Apocynin Memperbaiki Kerosakan Testis Terinduksi Monosodium Glutamat Oleh Penghalang Darah-Testis Yang Bermasalah Dan Parameter Tekanan OksidatifⅢ

4. Perbincangan

Dalam kajian ini, kesan penyembuhan APO pada kerosakan testis yang disebabkan oleh MSG telah dinilai oleh parameter biokimia, mikroskopik dan imunohistokimia. Tahap testosteron dan LH menurun dan tahap FSH meningkat, parameter tekanan oksidatif seperti tahap MDA meningkat, manakala tahap GSH dan SOD menurun dalam kumpulan MSG. Dalam kecederaan testis yang disebabkan oleh MSG, skor histopatologi dan bilangan tubul seminiferus dan spermatozoa yang rosak telah meningkat. Indeks proliferatif adalah rendah dan indeks apoptosis lebih tinggi dalam kumpulan MSG. Epitelium germinal tubulus seminiferus telah berkurangan ketebalannya.

Klik untuk jed cistanche untuk testosteron

Perubahan degeneratif tersebut telah diterbalikkan oleh pentadbiran APO. Kumpulan MSG menggambarkan penurunan dalam taburan ZO-1 dan tersekat sebagai protein simpang ketat penghalang darah-testis. MSG menjejaskan penanda tekanan oksidatif. Dalam kumpulan ini, terdapat peningkatan dalam pengagihan protein NOX-2, yang terlibat dalam sintesis ROS. Pemeriksaan ultrastruktur kumpulan MSG menunjukkan kerosakan yang ketara dalam sitoplasma sel epitelium germinal tubul seminiferus tubul seminiferus dengan persimpangan ketat yang dipisahkan. Analisis biokimia, histologi, imunohistokimia dan ultrastruktur menunjukkan bahawa parameter ini bertambah baik dengan rawatan APO dalam kumpulan MSG ditambah APO.

Kajian eksperimen telah menunjukkan bahawa pengambilan MSG secara lisan boleh menjadi toksik kepada pembiakan; Walau bagaimanapun, disebabkan oleh dos yang tinggi yang digunakan dalam kajian, kesan toksik pada sistem pembiakan akibat penggunaan MSG tidak mungkin diterjemahkan kepada penggunaan manusia [33,34] Dos harian MSG yang ditelan manusia dianggap antara 1200 dan 3000 mg/kg [35]. Dalam kajian ini, dos 120 mg/kg berat badan MSG digunakan untuk reka bentuk eksperimen, berdasarkan ekstrapolasi alometrik purata pengambilan harian bahan ini pada manusia [5].

Paksi hipotalamus-pituitari-gonadal (HPG) memainkan peranan penting dalam proses yang berkaitan dengan perkembangan dan kematangan sistem pembiakan lelaki. FSH adalah faktor dalam penyelenggaraan sintesis testosteron intragonadal dan spermatogenesis. LH memainkan peranan dalam perkembangan sistem alat kelamin lelaki dan proses penentuan jantina dengan merangsang sel Leydig [36]. Rangsangan menyebabkan sel Leydig merembeskan tahap testosteron yang diperlukan. Tahap testosteron yang betul dikawal oleh aktiviti GnRH melalui mekanisme maklum balas negatif [36].

Dengan mekanisme ini, paksi HPG berfungsi dengan cara terkawal [37,38]. Dalam beberapa kajian berasaskan populasi, hormon seks telah ditunjukkan mempengaruhi morfologi, kepekatan dan motilitas sperma. Dalam kajian pasangan subfertil, hubungan songsang ditemui antara LH dan motilitas dan morfologi sperma [39]. Dalam kajian klinikal, paras FSH didapati berkorelasi negatif dengan kepekatan sperma [40]. Dalam kajian eksperimen lain, selepas pemberian MSG, penurunan dalam motilitas sperma, kepekatan, dan tahap hormon LH telah didedahkan. Kajian juga menunjukkan bahawa MSG menyebabkan penurunan tahap hormon testosteron dan kepekatan sperma [34,41].

