah dibiakkan dalam agar nutrien (NA) selama 24 jam dan pada suhu 37 darjah. Candida albicans (ATCC 10231) telah dibiakkan dalam PHB pada 37 darjah selama 24 jam. Propionibacterium acnes (ATCC 6919) dan Fusobacterium nuclear um (ATCC 10953) telah dibiakkan dalam agar CDC pada 37 darjah selama 48 jam dalam inkubator anaerobik YQX-II (Shanghai, China). Kiraan sel akhir dalam l mL sup adalah kira-kira 106 unit pembentuk koloni (CFU/mL). Larutan 10 mg/mL mikonazol nitrat dan hidroklorida tetrasiklin dalam air digunakan sebagai kawalan positif terhadap kulat dan bakteria, masing-masing.

Penentuan kepekatan perencatan minimum (MIC) dan kepekatan bakteria minimum (MBC) atau kepekatan racun kulat minimum (MFC)

Nilai MIC dan MBC atau MFC ditentukan seperti yang diterangkan sebelum ini oleh Xue. Secara ringkasnya, 100 μL pencairan (kira-kira 100,000 CFU/mL) Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Salmonella enteritidis, Fusobacterium nucleatum dan Candida albicans dalam sup nutrien dan Listeria acne ivanovii dan Propionibacterium brothi ininovii telah pinggan. Kemudian, 100 μL aliquot larutan sebatian ujian ditambah selepas pencairan bersiri dua kali ganda dengan sup nutrien (dari 2 mg/mL hingga 3 ug/mL). Sup dengan 5 peratus (v/v) DMSO digunakan sebagai kawalan. Cawan Petri diinkubasi pada suhu 37 darjah selama 24 jam kecuali Propionibacterium acnes dan Fusobacterium nucleatum, yang diinkubasi pada suhu 37 darjah selama 48 jam. MIC direkodkan sebagai kepekatan terendah bagi sampel yang tidak menunjukkan pertumbuhan yang boleh dikesan. Untuk menentukan nilai MBC atau MFC tanpa pertumbuhan bakteria atau kulat, 10 μL kepekatan sub-perencatan sebatian ujian telah diinkubasi pada plat agar CDC atau GMA selama 24 atau 48 jam. Setiap penentuan dilakukan dalam tiga kali ganda.

Analisis data

Data dibentangkan sebagai min bagi tiga replika ± sisihan piawai. ANOVA sehala dengan ujian julat berbilang Duncan digunakan untuk menganalisis keputusan dengan SPSS 13.0 dan Sigma Plot 10.0, masing-masing, menggunakan komputer (Lenovo, Yangtian B 41) dilengkapi dengan sistem pengendalian Win 7. Nilai p < 0.05 ditentukan sebagai signifikan secara statistik.

Keputusan dan perbincangan

Kandungan bahan meruap

Oleh kerana sampel RFCS mempunyai wangian mawar tertentu, kami menganalisis dan membandingkan komponen meruap bagi ekstrak etil asetatnya. Kandungan komponen meruap ekstrak etil asetat RFCS ditentukan oleh GC/MS dan dianalisis dengan perbandingan dengan empat lengkung standard, dan hasilnya dinyatakan sebagai ng/mL.

Enam komponen utama dikenal pasti secara serentak mengikut masa pengekalan standard dan serpihan ion MS. Kromatogram GC bahan rujukan dalam RFC ditunjukkan dalam Rajah 1. Kandungan setiap unsur dalam setiap sampel dibentangkan dalam Jadual 1. Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 1, enam sebatian telah berjaya diasingkan di bawah atur cara suhu kecerunan. Jumlah kandungan sebatian meruap dalam RFCS adalah lebih kurang 48.21 ± 2.76 ng/mL, dan enam jenis utama sebatian meruap, termasuk phenylethyl alcohol (40.48 ± 2.24 ng/mL), citronellol (7.83 ± {{ 16}}.77 ng/mL), -bisabolol (0.08 ± 0.01 ng/mL) dan phenylethyl acetate (11.20 ± 0.89 ng/mL) telah dikenal pasti (dua puncak belum dikenalpasti. dikenal pasti dan kandungan linalool jarang berlaku). Dalam kajian terdahulu mengenai sebatian meruap dalam RODW, GC-MS, lebih khusus HS-SPME/GC/MS, teknik telah digunakan secara meluas [13, 21-24]. Berbeza dengan kajian terdahulu ini, kajian kami melaporkan kandungan mutlak komponen. Walaupun terdapat pelbagai sebatian meruap, tiada perbezaan dalam komponen dominan. Sebatian meruap utama dalam RFCS ialah alkohol monoterpena (citronellol, linalool, dan phenylethyl alcohol, yang khusus untuk bunga ros kecil). Jenis komponen dominan dalam RFC adalah serupa dengan RODW, tetapi terdapat perbezaan yang ketara dalam kandungan komponen [13]. Satu sebab yang mungkin untuk perbezaan ini ialah kebanyakan komponen yang tidak menentu telah hilang dalam proses pengeringan teh mawar.

