Pengesanan Tindak Balas Imun Humoral Dan Selular Terhadap Vaksin Anti-SARS‑CoV‑2 BNT162b2 dalam Wanita Menyusu Serta Individu Naif Dan Terdahulu Dijangkiti

Kajian ini meneroka tindak balas humoral dan selular terhadap vaksin mRNA anti-SARS-CoV-2 BNT162b2 dalam wanita menyusu dan individu naif dan seropositif dalam enam bulan pertama selepas vaksinasi. Enam puluh satu sukarelawan yang diberi vaksin dengan dua dos vaksin mRNA BNT162b2 telah didaftarkan dalam kajian ini. ELISA yang dibangunkan secara dalaman telah digunakan untuk pengiraan antibodi khusus RBD{10}} SARS-CoV. Ekspresi penanda permukaan sel dan analisis IFN intraselular telah dijalankan oleh sitometri aliran. Kepekatan IFN-, IL-6 dan TNF ditentukan oleh ELISA. Peningkatan ketara dalam paras antibodi IgG anti-RBD diperhatikan 14 hari selepas dos vaksin pertama (p< 0.0001) in serum and milk. The expression of CD28 on CD4+ T cells was significantly higher compared to baseline (p< 0.05). There was a significant increase (p≤ 0.05) in the B cell lymphocyte subset after revaccination and an increased percentage of CD80+ B cells. The expression of IFN-γ in peripheral blood lymphocytes, CD3+ T cells, and serum was significantly increased (p< 0.05). No significant difference in immune response was observed between breastfeeding women and other study participants. The anti-SARS CoV-2 BNT162b2 mRNA vaccine induced measurable and durable immune response in breastfeeding women and naïve and previously infected individuals. 

manfaat cistanche untuk lelaki-menguatkan sistem imun

Klik di sini untuk melihat produk Cistanche Enhance Immunity

【Minta lebih lanjut】 E-mel:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

1. Pengenalan 

Penyebaran global virus SARS-CoV-2 selepas kes khas pertama didaftarkan pada 31 Dis 2019, di Wuhan, China, membawa kepada wabak Penyakit Koronavirus di seluruh dunia-19 (COVID{{ 5}}), dengan kira-kira 648 juta kes dan 6.6 juta kematian sehingga 18 Dis 20221. Kematian dalam COVID-19 telah dikaitkan dengan pengeluaran berlebihan sitokin proinflamasi seperti IL-6, TNF- dan IL-1, apa yang dipanggil "ribut sitokin", yang mungkin membawa kepada sindrom gangguan pernafasan akut dan kerosakan tisu yang meluas yang mengakibatkan kegagalan pelbagai organ2. Walau bagaimanapun, peningkatan pesat dalam diagnostik, rawatan dan pengenalan vaksinasi dijangka menyumbang kepada penurunan berterusan dalam bilangan individu yang dijangkiti, keperluan untuk dimasukkan ke hospital, dan akhirnya pengurangan kadar kematian. Di Serbia, kes pertama yang didaftarkan secara rasmi berlaku pada 6 Mac 2020 dan vaksinasi telah dimulakan pada 24 Dis 2020. Pada masa ini, terdapat empat vaksin yang tersedia untuk populasi umum, Vero Cell–Inactivated (Sinopharm), Vaxzevria (ChAdOx{{ 22}}S [rekombinan], AstraZeneca), Sputnik V (Gam-COVID-Vac, Gamaleya) dan Comirnaty (BNT162b2, BioNTech–Pfizer). Selain penghasilan antibodi khusus, tindak balas imun yang berkesan terhadap SARS-CoV-2 memerlukan pengaktifan imuniti selular. Komponen imuniti selular, termasuk CD penolong4+ dan sel T CD8+ sitotoksik, sel pembunuh semulajadi (NK) dan sel B, dalam masa beberapa jam dan hari pertama selepas pendedahan kepada virus ini dijangka akan mengurangkan gejala penyakit, mencegah perkembangan penyakit, kemasukan ke hospital dan kematian. Sel T-helper (T) yang diaktifkan secara tidak langsung boleh membunuh sel yang dijangkiti, dan menyokong fungsi sel B dan tindak balas antibodi, dengan menghasilkan interferon- (IFN- )3,4. Telah ditunjukkan bahawa fenotip T1 dikaitkan dengan keterukan penyakit-19 COVID5 yang lebih rendah, oleh itu strategi untuk pembangunan vaksin-19 COVID juga harus mempertimbangkan kemungkinan pengaktifan sel T untuk pengeluaran IFN. Imuniti selular kepada SARS-CoV-2 dilaporkan dapat dikesan sehingga 6 bulan selepas jangkitan pada lebih 90% individu6. Oleh itu, vaksinasi dijangka akan menimbulkan imuniti selular yang boleh diukur yang akan menyumbang kepada pertempuran melawan wabak itu. Keputusan baharu telah menunjukkan bahawa selain mengaktifkan sel B dalam pusat germinal7, vaksin mRNA anti-SARS-CoV-2 harus menjana tindak balas sel T CD khusus protein4+ dan CD{53}} yang meningkat8. Walaupun titer antibodi biasanya berkorelasi dengan keberkesanan vaksin, sel B dan T adalah penting dalam perlindungan apabila terdedah semula kepada antigen virus. Sel B dan T memori ini dijangka dihasilkan oleh vaksin mRNA SARS-CoV-2 dan harus berperanan dalam mengawal replikasi virus, mengehadkan penyebaran virus9. Walaupun tiada kesan buruk yang teruk telah dilaporkan, tindak balas khusus terhadap vaksinasi anti-SARS-CoV-2 dalam wanita hamil dan menyusu serta bayi yang ibunya menerima vaksin semasa penyusuan masih dalam penilaian dan masih menjadi topik kontroversi10,11. Penyelidikan ini bertujuan untuk meneroka buat kali pertama tindak balas humoral dan selular bulanan terhadap vaksin mRNA anti-SARS-CoV-2 BNT162b2 dalam wanita menyusu dan dalam individu naif dan seropositif, dalam enam bulan pertama selepas vaksinasi di Serbia, dan susulan keselamatan jangka panjang yang dilaporkan sendiri selama dua tahun.

