Pencirian Tujuh Belas Komponen dalam Herba Cistanches Ditanam Dari Gurun Tarim Melalui HPLC-MS

［Abstrak］Objektif: Untuk mengenal pasti komponen kromatografi bagi 60% ekstrak metanol dalamCistanches deserticola Herbadibudidayakan di padang pasir Tarim oleh HPLC-MS．

Kaedah: Analisis HPLC-MS dilakukan pada lajur Agilent ZOＲBAX Eclipse Plus C18 (6 mm × 250 mm,5 μm)． Fasa mudah alih ialah asetonitril-0. 1% larutan akueus asid formik melalui elusi kecerunan pada kadar alir 1 mL· min-1, dan panjang gelombang pengesanan ialah 254 nm． Suhu lajur ditetapkan pada 25 darjah, dan isipadu suntikan ialah 10 μL． Ｒhasil: Enam belas puncak kromatografi / tujuh belas komponen telah dikenal pasti dengan tepat dengan membandingkan masa pengekalan, berat molekul dan ion serpihan sebatian yang kami asingkan dan kenal pasti． Komponen kromatografi ini ditentukan sebagai koniferin, demetil syringin, syringin, echinacoside, cistanoside A, verbascoside ( tubuloside A ), cistanoside B, isoverbascoside, 2'-acetylcistanoside A, cistanoside C, isocistanoside C,2'-acetyluloverbascoside, danpitinoside. cistanoside J.

Kesimpulan: Kaedah HPLC-MS sesuai untuk mengenal pasti komponen kromatografi 60% ekstrak metanol dalam Cistanches Herba． Kajian ini akan menyediakan bukti saintifik untuk menganalisis secara komprehensif juzuk kimia herba ubatan ini．

［Kata kunci］ Cistanches deserticolaHerba; Cistanche; HPLC-MS; ekstrak metanol

Cistanche deserticola YCMa

Cistanche deserticola, juga dikenali sebagai "ginseng padang pasir",adalah ubat tonik Cina yang terkenal, yang diedarkan di Mongolia Dalam, Ningxia, Gansu, dan Xinjiang di China [1].Ia mempunyai kesan mengencangkan buah pinggang, memberi manfaat kepada pati darah, melembabkan usus, dan membuang air besar. Ia biasa digunakan di klinik untuk merawat mati pucuk lelaki, kemandulan wanita, sakit sejuk di pinggang dan lutut, sembelit stasis darah., dsb. [2-3].Cistanche deserticola, iaitutermasuk dalam bahagian pertama Pharmacopoeia Cina (edisi 2015), ialah batang berdaging kering Cistanche deserticola dan Cistanche tubulosa (4). Pasukan penyelidik kami telah menjalankan penyelidikan yang sistematik dan mendalam tentang tumbuhan Cistanche selama bertahun-tahun.Komponen kimia tumbuhan Cistanche terutamanya glikosida fenilethanoid, sebagai tambahan kepada iridoid dan glikosidanya, lignan dan glikosidanya, glikosida alkohol benzil, dsb.[5]. Kajian farmakologi moden menunjukkan bahawa fenil etanol glikosida, komponen utama genus, mempunyai neuroprotektif, antioksidan, perlindungan hati, antibakteria, antivirus, anti-tumor, anti-radang, dan kesan lain [6-11].