Jumlah kandungan fenolik, flavonoid dan pepejal

Flavonoid, masa pengekalannya, dan lengkung penentukuran sebatian piawai dalam RFCS, seperti yang ditentukan menggunakan HPLC, ditunjukkan dalam Rajah 2. Empat sebatian berjaya diasingkan di bawah atur cara suhu kecerunan, seperti ditunjukkan dalam Rajah 2. Kelinearan bagi keluk penentukuran dan pekali regresi flavonoid ditunjukkan dalam Jadual 2. Didapati bahawa sebatian rujukan menunjukkan kelinearan yang baik (R2 Lebih besar daripada atau sama dengan 0.997). RFCS didapati mengandungi tiga komponen utama, iaitu, hyperoside (0.18 ± 0.01 mg/mL), kaempferol{{10}}O -rutinoted (0.12 ± 0.{{20}}1 mg/mL), dan rutin (0.23 ± 0. 01 mg/mL). Jumlah kandungan fenolik dan jumlah kandungan flavonoid ialah 0.31 ± 0.01 mg/mL dan 0.43 ± 0.01 mg/mL, masing-masing. Jumlah kandungan pepejal dalam RFCS ialah 1.45 ± 0.04 mg/mL.

Kajian terdahulu telah melaporkan bahawa sebatian fenolik dan flavonoid yang dominan dalam teh rose rugosa ialah asid gallic, catechin, epicatechin, dan quercetin dan jumlah kandungan polifenol dan kandungan flavonoid dalam ekstrak polifenol teh Rosa rugosa ialah 875.2 mg/g dan 610.3 mg/g. , masing-masing [1]. Di samping itu, rutin, mulflorin B, hyperoside, kaempferol, dan asid ellagic juga ditemui dalam pecahan resin RODW [6]. Tambahan pula, tidak seperti kajian lepas, walaupun kajian kami menggunakan HPLC-MS untuk menentukan sebatian fenol dan flavonoid dalam RODW, hanya satu daripada sebatian dominan, kaempferol-3-O-rutinosid, ditemui dalam kajian ini dan kajian terdahulu [6 , 13]. Tiada sebatian phe nol dikesan dalam RFCS oleh HPLC terutamanya kerana kepekatan fenol dan flavonoid dalam RFCS adalah sangat rendah, dan oleh itu ia tidak dapat dikesan oleh HPLC. Pepejal dalam RFCS itu adalah campuran molekul kecil.