Bahan dan kaedah

Reka bentuk kajian dan pengumpulan dan pemprosesan sampel.

Sebanyak 61 sukarelawan (45 SARS-CoV-2 naif, 16 SARS-CoV-2 pulih mengikut laporan yang disahkan PCR) telah didaftarkan dalam kajian dan dipantau dalam tempoh dari Januari hingga 2 November{ {11}}21. Purata masa antara jangkitan semula jadi dan vaksinasi pada individu yang dijangkiti sebelum ini ialah 3.18±0.98 bulan, dengan julat 2-5 bulan. Semua peserta berumur lebih dari 18 tahun dan tidak menunjukkan tanda-tanda jangkitan pernafasan pada masa vaksinasi. Kebanyakan peserta adalah pekerja penjagaan kesihatan dari Institut Onkologi dan Radiologi Serbia (44; 72%). Peserta telah diberi vaksin dengan dua dos vaksin mRNA BNT162b2 (selang 3 minggu). Semua pengambilan darah dilakukan di pusat perubatan yang diluluskan di bawah protokol dan pemerhatian yang ketat. Empat peserta adalah ibu menyusu yang menawarkan diri padanan sampel darah dan susu. Sampel dikumpul pada 6-titik masa: titik 1—prevaksinasi (garis dasar), titik 2–14 hari selepas imunisasi primer, titik 3–1 bulan selepas imunisasi primer, titik 4–2 bulan selepas imunisasi primer, titik 5-3 bulan selepas imunisasi primer, dan titik 6-6 bulan selepas imunisasi primer. 10-20 mL darah periferi telah diambil sampel untuk setiap titik masa, serta 1 mL susu untuk 4 wanita menyusu yang mengambil bahagian. Serum diperoleh daripada darah periferi melalui sentrifugasi serta-merta selepas pengambilan darah dan disimpan pada suhu -20 darjah . Sel mononuklear darah periferal (PBMC) telah diasingkan daripada darah heparin menggunakan Lymphoprep (Nypacon, Oslo, Norway) kecerunan ketumpatan, disentrifugasi pada 500 g selama 40 minit, dan dibasuh tiga kali dalam medium kultur RPMI 1640 (CM) (Sigma, St. Louis). , MO) ditambah dengan 10% serum anak lembu janin (FCS) (Sigma, St. Louis, MO). Selepas mencuci, PBMC segera digunakan untuk analisis immunophenotypic. Kajian itu telah diluluskan oleh Jawatankuasa Etika Institut Onkologi dan Radiologi Serbia (No. 899–01 dari 01.04.2021.), dan semua peserta menandatangani persetujuan termaklum. Semua peserta telah ditemu bual oleh kakitangan perubatan yang berpengalaman. Susulan jangka panjang yang dilaporkan sendiri kesan buruk selepas vaksinasi telah dijalankan selama dua tahun selepas dos vaksin pertama.

cistanche tubulosa-meningkatkan sistem imun

Pengesanan dan kuantifikasi antibodi khusus RBD SARS‑CoV‑2.

Ungkapan RBD protein pancang SARS-CoV-2 (NCBI: YP_009724390, AA319-541) telah dijalankan dalam barisan sel T HEK-293 berikutan prosedur yang diterbitkan sebelum ini12 . Protein rekombinan telah ditulenkan sehingga homogen, dan hasil yang diperoleh ialah 5{{20}}0 mg per L kultur sel. Secara ringkas, protein RBD rekombinan digunakan untuk menyalut plat telaga 96-lemak (Thermo Scientific NUNC-MaxiSorp, USA) pada kepekatan akhir 10 ug/mL (50 μL/telaga) dalam penimbal salutan (15 mM Na2CO3/35 mM NaHCO3, pH 9.5) pada 4 darjah semalaman. Plat telah dibasuh dengan TBS yang mengandungi 0.05% Tween 20 (TBST) dan disekat dengan 1% BSA dalam TBST selama 2 jam pada 37 darjah. Sera yang dicairkan diinkubasi pada 37 darjah selama 1 jam dalam TBST yang mengandungi 0.1% BSA, dan kemudian plat dibasuh dengan TBST. Untuk jumlah penentuan IgG spesifik, antibodi konjugat anti-Manusia-IgG-AP kambing (Novus Biologicals, USA) telah dicairkan 1/1000 dalam larutan penyekat dan ditambah ke dalam telaga. Selepas pengeraman selama 1 jam pada 37 darjah, plat dibasuh 5 kali dengan TBST dan dibangunkan dengan 4-Nitrofenil fosfat selama 1 jam pada 37 darjah. Penyerapan diukur pada 450 nm (A450).