ginseng padang pasir

Di China, Cistanche deserticola diedarkan di Mongolia Dalaman barat, utara Xinjiang, dan Lembangan Qaidam di Qinghai, tetapi tidak di Lembangan Tarim di selatan Xinjiang. Pada akhir 1990-an, untuk melindungi medan minyak Tazhong dan mengawal padang pasir, ibu pejabat medan minyak memperkenalkan sejumlah besar ammodendron Haloxylon di sekitar medan minyak Tazhong dan di kedua-dua belah lebuh raya padang pasir dan menyuntik ammodendron Haloxylon dengan cistanche, yang telah lebih daripada 10 tahun. Oleh kerana iklim panas di Xinjiang Selatan dan keadaan pengairan titisan yang baik di pangkalan minyak, hasil cistanche deserticola sangat tinggi, dan hasil cistanche deserticola per mu mencapai lebih daripada 500kg [8]. Banyak komponen kimia dalam Cistanche deserticola telah menghasilkan sejumlah besar isomer kerana kedudukan sambungan substituen yang berbeza. Ini membawa kesukaran besar untuk mengenal pasti puncak kromatografi bahan perubatan ini. Sukar untuk mengenal pasti dengan tepat komponen puncak kromatografi jika hanya bergantung pada LC-MS tanpa sebatian monomer sebagai kawalan. Oleh itu, terdapat sedikit laporan literatur mengenai kerja ini pada peringkat awal. Penulis mengasingkan banyak sebatian monomer [9-11] daripada Cistanche deserticola yang ditanam di Gurun Tazhong pada peringkat awal. Melalui sebatian monomer yang diperoleh pada peringkat awal ini, puncak kromatografi separa HPLC daripada 60% ekstrak metanol Cistanche deserticola telah dikenal pasti dengan tepat. Ini bukan sahaja akan mengelakkan pengenalpastian berulang beberapa sebatian yang diketahui dalam juzuk kimia Cistanche deserticola tetapi juga menyediakan beberapa rujukan untuk penyelidikan lanjut tentang kawalan kualiti bahan perubatan. Dalam kertas ini, 17 komponen 6ekstrak metanol 0% daripada Cistanche deserticola telah dikenal pasti oleh HPLC-MS.

Kepingan cistanche deserticola

Klik di sini untuk melihat produk Cistanche

【Minta lebih lanjut】 E-mel: xue122522@foxmail.com / WhatsApp: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

1.bahan

Instrumen resonans magnetik nuklear Inova-500 (Varian, Amerika Syarikat); 6320IonTrap LC-MS spektrometer jisim, lajur EclipseXDB-C18 (4.6mm × 250mm,5 μm) (Agilent, USA); QUINTIX313-1CN jenis 1/10000 baki elektronik (Bahagian Sedaris); KQ-500DV pembersih ultrasonik (Jiangsu Kunshan Ultrasonic Instrument Co., Ltd.); KMUP - Ⅰ Sistem Penjanaan Air Ultra Tulen Analitikal (Chengdu Haochun Instrument Equipment Co., Ltd.).

39 bahan kawalan yang digunakan dalam eksperimen ini semuanya diasingkan daripada Cistanche deserticola yang ditanam di padang pasir di Tazhong oleh pengarang pada peringkat awal, dan strukturnya ditentukan oleh NMR dan teknik spektroskopi lain. Struktur 39 sampel kawalan telah dikenalpasti sebagai Cistanche deserticoside J, Cistanche deserticoside K, Cistanche deserticoside L, Cistanche deserticoside M, Cistanche deserticoside N, epimeridinosideA, Isocistancheside C, angiocyanin B, Cistanche deserticoside, Cistanche deserticoside, Cistanche deserticoside, Cistanche deserticoside, Cistanche deserticoside N, epimeridinosideA, Isocistancheside C, angiocyanin B, Cistanche heterophyllin, Cistanche deserticoside, Cistanche deserticoside. C, Cistanche cymosin, 2'- acetyl Cistanche deserticoside A, 2' - acetyl Cistanche deserticoside A, Cistanche deserticola B, Cistanche deserticola A, Echinoside A, Cistanche deserticola glycoside E, Salidroside, 6'- acetyl salidroside, synimetil salidroside, salidroside, syringinside (2E, 6E) - 3, 7-dimetil-8-hydroxyctadien-1-O- - D-glukosida, (+) - syringin, (+) - syringin-4 '- O- - D-glucopyranoside, (+) - isoeucomminA, eucomminA, (+){100}{101} larviciding-4 '- O- - D-glucoside, larviciding-4-O- - D-glucoside- - D glucopyranoside, hesperidin A, kawasan diketepikan A, 6-deoxycatapol. Ketulenan semua bahan rujukan di atas adalah lebih daripada 98.0%. Acetonitrile adalah kromatografi tulen (DikmaPure, USA), air adalah air ultratulen, dan reagen lain yang digunakan dalam proses ujian adalah reagen tulen analitikal, yang dihasilkan oleh Beijing Chemical Plant.

