Persatuan Gen Sitokin Dengan Penilaian Laporan Kendiri Mengenai Keletihan Pagi Dan Petang dalam Pesakit Onkologi Dan Penjaga Keluarga Mereka

Abstrak

Objektif:Ditanam secara liarcistanche(cWG), dipanggilRoucongrong, telah digunakan secara klinikal pada pesakit dengankeletihan kronikdi Korea. Sedikit yang diketahui tentang kesan daripadayangcistanchekomponen suling (meruap) yang dihasilkansemasa penyejatan. Baru-baru ini, kami mula-mula mengenal pasti satukomponen utama daripada ekstrak suling cWG, panaxydol, dengan menggunakan spektrometri jisim. Walau bagaimanapun, fungsisifat ekstrak suling cWG dan panaxydol kekalsukar difahami. Oleh itu, kajian ini dinilaikesan ekstrak suling cWG atau panaxydol pada senaman-didorongkeletihandalam tikus.

Kaedah: Keletihandisebabkan oleh berenang paksadan masa imobilitas dianalisis pada lelakiTikus Sprague-Dawley. Haiwan itu menerima secara intraperitonealsama ada kenderaan, ekstrak suling cWG atau panaxydol 10 min sebelum permulaan berenang paksaujian (FST) sekali sehari selama 5 hari. Selepas FST pada hari ke-5,kami juga menganalisis tahap biokimia yang berkaitan dengan keletihan termasuknitrogen urea darah (BUN), asid laktat (LAC),dan laktat dehidrogenase (LDH) dalam serum dan parasglikogen dalam hati dan otot soleus.

Keputusan:Masa berenang paksa dalam cWG disulingkumpulan yang dirawat ekstrak (0.6 mL/kg) adalah ketaralebih lama daripada kumpulan kawalan pada hari ke-4 dan5. Kumpulan yang dirawat Panaxydol (0.1 dan 0.25 mg/kg)menunjukkan prestasi yang dipertingkatkan dengan ketara dalamberenang paksa, berbanding dengan kawalan. Selain itu, apenurunan ketara dalam paras LDH serum didapati dalamkumpulan yang dirawat panaxydol, sementara tiada selang selidalam tahap serum BUN dan LAC dan glikogen dalamhati atau otot soleus.

Kesimpulan:Kajian ini menunjukkan cWGekstrak suling dan komponen aktifnya panaxydol mempunyaisatu fungsi daripadaanti-keletihan.  

Klik di sini untuk mengetahui maklumat lanjut tentang fungsi anti-keletihan cistanche

