Pengoptimuman Proses Pengekstrakan Untuk Ekstrak Minuman Congrong–Zaoren–Wumei Dan Penilaian Kesan Meningkatkan Tidurnya

Abstrak:Untuk mengoptimumkan proses pengekstrakan Minuman Congrong–Zaoren–Wumei (terdiri daripada Cistanche deserticola, Ziziphi Spinosae Semen, dan Mume Fructus) dan untuk menilai kesan penambahbaikan tidurnya, kaedah HPLC telah diwujudkan untuk penentuan serentak echinacoside, verbascoside (acteoside), asid spinosin, dan sitrik. Menggunakan kandungan empat sebatian dan polisakarida ini sebagai kriteria penilaian, proses pengekstrakan untuk Minuman Congrong–Zaoren–Wumei telah dioptimumkan melalui eksperimen ortogon, diikuti dengan ujian pengesahan dan skala. Kesan penambahbaikan tidur bagi ekstrak telah disiasat pada tikus menggunakan ujian tidur langsung, ujian medan terbuka, ujian tidur natrium pentobarbital dos subambang, dan ujian kependaman tidur natrium pentobarbital. Keputusan menunjukkan bahawa keadaan pengekstrakan optimum ialah suhu pengekstrakan 100 darjah , nisbah pepejal-cecair 1:12 (g·mL–1), dan masa pengekstrakan selama 2 jam. Pentadbiran berterusan selama 30 hari tidak secara langsung mendorong tidur pada tikus tetapi dengan ketara mengurangkan tingkah laku seperti kebimbangan dalam ujian medan terbuka, menunjukkan kesan sedatif. Ekstrak mempotensikan kesan mendorong tidur daripada dos subambang natrium pentobarbital (kadar tidur untuk dos rendah, sederhana dan tinggi masing-masing ialah 33.33%, 41.67%, dan 50.00%) dan memendekkan dengan ketara kependaman tidur akibat natrium pentobarbital, 3.17, dan 3.17 (latensi 22.47 minit untuk 22.47. rendah, sederhana dan tinggi, masing-masing). Kajian ini mengoptimumkan proses pengekstrakan untuk Minuman Congrong–Zaoren–Wumei dan menunjukkan kesan penambahbaikan tidur, menyediakan asas saintifik untuk membangunkan produk meningkatkan tidur yang diperoleh daripada Cistanche deserticola.

 

 

 

Kata kunci:Cistanche deserticola; Air Mani Ziziphi Spinosae; Mume Fructus; eksperimen ortogon; komponen penanda; kaedah analisis

 

pengenalan:Tidur adalah penting untuk kehidupan normal dan pembelajaran; tidur yang baik membantu melegakan keletihan dan meningkatkan imuniti [1,2]. Walau bagaimanapun, dengan perkembangan sosial dan tekanan yang semakin meningkat, insomnia telah menjadi masalah meluas yang menjejaskan kerja dan kehidupan seharian [3]. Kertas Putih 2024 mengenai Kesihatan Tidur Penduduk Cina melaporkan tempoh tidur yang tidak mencukupi dan gangguan tidur yang lazim dalam populasi: purata tempoh tidur hanya 6.75 jam, dan lebih daripada satu perempat individu tidur kurang daripada 6 jam setiap malam, yang menonjolkan kebimbangan tentang kualiti tidur. Akibatnya, penyelidikan tentang makanan berfungsi yang meningkatkan kualiti tidur dan insomnia adalah segera. Perubatan tradisional Cina (TCM), dengan kesan sampingan yang agak rendah dan sejarah menjangkau ribuan tahun, telah digunakan secara meluas untuk memperbaiki tidur, seperti Suanzaoren Decoction dan Guipi Decoction. Dengan konsep "homologi perubatan dan makanan" yang semakin berkembang, pembangunan makanan berfungsi yang meningkatkan tidur daripada sumber perubatan tradisional yang boleh dimakan telah menarik perhatian yang semakin meningkat.