Bahan ubatan yang digunakan dalam eksperimen ini, Cistanche deserticola, telah dikumpulkan dari kawasan padang pasir Tazhong, Xinjiang, pada November 2010. Ia telah dikenal pasti oleh Profesor Tu Pengfei dari Sekolah Farmasi Universiti Peking sebagai batang berisi kering tumbuhan Leobaceae Cistanche deserticola. Spesimen itu disimpan di Pusat Penyelidikan Moden Perubatan Tradisional Cina Universiti Peking (nombor spesimen: CD201011).

Kepingan cistanche deserticola

2.Kaedah dan keputusan

2.1 Penyediaan penyelesaian rujukan

Ambil kira-kira 1mg setiap satu daripada 39 sampel kawalan yang diperoleh daripada Cistanche deserticola pada peringkat awal, timbangkannya dengan tepat, masukkan ke dalam kelalang isipadu 5mL masing-masing, larutkan dengan metanol, dan isipadukannya mengikut skala, dan kemudian dapatkan penyelesaian kawalan tunggal.

2.2 Penyediaan penyelesaian ujian

Merujuk kepada Pharmacopoeia Cina, edisi 2015, ambil kira-kira 1g serbuk produk (melalui ayak keempat), timbang dengan tepat, masukkan ke dalam botol coklat 100mL, tambah tepat 50mL 60% metanol, tamp, goncang dengan baik, timbang jisim, rendam selama 30 minit, rendam selama 30 minit, rendam selama 30 minit. jisim sekali lagi, tambahkan 50% metanol untuk membentuk jisim yang dikurangkan, goncangkannya dengan baik, tahan, ambil supernatan, dan gunakan penapisan membran mikroporous 0.45 μ M, ambil turasan berterusan untuk mendapatkan penyelesaian ujian.

2.3 Keadaan kromatografi

AgilentEclipse XDB-C18 lajur kromatografi (4.6mm × 250mm,5 μ m), panjang gelombang pengesanan 254nm, suhu lajur 25 darjah ; Menggunakan asetonitril (A) - 0.1% larutan akueus asid formik (B) sebagai fasa mudah alih, elusi kecerunan (0 - 20min, 5% - 15% A; 20 - 50min, 15% - 30% A; 50 - 60min, 30% - 50}} % A; A); Kadar alir: 1.0mL · min-1, isipadu suntikan: 10 μ L.

2.4 Keadaan spektrum jisim

Suhu kapilari 350 darjah ; Voltan kapilari 3500V; Kadar aliran gas jaket (nitrogen) 12.0L · min-1; Tekanan gas tambahan (nitrogen) 206.8kPa; Julat pengimbasan penuh spektrometri jisim ialah m/z 50~1000; Helium gas perlanggaran, tenaga perlanggaran dipilih secara automatik semasa ujian; Kumpulkan 1 jarum untuk setiap mod ion positif dan negatif.

2.5 Ujian bahan rujukan

39 penyelesaian rujukan yang disediakan di bawah 2.1 telah diuji di bawah 2.3 keadaan kromatografi dan 2.4 keadaan spektrometri jisim, dan masa pengekalan dan berat molekul relatifnya direkodkan (Jadual 1).

2.6 Penentuan penyelesaian ujian

Ambil bahan ubatan Cistanche deserticola yang dikumpul dari kawasan padang pasir Tazhong, Xinjiang, dan sediakan penyelesaian ujian mengikut kaedah yang diterangkan dalam 2.2. Kemudian, lakukan penentuan mengikut keadaan kromatografi yang diterangkan dalam 2.3 dan keadaan spektrometri jisim yang diterangkan dalam 2.4, dan tentukan kromatogram HPLC dan spektrometri jisimnya dalam mod ion positif dan negatif (Rajah 1-3).