Kapasiti antioksidan 

Jadual 3 membentangkan nilai DPPH IC50 RFCS dan sebatian piawai. Flavonoid dengan nilai IC50 < 1 ug/mL, termasuk hyperoside (nilai IC50 0.695 ± 0.021 ug/mL ), kaempferol-3-O-rutinoside (nilai IC50 0.808 ± 0.024 ug/mL) , rutin (nilai IC50 0.715 ± {{60}}.017 ug/mL) dan luteolin (nilai IC50 0.507 ± 0.015 ug/mL), menunjukkan aktiviti penghapusan radikal DPPH yang lebih kuat daripada RFCS (nilai IC50 1120 ± 42 ug/mL). Sebatian meruap tunggal, seperti linalool, phenylethyl alcohol, citronellol, dan -bisabolol, menunjukkan aktiviti penghapusan radikal yang lemah dengan nilai IC50 > 10,000 ug/mL. Dalam laporan terdahulu, aktiviti antioksidan pelbagai produk semula jadi, termasuk dari mawar, telah dikaitkan dengan kandungan sebatian fenolik [25, 26]. Ujian radikal ABTS juga digunakan untuk menilai aktiviti penghapusan radikal antioksidan penderma hidrogen dan pemecah rantai dalam banyak produk semula jadi [27, 28]. Seperti yang ditunjukkan dalam Jadual. 3, aktiviti penghapusan radikal ABTS bagi sebatian tunggal dan RFCS dinyatakan sebagai ug/mL. Selaras dengan kerja-kerja terdahulu, flavonoid mempamerkan aktiviti anti-radikal dan kapasiti antioksidan yang jauh lebih tinggi daripada sebatian meruap [8, 13]. Dalam kajian ini, keputusan penghapusan ABTS adalah serupa dengan keputusan DPPH; sebatian flavonoid dengan nilai IC50 < 1 ug/mL, termasuk hyperoside (nilai IC50 0.526 ± 0.014 ug/mL), kaempferol-3-O-rutinoside (nilai IC50 0.719 ± 0.016 ug/mL), rutin (nilai IC50 sebanyak 0.621 ± 0.024 ug/mL), dan luteolin (nilai IC50 0.436 ± 0.026 ug/mL), menunjukkan aktiviti penghapusan radikal ABTS yang lebih kuat daripada RFCS (nilai IC50 1430 ± 49 ug/mL). Sebatian meruap tunggal, seperti linalool, phenylethyl alcohol, citronellol dan -bisabolol, menunjukkan aktiviti antiradikal yang lemah (nilai IC50 > 10,000 ug/mL).

Aktiviti perencatan tyrosinase

Tyrosinase adalah enzim yang mengandungi tembaga pelbagai fungsi yang terdapat dalam kulat, mamalia, dan tumbuhan [29]. Tirosinase mempunyai dua aktiviti enzim yang berbeza, iaitu, aktiviti monophenolase dan aktiviti diphenolase [30]. Kami menjalankan kajian awal aktiviti perencatan tyrosinase tyrosinase cendawan. Mengikut ujian ini, RFCS menunjukkan aktiviti perencatan tyrosinase yang kuat dengan nilai IC50 570 ± 21 ug/mL (Jadual 3). Sebatian meruap, termasuk linalool, phenylethyl alcohol, citronellol, dan -bisabolol, juga menunjukkan kesan perencatan tyrosinase yang bergantung kepada dos dengan nilai IC50 730 ± 44 ug/mL, 315 ± 13 ug/mL, 825 ± 31 ug/mL, dan 635 ± 22 ug/mL, masing-masing. Semua sebatian flavonoid, iaitu, hyperoside, kaempferol-3-O-rutinosid, dan juga rutin adalah lebih kuat daripada asid kojik (80 ± 17 ug/mL), dan kesemuanya mempunyai nilai IC50 di bawah 1 ug/mL. Sama seperti laporan oleh Solimine, pecahan RODW yang diperkaya polifenol, yang mengandungi sebatian flavonoid, mempamerkan aktiviti perencatan tyrosinase yang jelas dengan nilai IC50 0.41 ± 0.01 ug/mL [6]. Sementara itu, kesan perencatan tyrosinase RFCS lebih kuat daripada RODW daripada Pingyin [13]. Kandungan flavonoid menyumbang kepada keseluruhan kesan perencatan tyrosinase RODW.

Aktiviti antimikrob

Keputusan kajian aktiviti antimikrob bagi pecahan mawar yang berbeza, RFCS, dan antibiotik standard (tetracycline dan hydrochloride) dibentangkan dalam Jadual 4. F. nucleatum paling terdedah kepada RFCS dan menunjukkan MIC 64 ug/mL dan MBC 250 ug/mL. Nilai MIC untuk RFCS terhadap kedua-dua P. acnes dan S. aureus ialah 125 ug/mL. Nilai MIC terhadap bakteria lain ialah 250 ug/mL. Nilai MIC dan MBC atau MFC bagi sembilan komponen RFCS ditentukan untuk mengenal pasti konstituen yang bertanggungjawab terhadap kesan anti-mikrob RFCS. L. ivanovii dan F. nucleatum didapati paling mudah terdedah kepada -bisabolol, dan mereka menunjukkan nilai MIC 8 ug/mL dan nilai MBC 32 ug/mL terhadap spesies ini (Jadual 4). Selepas -bisabolol, phenylethyl alcohol menunjukkan nilai MIC dan MBC atau MFC yang paling rendah di antara semua juzuk RFCS. Secara keseluruhannya, konstituen meruap memainkan peranan yang lebih penting daripada sebatian flavonoid dalam aktiviti antimikrob RFCS.