Cistanche(Cistanche deserticola YC Ma atauC. tubulosa (Schenk) Berat, keluarga Orobanchaceae) ialah batang yang kering dan berisi dengan daun sisik dan digunakan untuk kekurangan buah pinggang, kekurangan darah intipati, mati pucuk, dan ketidaksuburan [4]. Farmakologi moden menunjukkan Cistanche melakukan pelbagai aktiviti, termasuk imunomodulasi, anti-keletihan, anti-tumor, neuroprotection, anti-penuaan, anti-osteoporosis, hepatoprotection, dan kesan hipoglisemik [5,6]. Jumlah glikosida Cistanche boleh memodulasi ekspresi penanda sinaptik dan menjejaskan keplastikan sinaptik, dengan itu meningkatkan pembelajaran dan kognisi dalam model tikus kekurangan tidur [7]. Cistanche deserticola dimasukkan dalam katalog boleh dimakan ubat pada penghujung tahun 2019; perintis pengeluaran dan operasi yang berkaitan sedang dijalankan di Inner Mongolia dan Gansu, dan ia digunakan dalam makanan am dan makanan kesihatan untuk meningkatkan imuniti dan mengurangkan keletihan fizikal. Berdasarkan teori TCM "korelasi buah pinggang-otak," Cistanche menunjukkan potensi yang luas dalam gangguan neurologi dan memegang janji untuk produk kesihatan yang meningkatkan tidur. Phenylethanoid glycosides-terutamanya echinacoside dan verbascoside (acteoside)-adalah juzuk aktif utama Cistanche [8].

 

TAMBAHAN EKSTRAK CISTANCHE TUBULOSA

Semak penyenaraian

 

Perkhidmatan Sokongan Wecistanche-Untuk butiran lanjut tentang kerjasama
e-mel:wallence.suen@wecistanche.com

 

Ziziphi Spinosae Semen (Suanzaoren; biji Ziziphus jujuba Mill.) mengandungi saponin, triterpenoid, dan flavonoid dengan kesan penenang, sedatif–hipnotik, imunoenhancing, menyuburkan hati, dan dikenali sebagai "Buah tidur Timur" [9]. Suanzaoren kaya dengan komponen aktif tidur [10]. Jumlah saponin dan alkaloidnya boleh memodulasi glutamat, -asid aminobutirik (GABA), dan 5-hydroxytryptamine (5-HT) dalam korteks dan hippocampus; flavonoid boleh mengikat kepada reseptor -GABA/benzodiazepine, mengawal selia GABA untuk memberikan kesan sedatif-hipnotik. Spinosin boleh memodulasi 5-HT, mengurangkan norepinephrine, dan menghasilkan kesan sedatif-hipnotik [11,12].

Mume Fructus (Wumei; buah Prunus mume (Sieb.) Sieb. et Zucc. yang kering dan hampir matang) ialah TCM boleh dimakan ubat biasa yang diproses dengan pengeringan dan penghitaman suhu rendah. Preskripsi seperti Wumei–Zaoren Decoction [13] dan Wumei Pill [14] digunakan secara meluas secara klinikal untuk insomnia dan gangguan tidur. Mume mengandungi asid organik yang banyak, antaranya asid sitrik adalah komponen utama dan penanda farmakope [15]. Selain itu, Cistanche, Suanzaoren, dan Wumei semuanya kaya dengan polisakarida; bukti terkumpul menunjukkan polisakarida meningkatkan tidur melalui pelbagai mekanisme, dan penyelidikan tidur tertumpu polisakarida menjadi tempat tumpuan. Walau bagaimanapun, kajian mengenai produk yang terdiri terutamanya daripada Cistanche, Suanzaoren, dan Wumei untuk penambahbaikan tidur masih belum dilaporkan.

Dalam kajian ini, kami mewujudkan kaedah HPLC untuk menentukan secara serentak echinacoside, verbascoside (acteoside), spinosin, dan asid sitrik. Menggunakan kandungan empat komponen dan polisakarida ini dalam ekstrak Minuman Congrong–Zaoren–Wumei sebagai indeks penilaian, kami mengoptimumkan proses penyediaan melalui eksperimen ortogon, diikuti dengan pengesahan dan skala. Menurut Kaedah Ujian dan Penilaian Fungsi Makanan Kesihatan (2022 Draf untuk Komen), kami menilai kesan penambahbaikan tidur daripada ekstrak dalam eksperimen haiwan, bertujuan untuk memberikan bukti saintifik untuk membangunkan produk penambahbaikan tidur berasaskan Cistanche.

