Pengenalpastian Komprehensif Dan Analisis Kimia Senegalensis Cistanche Liar di Kenya: Morfologi, Pengekodan Bar DNA, Dan Fitokimia

2. Pengenalpastian Molekul melalui Kod Bar DNA

Pengenalpastian molekul liarSampel cistanche dari Kenyadan tumbuhan perumah mereka dilakukan menggunakan dua pasang primer, ITS2F/ITS3R dan psbA-trnH [11]. Kedua-dua sampel Cistanche liar Kenya telah berjaya dipadankan sebagaiCistanche tubulosadalam sistem barcoding DNA Perubatan Tradisional Cina, dengan persamaan urutan 96.7%. Dalam pangkalan data GenBank, jujukan memadankan berbilang spesies, menunjukkan 100% persamaan denganCistanche senegalensis dan lebih 98% persamaan denganCistanche tubulosa. Tumbuhan perumah tidak sepadan dengan sebarang rekod dalam sistem barkod DNA Perubatan Tradisional Cina tetapi mempamerkan persamaan yang tinggi (97.55%) dengan spesies AmaranthaceaeSericocokopsis hildebrandtiidalam GenBank.

Untuk menjelaskan lebih lanjut hubungan, yang paling serupaCistanche senegalensisJujukan psbA-trnH (Aksesi: LT715293) dan jujukan ITS2 (Aksesi: LT715483) telah dimuat turun daripada GenBank, bersama-sama dengan jujukan ITS2 dan psbA bagi empat spesies Cistanche Cina. Pokok filogenetik telah dibina menggunakan perisian MEGA X (lihat Rajah 3). Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 3, kelompok sampel Cistanche liar Kenya (K1, K2) di cawangan yang sama sepertiCistanche senegalensis, dengan jarak genetik 0–0.0016, menunjukkan ia mungkin tergolong dalam spesies yang sama. Sebaliknya, mereka jatuh ke dalam cawangan yang berbeza daripada empat spesies Cistanche Cina, menunjukkan perbezaan interspesies yang ketara. Secara perbandingan, jarak filogenetik antara K1, K2 danCistanche tubulosaadalah agak dekat (0.0089–0.0098), manakala jarak keCistanche deserticolaadalah jauh lebih besar (0.1193–0.2961). Ini menunjukkan bahawa Cistanche liar Kenya lebih berkait rapat denganCistanche tubulosa, membayangkan keturunan yang dikongsi tetapi perbezaan seterusnya disebabkan oleh tekanan persekitaran dan proses evolusi yang berbeza.

 

 

Cistanche tubulosa

3. Penentuan Kandungan Bahan Aktif dan Analisis Cap Jari dalam Sampel Cistanche Berbeza

Kromatografi cecair berprestasi tinggi (HPLC) digunakan untuk menentukan secara serentak kandungan lima glikosida phenylethanoid dan lima alkohol sakarida dalam dua sampel Cistanche liar Kenya, serta Cina.Cistanche tubulosadanCistanche deserticola(lihat Jadual 1 dan 2).

Mengenai glikosida phenylethanoid, echinacoside dan acteoside didapati pada paras tinggi secara konsisten dalam semua sampel Cistanche, menyokong rasional pemilihan mereka sebagai sebatian penanda dalam Farmakope Cina. Terutamanya,Cistanche senegalensisdari Kenya mempamerkan kandungan tubuloside A yang jauh lebih tinggi, yang membezakannya daripada spesies Cistanche Cina dan mungkin berfungsi sebagai ciri ciri Cistanche Kenya.

Dari segi jumlah kandungan alkohol sakarida,Cistanche deserticolamenunjukkan tahap yang lebih tinggi daripada kedua-duanyaCistanche tubulosadanCistanche senegalensis. Betaine tidak dikesan masukCistanche tubulosa, walaupun kandungan fruktosa, manitol dan glukosa adalah serupa dengan kandungan dalamCistanche deserticola, kecuali kandungan sukrosa yang jauh lebih rendah. Sebaliknya,Cistanche senegalensismengandungi betaine yang boleh dikesan tetapi tiada glukosa, dan paras alkohol sakarida lain juga jauh berbeza daripada spesies Cistanche Cina.

