Memilih ramuan penjagaan kulit botani harus melibatkan lebih daripada mencari cerita tumbuhan yang menarik. Untuk jenama penjagaan kulit, pengeluar kontrak atau pengedar bahan, soalan yang lebih berguna ialah:

Sebatian yang manakah terdapat dalam ekstrak?

Sejauh manakah pengeluar boleh mengawal kepekatannya secara konsisten?

Apakah eksperimen yang menyokong aplikasi yang dicadangkan?

Adakah bukti berkenaan dengan bahan sebenar yang dibeli?

Apakah ujian tambahan yang diperlukan sebelum melancarkan produk siap?

Dokumen teknikal yang diperiksa dalam artikel ini memberi tumpuan kepadaverbascoside berasal daripada Cistanchedan aplikasi yang dicadangkan dalam pengeluaran lipid kulit, penghidratan, dan penyelidikan berkaitan halangan.

Ia menerangkan kedua-dua proses penulenan dan eksperimen makmal yang membandingkan verbascoside yang telah dimurnikan dengan beberapa ekstrak Cistanche dan bahan lain.

 

 

16% ekstrak cistanche verbascoside

Pelajaran komersial utama adalah mudah: ekstrak Cistanche am dan sebatian terbitan Cistanche yang sangat tulen tidak boleh dianggap sebagai bahan yang boleh ditukar ganti.

Nota bukti:Penemuan penyelidikan di bawah dilaporkan dalam teks paten Cina yang dibekalkan untuk terjemahan. Bahan yang dibekalkan tidak termasuk angka asal, set data berangka yang lengkap, butiran penerbitan paten atau kajian klinikal manusia. Oleh itu, ia harus dibaca sebagai pendedahan teknikal, bukan sebagai pengesahan bebas tentang keberkesanan produk siap atau kelulusan kawal selia.

 

1. Apakah Verbascoside?

Verbascoside juga dikenali sebagaiacteoside. Ini adalah nama untuk bahan kimia yang sama, bukannya dua bahan aktif yang berbeza. Pendaftaran bahan FDA menyenaraikan kedua-dua nama di bawah identiti bahan yang sama. (precision.fda.gov)

 

 

Dalam pendedahan yang dibekalkan, verbascoside digambarkan sebagai glikosida phenylethanoid yang diperoleh daripada batang berisi kering spesies Cistanche. Sumber botani utama yang dinamakan ialah:

Cistanche deserticola

Cistanche tubulosa

Cistanche sinensis

salsa cistanche

Dokumen itu menyiasat verbascoside sebagai aktif botani yang berpotensi untuk formulasi topikal, dengan perhatian khusus kepada metabolisme lipid, pengeluaran asid hyaluronik, protein simpang rapat dan penghijrahan sel.

Kenapa Nama Penting Semasa Membeli Bahan

Apabila membandingkan sebut harga pembekal, minta pengesahan:

Spesies botani dan bahagian tumbuhan.

Sama ada bahan itu adalah ekstrak keseluruhan, ekstrak piawai atau sebatian yang telah dimurnikan.

Kandungan verbascoside yang diukur.

Kaedah analisis dan piawai rujukan yang digunakan.

Sama ada peratusan yang dinyatakan mewakili ujian mengikut jisim atau peratusan luas kromatografi.

Petikan untuk "ekstrak Cistanche" sahaja tidak memberikan maklumat yang mencukupi untuk menentukan sama ada ia sepadan dengan bahan yang dinilai dalam eksperimen tertentu.

2. Mengapa Pendedahan Tertumpu pada Penghalang Kulit?

Dokumen ini membentangkan konsep penyelidikan berbilang titik akhir dan bukannya tuntutan pelembap permukaan yang mudah.

Urutan yang dicadangkan ialah:

Pembaharuan sel epidermis → sambungan sel-ke-sel yang lebih kuat → sokongan lipid → pengeluaran asid hyaluronik → aktiviti berkaitan pembaikan

Untuk menyiasat konsep ini, para penyelidik menggunakan sel HaCaT. HaCaT ialah barisan sel keratinosit manusia yang diabadikan yang ditubuhkan sebagai model makmal untuk mengkaji biologi epidermis dan keratinisasi. Ia bukan jenis sel yang dinamakan semula jadi "HaCaT" dalam kulit seseorang. (pmc.ncbi.nlm.nih.gov)

Bagi pembeli ramuan, perbezaan ini penting:keputusan dalam sel kultur adalah titik permulaan penyelidikan, bukan pengganti untuk menguji produk siap pada kulit manusia.

Titik Akhir Utama Dilaporkan

Kawasan penyelidikan	Ukuran yang diterangkan dalam dokumen yang dibekalkan	Tafsiran praktikal
Tindak balas sel	CCK-8 ujian	Titik akhir saringan; kaedah tambahan akan mengukuhkan tuntutan percambahan
Aktiviti berkaitan lipid	Aktiviti sintase asid lemak; Ungkapan ACC , FASN dan N-SMase	Menyokong penyiasatan lanjut mengenai metabolisme lipid, tetapi tidak secara langsung mengukur profil lipid penghalang kulit yang lengkap
Asid hyaluronik	kandungan HA; Ekspresi HAS2, HAS3 dan CD44	Menyokong penyiasatan lanjut mengenai laluan berkaitan HA
Sambungan sel ke sel	Tahap Claudin-1 dan occludin	Mengukur protein simpang ketat terpilih dan bukannya fungsi penghalang lengkap
Aktiviti berkaitan pembaikan	Ujian calar sel	Titik akhir penutupan jurang in vitro, bukan percubaan penyembuhan luka klinikal
Pengekalan kelembapan	Pengekalan jisim formulasi pada plat kaca	Ujian makmal peringkat formulasi, bukan kajian penghidratan pada kulit

Tafsiran ini mengikuti kaedah eksperimen yang diterangkan dalam teks yang dibekalkan.

 

3. Apakah yang Membuatkan Penyelidikan Ini Berguna untuk Perniagaan Penjagaan Kulit?

Pendedahan ini membandingkan beberapa bahan dan bukannya mengandaikan bahawa setiap bahan terbitan Cistanche menghasilkan tindak balas yang sama.

Bahan yang diuji termasuk:

Ekstrak polisakarida Cistanche.

Beberapa ekstrak yang mengandungi phenylethanoid-glycoside.

Ekstrak glikosida phenylethanoid total.

Echinacoside.

Verbascoside yang disucikan.

Menurut dokumen yang dibekalkan, verbascoside yang telah dimurnikan menunjukkan aktiviti merentasi beberapa titik akhir yang diukur. Beberapa ekstrak campuran menunjukkan aktiviti dalam ujian tertentu tetapi tidak yang lain.

Bawa Pulang Pembelian

Beli spesifikasi yang sepadan dengan objektif pembangunan anda-bukan hanya nama tumbuhan.

Contohnya:

Jika projek anda berdasarkan eksperimen verbascoside yang dimurnikan, minta data untuk bahan yang disucikan.

Jika formulasi anda menggunakan ekstrak keseluruhan yang diseragamkan, minta ujian pada ekstrak tersebut.

Jika pembekal memetik penyelidikan tentang proses pengekstrakan lain, tanya sama ada komposisi yang diuji adalah setanding dengan bahan yang ditawarkan.

Bukti untuk satu gred ramuan tidak boleh dipindahkan secara automatik ke gred bahan lain.

4. Bagaimanakah Verbascoside Disediakan dalam Pendedahan?

Proses yang diterangkan mempunyai empat peringkat utama:

Penyediaan botani:Prarawat dan hancurkan batang berisi Cistanche kering.

Pengekstrakan:Gunakan 50%–80% etanol berair.

Pengayaan:Asingkan pecahan menggunakan resin penjerapan berliang makro AB-8.

Pemurnian:Gunakan kromatografi silika-gel, diikuti dengan kepekatan dan pengeringan beku.

Kesucian akhir yang dinyatakan ialahsekurang-kurangnya 98%, walaupun teks yang dibekalkan tidak termasuk pengesahan analisis atau data kelompok yang diperlukan untuk mengesahkan spesifikasi tersebut secara bebas.

Soalan Pembuatan Kritikal: Pelarut Sisa

Langkah kromatografi yang didedahkan menggunakankloroform dan metanol.

Untuk projek penyumberan komersial, minta pengeluar senarai pelarut pengeluaran sebenar, kawalan penyingkiran pelarut dan hasil sisa pelarut khusus kelompok. ICH Q3C menyediakan rangka kerja farmaseutikal untuk menilai risiko sisa-pelarut; ia tidak sepatutnya diwakili sebagai piawaian penerimaan kosmetik sejagat. (ema.europa.eu)

Jangan menganggap bahawa "berasal tumbuhan" bermaksud "dibuat hanya dengan air dan etanol."

 

5. Apakah yang Ditunjukkan oleh Ujian Pengekalan Kelembapan?

Dokumen yang dibekalkan menerangkan perbandingan:

Serum yang mengandungi2% verbascoside.

Serum yang mengandungi2% echinacoside.

Serum kawalan positif yang mengandungi5% gliserin.

Sampel diletakkan di25 darjah dan 50% kelembapan relatif, dan jisim mereka diukur dari semasa ke semasa.

Pendedahan melaporkan bahawa sampel yang mengandungi verbascoside mengekalkan lebih banyak jisim di bawah keadaan ini.

Itu adalah pemerhatian penyaringan rumusan yang berpotensi berguna. Walau bagaimanapun, kaedah yang diterangkan tidak menetapkan:

Penghidratan unggul pada kulit manusia.

Kehilangan air transepidermal yang lebih rendah.

Keunggulan klinikal berbanding gliserin.

Prestasi yang lebih baik dalam setiap formulasi.

Bahawa perbezaan yang diperhatikan hanya terhasil daripada yang dinamakan aktif, tanpa perbandingan kenderaan dipadankan yang didedahkan sepenuhnya.

Untuk jenama yang merancang tuntutan perbandingan, uji formulasi siap menggunakan kajian yang direka bentuk yang sesuai.

 

6. Senarai Semak Penyumberan Bahan Cistanche Praktikal

Gunakan soalan berikut semasa menilai pembekal ekstrak Cistanche atau pengeluar verbascoside yang telah dimurnikan.