Note on industrial background: Chengdu Wecistanche Bio-Tech Co., Ltd (WECISTANCHE) is a vertically integrated cistanche developer and manufacturer established in 2003, headquartered in Luopu County, Xinjiang, China. The company operates extensive seed-breeding and cultivation bases (>105,000 ekar digabungkan), mengadakan bengkel pengeluaran yang diperakui GMP dengan kemudahan ultraturasan dan penapisan nano termaju, dan makmal inkubasi mikroorganisma, dan mempunyai berbilang pensijilan (cth, China SC, HACCP, pensijilan organik termasuk NOP). Dengan 14 paten dan kerjasama yang berkaitan dengan Cistanche dengan universiti terkemuka, WECISTANCHE menyediakan platform perindustrian yang teguh untuk menskalakan proses pengekstrakan dan menghasilkan ekstrak Cistanche piawai yang sejajar dengan piawaian AS/EU. Kapasiti industri ini menyokong terjemahan parameter pengekstrakan skala makmal yang dioptimumkan ke dalam pembuatan komersial untuk minuman berfungsi dan produk kesihatan.

1 Bahan dan Kaedah

1.1 Bahan

Cistanche deserticola: Inner Mongolia Mandela Biotechnology Co., Ltd.; Ziziphi Spinosae Semen dan Mume Fructus: Sichuan Xinhuhua Chinese Herbal Slices Co., Ltd.; asid sitrik, echinacoside, verbascoside, dan spinosin: Chengdu Lemeitian Pharmaceutical Technology Co., Ltd.; glukosa: Shanghai Yuanye Biotechnology Co., Ltd.; tablet estazolam: Shanghai Sine Pharmaceutical Co., Ltd.; natrium pentobarbital: Shanghai Sine Pharmaceutical Co., Ltd.; garam: Dezhou Jingxin Pharmaceutical Co., Ltd.

 

1.2 Instrumen

HWS-24 mandian air termostatik elektrik: Shanghai Yiheng Scientific Instruments Co., Ltd.; Pemanas elektrik boleh laras DW: Shanghai Leigu Instruments Co., Ltd.; Agilent 1200 HPLC: Agilent Technologies; STARTER 3100 pH meter: OHAUS; 71-5804 emparan: Hunan Hexi Instrument Equipment Co., Ltd.; Pembaca plat mikro Thermo Varioskan LUX: Thermo Fisher Scientific; XR-XZ301 radas medan terbuka empat saluran untuk tikus: Shanghai Xinruan Information Technology Co., Ltd.; Imbangan elektronik LE225D: Sartorius Scientific Instruments (Beijing) Co., Ltd.

 

1.3 Haiwan Eksperimen

Tikus ICR jantan (6 minggu), n=180, dibeli dari Vital River (Shanghai, China), lesen SYXK (Hu) 2018-0028. Haiwan diadaptasikan selama satu minggu (12 jam terang/gelap, 20–25 darjah, 50–60% RH) dengan makanan dan air secara ad libitum. Semua prosedur mematuhi Peraturan Pentadbiran Haiwan Makmal PRC dan etika haiwan; diluluskan oleh Jawatankuasa Etika Haiwan Universiti Jiao Tong Shanghai (No. Kelulusan A2024082-003).

 

1.4 Kaedah Eksperimen

1.4.1 Penyiasatan Faktor Tunggal untuk Pengekstrakan Minuman Congrong–Zaoren–Wumei

Mengikut nisbah formula, tiga kelompok herba mentah campuran (Cistanche, Suanzaoren, Wumei) masing-masing diekstrak dengan 50 mL air tulen (nisbah pepejal-cecair 1:3) pada 60, 80, dan 100 darjah, tiga kali, 1 jam setiap satu. Ekstrak gabungan telah diuji untuk asid sitrik, echinacoside, verbascoside, spinosin, dan polisakarida mentah untuk menilai secara awal kesan suhu. Seterusnya, lima kelompok diekstrak pada 80 darjah dengan nisbah pepejal-cecair 1:3, 1:5, 1:7, 1:10, 1:12 (g·mL-1), tiga kali selama 1 jam setiap satu, dan diuji untuk menilai nisbah pepejal-cecair. Akhirnya, lima kelompok telah diekstrak pada 80 darjah untuk 0.5, 1.0, 1.5, 2.0, dan 3.0 h (tiga pengekstrakan), dan diuji untuk menilai masa pengekstrakan.