Dalam kajian kami sekarang, tahap FSH, LH, dan testosteron dalam kumpulan APO adalah serupa dengan kumpulan kawalan. Penurunan ketara secara statistik dalam hormon testosteron diperhatikan dalam kumpulan MSG. Peningkatan ketara dalam tahap hormon FSH diperhatikan dalam kumpulan MSG. Dalam kumpulan MSG tambah APO, tahap FSH adalah lebih rendah daripada kumpulan MSG. Walaupun penurunan dalam hormon LH diperhatikan dalam kumpulan MSG, tidak terdapat perbezaan statistik dalam hormon LH antara kumpulan eksperimen. MSG boleh merosakkan sel Leydig untuk rembesan testosteron. Penurunan tahap testosteron dan LH juga dikaitkan dengan kiraan sperma. Oleh itu, tahap testosteron dan LH yang rendah boleh dikaitkan dengan penurunan jumlah sperma dan morfologi sperma yang tidak normal [42].

Sebaliknya, tahap FSH yang tinggi menunjukkan bahawa terdapat gangguan dalam spermatogenesis menyebabkan isyarat FSH diubah. MSG telah ditunjukkan bahawa ia boleh menyebabkan gangguan dalam laluan hormon dalam hipotalamus [4]. Hasil daripada kajian kami, didapati bahawa pentadbiran MSG mengganggu paksi HPG dengan menjejaskan tahap FSH, LH, dan testosteron, serta morfologi testis dan sperma, kepekatan sperma, dan motilitas. Pentadbiran apocynin mengurangkan tahap testosteron, FSH, dan LH terjejas kepada paras yang hampir normal dan peningkatan tahap hormon ini juga menjejaskan parameter morfologi. SOD adalah enzim penting yang melindungi sel daripada kerosakan yang disebabkan oleh ion superoksida dalaman dan luaran [43].

MDA ialah aldehid yang dibentuk oleh radikal bebas semasa peroksidasi lipid dan merupakan penunjuk kedua-dua kerosakan membran sel dan keterukan kesan radikal oksigen pada sel reaktif. Pengurangan dalam SOD dan peningkatan dalam MDA boleh mencetuskan tekanan oksidatif, yang membawa kepada kerosakan sel dan kematian sel [24]. GSH terlibat dalam pengurangan ROS seperti hidrogen peroksida dalam sel [44]. NOX ialah sumber ROS dan apocynin dikenali sebagai perencat NOX [45].

Dalam kajian kecederaan testis yang disebabkan oleh MSG, tahap MDA dalam tisu testis meningkat dan tahap SOD menurun apabila MSG diberikan [4,46]. Dalam kajian lain, pengambilan MSG juga ditunjukkan untuk mengurangkan tahap GSH dalam tisu testis [4]. Dalam kajian di mana apocynin digunakan sebagai agen penyembuhan, ia menunjukkan bahawa apocynin mengurangkan tahap MDA, yang meningkat akibat kerosakan tisu dan menyebabkan peningkatan tahap GSH dan SOD dalam kumpulan kerosakan testis [27]. Dalam satu lagi kajian eksperimen model degenerasi testis yang disebabkan oleh hipoksia, pengaktifan NOX-2 dan paras MDA telah meningkat dan paras GSH telah menurun disebabkan oleh kesan hipoksia. Walau bagaimanapun, kerosakan tisu testis ditunjukkan dapat dikurangkan dengan penggunaan APO [47].