Rajah 1 kromatogram HPLC daripada 60% ekstrak metanol daripada Cistanches Herba

Rajah 2 Kromatogram TIC MS positif daripada 60% ekstrak metanol daripada Cistanches Herba

Rajah 3 Kromatogram TIC MS negatif daripada 60% ekstrak metanol daripada Cistanches Herba

2.7 Pengenalpastian kromatogram HPLC bahan ubatan

Di bawah keadaan yang sama (2.3 keadaan kromatografi dan 2.4 keadaan spektrometri jisim), komponen telah dikenal pasti dengan membandingkan masa pengekalan dan berat molekul relatif sampel ujian dan sampel kawalan. Proses pengenalpastian khusus bagi puncak kromatogram sampel ujian (Rajah 1) adalah seperti berikut.

2.7.1 Pengenalpastian puncak kromatografi 1

Masa pengekalan puncak kromatografi 1 ialah 16.67 minit. Dalam mod ion positif, puncak ion excimer m/z365 diberikan sebagai [M+Na]+, manakala dalam mod ion negatif, puncak ion excimer m/z387 [M+COOH] - diberikan. Berat molekul relatif puncak 1 ditentukan sebagai 342. Ion serpihan m/z179 juga diberikan, yang berasal daripada kehilangan 1 molekul glukosa, 163 D, disebabkan oleh pembelahan ikatan glikosida. Mengikut masa pengekalan dan berat molekul relatif bahan rujukan, puncak kromatografi 1 dikenal pasti sebagai koniferin.

2.7.2 Pengenalpastian puncak kromatografi 2

Masa pengekalan puncak kromatografi 2 ialah 17.36min. Di bawah mod ion negatif, ion excimer memuncak m/z357 [M – H] -, 393 [M+Cl] - diberikan, dan berat molekul relatif puncak 2 ditentukan sebagai 358. Pada masa yang sama, ion serpihan m/z195 diperolehi daripada kehilangan 1 molekul gliko3 ikatan Da, pemecahan glukosa, . Puncak kromatografi 2 dikenal pasti sebagai demethylsyringin mengikut masa pengekalan dan berat molekul relatif bahan rujukan.

2.7.3 Pengenalpastian puncak kromatografi 3

Masa pengekalan puncak kromatografi 3 ialah 19.04min, puncak ion excimer m/z395 [M+Na] diberikan dalam mod ion positif, dan puncak ion excimer m/z417 [M+HCOO] - diberikan dalam mod ion negatif, dan berat molekul relatif bagi puncak 3 i72, pada masa yang sama ditentukan. m/z209 terhasil daripada kehilangan 1 molekul glukosa, 163 Da, akibat pemecahan ikatan glikosida. Puncak kromatografi 3 dikenal pasti sebagai syringin mengikut masa pengekalan dan berat molekul relatif bahan rujukan.

2.7.4 Pengenalpastian puncak kromatografi 4

Masa pengekalan puncak kromatografi 4 ialah 27.66 min. Puncak ion excimer m/z804 [M+NH4] diberikan dalam mod ion positif, dan puncak ion excimer m/z785 [M–H] - diberikan dalam mod ion negatif. Berat molekul relatif puncak 4 ditentukan sebagai 786. Pada masa yang sama, ion serpihan m/z623 diperoleh daripada kehilangan pemecahan ikatan ester bagi 1 molekul kafein, 163 Da. Digabungkan dengan masa pengekalan dan berat molekul relatif bahan rujukan, puncak kromatografi 4 dikenal pasti sebagai echinacea.

2.7.5 Pengenalpastian puncak kromatografi 5

Masa pengekalan puncak kromatografi 5 ialah 31.48min, puncak ion excimer m/z818 [M+NH4 diberikan dalam mod ion positif, dan puncak ion excimer m/z799 [M–H] - diberikan dalam mod ion negatif, dan berat molekul relatif bagi puncak 500, pada fragmen yang sama ditentukan sebagai serpihan yang sama. m/z637 diperoleh daripada kehilangan pemecah ikatan ester bagi 1 molekul kafein, 163Da. Menggabungkan masa pengekalan dan berat molekul relatif bahan rujukan, telah disahkan bahawa puncak kromatografi 5 ialah cistanche glycoside A.

