Kesan Antioksidan Tindakan Kompleks Vitamin E dan Ethylthiosulfаnylate dalam Hati Dan Buah Pinggang Tikus Di Bawah Keadaan Tekanan Oksidatif Terinduksi Chrome(VI)

Bohdan Kotyk^1,*, Ruslana Iskra¹, Vira Lubunets²

Abstrak:Matlamat kajian kami adalah untuk menyiasat keberkesanan dan faedah kesan kompleks vitamin E dan ethylthiosulfanylate (ETS) pada keadaan sistem pro/antioksidan dalam hati danbuah pinggangtikus di bawah keadaan tekanan oksidatif yang disebabkan oleh Cr(VI). Tikus dibahagikan kepada 8 kumpulan.

Kumpulan yang diterima: I (kawalan) - penyelesaian fisiologi (150 ul) selama 7 hari; II – larutan minyak (1 ml) selama 14 hari; III, IV, VII, VIII - K2Cr2O7 (2.5 mg Cr(VI)/kg berat badan (bw)) untuk 7 (III, IV) dan untuk 14 (VII, VIII); V - vitamin E (20 mg/kg bb) selama 14 hari; VI, VII, VIII - vitamin E dalam kompleks dengan ETS (100 mg/kg bb) selama 14 hari. Keputusan melaporkan bahawa K2Cr2O7 menyebabkan tekanan oksidatif yang disebabkan oleh Cr(VI) disebabkan oleh pengaktifan proses peroksidasi lipid (LP). Tindakan Cr(VI) selama 7 hari menyebabkan pengaktifan pampasan sistem pertahanan antioksidan (AOS) dalam kedua-dua tisu. Walau bagaimanapun, tindakan Cr(VI) yang lebih lama disertai dengan pengurangan aktiviti enzim AOS dan kandungan GSH. Kesan kompleks vitamin E dan ETS mengurangkan keamatan tekanan oksidatif yang disebabkan oleh Cr(VI) dalam kedua-dua tisu tikus. Keputusan kami menunjukkan sifat antioksidan positif vitamin E dan ETS di bawah keadaan ketoksikan Cr(VI).

Kata kunci:tikus; sistem antioksidan; tekanan oksidatif; vitamin E; etilthiosulfаnylate; kalium bikromat; peroksidasi.

Kenalan:ali.ma@wecistanche.com

Klik untuk memasukkanbahasa Urduuntuk buah pinggang

1. Pengenalan

Penggunaan aktif kromium untuk tujuan perindustrian dan pertanian membawa kepada pengumpulan ketara sebatian yang mengandungi Cr dalam persekitaran [1-3]. Sebatian kromium ialah salah satu bahan pencemar yang paling biasa dalam ekosistem akuatik dan daratan [4-6]. Industri utama yang memerlukan penggunaan aktif sebatian yang mengandungi Cr ialah penyamakan kulit, pengawet kayu, industri kimpalan logam, penyaduran krom, kromat, dan pengeluaran Ferro kromat [1]. Kromium ialah logam semula jadi, kebanyakannya terdapat dalam dua bentuk berbeza: kromium trivalen (Cr(III)) dan kromium heksavalen (Cr(VI)). Cr(III) ialah peringkat terakhir pengoksidaan kromium. Bentuk kromium trivalen adalah biasa dalam semua sistem biologi, stabil secara termodinamik, dan mempamerkan sifat kuat untuk membentuk sebatian koordinasi. Bentuk heksavalen (Cr(VI)) mempamerkan sifat toksik dan karsinogenik yang kuat dan biasanya ditunjukkan sebagai sebatian kromat yang mengandungi oksigen (CrO42-) dan dikromat (Cr2O72-) ​​[1,7]. Ketoksikan tinggi sebatian Cr(VI) dikaitkan dengan keupayaan untuk mudah diserap dan diangkut dengan cepat ke dalam sel melalui saluran sulfat [8,9]. Kemudian Cr(VI) dikurangkan kepada Cr(III) dalam beberapa peringkat selepas penembusan ke dalam sel. Sebilangan besar spesies oksigen reaktif (ROS) dijana semasa proses pengurangan Cr(VI) [10,11]. Pengaktifan pembentukan ROS membawa, seterusnya kepada perkembangan tekanan oksidatif dan kerosakan tisu. Proses pengurangan Cr(VI) turut disertai dengan sitotoksisiti, genotoksisiti, kekarsinogenan dan apoptosis melalui modulasi gen pengawalseliaan p53 [12- 15]. Sistem AOS ialah penghalang utama dalam tindak balas tegasan oksidatif yang disebabkan oleh Cr(VI) [9]. Komponen enzimatik dan bukan enzim dalam sistem AOS, seperti flavoenzim yang bergantung kepada GSH dan NADPH, merangsang dan mempercepatkan pengurangan Cr(VI) yang sangat toksik kepada Cr(III) yang sangat toksik. Sebaliknya, enzim seperti SOD, CAT, GP, dan tripeptida GSH bukan enzimatik meneutralkan banyak ROS, yang terbentuk semasa pengurangan Cr(VI) [16,17]. Walau bagaimanapun, tekanan oksidatif akibat Cr(VI) yang berpanjangan membawa kepada kekurangan sumber sistem AOS dan mencetuskan kerosakan sel, tisu, dan organ oksidatif akibat peningkatan proses pro-oksidan [9,18]. Sebatian yang mengandungi Cr(VI), seperti kalium dikromat (K2Cr2O7) pada dos 8 mg/kg berat badan menyebabkan hepatotoksisiti akut pada tikus disebabkan oleh peningkatan proses nekrotik dan keradangan serta kehabisan sumber sistem AOS dalam tisu hati haiwan [19]. ]. Suntikan subkutaneus tunggal K2Cr2O7 pada dos 10 mg/kg juga mengakibatkan tekanan oksidatif yang disebabkan oleh Cr(VI) dan kerosakan pada tisu hati tikus, diikuti oleh perubahan degeneratif dalam histoarchitecture dan dilatasi sinusoid hepatik. Dos Cr(VI) yang serupa menyebabkan perubahan degeneratif dalam sel epitelium tiub, dilatasi sistik tubul, kesesakan saluran darah, tuangan hialin, dan dilatasi ruang Bowman dalambuah pinggangdaripada tikus [14]. Hepato- dan nefrotoksisiti yang disebabkan oleh K2Cr2O7 disertai oleh tekanan oksidatif yang disebabkan oleh Cr(VI) akut. Ketoksikan yang disebabkan oleh Cr(VI) merangsang, khususnya, pembentukan ROS, hiperaktivasi proses peroksidasi, perencatan aktiviti enzim antioksidan, penurunan GSH selular, serta pengurangan kumpulan sulfhidril bukan protein dan pengumpulan Cr(VI) hati danbuah pinggangdaripada tikus dan tikus [14,20,21]. Adalah dipercayai bahawa pengekalan status antioksidan adalah faktor penting untuk mengurangkan dan mencegah kesan negatif tekanan oksidatif yang disebabkan oleh Cr(VI) [14,22,23]. Peneutralan Cr(VI) dilakukan dengan pengurangan enzimatik kepada Cr(V) dan transformasi seterusnya menjadi garam yang mengandungi Cr dengan penyertaan GR dan NADPH. Antioksidan bukan enzim seperti vitamin E, asid askorbik, N-acetylcysteine, serbuk bawang putih, dan GSH mempunyai keupayaan untuk mengurangkan kerosakan oksidatif yang disebabkan oleh K2Cr2O7 [24,25]. Vitamin E dianggap sebagai antioksidan bukan enzimatik larut lemak yang paling berkesan, yang melindungi membran sel daripada peroksidasi yang disebabkan oleh radikal, merangsang pengaktifan enzim antioksidan, dan mengurangkan keamatan tekanan oksidatif yang disebabkan oleh ketoksikan yang disebabkan oleh logam berat. Tindakan vitamin E pada dos 100 dan 125 mg/kg berat badan masing-masing selama 2 dan 6 minggu, mengurangkan tahap proses peroksidasi yang disebabkan oleh K2Cr2O7- dan memulihkan kandungan GSH dan aktiviti SOD dalam hati danbuah pinggangdaripada tikus [14,19,22]. Vitamin E pada dos 125 mg/kg berat badan juga mempamerkan sifat antioksidan dan anti-radang dan mengurangkan keamatan ketoksikan yang disebabkan oleh Cr(VI) dalam hati danbuah pinggangdaripada tikus [22].

