Perubatan Cina Komposisi Kimia Cistanche Dan Analisis Komponen Dalam Badan Ⅲ

Bab 2 Kajian kualitatif tentang komposisi kimia Cistanche deserticola

Cistanche ialah batang berdaging daun bersisik keringCistanche deserticola YC.Madan Cistanche tubulosa (Schenk) R.Wight. Ia adalah salah satu ubat-ubatan tradisional Cina yang terkenal untuk buah pinggang-yang. Ia mempunyai fungsibuah pinggang yang berkhasiat, menambah pati dan darah, dan melembapkan Ia mempunyai kesan julap dan sering digunakan untuk merawat mati pucuk, kemandulan, sakit pinggang dan lutut, kelemahan otot dan tulang, kekeringan usus dan sembelit, dll. Ia mempunyai kesan farmakologi seperti anti- demensia, penyakit anti-Parkinson, perlindungan daripada iskemia serebrum, dan peningkatan kebolehan pembelajaran dan ingatan. Untuk menjelaskan asas material bagikeberkesanan Cistanche deserticola, bab ini menggunakan HPLC dan LC-IT-TOF-MS untuk mencirikan secara menyeluruhkomponen kimia Cistanche. Berdasarkan ringkasan sistematik peraturan keretakan pelbagai jenis komponen kimia, sifat-sifat Cistanche deserticola dianalisis secara sistematik. Komposisi kimia, untuk menyediakan data yang kaya daripada sumber yang boleh dipercayai untukpenerangan yang mendalamdaripada sifat perubatanCistanche deserticoladalam vivo.

buy cistanche

BERAPA LAMA YANG DIPERLUKAN UNTUK CISTANCHE BERFUNGSI?

Bahagian 1 Bahan Eksperimen

1.Instrumen

Spektrometer jisim cecair Shimadzu HPLC-IT-TOF-MS (dilengkapi dengan 2 LC-20pam ADXR, pensampel automatik SIL-20AC, CTO-20Ketuhar lajur AC, pengesan UV SPD-M20A, DGU-20Mesin gas penyahcemaran A3R, CBM-20Pengawal, sumber ion ESI, Syarikat Shimadzu, Jepun), sistem penulenan air ultratulen Milli-Q (Syarikat Milipore, Amerika Syarikat): Neraca analitik elektronik Mettler ME204 ( Syarikat Mettler Toledo, Switzerland).

2. Reagen

Metanol gred kromatografi dan gred spektrometri jisim, asetonitril dan asid formik gred spektrometri jisim telah dibeli daripada Syarikat Thermo-Fisher (Pittsburgh, PA, Amerika Syarikat). Air itu adalah air ultratulen Milli-Q yang dibuat di makmal (Millipore, Bedford, MA, Amerika Syarikat). Selebihnya Reagen adalah semua gred analitik.

Salidroside, 6-deoxycatalpol, 8-asid epi-loganic, echinacoside, acteoside, isoside Verbascoside (isoacteoside,) dan pinoresinol- -D-glucopyranoside (pinoresinol- -D-glucopyranoside) kedua-duanya disediakan oleh kumpulan penyelidik Profesor Tu Pengfei di Makmal Utama Dadah Asli dan Biomimetik di Universiti Peking. Sarcoside F ( cistanosideF) dibeli daripada Chengdu Mansite Biotechnology Co., Ltd., cistanoside A (cistanoside A), 2'-acetylacteoside (2'-acetylacteoside), 2'-acetylpoliumoside (2'-acetylpoliumoside), cistanoside Polysideglucoside (poliumoside). ), cistanoside E (cistanosideE), isocistanoside E (isocistanosideE), cistanoside C (cistanosideC), isocistanoside C (isocistanosideC) dan cistanoside D (cistanosideD) semuanya dibeli daripada Shanghai Shidande Biotechnology Co., Ltd., tubuloside A (tubulosideA) dan tubuloside B (tubulosideB) telah dibeli daripada Chengdu Weikeqi Biotechnology Co., Ltd.

Bahagian 2 Kandungan eksperimen

1. Penyediaan sampel

1.1 Penyediaan bahan rujukan

Timbang dengan tepat amaun yang sesuai bagi pelbagai bahan rujukan dalam "Bahan Eksperimen Bahagian 1" di atas dan sediakan penyelesaian stok 10 mM dengan DMSO. Pipet dengan tepat 2 mL setiap larutan stok dan cairkan dengan 25% asetonitril untuk membuat larutan kawalan campuran 2 μM. 1.2 Penyediaan penyelesaian ujian

Ekstrak berair Cistanche deserticola telah dibuat oleh makmal kami, dan sampel itu disimpan di Pusat Penyelidikan Pemodenan Perubatan Tradisional Cina, Sekolah Perubatan Tradisional Cina, Universiti Perubatan Cina Beijing. Ambil 20 mg serbuk Cistanche deserticola, tambah 40 mL air untuk larut, vorteks dan campurkan, sentrifuge pada 10000 rpm selama 10 minit, dan ambil supernatan. Iaitu, penyelesaian ujian diperolehi.