Soalan pembelian	Dokumentasi untuk diminta
Apakah sumber botani?	Pengenalpastian spesies, pengisytiharan bahagian tumbuhan, dan maklumat kebolehkesanan
Apa sebenarnya yang dibekalkan?	Komposisi penuh, termasuk pembawa, alat bantu pemprosesan dan eksipien jika berkenaan
Berapa banyak verbascoside hadir?	Sijil analisis dan kaedah ujian khusus kelompok
Bagaimanakah identiti disahkan?	Pengenalan kromatografi dan maklumat piawai rujukan
Pelarut yang manakah digunakan?	Pengisytiharan pelarut pembuatan sebenar dan keputusan ujian sisa-pelarut
Sejauh mana konsistensi pengeluaran?	Keputusan wakil daripada berbilang kelompok
Adakah bahan tersebut sesuai untuk kegunaan yang dimaksudkan?	Dokumentasi tujuan penggunaan dan dokumen keselamatan yang sesuai
Adakah ia berfungsi dalam formula yang dipilih?	Data keterlarutan, keserasian, kestabilan dan pembangunan pembungkusan
Apakah yang menyokong tuntutan yang dicadangkan?	Laporan kajian untuk gred ramuan yang sama dan, sebaik-baiknya, formulasi siap

 

Jangan Gunakan "Semulajadi" sebagai Kesimpulan Keselamatan

Teks paten yang dibekalkan membuat pernyataan keselamatan yang menggalakkan berdasarkan asal bahan botani. Kenyataan itu memerlukan kelayakan untuk penerbitan komersial.

FDA menjelaskan bahawa sumber bahan tidak menentukan keselamatannya: bahan yang berasal dari tumbuhan juga boleh mengandungi bahan toksik atau alergen. Keselamatan mesti dinilai untuk keadaan penggunaan yang dimaksudkan. (fda.gov)

Atas sebab ini, minta bukti keselamatan dan bukannya bergantung pada "semulajadi", "herba" atau "ketulenan tinggi" sebagai jaminan yang berdiri sendiri.

 

7. Bagaimanakah Jenama Perlu Membincangkan Penyelidikan?

Simpan tiga lapisan berasingan:

Apa yang didakwa oleh pendedahan itu.

Perkara yang diukur oleh eksperimen yang dilaporkan.

Perkara yang telah ditunjukkan untuk dilakukan oleh produk siap.

Sebagai contoh, "disiasat dalam sel HaCaT untuk aktiviti berkaitan lipid" secara material berbeza daripada "terbukti secara klinikal untuk membaiki halangan kulit."

Begitu juga, rujukan untuk merawat ekzema, menguruskan dermatitis atopik, atau menyembuhkan luka tidak boleh disalin terus ke dalam tuntutan produk kosmetik biasa. Di Amerika Syarikat, tuntutan untuk merawat penyakit atau menjejaskan struktur atau fungsi badan boleh menyebabkan produk dikawal selia sebagai ubat. (fda.gov)

Artikel penyelidikan atau rujukan paten bukanlah, dengan sendirinya, kebenaran untuk membuat tuntutan pemasaran terapeutik.

8. Laluan Pembangunan yang Disyorkan

Untuk perniagaan yang mempertimbangkan verbascoside terbitan Cistanche, urutan pembangunan yang berguna ialah:

Tentukan kategori produk yang dimaksudkan dan pasaran sasaran.

Pilih gred bahan dan spesifikasi analisis.

Semak komposisi, bahan cemar, sisa pelarut dan dokumentasi keselamatan.

Membangunkan prototaip dan menilai keserasian bahan.

Nilaikan formulasi dan kestabilan pembungkusan.

Menjalankan penilaian mikrobiologi dan keselamatan yang sesuai.

Uji produk siap terhadap tuntutan prestasi yang dimaksudkan.

Semak tapak web akhir, label dan bahasa pengiklanan sebelum pelancaran.

Julat kepekatan dalam pendedahan-0.01%–5.0%-harus dianggap sebagai julat yang didedahkan, bukan sebagai pengesyoran formulasi yang disahkan secara universal.

 

Bottom Line untuk Pembeli Bahan

Penyelidikan yang dibekalkan menjadikan verbascoside terbitan Cistanche sebagai calon untuk pembangunan penjagaan kulit selanjutnya, terutamanya untuk projek yang meneroka penghidratan dan titik akhir makmal berkaitan halangan.

 

Senarai kandungan cistanche acteoside

 

Klik untuk melawat kandungan berbeza senarai ekstrak cistanche acteoside

 

 

 

Pengajaran yang paling berguna bukan sekadar "Cistanche baik untuk kulit." Ia adalah itukaedah pengekstrakan, kandungan kompaun aktif, identiti ramuan, dan kualiti bukti semuanya mempengaruhi sama ada bahan botani sesuai untuk projek komersial tertentu.

Apabila mendekati pengeluar Cistanche, mulakan dengan permintaan yang tepat:

"Sila berikan identiti botani, spesifikasi verbascoside, kaedah analisis, sijil analisis yang mewakili, keputusan sisa pelarut, dokumentasi keselamatan dan panduan perumusan untuk gred ramuan yang dicadangkan untuk projek kami."

Permintaan itu mewujudkan asas yang lebih kukuh untuk pembangunan produk daripada pertanyaan generik untuk serbuk ekstrak herba.

 

(54) Tajuk Reka Cipta

Kaedah Penyediaan Verbascoside dan Kaedah Penggunaannya untuk Menggalakkan Pengeluaran Lipid Kulit

(57) Abstrak

Ciptaan ini berkaitan dengan kaedah untuk menyediakan verbascoside dan kaedah penggunaannya untuk menggalakkan pengeluaran lipid kulit, yang tergolong dalam bidang teknikal penjagaan kulit dan produk topikal.

Kaedah ini terdiri daripada langkah-langkah berikut:

Memilih batang berisi kering tumbuhan OrobanchaceaeCistanche deserticola, Cistanche tubulosa, Cistanche sinensis, atausalsa cistanche; menghancurkan batang selepas prarawatan; mengekstraknya di bawah refluks dengan larutan etanol akueus 50%–80% dua hingga empat kali selama satu hingga tiga jam setiap kali; menggabungkan ekstrak; dan menumpukan mereka di bawah tekanan yang dikurangkan sehingga tiada bau etanol kekal, dengan itu memperoleh larutan pekat.

Melewati larutan pekat melalui AB-8 lajur resin penjerapan makroliang; mencairkan secara berurutan dengan air ternyahion dan larutan etanol berair 30%–50% untuk menghilangkan kekotoran; kemudian mencairkan juzuk sasaran dengan larutan etanol akueus 60%–90%; mengumpul eluat dan menumpukan ia di bawah tekanan yang dikurangkan; memurnikannya dengan kromatografi lajur silika-gel menggunakan kloroform–metanol pada nisbah isipadu antara 5:1 hingga 2:1 sebagai eluen; mengumpul pecahan sasaran; dan menumpukan mereka di bawah tekanan yang dikurangkan, diikuti dengan pengeringan beku, untuk mendapatkan verbascoside yang telah dimurnikan.

Kesan berfaedah yang dinyatakan untuk ciptaan ini ialah verbascoside melindungi kulit dan mempamerkan aktiviti penjagaan kulit yang lebih baik apabila dimasukkan ke dalam produk.

 

Tuntutan

Tuntutan 1

Kaedah untuk menyediakan verbascoside, dicirikan dengan terdiri daripada langkah-langkah berikut:

Memilih batang berisi kering tumbuhan OrobanchaceaeCistanche deserticola, Cistanche tubulosa, Cistanche sinensis, atausalsa cistanche; melumatkan mereka selepas prarawatan; mengekstraknya di bawah refluks dengan larutan etanol akueus 50%–80% dua hingga empat kali selama satu hingga tiga jam setiap kali; menggabungkan ekstrak; dan menumpukan mereka di bawah tekanan yang dikurangkan sehingga tiada bau etanol kekal, dengan itu memperoleh larutan pekat.

Melewati larutan pekat melalui AB-8 lajur resin penjerapan makroliang; mencairkan secara berurutan dengan air ternyahion dan larutan etanol berair 30%–50% untuk menghilangkan kekotoran; kemudian mencairkan juzuk sasaran dengan larutan etanol akueus 60%–90%; mengumpul eluat dan menumpukan ia di bawah tekanan yang dikurangkan; memurnikannya dengan kromatografi lajur silika-gel menggunakan kloroform–metanol pada nisbah isipadu antara 5:1 hingga 2:1 sebagai eluen; mengumpul pecahan sasaran; menumpukan mereka di bawah tekanan yang dikurangkan; dan membekukan-mengeringkannya untuk mendapatkan verbascoside yang telah dimurnikan dengan ketulenan sekurang-kurangnya 98%.

 

Tuntutan 2

Kaedah untuk menyediakan verbascoside mengikut Tuntutan 1, di mana nisbah bahan kepada pelarut semasa pengekstrakan refluks berjulat dari 1:10 hingga 1:20, dan suhu pengekstrakan berjulat dari 60 darjah hingga 80 darjah .

 

Tuntutan 3

Kaedah untuk menyediakan verbascoside mengikut Tuntutan 1, di mana nisbah diameter-ke-tinggi AB-8 lajur resin penjerapan makroliang berjulat dari 1:8 hingga 1:15, dan kadar aliran elusi berjulat dari 1 hingga 3 BV/j.

 

Tuntutan 4

Kaedah untuk menyediakan verbascoside mengikut Tuntutan 1, di mana keadaan pengeringan beku terdiri daripada suhu antara -40 darjah hingga -50 darjah, tekanan vakum antara 10 hingga 30 Pa, dan masa pengeringan antara 12 hingga 24 jam.

 

Tuntutan 5

Kaedah menggunakan verbascoside untuk menggalakkan pengeluaran lipid kulit, menggunakan verbascoside yang disediakan mengikut mana-mana satu Tuntutan 1–4, yang dicirikan bahawa kaedah penggunaan terdiri daripada:

Menambah verbascoside pada asas produk topikal pada pecahan jisim yang telah ditetapkan dan kacau secara seragam untuk menghasilkan produk siap; memohon produk siap ke permukaan kulit sekali atau dua kali sehari; membenarkan verbascoside menembusi dan bertindak pada sel HaCaT epidermis untuk mengawal selia gen dan ekspresi protein ACC , FASN, dan N-SMase dan meningkatkan aktiviti sintase asid lemak; dan penggunaan berterusan selama satu hingga empat minggu untuk meningkatkan sintesis lipid kulit.