Ethylthiosulfanylate tergolong dalam kelas sebatian tiosulfonat. Thiosulfonates adalah analog sintetik bagi sebatian organosulfur aktif secara biologi semula jadi yang diperoleh daripada bawang putih, bawang, brokoli, dan kembang kol. Thiosulfonate lebih stabil daripada analog semula jadinya, mempamerkan pelbagai sifat biologi, dan dicirikan oleh ketoksikan yang rendah. Ramai penyelidik mengkaji sifat antikanser, anti-radang, antikulat, antimikrob dan imunomodulator thiosulfonat dalam beberapa tahun kebelakangan ini. Walau bagaimanapun, tiada kajian yang mencukupi tentang sifat antioksidan tiosulfonat. Adalah diketahui bahawa thiosulfonates dapat memodulasi faktor transkripsi, yang terlibat dalam pengaktifan gen sistem AOS [26,27]. Kesan antioksidan sebatian ini ditunjukkan dalam keupayaan untuk mengurangkan keamatan pengurangan kolam GSH dan pembentukan bahan reaktif asid thiobarbituric (TBARS) dalam hati tikus di bawah keadaan tekanan oksidatif [28]. Terdapat sangat sedikit yang diketahui tentang sifat antioksidan tiosulfonat di bawah tindakan toksik logam berat. Walau bagaimanapun, sebatian organosulfur semulajadi menunjukkan kesan antioksidan yang positif terhadap tegasan oksidatif yang disebabkan oleh Cr(VI) [23,29-31]. Kajian terdahulu kami juga menunjukkan bahawa ethylthiosulfanylate mempamerkan sifat antioksidan dan menghapuskan sebahagian kesan negatif K2Cr2O7-tekanan oksidatif yang disebabkan dalam tisu hati tikus [32].

Oleh itu, memandangkan sifat antioksidan positif vitamin E, serta tiosulfonat dan analog semula jadinya, kajian kami bertujuan untuk menyiasat keberkesanan dan faedah kesan kompleks vitamin E dan ethylthiosulfanylate pada keadaan sistem pro/antioksidan dalam hati danbuah pinggangtikus di bawah keadaan tekanan oksidatif yang disebabkan oleh Cr(VI).

2. Bahan-bahan dan cara-cara

Bahagian «Bahan dan Kaedah» telah disediakan dengan analogi dengan penerbitan kami sebelum ini [32].

2.1. Reka bentuk eksperimen.

Dalam kerja kami, kami menggunakan 40 ekor tikus jantan Wistar seberat 130- 140g. Kami membentuk 8 kumpulan haiwan (5 tikus setiap kumpulan): 1 kumpulan kawalan dan 7 kumpulan eksperimen. Semua tikus ditempatkan dalam keadaan standard dan menerima makanan standard dan air minuman ad libitum.

Tikus kawalan utuh dalam kumpulan I menerima satu suntikan garam fisiologi (150 µl) secara intraperitoneal sekali sehari selama 7 hari. Haiwan kumpulan eksperimen III dan IV telah dirawat secara intraperitoneal dengan K2Cr2O7 yang dilarutkan dalam 150 µl garam fisiologi (kepekatan Cr(VI) 2.5 mg/kg berat badan) selama 7 dan 14 hari, masing-masing.

Kumpulan II menerima intragastrik 1000 µl larutan minyak bunga matahari (tanda dagangan «Oleina»; DSTU 4492: ISO 14024) sekali sehari selama 14 hari dan sejurus selepas itu, garam fisiologi (150 µl) diberikan secara intraperitoneal sekali sehari selama 7 hari.

Kumpulan V: disuntik setiap hari secara intragastrik dengan larutan minyak vitamin E pada dos 20 mg/kg berat badan selama 14 hari dan kemudian selepas itu, garam fisiologi (150 µl) diberikan secara intraperitoneal sekali sehari selama 7 hari.

Kumpulan VI: telah disuntik setiap hari secara intragastrik dengan kompleks larutan minyak vitamin E [20 mg/kg berat badan] dan etilthiosulfanylate (ETS) [100 mg/kg berat badan] selama 14 hari dan kemudian serta-merta selepas itu disuntik setiap hari secara intraperitoneal dengan 150 µl larutan garam fisiologi selama 7 hari.

Kumpulan VII/Kumpulan VIII: menerima larutan minyak kompleks intragastrik vitamin E [20 mg/kg berat badan] dan ETS [100 mg/kg berat badan] selama 14 hari dan kemudian selepas itu menerima K2Cr2O7 intraperitoneal setiap hari pada dos 2.5 mg Cr(VI)/kg berat badan sehari selama 7 hari/14 hari.

Semua manipulasi dengan haiwan dalam kerja kami adalah konsisten dengan peruntukan Konvensyen Eropah untuk Perlindungan Haiwan Vertebrata yang Digunakan untuk Tujuan Eksperimen dan Saintifik Lain (Strasbourg, 1986) dan "Prinsip Etika Biasa untuk Eksperimen Haiwan" (Ukraine, 2001). Kebenaran untuk menjalankan penyelidikan diperoleh daripada Jawatankuasa Bioetika Institut Biologi Haiwan NAAS Lviv (Protokol № 80).