Kajian semasa kami menyimpulkan peningkatan dalam tahap MDA dengan penurunan tahap GSH dan SOD dalam kumpulan MSG. Kami boleh mencadangkan bahawa APO menambah baik parameter ini dalam kumpulan MSG tambah APO melalui perencatan NOX-2. Beberapa kajian praklinikal telah mendedahkan kesan toksik MSG pada banyak sistem organ, seperti hati, buah pinggang, dan sistem pembiakan [3]. Kajian eksperimen menyatakan bahawa MSG boleh menyebabkan ketidaksuburan kerana kesannya yang berbahaya pada ovari dan oosit [48]. Kesan toksik MSG pada testis dengan ketidakseimbangan hormon seks telah diperhatikan [34]. Dalam kajian yang sama, tahap penanda tekanan oksidatif telah meningkat dalam tisu testis tikus yang diberi MSG, dan morfologi testis dan morfologi sperma juga terjejas secara negatif oleh MSG [41].

Telah diperhatikan bahawa MSG membawa kepada degenerasi dalam morfologi testis dengan kesan negatif pada testosteron [4,49]. Dalam model kecederaan testis, penurunan dalam ketebalan epitelium germinal tubul seminiferus telah ditunjukkan [50,51]. Dalam model kecederaan testis yang disebabkan oleh MSG, ketebalan epitelium tubul seminiferus telah berkurangan [52]. Dalam kajian kami, ketebalan epitelium germinal tiub seminiferous kumpulan MSG telah menurun berbanding kumpulan eksperimen lain. Terdapat peningkatan dalam ketebalan epitelium germinal kumpulan MSG ditambah APO berbanding kumpulan MSG. MSG dinyatakan membawa kepada obesiti, sebagai pembuka selera [53]. Terdapat tanda tanya tentang sama ada penggunaan MSG boleh menjadi faktor risiko peningkatan pesat dalam wabak obesiti.

Dalam kajian kohort terbuka di kalangan orang dewasa Cina, menunjukkan bahawa mereka yang menggunakan MSG mempunyai indeks jisim badan yang lebih tinggi berbanding dengan mereka yang tidak menggunakan MSG [54]. Dalam kajian eksperimen lain, telah diperhatikan bahawa berat tikus yang diberikan MSG meningkat dan menjadikan mereka terdedah kepada obesiti [55,56]. Walau bagaimanapun, dalam kajian kami, tidak terdapat perbezaan yang signifikan secara statistik dalam berat badan antara kumpulan eksperimen, ditimbang setiap minggu semasa eksperimen. Dalam kajian berkaitan di mana MSG telah diberikan kepada tikus, penurunan telah diperhatikan dalam berat testis dalam kumpulan MSG berbanding dengan kumpulan kawalan [4,52]. Walau bagaimanapun, nisbah berat testis/berat badan kajian semasa kami, menunjukkan penurunan dalam kumpulan MSG berbanding kumpulan eksperimen lain, sebagai tidak signifikan secara statistik. Dalam kajian yang mengkaji kesan MSG pada kepekatan sperma, MSG didapati menyebabkan penurunan daya maju sperma [4,49,52].

Dalam model kerosakan testis yang lain, kesan kuratif apocynin pada parameter sperma telah diperiksa, dan peningkatan kepekatan sperma diperhatikan dalam kumpulan penyembuhan apocynin berbanding kumpulan kerosakan [27]. Dalam kajian kami, apabila membandingkan kiraan sperma antara kumpulan eksperimen, didapati kiraan sperma adalah paling rendah dalam kumpulan MSG, manakala kiraan sperma dalam kumpulan MSG tambah APO secara statistik lebih tinggi daripada kumpulan MSG. Dinyatakan bahawa penggunaan apocynin adalah selamat dalam kajian haiwan. Di samping itu, APO mempunyai kesan antioksidan dan anti-radang yang kuat dalam banyak model eksperimen [57]. Model kecederaan testis eksperimen melaporkan kesan apocynin pada pengurangan tekanan oksidatif [58,59].