Verbascoside menggalakkan percambahan sel HaCaT, penyembuhan luka, ekspresi protein simpang rapat, dan pengeluaran lipid dan asid hyaluronik, dengan itu menyediakan fungsi pembaikan halangan berbilang sasaran.

Ia digunakan di seluruh rantai penyelenggaraan penghalang kulit yang terdiri daripada pembaharuan sel epidermis, sambungan antara sel yang dipertingkatkan, penambahan matriks lipid, dan sintesis asid hyaluronik sebagai faktor pelembap semula jadi.

 

Tuntutan 6

Kaedah penggunaan mengikut Tuntutan 5, di mana pecahan jisim verbascoside dalam produk topikal adalah antara 0.01% hingga 5.0%.

 

Tuntutan 7

Kaedah penggunaan mengikut Tuntutan 5, di mana 0.1–0.5 g produk siap digunakan setiap permohonan, diikuti dengan urutan lembut selama satu hingga tiga minit untuk menggalakkan penyerapan.

 

Tuntutan 8

Kaedah penggunaan mengikut Tuntutan 5, di mana produk topikal adalah pembalut perubatan, produk pembaikan selepas prosedur, produk rawatan tambahan untuk dermatitis atopik, produk penjagaan kulit yang khusus ditujukan untuk kulit sensitif, atau produk penjagaan kulit pelembab dan pembaikan intensif.

 

Tuntutan 9

Kaedah permohonan mengikut Tuntutan 5, di mana eksipien tambahan boleh dimasukkan semasa penggunaan verbascoside.

 

Tuntutan 10

Kaedah penggunaan mengikut Tuntutan 9, di mana eksipien dipilih daripada bahan pelembap, pengemulsi, pengawet, pewangi, atau agen penenang, dan bentuk dos bagi komposisi yang mengandungi eksipien dipilih daripada losyen, krim, gel, serum atau larutan topeng lembaran.

 

Kaedah Penyediaan Verbascoside dan Kaedah Penggunaannya untuk Menggalakkan Pengeluaran Lipid Kulit

 

Bidang Teknikal

[0001]Ciptaan ini tergolong dalam bidang teknikal penjagaan kulit dan produk topikal. Khususnya, ia berkaitan dengan kaedah untuk menyediakan verbascoside dan kaedah penggunaannya untuk menggalakkan pengeluaran lipid kulit.

Lebih khusus lagi, ia melibatkan kaedah penyediaan untuk verbascoside yang bertujuan untuk memberikan kesan merentasi urutan pembaikan penghalang kulit yang lengkap bagi pembaharuan sel epidermis → persimpangan ketat antara sel yang dipertingkatkan → pengisian semula matriks lipid → sintesis asid hyaluronik → penyembuhan luka, untuk digunakan dalam melindungi kulit.

 

Seni Latar

[0002]Pembaharuan sel epidermis, persimpangan ketat antara sel yang dipertingkatkan, penambahan matriks lipid, sintesis asid hyaluronik, dan penyembuhan luka masing-masing memainkan peranan yang sangat diperlukan dalam mengekalkan homeostasis penghalang kulit.

Pembaharuan sel epidermis adalah asas pembinaan halangan. Dengan mempercepatkan pembiakan dan pembezaan keratinosit basal, ia memastikan bilangan sel yang mencukupi bergerak ke atas dengan teratur, membekalkan bahan selular yang mencukupi untuk pembentukan halangan.

Struktur persimpangan antara sel, termasuk persimpangan ketat dan desmosom, menambat sel-sel yang baru terbentuk bersama-sama untuk mencipta halangan fizikal yang padat dan berterusan yang menahan kemasukan perengsa luaran dengan berkesan.

Matriks lipid yang mengisi ruang antara sel membentuk struktur lamelar yang teratur dan merupakan cara utama untuk menutup laluan melalui mana air hilang.

Asid hyaluronik yang disintesis dalam epidermis dan dermis membentuk rangkaian penahan air yang kuat, membekalkan kelembapan kepada stratum korneum, dan mengekalkan homeostasis selular. Ia juga boleh menyediakan persekitaran lembap yang sesuai untuk proses fisiologi ini dan menghantar isyarat selular.

Penyembuhan luka sangat bergantung kepada empat proses ini. Pertama, asid hyaluronik menyediakan matriks sementara dan fungsi isyarat. Pembaharuan sel epidermis kemudiannya diperlukan untuk menutup luka. Sel yang baru terbentuk mesti mewujudkan semula persimpangan yang ketat dan menambah matriks lipid untuk melengkapkan pemulihan fungsi penghalang.

Lima proses ini dimulakan secara berurutan semasa penyembuhan luka. Tindakan mereka yang saling berkaitan dan diselaraskan-daripada pembaharuan sel dan pengukuhan struktur kepada pengisian matriks dan penyimpanan air-secara kolektif membawa kepada penghalang kulit yang stabil sepenuhnya.

Ia memberikan bukan sahaja kekuatan fizikal yang diperlukan untuk menentang perengsa luaran tetapi juga kapasiti pengekalan lembapan yang diperlukan untuk mengelakkan kehilangan air dalaman, membolehkan kulit mengekalkan kesihatan jangka panjang dalam keadaan keseimbangan yang dinamik.

Sehubungan itu, pembinaan semula berbilang dimensi dan sistematik adalah lebih asas daripada sekadar meningkatkan kelembapan permukaan. Ia boleh meningkatkan ketahanan kulit dan pengekalan lembapan pada sumbernya, menyokong keadaan sihat yang lebih tahan lama dan stabil.

[0003]Penghasilan lipid dan asid hyaluronik kulit sendiri adalah asas untuk mengekalkan kesihatan kulit, menentang kerengsaan alam sekitar dan memelihara keadaan muda.

Melalui pengekalan lembapan dan pertahanan terhadap mikroorganisma dan bahan pencemar, bahan ini membantu memastikan fungsi kulit fisiologi normal.

Berbanding dengan suplemen luaran sahaja, menggalakkan pengeluaran lipid dan asid hyaluronik kulit sendiri digambarkan sebagai strategi yang lebih asas dan tahan lama yang secara langsung menguatkan "kapasiti pembaikan diri" dan "rintangan."

Untuk penyakit kulit seperti dermatitis atopik dan ekzema, pengukuhan pengeluaran lipid dan asid hyaluronik digambarkan sebagai mempunyai kepentingan pencegahan dan terapeutik pusat.

Sumber menjelaskan bahawa keadaan ini selalunya melibatkan kecacatan genetik yang melemahkan struktur "bata-dan-mortar" kulit, membolehkan alergen dan perengsa menembusi lebih mudah dan mencetuskan kitaran imun-radang yang berterusan.

Oleh itu, mengenal pasti bahan aktif yang mengaktifkan enzim sintesis lipid utama, seperti FASN dan ACC, atau secara langsung mendorong pengeluaran asid hyaluronik boleh secara proaktif mengekalkan dan membaiki pengeluaran lipid selular dan asid hyaluronik.

Menurut pendedahan itu, strategi ini boleh mengurangkan kekeringan, gatal-gatal dan episod keradangan sambil mengurangkan pencetus luaran pada sumbernya, mengurangkan kekerapan dan keterukan berulang, dan membantu mengalihkan pengurusan penyakit daripada rawatan pasif kepada pencegahan aktif.

 

[0004]Verbascoside ialah glikosida phenylethanoid dan salah satu juzuk utama tumbuhan Orobanchaceae:

Cistanche deserticolaYC Ma;

Cistanche tubulosa(Schenk) Wight;

Cistanche sinensisBeck; dan

salsa cistanche(CA Mey.) Beck.

 

Penyelidikan telah menunjukkan bahawa verbascoside adalah antioksidan yang kuat dan mempunyai aktiviti farmakologi termasuk kesan anti-radang, neuroprotektif, hepatoprotektif dan anti-penuaan.

Semasa pemeriksaan untuk agen pelindung kulit daripada pelbagai tumbuhan, pencipta mendapati bahawa verbascoside bukan sahaja menggalakkan percambahan sel HaCaT dan ekspresi protein simpang rapat tetapi juga mengawal aktiviti sintase asid lemak, dengan itu meningkatkan sintesis lipid kulit.

Ia juga mengaktifkan laluan yang terlibat dalam pengeluaran asid hyaluronik dan seterusnya menggalakkan penyembuhan luka.

Tindakan ini merangkumi urutan penyelenggaraan dan pembaikan penghalang kulit yang lengkap bagi pembaharuan sel epidermis → sambungan antara sel yang dipertingkatkan → pengisian semula matriks lipid → sintesis asid hyaluronik → penyembuhan luka.

Oleh itu, Verbascoside boleh digunakan sebagai agen pelindung dan pelembap kulit berbilang sasaran dalam produk penjagaan kulit dan topikal yang berfungsi.

Contohnya termasuk pembalut perubatan dan produk pembaikan selepas prosedur; produk tambahan untuk dermatitis atopik atau ekzema; produk penjagaan kulit yang ditujukan khusus untuk kulit sensitif atau rosacea; dan produk pelembap dan pembaikan intensif untuk kegunaan harian.

 

Ringkasan Reka Cipta

[0005]Ciptaan ini menyediakan kaedah untuk menyediakan verbascoside dan kaedah penggunaannya untuk menggalakkan penghasilan lipid kulit.

Kaedah penyediaan melibatkan verbascoside yang bertujuan untuk menyokong urutan pembaikan penghalang kulit yang lengkap bagi pembaharuan sel epidermis → sambungan antara sel yang dipertingkatkan → penambahan lipid-matriks → sintesis asid hyaluronik → penyembuhan luka.

Ia menangani masalah teknikal untuk menyediakan bahan aktif teras baharu dengan kesan berbilang sasaran untuk produk penjagaan kulit atau topikal.