Jadual 1 Berat molekul dan masa pengekalan ( tＲ ) bagi 39 sebatian piawai

2.7.6 Pengenalpastian puncak kromatografi 6

Masa pengekalan puncak kromatografi 6 ialah 34.17min. Dua puncak ion excimer m/z846642 [M+NH4] + diberikan dalam mod ion positif, dan dua puncak ion excimer m/z827623 [M–H] - juga diberikan dalam mod ion negatif. Dispekulasi bahawa puncak 6 mungkin mengandungi dua sebatian dengan berat molekul relatif 828624. Pada masa yang sama, ion serpihan m/z665461 diperoleh daripada kehilangan pemecahan ikatan ester bagi 1 molekul kafein, 163 Da, dan ion serpihan m/z622 diperoleh daripada pemecahan ikatan acetyl ester. Kedua-dua sebatian ini telah diasingkan dan digabungkan dengan masa pengekalan dan berat molekul relatif bahan rujukan; puncak kromatografi 6 ialah campuran Cimicifugarin dan antosianin A.

2.7.7 Pengenalpastian puncak kromatografi 7

Masa pengekalan puncak kromatografi 7 ialah 35.34 min. Puncak ion excimer m/z832 [M+NH4]+, 837 [M+Na]+ diberikan dalam mod ion positif, dan puncak ion excimer m/z813 [M–H] - diberikan dalam mod ion negatif, dan berat molekul relatif puncak 7 ialah 814. Pada masa yang sama, serpihan 3 adalah serpihan. kehilangan pemecahan ikatan 1 molekul asid ferulik, 177Da. Digabungkan dengan masa pengekalan dan berat molekul relatif bahan rujukan, puncak kromatografi 7 telah dikenal pasti sebagai cistanche glycoside B.

2.7.8 Pengenalpastian puncak kromatografi 8

Masa pengekalan puncak kromatografi 8 ialah 36.17min, puncak ion excimer m/z647 [M+Na] diberikan dalam mod ion positif, dan puncak ion excimer m/z623 [M–H] - diberikan dalam mod ion negatif, dan berat molekul relatif bagi masa puncak 62 pada i4 ditentukan sebagai serpihan masa yang sama. m/z461 diberikan, yang berasal daripada pemecahan ikatan ester dan kehilangan 1 molekul kumpulan kafein, 163 Da. Digabungkan dengan masa pengekalan dan berat molekul relatif bahan rujukan, puncak kromatografi 8 dikenal pasti sebagai heterokoenosida.

2.7.9 Pengenalpastian puncak kromatografi 9

Masa pengekalan puncak kromatografi 9 ialah 38.20 minit. Ion excimer memuncak m/z860 [M+NH4]+, 865 [M+Na] diberikan dalam mod ion positif, dan ion excimer memuncak m/z841 [M–H] -, 877 [M+Cl] - diberikan dalam mod ion negatif. Berat molekul relatif puncak 9 ditentukan sebagai 842. Pada masa yang sama, ion serpihan m/z679636 diperoleh daripada kehilangan pemecahan ikatan ester bagi 1 molekul kafein, 163 Da, dan 1 molekul asetil, 43 Da. Masa pengekalan dan berat molekul relatif bahan rujukan adalah konsisten, dan puncak pengenalan 9 ialah 2- 2'-acetyl cistanche glycoside A.

2.7.10 Pengenalpastian kromatografik peak 10

Masa pengekalan puncak kromatografi 10 ialah 39.04min. Puncak ion excimer m/z656 [M+NH4]+, 661 [M+Na] diberikan dalam mod ion positif, dan puncak ion excimer m/z637 [M–H] -, 673 [M+Cl] - diberikan dalam mod ion negatif. Berat molekul relatif puncak 10 ditentukan sebagai 638. Pada masa yang sama, ion serpihan m/z475 diperoleh daripada kehilangan pemecahan ikatan ester bagi 1 molekul kafein, 163 Da. Masa pengekalan dan berat molekul relatif bahan rujukan adalah konsisten, dan puncak pengenalan 10 ialah Cistanche C.