3. Keadaan spektrometri jisim

Sumber ion Electrospray (ESI), mod pengimbasan adalah untuk mengimbas ion positif dan negatif secara serentak dan secara automatik mencetuskan spektrometri jisim pelbagai peringkat. Julat pengimbasan jisim MS'~MS' untuk ion positif ialah m/z50~800, dan untuk ion negatif ialah m/z100~1000. Voltan kebuk semburan ialah 4.5kV dan -3.5kV masing-masing: kadar aliran gas pengatoman (Nz) ialah 1.5Lmin; tekanan gas pengeringan ialah 110MPa; voltan pengesanan ialah 1.55 kV; suhu tiub nyahpelarut melengkung (CDL) dan modul pemanasan kedua-duanya adalah 200 darjah . Tekanan kebuk perlanggaran ialah 1.5e-Pa; tekanan perangkap ion ialah 2.8e-Pa; bilangan ulangan peringkat pertama positif dan negatif ialah 1, dan masa pengumpulan ion ialah 30 ms; bilangan ulangan peringkat kedua positif dan negatif ialah 2, dan masa pengumpulan ion ialah 20ms. ; Tenaga penceraian akibat perlanggaran (CID) ialah 50%.

Bahagian 3 Keputusan dan Perbincangan

Pemilihan lajur

Untuk mendapatkan pemisahan kromatografi yang lebih baik, kami menapis secara meluas lajur kromatografi daripada pengeluar dan spesifikasi yang berbeza, seperti lajur kromatografi ACEUltraCore 2.5 SuperC8 (3.0x150mm, 2.5 um, Advance Chromatography Technologies Ltd., Aberdeen, Scotland), Shiseido Capcell Core Ci8 ( 2.1 mm x 150mm, 2.7μm), lajur Waters Acquity UPLC HSS T3 (2.1 x 100 mm, 1.8 μm, Milford, MA, Amerika Syarikat) dan lajur Capcell Core ADME (2.1x150mm, 2.7μm, Shiseido Corporation, Jepun). Melalui perbandingan sistematik, didapati bahawa apabila menggunakan lajur kromatografi ADME Capcell Core (2.1x150mm, 2.7μm, Shiseido Co., Ltd., Jepun), setiap isyarat kromatografi boleh diasingkan dengan lebih baik (Rajah 3-1).

2. Pemilihan keadaan fasa cecair

Oleh kerana komponen kimia utamaCistanche deserticolaadalah phenylethanol glycosides, lignans, iridoid dan sebatian lain, ia secara amnya bertindak balas lebih baik di bawah keadaan ion negatif. Untuk mengenal pasti komponen kimia tahap rendah dalam ekstrak air Cistanche deserticola, adalah spekulasi bahawa asid mungkin perlu ditambah pada fasa mudah alih untuk meningkatkan kuasa. Oleh itu, percubaan ini menggunakan metanol air, asetonitril air, 0.1% metanol air asid formik dan 0.1% asetonitril air asid formik sebagai sistem fasa mudah alih untuk penyiasatan. Didapati bahawa 0.1% asid format asetonitril mempunyai kesan pemisahan terbaik, dengan bentuk puncak yang baik dan kapasiti puncak yang besar, jadi 0.1% air asid formik dan asetonitril telah dipilih sebagai fasa mudah alih. 3. Analisis kualitatif komponen kimia. Gunakan 19 bahan rujukan sedia ada untuk meneroka peraturan pemecahan spektrometri jisim pelbagai jenis sebatian dalam Cistanche deserticola. Bahan rujukan campuran ialah kromatogram PDA pada 340 nm pada lajur ADME dan carta BPC dalam mod ion positif dan negatif. Lihat Rajah 3-1. Kami menyemak literatur yang berkaitan melalui PubMed, RSC, CNKl, Springer, ScienceDirect, VIP, dan Wanfang, dsb., dan membina pangkalan data buatan sendiri bagi komponen kimia Cistanche deserticola. Berdasarkan perbandingan peraturan pemecahan spektrometri jisim dan masa pengekalan sebatian yang diketahui, kami mengenal pasti 45 sebatian dalam Cistanche deserticola secara awal. sebatian, termasuk 31 glikosida feniletanol, 9 iridoid, 3 glikosida benzil, dan 2 lignan, seperti ditunjukkan dalam Jadual 3-1.

buy cistanche

Dengan membandingkan masa kerahsiaan, spektrum MS dan spektrum MS bahan rujukan, sebatian 11, 12, 13, 17, 21, 22, 24, 25, 26, 28, 29, 32, 33, 36, 37, 38 secara berurutan Dikenal pasti secara tepat sebagai genipin, cistanchein F, cistancheoside E, echinaceaside, chrysantoside, cistanchein A, tuberosin A, larchresinol 4-0- -D glucoside, mullein Glycosides, isocannabinoid glycoside, pinoresin monomethyl ether glycoside, 2'acetyl verbacheside glikosida C, isocistancoside C, tuberosin B, dan cistanche glycoside D.

Percubaan ini menggunakan teknologi HPLC-IT-TOF-MS untuk menganalisis komponen kimia kompleks secara sistematik dengan cepat dan tepat dalam ekstrak air Cistanche deserticola, yang menyediakan asas untuk analisis kualiti komprehensif Cistanche deserticola dan penyelidikan tentang bahan farmakologi dalam vivo.

buy cistanche