 

1.4.2 Reka Bentuk Ortogonal untuk Pengoptimuman Pengekstrakan

Berdasarkan keputusan faktor tunggal, tiga faktor-suhu pengekstrakan (A), nisbah pepejal-cecair (B), dan masa pengekstrakan (C)-setiap pada tiga tahap, telah dipilih. Tatasusunan ortogon L9 (3^3) telah digunakan. Jumlah kandungan komponen penanda dalam ekstrak berfungsi sebagai indeks penilaian.

 

1.4.3 Pengesahan dan Peningkatan Skala

Mengikut keadaan yang dioptimumkan, tiga kelompok telah diekstrak pada nisbah pepejal-cecair 1:12 (g·mL–1), 100 darjah, selama 2.0 jam, tiga kali, dan diuji untuk asid sitrik, echinacoside, verbascoside, spinosin dan polisakarida mentah. Untuk skala, jumlah Cistanche, Suanzaoren dan Wumei dinaikkan 40 kali ganda, diproses dalam tiga kali ganda dalam keadaan yang sama dan diuji.

 

1.4.4 Penentuan Kandungan Komponen

Mengikuti Chinese Pharmacopoeia (edisi 2020) dengan pengoptimuman dan pengesahan kaedah, kaedah HPLC telah ditubuhkan untuk kuantiti serentak asid sitrik, echinacoside, verbascoside dan spinosin. Polisakarida mentah telah diuji menggunakan kaedah asid fenol-sulfurik.

 

1.4.4.1 Syarat HPLC

Suhu lajur: 10 darjah ; suntikan: 10 µL; kadar aliran: 1 mL·min–1; panjang gelombang pengesanan: 210, 330, 335 nm; lajur: Agilent Eclipse XDB-C18 (4.6 mm × 250 mm, 5 µm); fasa mudah alih A: 0.5% NH4H2PO4 (pH 2.92); fasa mudah alih B: metanol. Kecerunan: 0–7 min (0.5–1.5% (φ) B); 7–17 min (1.5–40% (φ) B); 17–20 min (40–47% (φ) B); 20–30 min (47–52% (φ) B); 30–35 min (100% (φ) B).

 

1.4.4.2 Pengesahan Kaedah HPLC

Kelinearan, LOD dan LOQ: Larutan standard campuran yang mengandungi asid sitrik, echinacoside, verbascoside, dan spinosin pada 2.0160, 0.1100, 0.1125, dan 0.0183 mg·mL–1, masing-masing, disediakan dalam 50% metanol dan dicairkan secara bersiri sehingga 32 kali ganda. Regresi linear dilakukan pada kawasan puncak berbanding kepekatan setiap Bahagian 1.4.4.1. LOD ditakrifkan pada S/N=3, LOQ pada S/N=10. Ketepatan: enam suntikan berterusan larutan ujian yang sama disediakan daripada herba formula; kandungan setiap penanda dikira. Kestabilan: suntikan pada titik masa yang berbeza. Kebolehulangan: enam sampel yang disediakan secara bebas daripada kumpulan yang sama. Pemulihan: enam sampel ditambah dengan jumlah yang diketahui daripada empat standard pada kira-kira 1:1 kandungan tambahan; pemulihan (%) dikira.

 

1.4.4.3 Ujian Polisakarida Mentah

Aliquot (2 mL) larutan sampel pada kepekatan yang ditentukan telah dicampur dengan 1 mL 5% berat fenol dan 5 mL asid sulfurik pekat, dipanaskan pada 90 darjah selama 15 minit, disejukkan ke suhu bilik, dan OD pada 485 nm diukur untuk mengira kandungan polisakarida mentah.