Akar Segar Cistanche tubulosa

Hubungi sekarang kenali petani cistanche di china

 

 

 

Jadual 1 Kandungan lima glikosida phenylethanoid dalam tumbuhan Cistanche (%, n=3, min ± SD). GH: C. tubulosa; HM: C. deserticola; "-" menunjukkan tidak dikesan

ID sampel	asal usul	Bentuk pertumbuhan	Tarikh pengumpulan	Echinacoside	Tubuloside A	Acteoside	Isoacteoside	2'-Acetylacteoside	Jumlah
GH1	Yutian, Xinjiang	Diusahakan	2023.11	9.47 ± 0.070	0.63 ± 0.003	4.34 ± 0.032	1.43 ± 0.007	0.11 ± 0.001	15.98
GH2	Yutian, Xinjiang	Diusahakan	2023.11	13.31 ± 0.347	0.64 ± 0.012	4.34 ± 0.032	1.33 ± 0.07	0.17 ± 0.001	19.52
GH3	Yutian, Xinjiang	Diusahakan	2023.11	24.64 ± 0.043	0.84 ± 0.014	5.75 ± 0.091	2.06 ± 0.038	0.06 ± 0.003	33.35
HM1	Turpan, Xinjiang	Diusahakan	2023.11	1.93 ± 0.094	0.04 ± 0.003	0.15 ± 0.026	0.03 ± 0.006	0.02 ± 0.001	2.17
HM2	Turpan, Xinjiang	Diusahakan	2023.11	2.76 ± 0.140	0.05 ± 0.003	0.16 ± 0.018	0.03 ± 0.004	0.03 ± 0.001	3.05
HM3	Turpan, Xinjiang	Diusahakan	2023.11	2.44 ± 0.174	0.06 ± 0.004	0.15 ± 0.008	0.03 ± 0.002	0.02 ± 0.001	2.69
K1	Kenya	Liar	2023.08	3.83 ± 0.027	2.69 ± 0.034	2.70 ± 0.27	0.27 ± 0.003	0.74 ± 0.001	10.23
K2	Kenya	Liar	2023.08	1.46 ± 0.018	1.51 ± 0.001	0.15 ± 0.001	0.08 ± 0.001	0.03 ± 0.001	3.23

---

Jadual 2 Kandungan gula alkohol dan betaine dalam tumbuhan Cistanche (%, n=3, min ± SD)

ID sampel	asal usul	Bentuk pertumbuhan	Tarikh pengumpulan	Betaine	Fruktosa	Manitol	Glukosa	Sukrosa	Jumlah
GH1	Yutian, Xinjiang	Diusahakan	2023.11	-	11.66 ± 0.084	5.56 ± 0.112	5.45 ± 0.054	2.29 ± 0.042	24.96
GH2	Yutian, Xinjiang	Diusahakan	2023.11	-	8.75 ± 0.061	4.94 ± 0.159	3.34 ± 0.081	1.70 ± 0.092	18.73
GH3	Yutian, Xinjiang	Diusahakan	2023.11	-	9.44 ± 0.107	5.09 ± 0.089	4.31 ± 0.455	1.80 ± 0.149	20.29
HM1	Turpan, Xinjiang	Diusahakan	2023.11	6.62 ± 0.136	7.60 ± 0.119	3.22 ± 0.049	3.55 ± 0.150	23.18 ± 0.425	44.16
HM2	Turpan, Xinjiang	Diusahakan	2023.11	6.46 ± 0.105	7.82 ± 0.104	4.82 ± 0.038	4.98 ± 0.104	28.57 ± 0.449	52.65
HM3	Turpan, Xinjiang	Diusahakan	2023.11	6.65 ± 0.148	8.29 ± 0.159	3.90 ± 0.084	4.88 ± 0.009	26.90 ± 0.629	50.62
K1	Kenya	Liar	2023.08	9.41 ± 0.021	5.31 ± 0.333	7.06 ± 0.045	-	8.44 ± 0.102	30.22
K2	Kenya	Liar	2023.08	6.29 ± 0.034	-	-	-	-	6.29