Verbascoside digambarkan sebagai mempunyai kelebihan bertindak merentasi rantai pembaikan penghalang kulit yang lengkap, dengan kesan yang lebih baik daripada ramuan penjagaan kulit sasaran tunggal sedia ada, seperti bahan yang menggalakkan hanya sintesis asid hyaluronik, menggalakkan percambahan sel sahaja atau memberikan pelembapan sahaja.

[0006]Untuk mencapai objektif di atas, ciptaan ini menggunakan penyelesaian teknikal berikut.

[0007]Kaedah untuk menyediakan verbascoside terdiri daripada langkah-langkah berikut.

[0008]Pilih batang berisi kering tumbuhan OrobanchaceaeCistanche deserticola, Cistanche tubulosa, Cistanche sinensis, atausalsa cistanche.

Selepas pemutihan, pengeringan dan penumbuk, ekstrak bahan di bawah refluks dengan larutan etanol akueus 50%–80% dua hingga empat kali selama satu hingga tiga jam setiap kali.

Gabungkan ekstrak dan pekatkannya di bawah tekanan yang dikurangkan sehingga tiada bau etanol kekal, dengan itu memperoleh larutan pekat.

[0009]Lulus larutan pekat melalui AB-8 lajur resin penjerapan makroliang.

Elusikan secara berurutan dengan air ternyahion dan larutan etanol berair 30%–50% untuk menghilangkan kekotoran, diikuti dengan larutan etanol berair 60%–90% untuk mengelusi konstituen sasaran.

Kumpulkan eluat dan pekatkannya di bawah tekanan yang dikurangkan.

Tulenkan pekat dengan kromatografi lajur silika-gel menggunakan kloroform–metanol pada nisbah isipadu antara 5:1 hingga 2:1 sebagai eluen.

Kumpulkan pecahan sasaran, pekatkannya di bawah tekanan yang dikurangkan, dan bekukan-keringkannya untuk mendapatkan verbascoside tulen dengan ketulenan sekurang-kurangnya 98%.

[0010]Secara pilihan, nisbah bahan kepada pelarut semasa pengekstrakan refluks berjulat dari 1:10 hingga 1:20, dinyatakan dalam g/mL, dan suhu pengekstrakan berjulat dari 60 darjah hingga 80 darjah .

Nota penterjemah: Sumber juga menyatakan bahawa nisbah ini bermaksud "1 g bahan mentah ditambah kepada 1 mL pelarut." Pernyataan itu tidak konsisten dengan julat 1:10–1:20 yang ditentukan, yang sepadan dengan 10–20 mL pelarut setiap gram bahan mentah.

[0011]Secara pilihan, nisbah diameter-ke-tinggi lajur resin penjerapan makroliang AB-8 berjulat dari 1:8 hingga 1:15, di mana nisbahnya ialah diameter lajur, d, kepada ketinggian lajur, h. Kadar aliran elusi berjulat dari 1 hingga 3 BV/j.

[0012]Secara pilihan, keadaan pengeringan beku terdiri daripada suhu antara -40 darjah hingga -50 darjah, tekanan vakum antara 10 hingga 30 Pa, dan masa pengeringan antara 12 hingga 24 jam.

[0013]Kaedah penggunaan verbascoside untuk menggalakkan pengeluaran lipid kulit disediakan seperti berikut.

[0014]Tambahkan verbascoside pada asas produk topikal pada pecahan jisim yang telah ditetapkan dan kacau secara seragam untuk menghasilkan produk siap.

Sapukan produk siap ke permukaan kulit sekali atau dua kali sehari.

Melalui penembusan, verbascoside bertindak pada sel HaCaT epidermis untuk menggalakkan percambahan sel dan menguatkan persimpangan ketat.

Pada masa yang sama, ia mengimbangi ekspresi gen dan protein ACC , FASN, dan N-SMase, meningkatkan aktiviti sintase asid lemak, mengimbangi HAS2, HAS3, dan CD44, dan meningkatkan kandungan asid hyaluronik.

Teruskan penggunaan selama satu hingga empat minggu untuk mencapai peningkatan keseluruhan penghalang kulit.

[0015]Secara pilihan, pecahan jisim verbascoside dalam produk topikal berjulat dari 0.01% hingga 5.0%.

[0016]Secara pilihan, gunakan 0.1–0.5 g produk siap setiap permohonan dan urut perlahan-lahan selama satu hingga tiga minit selepas permohonan untuk menggalakkan penyerapan.

[0017]Secara pilihan, produk topikal ialah pembalut perubatan, produk pembaikan selepas prosedur, produk rawatan tambahan untuk dermatitis atopik, produk penjagaan kulit yang ditujukan khusus untuk kulit sensitif, atau produk penjagaan kulit yang melembapkan dan membaiki intensif.

[0018]Secara pilihan, eksipien juga boleh ditambah semasa penggunaan verbascoside.

[0019]Selanjutnya, eksipien dipilih daripada humektan, pengemulsi, pengawet, pewangi atau agen yang menenangkan.

Bentuk dos bagi komposisi yang mengandungi eksipien dipilih daripada losyen, krim, gel, serum atau larutan topeng lembaran.

 

Kesan Berfaedah Reka Cipta

[0020]Kesan berfaedah ciptaan tersebut adalah seperti berikut.

[0021]Ciptaan ini menunjukkan bahawa verbascoside mempunyai aktiviti teras dalam menggalakkan pengeluaran lipid kulit dan asid hyaluronik.

Ia juga boleh menggalakkan percambahan sel kulit, menguatkan persimpangan ketat antara sel, dan mempercepatkan penyembuhan luka, membentuk mekanisme gelung tertutup "menggalakkan percambahan sel → menstabilkan sambungan antara sel → meningkatkan pengeluaran lipid dan asid hyaluronik → mempercepatkan pembaikan dan penyembuhan."

Berbanding dengan seni terdahulu, ciptaan itu digambarkan mempunyai kelebihan berikut.

[0022]Verbascoside ialah bahan aktif terbitan tumbuhan semula jadi dengan tahap keselamatan yang tinggi dan aktiviti farmakologi yang jelas, mengelakkan potensi risiko kerengsaan kulit yang dikaitkan dengan bahan yang disintesis secara kimia.

Kelayakan editorial: Ini adalah tuntutan keselamatan sumber, bukan kesimpulan yang dibuat semata-mata oleh asal usul botani.

[0023]Kecekapan penyediaan dan hasil verbascoside dipertingkatkan.

[0024]Verbascoside bertindak pada julat sasaran yang komprehensif, secara serentak mengawal selia beberapa proses utama, termasuk percambahan sel, ekspresi protein simpang rapat, sintesis lipid, pengeluaran asid hyaluronik dan penyembuhan luka.

Ia sekali gus meningkatkan fungsi penghalang kulit secara bersepadu, dengan kesan yang digambarkan sebagai lebih baik daripada bahan-bahan sasaran tunggal.

[0025]Aplikasinya adalah luas, termasuk pembaikan perubatan, rawatan tambahan penyakit kulit, penjagaan kulit sensitif, dan pelembab dan pembaikan harian, memenuhi keperluan kesihatan kulit bagi populasi yang berbeza.

 

Penerangan Ringkas Lukisan

[0026]Untuk menerangkan penyelesaian teknikal bagi penjelmaan ciptaan atau seni terdahulu dengan lebih jelas, lukisan yang diperlukan untuk menerangkan penjelmaan atau seni terdahulu diperkenalkan secara ringkas di bawah.

Lukisan yang diterangkan di bawah hanya mewakili penjelmaan tertentu bagi ciptaan itu. Seseorang yang mempunyai kemahiran biasa dalam seni boleh memperoleh lukisan lain daripada mereka tanpa usaha kreatif.

[0027]Rajah 1 ialah carta alir skematik kaedah penyediaan ciptaan.

[0028]Rajah 2 membentangkan data daya maju sel HaCaT.

[0029]Rajah 3 menunjukkan data aktiviti sintase asid lemak.

[0030]Rajah 4 menunjukkan data kandungan asid hyaluronik.

[0031]Rajah 5 membentangkan data daya maju sel HaCaT untuk ciptaan itu.

[0032]Rajah 6 mempersembahkan data aktiviti sintase asid lemak untuk ciptaan itu.

[0033]Rajah 7 membentangkan ekspresi gen yang berkaitan dengan sintesis asid lemak.

[0034]Rajah 8 membentangkan ekspresi protein yang berkaitan dengan sintesis asid lemak.

[0035]Rajah 9 membentangkan keputusan Western blot yang dikaitkan dengan sintesis asid lemak.

[0036]Rajah 10 menunjukkan data kandungan asid hyaluronik.

[0037]Rajah 11 membentangkan ekspresi gen yang berkaitan dengan sintesis asid hyaluronik.

[0038]Rajah 12 membentangkan ekspresi protein yang berkaitan dengan sintesis asid hyaluronik.

[0039]Rajah 13 menunjukkan keputusan Western blot yang dikaitkan dengan asid hyaluronik.

[0040]Rajah 14 menunjukkan tahap ekspresi claudin-1.

[0041]Rajah 15 menunjukkan tahap ekspresi occludin.

[0042]Rajah 16 menunjukkan kadar penutupan luka.

[0043]Rajah 17 membentangkan imej daripada ujian awal sel.

[0044]Rajah 18 membentangkan penilaian prestasi pelembapan sampel yang berbeza.

 

Penerangan Terperinci tentang Penjelmaan

[0045]Penjelmaan aplikasi diterangkan secara terperinci di bawah dengan merujuk kepada lukisan yang disertakan.

Contoh 1: Penyediaan Verbascoside yang Dimurnikan

[0046]Contoh 1.

[0047]Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 1, contoh ini menyediakan kaedah untuk menyediakan verbascoside, disingkat sebagai Ver, yang terdiri daripada langkah-langkah berikut.

[0048]Pilih batang berdaging keringCistanche deserticolaatauCistanche tubulosa, kedua-duanya tergolong dalam keluarga Orobanchaceae.

Potong bahan, rebus dalam air mendidih selama 10–25 minit, dan keringkan dalam ketuhar pada suhu 40 darjah –60 darjah, meningkatkan kandungan verbascoside lebih daripada empat kali ganda.