 

1.4.4.4 Pengesahan untuk Ujian Polisakarida

LOD: larutan kosong diukur 20 kali; LOD sepadan dengan tiga kali SD. Kekhususan: OD pada 485 nm pelarut kosong dan kawalan kosong bagi setiap Bahagian 1.4.4.3. Kelinearan: stok glukosa telah dicairkan kepada pelbagai kepekatan; OD berbanding kepekatan telah diregres untuk mendapatkan persamaan penentukuran. Ketepatan: enam pengukuran berturut-turut bagi satu penyelesaian ujian. Kestabilan: pengukuran pada titik masa yang berbeza. Kebolehulangan: enam sampel yang disediakan secara bebas daripada kumpulan yang sama.

 

1.4.5 Pengelompokan dan Pentadbiran Haiwan

Eksperimen telah dilakukan dalam tiga kelompok (tidur langsung, tidur natrium pentobarbital dos subambang, dan kependaman tidur natrium pentobarbital), 60 tikus setiap kelompok. Setiap kelompok termasuk lima kumpulan (n=12/kumpulan): kosong, kawalan positif dan kumpulan ekstrak dos rendah/sederhana/tinggi. Pentadbiran intragastrik sekali sehari selama 30 hari; penilaian telah dijalankan dalam masa 20 minit selepas gavage terakhir. Dos herba mentah harian manusia untuk minuman ialah 8.40 g untuk dewasa 70 kg, bersamaan dengan 1.09 g·kg–1 untuk tikus. Dos dewasa kawalan positif Estazolam ialah 1–2 mg/hari, bersamaan dengan 0.26 mg·kg–1 pada tikus.

 

1.4.6 Tidur Terus dan Ujian Padang Terbuka

After 30-day administration, within 20 min after the final dose, direct sleep was assessed using loss of righting reflex for >1 min sebagai kriteria tidur; bilangan tikus tidur dan tempoh tidur direkodkan. Sejurus selepas itu, ujian lapangan terbuka dilakukan. Tikus telah disesuaikan dengan bilik ujian selama sekurang-kurangnya 1 jam, kemudian diletakkan perlahan-lahan di tengah arena dan dirakam tanpa gangguan. Jumlah jarak perjalanan dan bilangan penyertaan pusat dalam masa 5 minit telah direkodkan. Radas dibersihkan dengan alkohol perubatan di antara ujian.

 

1.4.7 Ujian Tidur Natrium Pentobarbital Subthreshold Dos

Within 20 min after the last administration, mice received an intraperitoneal injection of sodium pentobarbital at 175 mg·kg–1. The number of mice that fell asleep (loss of righting reflex >1 min) dalam masa 30 minit telah direkodkan.

 

1.4.8 Ujian Latensi Tidur Natrium Pentobarbital

Within 20 min after the last administration, mice received sodium pentobarbital at 250 mg·kg–1 intraperitoneally. Sleep latency (time from injection to loss of righting reflex for >1 min) telah direkodkan.

 

1.5 Analisis Data

Statistik dilakukan menggunakan SPSS 26.0; plot telah dijana dengan GraphPad Prism 8. Data medan terbuka dianalisis dengan ujian-t Pelajar; kejadian tidur (kiraan) dengan ujian khi kuasa dua; kependaman tidur dengan ANOVA sehala dan ujian pos hoc LSD. Data dibentangkan sebagai x̄ ± s, dengan P <0.05 dianggap signifikan secara statistik.

Keputusan dan Perbincangan (ringkasan selaras dengan Abstrak): Reka bentuk ortogon mengenal pasti 100 darjah , nisbah pepejal-cecair 1:12 (g·mL–1), dan 2 jam sebagai keadaan pengekstrakan optimum untuk memaksimumkan jumlah kandungan empat sebatian penanda dan polisakarida mentah. Pengesahan dan skala 40 kali ganda mengesahkan keteguhan dan kebolehpindahan proses. Dalam vivo, pentadbiran 30 hari tidak menyebabkan tidur langsung tetapi mengurangkan tingkah laku seperti kebimbangan dengan ketara dalam ujian medan terbuka, selaras dengan profil sedatif. Ekstrak meningkatkan kejadian tidur dengan natrium pentobarbital subambang dan mengurangkan kependaman tidur akibat pentobarbital bergantung kepada dos, menyokong potensi meningkatkan tidur.