---

Nota:
"-" menunjukkan tidak dikesan.
GH =Cistanche tubulosa, HM =Cistanche deserticola, K=Kenya liarCistanche.

 

Cap jari kromatografi sampel Cistanche dari kawasan berbeza ditunjukkan dalam Rajah 4, dan keputusan analisis persamaan cap jari dibentangkan dalam Jadual 3. Persamaan antara sampel Cistanche liar Kenya K1 dan sampel GH1–GH3 (Cistanche tubulosadari China) berkisar antara 0.785 hingga 0.899, manakala persamaan dengan sampel HM1–HM3 (Cistanche deserticoladari China) berkisar antara 0.630 hingga 0.745. Bagi sampel K2 dari Kenya, persamaan dengan sampel GH1–GH3 ialah 0.840 hingga 0.859, dan dengan sampel HM1–HM3 ia adalah 0.775 hingga 0.824. Keputusan ini menunjukkan bahawa komposisi kimia Cistanche liar Kenya adalah lebih serupa dengan CinaCistanche tubulosadaripada kepadaCistanche deserticola.

 

Rajah 4 Kromatogram cap jari Cistanche liar di Kenya dan ditanam C. tubulosa dan C. deserticola di Xinjiang

 

Jadual 3 Keputusan penilaian kesamaan sampel Cistanche

Sampel	K1	K2	HM1	HM2	HM3	GH1	GH2	GH3	Rujukan
K1	1	0.881	0.647	0.745	0.630	0.899	0.834	0.785	0.852
K2	0.881	1	0.783	0.824	0.775	0.859	0.854	0.840	0.875
HM1	0.647	0.783	1	0.988	1	0.887	0.950	0.975	0.945
HM2	0.745	0.824	0.988	1	0.985	0.946	0.986	0.997	0.983
HM3	0.630	0.775	1	0.985	1	0.876	0.942	0.969	0.937
GH1	0.899	0.859	0.887	0.946	0.876	1	0.987	0.967	0.988
GH2	0.834	0.854	0.950	0.986	0.942	0.987	1	0.996	0.999
GH3	0.785	0.840	0.975	0.997	0.969	0.967	0.996	1	0.993
Rujukan	0.852	0.875	0.945	0.983	0.937	0.988	0.999	0.993	1

---

Nota: K1, K2: Cistanche liar Kenya; HM1–HM3:Cistanche deserticoladari Turpan, Xinjiang; GH1–GH3: *

 

Perbincangan

Kenya mempunyai kepelbagaian tumbuhan yang kaya dan tradisi lama menggunakan tumbuhan untuk tujuan perubatan. Walau bagaimanapun, penyelidikan ke atas banyak tumbuhan Afrika dari segi taksonomi, kimia, dan farmakologi masih terhad, menyebabkan banyak tumbuhan ubatan yang berharga diabaikan dan kurang diteliti [9]. Walaupun terdapat laporan yang mencadangkan bahawa Cistanche diedarkan secara meluas di Kenya [15], pada masa ini tiada rekod penggunaan ubatnya di negara ini. Untuk menjelaskan status dan nilai perubatan sumber Cistanche di Kenya, pasukan penyelidik kami menjalankan tinjauan lapangan dan mendapati bahawaCistanche senegalensisdiedarkan secara meluas di barat daya Kenya. Tempoh berbunga tempatan untuk Cistanche adalah dari Mac hingga Mei dan dari Oktober hingga Disember. Oleh kerana tinjauan kami dijalankan pada bulan Ogos, kami hanya dapat mengumpul dua sampel. Walaupun had ini, kami mengenal pasti spesies Cistanche Kenya liar melalui analisis molekul morfologi, histologi dan DNA, dan menentukan komposisi kimianya, memberikan sokongan untuk pemuliharaan dan pembangunan sumber Cistanche di Kenya.