1. Pengenalan

Keletihanadalah perasaan keletihan fizikal atau mental yang melampaudan keletihan sebagai salah satu fisiologi biasatindak balas akibat tekanan yang teruk, fizikal yang keras ataukerja mental. Keletihan mungkin dikaitkan dengan banyak gangguandan terutamanya disebabkan oleh kehabisan sumber tenagayang termasuk pengumpulan hasil akhir daripadakeletihan, pengurangan penggunaan glikogen hati [1].Khususnya, keletihan fizikal adalah ketidakupayaan sementaraotot untuk mengekalkan prestasi fizikal yang optimum dan adalahdisebabkan oleh senaman fizikal yang sengit selalunya membawa kepada akemerosotan dalam prestasi, menyebabkan penurunan ototkuasa dan ketahanan dan dalam fungsi mental [2].cistanchemerupakan herba perubatan yang terkenal dan telahdigunakan secara tradisional sebagai ubat untuk anti-tumor [3], anti-oksida[4], anti-radang [5] dan hipoglisemikhartanah [6]. cistanche juga telah digunakan untuk meningkatkankekuatan fizikal, terutamanya pada pesakit yang menderitadaripada keletihan yang teruk [7, 8] dan keletihan yang berkaitan dengan kanser [9].Komponen cistanche seperti polisakarida cistancheatau oligopeptida molekul kecil yang diasingkan daripada Panaxcistanchetelah menunjukkan aktiviti anti-keletihan dan kesannyapada biomarker fisiologi untuk keletihan [10] dan dihasilkankesan anti-keletihan dengan meningkatkan berenang paksamasa dan meningkatkan dehidrogenase laktik (LDH)dan tahap glikogen dalam hati tikus [11].Sebagai sejenis cistanche, cistanche liar Korea (SanSam,cistanche gunung) secara semula jadi ditanam di pergunungan yang dalamdan agak jarang dan mahal di Korea. Untuk menirucistanches yang ditanam secara semula jadi, cistanches sering ditanamdi pergunungan dalam dan dikelaskan kepada SanYangSam (cistancheditanam di pergunungan) dan SanYangSanSam (liarcistancheditanam di pergunungan atau ditanam cistanche liar,cWG), bergantung kepada jenis biji cistanche. Mentah atauekstrak suling daripada cWG (dipanggil sebagai SanYangSanSam)dilaporkan mempunyai kesan anti-tumor atau -kanser [12,13]. Terutamanya, ekstrak suling daripada cWG telahdigunakan secara klinikal untuk suntikan ke dalam titik akupunktur dalamKorea [13] dan juga telah menunjukkan untuk mengurangkan keradangan dalammodel tikus yang disebabkan oleh lipopolysaccharide (LPS) [14] dan oksidatiftekanan pada tikus obes [15]. Manakala eksperimen sebelumnyakajian telah menyokong keberkesanan cWGekstrak suling, komponen aktif cWG sulingekstrak dan kesan biologinya sebahagian besarnya tidak diketahui.Baru-baru ini, dengan menggunakan kromatografi cecair jisim tandemspektrometri dan pecutan ortogonal quadrupolespektrometri jisim masa penerbangan, kami mendapati bahawa cWG disulingekstrak mengandungi panaxydol sebagai komponen utamadan tahap panaxydol adalah kira-kira 30 kali lebih tinggi daripadacistanche yang ditanam di gunung (SanYangSam)[16]. Oleh kerana ekstrak suling cWG telah lama digunakan secara klinikaluntuk meningkatkan tenaga fizikal pada pesakit kansermengalami keletihan, ekstrak suling cWG dan utamanyakomponen panaxydol mungkin memainkan peranan dalam mengurangkan keletihan.Oleh itu, kajian ini direka untuk menilai anti-keletihansifat ekstrak suling cWG dan aktifnyakomponen panaxydol dalam tikus dengan melakukan paksaanujian renang dan mengukur biomarker berkaitan keletihan[17] seperti nitrogen urea darah (BUN), asid laktik (LAC),LDH, dan glikogen dalam hati dan otot tikus.

2. Bahan-bahan dan cara-cara

2.1. Haiwan

Tikus jantan Sprague-Dawley dibeli dari Daehan animal Co. (Seoul, Korea Selatan) seberat 270-320 gdan ditempatkan dalam kumpulan 2-3 haiwan setiap sangkar di asuhu bilik 22 ± 2 darjah dengan kitaran 12 jam terang-gelapdan menerima makanan dan air secara ad libitum. Semua eksperimenprosedur telah dijalankan mengikut NationalGaris panduan Institut Kesihatan untuk penjagaan dan penggunaan makmalhaiwan dan diluluskan oleh Haiwan InstitusiJawatankuasa Penjagaan dan Penggunaan di Universiti Daegu Haany danUniversiti Daejeon.