 

 

Nota:* lwn. kumpulan kawalan kosong, P<0.05P < 0.05P<0.05.

 

Selepas penghancuran, ekstrak bahan di bawah refluks dengan larutan etanol akueus 50%–80% dua hingga empat kali selama satu hingga tiga jam setiap kali.

Gabungkan ekstrak dan pekatkannya di bawah tekanan yang dikurangkan sehingga tiada bau etanol kekal, dengan itu memperoleh larutan pekat.

 

[0049]Lulus larutan pekat melalui AB-8 lajur resin penjerapan makroliang.

Elusikan secara berurutan dengan air ternyahion dan larutan etanol berair 30%–50% untuk menghilangkan kekotoran, diikuti dengan larutan etanol berair 60%–90% untuk mengelusi konstituen sasaran.

Kumpulkan eluat dan pekatkannya di bawah tekanan yang dikurangkan.

Bersihkan dengan kromatografi lajur silika-gel menggunakan kloroform–metanol pada nisbah isipadu antara 5:1 hingga 2:1 sebagai eluen.

Kumpulkan pecahan sasaran, pekatkannya di bawah tekanan yang dikurangkan, dan bekukan-keringkannya untuk mendapatkan verbascoside tulen dengan ketulenan sekurang-kurangnya 98%.

[0050]Khususnya, nisbah bahan kepada pelarut semasa pengekstrakan refluks berjulat dari 1:10 hingga 1:20, dan suhu pengekstrakan berjulat dari 60 darjah hingga 80 darjah .

[0051]Nisbah diameter-ke-tinggi lajur resin penjerapan berliang makro AB-8 berjulat dari 1:8 hingga 1:15, dan kadar aliran elusi berjulat dari 1 hingga 3 BV/j.

[0052]Keadaan pengeringan beku terdiri daripada suhu antara −40 darjah hingga −50 darjah, tekanan vakum antara 10 hingga 30 Pa, dan masa pengeringan antara 12 hingga 24 jam.

 

Jadual 2. Ringkasan bioaktiviti sampel yang berbeza

Indeks	Kawalan kosong	Kawalan positif	CTE	Ech	Ver
Daya maju sel (%)	100 ± 8.347	/	122.052 ± 8.051*	117.868 ± 7.941*	128.894 ± 9.528*
Aktiviti FAS (U/mg prot)	2.712 ± 0.419	18.488 ± 4.56*	2.069 ± 0.27	9.799 ± 1.356*	10.4 ± 0.697*
kandungan HA (ng/mL)	10.908 ± 0.968	19.925 ± 4.306*	21.644 ± 2.037*	13.517 ± 1.653*	18.486 ± 1.341*
Ungkapan Claudin-1 (pg/mL)	414.58 ± 25.05	/	505.556 ± 20.518*	478.937 ± 12.419*	554.057 ± 22.106*
Ungkapan occludin (pg/mL)	3.287 ± 0.683	/	4.285 ± 0.575	4.666 ± 0.582*	7.258 ± 0.774*
Kadar penyembuhan luka 24 jam (%)	30.581 ± 1.308	70.075 ± 1.781*	40.762 ± 9.68	37.102 ± 7.038	45.173 ± 5.508*
48 jam kadar penyembuhan luka (%)	55.458 ± 6.674	87.545 ± 3.155*	76.47 ± 2.684*	67.883 ± 5.678*	76.704 ± 4.8*

Nota:* lwn. kumpulan kawalan kosong, P<0.05P < 0.05P<0.05.

 

Contoh 2: Penyediaan Ekstrak Polisakarida Cistanche

[0053]Contoh 2.

[0054]Ekstrak Cistanche dua kali di bawah refluks yang dipanaskan dengan kuantiti air 20 kali ganda dan 15 kali ganda selama tiga jam dan dua jam, masing-masing.

Tapis, gabungkan turasan, dan pekat pada 80 darjah –90 darjah .

Tambah 215 mL etanol 95% untuk mencapai kepekatan etanol akhir 80%, dan biarkan semalaman pada 4 darjah .

Kumpulkan mendakan sama ada dengan penapisan, mengekalkan kek penapis, atau dengan sentrifugasi pada 4,000 rpm selama 10 minit.

Basuh mendakan tiga kali dengan etanol mutlak dan keringkan pada suhu 50 darjah untuk mendapatkan ekstrak polisakarida Cistanche, POL yang ditetapkan.

 

Contoh 3: Penyediaan Ekstrak Glikosida Phenylethanoid

[0055]Contoh 3.

[0056]Ekstrak Cistanche dua kali di bawah refluks yang dipanaskan dengan kuantiti air 20 kali ganda dan 15 kali ganda selama tiga jam dan dua jam, masing-masing.

Tapis, gabungkan turasan, dan pekat pada 80 darjah –90 darjah .

Tambah 215 mL etanol 95% untuk mencapai kepekatan etanol akhir 80%, dan biarkan semalaman pada 4 darjah .

Kumpulkan turasan melalui penapisan atau supernatan melalui sentrifugasi pada 4,000 rpm selama 10 minit.

Pekat dan keringkan untuk mendapatkan ekstrak glikosida phenylethanoid Cistanche, POLS yang ditetapkan.

Ujian menunjukkan kandungan echinacoside sebanyak 21.8% dan kandungan verbascoside sebanyak 1.2%.

 

Contoh 4: Penyediaan Ekstrak RE1

[0057]Contoh 4.

[0058]RendamCistanche deserticoladalam enam kali ganda kuantiti etanol 52% pada suhu bilik selama 10 hari.

Tapis dan simpan sisa tumbuhan.

Selepas pengeringan, ekstrak sisa sekali di bawah refluks dengan enam kali ganda kuantiti etanol 95% selama dua jam.

Tapis, gabungkan turasan, pekat pada 60 darjah, dan keringkan untuk mendapatkan ekstrak Cistanche phenylethanoid glycosides dan derivatifnya, RE1 yang ditetapkan.

Ekstrak mengandungi konstituen termasuk echinacoside, verbascoside, isoverbascoside, dan 2'-acetylverbascoside.

 

Contoh 5: Penyediaan Ekstrak RE2

[0059]Contoh 5.

[0060]EkstrakCistanche tubulosadua kali dengan etanol 75% selama satu jam setiap kali.

Tapis dan simpan sisa.

Selepas pengeringan, ekstrak sisa sekali di bawah refluks dengan enam kali ganda kuantiti etanol 95% selama dua jam.

Tapis, gabungkan turasan, pekat pada 60 darjah, dan keringkan untuk mendapatkan ekstrak Cistanche phenylethanoid glycosides dan derivatifnya, RE2 yang ditetapkan.

Ekstrak mengandungi konstituen termasuk echinacoside, verbascoside, isoverbascoside, dan 2'-acetylverbascoside.

 

Contoh 6: Penyediaan Ekstrak Glikosida Phenylethanoid Jumlah

[0061]Contoh 6.

[0062]Potong Cistanche dan ekstrak dua kali dengan larutan etanol 75% selama 1.5 jam setiap kali.

Gabungkan ekstrak, pekat, dan keringkan untuk mendapatkan ekstrak glikosida phenylethanoid Cistanche, CTE yang ditetapkan.

Ujian menunjukkan kandungan echinacoside sebanyak 22.6% dan kandungan verbascoside sebanyak 4.5%.

 

Contoh 7: Kaedah Permohonan

[0063]Contoh 7.

[0064]Berdasarkan Contoh 1, contoh ini menyediakan kaedah aplikasi di mana verbascoside memberikan kesan merentasi urutan pembaikan penghalang kulit yang lengkap bagi pembaharuan sel epidermis → sambungan antara sel yang dipertingkatkan → pengisian semula matriks lipid → sintesis asid hyaluronik → penyembuhan luka.

Kaedah permohonan khusus adalah seperti berikut.

[0065]Tambahkan verbascoside pada asas produk topikal pada pecahan jisim yang telah ditetapkan dan kacau secara seragam untuk menghasilkan produk siap.

Sapukan produk siap ke permukaan kulit sekali atau dua kali sehari.

Melalui penembusan, verbascoside bertindak pada sel HaCaT epidermis untuk menggalakkan percambahan sel dan menguatkan persimpangan ketat.

Pada masa yang sama, ia mengimbangi ekspresi gen dan protein ACC , FASN, dan N-SMase, meningkatkan aktiviti sintase asid lemak, mengimbangi HAS2, HAS3, dan CD44, dan meningkatkan kandungan asid hyaluronik.

Teruskan penggunaan selama satu hingga empat minggu untuk mencapai peningkatan keseluruhan penghalang kulit.

[0066]Khususnya, pecahan jisim verbascoside dalam produk topikal adalah antara 0.01% hingga 5.0%.

[0067]Gunakan 0.1–0.5 g produk siap setiap permohonan dan urut perlahan-lahan selama satu hingga tiga minit selepas permohonan untuk menggalakkan penyerapan.

[0068]Produk topikal ialah pembalut perubatan, produk pembaikan selepas prosedur, produk rawatan tambahan untuk dermatitis atopik, produk penjagaan kulit yang ditujukan khusus untuk kulit sensitif, atau produk penjagaan kulit pelembap dan pembaikan intensif.

[0069]Eksipien juga boleh ditambah semasa penggunaan verbascoside.

Selanjutnya, eksipien dipilih daripada humektan, pengemulsi, pengawet, pewangi atau agen yang menenangkan.

Bentuk dos bagi komposisi yang mengandungi eksipien dipilih daripada losyen, krim, gel, serum atau larutan topeng lembaran.

 

Contoh 8: Bahan dan Peralatan Eksperimen

[0070]Contoh 8.

[0071]Berdasarkan Contoh 1 dan 7, bahan eksperimen yang digunakan dalam ciptaan adalah seperti berikut.

[0072]Sel-sel eksperimen adalah sel HaCaT epidermis manusia yang diabadikan yang dibeli dari Shanghai Yaji Biotechnology.

Sel-sel telah dibiakkan dalam DMEM glukosa tinggi ditambah dengan 10% serum lembu janin dan 1% penisilin-streptomisin pada 37 darjah dalam atmosfera yang mengandungi 5% karbon dioksida pada kelembapan tepu.