Kerja tersebut mengkaji kesan sebatian ETS (etil 4- aminobenzenethiosulfonate) yang baru disintesis dalam kompleks dengan vitamin E pada badan tikus. ETS telah disintesis di jabatan teknologi sebatian aktif biologi, farmasi, dan bioteknologi Universiti Kebangsaan "Politeknik Lviv" mengikut protokol yang diterangkan secara terperinci dalam kertas [33, 34].

Selepas pemenggalan kepala haiwan, yang berlaku di bawah anestesia thiopental, yangbuah pinggangtelah dikumpulkan. Semua prosedur dihidupkanbuah pinggangtelah dilakukan pada 4 darjah. Bahan kajian ialah homogenat buah pinggang tikus, yang disediakan pada 0.05 M Tris-HCl penimbal dengan pH 7.4 dalam nisbah 1 g tisu dan 9 ml penimbal (1:9, berat/isipadu ) dan kemudian disentrifugasi selama 15 minit pada 1000 g. Selepas sentrifugasi dalam supernatan yang diperoleh, kandungan GSH, tahap produk peroksidasi, dan aktiviti enzim antioksidan ditentukan.

2.1.1. Kumpulan haiwan.

Kumpulan haiwan telah dibandingkan mengikut skema berikut (Rajah 1). Kumpulan I ialah kawalan utuh berhubung dengan kumpulan eksperimen III dan IV, yang tidak menerima larutan minyak. Kawalan Kumpulan II berhubung dengan kumpulan eksperimen V, VI, VII, dan VIII, yang menerima larutan minyak. Kami merekodkan peratusan ( peratus ) perubahan dalam penunjuk untuk kumpulan eksperimen III dan IV berbanding kumpulan I (kawalan utuh). Kami juga merekodkan peratus perubahan dalam penunjuk untuk kumpulan eksperimen V, VI, VII, dan VIII berbanding kumpulan II (kawalan minyak). Pada peringkat akhir, kami menganalisis peratus perubahan dalam penunjuk kumpulan eksperimen III/IV berbanding kumpulan I (kawalan utuh) dan membandingkannya dengan peratus perubahan penunjuk kumpulan eksperimen VII/VIII berbanding kumpulan II (kawalan minyak).

2.2. Memproses.

2.1.1. Kepekatan LHP.

Pengukuran tahap LHP (hidroperoksida lipid) dilakukan secara tidak konsisten dengan kaedah pemendakan protein yang disebabkan oleh asid trikloroasettik dan lipid yang disebabkan oleh etanol.

pengekstrakan [35]. Ammonium thiocyanate berinteraksi dengan ekstrak etanol lipid dan memulakan tindak balas berwarna. Rakaman penyerapan produk berwarna dilakukan secara spektrofotometri (λ 480 nm). Tahap LHP (tisu SU/g) dikira sebagai perbezaan antara sampel kawalan dan eksperimen.

2.2.2 Kepekatan TBARS.

Menilai kepekatan TBARS (bahan reaktif asid thiobarbituric) adalah berdasarkan prinsip interaksi malondialdehid dan asid tiobarbiturik di bawah keadaan keasidan dan suhu tinggi [35]. Hasil interaksi malondialdehid dan asid tiobarbiturik ialah tindak balas warna. Rakaman penyerapan produk berwarna telah dilakukan secara spektrofotometri (λ 535 nm, dan λ 580 nm) dan tahap TBARS dikira sebagai tisu nmol MDA/g.

2.2.3. Aktiviti GP.

Pengukuran aktiviti enzimatik GP (glutathione peroxidase) dilakukan dengan kehadiran GSH sebelum dan selepas menambah butil hidroperoksida tertier [35]. Menilai

aktiviti GP adalah berdasarkan prinsip kadar pengoksidaan GSH. Kumpulan SH molekul GSH teroksida dengan kehadiran2-asid Nitrobenzoik. Anion dinitrophenyl terbentuk hasil daripada pengoksidaan GSH. Rakaman penyerapan produk berwarna dilakukan secara spektrofotometri (λ 412 nm) dan aktiviti GP dikira dalam nmol GSH / min. ×mg protein.

2.2.4. Aktiviti GR.

Pengukuran aktiviti enzimatik GR (glutathione reductase) dilakukan dengan kehadiran glutation teroksida dan NADPH [35]. Penilaian aktiviti GR adalah berdasarkan prinsip kadar pengurangan glutation teroksida. Rakaman penyerapan dilakukan secara spektrofotometri (λ 340 nm) selama 1 minit pada 37 darjah. Kadar penurunan kepupusan adalah penunjuk keamatan tindak balas. Aktiviti GR dikira dalam µmol NADPH/min. ×mg protein.

2.2.5. Kepekatan GSH.

Penilaian tahap GSH (glutathione terkurang) adalah berdasarkan prinsip pembentukan anion dinitrophenyl (produk berwarna) selepas pengikatan 2-asid Nitrobenzoik kepada kumpulan SH molekul GSH [36]. Nilai kepekatan GSH bergantung kepada keamatan tindak balas warna. Rakaman penyerapan produk berwarna telah dilakukan secara spektrofotometri (λ 412 nm) dan kandungan GSH dikira sebagai tisu mmol GSH/g.

2.2.6. Aktiviti SOD.

Pengukuran aktiviti enzimatik SOD (superoxide dismutase) dilakukan dengan kehadiran NADH dan phenazine methosulfate [36]. Penilaian aktiviti SOD adalah berdasarkan prinsip pengurangan nitroblue tetrazolium. Keamatan perencatan proses pengurangan nitroblue tetrazolium menunjukkan keamatan aktiviti enzim. Rakaman penyerapan dilakukan secara spektrofotometri (λ 540 nm) dan aktiviti SOD dikira dalam unit piawai setiap 1 mg protein.

2.2.7. Aktiviti CAT.

Pengukuran aktiviti enzimatik CAT (catalase) dilakukan dengan kehadiran garam molibdenum, yang berinteraksi dengan hidrogen peroksida [36]. Produk berwarna itu terbentuk hasil daripada tindak balas. Rakaman penyerapan produk berwarna dilakukan secara spektrofotometri (λ 410 nm) dan aktiviti CAT dikira dalam mmol/minit × 1 mg protein.

2.2.8. Kepekatan protein.

Kepekatan jumlah protein dalam homogenat tisu diukur dengan Kaedah Lowry [37] dengan menggunakan kit "Simko LTD" (Ukraine, Lviv). Pengukuran semua nilai penyerapan dilakukan pada spektrofotometer, "Unico" 1205 (AS).

2.3. Analisis statistik.

Semua data eksperimen telah dianalisis secara statistik oleh perisian Microsoft Excel menggunakan analisis varians sehala (ANOVA) dan ujian Tukey-Kramer. Semua nilai percubaan dikira sebagai nilai min (M) ± ralat piawai (SEM) dan dianggap sebagai signifikan secara statistik pada P <>

3. Keputusan dan perbincangan

Bahagian «Keputusan dan Perbincangan» telah disediakan dengan analogi dengan penerbitan kami sebelum ini [32].

