Kapsul Berasaskan Cistanche Mengurangkan Prostatitis Bukan Bakteria Kronik dalam Tikus Dengan Memodulasi Mikrobiota Usus, Metabolit Serum, Dan Laluan Isyarat SPHK1/S1P1/PI3K/Akt

3.5 Analisis Metabolomik Serum CBC dalam Tikus EAP

3.5.1 Analisis Statistik Multivariate Metabolomik Fecal

Analisis komponen utama (PCA) mendedahkan pemisahan kumpulan yang jelas di bawah mod ion positif di kalangankumpulan CBC biasa, model dan dos tinggi, denganKumpulan CBC mengelompok lebih dekat dengan kumpulan biasadan lebih jauh daripada kumpulan model. Di bawah mod ion negatif, pertindihan separa diperhatikan antara kumpulan normal dan model, manakala sampel yang dirawat CBC masih menunjukkan diskriminasi yang baik (Rajah 5).

Analisis diskriminasi kuasa dua separa terkecil (PLS-DA) mengesahkan kesan pengelasan yang kuat merentas ketiga-tiga kumpulan di bawah kedua-dua mod pengionan. TheUjian pilih atur 200 kalimengesahkan kebolehpercayaan model, dengan apintasan Q² di bawah 0.05, menunjukkan tiada overfitting. Trend menurun dalamnilai R² dan Q²sepanjang paksi-X mengesahkan lagi kestabilan model (Rajah 6).

TEH FORMULA BERASASKAN CISTANCHE

Beli Sekarang

 

 

 

 

 

3.5.2 Pengenalpastian Metabolit Berbeza yang Dijejaskan oleh CBC

Metabolit serum berbeza ditapis berdasarkanVIP > 1daripada PLS-DA,perubahan lipatan Lebih besar daripada atau sama dengan 1, danp < 0.05. Selepas mengecualikan sebatian eksogen,10 metabolit endogen yang ketaratelah dikenalpasti (Jadual 9).

 

3.5.3 Analisis Pengayaan Laluan KEGG

Analisis pengayaan KEGG bagi metabolit pembezaan menunjukkan bahawaRawatan CBC boleh memodulasi laluan metabolik utamaterlibat dalam prostatitis kronik. Laluan yang diperkaya termasuk:

Metabolisme sphingolipid

Metabolisme retinol

Metabolisme glisin, serin dan threonine

Metabolisme gliserophospholipid

Metabolisme asid arakidonik(Rajah 7)

Laluan ini diketahui memainkan peranan penting dalamperaturan imun, tekanan oksidatif, dan keradangan.

3.5.4 Korelasi Antara Metabolit Berbeza dan Mikrobiota Usus

Analisis korelasi Spearman telah dijalankan antara 10 metabolit pembezaan dan taksa bakteria yang berubah dengan ketara. Korelasi yang ketara termasuk:

PA(6-keto-PGF1 /i-20:0): berkorelasi positif denganLactobacillusdanRomboutsia ilealis, negatif denganNeglecttibacter timonensis

SM[d16:2/20:4-2OH]: berkorelasi positif denganParaprevotella claradanRomboutsia ilealis

PS[18:1/20:0]: berkorelasi positif denganRomboutsia ilealis, negatif denganOscillospiraceae

lysoPA(0:0/18:0): berkorelasi negatif denganLactobacillusdanRomboutsia ilealis, secara positif denganNeglecttibacter timonensis

Asid Ureidoisobutyric: berkorelasi negatif denganParaprevotella clara

16(R)-HETEdan(2R,3R)-2-aminooctadecane-1,3-diol: berkorelasi positif denganNeglecttibacter timonensis

Sphingosine: berkorelasi negatif denganRomboutsia ilealis, secara positif denganNeglecttibacter timonensis

lysoPA(18:0/0:0)danRetinoil -glukuronida: berkorelasi negatif denganBifidobacterium animalisdanRomboutsia ilealis(Rajah 8)

Korelasi ini mencadangkanhubungan yang kuat antara perubahan metabolik yang disebabkan oleh CBC dan modulasi mikrobiota usus.

 

3.6 Peraturan Laluan SPHK1/S1P1/PI3K/Akt oleh CBC

Analisis Western blot menunjukkan bahawaEkspresi protein SPHK1 dan S1P1 telah meningkat dengan ketara dalam kumpulan modelberbanding kumpulan biasa. CBC (dos tinggi) dengan ketaramenurunkan tahap protein SPHK1 dan S1P1. Tiada perbezaan yang ketara diperhatikan dalam ekspresi SPHK2 di kalangan kumpulan (Rajah 9, Jadual 10).

Selain itu,PI3K dan Akttahap ekspresi telah dikurangkan dengan ketara dalam kumpulan model, manakalap-PI3K dan p-Akttahap meningkat dengan ketara, menunjukkan pengaktifan laluan. rawatan CBCtahap PI3K dan Akt dipulihkandanmenghalang fosforilasi mereka, mengurangkanNisbah p-Akt/Akt dan p-PI3K/PI3K.

