Kesan Cistanche Glycosides Pada Fungsi Imun Tikus Model Penuaan akibat D-galaktosa

Hubungi: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mel:audrey.hu@wecistanche.com

〔Abstrak〕 Objektif:

Untuk mengkaji mekanisme imunologi kesan anti-penuaan Cistanche glycosides pada tikus penuaan yang disebabkan oleh D-galaktosa.Kaedah: Kaedah penggabungan 3 H-TdR digunakan untuk menentukan keupayaan transformasi limfosit, ujian merah neutral digunakan untuk menentukan fungsi fagositik makrofaj peritoneal tikus, kaedah imunofluoresensi digunakan untuk mengesan subset limfosit, dan radioimmunoassay digunakan untuk menentukan tahap IL-2 dalam darah periferi. , Surih kaedah pelepasan enzim NAG untuk mengukur aktiviti sel NK.Keputusan: Fungsi imun tikus penuaan yang disebabkan oleh D-galaktosa telah menurun dengan ketara, yang ditunjukkan dalam keupayaan transformasi limfosit, kandungan IL-2 darah periferal, sel T CD4 dan kandungan sel T CD8 ditambah, fagositik. fungsi makrofaj peritoneal, dan aktiviti sel NK. Mengurangkan (P<>cistanche glikosidaboleh meningkatkan keupayaan transformasi limfosit, kandungan IL-2 darah periferi, fungsi fagositik makrofaj peritoneal, aktiviti sel NK, kandungan sel T CD4 dan CD8 ditambah T (P<0.05). 0.="" 05).="">Kesimpulan: cistanche glikosida dengan ketara boleh meningkatkan fungsi imun tikus penuaan yang disebabkan oleh D-galaktosa, memulihkan atau mendekati keadaan tikus muda, dan mempunyai kesan melambatkan penuaan.

[Kata kunci]: Jumlah glikosida cistanche; D-galaktosa; model penuaan; imuniti

Cistanche glikosida:anti penuaan

Cistancheadalah ubat yang paling kerap digunakan dalam formula anti-penuaan dan awet muda. Cistanche total glycosides (GCS) ialah istilah umum untuk kelas glikosida phenylethanoid dalam cistanche dan merupakan aktiviti biologi utama yang diekstrak daripada cistanche penghasil garam di utara Komponen Xinjiang [1], GCS telah terbukti mempunyai anti-lipid. kesan peroksidasi [2], tetapi terdapat sedikit laporan penyelidikan mengenainyamekanisme imun anti-penuaan.

1. Bahan dan Kaedah

1. 1 Kumpulan haiwan dan perubatan

60 ekor tikus Kunming, jantan dan betina, berumur 3 bulan, seberat 18-21 g, disediakan oleh Bilik Haiwan Institut Produk Biologi, Kementerian Kesihatan. Tikus dalam setiap kumpulan ditempatkan di dalam bilik yang sama dalam sangkar yang berasingan, dan mereka bebas untuk makan dan minum. Haiwan tersebut dibahagikan secara rawak kepada tiga kumpulan: kumpulan kawalan belia, kumpulan model penuaan, dan kumpulan pentadbiran model, dengan 20 haiwan dalam setiap kumpulan. GCS telah diekstrak dan dikenal pasti oleh Jabatan Fitokimia, Sekolah Farmasi, Universiti Jiamusi mengikut kesusasteraan [1].

Tingkatkan Imunitisuplemen cistanche

1.2 Kaedah

Kumpulan muda disuntik dengan garam biasa secara subkutan di leher selama 30 hari setiap hari dan diberi air suam selama 15 hari dari hari ke-15. Tikus dalam kumpulan model penuaan disuntik dengan D-galaktosa (autoklaf) 100 mg/kg secara subkutan di belakang leher setiap hari. Berat badan selama 30 hari berturut-turut. Dalam kumpulan pentadbiran model, D-galaktosa 100 mg/kg berat badan disuntik secara subkutan di belakang leher setiap hari dan GCS 125 mg·kg-1·d-1 ditadbir pada masa yang sama masa dari hari ke-15, dan pentadbiran berterusan selama 15 hari. Semua haiwan telah dikorbankan pada masa yang sama pada hari ke-30, dan pelbagai indeks pemerhatian telah ditentukan.