3.1. Penanda tekanan oksidatif.

Kami mendapati bahawa pentadbiran intraperitoneal kalium dikromat selama 7 dan 14 hari membawa kepada peningkatan kandungan penanda tekanan oksidatif dalam tisu hati dan buah pinggang tikus jantan. Pendedahan kepada K2Cr2O7 pada dos 2.5 mg Cr(VI)/kg berat badan selama 7 (kumpulan III) dan 14 hari (kumpulan IV) menyebabkan peningkatan ketara kandungan TBARS dalam hati haiwan berbanding kumpulan I (kawalan) sebanyak 69 dan 75 peratus, masing-masing (Jadual 1). Tahap TBARS juga meningkat dengan ketara dalam tisu buah pinggang tikus kumpulan eksperimen III dan IV berbanding kawalan masing-masing sebanyak 41 dan 46 peratus. Dos Cr(VI) yang serupa membawa kepada peningkatan ketara kepekatan LHP dalam hati tikus kumpulan eksperimen III dan IV berbanding kumpulan I masing-masing sebanyak 112 dan 127 peratus. Tahap LHP juga meningkat dengan ketara dalam tisu buah pinggang tikus selepas 7 (kumpulan III) dan 14 hari (kumpulan IV) tindakan Cr(VI) berbanding dengan kumpulan kawalan masing-masing sebanyak 39 dan 56 peratus.

Sebab peningkatan dalam keamatan proses peroksidasi dalam hati dan buah pinggang tikus adalah Cr(VI) -disebabkan hiperaktivasi penjanaan radikal hidroksil dan superoksida. Pembentukan ROS yang disebabkan oleh Cr(VI) menyebabkan kerosakan pada struktur komponen lipid membran sel dan, akibatnya, menimbulkan peningkatan kandungan TBARS [19,20,38]. Perantaraan pengurangan Cr(VI) memasuki tindak balas seperti Fenton, berinteraksi dengan hidrogen peroksida, dan memulakan radikal hidroksil [19]. Menurut literatur, Cr(VI) meningkatkan keamatan penjanaan radikal superoksida dengan mengaktifkan kompleks enzim NADPH-oksidase [39] dan xanthine-xanthine oxidase [40].

Pentadbiran intragastrik vitamin E (kumpulan V) dan vitamin E dalam kompleks dengan ETS (kumpulan VI) selama 14 hari membawa kepada penurunan ketara dalam kandungan TBARS dalam hati haiwan berbanding kumpulan II masing-masing sebanyak 13 dan 16 peratus (Jadual). 1). Penurunan sedikit dalam tahap TBARS juga direkodkan dalam tisu buah pinggang tikus kumpulan eksperimen V dan VI berbanding kumpulan II masing-masing sebanyak 5 dan 3 peratus. Kandungan LHP telah menurun dengan ketara dalam kumpulan eksperimen V dan VI dalam hati tikus berbanding kumpulan II masing-masing sebanyak 12 dan 16 peratus. Terdapat juga penurunan ketara tahap LHP dalam tisu buah pinggang tikus kumpulan eksperimen yang serupa berbanding kumpulan II sebanyak 10 dan 8 peratus, masing-masing.

Kandungan TBARS dalam hati tikus kekal pada tahap penunjuk kumpulan II selepas 14 hari prarawatan kompleks dengan vitamin E dan ETS oleh aktin seterusnya Cr(VI) selama 7 hari (kumpulan VII). Kesan kompleks vitamin E dan ETS sebelum ini oleh tindakan Cr(VI) seterusnya selama 14 hari membawa kepada peningkatan tahap TBARS dalam tisu hati kumpulan VIII berbanding kumpulan II sebanyak 23 peratus . Walau bagaimanapun, peningkatan kandungan TBARS dalam tisu hati haiwan kumpulan VIII (23 peratus ) berbanding kumpulan II adalah 52 peratus lebih rendah daripada peratusan peningkatan kandungan TBARS dalam hati tikus kumpulan IV (75 peratus ) berbanding kumpulan I. .

Kepekatan TBARS meningkat dalam tisu buah pinggang tikus selepas 14 hari prarawatan kompleks dengan vitamin E dan ETS dengan tindakan seterusnya Cr(VI) selama 7 (kumpulan VII) dan 14 hari (kumpulan VIII) berbanding kumpulan II sebanyak 21 dan 31 peratus, masing-masing. Walau bagaimanapun, keamatan peningkatan kandungan TBARS dalam buah pinggang tikus kumpulan VII (21 peratus ) dan VIII (31 peratus) berbanding kumpulan II adalah sebanyak 25 dan 21 peratus lebih rendah daripada peratusan peningkatan tahap TBARS dalam homogenat buah pinggang kumpulan. III (46 peratus ) dan IV (52 peratus ) berbanding kumpulan I.

Prarawatan kompleks dengan vitamin E dan ETS oleh aktin Cr(VI) seterusnya selama 7 hari (kumpulan VII) dan 14 hari (kumpulan VIII) menyebabkan peningkatan kandungan LHP dalam tisu hati tikus berbanding kumpulan II sebanyak 17 dan 52 peratus , masing-masing. Walau bagaimanapun, peningkatan tahap LHP dalam hati tikus kumpulan VII (17 peratus ) dan VIII (52 peratus) berbanding kumpulan II adalah sebanyak 97 dan 75 peratus lebih rendah daripada peratusan peningkatan kandungan LHP dalam homogenat hati kumpulan III (114 peratus ) dan IV (127 peratus ) berbanding kumpulan I.

Kepekatan LHP meningkat dalam buah pinggang haiwan kumpulan VII dan VIII berbanding kumpulan II masing-masing sebanyak 16 dan 31 peratus.

Walau bagaimanapun, peningkatan kandungan LHP dalam buah pinggang tikus kumpulan VII (16 peratus ) dan VIII (31 peratus) berbanding kumpulan II adalah sebanyak 23 dan 25 peratus lebih rendah daripada peratusan peningkatan tahap LHP dalam tisu buah pinggang kumpulan III (39 peratus ) dan IV (56 peratus ) berbanding kumpulan I.