Penyiasatan terdahulu mengenai kesan antimikrob dari pelbagai pecahan mawar telah melaporkan hasil yang sama [8, 28, 31]. Minyak pati dan pelbagai ekstrak mawar, termasuk ekstrak akueus, ekstrak etanol, ekstrak kloroform, pecahan etil asetat, dan pecahan butanol, mempamerkan aktiviti antimikrob spektrum luas. Kecuali pecahan etil asetat, minyak pati mawar secara perbandingan lebih aktif terhadap bakteria yang diuji [28]. Minyak mawar mutlak dan pati mengandungi tahap polifenol dan phenylethyl alcohol yang tinggi, yang menghasilkan sifat antimikrob yang luar biasa [8]. Oleh kerana kandungan minyak meruap dalam RODW lebih tinggi daripada RFCS, kesan antimikrob RODW lebih baik daripada RFCS [13]. Pecahan yang diperkaya polifenol daripada teh ru gosa boleh menghalang pengesanan kuorum Escherichia coli dan Pseudomonas aeruginosa dan formatiosignificancen biofilm [1]. Kesan antimikrob beberapa bahan aktif minyak mawar seperti linalool, citronellol, dan geraniol telah disahkan [32, 33]. Sehingga kini, aktiviti antimikrob RFCS R. Fenghua belum dinilai. Keputusan ini secara jelas menyokong fakta bahawa kandungan phenylethyl alcohol yang tinggi dan komponen meruap lain menyumbang kepada aktiviti antimikrob RFCS [34].

Kesimpulan

Kajian kami menunjukkan aktiviti perencatan antioksidan, anti-mikrob dan tyrosinase yang kuat RFCS. Disebabkan oleh aroma phenylethyl alcohol seperti mawar dalam kombinasi dengan aktiviti perencatan tyrosinase dan kesan antimikrobial terhadap S. enteritidis subspesies enteritidis, C. albicans, dan P. acnes, RFCS boleh digunakan sebagai pemutihan kulit dan bahan tambahan penjagaan kulit semulajadi. dalam industri kosmetik. Selain itu, disebabkan aktiviti antioksidan dan kesan antimikrob terhadap L. ivanovii, S. subspesies, E. coli, dan S. aureus, RFCS boleh digunakan sebagai agen pengawet dan antimikrob semulajadi dalam industri makanan dan farmaseutikal.

Ucapan terima kasih

Terima kasih kepada Fragrant Rose Biological Technology Co., LTD di Pingyin kerana menyediakan RFCS.

Pembiayaan

Kerja ini disokong oleh Koleksi dan Inovasi Sumber Penanaman Ginseng (No. 20151FDA31290).

Ketersediaan data dan bahan

Set data yang digunakan dan/atau dianalisis semasa kajian semasa tersedia daripada pengarang yang berkaitan atas permintaan yang munasabah.

Sumbangan penulis

GR, GZ, dan PX menyusun kajian itu. GR dan GZ bertanggungjawab untuk pengumpulan data dan kemasukan data. PX dan XS menganalisis data dan menulis manuskrip. Semua pengarang membaca dan meluluskan manuskrip akhir.

Kelulusan etika dan persetujuan untuk mengambil bahagian

Bab ini tidak mengandungi sebarang kajian dengan peserta manusia atau haiwan yang dilakukan oleh mana-mana pengarang dan tiada persetujuan termaklum yang terlibat.

Persetujuan untuk penerbitan

Tidak berkaitan.

Kepentingan yang bersaing

Penulis mengisytiharkan bahawa mereka tidak mempunyai kepentingan bersaing.

Nota Penerbit

Springer Nature kekal berkecuali tentang tuntutan bidang kuasa dalam peta yang diterbitkan dan gabungan institusi.