Cistanche deserticola

 

Batang berair Cistanche liar Kenya diratakan dan berbentuk silinder, menyerupaiCistanche deserticoladalam rupa, tetapi berbeza terutamanya daripada batang fusiformCistanche tubulosa. Bahagian melintang Cistanche liar Kenya menunjukkan berkas vaskular bertaburan, yang konsisten dengane ciri-ciriCistanche tubulosa. Walau bagaimanapun, manakala asas anter daripadaCistanche tubulosaadalah tumpul dan bulat tanpa hujung akut, ciri ini tiada dalam Cistanche Kenya liar [1,7]. Berdasarkan analisis jujukan ITS2 dan psbA-trnH, Cistanche liar Kenya berkemungkinanCistanche senegalensis, dan kedua-dua kawasan genetik menunjukkan persamaan yang tinggi dengan CinaCistanche tubulosa. Laporan terdahulu menunjukkan bahawaC. senegalensisdiedarkan terutamanya dari Senegal di timur laut Afrika ke selatan ke Kenya dan bahagian lain di tenggara Afrika [15]. Kajian filogenetik terbaharu dan menyeluruh bagi genus Cistanche membahagikannya kepada empat klad utama: Asia Timur, Afrika Barat Laut, Asia Barat Daya dan klad yang meluas. Disebabkan penghibridan interspesies atau perubahan geografi, klad yang meluas dicirikan oleh resolusi filogenetik yang rendah, menjadikannya sukar untuk membezakan spesies berdasarkan morfologi dan urutan DNA. Kedua-duanyaC. tubulosadanC. senegalensistermasuk dalam klad yang meluas ini, dan empat sampel dikenal pasti sebagaiC. tubulosaditemui di dalamC. senegalensiscabang dalam kajian, menjadikannya mencabar untuk membezakan antara kedua-duanya walaupun pada tahap nuklear ITS2 dan jujukan kloroplas psbA-trnH [8].

Menurut penyelidikan [15], tuan rumah daripadaC. senegalensistermasuk beberapa spesies, sepertiSuaeda monoica(Amaranthaceae),Salvadora persica(Salvadoraceae),Zygophyllumspesies (Zygophyllaceae), danVachellia tortilis(Fabaceae). Dalam kajian ini, hos Cistanche liar Kenya dikenal pasti sebagaiSericocokopsis hildebrandtii(Amaranthaceae), subshrub atau pokok renek yang akarnya digunakan secara tempatan sebagai etnoperubatan untuk merawat malaria, sakit perut, hepatitis, sembelit, dan penyakit lain [16,17]. Di China, tuan rumahCistanche deserticolatermasukHaloxylon ammodendron, H. persicum(kedua-dua Amaranthaceae), danAtriplex canescens(Chenopodiaceae) [18]; manakala tuan rumah orang CinaCistanche tubulosaadalah pelbagai spesiesTamarix(Tamaricaceae). Berbanding dengan julat tuan rumah yang agak terhad spesies Cistanche Cina,C. senegalensisdi Kenya menggunakan pelbagai jenis hos daripada genera yang berbeza, mencadangkan kebolehsuaian ekologi yang lebih luas.