2.2. Reka bentuk eksperimen

Dua eksperimen berasingan telah dijalankan untuk mengujihipotesis bahawa sifat anti-keletihan cWG disulingekstrak dan komponen aktifnya panaxydol dalam tikus olehmelakukan ujian renang paksa dan mengukur keletihanbiomarker yang berkaitan seperti BUN, LAC, LDH, danglikogen dalam hati dan otot tikus. Percubaan pertamatelah dijalankan untuk menentukan sama ada ekstrak suling cWGmenjejaskan masa berenang paksa dan tahap glukosa dalam hatidan otot soleus. Oleh itu, tikus dibahagikan kepada dua eksperimenkumpulan: kumpulan yang dirawat dengan garam (n=6) dan cWG diskumpulan yang dirawat ekstrak digarap (n=6). Percubaan keduatelah dijalankan untuk melihat sama ada panaxydol, komponen aktifcWG, mengubah masa berenang paksa, biokimiatahap seperti BUN, LAC, dan LDH dalam serum dan tahapglikogen dalam hati dan otot soleus. Untuk eksperimen ini,tikus dibahagikan kepada tiga kumpulan eksperimen: kenderaan(n {{0}}), panaxydol (0.1 mg/kg)-dirawat (n=5), dan panaxkumpulan ydol (0.25 mg/kg)-dirawat (n=5).

2.3. Dadah dan bahan kimia

Cistanche liar yang ditanam (cWG, ChonBangNongSan Inc.,Chungnam, Korea), kira-kira 8–10 tahun, telah digunakan. ThecWG yang utuh telah dibasuh, dikeringkan dan dihancurkan sehingga sangat halusserbuk (min saiz zarah, 7.5 μm) menggunakan kilang turbo. Yang disulingekstrak daripada cWC (SanYangSanSam, 20 ml/botol)telah dibuat di Institut Penyelidikan Farmakopunktur Korea(KPRI) seperti yang diterangkan sebelum ini [16] 16]. spesimen baucar(#CWG-2015-03-DE) telah didepositkan diKPRI. Secara ringkas, cistanche liar itu dibasuh dengan sulingair untuk membuang serpihan dan bahan cemar. Empat gramcistanche liar kering dicampur dengan 250 mL air sulingdalam plask bulat dan dipanaskan pada 80ºC melalui gelung tertutupsistem pengekstrakan (mesin KyungSeo Com., Incheon,Korea)(Gamb. 1A). Semasa pemanasan 24 jam, wap telah terpeluwapdengan menyejukkan dalam sistem gelung tertutup dan cWG disulingekstrak kira-kira 200 mL diperolehi. Panadol tadidibeli daripada Chengdu Biopurify Phytochemicals Ltd(Chengdu, China). Tahap BUN, LDH, LAC, dan glikogentelah ditentukan dengan IDEXX VetTest Chemistry analyzer (Makmal IDEXX, Westbrook, Maine, Amerika Syarikat). Lain-lainbahan kimia telah dibeli daripada Sigma Aldrich (St. Louis,MO, Amerika Syarikat). Panaxydol telah dibubarkan dalam 100 peratus etanol dankemudian dicairkan kepada garam sebelum digunakan. Kenderaan, ekstrak suling cWG({{0}}}.6 mL/kg) atau panaxydol (0.1 dan 0.25 mg/kg, sekalihari) diberikan secara intraperitoneal (ip) 10 minit sebelum itukepada permulaan ujian renang paksa (FST) selama 5 hari.

2.4. Ujian renang paksa

Ujian renang daya (FST) telah dijalankan seperti yang diterangkansebelum ini [1] . Secara ringkas, tikus diletakkan secara individuke dalam bekas plastik (30 x 30 x 80 cm) berisi air(25 ± 5 darjah ) hingga kedalaman 60 cm. Bar kaca (10 peratus daripada badan tikusberat) telah dilekatkan pada bahagian proksimal ekor tikus.Jumlah masa berenang direkodkan apabila fizikalkekuatan tikus telah habis dan ia tidak boleh naik kepermukaan selama lebih daripada 10 saat.