Analisis sitometri aliran.

Imunofenotip permukaan sel sel mononuklear darah periferal (PBMCs) telah dikenal pasti menggunakan kombinasi berikut antibodi monoklonal berlabel secara langsung (mAbs): CD3FITC/CD28PE/CD4PerCP, CD80PE/CD19PerCP, CD80PE/CD14PerCP (Becton Dickinson, San Jose, Amerika Syarikat). Sampel telah disediakan seperti yang diterangkan sebelum ini13 menggunakan 1× 105 PBMC yang baru diasingkan dalam 100 μL RPMI 1640 ditambah dengan 10% Fetal Calf Serum (FCS, Sigma), diinkubasi selama 30 minit pada 4 darjah dengan 20 μL gabungan mAb yang sesuai, dibasuh dua kali dengan salin penampan fosfat ais sejuk (PBS), dan tetap dengan 1% paraformaldehid sebelum analisis FACS. Ekspresi penanda permukaan dikira pada sitometer aliran FACSCalibur (Becton-Dickinson, San Jose, Amerika Syarikat). Sebanyak 10,000–50,000 peristiwa berpagar disahkan sebagai limfosit darah periferal (PBL) dan monosit, mengikut ciri fizikalnya, ciri serakan ke hadapan (FSC) dan ciri serakan sisi (SSC ), telah dikumpulkan setiap sampel dan dianalisis menggunakan perisian CellQUEST. Subset sel dinyatakan sebagai peratusan dalam darah periferi.

Analisis IFN intraselular.

Untuk pewarnaan intraselular IFN 1×, 106 PBMC diinkubasi dengan Phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) (50 ng/mL) ditambah ionomycin (500 ng/mL) selama 4 jam pada 37 darjah dan dengan Brefeldin A (10 ug/mL) selama 3 jam terakhir, seperti yang diterangkan sebelum ini14. Sel pertama kali diwarnakan untuk antigen permukaan dengan antibodi CD3 PerCP, tetap dan selepas permeabilisasi dengan larutan permeabilisasi BD FACS 2 (BD Biosciences) yang diwarnakan untuk anti-IFN- PE (Becton Dickinson). IFN intraselular dinyatakan sebagai peratusan dalam PBL, serta dalam limfosit T CD3.

ELISA.

Kepekatan IFN-, IL-6 dan TNF dalam sera peserta yang disiasat ditentukan oleh kit ELISA tidak bersalut komersial, mengikut arahan pengilang (Invitrogen). Kepekatan sitokin ditentukan pada titik 1 (sebelum vaksinasi), titik 3 (1 bulan selepas imunisasi primer), dan titik 4 (2 bulan selepas imunisasi primer). Secara ringkas, plat ELISA disalut dengan antibodi penangkapan yang sesuai dalam penimbal salutan dan diinkubasi semalaman pada 4 darjah . Pertama, pinggan dibasuh dan disekat dengan Pencair ELISA/ELISAASPOT. Selepas 1 jam pengeraman, plat dibasuh, dan sampel serum dan piawaian ditambah ke telaga. Selepas pengeraman, pencucian, dan penyedutan, mengikut arahan pengilang, larutan antibodi pengesanan ditambahkan pada setiap telaga. Selepas itu, pinggan telah dibasuh dan disedut; larutan avidin-HRP telah ditambah ke dalam telaga dan diinkubasi selama 30 minit. Seterusnya, plat telah dibasuh, dan larutan TMB (3,3′,5,5′-Tetramethylbenzidine) telah ditambahkan pada setiap telaga. Plat diinkubasi selama 15 minit pada suhu bilik, dan tindak balas enzimatik ditamatkan dengan menambah larutan henti. Penyerapan diukur pada 450/520 nm menggunakan pembaca plat Multiskan EX Termo Labsystems15. Analisis statistik. Keputusan / dipersembahkan sebagai nilai individu dengan ralat standard min (SEM). Perbezaan antara nilai dibandingkan menggunakan ujian-t tidak berpasangan dan ujian Wilcoxon signed-rank dan keputusan dianggap signifikan secara statistik jika p<0.05. The analysis was performed using GraphPad Prism 9.0 (GraphPad, La Jolla, CA, USA).

cistanche tubulosa-meningkatkan sistem imun

Keputusan

3.1 Peserta kajian dan pemprosesan serum/susu.

Ciri-ciri peserta kajian dibentangkan dalam Jadual 1. Daripada 61 sukarelawan yang menerima vaksin mRNA anti-SARS-CoV-2 BNT162b2 mRNA, sejumlah 344 sampel serum telah dikumpulkan pada 6 titik masa, bermula dari garis dasar pra-vaksinasi hingga 6 bulan selepas titik vaksinasi pertama. Kebanyakan peserta kajian (97%) melaporkan reaksi buruk tempatan terhadap vaksinasi dalam bentuk sakit lengan/bahu ringan dan keletihan, yang berlangsung selama 1-2 hari. Hanya tiga peserta menerima dos vaksin kedua dengan kelewatan, dua disebabkan kesan buruk ke atas vaksinasi primer (ruam kulit, alahan), dan seorang disebabkan penemuan kehamilan selepas dos pertama. Tiada jangkitan dilaporkan antara kedua-dua dos vaksin. Selepas enam bulan pemantauan, hanya 3 (5%) peserta telah dijangkiti SARS-CoV-2 dan tiada bentuk penyakit serius yang memerlukan kemasukan ke hospital dikesan. Tujuh peserta hamil selepas vaksinasi, seorang 2 minggu selepas dos pertama, seorang 4 bulan selepas dos pertama, dan 5 lebih 12 bulan selepas dos pertama. Susulan jangka panjang yang dilaporkan sendiri mendedahkan tiada kesan buruk berkaitan vaksinasi sehingga dua tahun selepas dos pertama, pada wanita menyusu atau mana-mana peserta kajian lain.