Dalam kajian eksperimen berasaskan kemoterapi, kesan penyembuhan apocynin juga diserlahkan pada tisu testis. Dalam kajian ini, diperhatikan bahawa apocynin membawa kepada penurunan bilangan sel apoptosis dan peningkatan tahap testosteron [27,60]. Sebagai salah satu faktor ketidaksuburan lelaki, tekanan oksidatif membawa kepada disfungsi sperma. Kerosakan spermatozoon akibat tekanan oksidatif menjejaskan 30-80 peratus lelaki tidak subur [61]. Enzim dalam keluarga NOX bertanggungjawab untuk sintesis ROS selular, dan apocynin adalah perencat NOX [45]. Dalam model eksperimen kecederaan testis di mana apocynin digunakan sebagai agen penyembuhan, imunoreaktiviti NOX-2 tertinggi diperhatikan dalam kumpulan kecederaan testis. Rawatan APO menyimpulkan dalam penurunan bilangan sel imunopositif NOX-2 [27].

Data literatur mendedahkan bilangan terhad kajian kerosakan testis eksperimen yang menilai jumlah dan pengedaran NOX-2. Dalam kajian kami, imunoreaktiviti NOX{1}} adalah tertinggi dalam kumpulan MSG, dengan penurunan imunoreaktiviti dalam kumpulan MSG tambah APO berbanding kumpulan MSG. Tidak terdapat perbezaan yang ketara antara kumpulan APO dan kumpulan kawalan, yang menunjukkan imunoreaktiviti NOX-2 terendah. Apoptosis adalah kematian sel yang diprogramkan, yang penting untuk homeostasis tisu [62]. Peraturan apoptosis adalah faktor kritikal dalam pembangunan, pembezaan, dan fungsi sel kuman [61]. Pendedahan kepada faktor yang membawa kepada tekanan oksidatif memberi kesan negatif kepada spermatogenesis dengan menjejaskan struktur kromatin dalam spermatozoa secara negatif [63].

Lelaki yang tidak subur didapati mempunyai tekanan oksidatif dan sel apoptosis yang lebih tinggi dalam cecair mani mereka berbanding lelaki yang subur. Dalam model eksperimen kerosakan testis, peningkatan bilangan sel apoptosis dalam tisu testis yang rosak telah diterbalikkan oleh pentadbiran APO sebagai bahan kuratif [23,51]. Dalam kajian eksperimen kecederaan testis, apocynin telah ditunjukkan mempunyai kesan penyembuhan pada kerosakan DNA yang disebabkan oleh tekanan oksidatif yang disebabkan oleh NOX [64]. Begitu juga, dalam kajian kami, indeks percambahan telah menurun dalam kumpulan MSG, dengan peningkatan dalam indeks apoptosis.

Dalam kumpulan MSG ditambah APO, penurunan dalam indeks apoptosis dan peningkatan dalam indeks proliferatif telah dinilai. Penghalang darah-testis melindungi sel-sel kuman yang sedang berkembang terhadap persekitaran luaran dan memberikan sokongan kepada sel-sel kuman untuk membahagi dan berkembang, yang sangat penting untuk kesuburan [65]. Sel Sertoli, yang merupakan sel epitelium khusus yang terdapat dalam tubul seminiferus, membentuk asas penghalang darah-testis dengan persimpangan yang ketat. Occludin, ZO-1, ZO-2 dan ZO-3 ialah molekul yang terdapat dalam persimpangan ketat penghalang darah-testis. Protein ZO terlibat dalam mengikat protein occludin kepada aktin dalam sitoskeleton [66,67]. Telah diperhatikan bahawa spermatogenesis terjejas secara negatif, dan tubul seminiferus atropik terbentuk dalam model tetikus kalah mati occludin.