2.5. Pengukuran biokimia darahparameter

Selepas FST terakhir pada hari ke-5, sampel darah (500 μL) dikumpulkandari aorta abdomen di bawah anestesia isoflurane(2 peratus ) dan dipindahkan ke dalam tiub berheparin. Serumdiperoleh dengan sentrifugasi pada 3000 rpm pada 4 darjah selama 10min dan disimpan pada −80 darjah sehingga analisis selanjutnya. Peringkat daripadaserum BUN, LAC, dan LDH ditentukan pada 562 nmmenggunakan Penganalisis kimia slaid kering (VetTest 8008 serumpenganalisis kimia dan slaid reagen VetTest, IDEXX LaboratoriesInc, Westbrook,. Maine, Amerika Syarikat) menurutarahan pengeluar.

2.6. Pengukuran kandungan glikogen tisu

Tikus telah dieutanasi di bawah 4~5 peratus anestesia isofluraneselepas pengambilan sampel darah (2 peratus isoflurane) untuk mendapatkanhati dan tisu otot soleus. Tahap glikogen dalam hatidan mucles soleus diukur dengan menggunakan kaedahditerangkan sebelum ini [18] Secara ringkas, selepas berkorban untukpengumpulan darah, hati dan otot soleus dengan cepat dibedahkeluar, beku dalam nitrogen cecair, dan disimpan pada -80 darjahsehingga digunakan. Setiap sampel (20 mg setiap tisu) telah direbus dalam 2.0M HCl pada 100 darjah selama 1 jam dan dihomogenkan. Selepas sentrifugasi, sampel telah dineutralkan dengan 2.0 M NaOH dandisentrifugasi semula pada 3000 rpm selama 10 min. Tahap glikogentelah ditentukan pada 562 nm menggunakan Penganalisis kimiaUjian Vet 8008.

2.7. Analisis statistik

Data telah dijalankan menggunakan perisian SigmaStat 3 (Systat Software, Inc, San Jose, CA, USA) dan dibentangkan sebagaimin ± SEM (ralat piawai min). Analisis statistiktelah dianalisis dengan ujian-t, analisis berulang sehala atau dua halavarians (ANOVA), diikuti dengan ujian post hoc menggunakanKaedah Tukey. Kepentingan statistik telah dipertimbangkan pada(*) P< 0.05 dan (**)P< 0.01. 

3. Keputusan

3.1. Kesan ekstrak suling cWG padaujian renang paksa pada tikus

Kesan ekstrak suling cWG pada berenang paksamasa tikus ditunjukkan dalam Rajah.1. Renang paksamasa kumpulan yang dirawat ekstrak suling cWG pada hari ke-4dan 5 adalah lebih lama daripada kawalan garamkumpulan (Rajah 1B, ujian-t berulang; rawatanF(1,20) = 10.384, P  = 0.023; masaF(4,20) = 20.165, P< 0.001;=""> F(4,20) =  2.609, P = 0.066).  3.2. Kesan ekstrak suling cWG pada glikogendalam hati atau otot soleus tikus.Untuk menilai sama ada kesan ekstrak suling cWGberenang paksa dikaitkan dengan tahap glikogen,tahap glikogen dianggarkan dalam hati dan otot soleustikus selepas FST pada hari ke-5. Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 2A dan 2B,Ekstrak suling cWG tidak menjejaskan tahap glikogen dalamhati (Gamb. 2A: t-ujian,F(1,10) = 0.056, P= 0.82) atau otot soleus