Kedua-dua sampel daripadaC. senegalensisyang dikumpul dalam kajian ini mengandungi kesemua lima glikosida phenylethanoid, walaupun parasnya sangat berbeza-beza, mungkin disebabkan oleh perbezaan dalam peringkat berbunga. Sampel K1 dikumpul sebelum tumbuhan muncul dari tanah, dengan batang yang lebih kecil dan rizab nutrien tidak digunakan, menghasilkan kandungan bahan aktif yang lebih tinggi; sampel K2 dikumpul semasa tempoh berbunga, apabila nutrien telah habis, menyebabkan kandungan bahan aktif yang lebih rendah, selaras dengan kajian terdahulu [19]. Jumlah kandungan lima glikosida phenylethanoid dalam K1 adalah lebih tinggi daripada dalam bahasa CinaCistanche deserticolatetapi lebih rendah daripada bahasa CinaCistanche tubulosa. Tambahan pula, jumlah kandungan empat gula alkohol dan betaine dalam K1 adalah lebih tinggi daripada dalamCistanche tubulosatetapi lebih rendah daripada dalamCistanche deserticola. Terutama, kedua-dua sampel K1 dan K2 mengandungi tahap betaine yang agak tinggi, yang tidak pernah dikesan dalam bahasa Cina.Cistanche tubulosatetapi diketahui terdapat dalam jumlah yang tinggi dalam bahasa CinaCistanche deserticola[6]. Satu lagi perbezaan ketara ialah K1 atau K2 tidak mengandungi glukosa, tetapi disebabkan saiz sampel yang kecil, tidak jelas sama ada ini adalah ciriC. senegalensisatau hanya variasi individu-ini akan memerlukan pengesahan lanjut dengan lebih banyak sampel pada masa hadapan.

Secara ringkasnya, melalui penyiasatan dan penyelidikan lapangan, kajian ini telah mengenal pasti taburan Cistanche liar di Kenya, menjelaskan spesiesnya sebagaiCistanche senegalensis, dan mendapati kedua-dua persamaan dan perbezaan dengan bahasa CinaCistanche deserticoladanCistanche tubulosa. Perbezaan ini mungkin dipengaruhi oleh kaedah penanaman, persekitaran ekologi, dan faktor lain, dan memerlukan penyelidikan dan pemantauan lanjut.

 

Rujukan

[1] Suruhanjaya Farmakope China. Farmakope Republik Rakyat China (中华 人民共和国药典) [S]. Vol 1. 2025 Ed. Beijing: China Medical Science Press, 2025: 319-320.

[2] Tu PF, Jiang Y. Kemas kini penyelidikan literatur klasik mengenai Cistanches Herba [J]. China J Chin Mater Med (中国中药杂志), 2022, 47: 5670-5679.

[3] Fu Z, Fan X, Wang X, et al. Cistanches Herba: gambaran keseluruhan kimia, farmakologi,

[4] Xu CH, Tuerdimaimaiti N, Wang YX, et al. Kemajuan dalam bioaktiviti glikosida phenylethanoid dalam Cistanches [J]. Ubat Makanan (食品与药品), 2023, 25: 261-266.

[5] Lagu ZH, Lei L, Tu PF. Kemajuan dalam penyelidikan aktiviti farmakologi dalam tumbuhan Cistanche Hoffing et Link [J]. Ubat Herba Tradit Dagu (中草药), 2003, 34: 113-115.

[6] Gao YJ, Jiang Y, Dai F, et al. Kajian tentang juzuk julap dalam Cistanche deserticola YC Ma [J]. Mod Chin Med (中国现代中药), 2015, 17: 307-310, 314.

[7] Jawatankuasa Editorial Flora Reipublicae Popularis Sinicae, Akademi Sains China. Flora of China (中国植物志) [M]: Vol 69. Beijing: Science Press, 1999: 86.

[8] Ataei N, Schneeweiss GM, García MA, et al. Filogeni berbilang lokus tumbuhan parasit bukan fotosintetik Cistanche (Orobanchaceae) menyangkal taksonomi semasa dan mengenal pasti empat klad morfologi utama yang berbeza [J]. Mol Phylogenet Evol, 2020, 151: 106898.

[9] Nankaya J, Gichuki N, Lukhoba C, et al. Tumbuhan ubatan maasai Kenya: ulasan [J]. Tumbuhan, 2020, 9: 44