2.7.11 Pengenalpastian puncak kromatografi 11

Masa pengekalan puncak kromatografi 11 ialah 40.82 min. Puncak ion excimer m/z661 [M+Na]+, 677 [M+K + diberikan dalam mod ion positif, dan puncak ion excimer m/z637 [M–H] -, 673 [M+Cl] - diberikan dalam mod ion negatif. Ia boleh ditentukan bahawa berat molekul relatif puncak 11 ialah 638. Pada masa yang sama, ion serpihan m/z475 diperoleh daripada kehilangan pemecahan ikatan ester bagi 1 molekul kafein, 163 Da. Menggabungkan masa pengekalan dan berat molekul relatif bahan rujukan, puncak kromatografi 11 telah dikenal pasti sebagai isocistanche glycoside C.

2.7.12 Pengenalpastian puncak kromatografi 12

Masa pengekalan puncak kromatografi 12 ialah 41.48 min. Puncak ion excimer m/z684 [M+NH4]+, 689 [M+Na + diberikan dalam mod ion positif, dan puncak ion excimer m/z665 [M–H] - diberikan dalam mod ion negatif. Ia boleh ditentukan bahawa berat molekul relatif puncak 12 ialah 666. Pada masa yang sama, ditunjukkan bahawa serpihan ion m/z503460 berasal daripada kehilangan pemecahan ikatan ester 1 molekul kafein, 163 Da, dan 1 molekul asetil, 43 Da. Mengikut masa pengekalan dan berat molekul relatif bahan rujukan, puncak kromatografi 12 telah dikenal pasti sebagai a2'-asetil coeliaoside.

Percubaan Cistanche deserticola

2.7.13 Pengenalpastian puncak kromatografi 13

Masa pengekalan puncak kromatografi 13 ialah 44.29min, puncak ion excimer m/z689 [M+Na] diberikan dalam mod ion positif, dan puncak ion excimer m/z665 [M–H] - diberikan dalam mod ion negatif, dan berat molekul relatif puncak 13 itu ialah 66 serpihan pada masa yang sama. m/z503460 berasal daripada kehilangan pemecahan ikatan ester 1 molekul kafein, 163 Da, dan 1 molekul asetil, 43 Da. Digabungkan dengan masa pengekalan dan berat molekul relatif bahan rujukan, puncak kromatografi 13 dikenal pasti sebagai antosianin B.

2.7.14 Pengenalpastian puncak kromatografi 14

Masa pengekalan puncak kromatografi 14 ialah 46.67 min. Puncak ion excimer m/z675 [M+Na] diberikan dalam mod ion positif, dan puncak ion excimer m/z651 [M–H] - diberikan dalam mod ion negatif. Berat molekul relatif puncak 14 ialah 652. Pada masa yang sama, ion serpihan m/z475 diperoleh daripada kehilangan pemecahan ikatan ester bagi 1 molekul kumpulan asid ferulik, 177Da. Digabungkan dengan masa pengekalan dan berat molekul relatif bahan rujukan, puncak kromatografi 14 dikenal pasti sebagai epimeridinoside A.

2.7.15 Pengenalpastian puncak kromatografi 15

Masa pengekalan puncak kromatografi 15 ialah 49.90 min. Puncak ion excimer m/z698 [M+NH4]+, 703 [M+Na + diberikan dalam mod ion positif, dan puncak ion excimer m/z679 [M–H] -, 715 [M+Cl] - diberikan dalam mod ion negatif. Berat molekul relatif puncak 15 ialah 680. Pada masa yang sama, ion serpihan m/z517474 diperoleh daripada kehilangan pemecahan ikatan ester bagi 1 molekul kafein, 163 Da, dan 1 molekul asetil, 43 Da. Puncak kromatografi 15 dikenal pasti sebagai cistanche glikosida K berdasarkan masa pengekalan dan berat molekul relatif bahan rujukan.