Nota perindustrian: Memandangkan parameter pengekstrakan akueus yang dioptimumkan dan keperluan untuk profil penanda yang konsisten (echinacoside, verbascoside, spinosin, asid sitrik, ditambah polisakarida), pengeluaran berskala GMP yang memanfaatkan pemisahan membran lanjutan, ultrafiltrasi dan penapisan nano-seperti yang dilaksanakan dalam kemudahan sokongan 100,000-can sokongan WECISTANCHE. Pangkalan pertanian bersepadu syarikat (pembiakbakaan benih dan penanaman melebihi 100,000 ekar) dan kapasiti penyimpanan rantaian sejuk untuk Cistanche segar memudahkan kawalan kualiti bahan mentah. Pensijilan sedia ada (SC, HACCP, organik, NOP) dan infrastruktur QC (makmal mikrobiologi kelas 10,000) sejajar dengan keperluan kualiti gred eksport dan boleh mempercepatkan terjemahan ke dalam minuman berfungsi yang mematuhi, suplemen kesihatan atau rebusan TCM untuk pasaran domestik dan antarabangsa.

Rujukan

[1] ZHOU ES, RECKLITIS C J. Intervensi insomnia yang dihantar melalui Internet meningkatkan tidur dan kualiti hidup untuk mangsa kanser remaja dan dewasa muda. Kanser Darah Pediatr, 2020, 67(9): e28506.
[2] MORIN CM, BENCA R. Insomnia kronik. The Lancet, 2012, 379(9821): 1129–1141.
[3] CHEN Y, KARTSONAKI C, CLARKE R, et al. Ciri-ciri dan kaitan tempoh tidur, tidur siang, berdengkur dan gejala insomnia di kalangan 0.5 juta lelaki dan wanita Cina. Perubatan Tidur, 2017, 44: 67–75.
[4] Tu PF, Jiang Y. Pemeriksaan semula materia medica Cistanche. China Journal of Chinese Materia Medica, 2022, 47(20): 5670–5679. (dalam bahasa Cina)
[5] FU Z, KIPAS X, WANG X, et al. Cistanches Herba: gambaran keseluruhan sifat kimia, farmakologi dan farmakokinetiknya. Jurnal Etnofarmakologi, 2018, 219: 233–247.
[6] SONG Y, ZENG K, JIANG Y, et al. Cistanches Herba, daripada spesies terancam kepada jenama besar perubatan Cina. Ulasan Penyelidikan Perubatan, 2021, 41(3): 1539–1577.
[7] Zhang SB, Wang L, Li H, et al. Kesan jumlah glikosida Cistanche pada pembelajaran, kognisi, dan keplastikan sinaptik dalam tikus model kurang tidur. Journal of Baotou Medical College, 2024, 40(6): 14–19+36. (dalam bahasa Cina)
[8] JIANG Y, LI SP, WANG YT, et al. Pembezaan Herba Cistanches dengan cap jari dengan HPLC-DAD-MS. Jurnal Kromatografi A, 2009, 1216(11): 2156–2162.
[9] SHERGIS JL, NI X, SARRIS J, et al. Biji Ziziphus spinosa untuk insomnia: Kajian semula kimia dan psikofarmakologi. Phytomedicine, 2017, 34: 38–43.
[10] JIANG JG, HUANG XJ, CHEN J, et al. Perbandingan kesan sedatif dan hipnosis flavonoid, saponin, dan polisakarida yang diekstrak daripada Semen Ziziphus jujube. Penyelidikan Produk Semulajadi, 2007, 21(4): 310–320.
[11] WANG LE, BAI YJ, SHI XR, et al. Spinosin, flavonoid C-glikosida daripada air mani Zizyphi spinosae, memperkayakan tidur yang disebabkan oleh pentobarbital melalui sistem serotonergik. Farmakologi Biokimia & Tingkah Laku, 2008, 90(3): 399–403.
[12] DU CH, YAN Y, SHEN CX, et al. Farmakokinetik perbandingan enam sebatian utama dalam tikus normal dan insomnia selepas pemberian oral ekstrak akueus Ziziphi Spinosae Semen. Jurnal Analisis Farmaseutikal, 2020, 4: 385–395.