Kajian kami mendedahkan imunoreaktiviti tertinggi ZO-1 dan occludin dalam kumpulan kawalan dan kumpulan APO, manakala kumpulan MSG mempunyai imunoreaktiviti yang jauh lebih rendah. ZO-1 dan imunoreaktiviti occludin adalah lebih tinggi dalam kumpulan MSG tambah APO, berbanding kumpulan MSG. Pemeriksaan mikroskopik elektron penghantaran kajian eksperimen menggambarkan sel epitelium germinal testis yang merosot dan titisan lipid [41,54] dengan persimpangan ketat yang merosot dalam penghalang testis darah [68]. Dalam kajian kami, pemeriksaan mikroskopik elektron penghantaran mendedahkan ultrastruktur tubul seminiferus testis normal dalam kumpulan kawalan dan APO. Vakuolisasi, titisan lipid, dan degenerasi dalam persimpangan ketat penghalang testis darah terbukti dalam kumpulan MSG. Dalam kumpulan MSG plus APO, apocynin didapati mempunyai kesan penyembuhan pada tahap kerosakan ultrastruktur.

5. Kesimpulanpenggunaan

Kajian kami menyimpulkan dengan peranan pengawalseliaan APO, untuk pembentukan derivatif oksigen reaktif dan paksi HPG dalam kecederaan testis tikus yang disebabkan oleh MSG. APO mengekalkan keseimbangan antara indeks proliferatif dan apoptosis, memelihara integriti penghalang darah-testis, dan menyumbang kepada penyembuhan kerosakan tisu testis yang disebabkan oleh kerosakan oksidatif. Ia juga dianggap bahawa pentadbiran apocynin mungkin mempunyai kesan penyembuhan ke atas ketidaksuburan dengan membalikkan kesan berbahaya MSG pada kedua-dua pergerakan dan bilangan sperma.

Bagaimanakah Cistanche meningkatkan testosteron?

Cistanche adalah herba yang digunakan secara tradisional dalam perubatan Cina untuk meningkatkan tenaga, libido, dan kecergasan keseluruhan. Adalah dipercayai bahawa Cistanche boleh meningkatkan tahap testosteron dengan menghalang aktiviti enzim yang dipanggil aromatase, yang menukar testosteron kepada estrogen. Cistanche juga didapati dapat meningkatkan pengeluaran hormon luteinizing (LH) dalam badan. LH memainkan peranan penting dalam mengawal pengeluaran testosteron dalam testis. Dengan meningkatkan tahap LH, Cistanche secara tidak langsung boleh meningkatkan pengeluaran testosteron. Tambahan pula, Cistanche juga mengandungi beberapa fitokimia seperti echinacoside dan acteoside, yang mempunyai sifat antioksidan. Sebatian ini boleh membantu melindungi testis dan organ pembiakan lain daripada kerosakan oksidatif, dengan itu meningkatkan fungsinya dan meningkatkan pengeluaran testosteron. Secara keseluruhannya, mekanisme tepat yang Cistanche meningkatkan tahap testosteron tidak difahami sepenuhnya, tetapi ia berkemungkinan satu interaksi menghalang aromatase, meningkatkan pengeluaran LH, dan menyediakan sokongan antioksidan kepada sistem pembiakan.

Merve Acikel-Elmas 1,*, Salva Asma Algilani 1 , Begum Sahin 1 , Ozlem Bingol Ozakpinar 2 , Mert Gecim 2 , Kutay Koroglu 3 dan Serap Arbak 1

1 Jabatan Histologi dan Embriologi, Pusat Pengajian Perubatan, Universiti Acibadem Mehmet Ali Aydinlar, Icerenkoy Mah., Kayisdagi Cad. 32, Atasehir, Istanbul 34752, Turki

2 Jabatan Biokimia, Fakulti Farmasi, Universiti Marmara, Basibuyuk Yolu, 4/A, Basibuyuk, Istanbul 34854, Turki

3 Jabatan Histologi dan Embriologi, Pusat Pengajian Perubatan, Universiti Marmara, Basibuyuk Yolu No. 9 D:2, Maltepe, Istanbul 34854, Turki