[0073]Bahan eksperimen adalah:

Echinacoside, disingkat sebagai Ech, dari Institut Kawalan Makanan dan Dadah Kebangsaan, China.

Serum lembu janin, FBS, dari EXCELL.

DMEM tinggi glukosa daripada Gibco.

0.25% trypsin–EDTA daripada Gibco.

Serbuk garam penimbal fosfat dari Bioteknologi Jambatan Emas Zhongshan Beijing.

CCK-8 Kit Ujian Percambahan Sel/Sitotoksisiti daripada TransGen Biotech.

Human Occludin, OCLN, ELISA Kit dari Wuhan CUSABIO.

Human Claudin-1, CLDN1, Kit ELISA dari Wuhan CUSABIO.

Sintase Asid Lemak, FAS, Kit Ujian Aktiviti daripada Solarbio.

Kit ELISA Asid Hyaluronik Manusia dari Wuhan CUSABIO.

Protein EGF Manusia Rekombinan, bebas pembawa, daripada Sistem R&D.

DEPC daripada Amresco.

Penanda DNA M5 HiClear DL2000 dari Mei5 Biotechnology.

Reagen TRIzol dari Ambion.

5X All-In-One RT MasterMix daripada abm.

EvaGreen Express 2X qPCR MasterMix–ROX Rendah daripada abm.

Kit Kuantitatif Protein Easy II, BCA, daripada TransGen Biotech.

Penampan lisis RIPA daripada Boster.

Perencat protease dari Boster.

Kambing Anti-Arnab IgG H&L, HRP, daripada Abcam.

IgG Anti-Tetikus Kambing H&L, HRP, daripada Abcam.

Penanda protein tertahan daripada Solarbio.

-Mercaptoethanol daripada Amresco.

Membran pemindahan PVDF, 0.45 μm, dari Millipore.

Glycine daripada Sangon Biotech.

Gliserol daripada Sangon Biotech.

SuperSignal West Pico PLUS daripada Thermo Fisher.

Antibodi Kawalan Pemuatan Beta-Actin, Monoklonal Tetikus, daripada Sino Biological.

Antibodi ACC1 daripada Affinity.

Antibodi FASN daripada Affinity.

SMPD2 Antibodi daripada Affinity.

Antibodi Hyaluronan Synthase 2, HAS2, daripada Affinity.

HAS3 Antibodi daripada Affinity.

CD44 Antibodi daripada Affinity.

[0074]Peralatan eksperimen terdiri daripada:

SmartCell HF-90 inkubator kultur sel karbon dioksida, Shanghai Lishen Scientific Equipment Co., Ltd. [上海力康仪器有限公司].

Kabinet keselamatan biologi HF1200LC daripada pengeluar yang sama.

DK-80 emparan berkelajuan rendah atas bangku, Shanghai Feige Instrument Co., Ltd.

Heraeus Multifuge X1R emparan peti sejuk berkelajuan tinggi, Thermo Fisher Scientific.

xMark microplate spectrophotometer, Bio-Rad.

GL-88B pengadun vorteks, Haimen Qilin-Bell Instrument Manufacturing Co., Ltd.

Sistem pengimejan gel model 2500, Shanghai Tianneng.

Alat PCR Thermal Cycler MyCycler, Bio-Rad.

7500 Alat PCR Masa Nyata Pantas, ABI.

Chemiscope 3000 sistem pengimejan chemiluminescence, Shanghai Qinxiang Scientific Instrument Co., Ltd.

Alat pemindahan protein sistem Tetra mini-PROTEAN, Bio-Rad.

DYCZ-24DN radas elektroforesis, Beijing Liuyi.

Nota penterjemah: Perihalan pengilang dan instrumen di atas mengikut sumber yang dibekalkan; butiran katalog tidak disahkan secara bebas.

 

 

 

Contoh 9: Kaedah Eksperimen

[0075]Contoh 9.

[0076]Berdasarkan Contoh 1–8, kaedah eksperimen yang digunakan dalam ciptaan adalah seperti berikut.

CCK-8 Ujian untuk Percambahan Sel

[0077]Sediakan penggantungan sel tunggal sel HaCaT dalam medium kultur lengkap pada ketumpatan 5×1045 \\kali 10^45×104 sel/mL.

Benih sel ke dalam plat 96-telaga pada 100 μL setiap telaga.

Selepas membenarkan sel melekat selama 24 jam pada 37 darjah di bawah 5% karbon dioksida, buang medium kultur dan tadbir bahan ujian yang berbeza. Sertakan kumpulan kawalan kosong, dengan n=5n=5n=5.

Selepas 48 jam rawatan, buang medium dan tambah 100 μL larutan 10% CCK-8 yang baru disediakan ke setiap perigi.

Teruskan pengeraman dalam inkubator kultur sel selama satu jam, kemudian ukur ketumpatan optik pada 450 nm menggunakan pembaca plat mikro.

Ujian Aktiviti Sintase Asid Lemak

[0078]Sediakan penggantungan sel tunggal sel HaCaT dalam medium kultur lengkap pada ketumpatan 5×1045 \\kali 10^45×104 sel/mL dan masukkan sel ke dalam kelalang kultur.

Selepas membenarkan sel melekat selama 24 jam pada 37 darjah di bawah 5% karbon dioksida, buang medium kultur dan tadbir bahan ujian yang berbeza.

Sertakan kumpulan kawalan kosong dan kumpulan kawalan positif yang dirawat dengan faktor pertumbuhan epidermis manusia rekombinan, rhEGF, pada 20 ng/mL, dengan n=3n=3n=3.

Selepas 48 jam rawatan, kumpulkan sel dan ukur aktiviti sintase asid lemak mengikut arahan kit ujian.

Ujian Kandungan Asid Hyaluronik

[0079]Sediakan penggantungan sel tunggal sel HaCaT dalam medium kultur lengkap pada ketumpatan 5×1045 \\kali 10^45×104 sel/mL dan masukkan sel ke dalam kelalang kultur.

Selepas membenarkan sel melekat selama 24 jam pada 37 darjah di bawah 5% karbon dioksida, buang medium kultur dan tadbir bahan ujian yang berbeza.

Sertakan kumpulan kawalan kosong dan kumpulan kawalan positif yang dirawat dengan rhEGF pada 20 ng/mL, dengan n=3n=3n=3.

Selepas 48 jam rawatan, kumpulkan supernatan kultur sel dan ukur kandungan asid hyaluronik mengikut arahan kit ujian.

PCR Transkripsi Songsang Kuantitatif

[0080]Sediakan penggantungan sel tunggal sel HaCaT dalam medium kultur lengkap pada ketumpatan 5×1045 \\kali 10^45×104 sel/mL dan benih sel ke dalam plat enam perigi.

Selepas membenarkan sel melekat selama 24 jam pada 37 darjah di bawah 5% karbon dioksida, buang medium kultur dan tadbir bahan ujian yang berbeza.

Sertakan kumpulan kawalan kosong dan kumpulan kawalan positif yang dirawat dengan rhEGF pada 20 ng/mL, dengan n=3n=3n=3.

Selepas 48 jam rawatan, buang supernatan dan tambah 1 mL TRIzol ke setiap telaga untuk menanggalkan dan melisiskan sel, memastikan bahawa reagen meliputi lapisan sel.

Goncangkan bekas kultur berulang kali sehingga sel dilepaskan, dan pindahkan bahan ke dalam tiub mikrosentrifuge 1.5 mL.

Ekstrak jumlah RNA dan gunakan qRT-PCR untuk menentukan ungkapan ACC , FASN, N-SMase, HAS2, HAS3, dan CD44.

Western Blotting

[0081]Sediakan penggantungan sel tunggal sel HaCaT dalam medium kultur lengkap pada ketumpatan 5×1045 \\kali 10^45×104 sel/mL dan masukkan sel ke dalam kelalang kultur.

Selepas membenarkan sel melekat selama 24 jam pada 37 darjah di bawah 5% karbon dioksida, buang medium kultur dan tadbir bahan ujian yang berbeza.

Sertakan kumpulan kawalan kosong dan kumpulan kawalan positif yang dirawat dengan rhEGF pada 20 ng/mL, dengan n=3n=3n=3.

Selepas 48 jam rawatan, kumpulkan sel.

Ekstrak jumlah protein dan gunakan Western blotting untuk menentukan ungkapan ACC , FASN, N-SMase, HAS2, HAS3 dan CD44.

Penilaian Ekspresi Protein Simpang Tegang

[0082]Sediakan penggantungan sel tunggal sel HaCaT dalam medium kultur lengkap pada ketumpatan 5×1045 \\kali 10^45×104 sel/mL dan masukkan sel ke dalam kelalang kultur.

Selepas membenarkan sel melekat selama 24 jam pada 37 darjah di bawah 5% karbon dioksida, buang medium kultur dan tadbir bahan ujian yang berbeza.

Sertakan kumpulan kawalan kosong, dengan n=3n ​​= 3n=3.

Selepas 48 jam rawatan, kumpulkan lisat sel dan ukur occludin dan claudin-1 menggunakan ELISA mengikut arahan kit.

Ujian Cakaran Sel

[0083]Sediakan penggantungan sel tunggal sel HaCaT dalam medium kultur lengkap pada ketumpatan 5×1055 \\kali 10^55×105 sel/mL.

Benih 500 μL setiap telaga ke dalam plat 24 telaga.

Selepas lampiran sel, berikan rawatan, bahagikan sel kepada kumpulan kawalan kosong, kumpulan kawalan positif yang dirawat dengan serum lembu janin, dan kumpulan bahan ujian.

Rawat selama 48 jam.

Selepas rawatan, perlahan-lahan buat calar lurus menggunakan hujung pipet.

Gantikan medium dengan medium bebas serum dalam semua kumpulan kecuali kumpulan kawalan positif.

Ambil gambar kawasan yang tercalar pada 0, 24, dan 48 jam.

Gunakan ImageJ untuk mengira kawasan calar dan menilai kapasiti penghijrahan sel.

 

Contoh 10: Penilaian Pengekalan Kelembapan

[0084]Contoh 10.

[0085]Kaedah gravimetrik in vitro digunakan untuk menilai prestasi pelembab serum yang mengandungi Ver, Ech, atau gliserin.