Kuantifikasi antibodi khusus SARS‑CoV‑2 RBD dalam serum dan susu peserta kajian.

Menganalisis tahap antibodi IgG anti-RBD selepas vaksinasi dalam serum, peningkatan ketara dalam tahap IgG anti-RBD telah diperhatikan walaupun 14 hari selepas dos vaksin pertama dalam keseluruhan kumpulan yang dianalisis berbanding tahap IgG sebelum vaksinasi (17.47±51.49 AU /mL lwn. 7828.28±24,157.29 AU/mL, p<0.0001) (Fig. 1a). Te serum levels of anti-RBD IgG continued to rise to 2 months post-vaccination, when a decrease was detected, which lasted up to 6 months, steadily. The levels of anti-RBD IgG antibodies were compared at each time point between naïve and previously infected individuals (Fig. 1b-c), and it was determined that the difference was statistically significant at baseline (point 1), as previously infected individuals had a higher level of antibodies before vaccination (7.23±0.77 AU/mL vs. 54.47±101.40 AU/mL, p<0.01). The difference was statistically significant also in points 2 (3979.48±3277.27 AU/mL vs. 22,581.99±49,570.63 AU/mL, p<0.05), 5 (2369.16±1934.31 AU/ mL vs. 6366.83±6875.85 AU/mL, p<0.01), and 6 (461.96±375.41 AU/mL vs. 766.04±317.35 AU/mL, p<0.05). The decline in antibody levels had the same dynamics in both groups but remained at higher levels in previously infected individuals for up to 6 months. No other analyzed parameters were correlated with a significantly different level of antibodies in serum (age, gender, smoking status). When comparing levels of anti-RBD IgG antibodies in other participants and breastfeeding women (Fig. 1d-e), no significant differences in serum antibody levels were observed in any of the comparisons. Anti-RBD IgG antibodies were also detected in the milk of 4 breastfeeding women (Fig. 1f). In lower levels, they presented with the same dynamics of rising and decline as detected in the serum. Comparing the levels of anti-RBD IgG antibodies in milk at each time point to baseline, (Fig. 1f), it was determined that the difference was statistically significant at points 2 (6.57±0.77 AU/mL vs. 152.13±35.83 AU/ mL, p<0.01) and 6 (6.57±0.77 AU/mL vs. 117.31±25.64 AU/mL, p<0.01).

Jadual 1. Ciri-ciri peserta kajian.

Rajah 1. Tahap antibodi IgG anti-RBD serum dalam (a) keseluruhan kumpulan yang dianalisis, (b naif, c) individu yang dijangkiti sebelum ini, (d) keseluruhan kumpulan tanpa wanita menyusu, (e) wanita menyusu, dan (f) dalam susu ibu menyusu. Keputusan dibentangkan sebagai nilai individu dengan ralat standard min (SEM) bagi tiga replika bebas. Perbezaan antara nilai dibandingkan menggunakan ujian-t tidak berpasangan dan keputusan dianggap signifikan secara statistik jika p<0.05. * p<0.05; **p<0.01; *** p<0.0001.

Analisis sitometrik dan intraselular IFN‑.

Data yang diperolehi oleh analisis fow cytometrik menunjukkan bahawa ekspresi CD28 pada CD4+ sel T dalam darah periferi pada 2 bulan selepas dos vaksin kedua adalah lebih tinggi dengan ketara berbanding dengan nilai sebelum vaksinasi (42.84±5.37% berbanding 37.75 ±5.96%, hlm<0.05, Wilcoxon signed-rank test) (Fig. 2a). Tere was a signifcant increase (p≤0.05, Wilcoxon signed rank test) in the prevalence of B cell lymphocyte subset (CD19+) from 6.87±1.17% to 8.73±1.54%, two months afer revaccination, as well as an increased percentage of CD80+ B cells from 1.72±0.28% to 1.99±0.28% (Fig. 2b). Furthermore, fve weeks afer revaccination, a signifcant (p≤0.05, Wilcoxon signed rank test) increase in the percentage of CD14+CD80+ cells from 1.15±0.38% to 5.87±0.95% was detected in the monocyte gate (Fig. 2c). Te expression of IFN-γ in PBLs, as well as in CD3+ T cells was signifcantly (p < 0.05, Wilcoxon signed rank test) increased at 1 week afer the second vaccine dose (1.84 ± 0.13% in PBL and 1.32 ± 0.10% in CD3+ T cells) compared to pre-vaccination baseline values (0.88 ± 0.13% in PBL and 0.72 ± 0.12% in CD3+ T cells) (Fig. 3a). Furthermore, serum levels of IFN-γ were signifcantly increased in all participants from the initial value of 16.69±0.29 pg/mL to 17.72±0.41 pg/mL (p<0.05, Wilcoxon signed rank test) (Fig. 3b), as well as in naive from 16.55±1.77 pg/mL to 17.26±2.53 pg/mL and in a group and previously infected individuals, from 15.93±2.01 pg/mL to 19.90±4.32 pg/mL at 1 week afer revaccination (Fig. 3c). Tere was no signifcant (p>0.05, Wilcoxon menandatangani ujian peringkat) perbezaan dalam paras serum IL-6 dan TNF- 1 minggu dan lima minggu selepas dos vaksin kedua berbanding dengan nilai pra-vaksinasi secara keseluruhan kumpulan, serta dalam individu naif atau yang dijangkiti sebelum ini (Tambahan Rajah 1a-d).