Rujukan

1. Zhang JM, Rui X, Wang L, Guan Y, Sun XM, Dong MS. Ekstrak polifenol daripada teh Rosa rugosa menghalang pengesanan kuorum bakteria dan pembentukan biofilm. Kawalan Makanan. 2014;42:125–31.

2. Tursun X, Zhao YX, Talat Z, Xin XL, Tursun A, Abdulla R, Akber AH. Kesan anti-radang ekstrak bunga Rosa rugosa dalam makrofaj RAW264.7 yang dirangsang lipopolysaccharide. Biomol Ther. 2016;24:184–90.

3. Thao NP, Luyen BTT, Tai BH, Yang SY, Jo SH, Cuong NX, Nam NH, Kwon YI, Minh CV, Kim YH. Perencatan sucrase usus tikus terhadap juzuk dari akar Rosa rugosa Thunb. Bioorg Med Chem Lett. 2014;24:1192–6.

4. Lee HJ, Ahn JW, Lee BJ, Moon SG, Seo Y. Aktiviti antioksidan Rosa rugosa. Ksbb J. 2004;19:67–71.

5. Kovacheva N, Rusanov K, Atanassov I. Penanaman industri minyak mawar dan pengeluaran minyak mawar di Bulgaria pada abad ke-21, arah dan cabaran. Persamaan Bioteknol Biotec. 2010;24:1793–8.

6. Solimine J, Garo E, Wedler J, Rusanov K, Fertig O, Hamburger M, Atanassov I, Butterweck V. Bahan perencatan tyrosinase daripada pecahan diperkaya polifenol air sisa penyulingan minyak mawar. Fitoterapia. 2016;108:13–9.

7. Callaway TR, Edrington TS, Anderson RC, Byrd JA, Nisbet DJ. Ekologi mikrob gastrousus dan keselamatan bekalan makanan kita yang berkaitan dengan salmonella. J Anim Sci. 2008;86:163–72.

8. Shohayeb M, Abdel-Hameed ESS, Bazaid SA, Maghrabi I. Aktiviti antibakteria dan antikulat Rosa damascena MILL.Minyak pati, ekstrak kelopak bunga mawar yang berbeza. Global J Pharmac. 2014;8:01–7.

9. Kim S, Lee S, Gwak K, Lee J, Choi I. Kesan pemutihan dan aktiviti antioksidan minyak pati daripada Cryptomeria japonica. Planta Med. 2011;77:1301.

10. Baek SH, Nam IJ, Kwak HS, Kim KC, Lee SH. Kesan anti-melanogenik selular daripada pecahan etil asetat ekstrak biji Euryale ferox melalui jentera degradasi lisosom. Int J Mol Sci. 2015;16:9217–35.

11. Roh JS, Han JY, Kim JH, Hwang JK. Kesan perencatan sebatian aktif yang diasingkan daripada biji safflower (Carthamus tinctorius L.) untuk melanogenesis. Biol Pharm Bull. 2004;27:1976–8.

12. Takaki A, Yamamoto K. Kawalan tekanan oksidatif dalam karsinoma hepatoselular: membantu atau berbahaya? Hepatol J Dunia. 2015;7:968–79.

13. Xue P, Sun XY, Zhang WY, Wang QC, Ren GX. Konstituen fitokimia, antioksidan, antimikrob, aktiviti perencatan Tyrosinase RODW. Teknologi Sains Makanan Moden. 2017;33:105–10.

14. Briehl MM. Oksigen dalam kesihatan manusia dari hidup hingga mati - pendekatan untuk mengajar biologi redoks dan memberi isyarat kepada pelajar siswazah dan perubatan. Bio Redoks. 2015;5:124–39.

15. Ellinsworth DC. Arsenik, oksigen reaktif, dan disfungsi endothelial. J Pharmacol Exp Ther. 2015;353:458–64.

16. Balaguer A, Chisvert A, Salvador A. LC mesra alam untuk penentuan serentak asid askorbik dan derivatifnya dalam kosmetik pemutihan kulit. J Sep Sci. 2008;31:229–36.

17. Fawole OA, Makunga NP, Opara UL. Aktiviti antibakteria, antioksidan dan perencatan tyrosinase ekstrak metanol kulit buah delima. BMC Complement Altern Med. 2012;12:1–11.