Data literatur melaporkan bahawa vitamin E dicirikan oleh sifat antioksidan yang berkesan, menghalang proses peroksidasi lipid, dan mengurangkan tahap ROS secara in vitro dan in vivo [22]. Pentadbiran oral vitamin E melemahkan hepatotoksisiti yang disebabkan oleh Cr(VI) dan mengurangkan kandungan TBARS dalam hati tikus [19]. Sebab penurunan dalam keamatan proses peroksidasi dalam tisu hati tikus mungkin juga merupakan sifat antioksidan bagi kumpulan lain sulf, yang merupakan komponen struktur molekul ETS [32,42,43]. Kumpulan berfungsi ini mempunyai sifat untuk mengurangkan kandungan LHP [41]. S-alkylthiosulfonates, yang merupakan analog struktur sintetik ETS, menghalang aktiviti sistem xanthine-xanthine oxidase dan penjanaan ROS [27]. Vitamin E adalah komponen penting dalam sitoplasma dan membran sel. Kesan antioksidan vitamin E menghalang pengaktifan tindak balas berantai pengautoksidaan lipid akibat peneutralan radikal peroksil dan alkoksida. Radikal peroksil juga bertindak balas lebih cepat dengan vitamin E berbanding dengan lipid membran sel [14].

Oleh itu, kesan toksik Cr(VI) membawa kepada peningkatan kandungan TBARS dan LHP dalam tisu hati dan buah pinggang haiwan. Walau bagaimanapun, kesan sebelumnya vitamin E dengan ETS mengurangkan keamatan proses peroksidasi dalam hati dan buah pinggang tikus di bawah tindakan tekanan oksidatif yang disebabkan oleh Cr(VI).

3.2. Sistem antioksidan glutathione.

Terdapat peningkatan dalam aktiviti GP dalam tisu hati tikus di bawah tindakan Cr(VI) selama 7 (kumpulan III) dan 14 hari (kumpulan IV) berbanding kumpulan I sebanyak 55 dan 15 peratus, masing-masing (Jadual). 2).

Pentadbiran intraperitoneal kalium dikromat selama 7 hari (kumpulan III) menyebabkan peningkatan kandungan GSH selular dalam tisu hati tikus sebanyak 12 peratus berbanding dengan kawalan (kumpulan I). Tahap GSH tidak berbeza daripada nilai kawalan dalam buah pinggang haiwan kumpulan III (K2Cr2O7 14 hari). Walau bagaimanapun, terdapat penurunan dalam kumpulan GSH dalam hati dan buah pinggang tikus selepas 14 hari tindakan Cr(VI) (kumpulan IV) berbanding kumpulan I sebanyak 34 peratus dan 36 peratus, masing-masing. Sebaliknya, sensitiviti tinggi tisu buah pinggang kepada ketoksikan yang disebabkan oleh Cr(VI) mungkin menjadi sebab ketidakaktifan GP dalam buah pinggang haiwan kumpulan IV [1, 16].

Penulis juga mencadangkan bahawa mekanisme penyahaktifan GP di bawah keadaan ketoksikan Cr(VI) dijalankan dengan melekatkan Cr(VI) pada tapak aktif enzim dan anjakan terus logam kofaktor dari tapak aktif [25].

Aktiviti GR tidak berubah dalam hati haiwan kumpulan III berbanding kawalan. Tetapi 14 hari pendedahan Cr(VI) menyebabkan penurunan aktiviti GR dalam tisu hati tikus haiwan sebanyak 17 peratus berbanding kumpulan I. Perencatan aktiviti GR juga diperhatikan dalam tisu buah pinggang haiwan selepas 7 (kumpulan III) dan 14 (kumpulan IV) hari suntikan K2Cr2O7 berbanding kumpulan I masing-masing sebanyak 45 dan 43 peratus.

Kami menganggap bahawa Cr(VI)-penurunan teraruh kandungan GSH mungkin menjadi sebab penindasan GR dalam kedua-dua tisu tikus [44-46]. Molekul GSH menyediakan peneutralan langsung radikal bebas, memainkan peranan penting dalam mekanisme perlindungan antioksidan sel [47], dan terlibat dalam proses pengurangan Cr(VI) [19]. Oleh itu, penurunan kandungan GSH dalam hati tikus yang terjejas oleh Cr(VI) mungkin akibat penggunaan intensif molekul GSH dalam proses peneutralan ROS dan radikal bebas di bawah keadaan tekanan oksidatif teraruh K2Cr2O7-.

Data literatur juga menerangkan mekanisme langsung perencatan aktiviti GR disebabkan oleh pengikatan khusus logam berat kepada pasangan tiol/tiolat redoks dan sisa histidin dalam pusat pemangkin bentuk enzim yang dikurangkan. Kemudian ion logam terikat menyebabkan perubahan dalam lenturan cincin isoalloxazine FAD dan hidrofobisiti persekitaran mikronya. Akibatnya, aktiviti enzimatik GR dihalang [48].

Pentadbiran vitamin E (kumpulan V) dan vitamin E dalam kompleks dengan ETS (kumpulan VI) menyebabkan peningkatan paras GSH dalam hati tikus berbanding kumpulan II sebanyak 15 dan 21 peratus, masing-masing. Kesan kompleks vitamin E dan ETS sebelum ini oleh tindakan Cr(VI) seterusnya selama 7 (kumpulan VII) dan 14 hari (kumpulan VIII) membawa kepada peningkatan kandungan GSH dalam tisu hati berbanding kumpulan II sebanyak 21 dan 23 peratus , masing-masing.

Kami tidak menemui perbezaan yang signifikan secara statistik dalam perubahan kandungan GSH dalam tisu haiwan selepas pemberian vitamin E dan vitamin E dalam kompleks dengan ETS. Kami memerhatikan hanya kecenderungan untuk meningkatkan tahap GSH dalam buah pinggang haiwan selepas rawatan selama 14 hari dengan vitamin E dan vitamin E dalam kompleks dengan ETS.

Menurut literatur, vitamin E mempamerkan sifat hepato dan nefroprotektif terhadap ketoksikan yang disebabkan oleh Cr(VI), memulihkan kandungan GSH, dan menyokong aktiviti enzim AOS [14, 19]. Pengarang juga melaporkan bahawa tiosulfonat bertanggungjawab untuk pengaktifan bergantung kepada Nrf2- unsur tindak balas antioksidan (ARE), yang mendorong pengaktifan enzim sistem pertahanan antioksidan dan penghapusan radikal bebas. Pengaktifan ARE yang dimediasi Thiosulfonate merangsang aktiviti pengekodan gen -GCS. Mungkin mekanisme yang sama terlibat dalam meningkatkan kandungan GSH di bawah tindakan ETS [26]. Data sastera juga menunjukkan bahawa rangsangan ARE mendorong ekspresi gen GR dan GS. Enzim ini memainkan peranan penting dalam sintesis dan pengurangan molekul GSH [49].

Molekul tiosulfonat juga mempunyai keupayaan untuk berubah menjadi mono-, di- dan trisulfida. Ada kemungkinan bahawa produk transformasi tiosulfonat yang mengandungi sulfur mungkin terlibat dalam biosintesis molekul GSH baru [29].