2.7.16 Pengenalpastian puncak kromatografi 16

Masa pengekalan puncak kromatografi 16 ialah 55.36 minit. Dalam mod ion positif, puncak ion excimer m/z717 [M+N diberikan, manakala dalam mod ion negatif, ion excimer memuncak m/z693 [M–H] -, 729 [M+Cl] - diberikan, menghasilkan berat molekul relatif 694 untuk puncak 16. Pada masa yang sama, ia menunjukkan serpihan m4/7 pada masa yang sama. daripada kehilangan pemecahan ikatan ester 1 molekul kumpulan asid ferulik, 177 Da, dan 1 molekul kumpulan asetil, 43 Da. Digabungkan dengan masa pengekalan dan berat molekul relatif bahan rujukan, puncak kromatografi 16 dikenal pasti sebagai cistanche glikosida J. Puncak kromatografi bagi 60% ekstrak metanol Cistanche deserticola telah dikenal pasti oleh HPLC-MS digabungkan dengan berat molekul relatif, masa pengekalan dan ion serpihan bagi bahan rujukan yang diasingkan. Keputusan menunjukkan bahawa 17 komponen daripada 16 puncak kromatografi telah dikenal pasti dengan tepat (Jadual 2).

Jadual 2: Puncak kromatografi yang dikenal pasti bagi Cistanches Herba dan sebatian piawai rujukan

3  . Perbincangan

3.1 Pemilihan kaedah penyediaan artikel ujian

Tujuan utama kajian ini adalah untuk mengenal pasti puncak HPLC bagi Cistanche deserticola. Oleh itu, pemilihan pelarut pengekstrakan dan kaedah pengekstrakan adalah berdasarkan keupayaan untuk mendapatkan lebih banyak puncak HPLC. Pasukan penyelidik telah menjalankan penyelidikan jangka panjang tentang Cistanche deserticola dan telah melakukan banyak kerja dalam analisis kualiti. Dalam kertas kerja ini, pelarut pengekstrakan dan kaedah pengekstrakan Cistanche deserticola juga dipilih berdasarkan kerja analisis kumpulan penyelidikan dan Chinese Pharmacopoeia (edisi 2015) sebelum ini. Akhirnya, pengekstrakan ultrasonik pelarut metanol 60% selama 40 minit telah dipilih sebagai kaedah pengekstrakan.

3.2 Pemilihan keadaan HPLC-MS

Pemilihan lajur kromatografi dalam kertas ini adalah berdasarkan analisis kualiti Cistanche deserticola pada peringkat awal kumpulan penyelidikan, dan penyiasatan AgilentZORBAXEclipsePlusC18 (4.6mm × 250mm,5 μ m), DionexC18(4.6mm × 250mm,5 μm) (4.6mm × 250mm,5 μm) Lajur kromatografi, akhirnya pilih lajur kromatografi AgilentZORBAXEclipsePlusC18 (4.6mm × 250mm,5 μ m) Ia mempunyai kesan pemisahan yang baik pada Cistanche deserticola; 39 bahan rujukan termasuk fenilethanoid, lignan, dan fenilpropanoid, jadi panjang gelombang pengesanan ialah 254nm; Pada masa yang sama, kesan fasa mudah alih seperti air metanol, air asetonitril, air asid fosforik metanol-0.1%, air asid formik asetonitril-0.1% pada pengasingan kromatografi dan pengesanan spektrometri jisim telah disiasat, dan air asid formik asetonitril-0.1% akhirnya dipilih sebagai fasa mudah alih.

3.3 Rumusan

Kaedah yang diwujudkan dalam kajian ini mengenal pasti dengan tepat 17 komponen daripada 16 puncak kromatografi metanol 60%ekstrakdaripadaCistanche deserticola.

Hasil penyelidikan bukan sahaja mempunyai nilai rujukan tertentu untuk analisis kualiti selanjutnya bahan ubatan tetapi juga boleh mengelakkan beberapa kerja berulang pada pengenalpastian struktur bagi sebatian bahan ubatan yang diketahui. Walau bagaimanapun, secara amnya, terdapat sedikit puncak kromatografi yang dikenal pasti, dan banyak puncak kromatografi belum dikenal pasti kerana ia belum ditetapkan kepada bahan rujukan. Kebanyakan komponen yang dikenal pasti ialah glikosida phenylethanoid, manakala lignan jarang berlaku. Ini mungkin kerana kaedah pengekstrakan yang dirujuk dalam Farmakope Cina edisi 2015 terutamanya ditujukan kepada glikosida phenylethanoid, atau kerana kandungan sebatian echinacoside dan koliform dalam ekstrak bahan perubatan ini adalah terlalu tinggi, yang menyukarkan untuk mengesan sebatian lain dengan kandungan yang kecil. Sebab-sebab khusus perlu dijelaskan lebih lanjut.