18. Park KM, Kwon KM, Lee SH. Penilaian aktiviti antioksidan dan sifat perencatan tyrosinase daripada ekstrak Kultur Miselium. Compl Alt Med Berasaskan Evid. 2015;2015:616298–304.

19. Thaipong K, Boonprakob U, Crosby K. Perbandingan ujian ABTS, DPPH, FRAP, dan ORAC untuk menganggar aktiviti antioksidan daripada ekstrak buah jambu batu. J Kompos Makanan Dubur. 2006;19:669–75.

20. Xue P, Yao Y, Yang XS, Feng J, Ren GX. Peningkatan kesan antimikrob ekstrak ginseng melalui transformasi haba. J Gins Res. 2016;41:180–7.

21. Rusanov KE, Kovacheva NM, Atanassov II. Analisis gc/ms perbandingan bunga mawar dan meruap minyak suling bagi bunga ros yang mengandungi minyak. Persamaan Bioteknol Biotec. 2014;25:2210–6.

22. Koksal N, Saribas R, Kafkas E, Aslancan H, Sadighazadi S. Penentuan sebatian meruap minyak mawar pertama dan air mawar pertama dengan teknik hs-spme/GC/ms. Afr J Tradit Pelengkap Alt Med. 2015;1212:145–50.

23. Mahboubifar M, Shahabipour S, Javidnia K. Penilaian komponen beroksigen berharga dalam air mawar Iran. Intern Int J Chemtech Res. 2014;6:4782–8.

24. Lei G, Wang L, Liu X, Zhang A. Kuantifikasi cepat phenylethyl alcohol dalam air mawar dan profil kimia air mawar dan minyak dan dari China Tenggara. J Liq Chromatogr Rela Tech. 2015;38:823–32.

25. Wong PY, Kitts DD. Kajian tentang sifat antioksida dan antibakteria dwi pasli (Petroselinum crispum) dan ekstrak ketumbar (Coriandrum sativum). Kimia Makanan. 2006;97:505–15.

26. Li L, Ham H, Sung J, Kim Y, Lee H. Aktiviti antioksidan ekstrak metanol daripada empat kultivar mawar yang berbeza. J Food Nutr Res. 2014;2:69–73.

27. Netzel M, Strass G, Bitsch I, Konitz R, Christmann M, Bitsch R. Kesan pemprosesan anggur pada fenolik antioksidan terpilih dalam wain merah. J Makanan Eng. 2003; 56:223–8.

28. Joo SS, Kim YB, Lee DI. Sifat antimikrob dan antioksidan metabolit sekunder daripada bunga mawar putih. Tumbuhan Pathol J. 2010;26:57–62.

29. Saanchez-Ferrer A, Rodríguez-López JN, García-Cánova F, García-Carmona F. Tyrosinase: kajian menyeluruh mekanismenya. Bioch Et Biophy Acta. 1995;1247:1–11.

30. Kim YJ, Uyama H. ​​Tyrosinase inhibitor daripada sumber semula jadi dan sintetik: struktur, mekanisme perencatan dan perspektif untuk masa depan. Sel Mol Life Sci. 2005;62:1707–23.

31. Said BOS, Haddadi-Guemghar H, Boulekbache-Makhlouf L, Rigou P, Remini H, Adjaoud A. Komposisi minyak pati, aktiviti antibakteria dan antioksidan ekstrak penyulingan hidro buah eucalyptus globulus. Produk Tanaman Ind. 2016;89:167–75.

32. Aridogan BC, Baydar H, Kaya S, Demirci M, Mumcum E. Aktiviti antimikrob dan komposisi kimia beberapa minyak pati. Arch Pharm Res. 2002;25:860–4.

33. Gochev V, Wlcek K, Buchbauer G, Stoyanova A, Dobreva A, Schmidt E, Jirovetz L. Penilaian perbandingan aktiviti antimikrob dan komposisi minyak mawar dari pelbagai asal geografi, khususnya minyak mawar Bulgaria. Nat Prod Commun. 2008;3:1063–8.

34. Etschmann MMW, Bluemke W, Sell D, Schrader J. Pengeluaran bioteknologi 2-phenylethanol. Appl Microbiol Biot. 2002;59:1–8.