Keputusan ini mencadangkan bahawaCBC menghalang laluan isyarat SPHK1/S1P1/PI3K/Akt, menyumbang kepada kesan anti-radangnya.

4. Perbincangan

Prostatitis bukan bakteria kronik (CNP) menyumbang lebih90% daripada semua diagnosis prostatitisdan dikaitkan dengan etiologi yang kompleks, termasukjangkitan mikrob patogenik, tekanan oksidatif, disregulasi imun, dan tindak balas autoimun [20–21].

Bukti terkini menunjukkan bahawakeradangan dan autoimunadalah pusat kepada patogenesis CNP [22-24]. Themodel tikus eksperimen autoimun prostatitis (EAP)., yang meniru CNP manusia dalam histopatologi dan tindak balas imun, oleh itu dipilih [25].

Dalam kajian farmakokimia serum kami sebelum ini, komponen CBC ditemui dalamlebih banyak dalam najis daripada dalam serum, membayangkaninteraksi usus sebagai laluan utama tindakan(lihat Bahan Penerbitan Dipertingkatkan CNKI).

CBC Memperbaiki Patologi Prostat dan Indeks Radang

Pewarnaan HE menunjukkan bahawa CBC berkuranganpenyusupan limfosit, dipulihkanstruktur asinar, dan meningkatrembesan kelenjar. CBC dengan ketaramengurangkan bilangan leukositdalam homogenat prostat dan dipulihkanketumpatan badan lesitin-kedua-dua penanda diagnostik CNP utama [26–28]. Keradangan membawa kepada kerosakan epitelium dan mengurangkan rembesan lesitin, manakala makrofaj yang diaktifkan menelan badan lesitin [29]. CBC secara berkesan membalikkan perubahan patologi ini.

CBC jugamengurangkan sitokin pro-radang(TNF- , IL-1 , IL-6, IL-8, IL-2, iNOS) danpeningkatan anti-radang IL-10, menyokong tindakan anti-radang yang mujarab.

 

CBC Mengawal Disbiosis Mikrobiota Usus

CNP berkait rapat denganketidakseimbangan mikrobiota usus, yang boleh mengurangkanasid lemak rantai pendek (SCFA)dan menjejaskan halangan usus, membenarkanTranslokasi LPSdan mencetuskan keradangan prostat melaluicorak molekul berkaitan mikrob (MAMPs) [30].

Kajian menunjukkan bahawaPolifenol cistanchememperbaiki ketidakseimbangan mikrobiota dan memodulasi taksa utama yang terlibat dalampenyakit radang usus (IBD)[31]. Dalam kajian ini,Lactobacillus dan Bifidobacterium animalistelah habis dalam tikus EAP tetapi pulih selepas rawatan CBC. Probiotik ini diketahui dapat mengurangkan keradangan urogenital [32-33]. Sebaliknya,Veillonella, sering diperkaya dalam keadaan autoimun [34], dinaikkan dalam tikus EAP dan dikurangkan selepas pentadbiran CBC. Begitu juga,Prevotellaceae, dikaitkan dengan kanser prostat [35], diperkaya dalam kumpulan EAP dan dikurangkan oleh CBC.

 

CBC Memodulasi Laluan Metabolik Utama

Metabolomik didedahkanketinggian sphingosinedalam tikus EAP, dikurangkan dengan ketara oleh CBC, mencadangkan penglibatan dalammetabolisme sphingolipid. Sphingolipid ialah molekul struktur dan isyarat utama yang terlibat dalampertumbuhan sel, apoptosis, dan peraturan imun [36].

Sphingosine-1-fosfat (S1P), disintesis olehSPHK1/2, adalah perantara lipid yang kuat yang mengikatReseptor S1P (S1PRs)untuk mengawal selia pemerdagangan sel imun dan terlibat dalampenyakit radang dan autoimun[37–39]. Modulator S1PRFTY720 (fingolimod)telah ditunjukkan untuk mengurangkan keradangan dan kerosakan tisu dalam model EAP [40].

S1P juga mengaktifkan laluan hiliran sepertiPI3K/Akt, yang dikaitkan dengan keradangan kronik. Dalam kajian kami, CBCmenurunkan SPHK1 dan S1P1, dan dihalangfosforilasi PI3K dan Akt, mencadangkan kesan pengawalseliaan pada paksi kritikal ini.

 

Kesimpulan

Kajian ini, mengintegrasikanpenjujukan mikrobiota usus dan metabolomik yang tidak disasarkan, menunjukkan bahawaKapsul Berasaskan Cistanche (CBC)dengan berkesan:

Memperbaikikerosakan tisu prostat

Sekatsitokin radang

Pulihkanflora usus yang bermanfaat

kawal seliametabolisme sphingolipid

menghalangIsyarat SPHK1/S1P1/PI3K/Akt

Penemuan ini menyediakanbukti yang meyakinkanuntuk potensi CBC sebagai aterapi herba pelbagai sasaran untuk prostatitis bukan bakteria kronik, dan menawarkan aasas saintifik untuk aplikasi klinikal yang diperluaskan.