3.3. Kesan panaxydol pada terpaksaujian renang pada tikus

 Kami menguji kesan panaxydol, com polyacetylenicpon ditemui dalamPanax cistanche, pada FST pada tikus. Seperti yang ditunjukkandalam Rajah 3B, kumpulan yang dirawat panaxydol (0.1 atau 0.25 mg/kg)meningkat dengan ketara masa berenang paksa berbandingkepada kumpulan kawalan kenderaan pada hari ke-4 dan ke-5 (dua hala, merawatment F(2,32){{0}}.997, P < 0.001;="" masa="">(4,32)= 120.756, P <0.001; interaksi F(8,32) = 1.531, P = 0.186). 3.4. Kesan panaxydol pada bio serumparameter kimia tikusTahap biomarker serum yang berkaitan dengan keletihan, BUN, LAC,dan LDH diukur selepas FST lepas. Panaxydol telahtiada kesan pada tahap BUN serum (Rajah 4A; sehala, F(2,12) =  0.5842, P=0.0573) atau LAC (Rajah 4B; sehala, F(2,12) = 0.6488,  P=0.5401). Walau bagaimanapun, tahap LDH telah meningkat secara paksaberenang, yang telah dilemahkan dengan ketara oleh rawatanment dengan panaxydol pada dos 0.1 mg/kg selama 5 hari (Gamb.4C; sehala, F(2,10) {{0}}.65, P=0.003, P < 0.01 lwn. kenderaan).

3.5. Kesan panaxydol pada glikogen conkhemah di hati dan tisu otot soleus selepasberenang paksaKami juga mengukur tahap glikogen dalam hati dan tunggalotot tikus selepas FST pada hari ke-5. Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah.5A dan 5B, panaxydol tidak mempunyai kesan yang ketara ke atas tahapglikogen dalam hati (Rajah 5A: sehala, F(2,12) = 0.256, P = 0.78)  atau otot soleus (Rajah 5B: sehala, F(2,12) = 0.715, P = 0.51) berbanding kumpulan kawalan kenderaan.