Perbincangan

Wabak jangkitan pernafasan SARS-CoV-2 mempunyai kesan negatif yang mendalam ke atas pelbagai aspek kehidupan seharian, termasuk isu kemasyarakatan, pendidikan dan kesihatan yang tidak berkaitan langsung dengan penyakit-19 COVID itu sendiri16–18 . Pendekatan vaksinasi global diperlukan untuk melengkapkan langkah menjauhkan diri dalam memerangi penyakit ini, dan banyak kajian meneroka kecekapan dan keberkesanan pelbagai jenis vaksin yang diedarkan di seluruh dunia pada tahun 2021. Di Serbia, hanya laporan sementara mengenai imuniti humoral 2 dan 3 bulan selepas vaksinasi kini tersedia19 ,20 dan adalah mengikut data yang dilaporkan dalam kajian ini. Dalam kohort kami yang dianalisis sehingga 6 bulan selepas vaksinasi, kadar seroconversion 100% dikesan selepas dos vaksin pertama. Hanya 5% peserta terpaksa menerima dos vaksin kedua dengan kelewatan. Tiada laporan jangkitan SARS-CoV{15}} antara dua dos vaksin. Sehingga enam bulan pemantauan, hanya 5% peserta dijangkiti, tanpa memerlukan kemasukan ke hospital. Titer antibodi IgG anti-RBD SARS-CoV-2 adalah jauh lebih tinggi berbanding garis dasar walaupun selepas dos vaksin pertama, yang menyumbang kepada tanggapan bahawa menggunakan vaksin mRNA BNT162b2 ialah pendekatan yang cekap untuk tindak balas humoral pantas terhadap yang asal. strain virus. Tahap serum IgG terus meningkat sehingga 2 bulan selepas vaksinasi apabila penurunan yang berterusan dikesan sehingga tempoh analisis selama 6 bulan. Individu yang dijangkiti sebelum ini didapati mempunyai titer IgG yang lebih tinggi berbanding individu naif sehingga 6 bulan, yang merupakan satu-satunya faktor yang menyumbang kepada tahap antibodi yang berbeza. Antibodi IgG anti-RBD juga dikesan dalam susu wanita menyusu dalam kami dan beberapa kajian terdahulu21, dengan dinamik titer yang sepadan seperti dalam serum. Laporan serupa telah diterbitkan untuk antibodi IgA selepas jangkitan semula jadi22. Memandangkan data terhad pada masa ini tersedia mengenai risiko dan faedah vaksinasi wanita menyusu, keputusan ini menjanjikan berdasarkan kemungkinan imunisasi pasif bayi yang diberi susu ibu, walaupun selepas 6 bulan selepas vaksinasi ibu. Tiada perbezaan ketara dalam paras antibodi serum diperhatikan antara individu naif atau pernah dijangkiti dengan wanita menyusu, mengukuhkan pemerhatian bahawa tindak balas terhadap vaksin anti-SARS-CoV-2 tidak dipengaruhi oleh penyusuan. Pengesyoran semasa menyatakan bahawa vaksinasi harus dipertimbangkan untuk semua individu yang berumur 6 bulan ke atas, termasuk mereka yang hamil atau cuba hamil sekarang atau pada masa hadapan dan menyusukan bayi, tanpa mengira status jangkitan COVID{35}} mereka sebelum ini23. Kajian kami menyumbang kepada beban bukti24 yang menunjukkan bahawa tiada kemudaratan serta-merta untuk wanita menyusu yang menerima vaksin anti-SARS-CoV-2 atau bayi mereka yang menyusu. Juga, tujuh peserta kajian hamil selepas vaksinasi, seorang 2 minggu selepas dos pertama, seorang 4 bulan selepas dos pertama, dan 5 lebih 12 bulan selepas dos pertama. Temu bual susulan jangka panjang yang dijalankan baru-baru ini terhadap peserta kajian mengesahkan bahawa juga tiada kemudaratan yang tidak dijangka bagi wanita menyusu atau bayi mereka yang menyusu, atau mana-mana peserta lain, dua tahun selepas menerima vaksin anti-SARS-CoV-2.

Rajah 2. Peratusan (a) CD3+CD28+ dan CD4+CD28+ limfosit T, (b) CD19+ dan CD{{6 }}CD80+ B limfosit, (c) CD14+CD80+ monosit dalam darah periferi. Keputusan dibentangkan sebagai nilai individu dengan min±ralat piawai min (SEM). Perbezaan antara nilai dibandingkan menggunakan ujian Wilcoxon signed-rank dan keputusan dianggap signifikan secara statistik jika p<0.05. * p<0.05.