Prarawatan kompleks dengan vitamin E dan ETS oleh aktin Cr(VI) seterusnya selama 7 hari (kumpulan VII) dan 14 hari (kumpulan VIII) hanya menunjukkan kecenderungan kepada pemulihan aktiviti GP dan GR dalam hati tikus. Walau bagaimanapun, kami tidak menemui perbezaan yang signifikan secara statistik dalam kes ini.

Tindakan vitamin E khususnya (kumpulan V) dan dalam kombinasi dengan ETS (kumpulan VI) selama 14 hari membawa kepada pengaktifan GP dalam tisu buah pinggang haiwan berbanding kumpulan II sebanyak 19 dan 22 peratus, masing-masing. Kesan kompleks sebelum ini vitamin E dan ETS oleh tindakan seterusnya Cr(VI) selama 7 hari menyebabkan peningkatan dalam aktiviti GP sebanyak 38 peratus dalam buah pinggang tikus kumpulan VII berbanding kumpulan II (Jadual 2). Walau bagaimanapun, peningkatan aktiviti GP dalam buah pinggang tikus kumpulan VII (38 peratus) berbanding kumpulan II adalah 47 peratus lebih rendah daripada peratusan hiperaktivasi GP dalam tisu buah pinggang tikus kumpulan III (85 peratus) berbanding kumpulan I.

Sebaliknya, aktiviti GP telah ditindas sebanyak 16 peratus dalam tisu buah pinggang tikus selepas kesan sebelumnya vitamin E dalam kompleks dengan ETS selama 14 hari oleh tindakan seterusnya Cr(VI) selama 14 hari (kumpulan VIII) berbanding kumpulan II. Walau bagaimanapun, penurunan aktiviti GP dalam tisu buah pinggang haiwan kumpulan VIII (16 peratus) berbanding kumpulan II adalah 11 peratus lebih rendah daripada peratusan ketidakaktifan GP dalam buah pinggang tikus kumpulan III (27 peratus) berbanding kumpulan I. Sedikit peningkatan dalam aktiviti GR (8 peratus ) diperhatikan selepas 14 hari pendedahan kompleks kepada vitamin E dan ETS dalam tisu buah pinggang haiwan kumpulan VI berbanding kumpulan II.

Kesan kompleks vitamin E dan ETS sebelumnya oleh tindakan seterusnya Cr(VI) selama 7 (kumpulan VII) dan 14 hari (kumpulan VIII) menyebabkan penurunan aktiviti GR dalam buah pinggang tikus berbanding kumpulan II sebanyak 17 dan 36 peratus , masing-masing.

Walau bagaimanapun, keamatan penurunan aktiviti GR dalam tisu buah pinggang tikus kumpulan VII (17 peratus ) dan VIII (36 peratus) berbanding kumpulan II adalah sebanyak 28 dan 7 peratus lebih rendah daripada peratusan ketidakaktifan aktiviti GR dalam homogenat buah pinggang kumpulan III. (45 peratus) dan IV (43 peratus) berbanding kumpulan I.

Kami membuat hipotesis bahawa penstabilan separa aktiviti GP dan penurunan keamatan penindasan GR dalam buah pinggang tikus di bawah tindakan Cr(VI) telah dimediasi oleh kesan antioksidan vitamin E dan kompleks ETS. Keputusan kajian yang diterangkan di atas menunjukkan bahawa pendedahan sebelumnya kepada vitamin E dan ETS melemahkan keamatan proses LP yang disebabkan oleh Cr(VI) dalam buah pinggang tikus. Menurut literatur, peningkatan mendadak kandungan produk peroksidasi TBARS, LHP, dan protein disertai dengan gangguan aktiviti enzim AOS berkaitan GSH [50]. Ada kemungkinan kesan antioksidan kompleks vitamin E dan ETS menstabilkan aktiviti enzimatik GP dan GR dengan mengurangkan kandungan LHP dan TBARS dalam tisu buah pinggang haiwan.

Oleh itu, suntikan intraperitoneal K2Cr2O7 selama 7 hari membawa kepada pengaktifan pampasan sedikit GP dan peningkatan kandungan GSH dalam hati tikus. Rangsangan GP sedikit juga diperhatikan selepas 14 hari tindakan Cr(VI). Walau bagaimanapun, 14 hari pendedahan K2Cr2O7 menyebabkan penyusutan kumpulan GSH hepatik dan perencatan aktiviti GR. Penurunan kandungan GSH akibat Cr(VI) disingkirkan dalam tisu hati dengan prarawatan intragastrik kompleks vitamin E dan ETS. Tindakan Cr(VI) selama 7 hari membawa kepada pengaktifan pampasan GP dan penindasan GR dalam buah pinggang tikus. Sebaliknya, pendedahan K2Cr2O7 selama 14 hari menyebabkan ketidakaktifan GP, ​​GR, dan pengurangan kandungan GSH buah pinggang. Kesan kompleks vitamin E dan ETS sebelum ini melemahkan keamatan penyahaktifan GR dan menstabilkan aktiviti GP dalam tisu buah pinggang tikus di bawah keadaan tekanan oksidatif yang disebabkan oleh K2Cr2O7-.

3.3. Enzim antioksidan.

Suntikan intraperitoneal kalium dikromat selama 7 dan 14 hari membawa kepada penurunan dalam aktiviti SOD dalam tisu hati haiwan kumpulan III dan IV berbanding kumpulan I sebanyak 17 dan 33 peratus, masing-masing (Jadual 3). Pengaktifan SOD diperhatikan selepas 7 hari rawatan Cr(VI) dalam tisu buah pinggang tikus kumpulan III (21 peratus), tetapi 14 hari tindakan Cr(VI) menyebabkan penindasan aktiviti enzimatik SOD dalam buah pinggang haiwan kumpulan IV (18 peratus). ) berbanding kumpulan I.

Aktiviti CAT meningkat sebanyak 11 peratus selepas 7 hari pendedahan Cr(VI), tetapi 14 hari pentadbiran K2Cr2O7 disertai dengan penurunan aktiviti CAT sebanyak 13 peratus dalam tisu hati tikus kumpulan IV berbanding kumpulan I. Cr(VI ) ketoksikan selama 7 hari membawa kepada pengaktifan CAT (sebanyak 15 peratus ), tetapi ketoksikan K2Cr2O7 selama 14 hari menyebabkan penurunan aktiviti enzimatik CAT dalam tisu buah pinggang haiwan kumpulan IV berbanding kumpulan I.

Penulis melaporkan bahawa sebab pengaktifan SOD (hati dan buah pinggang) dan CAT (hati) dalam tisu tikus kumpulan III mungkin adalah overexpression gen antioksidan atau mekanisme pampasan sistem AOS terhadap tekanan oksidatif yang disebabkan oleh Cr(VI) [51 ,52].