Timbang kuantiti yang ditentukan Sampel 1 yang telah diprarawat, mengandungi 2% Ver; Sampel 2, mengandungi 2% Ech; dan kawalan positif, mengandungi gliserin 5%.

Simpan sampel dalam kebuk suhu malar, kelembapan malar pada 25 darjah dan kelembapan relatif 50%.

Timbang sampel pada titik masa yang berbeza dan plot lengkung pengekalan lembapan.

[0086]Kadar pengekalan kelembapan dikira sebagai:

Kadar pengekalan lembapan (%)=M2−M0M1−M0×100%\\text{Kadar pengekalan lembapan (\\%)}=\\frac{M_2-M_0}{M_1-M_0}\\kali100\\%Kadar pengekalan lembapan (%)=M1​−M0​M2​−M0​​×100%

[0087]di mana:

[0088]M0M_0M0 ialah jisim plat kosong, dalam gram.

[0089]M1M_1M1 ialah jisim plat kaca selepas penambahan sampel, dalam gram.

[0090]M2M_2M2​ ialah jisim selepas disimpan dalam desikator selama beberapa jam, dalam gram.

Nota penterjemah: Perenggan [0085] menerangkan penyimpanan dalam ruang suhu terkawal, kelembapan terkawal, manakala [0090] merujuk kepada desikator. Kedua-dua huraian dikekalkan daripada sumber.

 

Keputusan Eksperimen

[0091]Keputusan eksperimen contoh ini adalah seperti berikut.

Kesan pada Percambahan Sel HaCaT

[0092]Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 2, ekstrak Cistanche yang berbeza mempunyai kesan yang berbeza terhadap daya maju sel HaCaT.

Ver dan POL meningkatkan daya maju sel dengan ketara, dengan P<0.05P < 0.05P<0.05, and Ver produced the highest viability.

Kesan pada Aktiviti Asid Lemak Sintase

[0093]Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 3, lipid antara sel dalam stratum korneum ialah komponen "mortar" teras struktur "bata-dan-mortar" kulit.

Ceramides, kolesterol, dan asid lemak bebas membentuk struktur dwilapisan lamelar padat dalam perkadaran tertentu.

Mengekalkan sintesis lipid normal boleh mengukuhkan struktur ini, mencegah kehilangan air, menahan kerosakan luaran, mengekalkan keseimbangan mikrobiom kulit, dan menggalakkan pembaikan diri.

Ia dengan itu boleh menangani kekeringan, kepekaan, dan mengurangkan kapasiti pertahanan kulit pada sumbernya.

[0094]Sintase asid lemak digambarkan sebagai enzim pengehad kadar teras dan enjin bekalan pusat yang mengawal sintesis lipid kulit.

Fungsi utamanya adalah untuk memangkinkan sintesis asid palmitik, C16:0, daripada asetil-KoA dan malonyl-KoA. Asid palmitik digambarkan sebagai asid lemak tepu rantai panjang endogen utama dalam kulit.

Asid palmitik mempunyai dua fungsi.

Pertama, sebagai blok binaan struktur asas, ia digunakan secara langsung dalam sintesis lipid penghalang stratum-corneum, termasuk seramida dan asid lemak bebas, menyediakan asas bahan untuk pembentukan dwilapisan lamellar.

Kedua, sebagai molekul prekursor dan isyarat yang penting, ia boleh diproses lebih lanjut oleh elongases hiliran, seperti ELOVL1, menjadi asid lemak rantaian yang sangat panjang. Asid lemak tersendiri ini diperlukan untuk integriti penghalang.

Sehubungan itu, aktiviti sintase asid lemak secara langsung menentukan bekalan bahan mentah yang tersedia untuk pengeluaran lipid penghalang kulit sendiri.

Penyelarasan fungsinya adalah langkah awal dan kritikal dalam menggalakkan sintesis lipid epidermis dan dengan itu membaiki dan menguatkan halangan kulit fizikal, akhirnya menyokong pengekalan dan pertahanan lembapan.

[0095]Data menunjukkan bahawa kawalan positif rhEGF dan Ver meningkatkan aktiviti sintase asid lemak dengan ketara, dengan P<0.05P < 0.05P<0.05.

POL, POLS, RE1, dan RE2 tidak meningkatkan aktiviti sintase asid lemak.

Although RE2 increased fatty acid synthase activity, the difference was not statistically significant, with P>0.05P > 0.05P>0.05.

Nota penterjemah: Sumber pertama termasuk RE2 antara bahan yang tidak meningkatkan aktiviti, kemudian melaporkan peningkatan yang tidak ketara untuk RE2. Ketidakkonsistenan ini dikekalkan.

 

Kesan pada Kandungan Asid Hyaluronik

[0096]Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 4, asid hyaluronik ialah polisakarida yang wujud secara semula jadi dalam kulit dengan kapasiti mengikat air yang kuat, diterangkan dalam sumber sebagai terutamanya terdapat dalam dermis dan stratum korneum.

Meningkatkan kandungan asid hyaluronik boleh mengekalkan kelembapan pada tahap yang lebih dalam, mengekalkan struktur kulit yang sihat, memberikan kesan antioksidan dan anti-radang, menggalakkan penyembuhan dan pembaikan luka, dan meningkatkan fungsi stratum-corneum.

Kesan ini digambarkan sebagai menghasilkan penghidratan, kenyang, dan daya tahan dari dalam.

[0097]Data menunjukkan bahawa kawalan positif rhEGF, Ver, dan RE2 meningkatkan kandungan asid hyaluronik dengan ketara, dengan P<0.05P < 0.05P<0.05.

POL, POLS, dan RE1 tidak meningkatkan kandungan asid hyaluronik.

 

Perbandingan Kelas Ekstrak dan Verbascoside Dimurnikan

[0098]Cistanche terutamanya mengandungi glikosida phenylethanoid dan polisakarida.

Aktiviti ekstrak polisakarida, POL; ekstrak glikosida phenylethanoid, POLS, RE1, dan RE2; dan verbascoside, Ver, oleh itu dibandingkan.

Keputusan dalam Rajah 2-4 menunjukkan bahawa ekstrak glikosida phenylethanoid Cistanche yang disediakan dengan kaedah yang berbeza dan sebatian individu menunjukkan aktiviti yang berbeza dalam menggalakkan percambahan sel HaCaT, meningkatkan aktiviti sintase asid lemak, dan meningkatkan kandungan asid hyaluronik.

Hanya Ver mempamerkan aktiviti dalam ketiga-tiga kawasan, seperti yang diringkaskan dalam Jadual 1.

[0099]–[0101] Nombor perenggan ini dan kandungan Jadual 1 tidak terdapat dalam sumber yang dibekalkan. Tiada terjemahan atau pembinaan semula boleh dilakukan untuk bahan yang hilang.

Jadual 1. Ringkasan bioaktiviti sampel yang berbeza

Indeks	Kawalan kosong	Kawalan positif	POL	POLS	RE1	RE2	Ver
Daya maju sel (%)	100 ± 7.008	/	119.008 ± 7.379*	105.312 ± 6.494	85.851 ± 8.381	95.234 ± 10.065	128.894 ± 9.528*
Aktiviti FAS (U/mg prot)	2.712 ± 0.419	18.488 ± 4.56*	3.786 ± 1.715	2.399 ± 0.717	2.145 ± 0.889	9.34 ± 10.756	10.63 ± 2.228*
kandungan HA (ng/mL)	10.908 ± 0.968	19.925 ± 4.306*	6.881 ± 2.411	6.321 ± 1.021	6.53 ± 1.342	16 ± 2.531*	17.86 ± 3.27*

 

Perbandingan Lanjut CTE, Echinacoside, dan Verbascoside

[0102]Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 5, glikosida fenilethanoid utama dalam Cistanche termasuk echinacoside dan verbascoside.

Kesan jumlah ekstrak phenylethanoid glycoside Cistanche, CTE, mengandungi 22.6% echinacoside dan 4.5% verbascoside; echinacoside, Ech; dan verbascoside, Ver, pada percambahan sel HaCaT oleh itu dibandingkan dengan lebih lanjut.

[0103]Data menunjukkan bahawa CTE, Ech, dan Ver semuanya menggalakkan percambahan sel HaCaT.

CTE dan Ver menghasilkan kesan terkuat, mencadangkan kesan perlindungan pada sel kulit.

Kesan Selanjutnya pada Aktiviti Sintase Asid Lemak

[0104]Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 6, kesan ke atas aktiviti sintase asid lemak adalah seperti berikut.

[0105]Data menunjukkan bahawa kawalan positif rhEGF, Ech, dan Ver meningkatkan aktiviti sintase asid lemak dengan ketara, dengan P<0.05P < 0.05P<0.05.

CTE tidak meningkatkan aktiviti sintase asid lemak.

 

Ungkapan Gen dan Protein Berkaitan dengan Sintesis Asid Lemak

[0106]Rajah 7–9 menunjukkan kesan pada ekspresi gen dan protein yang berkaitan dengan sintesis asid lemak.

[0107]ACC dan FASN digambarkan sebagai enzim pengehad kadar dan enjin teras anabolisme lipid.

Bersama-sama, ia memangkinkan penjanaan asid lemak rantai panjang, termasuk asid palmitik, menyediakan bahan mentah penting untuk sintesis lipid penghalang utama seperti ceramide.

N-SMase ialah pemula utama pecahan lipid dan isyarat tekanan dengan dua peranan.

Ia diaktifkan semasa kecederaan dan menghidrolisis sphingomyelin untuk menjana seramida isyarat, mencetuskan keradangan dan apoptosis dan menyekat sintesis lipid normal.

Dalam sel normal, bagaimanapun, ia mempunyai peranan pengawalseliaan dalam metabolisme lipid.

[0108]Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 7-9, keputusan qPCR dan Western blot menunjukkan bahawa Ver, seperti rhEGF, secara signifikan mengimbangi ekspresi gen dan protein ACC , FASN, dan N-SMase, dengan P<0.05P < 0.05P<0.05, and the effects were comparable.

Keputusan menunjukkan bahawa Ver mengimbangi ACC dan FASN untuk mengawal sintesis lipid selular untuk pembinaan membran, penyimpanan tenaga atau rembesan.