4. Perbincangan

cistanche mempunyai pelbagai sifat farmaseutikal sepertianti-tumor [3], anti-oksidan [4] dan aktiviti anti-radang[5] dan pemulihan memori terjejas [19]. Panaxberhala, sebatian ployacetylene yang diasingkan daripada cistanche,telah menunjukkan agen anti-kanser yang berpotensi [20], pelindungkesan pada neurodegenerasi dalam neuron kortikal [21], danmeniru kesan faktor pertumbuhan saraf dalam sel PC 12[22] . Beberapa kajian juga telah membuktikan keberkesanancistancheatau komponen aktif utama cistanche, sepertiginsenosides Rb1 dan oligopeptida molekul kecil padakeletihan senaman atau keletihan yang berkaitan dengan kanser [11, 23, 24]. Palingkajian lepas telah menggunakan ekstrak cistanche akueusekstrak mentah yang dikumpul melalui pengekstrakan/kondensasilangkah: akar cistanche direndam dalam air atau metanol,ditapis dan dipekatkan dengan mengeluarkan air yang berlebihan di bawahvakum. Sebaliknya, sedikit yang diketahui tentang kesankomponen suling cistanche (meruap) yang dihasilkan durdalam pengewapan.Kajian ini menunjukkan buat kali pertama, untuk pengetahuan kami, bahawa ekstrak suling daripada cistanche dan komponen aktifnyapanaxidol mempunyai aktiviti anti-keletihan dalam FST tikusmodel. Keletihan adalah salah satu fisiologi yang paling biasatindak balas berlaku daripada senaman, kemurungan, penuaan, kanser, multiple sclerosis, dan penyakit Parkinson. FST ialahmodel yang paling sah untuk penilaian aktiviti anti-keletihandaripada pelbagai jenis makanan atau sebatian tumbuhan [2, 25-27] 25-27]. Selaras dengan kajian terdahulu [28] 28], keputusan kamimendedahkan bahawa ekstrak suling cWG meningkatkan daya paksamasa berenang berbanding kumpulan kawalan salin. Dalam iklandition, panaxidol, komponen utama cWG, juga meningkatmasa berenang paksa. Keputusan ini menunjukkanbahawa kesan anti-keletihan cistanche mungkin dikaitkan denganaktiviti panaxidol dalam paksaan renang yang disebabkankeletihan.Keletihan yang disebabkan oleh senaman seperti boleh berenang paksadinilai dengan penunjuk biokimia, termasuk BUN,Tahap LAC dan LDH dalam darah. Oleh itu, kami mengukur tahapserum BUN, LAC, dan LDH pada tikus yang diberikan secara paksaberenang dan rawatan panaxydol. Nitrogen urea darahialah produk metabolik protein dan asid amino, digunakanpenunjuk penting untuk menilai ketahanan senamandan status keletihan [29]. Asid laktat dianggap sebagai utamapenunjuk keletihan otot. Senaman yang sengit membawa kepada pengumpulanlaktat yang mengakibatkan pH darah rendahdan otot dan akibat penjanaan keletihan [30] 30].Laktat dehidrogenase ialah indeks kerosakan otot danmemangkinkan pertukaran antara piruvat dan NADH tambah kepadaL-laktat dalam sel otot. Dalam kajian kami sekarang, diulangrawatan dengan panaxydol pada dos 0.1 mg/kg dengan ketaramelemahkan tahap peningkatan LDH serum (utamaenzim untuk penghasilan laktat) dalam tikus berenang paksamanakala paras serum BUN atau LAC tidak berubah. Iamungkin mencadangkan peningkatan prestasi dalam renang paksadikaitkan dengan LDH. Walau bagaimanapun, ia dikehendakiterokai bagaimana panaxydol boleh mengurangkan aktiviti LDH dankerosakan otot. Glikogen, yang merupakan bentuk simpanan utamaglukosa, dalam hati atau otot juga merupakan indeks keletihan [31]31]. Glikogen dalam hati melengkapkan penggunaanglukosa darah untuk mengekalkan glukosa darah dalam fisiologijulat dan keletihan berlaku apabila glikogen hepatik kebanyakannyadigunakan [32, 33]. Dalam kajian kami sekarang, tahap glikogen dalamhati atau otot soleus tikus yang dirawat cWG- atau panaxydoltidak diubah. Diambil bersama, penemuan ini mencadangkan bahawapanaxydol boleh meningkatkan keletihan fizikal melalui peraturantahap LDH serum dalam tikus berenang paksa.Sebagai mekanisme lain yang mungkin, yanganti-keletihankesan daripadapanaxydol boleh mengawal selia melalui pengecilan tekanan oksidatif.Adalah diketahui bahawa tekanan oksidatif berlaku berikutan FST danseterusnya boleh membawa kepada patologi dan gejala klinikalkeletihan [34-36]. Bao L et al., telah menunjukkan bahawa cistanchemeningkatkan fungsi mitokondria dan menghalangtekanan oksidatif dalam otot rangka tikus selepas FSTyang mungkin merupakan laluan tindakannyaanti-keletihankesan[11]. Oleh itu, panaxydol mungkin mempunyai kesan anti-keletihandengan mengurangkan tahap penunjuk tegasan oksidatif sepertisebagai superoksida dismutase atau malondialdehid dalam paksamodel renang. Kajian lanjut perlu dilakukan untukmengesahkan mekanisme yang mendasarianti-keletihankesandaripada panaxydol pada keletihan yang disebabkan oleh berenang paksa.

5. Kesimpulan

Dalam kajian ini, masa berenang paksa dalam cWG diskumpulan yang dirawat ekstrak diusahakan adalah lebih lama daripadakumpulan kawalan pada hari 4 dan 5. Panaxydol-treatedkumpulan menunjukkan prestasi yang dipertingkatkan dengan ketara dalamberenang paksa, berbanding dengan kawalan. Di samping itu, yang signifikanpenurunan paras LDH serum didapati dalam panadol-kumpulan yang dirawat, sementara tiada selang seli dalam levserum BUN dan LAC dan glikogen dalam hati atau soleusotot. Diambil keputusan ini, ekstrak suling ditanamcistanche liar dan hasil panaxydol komponen aktifnyaaktiviti anti-keletihan dengan mengurangkan aktiviti LDH dalam tikusmodel renang paksa. beberapa triterpenoid pentacyclic.