Kemunculan varian baharu yang membimbangkan serta kewujudan laporan penurunan pantas dalam paras antibodi anti-SARS CoV-2 selepas jangkitan semula jadi dan pemvaksinan25 telah menimbulkan ketidakpastian tentang peranan komponen imuniti selular. Beberapa kajian yang meneroka tindak balas imunologi individu yang divaksin di Serbia telah melaporkan hanya imuniti humoral19,20. Dalam kajian ini, peningkatan ekspresi reseptor kostimulator CD28 pada CD4+ sel T dan CD80 pada sel B dikesan 2 bulan selepas pemberian dos vaksin kedua. Tambahan pula, ekspresi CD80 pada monosit meningkat 1-sebulan selepas vaksinasi lengkap.

Pembiakan dan pembezaan sel T kepada sel effector atau memori memerlukan pembentangan antigen, stimulasi bersama dan sitokin. Perangsang bersama yang paling dipertahankan bagi sel T ialah pasangan molekul, B7-1 (CD80) dan B7-2 (CD86). Mereka biasanya dinyatakan pada sel pembentang antigen (APC) seperti sel dendritik, sel B, makrofaj, monosit dan sel T. Ekspresi mereka pada monosit juga penting untuk mengaktifkan limfosit dan imuniti adaptif26. Dua reseptor utama yang terdapat pada permukaan limfosit T yang mengikat CD80 dan CD86 ialah CD28, dan protein berkaitan limfosit T sitotoksik 4 (CTLA-4). Mengikat kepada CD28 mengaktifkan limfosit dan seterusnya meningkatkan tindak balas imun27. Keputusan yang diperoleh dalam kajian ini menunjukkan bahawa CD{18}} sel T diaktifkan oleh epitop terbitan antigen S yang dibentangkan pada sel B dan monosit yang diaktifkan 2 bulan selepas dos kedua vaksin. Pelbagai data mencadangkan bahawa sel T CD4 kebanyakannya diaktifkan selepas vaksin mRNA28,29, manakala dalam beberapa kajian kedua-dua sel T CD4 dan CD8 dilaporkan sama dibentangkan dan diaktifkan30. Tan et al. baru-baru ini memerhatikan bahawa pada 3 bulan selepas vaksinasi, kuantiti min sel T khusus Spike adalah bersamaan dengan apa yang telah dikesan dalam pesakit sembuh pada masa yang sama selepas jangkitan SARS-CoV-231. Tambahan pula, komponen imuniti adaptif (kedua-duanya dijangkiti dan divaksinasi sebelum ini) nampaknya dikawal secara bebas6,32,33 dan terdapat kekurangan korelasi antara pengeluaran antibodi antivirus dan kekerapan sel T. Di samping itu, vaksin mRNA semasa menimbulkan tindak balas imun terhad kepada protein Spike. Walau bagaimanapun, peranan berpotensi melindungi sel T khusus untuk protein struktur dan bukan struktur lain juga perlu dinilai34. Idea bahawa vaksin poli antigenik mungkin mempunyai kawalan yang lebih besar terhadap varian virus berbanding vaksin monoantigenik, seperti vaksin berasaskan protein Spike, mungkin mempunyai rasional yang kukuh35,36.

Rajah 3. (a) Ungkapan IFN- dalam semua dan CD3+ T limfosit darah periferi. Tahap serum IFN- dalam (b) keseluruhan kumpulan yang dianalisis, (c) individu naif dan sebelum ini dijangkiti. Keputusan dibentangkan sebagai nilai individu dengan ralat standard min (SEM). Perbezaan antara nilai dibandingkan menggunakan ujian Wilcoxon signed-rank dan keputusan dianggap signifikan secara statistik jika p<0.05. * p<0.05.

Dalam kajian ini peningkatan tahap IFN- dikesan dalam semua limfosit dan dalam CD{1}} sel T 7 hari selepas vaksinasi lengkap. Selain itu, paras IFN- yang meningkat dalam serum semua individu yang divaksinasi telah diperhatikan, kedua-dua dalam SARS-CoV-2 individu naif dan yang dijangkiti sebelum ini 7 hari selepas vaksinasi penuh. Oleh itu, sel T spesifik Spike yang disebabkan oleh vaksin berasaskan mRNA yang banyak menghasilkan IFN- . IFN- ialah sitokin utama dengan sifat antivirus dan telah ditunjukkan menghalang replikasi SARS-CoV-28. Kesan pantas IFN- oleh vaksin BNT162b2 yang ditunjukkan dalam kajian ini menunjukkan tindak balas imun sel T yang menggalakkan terhadap virus SARS-CoV-2. Reaksi imunologi yang dicetuskan oleh SARS-CoV-2 juga termasuk pengeluaran banyak sitokin proinflamasi, terutamanya IL-6 dan TNF- dan perubahan dalam tahapnya mungkin dikaitkan dengan prognosis penyakit itu. Kes COVID yang teruk dan maut-19 telah dilaporkan pada individu yang mengalami peningkatan paras sitokin37. Walau bagaimanapun, dalam kajian ini, tiada perbezaan ketara dalam paras serum IL-6 dan TNF- dikesan 7 hari dan sehingga 1 bulan selepas vaksinasi penuh, yang mungkin terhasil daripada ciri kohort tertentu dan masa pensampelan.