Analisis data literatur juga menunjukkan bahawa Cr(VI) adalah perencat kuat aktiviti enzim SOD. Mungkin, data ini mungkin menjelaskan perencatan aktiviti SOD selepas aktin toksik Cr(VI) yang lebih lama dalam tisu tikus kumpulan IV (Cr(VI) selama 14 hari). Tindakan toksik Cr(VI) membawa kepada perencatan aktiviti enzimatik SOD dan kerosakan struktur molekul SOD akibat pengukuhan proses peroksidasi [53]. Logam berat, termasuk Cr(VI), mempunyai keupayaan untuk menyahaktifkan enzim AOS selepas mengikat terus ke tapak aktif enzim yang sepadan [54]. Selepas penyahaktifan SOD ditindas, pemisahan memproses O2- kepada H2O2. Akibatnya, rangsangan Cr(VI) terhadap pembentukan O2- dan perencatan proses penggunaan O2- mungkin menjadi punca ketidakaktifan enzim AOS, termasuk CAT [55].

Vitamin E khususnya (kumpulan V) dan dalam kombinasi dengan ETS (kumpulan VI) merangsang aktiviti CAT dalam tisu hati haiwan berbanding kumpulan I sebanyak 15 dan 33 peratus, masing-masing. Terdapat juga kemungkinan pengaktifan CAT dalam buah pinggang tikus kumpulan eksperimen V dan VI berbanding kumpulan II sebanyak 23 dan 28 peratus, masing-masing (Jadual 3).

Prarawatan kompleks dengan vitamin E dan ETS oleh aktin Cr(VI) seterusnya selama 7 hari (kumpulan VII) dan 14 hari (kumpulan VIII) menyebabkan peningkatan aktiviti CAT dalam tisu hati tikus berbanding kumpulan II sebanyak 17 dan 9 peratus , masing-masing. Pengaktifan CAT juga diperhatikan dalam buah pinggang tikus kumpulan VII (13 peratus) berbanding kumpulan II. Walau bagaimanapun, aktiviti enzimatik CAT dalam tisu buah pinggang haiwan kumpulan VIII kekal pada tahap penunjuk kumpulan II.

Data literatur melaporkan bahawa vitamin E menghalang pengurangan aktiviti enzimatik SOD, CAT, dan enzim AOS lain dalam tisu tikus dan tikus di bawah keadaan tekanan oksidatif [56,57]. Vitamin E juga melemahkan tekanan oksidatif yang disebabkan oleh Cr(VI) dalam testis tikus kerana memulihkan aktiviti SOD dan CAT dan mengurangkan keamatan proses LP [58].

Thiosulfonates terlibat dalam pengaktifan gen AOS yang bergantung kepada Nrf2-[26]. Rangsangan petunjuk Nrf2, seterusnya kepada peningkatan ekspresi gen pengekodan CAT [59]. Allicin, salah satu analog semula jadi thiosulfonates, terlibat dalam mengaktifkan gen yang bertanggungjawab untuk ekspresi SOD, CAT, dan Nrf2 [60]. Ada kemungkinan bahawa sifat antioksidan vitamin E, tiosulfonat, dan analog semulajadinya di atas mungkin menjadi sebab untuk memulihkan aktiviti enzimatik CAT di bawah tindakan tekanan oksidatif yang disebabkan oleh Cr(VI).

4. Kesimpulan

Ia sedikit diketahui tentang sifat antioksidan tiosulfonat. Terdapat juga maklumat yang mencukupi yang menerangkan sifat perlindungan tiosulfonat terhadap ketoksikan yang disebabkan oleh logam berat dalam tisu organisma haiwan. Kajian terdahulu kami menunjukkan bahawa prarawatan ETS mungkin berkesan dalam membetulkan ketoksikan hati yang disebabkan oleh Cr(VI) dalam organisma tikus. Kami menganggap bahawa kajian lanjut tentang sifat antioksidan ETS dalam kombinasi dengan sebatian antioksidan dan reduktor selular adalah penting untuk pemahaman yang lebih baik tentang peranan tiosulfonat dalam mekanisme pencegahan tekanan oksidatif yang disebabkan oleh logam berat.

Generalisasi keputusan yang diperoleh menunjukkan bahawa tindakan K2Cr2O7 membawa kepada hepato- dan nefrotoksisiti yang disebabkan oleh Cr(VI) disebabkan oleh peningkatan proses LP dan peningkatan pembentukan LHP dan TBARS dalam kedua-dua tisu haiwan. Sistem AOS melibatkan mekanisme pampasan untuk mengatasi tekanan oksidatif yang disebabkan oleh Cr(VI). Mekanisme ini disertai dengan pengaktifan SOD, CAT, dan GP dalam tisu buah pinggang, serta dengan rangsangan CAT, GP, dan pengumpulan GSH dalam hati tikus selepas 7 hari pendedahan Cr(VI). Walau bagaimanapun, tindakan Cr(VI) yang lebih lama selama 14 hari membawa kepada kehabisan sumber sistem AOS disebabkan penyahaktifan enzim antioksidan (SOD, CAT, GR, GP) dan pengurangan kolam GSH dalam tisu hati dan buah pinggang haiwan. Kompleks vitamin E dan ETS mempamerkan kesan antioksidan terhadap ketoksikan yang disebabkan oleh Cr(VI). Prarawatan intragastrik kompleks ini selama 14 hari ditunjukkan dengan penurunan proses LP yang disebabkan oleh Cr(VI) dalam hati dan buah pinggang tikus. Kesan sebelumnya vitamin E dan ETS juga menghalang pengurangan CAT dan GSH dalam hati, serta menghapuskan keamatan ketidakaktifan CAT, menstabilkan aktiviti GP dan GR dalam tisu buah pinggang haiwan di bawah keadaan oksidatif yang disebabkan oleh K2Cr2O7- tekanan. Vitamin E khususnya dan dalam kompleks dengan ETS menyekat ketinggian LHP dan merangsang CAT dalam kedua-dua tisu tikus. Kesan antioksidan sebatian ini juga membawa kepada pengumpulan GSH hepatik dan pengaktifan GP buah pinggang.

Keputusan yang diperoleh menunjukkan bahawa prarawatan vitamin E dan ETS sebahagiannya menstabilkan gangguan yang disebabkan oleh Cr(VI) dalam mekanisme tindakan sistem pertahanan antioksidan dalam buah pinggang tikus. Selain itu, hasil kajian kami mungkin menjadi sebahagian daripada latar belakang untuk mencipta kaedah pencegahan dan pembetulan yang berkesan terhadap keadaan antioksidan dan pro-oksidan dalam buah pinggang yang terjejas oleh tindakan tekanan oksidatif yang disebabkan oleh Сr(VI).