1. 2. 1 Eksperimen transformasi limfosit

Suspensi sel limpa tetikus telah diselaraskan kepada kepekatan sel 2×106, dan Con A digunakan sebagai rangsangan untuk dikultur secara in vitro selama 5 hari, dan keupayaan transformasinya telah diuji dengan kaedah penggabungan 3 H-Td R. Keputusan dinyatakan sebagai indeks rangsangan SI (SI=kumpulan rangsangan/kumpulan kawalan ConA).

1. 2. 2 Fungsi fagositik makrofaj peritoneal tikus (ujian merah neutral [3])

Kumpulkan cecair peritoneal tetikusmakrofajpenggantungan secara aseptik. Selepas sentrifugasi, apungkan mendakan dalam medium kultur sel. Gunakan hemositometer untuk mengira dan melaraskan kepekatan sel larutan kepada 2×106. Letakkannya dalam inkubator 37 darjah selama 2 jam. , Buang sel supernatan dan tidak melekat. Ambil makrofaj dinding dan tambahkan 0.1 peratus garam fisiologi merah neutral kepada 37 darjah dan teruskan kultur selama 30 minit, buang merah neutral dan basuh berulang kali makrofaj dengan 37 darjah PBS, cairkan dengan 50 peratus asid asetik dan 50 peratus etanol, tetapkan 722 Spektrofotometer kolorimetrik pada panjang gelombang 540 nm, nilai penyerapan diukur A.

1. 2. 3 Pengesanan subset limfosit

Ambil 0.1 ml 1×107/mlpenggantungan limfosit, tambahkan 10 ul tetikus anti-tikus CD3, CD4, dan CD8 antibodi monoklonal masing-masing, gaul rata, inkubasi pada 4 darjah selama 30 minit, 1 peratus FC S dalam PBS (0. 2M, pH7.4) Cuci 3 kali, pengesanan sitometri aliran: sitometer aliran laser (FACScan, syarikat BD USA), laser argon, panjang gelombang pengujaan 488 nm, spektrum pengesanan FITC 480-630 nm, kiraan 800/s sel, 200,000 sel dalam jumlah. Hasilnya dianalisis dan direkodkan dengan komputer HP340 dan perisian profesional LYSI SⅡ.

1. 2. 4 Penentuan IL-2 dalam darah periferi oleh radioimmunoassay

Ambil 1 ml darah dari bola mata tikus dalam tabung uji. Selepas pembekuan, serum dipisahkan. Mengikut operasi kit, nombor CPM diukur di kaunter.

1. 2. 5 aktiviti sel NK

Ambil darah mata tikus secara aseptik dan tambah heparin untuk antikoagulasi. Rujuk literatur [4] untuk butiran. 1.3 Pemprosesan statistik Data eksperimen dinyatakan sebagai x±s, diproses oleh perisian S AS, dan dianalisis dengan analisis varians, ujian F dan ujian-t.

manfaat cistanche: Meningkatkan Imuniti

2. keputusan

2.1 Kesan GCS terhadap keupayaan transformasi limfosit dan subset sel T dalam setiap kumpulan tikus ditunjukkan dalam Jadual 1.

Jadual 1. Kesan GCS pada keupayaan transformasi limfosit dan subset sel T dalam setiap kumpulan tikus (n= 16,x±s)

Berbanding dengan Ⅰ: 1) P<0.05, 2)="" p.="" 05;="" compared="" with="" ⅱ:="" 2)="" p=""><0.05; the="" same="" as="" the="" table="">

2.2 Kesan GC pada fungsi fagositik, kandungan IL-2 dan aktiviti sel NK makrofaj peritoneal dalam setiap kumpulan tikus ditunjukkan dalam Jadual 2.