[Rujukan]

[1] Jawatankuasa Editorial Flora China. Flora China [M]. Beijing: Science Press, 1990: 86

[2] Yang Junshan. Ginseng gurun -- Cistanche deserticola [J]. Jurnal Farmasi Cina,2011,46(12): 881．

[3] Tu Pengfei, Jiang Yong, Guo Yuhai, et al. Penyelidikan mengenai Cistanche deserticola dan pembangunan perindustriannya[J]. Jurnal Farmasi Cina, 2011, 46 (12): 882-887

[4]Suruhanjaya Farmakope Kebangsaan. Farmakope Republik Rakyat China. Bahagian I [M]Beijing: Akhbar Sains dan Teknologi Farmaseutikal China, 2015: 135

[5] JIANG Y, TU PF． Analisis juzuk kimia dalam spesies Cistanche ［J］． J Chromatogr A,2009,1216 ( 11) : 1970-1979．

[6] PAN J,YUAN CS,LIN CJ,et al． Aktiviti farmakologi dan mekanisme glikosida fenilpropanoid semulajadi［J］． Pharmazie,2003,58( 11): 767-775．

[7] FU GM, PANG HH, Wong Y． Glikosida phenylethanoid semulajadi: petunjuk berpotensi untuk terapeutik baharu［J］． Curr Med Chem,2008,15 ( 25 ) : 2592-2613．

[8] Rhode Mei, Long Mei, Du Wenjing, et al. Mekanisme kesan anti-osteoporosis ekstrak Cistanche deserticola pada tikus M KOOPG ［ J ］. Percubaan Cina Jurnal Preskripsi, 2016, 22 (10): 138-142

[9] Ma Hui, Yin Ruoxi, Guo Min, et al. Kesan polisakarida Cistanche deserticola pada penuaan yang disebabkan oleh D-galaktosa. Kesan ekspresi CREB dalam tikus model lama ［ J ］. Jurnal Preskripsi Eksperimen Cina, 2014, 20 (20): 137-141

[10] Tao Yicun, Li Jianying, Xu Yonghua, et al. Kesan phenylethanoside Cistanche deserticola pada tikus: Pencegahan dan rawatan edema pulmonari altitud tinggi ［ J ］. Jurnal Cina Preskripsi Eksperimen,2014,20(15): 134-138．

[11] Zhou Haitao, Cao Jianmin, Lin Qiang. Cistanche deserticola mengenai keupayaan berenang tikus yang letih dan kapasiti antioksidan miokardium miokardium ［ J ］. Formula eksperimen Cina Jurnal Sains, 2012, 18 (6): 229-233

[12] NAN ZD,ZHAO MB,ZENG KW,et al． Iridoid anti-radang daripada batang Cistanche deserticola yang dibiakkan di padang pasir Tarim ［J］． Chin J Nat Med,2016,14(1): 61-65．

[13] NAN ZD,ZENG KW,SHI SP,et al． Glikosida phenylethanoid dengan aktiviti anti-radang daripada batang Cistanche deserticola yang dibiakkan di padang pasir Tarim ［J］． Fitoterapia,2013,89: 167-174．

[14] Nan Zedong, Zhao Mingbo, Jiang Yong, et al. Kimia cistanche padang pasir yang ditanam di Tazhong: Kajian komposisi ［ J ］. Jurnal Perubatan Cina Tradisional Cina, 2013, 38 (16):2665-2670．

[15] Nan Zedong, Zhao Mingbo, Jiang Yong, et alLignans [J]. Jurnal Perubatan Cina Tradisional Cina, 2015, 40 (3):463-468．