1 Jabatan Penyesuaian Biokimia dan Ontogenesis Haiwan; Institut Biologi Haiwan NAAS; Lviv; Ukraine

2 Jabatan Teknologi Sebatian Aktif Biologi; Farmasi dan Bioteknologi Universiti Kebangsaan Politeknik Lviv; Ukraine

Rujukan

1. Sahar, HO; Sherif, MS Kesan amelioratif minyak biji anggur pada nefrotoksisiti akibat kromium dan tekanan oksidatif pada tikus. Penyelidikan Zbornik Veterinar Slovenia 2020, 57, 123- 131.

2. Husain, N.; Mahmood, R. Taurine melemahkan kerosakan selular dan DNA yang disebabkan oleh Cr(VI): kajian in vitro menggunakan eritrosit dan limfosit manusia. Asid Amino2020, 52, 35-53.

3. Tian-Guang, Z.; Ya-Li, Z.; Lei, Li.; Dong-Hai, Z. Kesan antagonis nano-selenium pada ayam pedaging kecederaan hepatik yang disebabkan oleh keracunan Cr(VI) dalam laluan AMPK. Sains Alam Sekitar dan Penyelidikan Pencemaran Antarabangsa 2020, 27, 41585-41595.

4. Farag, AI; El-Sherry, ES Hepatotoksisiti akibat Chromium dan potensi kesan perlindungan selenium dalam tikus albino jantan dewasa: kajian histologi, imunohistokimia dan molekul. Med. J. Cairo Univ 2020, 88, 187- 196.

5. Shih-Chang, F.; Jui-Ming, L.; Kuan-I, L.; Feng-Cheng, T.; Kai-Min, F.; Ching-Yao, Y.; Chin-Chuan, S.; Hsin-Hung, C.; Ren-Jun, H.; Ya-Wen, C.Cr(VI) mendorong apoptosis yang bergantung kepada mitokondria pengantara ROS dalam sel neuron melalui pengaktifan laluan isyarat Akt/ERK/AMPK. Toksikologi In Vitro 2020, 65, 1- 16.

6. Fedala, A.; Adjroud, O.; Abid-Essefi, S.; Timoumi, R. Kesan perlindungan selenium dan zink terhadap gangguan tiroid yang disebabkan oleh kalium dikromat, tekanan oksidatif, dan kerosakan DNA dalam tikus Wistar hamil. Environ Sci Pollut Res Int 2021

7. Dia, X.; Li, P. Pencemaran air permukaan di Dataran Tinggi Loess Cina Tengah dengan Tumpuan Khas pada Kromium Heksavalen (Cr6 plus ): Kejadian, Sumber dan Risiko Kesihatan. Pendedahan dan Kesihatan 2020, 12, 1- 17, https://doi.org/10.1007/s12403-020-00344-x.

8. Chen, YQ; Murphy, A.; Sun H.; Costa M. Mekanisme molekul dan epigenetik karsinogenesis yang disebabkan oleh Cr(VI). Toksikologi dan Farmakologi Gunaan 2019, 377, 1-9,

https://doi.org/10.1016/j.taap.2019.114636.

9. Machado, AB; Caprara, JF; Diehl de Franceschi, I.; Linden, R.; Berlese, DB; Feksa, LR Kesan pendedahan kronik kepada kromium heksavalen dalam air pada parameter tegasan oksidatif dalam tikus Wistar. Acta Scientiarum Biological Sciences 2019, 41, 1- 10.

10. Fatma, M.; Raghda, A.; Mohamed, M. Potensi hepatoprotektif minyak pati Rosmarinus officinalis terhadap hematotoksisiti akibat kromium heksavalen, perubahan biokimia, histologi dan imunohistokimia pada tikus jantan. Sains Alam Sekitar dan Penyelidikan Pencemaran 2021, 28, 17445– 17456.

11. Wang, Y.; Wang, X.; Wang, L.; Cheng, G.; Zhang, M.; Xing, Y.; Zhao, X.; Liu, Y.; Liu, J. Mitophagy Dicetuskan oleh Kerosakan Fungsi Mitokondria dalam Buah Pinggang Ayam Terdedah kepada Cr(VI). Penyelidikan Unsur Surih Biologi 2021, 199, 703-711.

12. Zheng, X.; Li, S.; Li, J.; Lv, Y.; Wang, X.; Wu, P.; Yang, Q.; Tang, Y.; Liu, Y.; Zhang, Z. Kromium heksavalen mendorong apoptosis buah pinggang dan autophagy melalui gangguan keseimbangan dinamik mitokondria dalam tikus. Ekotoksikologi dan Keselamatan Persekitaran 2020, 204, 1-9.

13. Yang, D.; Yang, Q.; Fu, N.; Li, S.; Han, B.; Liu, Y.; Tang, Y.; Guo, X.; Lv, Z.; Zhang, Z. Heksavalen kromium disebabkan disfungsi jantung melalui gangguan Sesn2-pengantara fungsi mitokondria dan bekalan tenaga. Chemosphere 2021, 264, 1- 10.

14. Balakrishnan, R.; Satish Kumar, CS; Rani, MU; Srikanth, MK; Boobalan, G.; Reddy, AG Penilaian peranan perlindungan -tokoferol terhadap hepatotoksisiti akibat radikal bebas dan nefrotoksisiti akibat kromium dalam tikus. Indian Journal of Pharmacology 2013, 45, 490-495.

15. Zhang, Y.; Bian, H.; Mungkin.; Xiao, Y.; Mitophagy terlalu aktif yang disebabkan oleh Xiao, F. Cr(VI) menyumbang kepada kehilangan mitokondria dan sitotoksisiti dalam hepatosit L02. Jurnal Biokimia 2020, 477, 2607-2619.

16. Saidi, M.; Aouacheri, O.; Saka, S.; Tebboub, I.; Ailene, L. Kesan perlindungan Nephron Curcuma pada kerosakan oksidatif dan tekanan oksidatif dalam tikus di bawah keracunan kromium sub-kronik. Int. J. Biosci 2019, 15, 241-250.

17. Li, J.; Zheng, X.; Ma, X.; Xu, X.; Du, Y.; Lv, Q.; Li, X.; Wu, Y.; Matahari, H.; Yu, L.; Zhang, Z. Melatonin melindungi daripada kecederaan jantung akibat kromium(VI) melalui mengaktifkan laluan AMPK/Nrf2. Jurnal

Biokimia Tak Organik 2019, 197, 1- 10.

18. Sains Langsung.

19. Shati, AA Kesan amelioratif vitamin E pada hepatotoksisiti akibat kalium dikromat dalam tikus.Jurnal Universiti King Saud - Sains2014, 6, 181- 189.

20. Khalaf, AA;Hassanen, EI;Ibrahim, MA;Tohamy, AF;Aboseada, MA;Hassan, HM;Zaki, AR

Asid Rosmarinic melemahkan kerosakan oksidatif hepatik dan buah pinggang yang disebabkan oleh kromium dan kerosakan DNA pada tikus. Jurnal Toksikologi Biokimia dan Molekul 2020, 34, 1- 12.