Pada masa yang sama, regulasi N-SMase boleh mengaktifkan kitaran metabolik sphingolipid.

Ceramide yang dihasilkan bukan sahaja isyarat tekanan. Di bawah keadaan fisiologi biasa, ia juga merupakan prekursor penting untuk sintesis sphingolipid kompleks lain, seperti glycosphingolipids, atau untuk pembentukan semula membran dinamik.

Oleh itu, penyelarasan penyelarasan ketiga-tiga gen dan protein ini meningkatkan keseluruhan aktiviti anabolik selular dan kapasiti pembentukan semula membran.

 

Kesan Selanjutnya pada Kandungan Asid Hyaluronik

[0109]Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 10, data menunjukkan bahawa rhEGF, CTE, Ech, dan Ver semuanya meningkat dengan ketara kandungan asid hyaluronik, dengan P<0.05P < 0.05P<0.05.

Susunan kesan ialah CTE, diikuti oleh Ver, diikuti oleh Ech.

 

Ekspresi Gen dan Protein Berkaitan dengan Sintesis Asid Hyaluronik

[0110]Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 11–13, HAS2, HAS3, dan CD44 membentuk gelung maklum balas "sintesis–sensing–tindak balas" dalam metabolisme asid hyaluronik dalam sel HaCaT.

HAS2 dan HAS3 ialah enzim sintesis pemangkin teras.

HAS2 terutamanya menghasilkan asid hyaluronik berat molekul tinggi dan dikaitkan dengan mengekalkan homeostasis kulit dan kesan anti-radang.

HAS3 cenderung untuk menghasilkan asid hyaluronik dengan berat molekul rendah dan mengambil bahagian secara lebih langsung dalam proses termasuk penghijrahan dan percambahan sel.

CD44 ialah reseptor permukaan sel utama untuk asid hyaluronik.

Ia bukan sahaja mengantara penghantaran isyarat intrasel dan ekstraselular yang melibatkan asid hyaluronik tetapi juga mengawal secara dinamik asid hyaluronik melalui endositosis dan kitar semula dan, seterusnya, mengawal ekspresi dan aktiviti HAS2 dan HAS3.

[0111]Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 11-13, keputusan qPCR dan Western blot menunjukkan bahawa Ver, seperti rhEGF, secara signifikan mengimbangi ekspresi gen dan protein HAS2, HAS3, dan CD44, dengan P<0.05P < 0.05P<0.05.

Kesan pengawalseliaan Ver pada ekspresi gen HAS2, HAS3, dan CD44 adalah lebih besar daripada rhEGF.

Keputusan menunjukkan bahawa Ver mengawal selia HAS2, HAS3 dan CD44 untuk mengawal proses "sintesis-pemasangan-isyarat" asid hyaluronik yang lengkap, menyumbang kepada penghidratan, pembaikan dan fungsi penghalang epidermis.

Kesan pada Ekspresi Protein Simpang Tegang

[0112]Mengekalkan pengeluaran lipid kulit dan asid hyaluronik digambarkan sebagai menyediakan sokongan asas, sinergistik dan penstabilan protein simpang rapat antara sel HaCaT.

Lipid yang mencukupi membolehkan keratinosit membentuk dwilapisan lipid antara sel yang lengkap dan teratur.

Struktur ini digambarkan bukan sahaja sebagai rangka kerja fizikal penghalang tetapi juga persekitaran struktur hidrofobik yang stabil untuk pemasangan protein simpang ketat dan berlabuh.

Pada masa yang sama, keadaan penghidratan yang baik yang dikekalkan oleh asid hyaluronik membantu memastikan metabolisme dan isyarat keratinosit yang normal.

Melalui laluan yang melibatkan reseptor seperti CD44, asid hyaluronik juga secara tidak langsung mengawal ekspresi dan pengedaran protein simpang ketat.

Bersama-sama, lipid dan asid hyaluronik menyediakan asas fizikal dan biokimia yang diperlukan untuk pembentukan dan penyelenggaraan persimpangan ketat dari perspektif kestabilan struktur dan homeostasis persekitaran mikro masing-masing.

Mereka dengan itu mengukuhkan sambungan antara sel fizikal dan integriti halangan keseluruhan.

[0113]Keputusan di atas menunjukkan bahawa Ver mempamerkan aktiviti terkuat dalam menggalakkan penghasilan lipid kulit dan asid hyaluronik.

Penyiasatan lanjut mengenai kesannya pada persimpangan ketat antara sel menunjukkan bahawa CTE, Ech, dan Ver semuanya secara signifikan mempromosikan ekspresi protein simpang ketat claudin-1, dengan P<0.05P < 0.05P<0.05, as shown in Figure 14.

Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 15, hanya Ech dan Ver yang menggalakkan ekspresi occludin dengan ketara.

Kesan Ver adalah jauh lebih besar daripada Ech, dengan P<0.05P < 0.05P<0.05.

Ini konsisten dengan aktiviti terkuat yang dikaitkan dengan Ver dalam menggalakkan pengeluaran lipid kulit dan asid hyaluronik.

 

Kesan pada Penyembuhan Luka

[0114]Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 16–17, HAS3 mengambil bahagian secara langsung dalam proses termasuk penghijrahan dan percambahan sel.

CD44 menghantar maklumat daripada asid hyaluronik ke dalam sel dan akhirnya mengawal selia penghijrahan, percambahan dan penghidratan sel, memainkan peranan penting dalam penyembuhan luka, pelembab kulit dan homeostasis penghalang.

Eksperimen sebelumnya menunjukkan bahawa verbascoside secara signifikan mempromosikan ekspresi HAS3 dan CD44.

Oleh itu, keupayaannya untuk menggalakkan penyembuhan luka disiasat lebih lanjut.

[0115]Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 16–17, keputusan menunjukkan bahawa CTE, Ech, dan Ver semuanya menggalakkan penyembuhan luka.

Walau bagaimanapun, hanya Ver menunjukkan kesan menggalakkan yang ketara pada 24 jam.

Ia mempamerkan aktiviti menggalakkan penyembuhan luka yang paling kuat, selaras dengan promosi gen HAS3 dan ekspresi protein yang ketara.

Kelayakan editorial: Kaedah percubaan yang dibekalkan untuk keputusan ini ialah ujian calar sel. "Penyembuhan luka" ialah istilah yang digunakan dalam sumber dan tidak boleh ditafsirkan di sini sebagai hasil klinikal yang ditunjukkan.

 

Prestasi Pengekalan Kelembapan Formulasi

[0116]Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 18, kapasiti pengekalan lembapan sampel dinilai daripada trend dalam lengkung pengekalan lembapan untuk menilai prestasi pelembab untuk kulit.

Data menunjukkan bahawa lengkung pengekalan lembapan Sampel 1 adalah melebihi lengkung Sampel 2 dan kawalan positif.

Di bawah keadaan 25 darjah dan kelembapan relatif 50%, Sampel 1 mempunyai prestasi pelembapan yang lebih baik daripada Sampel 2 dan kawalan gliserin 5%, menunjukkan prestasi pelembapan yang paling kuat.

Sampel 1 mengandungi Ver, dan Sampel 2 mengandungi Ech.

Menurut sumber, keputusan ini menunjukkan bahawa, apabila dimasukkan ke dalam produk, Ver mempunyai kehomogenan dan aktiviti pelembab yang lebih baik daripada Ech, seperti yang diringkaskan dalam Jadual 2.

[0117]Jadual 2. Ringkasan Aktiviti Sampel Berbeza.

Kandungan jadual tidak disertakan dalam sumber yang dibekalkan.

[0118]Nota: [Simbol kepentingan tidak diterbitkan semula dalam teks yang dibekalkan.] Berbanding dengan kumpulan kawalan kosong, P<0.05P < 0.05P<0.05.

 

Tafsiran Keseluruhan Dibentangkan dalam Pendedahan

[0119]Keputusan di atas menunjukkan bahawa verbascoside mempamerkan aktiviti pelembab yang luar biasa dengan tepat mengaktifkan mekanisme pembaikan penghalang kulit gelung tertutup yang lengkap.

Ia mula-mula bertindak pada lapisan basal untuk mempercepatkan pembaharuan sel epidermis dengan ketara dan pembezaan yang teratur, menyediakan blok binaan selular yang mencukupi untuk pembinaan halangan.

Ia kemudian menggalakkan pengukuhan persimpangan ketat dan struktur desmosomal antara keratinosit, mengukuhkan penambat fizikal antara sel dan meningkatkan ketumpatan penghalang dan kekuatan mekanikal.

Pada masa yang sama, ia secara berkesan mengaktifkan enzim utama metabolisme lipid dan mengisi semula matriks lipid antara sel, mengisi ruang "mortar" di antara "bata" untuk mengelakkan kehilangan air.

Akhir sekali, dengan mengawal selia ekspresi sintase asid hyaluronik, ia secara serentak meningkatkan kandungan asid hyaluronik dalam dermis dan epidermis, menangkap dan mengekalkan sejumlah besar air.

Ini membentuk gelung berfungsi lengkap yang merangkumi pembaharuan pada sumber, tetulang struktur, penambahan matriks dan penyimpanan air.

Ia dengan itu boleh mencapai urutan gelung tertutup "menggalakkan percambahan sel → mengukuhkan sambungan fizikal antara sel → menggalakkan pengeluaran lipid dan asid hyaluronik → menggalakkan penyembuhan luka."

Sumber tersebut menyimpulkan bahawa ia menghasilkan kesan penggunaan yang lebih baik daripada echinacoside daripada Cistanche dan gliserin humektan yang biasa digunakan dan boleh digunakan sebagai agen pelindung kulit dalam penjagaan kulit berfungsi dan produk topikal.

[0120]Penerangan di atas hanyalah penjelmaan khusus ciptaan.

Skop perlindungan ciptaan tidak terhad kepada penjelmaan ini.

Sebarang perubahan atau penggantian yang boleh difahami oleh seseorang yang mahir dalam bidang seni dalam skop teknikal yang didedahkan dalam ciptaan hendaklah termasuk dalam skop perlindungan ciptaan.

Sehubungan itu, skop perlindungan ciptaan hendaklah ditentukan oleh tuntutan.