Data ini mewakili laporan pertama yang diterbitkan mengenai imuniti tahan lama dengan mengambil kira kedua-dua komponen humoral dan selular, yang memberi tumpuan kepada wanita yang menyusu. Ini mungkin berguna terutamanya untuk analisis meta masa hadapan ini dan subkumpulan populasi sensitif yang lain, kerana data dari kawasan Balkan mengenai populasi Slavic biasanya hilang daripada usaha multinasional yang lebih besar.

cistanche tubulosa-meningkatkan sistem imun

Kesimpulan

Vaksin mRNA anti-SARS-CoV-2 BNT162b2 menyebabkan tindak balas humoral dan selular yang boleh diukur dan tahan lama dalam wanita menyusu dan kedua-dua individu yang naif dan pernah dijangkiti dalam tempoh enam bulan pertama selepas vaksinasi di Serbia. Tiada kesan buruk yang serius terhadap vaksinasi dilaporkan dan hanya 5% peserta telah dijangkiti SARS-CoV-2 dalam tempoh enam bulan pertama selepas vaksinasi, tanpa memerlukan kemasukan ke hospital. Tiada bahaya yang tidak diduga untuk wanita menyusu atau bayi mereka yang menyusu dilaporkan dua tahun selepas menerima vaksin anti-SARS-CoV-2. Kajian seterusnya dalam bidang ini harus menumpukan pada strategi penyelidikan dan pembangunan vaksin yang mungkin mengekalkan COVID{11}} dan potensi wabak serupa di bawah kawalan yang lebih cepat dan tahan lama. Usaha juga perlu dilaburkan untuk menyediakan garis panduan berasaskan pengetahuan, menangani maklumat salah dengan betul terutamanya di sekeliling subpopulasi sensitif seperti wanita menyusu, memudahkan akses kepada vaksin pada masa yang sangat memerlukan, dan mengukuhkan kepercayaan umum terhadap sains.

manfaat cistanche-menguatkan sistem imun

Rujukan

1. WHO, WHO World Health Organization Coronavirus (COVID{1}}) Papan Pemuka. https://covid19.who.int/ (2022).

2. Hojyo, S. et al. Cara COVID-19 mendorong ribut sitokin dengan kematian yang tinggi. Infamm. Regen. 40, (2020).

3. van Eeden, C., Khan, L., Osman, MS & Tervaert, JWC Disfungsi sel pembunuh semulajadi dan peranannya dalam COVID-19. Int. J. Mol. Sci. 21, 6351 (2020).

4. Sette, A. & Crotty, S. Kekebalan adaptif kepada SARS-CoV-2 dan COVID-19. Sel 184, 861–880 (2021).

5. Chen, G. et al. Ciri klinikal dan imunologi penyakit coronavirus yang teruk dan sederhana 2019. J. Clin. melabur. 130, 2620–2629 (2020).

6. Dan, JM et al. Memori imunologi kepada SARS-CoV-2 dinilai sehingga 8 bulan selepas jangkitan. Sains 80, 371 (2021).

7. Turner, JS et al. Vaksin mRNA SARS-CoV-2 mendorong tindak balas pusat germinal manusia yang berterusan. Nat. 596, 109–113 (2021).

8. Pelukis, MM et al. Induksi pantas sel T CD4+ khusus antigen dikaitkan dengan imuniti humoral dan selular yang diselaraskan kepada vaksinasi mRNA SARS-CoV-2. Kekebalan 54, 2133-2142.e3 (2021).

9. Goel, RR et al. Pemvaksinan mRNA mendorong ingatan imun yang tahan lama kepada SARS-CoV-2 dengan evolusi berterusan kepada varian yang membimbangkan. bioRxiv Prepr. Serv. biol. https://doi.org/10.1101/2021.08.23.457229, (2021)

10. Muyldermans, J., De Weerdt, L., De Brabandere, L., Maertens, K. & Tommelein, E. Kesan vaksinasi kovid-19 ke atas wanita menyusu: Kajian sistematik literatur. Depan. Immunol. 13, 1498 (2022).

11. Golan, Y. et al. Pemvaksinan mRNA Covid-19 dalam laktasi: penilaian kejadian buruk dan antibodi berkaitan vaksin dalam dyad ibu-bayi. Depan. Immunol. 12, 777103 (2021).

12. Arbeitman, CR et al. Perbandingan struktur dan fungsi domain pengikat reseptor lonjakan SARS-CoV-2-yang dihasilkan dalam Pichia pastoris dan sel mamalia. Sci. Rep. 10, 21779 (2020).

13. Konjevic, G. et al. Penilaian kapasiti fungsi sel NK pesakit melanoma dalam model in vitro hubungan sel NK dengan garis sel tumor K562 dan femx. J. Ahli. biol. 250, 507–516 (2017).

14. Konjević, G. et al. Pengurangan pengaktifan CD161 dan peningkatan ekspresi reseptor perencatan CD158a pada sel NK mendasari sitotoksisiti sel NK terjejas pada pesakit dengan pelbagai myeloma. J. Clin. Pathol. https://doi.org/10.1136/jclinpath-2016-203614 (2016).

15. Stanojković, TP et al. Penilaian ekspresi sitokin dan subset sel imun yang beredar sebagai parameter potensi ketoksikan sinaran akut dalam pesakit kanser prostat. Sci. Rep. 10, 19002 (2020).