Jadual 2. Kesan GCS pada fungsi fagositik, aktiviti sel NK dan kandungan IL-2 makrofaj peritoneal dalam setiap kumpulan tikus (n= 16,x±s)

3. Perbincangan

Dalam eksperimen ini, fungsi fagositik makrofaj peritoneal dan aktiviti sel NK tikus model penuaan telah dikurangkan (P<0.05). gcs="" can="" increase="" the="" phagocytic="" function="" and="" nk="" cell="" activity="" of="" peritoneal="" macrophages="" in="" aging="" model="" mice=""><0.05), which="" is="" close="" to="" the="" youth="" model="" group.="" from="" this,="" it="" can="" be="" inferred="" that="" gcs="" can="">meningkatkan imuniti selular bukan spesifik badan dan fungsi pengawalan imun, danmeningkatkan Anti-tumor dan anti-jangkitanpenuaan badan adalah salah satu cara untuk melambatkan penuaan [4]. IL-2 ialah sitokin yang amat diperlukan untuk pembiakan dan pembezaan limfosit T, dan ia boleh mengawal selia fungsi limfosit, monosit-makrofaj dan sel NK. IL-2 boleh menggalakkan percambahan dan pembezaan limfosit T, mengawal seliatindak balas imun, mendorong aktiviti Tc, dan menggalakkan pengeluaran antibodi dan interferon- .Ia memainkan peranan penting dalam sistem imun. Dalam percubaan ini, kandungan IL-2 tikus model penuaan berkurangan (P<0.05). after="" gcs="" were="" given,="" the="" il-2="" content="" increased=""><0.05), which="" was="" close="" to="" the="" youth="" model="" group,="" indicating="" that="" gcs="" produced="" il="" by="" increasing="" t="" lymphocytes.="" -2,="" enhance="" the="" immune="" function="" of="" elderly="" mice="" and="" achieve="" the="" effect="" of="" delaying="" immune="" aging.="" the="" content="" of="" cd4+="" t="" cells="" and="" cd8+="" t="" cells="" decreased="" significantly="" with="" increasing="" age.="" the="" low="" t="" cell="" function="" was="" also="" manifested="" by="" the="" decline="" of="" specific="" antigen="" and="" mitogen="" con="" a,="" and="" the="" decline="" of="" the="" ability="" of="" t="" cells="" to="" divide="" repeatedly.="" in="" this="" experimental="" model,="" the="" lymphocyte="" transformation="" ability,="" cd4+="" t="" cell="" and="" cd8+="" t="" cell="" content="" of="" the="" mouse="" was="" reduced="" (p=""><0.05), and="" gcs="" increased="" the="" mouse="" lymphocyte="" transformation="" ability,="" cd4="" +="" t="" cell="" and="" cd8="" +="" t="" cell="" content="" (p=""><0.05). 05),="" close="" to="" the="" youth="" model="" group.="" it="" shows="" that="" gcs="" can="" make="" the="" body="" resist="" aging="" and="" tend="" to="" be="" younger="" by="" promoting="" the="" proliferation="" of="" lymphocytes="" and="">meningkatkan fungsi imun selular khusus tikus.

Meningkatkan Imuniti suplemen cistanche

4. Rujukan

1. Du Niansheng, Wang Hong. Pengasingan dan pengenalpastian phenoxyethanol glycosides daripada Cistanche [J]. Penyelidikan dan Pembangunan Produk Asli, 1993; 5(4): 7-8.

2. Li Linlin, Wang Xiaowen, Wang Xuefei, et al. Kesan peroksidasi anti-lipid dan anti-radiasi daripada jumlah glikosida Cistanche 〔J〕. Jurnal Cina Materia Medica Cina, 1997; 22(6): 364-367.

3. Xu Shuyun, Bian Rulian. Metodologi Eksperimen Farmakologi [M]. Edisi ke-2. Beijing: Rumah Penerbitan Kesihatan Rakyat, 1994: 1221.

4. Liu Xiongbo, Liu Caiyu, Yang Xiuyun, et al. Pengesanan aktiviti sel NK melalui kaedah pelepasan mikro-NAG [J]. Jurnal Sains Makmal Klinikal, 1996; 14(2): 66-67.