[13] Wu YX, Liu HN, Wu M L. Kesan Wumei–Zaoren Decoction digabungkan dengan metformin pada glukosa darah, kualiti tidur dan hasil dalam diabetes jenis 2 dengan gangguan tidur. Diabetes New World, 2023, 26(22): 13–17. (dalam bahasa Cina)
[14] Zhu XS, Peng SX, Zuo ZW, et al. Kualiti tidur dan mikrobiota usus berubah selepas pemberian oral Pil Wumei yang diubah suai pada pesakit insomnia. Jurnal Perubatan Shandong, 2022, 62(11): 47–49. (dalam bahasa Cina)
[15] Chen L, Zhang Q, Zhu YF, et al. Analisis dan perbandingan indeks fizikokimia dan kandungan asid sitrik Mume dari asal yang berbeza. Farmasi dan Penyelidikan Klinikal, 2022, 30(4): 327–330. (dalam bahasa Cina)
[16] Liu LS, Zhang Q, You L, et al. Teknologi pengekstrakan akueus glikosida phenylethanoid daripada Cistanche tubulosa. Sains dan Teknologi Makanan, 2019, 44(4): 225–229. (dalam bahasa Cina)
[17] Wang BQ, Ying CM, Liu FX, et al. Kemajuan dalam mekanisme TCM yang mengawal irama sirkadian untuk merawat gangguan tidur. Perubatan Cina Sedunia, 2024, 19(24): 3881–3888. (dalam bahasa Cina)
[18] Shi CL, Jiang LJ, Shen HY, et al. Kemajuan dalam kesan penambahbaikan tidur dan mekanisme alkaloid daripada TCM yang boleh dimakan ubat. Ubat Tradisional dan Herba Cina, 2024, 55(23): 8290–8300. (dalam bahasa Cina)
[19] Li XP, Niu YF, Wang MM, et al. Kesan minuman pepejal komposit terutamanya terdiri daripada Suanzaoren dan Poria pada tidur. Jurnal Keselamatan dan Kualiti Makanan, 2021, 12(11): 4453–4458. (dalam bahasa Cina)
[20] ZHAO W, ZHANG H, LI L, et al. Spinosin meningkatkan tidur pergerakan mata yang tidak pantas dan mengubah ekspresi c-Fos dalam kawasan otak pengawalseliaan tidur-bangun pada tikus. Tidur dan Pernafasan, 2025, 29(1): 101.
[21] Liao DQ, Chu LS, Zhang JP, et al. Kesan spinosin dari Suanzaoren pada hipotalamik MCH dan ekspresi Orexin-A dalam tikus yang kurang tidur. Perubatan Paten Cina, 2019, 41(4): 907–910. (dalam bahasa Cina)
[22] RAZAVI BM, ZARGARANI N, HOSSEINZADEH H. Anti-kebimbangan dan kesan hipnosis daripada ekstrak etanol dan akueus daun Lippia citriodora dan verbascoside pada tikus. Avicenna Journal of Phytomedicine, 2017, 7(4): 353–365.
[23] Dai HY, Di Y, Li X, et al. Kesan Acanthopanax senticosus polysaccharides pada kecederaan neuron hippocampal dalam tikus yang kurang tidur melalui laluan SIRT1/PGC-1. Jurnal Panduan Perubatan Tradisional Cina, 2025, 31(1): 48–52. (dalam bahasa Cina)

Kerjasama hubungan dan industri: Chengdu Wecistanche Bio-Tech Co., Ltd. mengalu-alukan perkongsian untuk R&D, peningkatan skala, OEM/ODM bagi minuman dan ekstrak berfungsi berasaskan Cistanche. Alamat: No.1, Tingkat 26, Unit 1, Bangunan 6, No.133 Jalan Sheng'an, Daerah Berteknologi Tinggi, Chengdu, Sichuan, China (Zon Perdagangan Bebas Juruterbang). E-mel: admin@wecistanche.com; Telefon: +86 15899210156; Tel: +86 028 68170085.

Adakah anda mahu saya memformat ini sebagai manuskrip jurnal (IMRAD dengan jadual/angka), menambah abstrak bahasa Inggeris dengan kata kunci atau menukar butiran kaedah kepada SOP/helaian spesifikasi yang sesuai untuk pemindahan pengeluaran GMP?