16. Cavic, M. et al. Meneroka kesan dunia sebenar wabak SARS-CoV-2 pada diagnostik molekul untuk pesakit kanser dan individu berisiko tinggi. Pakar Rev. Mol. Diagnos. 21, 101–107 (2021).

17. Hassan, I., Mukaigawara, M., King, L., Fernandes, G. & Sridhar, D. Hindsight is 2020? Pelajaran dalam tadbir urus kesihatan global setahun selepas pandemik. Nat. Med. 27, 396–400 (2021).

18. Cavic, M., Grahovac, J., Zec, R., Stefanovic, M. & Aleksic, E. Gambaran keseluruhan tahun pertama wabak SARS-CoV-2 di Serbia dan Daerah Pirot. Pirot. Zb. 46, 1–23 (2021).

19. Lijeskić, O. et al. Kajian kohort prospektif tentang kinetik antibodi khusus kepada jangkitan sars-cov-2 dan empat vaksin SARS-CoV-2 yang tersedia di Serbia, dan keberkesanan vaksin: Laporan interim 3-bulan. Vaksin 9, (2021).

20. Petrović, V., Vuković, V., Patić, A., Marković, M. & Ristić, M. Imunogenisiti BNT162b2, BBIBP-CorV dan vaksin Gam-COVID-Vac dan imuniti selepas SARS-CoV semula jadi{{7 }} jangkitan-Satu kajian perbandingan daripada Novi Sad. Serbia. PLoS One 17, e0263468 (2022).

21. Yeo, KT et al. Aktiviti meneutralkan dan mRNA vaksin SARS-CoV-2 Kegigihan dalam serum dan susu ibu selepas vaksinasi BNT162b2 dalam wanita menyusu. Depan. Immunol. 12, (2022).

22. Pace, RM et al. Susu daripada wanita yang didiagnosis dengan COVID-19 tidak mengandungi RNA SARS-CoV-2 tetapi mempunyai tahap antibodi IgA spesifik SARS-CoV-2-yang berterusan. Depan. Immunol. 12, 5566 (2021).

23. CDC, C. untuk vaksin DC dan P. COVID-19 semasa mengandung atau menyusu. https://www.cdc.gov/coronavirus/2019-ncov/vacci nes/recommendations/pregnancy.html (2022).

24. Bethesda (MD), NI CH dan HD Dadah dan pangkalan data laktasi (LactMed). Vaksin COVID-19 (2022).

25. Jo, DH et al. Titer antibodi SARS-CoV-2 menurun dengan pantas dalam masa 4 bulan selepas vaksinasi BNT162b2. Vaksin 9, (2021).

26. Carreno, BM & Collins, M. Te B7 keluarga ligan dan reseptornya: laluan baharu untuk costimulasi dan perencatan tindak balas imun. Annu. Rev. Immunol. 20, 29–53 (2002).

27. Esensten, JH, Helou, YA, Chopra, G., Weiss, A. & Bluestone, JA CD28 costimulation: Dari mekanisme kepada terapi. Kekebalan 44, 973–988 (2016).

28. Geers, D. et al. Varian SARS-CoV-2 yang membimbangkan sebahagiannya melarikan diri daripada tindak balas humoral tetapi bukan tindak balas sel T dalam-19 penderma dan vaksin pemulihan COVID. Sci. Immunol. 6, (2021).

29. Tarke, A. et al. Kesan varian SARS-CoV-2 pada jumlah CD4 + dan CD8 + kereaktifan sel T dalam individu yang dijangkiti atau divaksin. Laporan sel. Med. 2, (2021).

30. Sahin, U. et al. Vaksin BNT162b2 mendorong antibodi peneutralan dan sel T poli-spesifik pada manusia. Nat. 2021 5957868 595, 572–577 (2021).

31. Tan, AT et al. Pengukuran pantas sel T SARS-CoV-2 dalam darah keseluruhan daripada individu yang divaksin dan dijangkiti secara semula jadi. J. Clin. melabur. 131, (2021).

32. Chia, WN et al. Dinamik SARS-CoV-2 meneutralkan tindak balas antibodi dan tempoh imuniti: Kajian membujur. Mikrob Te Lancet 2, e240–e249 (2021).

33. Reynolds, CJ et al. Tindak balas antibodi peneutral dan sel T yang tidak serasi dalam jangkitan SARS-CoV-2 tanpa gejala dan ringan. Sci. Immunol. 5, (2020).

34. Lopandić, Z. et al. IgM dan IgG Imunoreaktiviti protein m rekombinan SARS-CoV-2. Int. J. Mol. Sci. 22, (2021).

35. Altmann, DM, Boyton, RJ & Beale, R. Kekebalan kepada varian SARS-CoV-2 yang membimbangkan. Sains 371, 1103–1104 (2021).

36. Matchett, KAMI et al. Teknologi canggih: Vaksin nukleokapsid menimbulkan imuniti perlindungan SARS-CoV{3}} bebas lonjakan. J. Immunol. 207, 376–379 (2021).

37. Costela-Ruiz, VJ, Illescas-Montes, R., Puerta-Puerta, JM, Ruiz, C. & Melguizo-Rodríguez, L. SARS-CoV-2 jangkitan: Peranan sitokin dalam COVID{{ 7}} penyakit. Faktor Pertumbuhan Cytokine Rev. 54, 62 (2020).